不同激素对红豆杉愈伤组织诱导及增殖的影响
红豆杉属植物组织与细胞培养影响因素研究进展_李健
第33卷 第10期西北农林科技大学学报(自然科学版)V o l.33N o.10 2005年10月Jour.o f No rt hw est Sci-T ech U niv.of A g ri.and F or.(N at.Sci.Ed.)Oct.2005红豆杉属植物组织与细胞培养影响因素研究进展X李 健,宋晓平,陈树林(西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100) [摘 要] 红豆杉中的紫杉醇具有抗肿瘤活性,直接从植物中提取紫杉醇的传统生产方法,不仅产量低,而且会对红豆杉野生资源造成严重破坏,而组织与细胞培养是一种极具潜力的紫杉醇生产技术。
文章对近年来国内外红豆杉属植物组织与细胞培养工作中的培养基、培养条件、外植体选择、诱导子以及褐变等影响因素的研究情况进行了全面系统地综述。
[关键词] 红豆杉;培养基;培养条件;外植体;诱导子;褐变现象[中图分类号] S791.490.4 [文献标识码] A[文章编号] 1671-9387(2005)10-0042-05 紫杉醇(taxo l)是20世纪70年代由Wani从短叶红豆杉(T ax us brev if olia)树皮中提取出来的具有独特抗癌作用的天然产物。
自1992-12美国食品与药品管理局(FDA)批准将其用于治疗卵巢癌以来,紫杉醇已在多个国家获准上市,中国医学科学院药物研究所和海口制药厂已于1995-10获得其新药证书。
但红豆杉属植物的野生资源十分有限,且生长缓慢,体内紫杉醇含量亦很低,所以紫杉醇的药源问题一直颇受关注,而且至今仍未得到很好的解决。
红豆杉属植物组织与细胞培养技术,是一种很有潜力的紫杉醇生产方法。
本文对国内外关于红豆杉属植物组织与细胞培养方面的研究作以综述。
1 培养基的种类与组成成分1.1 培养基的种类 刘佳佳等[1]从红豆杉愈伤组织的诱导、继代保存、生长和紫杉醇的生产等4个不同方面对培养基进行了筛选,结果表明,在红豆杉愈伤组织的诱导方面,M S培养基优于B5,N6,SHN(Schenk&Hilde-br andt New)等培养基,以当年生嫩茎为外植体,愈伤组织诱导率可达100%;继代培养时以B5培养基为好;愈伤组织的生长以B5和SHN培养基为好;而紫杉醇的生产以M S培养基为好。
小陇山林区红豆杉愈伤组织诱导试验初探
2016年第6期现代园艺红豆杉()为红豆杉属常绿乔木或灌木,小枝不规则互生,基部有多数或少数宿存的芽鳞,稀全部脱落,冬芽芽鳞覆瓦状排列,背部纵脊明显或不明显。
叶条形,螺旋状着生,基部扭转排成二列,直或镰状,下延生长,上面中脉隆起,下面有2条淡灰色、灰绿色或淡黄色的气孔带,叶内无树脂道。
雌雄异株,球花单生叶腋;雄球花圆球形,有梗,基部具覆瓦状排列的苞片,雄蕊6~14枚,盾状,花药4~9,辐射排列;雌球花几无梗,基部有多数覆瓦状排列的苞片,上端2~3对苞片交叉对生,胚珠直立,单生于总花轴上部侧生短轴之顶端的苞腋,基部托以圆盘状的珠托,受精后珠托发育成肉质、杯状、红色的假种皮。
种子坚果状,当年成熟,生于杯状肉质的假种皮中,稀生于近膜质盘状的种托(即未发育成肉质假种皮的珠托)之上,种脐明显,成熟时肉质假种皮红色,有短梗或几无梗,子叶2枚,发芽时出土。
红豆杉属约11种,分布于北半球,我国有4种1变种。
小陇山林区位于亚热带向暖温带的过渡地带,自然条件优越、气候湿润、物种丰富,区内有许多珍稀濒危树种,如国内分布较少的红豆杉()、连香树()、金钱槭()、庙台槭()等。
红豆杉一般通过种子播种、组织培养、扦插繁殖,组织培养是利用植物细胞的全能性,用红豆杉植株的嫩茎、针叶、树皮、形成层、假种皮、胚等做为外植体进行培养研究。
本试验以红豆杉的成熟种子、顶芽和茎段为材料,诱导愈伤组织的形成及萌发,为进一步研究快速繁殖红豆杉提供理论基础。
1材料与方法1.1材料以小陇山林区红豆杉树种的1年生枝萌发的嫩芽及种子作为外植体。
1.2方法1.2.1诱导培养基。
分别选用1/4MS 、1/2MS 、MS 作为诱导培养基及继代生长培养基。
培养基添加激素种类为NAA (0.2~2.0)、GA (1.0)、KT (0.1~1.0),附加0.1%的活性炭,0.7%~0.8%琼脂和3%的蔗糖,培养基pH 值为5.8。
1.2.2接种。
对带芽茎段和顶芽,先用洗涤剂清洗,自来水流水冲洗1~2h 。
不同浓度赤霉素处理对红豆杉种子萌发的影响
江、 安徽 相邻 , 位 于 E1 1 6 。 5 7 ~ 1 1 7 。 4 2 , N 2 8 。 4 4 ~ 2 9 。 5 6
2 结果与分析
2 . 1 不 同赤霉素溶液浓度 对种子开裂 比率 的影
响
的范围 , 属亚热带季风气候 , 雨量充沛 , 温和湿润 , 东
南、 西 南 部 多 丘 陵 和平 原 , 年平均气温 1 7℃ , 年均 日 照 时数 2 0 0 9 . 8 h , 年平 均 降雨量 1 7 6 3 . 5 m m, 最高 海拔
在沙 藏过程 中 ,每一个 月对 红豆 杉种 子 的开裂情
江西林业科技
2 0 1 3 年第 1 期
不 同浓度赤霉素处理对红豆杉种 子萌发 的影响
张 志强 , 占刽 峰 , 华 波
( 景德 镇市林业科学研究所 , 江西景德镇 3 3 3 0 0 0 )
摘
要: 采用不同浓度的赤霉素浸泡红豆杉( T a x u s ma i r e i ) 种子 , 研 究 了不同处理对红豆杉种子开裂及 出苗率的影响 。
箱低 温处理 后 的红豆 杉种子 ,可 以更好 提高 红 豆杉种
子的开裂比率 , 促进红豆杉种子的萌发。其中 9 5 m g / L
2 4 ・
浓度下 , 种子开裂 比率 为 7 2 . 9 3 %, 与其他 3 个浓度处
为: 4 7 . 7 1 %、 4 9 . 5 7 %、 4 3 . 9 %, 这 3个浓 度处 理 后 的结 果
4 5 . 6 a
9 5 7 " 5 8 ~ 鲫 9 8 8 9 9 I 二 2 1 1 叭
激素对2种红豆杉离体胚培养的影响
眠期 , 自然状态下种子须几年才能萌发 , 在 且种子萌 箱保存 。 发率、 出苗率很低 , 是造林 、 引种 、 繁殖和育种的重要 1 培养基 . 2 障碍。离体胚培养能够在一定程度上破除种子的休
采用 培养基 。除特殊说明外 , 培养基 中蔗糖
眠, 缩短萌发期 , 提高萌发率和成苗率。近年来 , 添加浓度为 2 / 琼脂浓度为 8gI,H值为 58 国 OgI , / p .。 内外学者对短叶红豆杉 ( a u eioi)欧洲红 13 方 法 T x s rv l 、 b f a .
