ELISA法检验乙型肝炎标志物的影响因素分析

合集下载

ELISA法检测乙型肝炎两对半影响因素分析

ELISA法检测乙型肝炎两对半影响因素分析

ELISA法检测乙型肝炎两对半影响因素分析【中图分类号】r488+3【文献标识码】a【文章编号】1005-0515(2010)010-0042-01酶联免疫吸附试验(elisa)法广泛用于乙型肝炎(下称乙肝)两对半检测。

但其测定影响因素较多,有些因素会导致结果假阳性或假阴性,本文就elisa测定乙肝两对半的影响因素及对策作如下讨论。

1 样本采集与处理的影响1.1 标本严重溶血及混有红细胞的血清易沉淀或附着在聚乙烯孔内不易洗净,残留在孔内的血红蛋白具有过氧化物酶样的活性,催化底物显色造成假阳性,严重溶血标本禁用。

1.2 采血试管洗涤不彻底、反复使用交叉污染。

塑料试管能吸附抗原物质,样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。

最好使用一次性玻璃试管或真空采血管。

并使用非抗凝标本。

1.3 标本凝固不全,正常血液采集后30 min~2 h开始凝固,18~24 h血块完全收缩。

在工作中,有时为了快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在elisa测定过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块或附着在酶标板孔壁内使酶标记物不易洗掉,易造成假阳(阴)性结果。

因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清,或标本采集时用带分离胶的采血管中加提取。

2 试剂的影响2.1 乙肝两对半试剂厂家较多,不同厂家出产的试剂灵敏度与特异性存在一定的差别。

资料显示,不同厂家试剂的特异性和敏感性也不尽相同,有的厂家酶标板孔间a值差>15%,标记酶的活性及显色液的稳定比较差[1]。

使用劣质试剂必然导致结果的假阳性或假阴性,选择高质量的试剂是保证结果准确的关键之一。

2.2 不同方法学的检测试剂会使两对半结果出现一些不同。

例如:在实际工作中常用elisa法检测乙肝病毒表面抗原(hbsag)结果为阴性,而电化学发光检测为阳性。

除方法学的灵敏度外,还存在使用单抗或多克隆抗体试剂的差别。

单抗对变异抗原或亚型乙肝标志物检测存在差异,建议试剂厂家对试剂的制备应该考虑亚型及浓度的问题。

ELISA法检测HBV血清标志物影响因素分析

ELISA法检测HBV血清标志物影响因素分析

ELISA法检测HBV血清标志物影响因素分析【摘要】目的:探讨在日常检验工作时,人工操作过程中存在哪些因素会对酶联免疫吸附实验(ELISA)检测乙肝病毒(HBV)血清标志物有影响。

方法:选取我院门诊、住院或体检人员血液样本中HBSAg为阳性的患者45例作为研究对象,并随机分为三组,分别从洗板次数、反应温度、以及延时比色时间等三个方面来综合分析其对结果的影响。

结果:随着洗板次数的增加,样本的吸光度值反而降低(P<0.05),且其组间差异有统计学意义;当反应温度在25℃时其样本的吸光度值则低于37℃时样本的吸光度(P<0.05),差异有统计学意义;随着延时比色时间的延长,样本的吸光度值也会随之下降(P<0.05),差异有统计学意义。

结论:人工操作过程中存在多种因素会对酶联免疫吸附实验检测HBV 血清标志物造成影响,严重者可影响样本的阴阳性判断。

为减少操作过程中的人为误差,各实验室应建立起自己的标准化操作程序并予以严格执行。

尽一切努力为患者出具安全放心的检验报告单。

【关键词】人工操作ELISA HBV血清标志物乙肝病毒(HBV)血清标志物包括HBSAg、HBSAb、HBEAg、HBEAb以及HBCAb,即表面抗原、表面抗体、E抗原、E抗体以及核心抗体。

酶联免疫吸附实验,即ELISA法,因其特异性强、灵敏度高、操作方便等优点被广泛运用于临床实验中[1]。

然而,在临床工作中却经常会出现患者临床表现和实验室结果相矛盾的地方,或者不同医院在相近的时间点上对同一个患者的检测结果出现误差,这些都是因为各种影响因素的存在,使得ELISA法检测结果的可靠性得不到保证。

因此,怎样避免这些影响因素,确保实验结果的准确性显得至关重要。

本研究针对酶联免疫吸附实验操作过程中易于出现的三种影响因素进行分析,观察其对样本的最终检测结果的影响,为各实验室建立起自己的标准化操作程序确保实验结果的准确性提供参考依据[2]。

ELISA法检测HBV血清标志物影响因素的分析

ELISA法检测HBV血清标志物影响因素的分析
[Key words]:’ne hepatitis B virus;Enzyme-linked immunosorbent assay;Infulencing factor;HBV
酶联免疫吸附实验(EUsA)用于血清乙型肝 炎标志物定性检测具有灵敏度高、特异性强、重复 性好的特点,且操作简单、试剂方便易得,无放射性
两组间均值比较采用成组t检验,多组间均值 比较采用F检验(在F检验有意义时进行两组之间 的检验);样品率的统计采用X2检验。
2结果
“边缘效应”对结果的影响中央孔和周围孔的 A值差异具有统计学意义(P<o.05和P<O.01)(见表
为96孔板周边36孔的微孔反应板。按ELISA检
1),且中央孔低于边缘孔。
2009,6(2)
湖南师范大学学报(医学版) J Hunan N ormal Univ(Med Sci)
ELISA法检测HBV血清标志物影响因素的分析
谭凌卉 (湖南中医药大学第一附属医院检验科,湖南长沙410007)
【摘要】目的:探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)检测乙肝血清标志物的影响因素,为临床有效减少1


0.5
-————
}??

