血、尿液淀粉酶AMS两点法测定-检验科生化室作业书
检验科sop-生化室作业指导书(SOP)
郾城微检综合门诊部生化检验作业指导书文件编号：YCWJZHMZB-2编制：刘桂菊审核：周风霞编辑日期：2017 年8月20日生效日期：2017 年8月30 日郾城微检综合门诊部检验科目录修订页8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验CS-6400生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验CS-6400生化分析仪操作规程.SOP文件检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法以TruCal U复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以μmol/L报告。
手工测定计算方法为：△Au直接胆红素(μmol/L) =--------×校准液浓度△As12. 参考值范围：≤6.8mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。
游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。
在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。
在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合,生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。
溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。
人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。
由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使60～70%的婴儿血液出现总胆红素增高。
常用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。
直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。
14. 操作性能14.1 线性范围：1.7～171mol/L14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法5，AU1000批内精密度小于4%或SD≤0.04，总精密度小于5%或SD≤0.07。
α-淀粉酶测定标准操作程序
α－淀粉酶测定标准操作程序1.摘要α－淀粉酶试剂盒适用于定量测定人血清、肝素化血浆、尿液样本中α－淀粉酶的活力。
2.适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中α－AMY的浓度。
3.职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定α－AMY浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司的α－AMY试剂测定采用CNPG3方法。
5.原理底物CNPG3在α－AMY催化下产生的 2－氯－4－硝基苯酚（CNP）引起波长405nm 处吸光度上升，上升的速率与α－淀粉酶的活力成正比。
5CNPG3−−→−AMY3CNP+2CNP2+3G3+2G6.仪器日立7600自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：MES缓冲液（PH6.0）、醋酸钙、硫氰酸钾、CNPG3。
表面活性剂、防腐剂7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为12个月。
试剂不可冰冻。
试剂打开后冷藏于分析中可保存28天。
7.4试剂准备：试剂为即用式。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。
8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。
8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》8.5室间质评：分别参加某地区室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。
淀粉酶测定SOP_AMY临床意义_检验科生化项目SOP
本法线性范围为0~650U/L,对于超过测定线性范围的结果，用酶稀释液对标本进行稀释，输入稀释因子后再重新检测。
8生物参考区间
血清：25~115U/L
尿液：59~401U/24小时
9临床意义
主要用于诊断急性胰腺炎。急性胰腺炎发病后8～12h，血清淀粉酶开始升高，12～24h达高峰，2d后逐步下降。尿淀粉酶12～24h也开始升高，但下降速度比较慢，所以胰腺炎后期，尿淀粉酶测定意义更大。其他急性疾病，如胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔、急性阑尾炎、急性腹膜炎及流行性腮腺炎、唾液腺化脓或腺管堵塞时淀粉酶也可升高，但很少高出500U/L。而对于各种肝脏疾病、肝炎、肝硬化、肝脓肿、肝癌及胆囊炎等，淀粉酶活性下降。