继续培养并无丛生芽发生 , 这与 P ua 【报道的 a l PC印
不一致 。细胞分裂素在种胚 的生理后熟期及种胚萌 发时相当活跃 , 研究表明 , 细胞分裂素一方面参与种
胚发育和萌发过程中物质 和能量代谢过程 的调节;
另一方面, 通过与其它激素的相互作用 , 与基因表 参 达的调控 , 在转录和 翻译水平上影响着植物种子的
离体胚培养和植株再生 系统 。 果表明 ,-A对 2 结 6B 种红 豆杉种胚的萌发促进 作用最 大,R次之 , 最小 。南 B G
方红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为 15m / -A+ 17 O n/ R+ 2 gLG 。短叶红豆杉种胚 . gL6 B . ×l。 gLB / m
( c i ni vrm i i和短 叶红豆杉 的成 熟胚 hn s a ar ) e s o e
. 生长过 程 进行离体培养及植株再生条件的探讨 , 旨在建 立有 21 离体 条件 下红 豆杉 成熟 胚 的萌发 、 接种 5 左右后 , d 有些红豆杉胚体积明显增大 ; 效的红豆杉植物离体胚培养及植株再生体 系, 用于 0d 子叶伸长、 分开 ; 优 良树种的离体快速 繁殖和反应器 的大规模 培养, 培养至 1 左右可见胚逐渐变绿 ,
曼地亚红豆杉愈伤组织诱导研究
伤 组 织 生 长质 量 好 。
【 关键词 】 曼地 亚红 豆杉 ; 愈伤组 织; 激素
随着升汞处理时间的延长 , 死亡率逐渐提高 . 当延长至 1m n , 8 i 时 死亡 率达到 了 5 . 0 %。愈伤组织诱导率 随着处理时 间延 长提高 ,处理 1 O 2 mn i 时最高 . 诱导率为 8. 处理 时间超 过 1 i. 3 %. 3 5 n 诱导率 又逐渐下 m 降 培养基颜色在处理 1m n 2 i 时基本无 明显变化 . 而在处理 1m n 6 i 和 1mn . 8 i 时 培养基变红 。 综上所述 . O1 %升汞处理曼地 亚红豆杉外植体 1m n是最合适 的。 2i 2 不同外植体对愈伤组织诱导 的影响 . 2 曼地亚红豆杉的幼茎 和叶均能诱导形成愈伤组织 . 但是茎形成愈 伤组织的能力 显著高于叶( 见表 2 。 种处理条件下。 )9 幼茎启动诱导时 间较 叶片早 . 幼茎的 出愈 时间为 l — 6天 . 41 而叶片 的出愈 时间为 2 — 2 2 天. 5 可能是 因为幼茎 的组织分化程度低 , 细胞分裂更加旺盛。在基 1 材 料 与 方 法 本培养基中 0 g 6 B 、. m . A 、. m . 2 一 . n . - A 1 g ~N A 3 g ~ , D条件下 , 3 aL 0 L 0 L 4 幼茎 的愈伤组织诱导率可达 9 . 3 %,显著高于叶的愈伤组织诱导率 。 3 11 材 料 . 对愈伤组织 的生 长状况调查发现 . 幼茎诱导的愈伤组织生 长状 在晴好天气 , 选取性状优 良、 无病虫害 、 生长健壮 的曼地亚红 豆杉 同时 . 况要明显好于叶片诱导 的愈伤组织 本研究说明幼茎更适合进行愈伤 新生 的嫩茎和 叶片为外植体 组织的诱导 1 方法 . 2 红 豆杉是天 然抗癌 化合物紫 杉醇 的唯~来 源 . 有极 高的 医疗 具 价值 . 而现 存的红 豆杉 植物 资源 数量极 为 有限 . 紫杉醇 在红 豆 然 且 杉植 物中 的含量 极低 , 要获得 1 g 杉醇需要 4 0 棵红 豆杉树剥 下 k紫 00 10 0 g的树 皮。预计 全世 界每年需 要 紫杉醇至 少 12 — 8 0 g 00k 9 0 4 0 k 左 右。 紫杉醇市场 供求关 系严重 失衡 。 曼地亚红豆杉为二十世纪末 引入 我 国的杂交 品种 . 其紫杉醇含量高并且稳定[ 1 】 。因此 , 研究利用曼地 亚 红豆 杉进行愈伤组织或 细胞培养生产 紫杉醇具有重 大的应用价值 和 良好 的生态效应 。本研 究对曼地 亚红豆杉愈伤组 织诱导进行相关 试 验 。 索曼地亚红豆杉 愈伤组织诱 导的最佳条件 。 探 为进一步 的研究 奠 定基础 1 . 外植体最佳灭菌方案筛选 .1 2 将嫩茎用 洗衣粉澄清液浸 泡 1 i . 5m n 自来水 冲洗 3 n 转 至无 0mi. 菌操作 台, 放人无菌烧杯先用 7 5%的酒精消毒 3 s无菌水清洗 3 , 0, 次 再用 O1%的 Hg . C1消毒 6 1 n 见表 1 , — 8mi( )无菌水清洗 8次 . 将茎 切 取长 约 1c m接 种在 培养 基 f + 一 A 02mg 一 A . m . 十 MS 6 B . . %N A10 gL L 2 一 2 g , , D . m . )每处理 接种 3 , 4 0 L 0瓶 每瓶接 种 1 个外植体 。 黑 暗 2 c 5 培养 。 接种 2 天后 , 2 统计诱导率 、 污染率 、 死亡率和培养基颜色变化情 况。外植体大部分变成深褐色或黑色者即判定为死亡 . 整个培养基 变 红记为+ + , + + 外植体周 围出现 红色记 为+ , 明显变化记为一 +无 1 . 不同激素配 比对曼地亚红豆杉愈伤组织诱 导的影响 .2 2 采用 3因素 3水平 ( 正交设计方案 , 3 3因素为 6 B - A、N A、 A 24 D, ,一 分别设 置 3个水 平 , 见表 2 详 。MS为愈 伤组织诱 导基本培 养 基, 其中蔗糖 3 . 1 0g - 琼脂 8g ,H调至 5 。 L, . p . 每处理分别接 种 3 个 8 O 幼茎和叶片 , 统计 出愈时间 ,2 后统计愈伤组织诱导率 。 3 d
三种抗氧化剂对曼地亚红豆杉愈伤组织褐化及相关物质含量的影响_郑超
植物生理学报 Plant Physiology Journal 2013, 49 (3): 259~263259收稿 2012-12-26 修定 2013-02-06资助 国家高技术研究发展计划(“863”计划)子课题(2011AA-10A206)、江苏省农业自主创新资金项目[CX(12)2041]、江苏省苏北发展计划(BN2012078)。
* 通讯作者(E-mail: jswangren@; Tel: 025-********)。
三种抗氧化剂对曼地亚红豆杉愈伤组织褐化及相关物质含量的影响郑超, 徐晟, 夏冰, 郑玉红, 贺佳, 彭峰, 汪仁*江苏省中国科学院植物研究所, 南京210014摘要: 采用不同浓度聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、维生素C (VC)、柠檬酸3种抗氧化剂处理褐化的曼地亚红豆杉愈伤组织, 检测结果表明, 在柠檬酸5 mg·L -1、VC 10 mg·L -1或PVP 5 mg·L -1处理下总酚含量为最低, VC 、柠檬酸处理后总酚含量下降显著, 分别比对照减少77.8%、87.4%, 而PVP 处理后下降不显著; 与愈伤组织褐化相关的多酚氧化酶(PPO)和过氧化物酶(POD), 在PVP 浓度为2.5和10.0 mg·L -1时活性分别达到最低, 与对照相比下降72.6%和97.8%。
相关性分析结果表明, 愈伤组织褐化程度与总酚含量呈显著正相关, 而总酚含量与PPO 、POD 活性则呈负相关。
可见, 抗氧化剂VC 和柠檬酸处理红豆杉愈伤组织, 能有效抑制总酚的积累, 降低其褐化程度。
关键词: 曼地亚红豆杉; 愈伤组织褐化; 总酚含量; POD; PPOEffects of Three Antioxidants on Callus Browning and Its Related Substance Contents in Taxus media RehderZHENG Chao, XU Sheng, XIA Bing, ZHENG Yu-Hong, HE Jia, PENG Feng, WANG Ren *Institute of Botany, Jiangsu Province and Chinese Academy of Sciences, Nanjing 210014, ChinaAbstract: Different concentrations of polyvinylpyrrolidone (PVP), vitamin C (VC) and citric acid were performed on callus browning of Taxus media . The result showed that the total phenolic content was the lowest at 5 mg·L -1 of citric acid, 10 mg·L -1 of VC or 5 mg·L -1 of PVP. Compared with the control, the total phenolic content was signi fi cantly decreased by 77.8% and 87.4% after treatment with VC and citric acid. Additionally, activities of callus browning-related enzymes PPO and POD were reduced by 72.6% and 97.8% at their lowest levels under treatments with 2.5 and 10.0 mg·L -1 PVP respectively. The correlation analysis among the browning degrees of callus, total phenolic content, PPO and POD activities was also carried out. A signi fi cant positive correlation between total phenolic content and callus browning was found. But total phenolic content was negatively correlated to PPO and POD activities. It indicates that VC and citric acid are more effective to inhibit total phenolic accumulation in T. media callus, and thus reducing callus browning. Key words: Taxus media ; callus browning; total phenolic content; POD; PPO 自在太平洋紫杉中发现紫杉醇(Wani 等1971)以来, 红豆杉的相关研究已成为植物研究领域的一大热点。
