人β2糖蛋白1抗体IgA试剂盒使用方法
人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
2022年修订第一版(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-EL-H0149c产品规格:96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
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Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中IL-1β浓度。
碧云天生物技术 Human IL-1β ELISA Kit 说明书
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology 订货热线:400-168-3301或800-8283301 订货e-mail :******************技术咨询:*****************网址:碧云天网站 微信公众号Human IL-1β ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI305Human IL-1β ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Human IL-1β ELISA Kit (Human Interleukin-1β Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即人白细胞介素1β酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的IL-1β的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为2.2pg/ml ,与人IL-1r α、IL-1sRII 、IL-1sRI 、小鼠IL-1α、小鼠IL-1β等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
IL-1即白细胞介素-1(简称白介1),其家族由IL-1α(也称IL-1F1)、IL-1β(也称IL-1F2)、IL-1受体拮抗剂(IL-1 receptor antagonist, 简称IL-1RA, 或IL-1F3)及IL-18、IL-33和IL-1F5~F10组成。
IL-1主要由巨噬细胞产生,此外几乎所有的有核细胞,如B 细胞、NK 细胞、体外培养的T 细胞、角质细胞、树突状细胞、星形细胞、成纤维细胞、中性粒细胞、内皮细胞以及平滑肌细胞均可产生IL-1。
正常情况下只有皮肤、汗液及尿液中含有一定量的IL-1,绝大多数细胞在受到外来抗原或细菌内毒素刺激后才能合成和分泌IL-1。
IL-1β在免疫和炎症反应、骨重建(bone remodeling)、发烧、碳水化合物代谢等生理、病理过程中都有重要作用。
抗β2-糖蛋白I抗体在系统性红斑狼疮诊断中的临床应用
抗β2-糖蛋白I抗体在系统性红斑狼疮诊断中的临床应用摘要】目的了解抗β2-糖蛋白I抗体(抗β2-GPI抗体)及亚型与系统性红斑狼疮(SLE)的关系及在诊断中的价值。
方法应用间接免疫荧光法检测100例SLE患者、39例疾病对照组类风湿关节炎(RA)7例、系统性硬化病(SSc)5例、干燥综合征(SS)19例、自身免疫性肝病4例、MCTD4例)患者和30例正常人血清中的抗β2-GPI抗体、抗心磷脂抗体(抗ACL抗体)水平,并分析与临床的关系。
结果 100例SLE患者抗ACL抗体阳性率为39%,特异性67.7%,与疾病组比较有显著性差异。
100例SLE患者抗β2-GPI抗体的滴度显著高于疾病组和正常组,联合检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率高于疾病组,且显著高于单独检测抗β2-GPI抗体、抗ACL抗体的阳性率。
抗β2-GPI抗体Ig-M与SLE存在相关性。
结论抗β2-GPI抗体在SLE 中具有敏感性,联合检测抗β2-GPI抗体和抗ACL抗体能辅助诊断SLE,抗β2-GPI抗体Ig-M在SLE诊断临床意义更大。
【关键词】抗β2-糖蛋白I抗体抗心磷脂抗体间接免疫荧光法系统性红斑狼疮【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)03-0150-02抗磷脂抗体(anti—phospholipid antibody,APL)是一组主要针对磷脂结合蛋白的异质性抗体。
如抗心磷脂抗体(ACL)、狼疮抗凝物(LAG)以及抗β2-糖蛋白(抗β2-GP)I抗体等。
抗β2-GPI抗体是以磷脂结合蛋白为靶抗原的APL,这种抗体除在系统性红斑狼疮(SLE)中有检出外,还存在于其他疾病中,如干燥综合征(ss)、类风湿关节炎(RA)、硬皮病、传染性单核细胞增多症以及免疫缺陷病毒感染等。
在自身免疫性疾病中,APL常与动静脉血栓形成、反复流产以及血小板减少有关。
1990年,研究者发现在自身免疫性疾病中APL识别的是磷脂结合蛋白β2-GP I,而在感染性疾病中APL则主要识别心磷脂。
两种试剂检测抗心磷脂抗体的比较
两种试剂检测抗心磷脂抗体的比较朱益佳;徐龙珍;胡伟;陶月;张葵;王庆飞【期刊名称】《现代检验医学杂志》【年(卷),期】2015(000)002【摘要】目的:对两种商品化的抗心磷脂抗体(Anti-cardiolipin,ACA)试剂的检测结果进行比较。
方法采用欧蒙公司ACA-IgA/G/M(总 ACA)检测试剂和亚辉龙公司 ACA-IgG,IgM 和抗β2糖蛋白 I(β2GPI)抗体 IgG(ACA 3项)测定试剂盒,同时检测66例血清样本,比较两者结果的差异,并分析两者之间的关系。