淀粉酶测定
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6.1质控品准备和储存
质控品为液体，可以直接使用。原包装质控品-10~-70℃可保存到瓶身有效期，未开启2~8℃可保存90d,开启后2~8℃可保存30d。
6.2质控水平和分析批长度
每24小至少进行一批，每批2个浓度水平。
6.3质控操作程序
与4.4标本检测步骤相同，只需要按F4:NEXT PRIORITY将ROUTINE修改成QC状态。
Product和批号Lot，以及最低值校准液在样品架上的位置Start at Position，最后把校准液各个水
平的值按照由低到高的顺序输到对应位置，按F4：ASSIGN CUPS指定样品杯，校准液按顺序排列在样品架上，按F7：LOAD/RUN→F4：RUN或“RUN”运行键运行校准程序。
6质量控制程序
3试剂和设备
3.1试剂
采用西门子医学诊断产品（上海）有限公司提供的试剂盒。
3.1.1试剂组成
淀粉酶含量测定
淀粉酶(AMS)测定试剂盒说明书(碘-淀粉比色法)一、 原理：淀粉酶能水解淀粉生成葡萄糖、麦芽糖及糊精，在底物浓度已知并且过量的情况下，家人碘液与未水解的淀粉结合生成蓝色复合物，根据蓝色的深浅可推算出水解的淀粉量，从而计算出AMS 的活力。
二、 试剂组成与配制：（100T ）1、0.4mg/ml 底物缓冲液：60ml ×1瓶，4℃冰箱保存6个月。
2、0.1mol/L 碘贮备液：7ml ×1瓶，4℃避光保存6个月。
0.01mol/L 碘应用液的配制：将碘贮备液：蒸馏水=1:9稀释，现用现配4℃避光保存。
三、 操作表： 测定管（u 管） 空白管（0管）底物缓冲液（ml ）37℃预温5分钟0.5 0.5 待测样本（ml ） 0.1混匀，37℃水浴，准确反应7.5分钟 碘应用液（ml ） 0.5 0.5蒸馏水（ml ）3.0 3.1 混匀，660nm 波长，1cm 光径，蒸馏水调零，测各管吸光度。
*注：不同样本批量测试前需要做预实验，确定最佳取样浓度，将 （空白OD-测定OD 控制在0.05～0.150之间） 四、 计算：1、 单位定义：100ml 血清（浆）中的AMS ，在37℃与底物作用30分钟，水解10mg 淀粉为1个单位。
2、公式：样本测试前稀释倍数空白管吸光度测定管吸光度空白管吸光度样本测试前稀释倍数分钟分钟空白管吸光度测定管吸光度空白管吸光度⨯⨯-=⨯⨯⨯⨯⨯-=801.01005.730105.04.0dl AMSu（此公式适用于测定血清中淀粉酶）血清淀粉酶的含量测定一、实验准备：1、实验器材：移液枪（100~1000ul、10~100ul、1000~5000ul、2~20ul）、5mlEP管、0.5mlEP管、比色皿、100ml烧杯、漩涡仪、水浴箱，分光光度计、计时器。
2、实验药品：NaCl、蒸馏水、0.4mg/ml底物缓冲液、0.1mol/L碘贮备液。
二、实验步骤：1、0.01mol/L碘应用液的配制：将碘贮备液：蒸馏水=1:9稀释，现用现配4℃避光保存。
血清α-淀粉酶(AMS)测定
血清α-淀粉酶（AMS）测定1. 实验原理AMS测定采用酶动态比色测定法。
所用底物为4,6-亚乙基-α,D-麦芽七糖苷-对硝基苯酚（EPS－G7）。
样品中α－淀粉酶分解底物EPS－G7，生成对硝基苯酚（PNP），在405nm处比色，吸光度的上升速率与样品中α-淀粉酶的活力成正比。
2 亚乙基－G5 ＋ 2 G2PNP5EPS-G7＋5H2O α-淀粉酶 2 亚乙基－G4 ＋ 2 G3PNP亚乙基－G3＋G4PNPα-葡萄糖苷酶2G2PNP＋2G3PNP＋G4PNP＋14H2O 5PNP＋14G （反应式中PNP：对硝基苯酚；G：葡萄糖）2. 标本采集与处理：2.1 病人准备：无特殊要求。
2.2 标本类型：血清、肝素或EDTA处理的血浆、尿液。
2.3 血清分离血清或血浆应在收集后尽快分离出来。
未酸化的尿液，随机或限时收取。
3. 标本存放：不要用嘴吸取标本或对标本吹气，以免唾液污染标本唾液中的淀粉酶使结果升高。
血清淀粉酶在20～25℃稳定一个星期，避免微生物降解作用；在2～8℃时稳定一个月。
尿液样品在2～8℃可稳定10天，在15～25℃可稳定2天。
对于尿液，酸性pH值可使淀粉酶的稳定性减弱，因此，储存前pH值应调至大约7.0。
4. 标本运输：常温条件下运输5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血的不能做测定。
6. 实验材料：6.1 AMS测定试剂盒（试剂1 6×64 ml ＋试剂2 6×16 ml）6.1.1 试剂组成试剂1：GOOD’S 缓冲液pH 7.1 100mmol/L氯化钠50mmol/L氯化镁10mmol/Lα-葡萄糖苷酶≥23KU/L试剂2：EPS－G73mmol/L6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.3 试剂稳定性与贮存：原试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂有效期为24个月。
6.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。
6.1.5注意事项：唾液和皮肤中含有α-淀粉酶，应避免用嘴吸取试剂，避免皮肤接触试剂。
检验科生化SOP文件.