东北红豆杉的愈伤组织诱导
生 物合 成途 径 、 导 、 诱 固定 化 及基 因修饰 等 方 面 的
研究 , 终 在反 应 器 中进 行放 大 生产 , 最 以及 过程 工 程 调控 。
程序 , 诱导 接种 前 进行 表 面 消毒 : 在 自来 水 反复 冲
些。以茎 和叶为外植体 , S为基础培养基 , M 采用 1 0种激素 配 比在 黑 暗条 件下诱 导愈 伤组织 。综合愈 伤 组织诱导率 、 伤组 织 生长 状态 和 愈伤 组织 传 代过 程 中 的褐 化情 况 , , 愈 2 4一D 1 0 m . g・ 和 6一B L A 10m L . g・ 为东北红 豆杉茎 愈伤诱导和传代 的最佳激素配 比。低 温预处理外植体有利于减 轻愈伤组 织
Ab ta t T x l o t ms a d l a e f T x s c s i a a h s b e x r ce n ee mi e sr c : a o f se n e v s o a u u p d t a e n e t t d a d d tr n d. a wh c h wst a o h s msa d l a e o t i r c a o ,w i h o tn fse S a l t ih s o h tb t t n e v sc n an ta e tx l h l t e c n e to tmsi i l e e te h g e h n t a fl a e . T k n s ms a d la e s e p a t .a d t k n MS b s lme i s ih rt a h to v s a e t n e v s a x l n s n a e a a d a a e e me i e i d f o o e c mb n t n a e b e p l d t n u e c l n d r .Ac o d n da,t n k n s o r n o i a i sh v e n a p i i d c al i a k hm o e o i c r ig
曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养研究
长 迅 速 , 质 良好 , 于 继 代 培 养 ; 养 基 B + K .mg L+2 4D .mg L 品 利 培 。 T1 0 / ,- 2 O / +NAA1 0 / . mg L适 用 于 愈 伤 继 代 ,
每 3d增 殖 倍 数 5 2 ; 养 基 中 添加 活性 碳 50 / 维 生 素 C 1 0mg L或 水解 乳 蛋 白 10 mg L对 抑 制 材 0 .倍 培 0mg L、 0 0 / 00 / 料 褐化 有 一 定 的效 果 。
■ ● ■
me a a . di v r
Z C
黄宁珍 , 付传 明, 何成新 , 唐凤 鸾 , 李
锋
HUANG ng z e FU u n— i H E e — i TANG n —u n, n Ni — h n, Ch a m ng, Ch ng x n, Fe g l a LIFe g
( 广西植 物研究 所 , 西桂林 广
510 ) 4 0 6
( a g i n t u e o o a y, in, a g i 5 1 0 , i a Gu n x si t fB t n Gu l Gu n x , 4 0 6 Ch n ) I t i
摘要: 以曼 地 亚 红 豆 杉 ( x s davrhcs) 茎 和 嫩 叶 为 外 植 体 , 行 愈 伤 组 织 诱 导 和 继 代 培 养 研 究 。 伤 Ta u mei a.i s 嫩 k 进 愈 组 织诱 导 以 MS为基 本 培 养 基 , 代 培 养 以 MS和 B 为 基本 培 养 基 , 别 添 加 不 同 浓 度 和 组 合 的 细 胞 分 裂 素 (一 继 。 分 6 B T Z K 2i) 生 长 素类 激 素 ( A、 D 、 T、- 、 p NAA、 ,一 , 24D) 和水 解 乳 蛋 白 、 性 碳 等 抗 褐 化 试 剂 , 察 其 对 愈 伤 组 织 诱 导 活 考 和继 代 培 养 的 影 响 。 结 果 表 明 , 地 亚 红 豆 杉 嫩 茎 有 很 强 的分 生 能 力 , 曼 比嫩 叶更 易 于 诱 导 愈 伤 ; 培 养 基 MS 在 +
植物生长调节剂对南方红豆杉愈伤组织培养和紫杉醇合成的影响_百解读
天然产物研究与开发N at Prod Res De v 2006, 18:569-576文章编号:1001-6880(2006 04-0569-08收稿日期:2005-05-27接受日期:2005-06-21基金项目:湖南省自然科学基金项目(03JJ Y5017 *通讯作者Tel :86-744-8231386; E -mail :duyatian6688@163. c om植物生长调节剂对南方红豆杉愈伤组织培养和紫杉醇合成的影响杜亚填1*, 陈建华2, 许建宇1, 曹庸1, 周朴华3(1. 吉首大学湖南省林产化工工程重点实验室; 2. 吉首大学城乡资源与规划学院, 张家界427000;3. 湖南农业大学生物科学与技术学院, 长沙410128摘要:通过不同种类和水平植物生长调节剂对南方红豆杉(Taxus chinensis var . mairei 愈伤组织诱导、生长和紫杉醇合成能力影响的研究发现:诱导培养初期, 以无植物生长调节剂的MS 为基本培养基, 在附加不同植物生长调节剂组合作用下愈伤组织产生的时间和生长、在相同植物生长调节剂组合作用下不同外植体愈伤组织的产生时间和生长均表现出较显著差异, 2, 4-D /NAA 高于0. 4时, 不利于南方红豆杉愈伤组织的诱导。
转换到附加不同植物生长调节剂组合的B5培养基上后, 随培养继代次数的增加, 生长差异逐渐缩小, 直至不显著, 表明参考不同文献报道最优配方所设计的各植物生长调节剂组合对南方红豆杉愈伤组织的生长均较适宜, 有利南方红豆杉愈伤组织生长的植物生长调节剂优化组合没有唯一性。
但不同调节剂组合作用下的同源愈伤组织中、相同调节剂作用下不同源愈伤组织中紫杉醇含量均存在着极显著差异, 适当水平(2mg /L 的2, 4-D 单用, 或与适当水平的KT 、6-BA 、KT+GA 配合使用, 对南方红豆杉愈伤组织紫杉醇的合成较有利, NAA 则不太有利, 幼茎和叶愈伤组织产紫杉醇的水平较其它愈伤组织为高。
南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立
different exp lants of T. chinensis
外植体 接种块数 愈伤组织块数 愈伤组织诱导率 / % 不同的外植体对愈伤组织的诱导在数量上差别 侧芽 50 43 86 不大 ,但试验发现侧芽的污染率很低 ,几乎无污 叶片 50 43 86 染 ,而叶片和茎段虽然是春季刚抽出来的 ,污染 茎段 50 40 80 率仍在 85%左右 . 另外 , 从芽诱导出来的愈伤 组织颜色较浅 ,出愈时间较早 ,而从茎段和叶片诱导出来的愈伤组织颜色浓绿 ,以后继代的过程中易发生 褐化 . 综合考虑上述因素 ,红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体 (图 1 ) .
1 材料与方法
1. 1 试验材料
南方红豆杉的外植体采自本研究室田间栽培植株 ,于春季取当年生的嫩茎 、 叶片 、 侧芽和茎尖作为外 植体材料 . 1. 2 试验方法 1. 2. 1 愈伤组织的诱导 ( 1 )不同外植体诱导愈伤组织的比较 . 取红豆杉外植体 ,用洗衣粉清洗干净 ,在
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福建农林大学学报 (自然科学版 )
第 35 卷
流动的自来水下冲洗 2 h,再用体积分数为 75%乙醇浸泡 30 s,然后在质量分数为 0. 1%升汞溶液中处理 15 m in,最后用无菌水冲洗 3 - 4 次 . 外植体为 3 种类型 : ① 长约 1 cm 叶片切段 ,平放于培养基上 (B5 + 1. 0 - 1 - 1 - 1 mg・L NAA + 1. 0 mg・L I AA + 0. 5 mg・L KT) ; ② 带叶茎段上的叶片剪去三分之二后 ,再切成 1 cm - 1 - 1 - 1 ( 左右 ,插入培养基 B5 + 1. 0 mg・L NAA + 1. 0 m g・L I AA + 0. 5 mg・L KT) ; ③ 侧芽和顶端生长点去 - 1 - 1 - 1 ( 除少数外鳞后 ,接入培养基 B5 + 1. 0 mg・L NAA + 1. 0 m g・L I AA + 0. 5 mg・L KT) . 每种材料接种 10 瓶 ,每瓶 5 块外植体 ,在 25 ℃ 黑暗条件下培养 . 20 d后统计各培养基中出现的愈伤组织块数 ,计算愈伤 组织的诱导率 . ( 2 )不同激素配比对红豆杉愈伤组织诱导的影响 . 按 2, 4 2 D (A ) 、 NAA ( B ) 、 I AA ( C ) 3 个考察因素 , 各 4 取三水平 ,据 L9 ( 3 )正交表安排试验 (表 1 ) . 将愈伤组织诱导率及生长率都较高的外植体侧芽接种在附 - 1 - 1 加上述激素 (生长调节剂 ) 、 2 g・L 水解乳蛋白 (LH )和 0. 5 g・L 活性炭 (AC )不同配比的培养基中 ,培 养 30 d后统计诱导率 ,培养条件同上 . 30 d后 ,以诱导率为指标进行分析 . 表 1 因素水平表 1. 2. 2 愈伤组织的继代增殖 由于不同的激素配比对南方红 Table 1 Factors and levels mg・L - 1 豆杉愈伤组织的生长和紫杉醇的积累都有影响 ,本试验以侧芽 因素 和茎段来源的愈伤组织作为试验材料 ,在添加不同配比的激素 水平 2+ ) 和 1 /2B5 3 种培养基中进 2, 4 2 D (A ) NAA (B ) I AA ( C) 和有机添加物的 B5 、 B′ 5 (去掉 Cu 1 1. 0 0. 0 0. 2 行培养 . 从诱导的愈伤组织中筛选出疏松 、 浅绿色或白色的愈伤 2 1. 5 1. 0 0. 5 组织在含有不同激素种类和浓度及有机添加物的 B5 培养基上继 3 2. 0 2. 0 0. 8 代培养 ,验证激素对愈伤组织增殖的效应以及对褐化的影响. 25 d 继代一次 ,观察褐化程度并计算生长率.