结果欧蒙总 ACA 试剂的检出阳性率为37.88%(25/66);亚辉龙 ACA 3项试剂的检出阳性率为31.82%(21/66,ACA-IgG,IgM 和抗β2GPI IgG 三者任一阳性),两种试剂检测结果不具有统计学差异;两者的检测符合率为87.88%(58/66)。
欧蒙试剂 ACA-IgA/G/M 的检测结果与亚辉龙试剂 ACA-IgG,IgM 和抗β2GPI IgG 3个检测值的总和具有良好的相关性(r 2=0.892,P <0.01)。
结论两种试剂检测结果符合性较高,具有良好的相关性,能满足临床应用的需要;两种试剂各具特色,可以根据需要选择合适的试剂单独或联合进行检测。
【总页数】3页(P94-96)【作者】朱益佳;徐龙珍;胡伟;陶月;张葵;王庆飞【作者单位】南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京 210008;南京大学医学院附属鼓楼医院检验科,南京210008【正文语种】中文【中图分类】R446【相关文献】1.优化后的线粒体抗体检测试剂盒与两种同类进口试剂盒的比较 [J], 舒翠莉;赵军;李靖;高蓉;李伯安;郑宇;程云2.两种猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒对疫苗免疫猪血清抗体检测的比较试验 [J], 张东东;宁宜宝;刘灿;龚文芝;徐璐;张玉杰;范学政3.两种检测试剂盒对猪瘟抗体水平检测结果的比较 [J], 李丽;徐璐;王琴;李金海;邓飞;周莉媛;陈弟诗;张毅;张睿4.两种PCV2抗体ELISA检测试剂盒检测效果比较 [J], 邢刚;邱小伙;阮系真;金玉兰5.两种HBV DNA荧光定量PCR检测试剂的检测能力精度比较 [J], 巫智勇;叶英因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
用ELISA试剂盒检测人白介素1β IL-1b 方法步骤
双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度。
IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IL-1β会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
当加入生物素化的抗人IL-1β抗体后,抗人IL-1β抗体与IL-1β接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。
生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。
最后加入显色剂,若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。
通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-1β浓度。
标本收集:1.标本的收集请按下列流程进行操作:A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测;D.标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
注:正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:1.试剂盒请保存在2~8℃。
2.浓缩洗涤液因在低温下可能有结晶,请水浴加热使结晶完全溶解后再配制工作液。
3.若标准品复溶后,请在三天内用完。
4.底物请勿接触氧化剂和金属。
5.加样时,请及时更换枪头,避免交叉污染。
6.严禁混用不同批号的试剂盒组份。
7.充分混匀对保证反应结果的准性很重要,在加液后请轻轻叩击边缘以保证混匀。
8.室温反应,请严格控制在25~28℃。
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程
1、 检验申请单独检验项目申请:人类免疫缺陷病毒抗体{缩写抗HIV (1+2)]测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2、 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2ml ,不抗凝,置普通试管中,或采用含分离胶的真空采血管。
也可采集血浆,用肝素、EDTA 或枸橼酸盐抗凝。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后,在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态,对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足:少于0.3ml 的全血标本,或少于0.1ml 的血清或血浆。
2.1.5.2对检测结果可能有干扰的标本,包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在置1-2h 后将标本离心分离出血清或血浆,避免溶血。
离心必须达到3000rpm 15min ,离心后的血清中不能含有颗粒物和微量纤维蛋白。
2.2.2标本保存时间:室温(15-25℃)下可稳定48h ,普通冰箱中(2-8℃)稳定7d ,在-20℃最多可保存4周。
避免反复冻融。
不可使用热灭活的标本。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号,置4-8℃冰箱内保存7d 。
2.3标本采集的注意事项采血前使受检者保持平静、松弛,避免剧烈活动。
医院检验科免疫室 体诊断试剂盒(酶联免疫法)标准操作规程 生效日期: 年 月 日版本:第1版第 页,共 页3.方法原理本实验采用HIV 特异性抗原gp160和gp36等包被微孔反应板,用gp36、gp41标记辣根过氧化物酶。
当待测标本中存在HIV 抗体时,该抗体和固化的抗原结合于反应板上,并进一步与酶结合物相结合,在TMB 底物参与反应的情况下,产生显色反应。