1。
目的规范生化组组长的职责范围，保证本专业组的各项工作按照既定的质量体系正常运行。
2. 范围适用于生化专业组。
3 .职责3．1 生化组组长为本专业实验室的学科带头人，在科主任领导下，负责本专业的全面质量管理,科研、教学和部分行政管理工作。
3．2 负责本组人员的工作安排、业务学习、继续教育和技术考核等工作，规划及落实本专业的发展计划,负责组织编写本组的标准操作规程(SOP)，经常检查执行情况。
3．3 负责制定本专业的室内质量控制方案，每日检查各检验项目的室内质控状态，分析质控数据，对失控项目提出纠正办法，填写月质控报告。
3．4 积极参加各临床检验中心组织的室间质量评价活动，审查签发室间质评回报表，分析质评成绩,提出改进措施，填写室间质评总结报告。
3．5 亲自参加检验工作并掌握特殊检验技术，解决本专业的复杂疑难问题。
3．6 经常深入临床科室征询对检验质量的意见,介绍新的检验项目及临床意义，有条件时参加临床疑难病例讨论，主动配合临床医疗工作。
3．7 结合临床医疗，制定本专业的科研计划，并不断引进国内外的新成果、新技术、新方法，开展新项目，提高本专业的技术水平。
3．8 检查督促本组检验人员贯彻执行各项规章制度的情况，进行考勤考绩、人员安排.3．9 负责本专业仪器设备和各种设施的管理;负责制定本专业试剂和实验用品的请购计划，负责本专业范围内试剂和低耗品的保管.3．10 专业组长外出前，应向科主任提出申请,临时指定人员负责代理。
1. 目的明确生化组岗位职责，加强岗位责任心，提高工作效率，保证本专业组的各项工作按照既定的质量体系正常运行，及时、准确地为客户报告检验结果.2。
范围适用于生化组。
3。
职责3．1 岗位A：负责奥林巴斯AU640、400 仪的操作、日常维护和保养，负责纯水箱的日常使用和维护，按时做好室内质控，记录室内质控结果，记录生化组室内温度和湿度以及冰箱温度等.3．2 岗位B：协助岗位A 的工作,负责雷度ABL-5 型血气分析仪、电解质分析仪的操作、日常维护和保养，负责检验报告单的审核和签发，做好室内质控和室间质评等。
生化项目SOP
沭阳县仁慈医院检验科生化室作业指导书文件编号：SYXRCYYLAB-SH –SOP第A版编制：路珊珊钱丽萍审核：李萍批准：侯波生效日期：2012年10月01日沭阳县仁慈医院检验科修订页血清总胆红素(T-BIL)测定一、目的保证总胆红素测定的结果准确、可靠。
二、修改程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任）。
三、适用范围钒酸盐氧化法测定总胆红素。
四、试剂来源本标准操作程序适用于上海执诚生物科技股份有限公司生产的总胆红素测定试剂盒。
五、溯源全国临床检验操作规程（第二版）。
六、原理此方法基于样品中的总胆红素在pH3.0 环境中，在有机复合物氧化剂的作用下，可以被氧化成胆绿素，而胆红素特有的黄色也随即消失，在450nm 处测定吸光度的变化，即可计算出样品中总胆红素的浓度。
七、试剂R1：硫磺酸缓冲液（pH2.9） 0.1mol/L表面活性剂R2：磷酸缓冲液（pH7.0） 10mmol/L有机钒酸盐 4mmol/L 不同批号试剂盒中各组份不能互换。
本试剂对光敏感，2～8℃密闭避光保存可以稳定18个月（勿冷冻）；首次开启试剂后，避光保存于2～8℃防污染环境中，可继续稳定至效期。
校准液： Randox 公司提供的系列校准品。
八、标本采血清总胆红素(T-BIL)测定血清、血浆。
样本2～8℃保存可以存放约3天，-20℃保存可以存放3个月，但只能冻融一次。
九、操作步骤1、标本编号，分离血清，依顺序置样品架上。
2、按标本编号在全自动化生化仪器上输入标本的基本信息和测定要求，进行测定。
3、仪器校准：将校准液置试管架上，输入校准液浓度，然后进行测定（测定参数与下同），其吸光度贮存在电脑中，浓度值测定符合要求即可应用。
一般每3～6个月校准一次，若更换不同批号的试剂、质控超标或仪器维修处理后应进行校准。
4、测定参数：血清量 7μl试剂Ⅰ 200μl试剂Ⅱ 50μl主波长 444nm次波长 548nm反应类型终点法；负反应测定时间 10分钟温度 37℃报告单位μmol/L5、结果计算：ΔA 样品样本中总胆红素的含量 = ------- ×标准液浓度ΔA 标准单位换算：mg/dl×17.1=μmol/L十、正常参考值5.1-20μmol/L血清总胆红素(T-BIL)测定十一、室内质控质控方法：每天测定样品前做一组质控，在标本中间插一组质控，最后再做一组质控品，共三组。
两种淀粉酶测定方法的比较
中国 医疗 前沿 C hina Healthcare Innovation
May, 2008 Vol , 3 No.10
两种淀粉酶测定方法的比较
田 麦 1 佟 凤芝 2 刘 明开 2 刘希 龙 2 ( 1 瓦房店市中医院检验科, 辽宁 大连 116300; 2 大连大学附属新华医院检验科, 辽宁 大连 116021)
氯化钠
50mmol/L
氯化镁
10mmol/L
α- 葡萄糖苷酶
≥23KU/L
叠氮钠
0.09%
R2:
PNPG7 (P- 硝 基苯 D- 麦芽 庚烷)
3mmol/L
1.2.2 GalG2CNP 法测定原理试剂组成
α- AMY
GalG2CNP + H2O - - - - - - - - - - - - - - - - - - GalG2 + CNP CNP 的摩尔消光系数为 17.17, 理论 F 值为 2388
组成
浓度