1%
图2终止反应后酶标仪不同时间扫描结果
知标本后放置2min,再加入抗一HBe—HRP,有7份
A450nm值>临界值0.1-4).35的阴性标本出现假阳
万方数据
湖南师范大学学报(医学版)2009,6(2)
性。表现为测定标本A450nm值低于临界值0.7以 内。随着加样后室温放置时间的延长.假阳性明显 增多。放置时间>,20min时,假阳性标本数显著增 加,约达放置时间10rain组的2倍。同时,一些原来 A450nm值超过0.7以上的标本、甚至更高的标本. 亦出现较高比例的假阳性。加样后室温放置

影响ELISA法检测乙型肝炎病毒血清标志物的因素

影响ELISA法检测乙型肝炎病毒血清标志物的因素
重 症 组 患 儿 人 院 时 血 清 h— R sC P的 异 常 率 为 7 . , 院 前 下 12 出
严琴琴 , 丽芳 , 建云 , . 症肺 炎患儿 心肌肌钙蛋 白 杨 郑 等 重 I 化 的 意 义 E] 实 用 儿 科 杂 志 ,0 52 ( )3 43 5 变 3. 2 0 ,0 4 :2—2 .
高 l , 而 可 以 弥 补 单 纯 检 测 c nI 不 足 。 由 于 婴 幼 儿 体 内 7因 ] T —的
合 成 C P的 能 力 不 足 , 清 C P含 量 显 著 低 于 成 年 人 , 须 R 血 R 必
用 更 加 灵 敏 的方 法 来 检 测 , 称 为 超 敏 C ( s R ) 故 RP h — P 。 C 本 研 究 发 现 重 症 肺 炎 组 患 儿 治 疗 1周 后 血 清 c n I 平 T—水
h达 到 峰 值 , 复 的 炎 症 刺 激 可 致 C P 水 平 持 续 上 升 l 。 反 R 6 ]
民 卫 生 出 版 社 , 0 2: 1 61 7 . 2 0 1 7 — 1 8
梁 宏 , 秀 兰 . 幼 儿 重 症 肺 炎 合 并 心 力 衰 竭 时心 肌 肌 钙 石 婴
C P 由于 其 半 衰 期 短 , 对 炎 症 、 织 损 伤 等 敏 感 性 相 当 R 且 组
参 考 文 献 [ ] 胡 亚美 , 载 芳 , 福 棠 . 用 儿 科 学 [ . 1 江 诸 实 M] 7版 . 京 : 北 人
蛋 白 I 临床 意 义 E] 中原 医 刊 ,0 6 3 () 4 —7 的 J. 2 0 ,34 :64 .
M a rd AH , e Re M , b , ta. o h mia r — d i d / yJ Ru i e 1Bic e c lma k J

ELISA法检测乙肝五项影响因素

ELISA法检测乙肝五项影响因素

ELISA法检测乙肝五项的影响因素初探【摘要】目的:探讨elisa法检测乙肝五项的影响因素。

方法:对我院采用elisa法检测乙肝五项的试验进行回顾分析,总结试验影响因素。

结果:elisa法检测乙肝五项可能的影响因素为患者因素、实验操作因素、标本因素、试剂因素、elisa试验特点等。

结论:医务人员需严格按照规范操作进行试验,避免elisa法测定乙肝五项中的各项影响因素,从而提高临床诊断灵敏度、特异性。

【关键词】elisa;乙肝五项;影响因素随着现代临床免疫学的发展,酶联免疫吸附试验(elisa)因其操作简单、灵敏度高、特异性高等特点[1]。

通常采用96孔酶标板作为固相来检测相应抗原、抗体。

虽然操作简单,但可能由于人工操作的差异,检验过程中受到外界因素及人为因素影响较多,而易使检测结果出现误差。

本研究从患者因素、实验操作因素、标本因素、试剂因素、elisa试验特点等方面入手,简要探讨elisa法检测乙肝五项的影响因素,报道如下:1患者因素以患者体内的非特异性干扰物质为主,常见的有:内源性酶、补体、类风湿因子(rf)[2]。

人血清中igm、igg型类风湿因子(rf),能结合捕捉抗体与标记二抗的fc段,从而出现假阳性结果。

补体活化过程中,固相一抗及酶标二抗结合过程中,引起抗体分子变构,fc的c1q分子结合位点暴露出来,c1q可将本不能结合的二者连接起来,引起假阳性。

内源性酶对双抗夹心elisa影响较小,用edta或nan3·h2o2即可灭活酶。

2实验操作因素elisa实验操作包括包被、封闭、孵育、加样、洗涤、显色、比色。

下面就这几个操作可能涉及的影响因素一一分析。

2.1包被:要求包被液ph值9.6的碳酸盐缓冲液,通常与酶标板中加入包被液,后放置于4°c冰箱过夜,也有学者主37°c保温2小时。

包被最适浓度随载体及包被物的性质变化很大,需根据实验摸索与酶结合物的最适宜浓度。

通常的蛋白质包被浓度100?g/ml-20?g/ml。

用ELISA法检测乙肝五项准确性的影响因素探讨

用ELISA法检测乙肝五项准确性的影响因素探讨

用ELISA法检测乙肝五项准确性的影响因素探讨【摘要】目的对影响ELISA法检测乙肝五项准确性的因素进行分析,以期为提升ELISA法的检测精准性提供一些依据。

方法将2017年2月-2017年6月到我院接受乙肝五项检测的208例患者选取为研究对象,对所有患者均采取ELISA法进行检测,并对影响检测结果准确性的有关因素进行全面分析。

结果血清样本的质量、开展实验前有关样本的准备工作、检测操作有关事宜、操作人员的素养以及最终检测结果的读取、审核等因素均是影响ELISA法检测乙肝五项准确性的主要因素。

结论采用ELISA法来检测乙肝患者的乙肝五项时,必须要求操作人员保持严谨的态度,严格按照相关的操作规定及准则,认真记录并做好检测过程中的有关实验操作,以免因人为因素而影响乙肝五项检测结果的精准性,同时,必须最大限度地排除可能影响检测结果的各项因素,为提升ELISA法检测乙肝五项准确性提供有效的保障,为准确地诊断乙型肝炎疾病奠定基础。