不同培育措施对云南红豆杉人工幼林生长量的影响
不同培育措施对云南红豆杉人工幼林生长量的影响自2005年起进行了不同密度、不同基肥和不同遮荫度等措施对云南红豆杉幼树生长的影响及云南红豆杉不同月份紫杉醇含量变化等研究.经多年观测发现:①不同密度对云南红豆杉幼林生长影响较大,较有利于其生长的造林密度为50 m×1 m、0.75 m×0.75 m、0.50 m×0.75 m;②施用不同基肥对云南红豆杉幼林的生长也有较大影响,较有利于其生长的基肥为(牛粪4.8 kg +锯末3 kg) /株、(100 g复合肥+锯末3 kg) /株、碎柴皮1.32 kg/株;③在3种遮阳条件(全光、50%、80%)下,云南红豆杉生长有差异,其中遮荫度为50%的遮阳条件有利于其生长;④云南红豆杉不同月份间紫杉醇含量变化较大,含量最高的为6月份,最低的为12月份.Key words:Taxus yunnanensis young plantation; cultivation measures; mass growth; density; fertilizer; shading; paclitaxel content1 试验地概况试验地位于云南省普洱市林业科学研究所内,地处东经102°19′,北纬22°02′,海拨1 300 m,气侯属热带北缘季风类型.一年当中受潮湿的西南季风和干暖的西风南支急流交替控制,干湿季分明,11月~次年4月为干季,5~10月为雨季.年均温为15.3~20.2℃,≥10℃积温6 000~7 500℃,最热月(7月)均温23.9℃,最冷月(1月)均温13.9℃,极端最高气温38.6℃,极端最低气温-3.4℃(1974年1月).年降水量1 700 mm,年日照时数1 900~2 200 h.2 研究内容及方法2.1 不同密度对云南红豆杉幼林生长的影响研究为探求不同初植密度对红豆杉幼林生长的影响,为今后红豆杉原料林的发展确定适宜的初植密度,项目进行了云南红豆杉不同密度试验.对2006年9月定植的云南红豆杉不同密度试验林进行调查,试验分8个处理,分别是0.25 m×0.25 m,0.25 m×0.50 m,0.50 m×0.50 m,0.50 m×0.75 m,0.75 m×0.75 m,0.50 m×1 m,0.75 m×1 m,1 m×1 m,3次重复,每一处理用苗30株.试验数据每年调查2次,主要以苗高和地径为调查指标.共持续调查了4年,2009年7月进行了最后一次调查,调查的指标为苗高、地径和生物量.2.2 不同基肥种类及施肥量对云南红豆杉苗木生长量的影响研究为探求不同基肥种类和施肥量对红豆杉人工幼林生长的影响,项目设计了云南红豆杉人工林的基肥试验,为今后云南红豆杉人工林发展过程中确定适宜的基肥种类和用量提供依据.2006年9月进行了云南红豆杉不同基肥试验,共分17个处理(表1),3个重复.每一处理的云南红豆杉分别用苗30株,定植成活后观测苗木的苗高、地径和侧枝萌发数,定植成活生长稳定后每年3月、6月、9月和12月分别观测记录苗高、地径和侧枝发枝数.试验共设计了16个肥种及用量组合,并以不施肥作为对照,具体肥种及肥量如表1.试验地清理及整理:试验地经过翻挖、捡除残根、杂草,使土壤充分细碎、疏松,然后按宽30 cm深30 cm的要求挖定植沟.为防止种植后积水影响红豆杉的生长,回填定植沟时将其整理成高畦.按50 cm×80 cm的株行距定植.每年除草6次,雨季1月1次、其它时间是3月1次,松土3次.定植成活后第一年每月施1次清粪水.以后每2月施1次清粪水,但浓度较第一年大.待苗定植1月左右,生长较稳定后,每3个月定期观测苗木的苗高、地径和侧枝萌发数.共持续观测了4年,2009年7月进行了最后一次调查,调查的指标为苗高、地径和生物量.2.3 不同遮荫度对云南红豆杉苗木生长的影响研究为探求红豆杉人工幼林对光照的适应性,掌握不同光照强度对红豆杉幼林生长的影响,为今后红豆杉原料林发展过程中确定适宜的光照,项目组进行了不同遮荫度对云南红豆杉幼林生长影响的研究.试验采用单因素随机区组设计,分3个处理,即遮荫度为50%的黑色遮荫网(用A代表)、遮荫度为80%的黑色遮荫网(用B代表)和不遮荫(对照用C代表).每个处理3个重复,每个重复用苗30株.试验地清理及整理:试验地经过多次翻挖、捡除残根、杂草,使土壤充分细碎、疏松.为防止积水,整理成1.5m宽、2.5 m长的高床. 按50 cm×75 cm的株行距定植.每年除草6次,雨季1月1次,其它时间是3月1次,松土3次.定植成活后第一年1月施1次清粪水.以后2月施1次清粪水,浓度较第一年大.待苗定植1月左右,生长较稳定后,每3个月定期观测苗木的苗高、地径和侧枝萌发数,共持续调查了4年,2009年7月进行了最后一次调查,调查的指标为苗高、地径和生物量.2.4 云南红豆杉年内不同时期紫杉醇含量测定紫杉醇作为一种中间代谢产物,它的含量会随着树体的生长情况和季节变化而发生较大的变化.为探求紫杉醇含量随季节变化的规律,以便为今后红豆杉原料采收季节确定提供参考,进行了云南红豆杉年内不同时期紫杉醇含量的测定.从2007年4月起,从中芬公司遮荫区内2003年种植的云南红豆杉林内固定10株进行紫杉醇含量年内变化的测定,测定每2月进行一次,取样时分别从样株上、中、下各部位分别取一些枝叶,最后将所取的全部枝叶混合均匀成一份样品,在烘箱内用70℃温度烘至恒重,然后密封带至昆明进行紫杉醇含量测定.共测定了6次.3 结果与分析3.1 不同定植密度对云南红豆杉幼树生长的影响定植成活后每隔3个月观测苗木的苗高、地径和侧枝萌发数.表2为云南红豆杉密度试验测定数据.从表2可以看出,云南红豆杉苗木的苗高生长速度最快的处理是0.50 m×0.50 m和0.75 m×1.0 m,最慢的处理是0.25 m×0.25 m;云南红豆杉苗木的地径生长速度最快的处理是0.75 m×0.75 m,最慢的处理是0.25 m×0.25 m.云南红豆杉苗高生长速度从快到慢的顺序是:0.75 m×1 m,0.50 m×0.50 m,0.25 m×0.5 m,0.50 m×0.75 m,0.75 m×0.75 m,0.50 m×1 m,1 m×1 m,0.25 m×0.25 m;云南红豆杉地径生长速度从快到慢的顺序是:0.50 m×1 m,0.75 m×0.75 m,0.50 m×0.75 m,0.75 m×1 m,1 m×1 m,0.50 m×0.50 m,0.25 m×0.5 m,0.25 m×0.25 m.3.2 不同基肥种类及施肥量对云南红豆杉苗木生长量的影响待苗定植1月左右,生长较稳定后,每3个月定期观测苗木的苗高、地径和侧枝萌发数.云南红豆杉基肥试验观测结果见表3所示.从表3可看出,各基肥配方处理对云南红豆杉苗木高生长速度从快到慢的顺序为13﹥12﹥15﹥10﹥11﹥9﹥2﹥16﹥8﹥14﹥17﹥7﹥6﹥1﹥5﹥4﹥3;各基肥配方处理对云南红豆杉苗木地径生长速度从快到慢的顺序为10﹥15﹥16﹥11﹥9﹥17﹥13=14﹥12﹥8﹥7﹥3﹥2﹥1﹥5﹥6﹥4;各基肥配方处理对南方红豆杉侧枝发枝数最好的是10、16,最差的是6,侧枝发枝数从多到少的顺序是:16=10﹥8﹥11=13﹥7=9=14=17﹥3=15﹥12﹥1=5﹥2=4﹥6.调查结果表明,较适合云南红豆杉苗木高、地径和侧枝发枝数生长的基肥配方是10、15、12、13,较不适合的基肥配方是3、4.由于本试验的研究时间短,研究结果只能代表云南红豆杉苗木生长初期的一些表现,但初步的研究结果可为云南红豆杉人工林初期培育中基肥的施用提供参考.3.3 不同遮荫度对云南红豆杉苗木生长的影响各处理的云南红豆杉苗木培育2年后各项生长指标的测定结果均值如表4所示.从表4不同遮荫度对2 a生云南红豆杉苗木的苗高、地径、茎鲜重、枝鲜重、地下部分鲜重、主根径、主根长7个生长指标测定结果显示,在参试的3种处理中,即A:遮荫度为50%的黑色遮荫网;B:遮荫度为80%的黑色遮荫网;C:不遮荫(对照)中,以A处理最为理想,即遮荫度为50%的黑色遮荫网对云南红豆杉苗木的苗高、地径、茎鲜重、枝鲜重、地下部分鲜重、主根径、主根长7个生长指标的生长量表现均为最好.此处理可在云南红豆杉苗木初期培育生产中大量推广使用.对照处理(不遮荫)云南红豆杉苗木的苗高、地径、茎鲜重、枝鲜重、地下部分鲜重、主根径、主根长7个生长指标表现较差.由此可知,云南红豆杉苗木的小苗最佳生长量需要有一定的遮荫度,但遮荫度不能太高.由于本研究时间不长,研究结果只能代表不同遮荫度(遮荫度为50%的黑色遮荫网、遮荫度为80%的黑色遮荫网和不遮荫)对云南红豆杉树种培育的一些生长表现,但初步的研究结果可为云南红豆杉树种的初期培育提供参考.3.4 云南红豆杉年内不同时期紫杉醇含量测定结果及分析对云南红豆杉年内不同时期紫杉醇含量的测定结果见表5所示.从表5可以看出,红豆杉紫杉醇含量在年内不同月份间变动较大,其中含量最高的是8月份,达0.699 403%,而其含量为最低时的12月仅为0.223 504%,仅为8月份的1/3,这与紫杉醇为中间代谢产物,生长越旺盛含量越高的研究结果是一致的,因此生产中在进行红豆杉原料采收时应注意选择好时间,最好是在其生长最为旺盛的7~8月进行,此时其有最高的紫杉醇含量,从而可有效降低生产和运输成本,提高经济效益.4 结语①云南红豆杉不同初植密度对其幼树生长影响较大,在4 a生时,较有利于其生长的造林密度为0.50 m×1 m、0.75 m×0.75 m、0.50 m×0.75 m,但相信随着时间的变化和林木的不断生长,密度对生长的影响将会越来越明显,因此选择合理的造林密度不仅可降低造林成本,还能促进人工林的生长.由于本试验时间短,不同密度对定植后苗木生长的影响还没完全表现出来,预计随着试验时间变长,不同造林密度间的生长量差距将会逐渐变大.