MES- 缓冲液
PH=6.0 100mmol/L
氯化 钙 氯化 镁
50mmol/L 10mmol/L
曲通 X- 100
0. 1%
叠氮 钠
0.09%
GalG2CNP 2 结果
3mmol/L
2.1 两 种淀 粉酶测 定方 法参 考值上 限: 参考人 群血 清测 得
[摘要] 目的 了解两种淀粉酶测定方法的临床应用价值 , 在确定其参考值上限的基础上, 同时用两种方法测定临床已确诊为急性胰
腺炎患者血、尿淀粉酶含量。方法 1、EPS 法; 2、GalG2CNP 法。结果 两种淀粉酶测定方法参考值上限: 参考人群血清测得 AMS 值(x±2s)分 别为 EPS 法( 60.7±36.0) U/ L, GalG2CNP 法( 58.0±31.2) U/ L。尿液中 AMS 值单侧 95%上限分别为: 300.0U/ L 和 180.0U/ L。18 例已经确
大鼠淀粉酶(AMS)说明书
大鼠淀粉酶(AMS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书齐一生物科技（上海）有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中淀粉酶(AMS)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠淀粉酶(AMS)水平。
用纯化的大鼠淀粉酶(AMS)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入淀粉酶(AMS)，再与HRP标记的淀粉酶(AMS)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的淀粉酶(AMS)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠淀粉酶(AMS)浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品：180μmol/L 0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
血尿液淀粉酶AMS两点法测定
血、尿液淀粉酶（AMS）两点法测定1. 实验原理Vitros AMS试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。
分布层含有反应所需的染色淀粉底物（与支链淀粉共价化合），样品中的淀粉酶催化该染色淀粉水解成更小的有色糖。
随后这些有色糖进入下面的试剂层。
分别在孵育 2.3分钟和5分钟时用反射仪测定试剂层中有色糖的反射强度，两次读数间的差值与样品中的淀粉酶活性成正比。
测定方式：两点法波长：540nm测试时间和温度：37℃约5分钟反应过程：淀粉酶染色支链淀粉——————→有色糖2. 标本：2.1 病人准备：无特殊。
2.2 样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3 标本采集与处理：2.3.1 血清和血浆样品血浆中淀粉酶活性约比血清中高20U/L。
不能使用钙螯合物作抗凝剂，如草酸，枸橼酸和EDTA。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2 尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：含有冰醋酸，浓盐酸或者防腐剂中有乙二羟化四甲铵和氧化汞的样品不能测淀粉酶。
尿液样品在测试前要冷藏在2～8℃。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3. 标本的存放：血清、血浆、尿液室温下最多7天；4～8℃冷藏最多1个月；样品不可冷冻保存。
4. 标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5. 标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6. 试验材料：6.1 测试AMS所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit3；Vitros特制质控液；Vitros 7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.1 试剂组成：干片成分：反应成份是染色支链淀粉。
其它成份有染色剂，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，稳定剂和媒染剂。
AX 4030尿液化学分析仪作业指导书
AX 4030 尿液化学分析仪作业指导书1目的规范实验室工作人员操作程序，保证AX 4030 尿液化学分析仪的正常使用，确保实验过程及结果的准确性与可靠性。
有效检测尿液红细胞（隐血）、白细胞、蛋白质、葡萄糖、酮体、亚硝酸盐、比重等指标，对泌尿系统相关疾病的诊断、治疗以及疗效观察提供参考数据。
2适用范围适用于本实验室使用AX 4030 尿液化学分析仪进行尿液分析检测。
3职责3.1本实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP。
3.2如需改动SOP，需先由血液室组长提出，再报经科主任批准。