【关键词】ELISA法;乙肝五项;影响因素乙肝全名乙型病毒性肝炎,其主要是由于肝脏在受到乙肝病毒侵扰时发生炎性病变,导致肝组织受损而诱发的一种疾病,一些乙型肝炎患者的病情还有可能逐步演变为肝硬化甚至肝癌,对患者的生命安全造成巨大危害[1]。

现阶段主要是根据乙肝五项的结果来对乙型肝炎进行诊断,而最为常见的一种检测办法就是ELISA法,但在实际操作过程中,ELISA法的检测结果极易因各种因素而受到影响。

为此,本文将2017年2月-2017年6月到我院接受乙肝五项检测的208例患者选取为研究对象,对影响ELISA法检测乙肝五项准确性的因素进行分析,以期为提升ELISA法的检测精准性提供一些依据。

1.资料与方法1.1一般资料将2017年2月-2017年6月到我院接受乙肝五项检测的208例患者选取为研究对象,其中98例为女性患者,110例为男性患者;最大年龄为93岁,最小年龄为1天。

通过对所有患者的样本收集和检查过程进行回顾性分析,同时,对影响检查结果的各种因素进行分析和总结。

ELISA法检测乙肝五项影响因素及结果分析与对策

ELISA法检测乙肝五项影响因素及结果分析与对策
内不 易 洗净 ,可 出现 非特 异性 反应 ,残 留在 孔 内的 血红 蛋 白具有 妇 H B s A g的检 出;而 且其所 生产 的生新 几也 常 出现 } 玎 3 s a g阴性 , 过氧 化 物酶 样 的活性 ,催 化底 物显 色造 成假 阳性 ,严 重 溶血 标本 H B e A g 阳性和 H B c A b阳性等 少见模 式 、可能 是 乙肝 免疫 球蛋 白属
经验 爻 流
E L I S A法检 测 乙肝 五项影 响因素及结果分析与对策
曹贺涛
宁夏石嘴 山市疾病预 防控制 中心 7 5 3 0 0 0
【 摘
要】 随着临床免疫 学不 断发展 , E L I S A法比较灵敏 , 不需特殊设备 , 可以定性分析 , 所以应 用发展迅速 。 但在 实际工作 中,
1 . 2标 本凝 固2 ~2 h 开始 可 将 二者连 接起 来 造成 假 阳性 ,采用 5 6 ℃3 0 分 钟 灭活 补体 可 降
凝 固 ,1 8~ 2 4 h血块 完全 收缩 。在 工作 中 ,有 时 为了争 取时 间快 低假 阳性率 ,高 浓度 的 A F P( 如孕 妇 ),在储 存 过程 中可 能形 成
可能会 因操作 不 当而 出现一 些异常指标 。总之 ,一点 小小的疏忽、失误可能造成检验 结果的偏差 ,给 患者及 家属 带来物 质
精神 上的损失 ,给 临床确诊 带来麻 烦。 【 关键 词 】E L I S A;乙肝 两对半 ;影响 因素 ;结果分析
E L I S A法广 泛 用 于 乙肝 两对 半 检测 ,但 E L I S A测 定 中影 响 因 H B s A b 、H B e A g 假 阴性 ;或 H B e A b 和H B c h b的假 阳性 。 素 较 多,有 些 因素 会 导致结 果假 阳 性或 假 阴性 ,本文 就 E L I S A 测

ELISA法检测乙肝表面抗原假阳性结果原因分析

ELISA法检测乙肝表面抗原假阳性结果原因分析

ELISA法检测乙肝表面抗原假阳性结果原因分析发表时间:2011-11-02T10:37:13.357Z 来源:《中外健康文摘》2011年第23期供稿作者:和景霞[导读] ELISA方法检测HBsAg假阳性的报道时有。

和景霞(河南省三门峡市中医院检验科河南三门峡 472000)【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2011)23-0285-01 用ELISA法检测乙肝表面抗原、二对半在临床上已是常用的、结果准确的查测方法。

旦量操作不当等各种影响因素都会造成假阳性、假阴性结果。

我们在试验中出了一例HBsAg假阳结现报道如下:患者、男、45岁。

2010年9月16日来我院内科门诊做健康体检。

门诊检查血压、心率正常,无既往病史。

心电图正常,肝胆B超未见异常。

患者于清晨空腹以真空采血管按要求定量采血检测血常规、肝、肾功能及乙肝二对半,按常规操作分离血清,无溶血、乳糜及黄疸等。

实验室检测结果:血、尿常规检测正常;生化肝、肾功能指标正常。

用ELISA方法检测乙肝二对半结果为HBsAg(+);HBsAb (+);HBeAg(-);HBeAb(-);HBcAb(-)。

再用ELISA方法复查,仍为此种模式。

改用金标方法复查HBsAg,结果为 (-)。

我们又检测了该标本的HBV-DNA含量,结果为低于检测值下线,(考贝数在103次方一下),说明是一例假阳性结果。

本次ELISA试剂为英科新创(厦门)科技有限公司生产,批号2010035104,有效期20110310;金标试剂为英科新创(厦门)科技有限公司生产,批号2010064211,有效期201106;HBV-DNA检测试剂为中山大学达安基因股份有限公司生产,批号2010004,有效期20110216。