但株行距为0.25 m×0.25 m时云南红豆杉的生长量均为最差,这是因为随着林木的不断生长发育,树体随之增大,根幅也在不断扩大,对空间和营养的争夺将越来越激烈,过大的初植密度对林木个体生长的制约作用将越来越明显.因此,在大面积发展红豆杉人工原料林中不宜采用过大的初植密度.②施用不同基肥对云南红豆杉幼林的生长也有较大影响,较有利于其生长的基肥为(牛粪4.8 kg +锯末3 kg) /株、(100 g复合肥+锯末3 kg) /株、碎柴皮1.32 kg/株.③在3种遮荫度(全光、50%、80%)下,云南红豆杉生长有差异,其中遮荫度为50%的遮阳条件有利于其生长.④云南红豆杉不同月份间紫杉醇含量变化较大,含量最高的为6月份,最低的为12月份. 因此要求在采收云南红豆杉原料时要选择好时间,最好是在其生长最为旺盛的7~8月进行,此时其有最高的紫杉醇含量,从而可有效降低生产和运输成本,提高经济效益.参考文献:[1]王卫斌,郭华,王达明,等.我国的云南红豆杉资源及其药用原料林培育技术的研究进展[J].西部林业科学,2007,36(2):122-128.[2]王卫斌,王达明,等.云南红豆杉[M].昆明:云南大学出版社,2006.[3]张茂钦,李达孝,左显东.云南红豆杉人工栽培及其生态生物学特性研究[J].林业科技通讯,1996(3):8-12.[4]云南省科技情报所,云南省科委科技处.红豆杉及抗癌新药紫杉醇研究动态[J].国内外科技发展动态,1996(25).[5]吴榜华,张启昌,李德志.东北红豆杉生长及营林技术研究[J].吉林林学院学报,1996,12(3):125-129.[6]项伟,阮德春,张宏杰,等.不同产地云南红豆杉紫杉醇的含量分析[J].云南林业科技,1996(2):74-76.[7]李莲芳,王达明,周云.云南红豆杉药用人工原料林培育技术进展及发展策略[J].云南林业科技,2001(1):18-20.。
不同因素对南方红豆杉愈伤组织诱导的初步研究
不同因素对南方红豆杉愈伤组织诱导的初步研究作者:王荣明,陈秋良,王烨,等来源:《种子科技》 2017年第9期文章编号: 1005-2690(2017)09-0137-02中图分类号: S791.49文献标志码: B王荣明1,陈秋良3,王烨1,吴红梅2,刘人菁2( 1.屏边县农广校,云南红河661200; 2.屏边县农产品质量安全检测站,云南红河661200; 3.红河州农广校,云南红河661200 )摘要:本试验主要研究不同因素对南方红豆杉(Taxus chinensis var mairei)愈伤组织诱导的影响,通过不同的材料(幼嫩茎段、叶柄、叶、芽)、不同培养基、不同光照条件以及不同的激素配比4个方面来进行试验诱导南方红豆杉愈伤组织,旨在筛选出适合诱导南方红豆杉愈伤组织的最佳配方、适宜的培养条件和适宜的外植体。
关键词:南方红豆杉;组织培养;外植体;愈伤组织;诱导1前言红豆杉属(Taxus Linn.)植物在全世界大约有11种,我国有4种1变种[1]。
从红豆杉属植物中分离出来的一种抗肿瘤特效成分——紫杉醇,具有抗白血病、黑色素瘤、肺癌、卵巢癌等癌症的效用[2],因为它是一种新型、高效、广谱抗癌药物,且制剂市场前景极好,所以紫杉醇成为当今最热门的抗癌药物之一。
近年来,众多学者在南方红豆杉组培微繁育苗方面进行了系统研究,并在组培微繁关键技术,如光照、温度、pH调控以及外植体选用和激素配比等方面都取得了长足的进展[3]。
本文通过不同外植体、不同培养基、不同光照条件和不同激素配比4个方面对南方红豆杉愈伤组织的诱导进行研究,旨在筛选出最适合诱导南方红豆杉愈伤组织的最佳配方、适宜的培养条件和适宜的外植体,从而能大量地诱导出愈伤组织,试图为进一步大规模细胞培养、生产紫杉醇奠定基础。
2材料与方法2.1材料的选择外植体采自屏边苗族自治县玉屏镇引种的南方红豆杉5年生枝条,选择当年生长健壮、无病虫害的幼嫩茎段、叶柄、叶、芽作外植体。
不同生长促进剂对红豆杉幼苗生长影响研究
2024Vol 56No 2林㊀业㊀科㊀技㊀情㊀报收稿日期:2024-01-10不同生长促进剂对红豆杉幼苗生长影响研究马㊀媛㊀董㊀琼㊀徐志立㊀丁子建(西南林业大学林学院ꎬ昆明650224)[摘㊀要]㊀本研究探讨了赤霉素(GA3)㊁吲哚乙酸(IAA)和芸苔素内酯(BR)对红豆杉幼苗生长的影响ꎮ结果表明ꎬ不同浓度的GA3㊁IAA和BR对红豆杉幼苗的生长具有不同程度的促进作用ꎮ其中ꎬGA3浓度为100mg/L时ꎬ红豆杉幼苗的茎伸长最长ꎬ达到12.5cmꎻIAA浓度为10mg/L时ꎬ红豆杉幼苗的根系最长ꎬ达到9.6cmꎻBR浓度为0.1mg/L时ꎬ红豆杉幼苗的叶绿素含量最高ꎬ达到0.35mg/gꎮ同时ꎬGA3㊁IAA和BR对红豆杉幼苗生物量和氮磷钾元素含量也产生了一定的影响ꎮ综合考虑各种因素ꎬGA3浓度为100mg/LꎬIAA浓度为10mg/LꎬBR浓度为0.1mg/L时ꎬ红豆杉幼苗的生长效果最佳ꎮ本研究为进一步了解不同生长促进剂对红豆杉幼苗生长的影响提供了理论依据和实践指导ꎮ[关键词]㊀不同生长促进剂ꎻ红豆杉幼苗ꎻ红豆杉ꎻ生理指标中图分类号:S791.49㊀㊀㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀㊀㊀文章编号:1009-3303(2024)02-0103-03EffectofDifferentGrowthPromotersonSeedlingGrowthofTaxusChinensisMaYuan㊀DongQiong㊀XuZhili㊀DingZijian(CollegeofSouthwestForestryUniversityꎬKunming650224ꎬChina)Abstract:Thisstudyinvestigatedtheeffectsofgibberellin(GA3)ꎬindoacetate(IAA)andBrassinolide(BR)onthegrowthofTaxusseedlings.TheresultsshowedthatdifferentconcentrationsofGA3ꎬIAAandBRpromotedthegrowthofTaxusseedlings.AmongthemꎬwhentheGA3concentrationis100mg/Lꎬthestemelongationis12.5cmꎬattheIAAconcentrationis10mg/Lꎬtherootsystemisthelongestꎬreaching9.6cmꎻattheBRconcentrationis0.1mg/Lꎬthechlorophyllcontentisthehighestat0.35mg/g.MeanwhileꎬGA3ꎬIAAandBRalsohadsomeeffectsontheseedlingbiomassandnitrogenꎬphosphorusandpotassiumelementcontentofTaxuschinensis.Con ̄sideringvariousfactorsꎬtheyewseedlingsgrewbestat100mg/LGA3ꎬ10IAA10mg/LandBR0.1mg/L.Thisstudyprovidestheoreti ̄calandpracticalguidancetofurtherunderstandtheeffectsofdifferentgrowthpromotersonseedlinggrowthofR.chinensis.Keywords:Differentgrowthpromotersꎻtaxuschinensisseedlingsꎻtaxuschinensisꎻphysiologicalindicators红豆杉(TaxaceaeGray)是目前红豆杉科(TaxusL)的一个通用名称[1]ꎮ世界已知11种ꎬ其中1种是中国产ꎬ西藏㊁东北㊁云南以及南方等4种[2]ꎮ红豆杉属的植物在世界范围内天然分布不多ꎬ主要在亚热带高山地区㊁热带以及北半球的温带和寒带生长[3]ꎮ利用对红豆杉幼苗根系的长度㊁数量和形态等指标进行观察和测量ꎬ将不同生长促进剂处理组与对照组之间的差异进行对比ꎬ以确定哪种生长促进剂对红豆杉根系生长具有最佳效果[4]ꎮ本文通过使用不同类型和浓度的生长促进剂来对红豆杉幼苗进行处理ꎬ并对其对各生长促进剂的反应进行了分析ꎬ进而从中挑选出最优的生长促进剂类型和浓度ꎬ为红豆杉幼苗的繁殖和培养提供了一定的技术依据[5]ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀试验地概况实验地点设在云南省昆明市寻甸县塘子街街道ꎬ寻甸地区一年中温度在11~23ħ之间ꎬ无霜时间229dꎬ空气中的水分含量高ꎬ雨水和水汽在同一季节ꎬ干湿性强ꎬ光㊁热㊁光㊁热等良好ꎮ年均光照时间2066.3hꎻ多年的平均降水是1045mm[6]ꎮ1.2㊀研究对象从2023年4月1号到2023年10月1号ꎬ在4月1号ꎬ5月15号ꎬ7月1号ꎬ8月15号ꎬ10月1号ꎬ对各处理的植株高度和地面直径进行测量[7]ꎮ①地上部生物量=叶片+树干②土壤有机质=根系有机质③生物总量=叶片+树干+根系④茎根比=茎与根的比例1.3㊀试验材料本实验选取了3种植物生长促进剂:赤霉素(GA3)㊁吲哚乙酸(IAA)和芸苔素内酯(BR)ꎬ如表1所示[8]ꎮ在制备时ꎬ也采用了用无水酒精来溶解ꎬ并添加了一种可以粘附在刀片上的乳化剂ꎬ这两种301林㊀业㊀科㊀技㊀情㊀报2024Vol 56No 2物质均为国药集团化工试剂有限公司采购的一种分析纯[9]ꎮ表1㊀试验材料名称(缩写)分子式纯度%CASNO.