4注意事项4.1 试纸条若浸在尿中的时间过短，则不能充分的显色；若时间过长，尿中试纸条会因震动导致试剂从中流出，得不到正确的检测结果。
4.2请严格遵守从试纸条开始浸入尿液到判断结果的时间。
4.3判断的环境标准基本上为温度20~25°C、湿度40~60%。
4.4检测场所的照明种类不同（荧光灯、白炽灯、自然光等），判断结果会有差异。
4.5 若试纸条的显色比比色表上的阴性（-）、正常色淡时，请判定为阴性（-）或正常。
5规范操作程序5.1设备参数5.1.1 分析参数：GLU (葡萄糖), PRO (蛋白质), BIL (胆红素), URO (尿胆原), PH (pH), BLD (隐血),KET (酮体), NIT (亚硝酸盐), LEU (白细胞), CRE (肌酐),P/C (蛋白/肌酐比), S.G. (比重), 浊度, 颜色5.1.2 方法学名称：GLU (葡萄糖)：葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法PRO (蛋白质)：PH指示剂蛋白质误差法BIL (胆红素)：偶氮反应法URO (尿胆原)：醛反应、重氮反应法PH (pH)：酸碱指示剂法BLD (隐血)：血红蛋白亚铁血红素类过氧化物酶法KET (酮体)：亚硝基铁氰化钠法NIT (亚硝酸盐)：亚硝酸盐还原法LEU (白细胞)：酯酶法CRE (肌酐)：配位子置换反应法S.G. (比重)：多聚电解质离子解离法操作程序5.2操作程序5.2.1标本准备5.2.1.1 参照《第三版临床检验操作规则》，尿常规检测小便留取方式可以采用清晨第一次尿液，随机尿液，必要时需留取清晨二次尿液，留于洁净容器中，二小时内完成检测。
淀粉酶测定标准操作规程
淀粉酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清淀粉酶测定(缩写AMY)，尿液淀粉酶测定；组合项目申请：血生化胰腺炎项目测定。
临床医生根据需要提出检验申请。
2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。
或采用含分离胶的真空采血管。
尿液收集5-10ml放于干燥试管中送检。
2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。
2.1.3急诊标本采集后，在检验申请单上填写标本采集时间。
2.1.4标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。
专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。
2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。
2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。
2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。
2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。
2.2标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。
2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定12h，普通冰箱中（2～8℃）稳定5天。
为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。
2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。
2.3标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，24h不饮酒和12h以上禁食空腹状态。
2.3.2注意有无应用影响测试项目的药物。
2.3.3不建议使用抗凝的血液标本，常用的抗凝剂对AMY有抑制作用。
3 方法原理以Gal-G2-α-CNP为底物的酶连续监测法。
淀粉酶催化Gal-G2-α-CNP成CNP，CNP在410nm处有特异吸收峰，其生成的速度与血清中AMY的活性成正比。
在410nm处连续监测CNP的生成速率，推算出AMY活性。
4 试剂及其他用品4.1试剂盒名称：淀粉酶连续监测法测定试剂盒，由上海申能生化试剂厂出品。
α-淀粉酶测定的操作规程
α-淀粉酶测定的操作规程1、用途：测定人血清中或尿液中α-淀粉酶的酶活浓度。
2、原理：α-淀粉酶与α-葡萄糖苷酶偶联，水解特异性底物4,6-亚乙基-4-硝基苯酚-α-庚糖，产生对-硝基苯酚，对-硝基苯酚生成速率与α-淀粉酶的活性成正比，在405nm波长下用速率法检测。
3、适用仪器：奥林巴斯AU480型全自动生化分析仪.4、样本要求：4.1、样本种类：新鲜无溶血血清或尿液。
4.2、样本采集：常规静脉采血约2ml，不抗凝。
置普通管中，或采用含有分离胶的真空采血管。
尿液保存时应将pH值调节至7.0。
4.3、样本干扰：对反映吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。
4.4、样本保存：血清样本2℃—8℃可稳定7天，-20℃可保存一个月，忌反复冻融。
尿液样本2℃—8℃可稳定10天.5、检测方法：5.1、试剂的准备：试剂开瓶即可使用。