讨论80年代中其以前检测乙肝的方法采用琼脂扩散法及琼脂电泳法、反向间接血凝等方法。

80年代以后临床上逐步采用ELISA职代了上述检查方法至今,ELISA的问世是检测乙型肝炎的为一方法敏感、特异性强、较准确、假阳低检测方法。

ELISA法检测HBsAg影响因素分析

ELISA法检测HBsAg影响因素分析

边缘效应

【中图分类号l
R44 6.6
l文献标识码l
【文章编号J
674--0742(2009)09(b)--01
72--02
HBsAg是实验室常见检测项目,是诊断乙型肝炎的重要指标 之一。ELISA发检.坝I]HBsAg具有高灵敏度,特异性强而被广泛应 用,现就此方法在实际操作中的影响因素进行分析。
Mediat,2007,83(3):188—197.
【4】Sapey E,Bayley D,Abroad A,Newbold P’et a1.Inter~relation—
ships between inflammatory markers in patients with stable COPD with bronchitis:intra~patient and inter~patient
1 72
中外医疗CHINA FOREIGN MEDICAL TREATMENT
万方数据
综述
38孑L)和中央孔A值作成组配对t检验,结果见表2。 3讨论 内源性物质干扰因素,从表1中可以看出溶血和非溶血,乳糜
血与非乳糜血两组样本测定吸光度A值无统计学意义,即两者对 明显。
CHNA
2QQ2 型鱼:2§ FOREIGN MEDICAL TREATMENT
CHINA FOREIGN MEDICAL
TREATMENT中外医疗
1 73
万方数据
检验提供最佳参考方案。结果实验表明溶▲,脂血的标本用ELISA检测HBsAg吸光度值无统计学意叉,对检测结果无影响。而边缘效应
的中央孔和周围孔在3种不同时间,不同的温孵方式中,吸光度值王著差异,水溶相对较小,孵育较大,室温i为明里,而且同一温育温度

用ELISA法检测乙型肝炎两对半准确性的影响因素探讨

用ELISA法检测乙型肝炎两对半准确性的影响因素探讨

E L I S A 法 的检测结 果也存在假 阳性或假 阴性的可 能性。 明确 可能影响 E L I S A 法 检测结果 的相关 因素 ,制定相 应的 防范措 施 ,对提 高乙型肝
炎两对 半准确性 和检验 质量具有 非常重要 的作用 】 。本文选取 在我 院
体 流程 、易 发生 问题 的环节 ,实 验操 作人 员必 须 十分 了解 ,除此 之 外 ,还必须 ,明确 乙型肝炎两对 半每个标 志代表 的不 同意义 以及 失控
于对 照组 ,差异具有 统计学 意义 ( P<0 . 0 5 )。 2 . 3安 全性 检测 :两 组 患者 在治 疗过 程 中严 重不 良反 应情 况 较为 轻
的糖皮 质激 素类 药物 等 ,而一 些抗 变态 反应 药物 同时 具有 稳定 肥大 细胞作 用 的药物 ,在 治疗 咳嗽 变异 性哮 喘 时临床 效果 也较 为显 著 。
孟 鲁 司特 是非 甾体抗 炎药 物 ,可选 择性 的拮 抗 白三烯 受体 ,具 有选
( 1 3 . 1 1 %) ,无 效患者 1 0 例 ( 1 6 . 3 9 %) ,治疗后 对照 组总 有效率
包括 D 2 受 体兴奋 药物 ,茶碱 类药物 或抗胆 碱类药 物 ,具有抗 炎作用
8 3 . 6 1 % ( 5 1 / 6 1 )。 由治 疗结果 可知 ,治疗后研 究组 临床疗 效显著高
1 4 2 ・临床 研 究 ・
O c t o b e r 2 0 1 6 , V o 1 . 1 4 , N o . 3 0
用E L I S A 法检测 乙型肝炎两对半准确性 的影 响因素探讨
王 迪 张锦 伟 韩亚 男
( 大连市第六人 民医院检验科 ,辽宁 大连 1 1 6 0 3 1 )

影响乙型肝炎表面抗原在ELISA检测中的2种因素分析

影响乙型肝炎表面抗原在ELISA检测中的2种因素分析

影响乙型肝炎表面抗原在ELISA检测中的2种因素分析【摘要】目的:探讨乙型肝炎表面抗原在ELISA法检测中受溶血标本、洗涤过程影响而使检测结果产生异常的分析。

方法:在应用ELISA酶免疫一步法对乙型肝炎表面抗原进行检测的过程中采用以上影响因素进行检测,再与其正常结果加以对照分析。

结果:乙型肝炎表面抗原受上述因素影响后易产生假阳性或假阴性的结果。

结论:如何避免以上因素对乙型肝炎表面抗原检测结果的影响,这就要求对实验条件、操作规程、试剂与仪器、实验人员的操作水平等进行严格的质量控制,对于已溶血的标本不能使用。

【关键词】溶血;乙型肝炎表面抗原;ELISA酶免疫一步法;手工洗板法在临床及健康体检工作中,人们对乙肝两对半的检测已成为重要项目。

HBsAg是机体感染HBV后最先出现的血清学指标物,HBsAg阳性可见于急性乙型肝炎患者的潜伏期、急性期、慢性乙型肝炎患者、无症状HBsAg携带者,所以HBsAg是HBV重要的感染指标之一。

用ELISA一步法检测HBV血清学标志物来诊断乙型肝炎和观察治疗效果是临床工作中常用的方法,其原理是采用单克隆抗-HBs 包被反应板,加入待测标本,同时加入多克隆抗-HBs-HRP(辣根过氧化酶)的酶液,当标本中存在HBsAg时,该HBsAg与包被抗-HBs结合并与抗-HBs-HRP结合形成抗-HBs-HBsAg-抗-HBs-HRP复合物,加入TMB(四甲基联苯胺)底物产生显色反应,反之则无显色反应。

但在具体实践工作中,有时会遇到HBsAg检测结果前后不一致或与其他单位的检测结果不一致的情况,其原因是多方面的。

本文就实际操作中的2种影响因素加以分析。

1 溶血对HBsAg检测结果的影响1.1 试剂:酶联免疫试剂盒由北京万泰公司提供。

1.2 标本:HBsAg阴性标本137例、HBsAg强阳性标本68例、HBsAg弱阳性标本68例的非溶血和溶血血清(清洁玻璃棒搅拌使其溶血)各1份。

1.3 方法:参照《全国临床检验操作规程》用ELISA酶免疫一步法,严格按照试剂盒说明书进行操作,用酶标仪单波长(450 nm)测定,设空白对照孔,测定各标本OD值。