抗β2糖蛋白1抗体(Anti-β2-GP1 )测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法)产品技术要求zh
抗β2糖蛋白1抗体(Anti-β2-GP1 )测定试剂盒(磁微粒化学发光免疫分析法) 组成:
适用范围:用于体外定量测定人血清中的抗β2糖蛋白1抗体(Anti-β2-GP1)含量。
2.1外观
2.1.1试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏;
2.1.2磁分离试剂摇匀后为均匀悬浊液,无明显凝集;
2.1.3液体组分应澄清,无沉淀或絮状物;
2.1.4包装标签应清晰,易识别;
2.2溯源性
应根据GB/T21415-2008及有关规定提供校准品的来源、溯源的赋值方法和相应指标、以及不确定度等内容。
本试剂盒校准品可溯源至企业工作校准品,并与已上市产品比对赋值。
2.3准确度
回收率应在85%-115%范围内。
2.4 空白限
应不大于1RU/mL。
2.5线性
在[2,200]RU/mL的测量范围内,相关系数r应≥0.9900。
2.6重复性
变异系数(CV)应不大于8%。
2.7质控品的赋值有效性
质控品的测量值应在质控范围内。
2.8批间差
变异系数(CV)应不大于15.0%。
2.9稳定性
试剂盒的有效期为12个月,取到效期后的试剂盒样品进行检测,检测结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6和2.7的要求。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay)是一种常用的免疫学实验技术,用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。
ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装,包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。
本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,以帮助用户顺利进行ELISA实验。
1.准备实验材料:-ELISA检测试剂盒:根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒,确保其在储存和运输过程中无损坏。
-样本:准备需要检测的样本,如血清、尿液、组织提取物等。
确保样本的质量和浓度满足实验要求。
-微孔板:根据试剂盒的要求选择合适的微孔板,同时注意其质量有无污染。
-基本实验设备:如计量器、洗板机、显微镜等。
2.实验步骤:-取出储存在4℃的试剂,确保其达到室温(一般为20-25℃),再根据实验步骤进行下一步操作。
-预处理样本:根据试剂盒的说明书,进行样本的预处理,包括稀释、纯化、稳定化等步骤。
-加样:将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中,通常每个孔需要加入100-200μL的样品。
-洗板:使用洗板机或手工操作,将孔中的杂质洗净。
洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。
-加入特异性抗体:根据试剂盒的说明书,将稀释好的特异性抗体加入各孔中,确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的抗体洗净。
-加入酶标记物:根据试剂盒的说明书,将稀释好的酶标记物加入各孔中,确保加入的量准确无误。
-洗板:重复第4步的操作,将未结合的酶标记物洗净。
-加入底物:将稀释好的底物加入各孔中,使其与酶标记物反应,生成可视化的颜色。
-终止反应:根据试剂盒的要求,在一定的反应时间后,加入终止剂停止反应。
终止剂的选择需符合试剂盒的要求。
-检测结果:使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化,通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。
3.数据分析:-计算样本的结果:根据试剂盒的说明书,根据吸光度或颜色强度测量结果,计算样本中目标物的浓度。
抗心磷脂抗体及抗β2糖蛋白1抗体检测血脂正常脑梗死患者的临床意义
抗心磷脂抗体及抗β2糖蛋白1抗体检测血脂正常脑梗死患者的临床意义发布时间:2021-03-23T02:39:57.257Z 来源:《医药前沿》2020年32期作者:刘春丽1 普建平2[导读] 分析抗心磷脂抗体(ACA)和抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)检测血脂正常脑梗死患者的临床意义。
(1昆明市经开人民医院云南昆明 650217)(2云南新昆华医院云南昆明 650300)【摘要】目的:分析抗心磷脂抗体(ACA)和抗β2糖蛋白1抗体(anti-β2-GP1)检测血脂正常脑梗死患者的临床意义。
方法:于2020年1月—6月抽取我院收治的50例治疗并确诊为脑梗死的患者为对象,按照患者是否合并高脂血症进行分组,其中21例合并高脂血症的脑梗死患者,作为高脂血症组,其中29例血脂正常的脑梗死患者,作为血脂正常组。
50例患者均行抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白1抗体检测,以ACA 抗体滴度>12U/mL,anti-β2-GP1抗体滴度>12U/mL,判断为阳性。
比较血脂正常组和高脂血症组患者的ACA和anti-β2-GP1阳性率;比较单发性脑梗死患者和多发性脑梗死患者的ACA和anti-β2-GP1阳性率;比较不同年龄、性别患者的ACA和anti-β2-GP1阳性率。
结果:血脂正常组患者的ACA和anti-β2-GP1阳性率分别为27.6%和34.5%,均显著高于高脂血症组患者的4.8%和4.8%,P<0.05比较差异有统计学意义。