5.2、检测步骤：2、动生化分析仪操作步骤：参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准：用K因素进行试剂空白校准，也可使用Diazyme公司校准品进行校准操作，当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时，须重新校准。
5.4、结果计算：全自动生化分析仪会自动给出检测结果。
3、6、参考范围：(各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。
）7、注意事项：7.1、试剂具有一定的酸碱性，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。
7.2、使用后的器具应按照规定处理，扔入指定的垃圾箱内，不可随处乱扔，防止环境污染和二次使用。
7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品，或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂，不可使用。
7.4、试剂只用于体外诊断。
8、参考文献：中华人民共和国卫生部医政司，全国临床检验操作规程（第三版），东南大学出版社，2006。
王惠萱、李雪梅、王冈，临床检验操作手册，云南科技出版社，2008.陆永绥、李清华、张伟民主编，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江大学出版社，2006.。
11.淀粉酶测定
7、试剂R2应严格避光保存。
生产厂家
四川迈克生物科技股份有限公司
样本要求
1、样本为不溶血的血清、血浆（肝素抗凝，0.1mg肝素可抗凝1.0ml血液）或尿液（pH值应调至7.0）。
2、样本应在低温条件下运输保存，血清或血浆中的淀粉酶2℃~8℃可稳定30天，室温可稳定7天。
操作步骤
尿液标本用蒸馏水稀释20倍，结果乘以20；R1临用前预温至37℃。
测定（U）
空白（B）
注意事项
1、试剂R1变混浊或出现絮状沉淀、空白吸光度值＜0.450，将不能使用，应弃去。
2、加入显色剂及蒸馏水后，应立即比色，否则可致结果偏高。
3、草酸盐、柠檬酸钠及氟化钠等抗凝剂对淀粉酶活性有不同程度的抑制作用，应避免使用。
4、试剂使用后立即盖紧瓶盖，避免污染。
5、唾液中含有高浓度淀粉酶，试剂使用过程中应避免带入。
AB－AU
＝×800
AB
参考范围
血清/血浆：60~180苏氏单位
尿液：100~1200苏氏单位
单位定义：100ml血清中淀粉酶在37℃，15分钟水解5mg淀粉为一个苏氏单位。
方法ห้องสมุดไป่ตู้限
样本中淀粉酶活力超过400苏氏单位或测定管吸光度小于空白管吸光度一半时，应将样本稀释后再进行测定，测定结果乘以稀释倍数。
麻将县人民医院检验科11淀粉酶测定试剂盒操作图表碘淀粉比色法预期用途本试剂用于测定血清血浆尿液中淀粉酶的活性适用仪器适用于具有波长为660nm的半自动生化分析仪或手工操作
α-淀粉酶测定试剂盒操作图表
（碘-淀粉比色法）
预期用途
本试剂用于测定血清、血浆、尿液中淀粉酶的活性
06化验室SOP文件1
TLSHZHYY／SHBUN－A1－2005 SOP文件A1血清尿素氮（BVN）测定A1.1 第一面页首内容血清尿素氮（BUN）测定（两点法）通辽市中医院操作规程文件号CG第二版共4 页2005年8月1 日起实施本规程每2年复审一次复审日期年月日复审复审人：（签名）规程编写者：周彬哲审批者：批准日期：年月日医务科保管者：李玉检验科主任：王彦夫生化室：A1.2测定原理：尿酸＋H2O脲酶2NH4＋＋CO32NH4＋＋α－酮戊＝酸＋NADH GLDH谷氨酸＋NAD＋H2OA1.3 标本的采集与处理A1.3.1受检查者的准备：采血前半小时内不作剧烈活动。
A1.3.2坐位、静脉取血，使用止血带时间不超过1minA1.3.3采用血清检测A1.3.4标本处理，血标本应尽快送实验室。
室温下放置30min离血清，置清洁试管待检。
4℃冰箱内保存可稳定3天。
A1.4试剂A1.4.1酶试剂：本科使用北京柏定试剂盒，临用前用R1与R2复溶即可使用。
A1.4.2试剂与标准液的稳定性，未开瓶的试剂于4℃保存，可稳定至有效期。
复溶后的试剂在4℃可稳定14天。
A1.5仪器A1.5.1美国厂家生产RT1904C半自动生化分析仪A1.5.2标准程序：严格按照仪器使用操作规程中的校准程序进行校准。
A1.6操作：A1.6.1试剂准备：取RⅡ10ml复溶1瓶RⅠ，溶解10分钟混匀后即为工作液，工作液预先保温至测试温度。
A1.6.2操作步骤：取预先保温至测试温度的工作液1ml，加入血清10ml，30秒后开始上机检测。
A1.7计算：由生化分析仪自行计算A1.8控制品：中生北控21项中值质控血清，每日质控一次，并严格按质控规则对超过允许线的值，查找原因重新测定直至在控为止，并记录其详细过程。
A1.9参考范围：2.14－7.85mmol/LA1.10操作性能A1.10.1准确度：以标准定值血清为校准品，测定结果与其基本一致。
A1.10.2可报告范围：线性范围：0－100mg/dl(35.7mmol/L)A1.11对超出可报告范围的结果处理：如果样品中BUN浓度超出线性范围，则用生理盐水稀释样品重测，结果乘以稀释倍数。
淀粉酶(AMY)测定标准操作程序SOP文件
S.VOLUME(NORMAL) [ 7 ]