ELISA法检验乙肝标志物影响因素分析

ELISA法检验乙肝标志物影响因素分析

ELISA法检验乙肝标志物影响因素分析摘要】目的观察分析ELISA法检验乙肝标志物的影响因素,总结其临床诊断意义。

方法选取我院2011年10月至2012年10月我院采取ELISA法检验乙肝标志物的受检者3340例,其中检出乙肝标志物阳性共386例,后经临床排除证实为假阳性有46例,假阴性有18例,分别对其各种影响因素进行调查并统计分析。

结果46例假阳性中,由于样本采集及处理导致有19例,占41.3%,操作过程导致有13例,占28.3%,试剂运输、贮存及试剂盒本身质量问题导致有2例,占4.3%,体内干扰物质导致有9例,占19.6%,药物影响有3例,占6.5%,各导致假阳性的因素间对比有一定差异(P<0.05),具有统计学意义;假阴性18例中,操作过程导致有10例,占55.6%,试剂运输、贮存及试剂盒本身质量问题导致有4例,占22.2%,药物影响有4例,占22.2%,各导致假阴性的因素间对比有一定差异(P<0.05),具有统计学意义。

结论样本采集及处理,操作过程,试剂运输、贮存及试剂盒本身质量,体内干扰物质及药物皆为ELISA法检验乙肝标志物的影响因素,因此,在实验室检测中应注意尽可能避免相关影响因素,增强实验室人员的责任心,总结经验教训,加强实验室管理,严格操作规程,力求为临床提供更为可靠、科学的参考依据。

【关键词】ELISA法乙肝标志物影响因素【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2012)36-0027-02目前,酶联免疫吸附试验(ELISA法)已成为临床检验中较为常用的一种免疫学检测方法,其灵敏度较高,能够协助临床早期诊断。

但ELISA法也有其局限性,影响其准确性的影响较多,本研究通过观察分析ELISA法检验乙肝标志物的影响因素,总结其临床诊断意义如下:1 资料与方法1.1 一般资料选取我院2011年10月至2012年10月我院采取ELISA法检验乙肝标志物的受检者3340例,男有1708例,女有1632例,年龄在14~68岁,中位年龄为42.3±3.6岁,其中检出乙肝标志物阳性共386例,后经临床排除证实为假阳性有46例,假阴性有18例,分别对其各种影响因素进行调查并统计分析。

ELISA法对乙型肝炎“两对半”检测结果影响因素的分析

ELISA法对乙型肝炎“两对半”检测结果影响因素的分析

生 生 长因 子 受 体  ̄ P F ) ( DG Ra 融合 基 因能 区 分 两 者 , C L阳 其 E
性 , I S一 般 阴性 j 而 HE 7。 参 考 文献
[ ] 王 静 , 梅 . 酸 粒 细 胞 白 血 病 1例 [ ] 实 用 诊 断 与 治 疗 杂 志 , 1 王 嗜 J.
向 左 扩 大 , 平 软 , 突 下 轻 压 痛 , 、 肋 下 未 扪 及 , 骨 压 腹 剑 肝 脾 胸
痛 。辅 助 检 查 , B 4 . W C: 9 7× 1 。 L; B 3 4 × 1 / ; O / R C: . 9 0 L
粒 细 胞 是 恶 性 增 殖 , 单 克 隆 增 殖 , 】 S的 嗜 酸 性 粒 细 胞 为 而 HE 为 反 应 性 增 殖 , 多 克 隆 增 殖 。最 近 , 现 FP L / 小 板 衍 为 发 II 1血
胸 骨 压 痛 l , 且 C I 与 I S本 质 的 区 别 是 C I 的 嗜 酸 性 6 而 ] E HE E
院前约半年 , 患者 无 明 显 诱 因 开 始 出 现 头 昏 、 闷 、 胸 四肢 乏 力 ,
活 动 后 心 累 , 出鼻 血 2次 , 身 皮 肤 无 瘀 点 、 斑 , 发 热 。 曾 全 瘀 无
质 , 以不 同程 度 影 响 检 测 结 果 。常 见 的干 扰 物 质 有 类 风 湿 因 可
子、 甲胎 蛋 白 因 子 。某 些 自身 抗 体 也 会 影 响 结 果 造 成 假 阳 性 。 5 药 物 的影 响 高 效 价 的 乙型 肝 炎 免 疫 球 蛋 白 会 与 HB Ag形 成 复 合 物 , s
分离胶 的采血管提取… 。 2 试 剂 的 影 响 乙 肝 两 对 半 试 剂 种 类 较 多 , 同种 类 的试 剂 灵 敏 度 与 特 意 不 性 存 在 一定 的 差 异 。资 料 显 示 , 同 厂 家 试 剂 的 特 异 性 和 敏 感 不

ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素探究

ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素探究

ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素探究摘要目的探讨酶联免疫吸附法(ELISA法)检测慢性乙型肝炎(乙肝)表面抗原中的有关影响因素。

方法231份乙肝表面抗原样本,采用ELISA法检测,针对影响检测结果的各方面因素进行分析。

结果第一组样本在0.5 h检测阳性率为12.50%(11/88), 1 h后检测阳性率为7.95%(7/88),2 h后检测阳性率为1.14%(1/88)。

第二组4支试管检测阳性率:不抗凝管为2.86%(2/70),枸橼酸钠管为0(0/70)、肝素钠抗凝管为7.14%(5/70)、EDTA-K2管为0(0/70)。

第三组样本检测阳性率与血细胞水平浓度由低到高依次为9.59%(7/73)、54.79%(40/73)、100.00%(73/73)。

结论采用ELISA法检测乙肝表面抗原过程中,其检测结果受多方面因素影响,为保证检测的准确率,需要进行重复性试验并换用不同方式进行测定,以保障检测准确性。

关键词酶联免疫吸附法;乙肝表面抗原;影响因素采用ELISA法对乙肝表面抗原结果进行检测为临床最常用检测方式,该检测方式具备操作简单、灵敏度高且存在有较高特异性等方面特点,可有效提升临床对乙肝病症诊断效率。