血脂正常组29例患者中,包括单发性脑梗死患者22例,多发性脑梗死患者7例,其中多发性脑梗死患者的ACA和anti-β2-GP1阳性率分别为71.4%和85.7%,均显著高于单发性脑梗死患者的13.6%和18.2%,P<0.05比较差异有统计学意义。
血脂正常组29例患者中,包括≤50岁的患者17例,>50岁的患者12例,其中≤50岁患者的ACA和anti-β2-GP1阳性率分别为35.3%和41.2%,均显著高于>50岁的患者的16.7%和25.0%,P<0.05比较差异有统计学意义。
小鼠β2糖蛋白1抗体IgAGMβ2GP1IgAGMelisa试剂盒使用
小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1lgA/G/M)elisa 试剂盒使用说明书Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml X 1瓶酶标试剂:3 ml X 1 瓶(48) /6 ml X 1 瓶(96)【小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1 IgA/G/M) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,0D值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的0D值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:封板膜:2片(48) /2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml X 1 瓶0.5ml X 1 瓶2-8C保存酶标包被板:1X 48 1X 96 2-8 C保存样品稀释液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂A液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂B液: 3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存终止液:3ml X 1 瓶6ml X 1 瓶2-8 C保存浓缩洗涤液:(20ml X 20倍)X 1瓶 (20ml X 30倍)X 1瓶2-8C保存实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠 B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1IgA/G/M)水平。
用纯化的小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1 IgA/G/M)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 B 2糖蛋白1抗体IgA/G/M( B 2-GP1IgA/G/M),再与HRP标记的B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1 IgA/G/M) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
抗体试剂盒使用方法
抗体试剂盒使用方法1. 引言抗体试剂盒是一种用于检测和定量分析特定抗体的工具,广泛应用于生命科学研究和临床诊断。
本文将详细介绍抗体试剂盒的使用方法,包括准备实验材料、样品处理、实验步骤、结果解读等内容。
2. 准备实验材料在开始实验之前,需要准备以下实验材料: - 抗体试剂盒:包括抗体、底物、缓冲液等。
- 样品:可以是血液、组织、细胞等。
- 实验仪器:如离心机、洗板机、显微镜等。
- 实验耗材:如离心管、试管、96孔板等。
- 实验液体:如去离子水、PBS缓冲液等。
3. 样品处理在进行抗体试剂盒实验之前,需要对样品进行处理。
处理步骤可以根据具体实验目的进行调整,但通常包括以下几个常见步骤: 1. 收集样品:根据实验需要,选择适当的样本收集方式。
例如,如果是血液样品,可以通过静脉采血或指尖采血收集。
2. 样品保存:根据实验要求,将样品储存于适当的条件下,如低温冷藏或冷冻保存。
3. 样品处理:根据实验需求,对样品进行处理,如离心、裂解、稀释等。
4. 实验步骤抗体试剂盒的使用方法通常包括以下几个步骤: 1. 准备工作台:清洁工作台,并准备所需实验仪器和试剂。
2. 样品加入:将待测样品加入到96孔板中。
根据实验要求,可以设置空白对照组和阴性对照组。
3. 加入抗体:向每个孔中加入适量的抗体试剂。
注意避免交叉污染。
4. 孵育反应:根据试剂盒说明书,设定适当的孵育时间和温度。
5. 洗涤步骤:用洗涤缓冲液洗涤孔板,去除未结合的物质。
6. 底物加入:加入底物溶液,在适当条件下进行反应。
7. 反应停止:停止底物反应,并记录反应时间。
8. 测量结果:使用合适的仪器,如酶标仪或荧光仪,测量吸光度或荧光强度。
9. 数据分析:根据试剂盒说明书提供的方法,对实验结果进行定量分析。
5. 结果解读抗体试剂盒的实验结果通常以定量的方式呈现。
根据试剂盒说明书提供的标准曲线或参考值范围,可以对样品中目标抗体的含量进行定量分析。
达优人 IL-1β ELISA 试剂盒说明书
产品信息和操作指南Human IL-1β预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1012-048 / DKW12-1012-096本试剂盒专用于科研,而非用于诊断Human IL-1βDKW12-1012目录产品简介 (1)知识背景 (1)试剂盒提供的试剂 (2)需要实验者自行准备的试剂与仪器 (2)注意事项 (3)试剂的配制 (5)操作过程 (7)结果分析 (9)试剂盒的保存 (9)操作步骤一览表 (10)参考文献 (11)ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法 (12)预包被ELISA 试剂盒系列产品 (15)1、产品简介:达优®人IL-1β ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的IL-1β,可同时检测天然的和重组的IL-1β。