赤霉素(GA3)C19H22O690.877-06-5吲哚乙酸(IAA)C10H9NO299.487-51-4芸苔素内酯(BR)C28H46O692.372962-43-7㊀㊀本文选取了2个市面上销售的植物促生剂ꎬ其中一个是禾百润(HR)ꎬ由德国SanovitaCorporation制造ꎬ由宁波星耀禾百润(HR)农业技术有限公司代理[10]ꎮ另外一种是由德国阿格福莱农业㊁林业㊁环保公司制造的BH(BH)ꎬ由北京诚禾佳信顾问公司作为代理商ꎮ1.4㊀试验用具如:锄头ꎬ铁锹ꎬ网筛ꎬ卷尺ꎬ直尺ꎬ游标卡尺ꎬ遮阳网ꎬ温室塑料薄膜ꎬ记录表等ꎮ1.5㊀试验设计1.5.1㊀施加生长促进剂实验采取了随机区组设计ꎬ在同一条件下ꎬ将3种促生剂的三种浓度(GA3的浓度为400~600ꎬIAA的浓度为50~100ꎬBR的浓度为1200~1500)设定了三个梯度ꎮ1.5.2㊀苗床选择依据云南红豆杉的生活习惯ꎬ选择适宜的苗圃ꎬ要选择排水良好ꎬ地势平坦ꎬ有充足的水资源ꎬ容易引水浇灌ꎬ土壤含水量ꎬ质地结构ꎬ以及土壤pH值与扦插幼苗的生长相适应ꎮ1.5.3㊀样品采集在实验处理完成之后ꎬ在每一次的重复中ꎬ从各处理中ꎬ抽取3株来测量幼苗的生物量ꎬ此外ꎬ在各次的反复中ꎬ也抽取2株来测量叶面积ꎮ1.5.4㊀指标测定在整个实验过程中ꎬ用皮尺测量了实验植株的高度ꎬ用卡尺量出了地面直径ꎮ取赤松幼树ꎬ105ħ干燥30minꎬ75ħ干燥至一定重量ꎬ测量其根系㊁茎㊁叶生物量及茎与叶的比例ꎮ1.6㊀数据处理使用excel2010来对试验数据展开整理与收集ꎬ使用IBMSPSSStatisctics18数据统计软件ꎬ对红豆杉生长指标㊁根系指标㊁生理指标进行数据分析㊁方差分析㊁显著性检验(Duncan新复极差法)㊁Pearson关联性分析和隶属函数分析ꎮ2㊀结果与分析在这个试验中ꎬ研究者们采用了不同生长促进剂对红豆杉幼苗进行了试验ꎬ并测定了各个生长指标ꎮ株高是指幼苗的身高㊁茎粗指幼苗的茎杆㊁地上部鲜重是指幼苗的地下部㊁茎鲜重和叶鲜重是指幼苗的叶片的总重ꎮ研究结果表明ꎬ不同配比条件下ꎬ红豆杉幼苗的生长指标存在差异ꎮ下面是几个重要的观测数据ꎮ株高(Plantheight):各配方中ꎬ以GIB232和GIB313的红豆杉幼苗株高为57.87cm和58.26cmꎮ这种结合显示出最佳的纵向增长ꎮ茎粗:以GIB112和GIB322为代表的红豆杉树茎粗为最大ꎬ其茎粗为8.82mmꎬ其茎粗为8.90mmꎮ地上部分的鲜重(FWofcovercrop):GIB331的地上部分最大ꎬGIB232的地上部分最高ꎬ为36.97gꎬ而GIB232c的地上部分最低ꎬ为36.80gꎮ这种混合料在地面上有更多的重量ꎮ茎鲜重(FWofstem)方面ꎬ以GIB331㊁GIB232为最大ꎬ可达20.95g㊁20.38gꎻ表明这两个品种的茎秆都很强壮ꎮ叶鲜重:分别达15.93g和16.02gꎮ它们的叶片品质都比较高ꎮ结果表明ꎬ9个配方处理的株高与对照相比ꎬ总体上表现为较高ꎬ达到了极明显的差异ꎮ与S0组相比ꎬGIB232ꎬGIB313ꎬGIB322株高分别增加了36.80%ꎬ37.71%ꎬ422.02%和3797%ꎬ与S0组比较ꎬ分别增加了36.80%ꎬ37.71%ꎬ422.02%和3797%ꎮ总体而言ꎬ以上资料显示ꎬ各种处理方式对红豆杉生长有明显的效果ꎮGIB232和GIB331在许多方面都有较好的效果ꎬ因此它们很有可能成为一种4012024Vol 56No 2林㊀业㊀科㊀技㊀情㊀报更适合于红豆杉幼苗的最佳组合ꎮ但是ꎬ目前还只是初步研究ꎬ为了更好地了解各种复方制剂对红豆杉幼苗的作用ꎬ还需进行更多的研究和实验ꎮ3㊀讨论在植物生长的复杂过程中ꎬ各种生长因子如GA3(赤霉素)㊁IAA(吲哚乙酸)以及BR(油菜素内酯)等ꎬ均扮演着不可或缺的角色ꎮ它们各自在促进地上部生长㊁地下部生长以及整体植物发育中发挥着独特的作用ꎮ赤霉素ꎬ作为一类重要的植物激素ꎬ已被证实能显著地影响稻秆节间的生长ꎮ在稻秆生长的过程中ꎬ赤霉素能够刺激节间细胞的伸长ꎬ使得稻秆更加粗壮ꎬ提高抗倒伏能力ꎮ油菜素内酯ꎬ简称BRꎬ同样是一种重要的植物生长调节剂ꎮ在0.10mg/kg的水平上ꎬBR对植物生长的促进作用显著ꎬ这主要体现在促进细胞伸长㊁增加叶片面积和提高光合效率等方面ꎮ当BR的浓度超过一定水平时ꎬ其对植物生长的促进作用就不再明显ꎬ甚至可能产生抑制作用ꎮ这可能是因为高浓度的BR会干扰植物体内其他激素的平衡ꎬ从而影响植物的正常生长ꎮGIB232和GIB331尽管在土壤中的养分浓度低于土壤整体的养分浓度ꎬ但它们在土壤中的养分富集程度却是最大的ꎬ养分的合成系数也是最大的ꎮ这表明GIB232和GIB331在土壤中具有高效的养分吸收和转化能力ꎬ能够将土壤中的养分有效地转化为植物可利用的形式ꎮ这种高效的养分利用能力ꎬ使得GIB232和GIB331在促进植物生长方面发挥着重要作用ꎮ赤霉素㊁油菜素内酯以及GIB232和GIB331等生长因子在促进植物生长方面各自具有独特的作用机制ꎮ它们通过调节植物体内的激素平衡㊁促进细胞伸长和分裂㊁提高光合效率以及优化养分利用等方式ꎬ共同实现对植物生长的全面调控ꎮ未来ꎬ对这些生长因子在植物生长调控中的深入研究ꎬ将为更好地理解和利用植物生长的奥秘提供重要的线索ꎮ4㊀结论2个以禾百润和碧护为代表性的处理比对照组的养分水平都要高ꎮ其中ꎬGIB232和GIB331的养分积累最多ꎻ通过对各性状的综合评价ꎬ发现GIB331和GIB232对植物生长发育的促进作用较强ꎻ其中ꎬ羟丙基-2和羟丙基-2的促生长作用最强ꎮGIB331和GIB232的总养分积累系数最大ꎮ参考文献[1]杨兴明.浅谈红豆杉种植技术及推广[J].河南农业ꎬ2023ꎬ(20):25-27.[2]张清浩ꎬ刘慧媛ꎬ曾楚祺ꎬ等.基于Citespace的红豆杉研究文献计量学和可视化分析[J].中国野生植物资源ꎬ2023ꎬ42(7):44-49.[3]张丽娜.不同立地条件对红豆杉幼苗生长的影响[J].特种经济动植物ꎬ2023ꎬ26(7):65-67.[4]朱威霖ꎬ徐超ꎬ龙婷ꎬ等.基于回归保护的东北红豆杉野生种群维持的制约因素[J].应用生态学报:1-10. [5]崔敏.秦岭红豆杉丰产栽培技术[J].林业科技情报ꎬ2023ꎬ55(2):76-79.[6]王芳伟.徽县红豆杉产业发展现状与对策[J].农业科技与信息ꎬ2023(4):135-138.[7]王博.浅析温室红豆杉育苗技术与病虫害防治[J].热带农业工程ꎬ2023ꎬ47(2):115-117.[8]窦永杰.种植密度和氮肥施用量对红豆杉幼苗生长的影响[J].现代园艺ꎬ2023ꎬ46(8):12-13ꎬ18. [9]王蕊ꎬ汤笛ꎬ张鑫丽ꎬ等.基于红豆杉多糖结构表征和生物活性相关研究进展[J].中国动物保健ꎬ2023ꎬ25(4):122-124ꎬ126.[10]刘晓军.不同立地条件对红豆杉幼苗的生长的影响[J].现代园艺ꎬ2023ꎬ46(6):28-29ꎬ32.501。
利用红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇
利用红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇【实用版】目录一、引言二、红豆杉植物愈伤组织的培养及其紫杉醇形成的初探三、紫杉醇的提取方法和过程四、影响紫杉醇提取效率的因素五、结论正文一、引言紫杉醇是一种从红豆杉植物中提取出的抗癌药物,其独特的抗癌效果使其成为目前世界上最为重要的抗癌药物之一。
然而,紫杉醇的提取过程却非常复杂,需要从红豆杉的愈伤组织中提取。
本文将介绍如何利用红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇。
二、红豆杉植物愈伤组织的培养及其紫杉醇形成的初探红豆杉植物愈伤组织的培养是提取紫杉醇的关键步骤之一。
通过适当的培养条件和激素浓度,可以促进红豆杉愈伤组织的形成,从而为紫杉醇的提取提供足够的原料。
在不同品种的红豆杉植物中,愈伤组织的发生率、发生速度和发生状况都有所不同。
同时,适量的水解酪蛋白和抗坏血酸也能促进愈伤组织的生长。
三、紫杉醇的提取方法和过程紫杉醇的提取方法主要包括化学法和生物法。
其中,生物法提取紫杉醇是最为常见的方法。
该方法主要是通过红豆杉愈伤组织细胞培养物中提取紫杉醇。
在细胞培养过程中,需要对培养基进行适当的调整,以促进紫杉醇的合成和提取。
四、影响紫杉醇提取效率的因素影响紫杉醇提取效率的因素主要包括以下几个方面:1.红豆杉品种和愈伤组织:不同品种的红豆杉植物愈伤组织的发生率、发生速度和发生状况不同,因此会影响紫杉醇的提取效率。
2.培养条件和激素浓度:适当的培养条件和激素浓度可以促进红豆杉愈伤组织的形成,从而提高紫杉醇的提取效率。
3.培养时间:培养时间的长短会影响紫杉醇的提取效率。
一般来说,培养时间越长,紫杉醇的提取效率越高。
4.提取方法:不同的提取方法会对紫杉醇的提取效率产生影响。
生物法提取紫杉醇是最为常见的方法,其提取效率较高。
五、结论总的来说,利用红豆杉的愈伤组织提取紫杉醇是一种有效的方法。
通过适当的培养条件和激素浓度,可以促进红豆杉愈伤组织的形成,从而提高紫杉醇的提取效率。
曼地亚红豆杉愈伤组织诱导条件探索
曼地亚红豆杉愈伤组织诱导条件探索柳文静;闵霞;高雅;卫静丽;史晓昀;郑冬超【摘要】该项目以曼地亚红豆杉为试材,研究外植体取材部位、激素种类及浓度组合、光照条件等培养条件对愈伤组织诱导的影响,以找出最适合曼地亚红豆杉愈伤组织生长的培养条件.实验结果发现,最适合诱导曼地亚红豆杉愈伤组织生长的激素组合为0.5 mg/L NAA+0.2 mg/L 6-BA+2 mg/L 2,4-D;最适合外植体为带芽茎段;黑暗培养相比光照培养更有利于愈伤组织生长.该项目的开展可为紫杉醇细胞培养生产体系提供理论指导.【期刊名称】《实验科学与技术》【年(卷),期】2016(014)003【总页数】5页(P175-179)【关键词】曼地亚红豆杉;培养条件;愈伤组织;诱导【作者】柳文静;闵霞;高雅;卫静丽;史晓昀;郑冬超【作者单位】四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065;四川大学生命科学学院,成都610065【正文语种】中文【中图分类】Q943.1紫杉醇(Paclitaxel)是从红豆杉属(Taxus sp.)植物中分离出的一种具有独特抗癌活性的二萜类化合物,是目前最有效的抗肿瘤药物之一[1]。