而结合实际情况可知,在采用该法检测过程中存在有一定假阳性率[1],很容易对被采集者造成精神压力。

为有效保证该检测技术准确性,使得该检测方案临床价值进一步彰显。

本次本院就针对ELISA法检测乙肝表面抗原过程中有关影响因素加以分析,报告如下。

1 材料与方法1. 1 材料来源收集本站2016年1~12月乙肝表面抗原样本231份,本组血液样本男131例,女100例,年龄28~48岁,平均年龄(31.01±1.74)岁。

1. 2 方法采用ELISA法检测,所用试剂均符合临床检测标准,所用设备为RT-2000i酶标仪。

在检测过程中,各方面操作均严格按照规定进行,并结合检测情况将样本划分为3组。

ELISA法乙肝两对半检测影响因素分析和临床意义_薛春杨

ELISA法乙肝两对半检测影响因素分析和临床意义_薛春杨

中国误诊学杂志2011年6月第11卷第16期Chin J Misdiagn,Jun 2011 Vol 11 No.16 · 3913 ··医学论坛 ·ELISA 法乙肝两对半检测影响因素分析和临床意义薛春杨,周建波东南大学医学院附属江阴医院检验科,江苏江阴214400摘要:目的探讨ELISA法检测乙肝两对半常见影响因素和临床意义。

方法回顾分析ELISA法检测乙肝两对半的检验步骤,总结乙肝两对半检测的影响因素,并对临床意义进行探讨。

结果检验前标本的准备、检验人员的业务水平、检验过程中的标准操作规程、检验结果的研读等是ELISA法检测乙肝乙肝两对半的影响因素,两对半各项指标对临床诊治乙肝具有指导意义。

结论乙肝两对半是乙肝临床治疗依据的重要指标,ELISA法是检测乙肝的灵敏方法,严格按照操作步骤,加强质量控制,可有效排除影响因素干扰。

主题词:肝炎,乙型/诊断;肝炎抗体,乙型/分析;肝炎抗原,乙型/分析;酶联免疫吸附测定中图分类号:R512.62 文献标识码:B 文章编号:1009-6647(2011)16-3913-02乙肝两对半是诊断、治疗乙肝的有效指标,常用的检测方育,温育使反应孔内的酶标物质辣根酶催化底物生成有色产。

、,ELISA 法检测乙肝两对半的影响因素和临床意义进行探讨, 为37 ℃ 10~40 min反应彻底完成,底物液受光照会自行变色,显临床诊疗提供参考。

色反应需在避光环境进行。

2 .4显色显色是ELISA法测定乙肝两对半中最后一步温1 检测前的影响因素1 .1 标本的影响标本应避免溶血, 红细胞破裂可释放过氧化物酶活性物质干扰与显色剂发生显色反应。

血块完全收缩使标本中的非特异性活性物质部分或全部失活,若在血液还未开始凝固时强行离心分离血清,EL ISA测定过程中可形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果[2]。

1 .2 试剂盒的影响试剂盒的质量是保证实验结果准确性的必要前提,各厂家的试剂盒灵敏度、特异性、精密度、稳定性和操作简便性有一定的差异。

ELISA法检测乙肝的影响因素

ELISA法检测乙肝的影响因素
材料 : 统计2 0 1 1 年度该 院门诊 、 体 检、 住 院 所 有 酶 法 检 测 乙肝
降低洗板质量。 另外, 显 色 剂 A和 B 一 定要 按 要求 准 确 量 加 入 反 应
孔 后充 分 混 匀 , 且要避 光反应够规定 时间, 如果时间不够, 也 可使
4 结果 判 定
五 项标 本 的结 果 。 仪器 和试 剂 : 使 用 安 图生 物 酶 标 分 析 仪 、 深 圳 汇 浓 度 低 的 标 本 不显 色 , 造 成假 阴性 。 松P W. 9 6 0 洗 板 机 和 上 海 科 华 生 物 乙肝 诊 断 试 剂 盒 。
格、 试 剂影响因素、 操 作技术失误 、 结果判定 失误 以及药物等一 些干扰物质都 可能对乙肝E L I S A法检 测造成影响。结论 乙
肝 酶 法检 测 时 要 排 除 各 种 影 响 因素 的 干扰 , 尽 量 杜 绝 出现 假 阳性 、 假阴性结果, 确保检测结果的准确性。
【 关 键 词 】 乙肝 检 测; E L I S A法 ; 标本; 操作; 影响 因素 【 中 图分 类 号 】R 5 7 5 【 文献 标 识 码 】A 【 文章 编 号 】1 6 7 2 — 5 6 5 4( 2 0 1 3 ) 0 1 ( c ) 一 0 0 9 5 — 0 1
【 摘 要1目的 通 过E L I S A法检测乙型肝炎过 程中所 有影 响因素 的分析 , 了解这些 因素会造成 的结果 , 及其处 理方法, 减 少差
错事 故发生 , 保证实验 结果的准确性。方法 运用 E L I S A法 , 严 格 按 照 试 剂 盒 说 明书 检 测 。 结 果 乙肝 检 测 时 乙 型 肝 炎 病 毒 ( HB V) 引起 的 一 种 世 界 操 作 。 首 先 是 加 样 后 放 置 一定 时 间后 洗 板 , 实 验 的 成 功 与 否 洗 板 性 疾病。 我 国 是 乙 型 肝 炎 病 毒 感 染 的高 流 行 区 。 目前 酶 联 免 疫 吸 有 着 很 大 的关 系要 严 格 按 照 试 剂 说 明书 配 制洗 液 , 手工 洗 板 一 次 附实验 ( E L I S A, 简称酶 免 ) 是 实验室最常用的检测方 法, 利 用 酶 把 反 应 孔 内的纤 维 蛋 白凝 块 洗 掉 以免 堵 塞 洗 板 机 。 洗 板 时要 注 意

ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素分析

ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素分析

世界最新医学信息文摘 2016年第16卷第103期 141·医学检验·ELISA法检测乙肝表面抗原结果影响因素分析何瑞平(内蒙古乌兰察布市中心血站,内蒙古 集宁)摘要:目的探讨血清标本因素对酶联免疫吸附法(ELISA)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)结果的影响。

方法用同一批号试剂对不同状态的血清标本进行同步检测,并对结果进行综合比较分析。

结果溶血或浑浊的血清是引起结果错误的主要原因。

结论对于患者血清标本中的HBsAg单独阳性或与乙肝三系统中的HBsAb同时阳性结果,在检测时最好进行重复性试验或者变换方法及试剂进行复查,确保HBsAg检验结果的准确性。

关键词:酶联免疫吸附试验;乙型肝炎表面抗原;抗凝剂中图分类号:R446.61 文献标识码:B DOI:10.3969/j.issn.1671-3141.2016.103.1030 引言酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBsAg因具有灵敏度高、特异性强等优点而被广泛应用,但在日常工作中检测HBsAg 常遇到假阳性率高、重复性不好的现象。

HBsAg假阳性结果易给广大无偿献血人员造成很大的精神压力,易引起献血人员对检测人员的投诉,同时对检验机构易造成不良的声誉[1]。

针对这一现象,为了使检验结果更加准确、假阳性率更低,笔者采用同一种试剂对不同的血清标本进行重复测定,现分析如下:1 资料与方法1.1 血清标本随机抽取市中心血站2016年3月无偿献血人员的血清标本279份。

1.2 试剂杭州艾康生物技术有限公司提供的同一批次乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂。

1.3 仪器选用深圳雷杜有限公司提供的RT-2000i酶标仪和洗板机。

1.4 分组和检测方法严格按照说明书进行操作,避免人为造成影响[2]。

按不同情况分3组进行观察。

A组(不抗凝血液标本):取144份不抗凝血液标本,每份分为三管,分别静置0.5小时、1小时、2小时后用3500r/min离心15min,取出血清分别检测HBsAg。

观察ELISA法检测乙肝两对半常见影响因素48

观察ELISA法检测乙肝两对半常见影响因素48

观察ELISA法检测乙肝两对半常见影响因素摘要:目的:探讨在检测中应用Elisa 技术开展乙肝两对半项目检测的相关因素。

方法:随机选取在我中心健康体检人群从 2015 年 1 月到 2017 年 1 月参与乙肝两对半项目检测且准确性较低的患者共有 100 例,搜集全部患者的临床资料并追踪检测过程与结果,探讨应用 Elisa 技术开展乙肝两对半项目检测的相关因素。

结果:应用 Elisa 技术开展乙肝两对半项目检测的相关因素包含试剂盒的质量较低、操作不规范以及标本没有正确地采集与保存等方面。

结论:在我中心临检室开展乙肝两对半项目检测的过程中,应对影响因素的各个环节进行综合评估与管理,提高检测的准确度。

关键词:影响因素;措施;乙肝两对半;检测;Elisa近年来,在临床中大多数采用 Elisa 技术开展乙肝两对半项目的检测,该技术存在一定的特异性与灵敏度,操作便捷以及具有较高的可重复性[1]。

然而,在实际的检测过程中,该技术检测的准确性无法有效地保证,不利于患者的治疗与康复[2]。

因此,为了探讨在临床中应用 Elisa 技术开展乙肝两对半项目检测的相关因素,本文随机选取在我中心健康体检人群从2015 年 1 月到 2017 年 1 月参与乙肝两对半项目检测且准确性较低的患者共有 100 例展开分析与总结,以便于提高乙肝两对半项目检测的准确度,具体研究结果现报告如下。

1 一般资料和方法1.1 一般资料随机选取在我中心健康体检人群从 2015 年 1 月到 2017 年 1 月参与乙肝两对半项目检测且准确性较低的患者共有 100 例,其中男性49 例,女性 51 例;患者的年龄范围在 23 至 79 岁,平均值是(48.92±8.32)岁。

1.2 方法搜集全部患者的临床资料并应用 Elisa 技术开展乙肝两对半检测,检测方法如下,空腹采集患者的 3mL 静脉血液,待其凝固后使用抗凝管混和均匀并离心,将转速设置为每分钟3000r,时间设置为10 min,然后进行酶联免疫吸附试验,分别检测血浆中的乙肝特定抗原与抗体。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