本试剂盒为预包被板,“夹心一步”完成,整个过程孵育时间不超过4小时,洗涤6次,操作时间大大减少。
本试剂盒专用于科研,而非用于诊断。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分,若有任何疑问请与达科为生物工程有限公司联系,E-mail:*************.检测范围:500-15.6 pg/mL灵敏度:5 pg/mL重复性:板内、板间变异系数均<10%。
2、知识背景:白细胞介素-1(Interleukin-1,IL-1)家族蛋白包括IL-1α、IL-1β和IL-1受体拮抗物。
除了皮肤角质化细胞、一些上皮细胞和中枢神经系统的一些细胞之外,IL-1并不在健康个体的未经刺激的细胞中分泌。
生理条件下IL-1的浓度仅在10-12-10-14M之间。
然而,为了应对刺激(如炎症物质、感染、细菌性内毒素),巨噬细胞和各种其它类型的细胞的IL-1分泌量将大大增加(1-4)。
3、试剂盒提供的试剂:试剂规格配制Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状,按瓶上说明操作Biotinylated antibody 2/1瓶* 1:50用Dilution buffer R(1×)稀释Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1:100用Dilution buffer R(1×)稀释Dilution buffer R(1×) 3/2瓶* 即用型Washing buffer(50×)1瓶 150∶用蒸馏水稀释TMB 1瓶即用型Stop solution 1瓶即用型Precoated ELISA plate 8×12或8×6*即用型封板膜 2/1张* 即用型说明书1份*:96/48 Tests4、需要实验者自行准备的试剂与仪器:1.酶标仪(建议参考仪器使用说明提前预热)2.微量加液器及吸头:P10,P50,P100,P200,P1000 3.蒸馏水或去离子水4.全新滤纸5.旋涡振荡器和磁力搅拌器5、注意事项:1.试剂应按瓶上标签说明储存,使用前室温平衡20-30分钟。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA(酶联免疫吸附试验)是一种常用的免疫学实验方法,用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。
它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势,被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。
本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南,包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。
一、实验准备1.阅读检测项目的说明书:在使用试剂盒前,仔细阅读说明书,了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。
2.样本准备:根据实验要求,准备样本。
如果需要检测血清中的抗体水平,可以采集血液样本,离心分离血清;如果需要检测细胞培养上清中的分子,将上清收集,并使其清晰,避免细胞或杂质的污染。
3.样本预处理:根据实验需求,对样本进行必要的预处理。
例如,可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本,以改变样本组分和浓度。
4.准备品质控制样品:制备阳性和阴性控制样品,用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。
5.实验器材准备:准备所需实验器材,如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。
确保器材的干净和完整,并按照说明书要求对其进行预处理。
二、试剂使用步骤1.试剂准备:根据说明书要求,将试剂从冰箱中取出,并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。
确保试剂瓶盖紧闭,并避免暴露在直接阳光下。
2.实验操作:按照说明书的要求,将试剂加入到酶标板中,并根据实验设计进行标准曲线的设置。
标准曲线用于测量未知样品的数量,并计算出浓度。
3.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行孵育。
孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。
4.洗涤:使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。
洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。
5.补液:在洗涤完成后,加入辣根过氧化物酶标况稀释液,促进酶标物与特异性结合物的反应。
6.孵育:根据试剂盒的要求,将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。
7.反应停止:根据试剂盒的要求,加入相应的停止液,停止酶反应。
人β内啡肽βEP试剂盒操作方法