由于紫杉醇结构复杂,通过化学手段合成很难实现大规模生产,目前其来源主要是从红豆杉属植物的树皮中提取分离,然而红豆杉属植物资源短缺、生长缓慢,难以满足日益增长的临床试验需求。
近年来,利用组织细胞培养法生产紫杉醇已成为目前的研究热点,并已取得了巨大进展[2-7]。
但是要实现紫杉醇大规模生产,必须进一步解决红豆杉细胞培养生长缓慢的问题,提高细胞中的紫杉醇含量。
曼地亚红豆杉(Taxus media)是母本为东北红豆杉父本为欧洲红豆杉的天然杂交种,该物种枝叶茂盛,生长速度快,对环境适应能力强,且可全株利用,树皮和枝叶中均含有紫杉醇,可达0.04左右,相当于一般红豆杉属植物干树皮含量的2-4倍。
南方红豆杉愈伤组织培养条件的优化及紫杉醇积累的基因表达效应分析_张芳芳
·药材与资源·南方红豆杉愈伤组织培养条件的优化及紫杉醇积累的基因表达效应分析张芳芳,王 鹏,姬丹丹,向凤宁*(山东大学生命科学学院细胞工程及种质创新教育部重点实验室,山东济南 250100)摘 要:目的 优化南方红豆杉愈伤组织诱导与继代培养条件,获得含紫杉醇量高的红豆杉愈伤组织,明确紫杉醇合成相关基因的表达模式与紫杉醇量的关系。
方法 探讨了适合南方红豆杉的愈伤组织诱导及继代培养的激素组成及浓度。
比较了南方红豆杉(种胚、幼茎、幼芽)、曼地亚红豆杉(种胚)和太平洋红豆杉(种胚)不同外植体来源的愈伤组织的生长特点和紫杉醇的量,分析了不同愈伤组织紫杉醇合成相关基因的表达差异。
结果 添加3.0mg/L2,4-D的M urashige&Skoog(M S)培养基有利于南方红豆杉的诱导,诱导率高于92%。
添加2.0mg/L2,4-D与1.0mg/L6-苄基腺嘌呤(6-BA)的继代培养基有利于南方红豆杉的紫杉醇积累。
同一培养条件下,南方红豆杉种胚来源的愈伤组织紫杉醇量最高,达到干质量的0.027%。
含紫杉醇量高的愈伤组织,其紫杉醇合成途径中的牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(G GP PS)、紫杉二烯合成酶(T A SY)、紫杉烷-10β-羟化酶(T10βH)、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ-β-O-乙酰转移酶(DBA T)、苯丙氨酸氨基变位酶基因(P A M)、去苯甲酰紫杉-N-苯甲酰转移酶(DBT N BT)等酶基因的表达水平高。
结论 从南方红豆杉的种胚为外植体源获得了含紫杉醇量高的愈伤组织,提高G G PPS、T A SY、T10βH、DBA T、P AM、DBT N BT的表达水平将促进紫杉醇的合成。
关键词:红豆杉属;愈伤组织诱导;紫杉醇;基因表达中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:02532670(2010)12205805Optimization of callus culture conditions for Taxus chinensis var.mairei and effectof gene expression of Taxol accumulationZHANG Fang-fang,WANG Peng,JI Dan-dan,XIANG Feng-ning(K ey L abo ra to ry of P lant Ce ll Enginee ring and G ermpla sm Innova tion,M inistry of Educatio n,Co lleg e of Life Science,Sha ndong Univ ersity,Jinan250100,China)A bstract:Objective The callus induction and subculture condition of Ta xus chinensis var.mairei were optimized in the ex periment.Hig h Tax ol-yielding callus w as o btained,and the co rrelation betw een e xpre ssion patterns of Taxol biosy nthesis related genes and Tax ol content w as defined.Methods Optimal ho rmo ne composition and concentration for induction and subculture of callus derived from T.chinensis var.m airei w ere briefly studied.The g row th characteristics and Tax ol content of calli derived from T. chinensis var.mairei(including vitro embry os,juvenile stem s,and juvenile buds),T.med ia(vitro em-bry os)and T.brev i folia(vitro embryo s)w ere compared.Ex pression of Taxol bio synthesis related genes in the above different calli w as analyzed.Results M S Medium supplem ented w ith3.0mg/L2,4-D w as suitable for callus induction o f T.chinensis v ar.mairei,the induced rate is up to92%.Subculture medi-um supplemented with2.0mg/L2,4-D and1.0mg/L6-BA w as suitable for Tax ol biosy nthesis of T. chinensis v ar.mairei.Under the same culture conditio ns,Taxol content of calli de rived fro m vitro embry-o s of T.chinensis var.mairei w as the highest and had reached0.027%of callus dry w eight.The genes of Tax ol biosy nthesis related enzy mes—g eranylg erany l diphosphate synthase(GGPPS),taxadiene sy nthase (TAS Y),taxane-10β-hy dro xylase(T10βH),10-deacety lbaccatinⅢ-β-10-O-acetyltransferase(DBA T), pheny lalanine aminom utase(PAM),and3′-N-debenzoy ltax ol N-benzoyltransferase(DBTNBT),w ere ex-pressed at the hig h level in the high Tax ol-pro ducing callus.Conclusion Vitro em bry os can be used as the first choice explant source to obtain hig h Taxo l-yielding callus.To im pro ve gene expression level of GG-PPS,TASY,T10βH,DBA T,PAM,and DBTNBT w o uld prom ote Tax ol biosynthesis.Key words:Tax us L.;callus induction;Taxo l(paclitaxel);gene expressio n收稿日期:2010-05-07基金项目:国家自然科学基金资助项目(30771116,30970243),山东省杰出青年基金(QJ200810)作者简介:张芳芳(1986—),女,江西上饶人,硕士,主要从事药用植物细胞工程和基因工程研究。
红豆杉愈伤组织的诱导培养及紫杉醇的产生
红豆杉愈伤组织的诱导培养及紫杉醇的产生
孙珺;胡正海
【期刊名称】《西北大学学报(自然科学版)》
【年(卷),期】2000(030)001
【摘要】研究了红豆杉愈伤组织的诱导、培养及愈伤组织中紫杉醇的产生.结果表明:在以1/2 MS培养基为基本培养基的条件下,在一个较宽的生长素浓度范围内,均可诱导发生红豆杉的愈伤组织;不同类型的植物生长素IAA,IBA,NAA及2,4-D和6-BA的组合均可使红豆杉外植体30 d的愈伤组织发生率达60%以上;不同类型的激素组合以及激素的不同浓度对愈伤组织的生长及愈伤组织中紫杉醇的含量有一定影响.采用高效液相色谱法,在几组不同条件下所获得的愈伤组织中,均检测出了紫杉醇.紫杉醇的最高含量达500×10-6 mol/L,且愈伤组织中紫杉醇及三尖杉酯碱的含量均高于外植体中的含量.