SD LIMIT [ 0.1 ]
S.VOLUME(DECREASE) [ 2 ]
SENSITIVITY LIMIT(LOW) [ -99999 ]
S.VOLUME(INCREASE) [ 14 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) [ 99999 ]
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-07
淀粉酶（AMY）测定
版序：ABCD
页码：第4页，共4页
AMY参数设置表
TEST NAME [ AMYL ]
R.VOLUME(R4) [ 0 ]
TEST CORD [ 570 ]
ABSORBANCE LIMIT [ 20000/DECREASE ]
-淀粉酶分为两种：即胰腺型（P-AMY）和唾液型（S-AMY），而胰腺型淀粉酶的检测对于诊断胰腺炎更有绝对意义，具有器官特异性。唾液型可以有许多片断产生，可以在唾液、泪液、汗液、母乳、羊水、肺、睾丸及输卵管中存在。胰腺型淀粉酶的检测适用于急性胰腺炎及慢性胰腺炎急性发作时的诊断以及监测治疗。因其灵敏度及特异性均较高，胰腺型淀粉酶的诊断值可以与酯酶相似。在急性胰腺炎的诊断中，检测胰腺淀粉酶比总淀粉酶的灵敏度高38％。
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCDห้องสมุดไป่ตู้SOP-04-07
淀粉酶（AMY）测定
版序：ABCD
页码：第2页，共4页
4.3质控物
来源：Precinorm (罗氏正常值质控)
Precipath (罗氏病理值质控)
其它适合的质控品
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血、尿液淀粉酶AMS两点法测定1.实验原理VitrosAMS试剂是一种干燥，多涂层的，在聚合物支撑基片上涂有分析成份的化学干片。
将一滴10ul的患者样品滴于干片上，样品就被分布层均匀地分布并渗透到下面的试剂层。
分布层含有反应所需的染色淀粉底物（与支链淀粉共价化合），样品中的淀粉酶催化该染色淀粉水解成更小的有色糖。
随后这些有色糖进入下面的试剂层。
分别在孵育2.3分钟和5分钟时用反射仪测定试剂层中有色糖的反射强度，两次读数间的差值与样品中的淀粉酶活性成正比。
测定方式：两点法波长：540nm测试时间和温度：37℃约5分钟反应过程：淀粉酶染色支链淀粉——————→有色糖2.标本：2.1病人准备：无特殊。
2.2样品类型：血清；肝素锂/钠抗凝血浆。
定时收集的，稀释后的尿样。
2.3标本采集与处理：2.3.1血清和血浆样品血浆中淀粉酶活性约比血清中高20U/L。
不能使用钙螯合物作抗凝剂，如草酸，枸橼酸和EDTA。
样品采集后4小时内要离心标本，吸出血清。
处理样品时要将其当成生物污染品。
2.3.2尿液样品定时或随时采集的尿液，特别要注意的是：含有冰醋酸，浓盐酸或者防腐剂中有乙二羟化四甲铵和氧化汞的样品不能测淀粉酶。
尿液样品在测试前要冷藏在2～8℃。
处理样品时要将其当成生物污染品。
3.标本的存放：血清、血浆、尿液室温下最多7天；4～8℃冷藏最多1个月；样品不可冷冻保存。
4.标本的运输：样品要放在带盖的容器内以防污染和蒸发。
5.标本拒收的标准：污染、抗凝剂、防腐剂不符合要求，标本放置时间过长。
6.试验材料：6.1测试AMS所需的物品包括：Vitros化学定标物Kit3；Vitros特制质控液；Vitros7%BSA稀释液。
强生厂家提供原装进口，试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.1试剂组成：干片成分：反应成份是染色支链淀粉。
其它成份有染色剂，粘合剂，缓冲剂，表面活性剂，稳定剂和媒染剂。
干片标记：试剂盒外包装上标明了测试项目名称，试剂标签代码，有效期限和储藏温度。
6.1.2试剂准备从冰箱中取出干片盒，在将干片盒打开封装并装入仪器内的干片储藏器之前必须使其达到室温状态18～28℃。
因此从冰箱中取出的试剂盒至少要在室温下要放置60分钟，而冷藏的试剂盒至少要在室温下放置30分钟。
去除内包装后立即将干片盒放入仪器的储藏器中。
说明：在试剂盒达到室温后的24小时之内必须将其装入仪器中。
6.1.3试剂稳定性与贮存未开封的干片盒：存储在-18℃或低于该范围。
在机内干片储藏器中的干片盒：在仪器上放置时间不能超过2周，否则要更换新试剂。
当仪器关闭时间不超过2个小时时，可将干片盒留在储藏器中。
出现以下情形要做质控检测：仪器关闭时间超过2小时；再次装载从仪器储藏器中取出的干片盒。
如果储藏正确，VitrosAMS干片可保质到包装盒上标明的有效期限。
参见VITROS250干化学分析仪试剂稳定性及贮存.SOP文件。
6.1.4变质指示：超过有效期的试剂干片不能使用。
6.1.5注意事项：为避免干片盒打开以前其内包装受损，不能摔打干片盒；不要让尖利物刺入内包装。
6.2校准品：用Vitros化学定标物Kit3。
血清、血浆、尿液都用相同的定标液，不过各自的SAVs值不同。
有关标准液的配制，使用及保存的配制，保存和稳定的详情，可参阅VITROS250干化学分析仪校准品和质控品.SOP文件。