人β2-内啡肽(β2-EP)试剂盒操作方法检测范围:96T80 ng/L -2000 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中β2-内啡肽(β2-EP)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人β2-内啡肽(β2-EP)水平。
用纯化的人β2-内啡肽(β2-EP)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β2-内啡肽(β2-EP),再与HRP标记的β2-内啡肽(β2-EP)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的β2-内啡肽(β2-EP)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人β2-内啡肽(β2-EP)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
抗体试剂盒使用方法
抗体试剂盒使用方法抗体试剂盒是一种用于检测特定抗体的试剂盒,广泛应用于医学、生物学、生物技术等领域。
本文将介绍抗体试剂盒的使用方法,包括试剂盒的准备、样品的处理、试剂的添加、反应的进行和结果的解读等方面。
一、试剂盒的准备在使用抗体试剂盒之前,需要准备好试剂盒和实验室必备的器材和试剂。
试剂盒通常包括抗体、标记物、底物、缓冲液、洗涤液等多种试剂,需要按照说明书中的要求进行保存和使用。
实验室必备的器材和试剂包括离心机、显微镜、移液器、离心管、试管、磁珠等。
二、样品的处理在进行抗体试剂盒检测之前,需要对样品进行处理。
样品可以是血清、血浆、尿液、组织等生物样品。
处理方法包括离心、稀释、加热、冷冻等。
离心可以去除悬浮在样品中的细胞和碎片,使样品更加纯净。
稀释可以使样品的浓度适合于试剂盒的检测范围。
加热可以使某些抗体变性,从而增加检测的灵敏度。
冷冻可以保存样品,以备后续的检测。
三、试剂的添加在样品处理完成后,需要将试剂添加到样品中进行反应。
试剂的添加顺序和量需要按照说明书中的要求进行。
通常情况下,先加入缓冲液,再加入标记物和底物,最后加入抗体。
试剂的添加需要注意避免污染和交叉反应。
四、反应的进行试剂添加完成后,需要将样品和试剂充分混合,并进行反应。
反应的时间和温度需要按照说明书中的要求进行。
通常情况下,反应时间为30分钟至2小时,反应温度为室温或37℃。
反应过程中需要轻轻摇动样品,以促进反应的进行。
五、结果的解读反应完成后,需要对结果进行解读。
抗体试剂盒的结果通常是颜色变化或荧光信号的出现。
颜色变化可以通过目视或光度计进行读取,荧光信号可以通过荧光显微镜进行观察。
结果的解读需要按照说明书中的要求进行,包括阳性、阴性和可疑等判断。
抗体试剂盒是一种简单、快速、灵敏的检测方法,广泛应用于医学、生物学、生物技术等领域。
正确的使用方法可以保证检测结果的准确性和可靠性。
人β防御素2(HβD2)试剂盒使用方法
人β-防御素2(HβD-2)试剂盒使用方法检测范围:96T7pg/ml-160pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中β-防御素2(HβD-2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人β-防御素2(HβD-2)水平。
用纯化的人β-防御素2(HβD-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入β-防御素2(HβD-2),再与HRP标记的β-防御素2(HβD-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的β-防御素2(HβD-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人β-防御素2(HβD-2)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA检测方法及步骤
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA检测方法及步骤人(Human) 免疫球蛋白G (IgG) ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理:IgG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IgG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将IgG和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中IgG的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品:80g/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗IgG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
抗人球蛋白检测卡操作程序
抗人球蛋白检测卡操作程序
抗人球蛋白检测卡操作程序(微柱凝胶免疫检测法)
(一)直接抗人球蛋白试验(DAT)
1.将准备好的检测卡做好标记
2.将各待检者红细胞用生理盐水洗涤后配成0.8%红细胞悬液
3.阴性对照红细胞:将健康男性0型红细胞配成0.8%红细胞悬液
4.将各待检者0.8%红细胞悬液50ul加入1-5管,阴性对照红细胞
加入第6管
5.专用离心机离心5min(900rpm 2min,1500rpm 3min)
6.肉眼观察结果
(二)不规则抗体筛检和鉴定试验(IAT)
1. 将准备好的检测卡做好标记
2. 分离被检者血清/血浆
3. 将0.8%Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ筛检红细胞各50ul分别加入对应的微管中