实验 室环境 、仪 器、干扰 物 质 及 H D — H O O K 效 应等 因素 影响 。结论 检 验 人 员在操 作过 程 中 ,加 强质 量 管理 ,避 免或 减 少影 响 因素 ,对提
高检 测结 果 准确 性 具有 重要 意 义。
【 关 键 词l 酶联 免疫吸 附试验 ;乙型肝 炎血 清标 志物 ;影 响 因素
温度 恒定 。③温育 时微 孔反应 板 不能叠 加 ,因为 微孔反 应板 结构 特 殊 ,易产 生边缘效应 ,使板周 围和 孔内温度升温速度 不同 ,造成 孔边 缘与 内部结果 的差异 。
2 - 3洗板
①标 本量不足 可直 接影响检 验结果 ,因此 ,在 抽取样本 时应抽取
足够 量血液 ,以便得到 足够血液样本 。②标本发 生严重溶血 时 ,血清 易沉淀于 聚乙烯孔 ,残 留的血红蛋 白发挥过 氧化 物酶样作用 ,可催化
不 可重复使用 ,以避 免交叉感染 ,建议使用一 次性吸头 。③加样 时应
将标 本加在微孔反应 板底部 ,同时避 免吸头接触 微孔反应板底部 和孔 壁 。④加样过程 中避 免液体外 溅,如不慎将样本 或试 剂溅 出 ̄ L E c F 时, 应用 吸水纸 轻拭 吸干 ,并做好相关记录 。
2 - 2温育
联免疫 吸附试验 技术 ( E L I S A)是 目前最常用 的一种检测 乙型肝炎血
清标 志物的方法 ,具有 操作简便 、灵敏度高 经济环保 、便于大规模 检测等优 点 ,但在 实际检测过程 中 ,检测结果 易受多种 因素影响 ,造 成检测结 果假 阳性 或假 阴性 ;本 次研 究为保 障检 测结果 的准确性 ,就 E L I S A 检验乙型肝炎血 清标志物的影响因素进行探讨 ,报道如下 。 1材 料 1 . 1标本因素
1 . 2试 剂因素
①显 色剂要现 用现配 ,不使用 过期色 剂。②显色要避 光反应 ,
严 格按照说 明书放置放够 时间 ,以避免滴度 低的标本反 应不出来 ,形 成 假 阴性 。③加入终止液 时要避免产生气 泡造成假 阳性 ,加终止液后 应及时在 1 5 m i n 内 比色。 2 . 5读数 酶标 仪读数 时应保 证微孔反应 板底部清 洁 ,严格按说 明书的规定
【 摘要】 目的 探 讨 酶联 免疫吸 附试 验 ( E L I S A) 检验 乙型肝 炎血 清标 志物 的影 响 因素。 方法 用酶联 免疫吸 附试 验 法检 测 乙型 肝 炎血 清标 志物 ,
对 影 响检 测结 果的主 要 因素进 行控 制 ,并 进行 统 计学 分析 。结果 酶联 免疫吸 附试验 检验 乙型 肝 炎血 清标 志物 易受标 本、 试剂 、检测 操作 、
① 由于E L I S A 是根 据着色深浅 来判定 阴阳性 ,因此 ,严格按试 剂 盒操 作说 明书控 制温育时间 ,保证 足够的反应 时间可提高实验 灵敏 度
和结果 的准确性 。②温育温度应恒 定为3 7  ̄ C,用封条 封板 ,避免液 体 成分 蒸发或杂质进入 孔 内影响结果 ,同时避免频 繁开 启恒温箱 门影响
①洗 涤液应现 用现配 ,使 用新 鲜 、干净 、无菌的蒸馏水 或去离子
水 ,禁用 自来水 。②洗 板前应将孔 内液体含有 的纤维 带 白挑 出,同时
避免液体 溅出和孔与孔之 间的液体 溢出 ,以免造成 “ 花 板”现象[ 5 】 。
底物显色 ,造成 结果呈现 假 阳性 】 ,因此 ,在 采取过程 中应 防止标本 污染 ,低温保 存 ,必要 时分离血清单 独保存 以避 免溶血 。③塑料试管
进 行读数和结 果判读 ,对不符 合临床模 式或少见模式 的可疑 标本 ,要
可吸附抗原 物质 ,使样本 抗原含量 下降 ,造成结 果呈假 阴性 ,因此 , 采血 时尽量使 用一次性玻 璃试管或真 空采血管 。④血清标本 中残留纤 维蛋 白原 ,易 影响检测结果 ,因此 ,血液标 本应置于室 温下 1 - 2 h ,使
③洗板 时应确保洗涤液 充分 注满微 孑 L 反应板各孔 ,以保 证微孔反应 板
中图分 类号 :R 4 4 6
文 献标 识 码 :A
文章 编 号 :1 6 7 1 - 8 1 9 4( 2 0 1 3 )3 2 - 0 5 8 1 - 0 2
乙型病毒性 肝炎是 由乙型 肝炎病毒 ( H B V)感染 引起的一种传染 性疾病 ,目前我 国乙型肝炎病毒携带患者约有9 3 0 0 万 】 ;乙型肝 炎病毒 包膜表面 的 乙型肝 炎表 面抗原 ( H B s A g ),是病毒在肝 细胞 表达的产 物 ,成人暴露H B V 1 - 1 2 周 内血清 中开始 出现H B s A g ,因此 ,H B s A g 的 血清学检 测对 乙型 肝炎的早期 发现 、早期治疗 具有重要意 义 ;目前酶
圄匣
曩强同
2 0 1 3 年1 1 月第 1 1 卷 第3 2 期
・管理 ・ 教育 ・ 教学 ・ 5 8 1
E L I S A 法检验 乙型肝炎标志物 的影 响因素分析
高 梅 张 凌 峰 付 永航
( 1 解放 军4 5 8 医院检验科 ,广东 广州 5 1 0 6 0 2 ;2解放军4 5 8 医院输血科 ,广东 广州 5 1 0 6 0 2 )
彻底洗净 。④洗板后微 孔反应板应在 吸水纸上轻轻拍 干 ,甩干 时,应
保 证甩动速度要快 ,可避免洗 涤液甩人邻孔 。
2 . 4 显色
血 液凝固 ,然后 对血液进 行离心后再检 测 ,同时 可加大离心转速 ,延 长离心时 间,以促使血细胞 和纤维蛋 白完全沉淀 ,减少标本 中的非特
异性 物质 。 ⑤对 无法及 时检测 的标本 ,应妥善 保存 于4 ℃冰箱 内,并 准确标注待检者 姓名 、 日期等 ,做好 原始 记录 ;冰冻保存时切 忌反复 冻 融 ,以避免 引起假 阳性 ;从冰箱取 出的标本应预 温至室温 ,充分 融 化混 匀后再行检测 。
相关文档
最新文档