6.3质控品：使用Vitros特制的质控物品；若使用其它的一些质控物品，当与别的AMS测试方法比较时就会出现差异，如：用人血清/血浆混合物分离制成的质控物品；含有高浓度防腐剂，稳定剂和其它化学添加剂的质控物品；猪或牛血清质控品的淀粉酶值会偏低，还会因测试方法不同而变化；酶的活性可能会由于酶源，稀释温度和复溶活化时间不同而发生变化;乙烯乙二醇作稳定剂质控物品不能使用。
有关质控液的配制，保存和稳定的详情，可参阅VITROS250干化学分析仪校准品和质控品.SOP文件。
7.仪器美国强生厂家VITROS250全自动干式生化分析仪。
具体测试程序请参阅操作手册的介绍。
8.操作步骤：将试剂复温后直接放入仪器，样品编程，仪器5分后自动打印结果。
具体测试程序请参阅VITROS250操作手册.SOP。
具体定标程序：参阅操作手册的相关章节内容。
何时进行定标：——在维护和保养时更换了仪器的重要部件。
——质控结果持续超出线性范围内时，详情参阅操作手册。
——管理条例上指定的时间，在美国，CLIA 要求至少每6个月定标一次。
9.检验结果的判断与分析10.质量控制：操作建议：将质控物质当成生物污染品来处理；将质控液与患者样品同时进行测试；每天至少做一次质控以检测仪器运行状况；选择质控浓度来检查与临床的相关性；其它详情参阅操作手册质控章节的有关内容。
有关质控操作的常规性条例可参照国际质控检测（IQCT）的内容。
在每一批标本中都应把质控血清作为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11.计算方法：以用Vitros化学定标物校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。
12.参考值范围国际单位(U/L)血清30-110血浆比血清高约20尿液(随机尿样)32-6411岁以下儿童比成人低。
此参考范围是测试98位健康成人，然后取靶值附近95%的结果计算所得。
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13.临床意义：淀粉酶是淀粉分解和消化酶，由胰腺和唾液腺产生。
急性胰腺炎，胰腺溃疡或假（性）囊肿，胰腺创伤，淀粉样变，胆总管阻塞和胸部手术后，会使淀粉酶增加。
流行性腮腺炎和肾功能不全也可能导致淀粉酶活性升高。
14.操作性能14.1线性范围：血清/尿液：30-1200U/L。
14.2精密度：在Vitros250生化仪上用质控液来测精密度。
结果反映了该方法的精密度。
当仪器维护，周围环境，干片处理和保存，质控液的复溶以及样品处理等方面发生变化都会影响结果的重复性。
*日间精密度是将2至3份相同的样品在一天中运行两次，然后对测试结果进行统计计算。
**室间精密度是用同一个批号的干片每周定标一次，然后对测试结果进行统计计算。
14.3方法学比较：用Vitros700仪器和对硝基苯酚法参考方法分别测试相同血清样品，对比结果显示Vitros方法的准确度良好。
用Vitros250仪器与Vitros700仪器测试相同的血清/尿液样品，对比结果显示Vitros250方法的准确度良好，血清：Y=0.99X+5.4（r=1.0，N=85，检测范围20-1039U/L）；尿液：Y=1.01X+7.6（r=0.998，N=39，检测范围25-1103U/L）。
14.4灵敏度：本试剂的检测下限为血清、尿液均为30U/L。
14.5特异性：经测试，以下物质对VitrosAMS干片法均无干扰（偏差<9U/L）。
阿司匹林30mg/Dl、维生素C3mg/d、胆红素20mg/dL、胆固醇500mg/dL、葡聚糖1000mg/dL、乙醇300mg/dL、5-氟尿嘧啶125mg/L等等。
14.6病人结果可报告范围：血清、尿液:：30-1200U/L。
15.超出范围结果处理：本法线性上限为血清、尿液为1200U/L。
如果样品中AMS浓度超出系统的测试线性范围，请按下列步骤进行稀释：血清和血浆：如果是脂血标本或淀粉酶的活性超出系统的测试线性范围，可按下列步骤进行稀释：淀粉酶活性低的脂血标本用Vitros 特制稀释液或生理盐水配制的2%牛血清白蛋白（PH7.4）进行稀释。
说明：用Vitros特制稀释液时先按1：1的比例稀释样品，结果乘以2。
重新测试。
必要时，校正稀释液的淀粉酶活性。
测试结果乘以稀释倍数就得到原始样品中淀粉酶的活性。
尿液：如果样品中淀粉酶的活性超出系统的线性范围，请按下列步骤进行稀释：用生理盐水稀释样品。
重新测试。
说明：稀释液的量要尽可能少。
由于稀释样品会产生一个正偏差，因此结果只是近似值。
16.病危报警值的处理当血清AMS>300U/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。
17.方法局限性17.1本法线性上限血清、尿液为1200U/L。
血清和血浆：如果是脂血标本或淀粉酶的活性超出系统的测试线性范围，可按下列步骤进行稀释：淀粉酶活性低的脂血标本用Vitros特制稀释液或生理盐水配制的2%牛血清白蛋白（PH7.4）进行稀释。
说明：用Vitros特制稀释液时先按1：1的比例稀释样品，结果乘以2。
重新测试。
17.2干扰物质：不确定。
有些药物和患者的自身状况也会影响AMS 的测试值。
18.补救措施：仪器出了故障可联系仪器厂家，进行紧急修理，如一时不能修好，用OLYMPUSAU1000生化分析仪测定病人标本。
19.参考文献强生厂家提供的方法学手册20.其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按检验科废物处理.SOP文件处理。