4. 将待检者血清/血浆分别加入Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ微管中,各50ul
5. 37℃孵育15min
6.专用离心机离心5min(900rpm 2min,1500rpm 3min)
7. 肉眼观察结果。
抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体 基因工程
抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程以人为本,抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程以可持续发展为准则的生态规划设计成为抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程园林景观设计的发展趋势,而抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程又将是城市可持续发展的必由之路。
有人说:“抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程的终生目标和工作就是帮助人类,使人、建筑物、社区、城市以及他们的生活同生活的地球和谐共处。
”久居高楼如林、车声嘈杂、空气污染的城市之后,抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程又企盼着亲近自然和返回自然,于是返朴归真成为时尚。
抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程随着席卷全球的生态主义浪潮,抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程不得不站在科学的视角上重新审视园林景观行业,抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程也开始将抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程的使命与整个地球生态系统联系起来。
抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程已不再停留在抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程的狭小天地或是图纸上的空谈,而开始介入更为广泛的抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程设计领域。
对抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程生态发展过程的尊重、对抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程的循环利用、对抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程自我维持和可持续处理技术的倡导,具体到每个抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程,都体现了浓厚的抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程。
在设计中对生态的追求已经与对功能和形式的追求同等重要,有时甚至超越后两者,占据首要位置。
抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga 抗体基因工程已成为景观设计师内在和本质的考虑,其创造的是一种可持续发展的景观。
一、抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程设计理念1、抗β2糖蛋白i结构域1蛋白iga抗体基因工程以人为本。
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人β2糖蛋白1抗体IgA试剂盒使用方法
检测范围:96T
60pg/ml-1600pg/ml
使用目的:
本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本β2糖蛋白1抗体IgA含量。
实验原理
本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人β2糖蛋白1抗体IgA水平。
用纯化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被单抗的微孔中依次加入β2糖蛋白1抗体IgA,再与HRP标记的抗原结合,形成抗原-抗体-酶标抗原复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的β2糖蛋白1抗体IgA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠β2糖蛋白1抗体IgA浓度。
试剂盒组成
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、
待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
操作程序总结:
计算
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
注意事项
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好
控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
保存条件及有效期
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。