【总页数】5页(P55-59)
【作者】孙珺;胡正海
【作者单位】西北大学,植物研究所,陕西,西安,710069;西北大学,植物研究所,陕西,西安,710069
【正文语种】中文
【中图分类】Q94-336
【相关文献】
1.几种氨基酸前体物对红豆杉愈伤组织的生长和紫杉醇含量的影响 [J], 翟雪霞;李友勇
2.高效液相色谱法测定东北红豆杉愈伤组织中紫杉醇的含量 [J], 张艳平;刘同祥
3.红豆杉植物和愈伤组织培养物中紫杉醇含量的检测 [J], 杜亚填;许建宇;卜晓英;于华忠;曹庸
4.植物生长调节剂对南方红豆杉愈伤组织培养和紫杉醇合成的影响 [J], 杜亚填;陈建华;许建宇;曹庸;周朴华
5.南方红豆杉外植体母株来源与培养基成分对愈伤组织生长和紫杉醇的影响 [J], 陈惠;王文科;卢英梅;白新生
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激素对南方红豆杉扦插苗主要经济指标的影响
激素对南方红豆杉扦插苗主要经济指标的影响
王济虹;姚松林;周云
【期刊名称】《贵州科学》
【年(卷),期】2005(23)1
【摘要】本文报道了赤霉素、乙烯利、ABT1和ABT2四种激素水溶液处理对修剪后的四年生南方红豆杉扦插苗的新梢长年生长量、年萌枝数、植株高年生长量、植株冠幅年生长量的影响,其中ABT1处理对一、二年生插条类型扦插苗的效果最好,ABT2对多年生插条类型扦插苗的效果最好.不同处理间的枝叶鲜重与枝长之比在0.01水平上无显著差异;枝叶鲜重与枝长呈线性关系,其关系式为Y=-
0.2435+0.1009X.并评估不同处理对扦插苗的栽培密度、单株枝叶年生长量、枝叶单位面积年生长量和最佳密度下枝叶单位面积年生长量的影响.
【总页数】6页(P67-72)
【作者】王济虹;姚松林;周云
【作者单位】贵州省生物研究所,贵州,贵阳,550009;贵州省生物研究所,贵州,贵阳,550009;贵州省生物研究所,贵州,贵阳,550009
【正文语种】中文
【中图分类】S615
【相关文献】
1.南方红豆杉扦插繁殖技术研究——Ⅲ.叶面肥与透光度对扦插苗生长的影响 [J], 傅瑞树;孙晓冬;黄琦;朱建华;徐鹭霞
2.南方红豆杉实生苗和扦插苗定植后幼树生长量比较 [J], 柯朝坤;徐玉梅;胥佳;孔琼荣
3.南方红豆杉实生苗与扦插苗生理生化特性比较研究 [J], 刘森勋;
4.南方红豆杉实生苗和扦插苗定植后生长量研究 [J], 张建军
5.不同激素处理对南方红豆杉扦插苗的影响 [J], 高银祥;于景华;祖元刚;张学科;常影;庞海河
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几种激素对东北红豆杉插穗扦插造林质量的影响
几种激素对东北红豆杉插穗扦插造林质量的影响李成福;朱玲;杨燕超;逄宏杨;李雪【期刊名称】《牡丹江师范学院学报(自然科学版)》【年(卷),期】2009(000)002【摘要】东北红豆杉是国家一级保护植物,第三纪孑遗物种,所含紫杉醇具有抗癌作用.本项研究对东北红豆杉在林内采用近自然扦插造林技术培育东北红豆杉药用林获得成功.研究结果表明:东北红豆杉扦插造林前应对插穗用ABT1号生根粉50~100 mg·L-1水溶液浸泡0.5 h或用IBA10~20 mg·L-1水溶液浸泡0.5~1.0 h,有利于生根和提高成活率,促进扦插苗的生长.【总页数】3页(P41-43)【作者】李成福;朱玲;杨燕超;逄宏杨;李雪【作者单位】黑龙江省海林林业局,黑龙江,海林157000;黑龙江省牡丹江林业科学研究所,黑龙江,牡丹江,157009;黑龙江省牡丹江林业科学研究所,黑龙江,牡丹江,157009;黑龙江省牡丹江林业科学研究所,黑龙江,牡丹江,157009;黑龙江省牡丹江林业科学研究所,黑龙江,牡丹江,157009【正文语种】中文【中图分类】S718.3【相关文献】1.激素和插穗处理对乌饭树扦插生根的影响1) [J], 陈庆生;周鹏;张敏;黄利斌;窦全琴2.东北红豆杉天然群体插穗生根力变异及扦插技术 [J], 程广有;唐晓杰;沈熙环3.外源激素和扦插时间对濒危植物永瓣藤插穗成活率的影响 [J], 朱弦;田奔;李文倩;程家寿4.激素和扦插基质对高山杜鹃插穗生根状态的影响 [J], 唐欣;屈克红;胡长玉5.不同插穗材料和处理方法对麻栎扦插成活率和内源激素等内含物含量的影响 [J], 朱文成;董玉峰;舒秀阁;任飞;李杰;宋福荣因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
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合 和浓 度 对 愈 伤 化 诱 导 及 其 愈 伤 组 织 继 代 增 殖 培 养 的 影响, 为 生产 红 豆 杉 试 管 苗 和 实 现 紫 杉 醇 工 业 化 生 产 提
供 一 定 的技 术 参 考 。
NA A5 . 0 mg / L分 别 进 行 愈 伤 诱 导 试 验 , 基 础 培 养 基 为 B, 5 ( 去掉 C u 抖的 B 5培 养 基 )+ AC O . 5 g / L+ 酪 蛋 白 l g / L +蔗 糖 2 0 g / L +琼脂 8 g / L , 每 个 处 理 接 种 愈 伤 组 织 l 6只 试 管 , 培养 3 0 d观 察 愈 伤 生 长情 况 并 称 其 鲜 重 , 并 计 算 愈 伤 组 织 生 长 值 和 愈 伤 组 织 生 长 指 数 。其 中 , 愈 伤组织生长值 ( mg ) =收 获鲜 重 一接种 鲜重 , 愈 伤 组 织
试 验 以南 方 红 豆 杉 的嫩 茎 为 外 植体 , 探讨 了 不 同 激 素 组
2 . 2 不同激素对红豆杉愈伤组织细胞继代增殖影响
2 . 2 . 1 探 讨 NAA 对 愈 伤 组 织 继 代 增 殖 的 影 响
在 试 验 基 础 上 ,提 高 NAA 浓 度 ,并 搭 配
KT O . 5 ag r / L, 选 用 NAA3 . 0 mg / L、 NAA4 . 0 mg / L、
由 于 红 豆 杉 生 长 极其 缓 慢 , 种 子 存 在 休 眠 与 后 熟 难
以繁 殖 , 内生 菌种 类 与 数 量 多 , 愈 伤 组 织 易 褐 变 及 生 长 不 稳 定 和 紫杉 醇市 场 需 求 大 、 利 润高 , 因 此 通 过 体 外 植
物 组 织 培养 获 得试 管 苗 运 用 于 观 赏 盆 景 、 工 业 木 Байду номын сангаас 和 细 胞 悬 浮 培 养 高 产 紫杉 醇都 有 巨 大 的科 研 、 商 业 前 景 。本
2 0 1 3 年1 月
J o u r n a l o f G r e e n S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y
绦 色料 技
第 1期
不 同激素对红豆杉愈伤组织诱导及增殖 的影 响
韩晓红, 李 磊, 段春红
( 武 汉 生物工 程 学院 生物 工程 系, 湖北 武 汉 4 3 0 4 1 5 )
2, 4 一 D 1 . 0 + 6 一 BA 1 . 0
( T a x u s ) 植 物 的 总称 ] , 从 中提取 的紫杉醇 以其独 特 的
治癌 机 理 和疗 效 显 著 而 风靡 全 球 , 从 而 促 成 了世 界 性 开 发 红 豆 杉 和提 取 紫杉 醇 的新 潮 流 。全 球 共 有 1 1种 红 豆
5 mg / L +蔗 糖 2 0 g / L +琼脂 8 g / L +AC l g / L +酪蛋 白 l g / L, 但 高浓度的 2 , 4 一D 易使 愈 伤 组 织褐 化 。为 了
减 缓 愈 伤 组 织 褐化 和使 细 胞 持 续 增 殖 , 继 代 时 选 用 NAA 替 代 2 , 4 一D, 继代培 养的最佳 培养基 为 : B, 5 ( 去 掉C u 2 +的 B 5培 养 基 ) +NAA 4 . O mg / L+ K TO . 5 mg / L+蔗 糖 2 0 g / L +琼 脂 8 g / L + AC 0 . 5 g / L +酪 蛋 白
l g / L。
关键词 : 南方红豆杉 ; 愈伤组 织; 诱导 ; 增 殖
中图 分 类 号 : Q9 4 2
文献标识码 : A
文章编号 : 1 6 7 4 — 9 9 4 4 ( 2 0 1 3 ) 0 1 — 0 1 7 3 — 0 3
1 引 言
红 豆杉 ( T a x u s ) 是 红 豆杉 科 ( Ta x a c e a e ) 红 豆 杉 属
杉, 分 布 于 北 半球 的 温 带 及 亚 热 带 地 区 , 在 我 国有 4个
品种 及 1个 变 种 : 东 北红豆杉 ( T. c u s p i d a t a ) 、 云 南 红 豆 杉( 丁. y u n n a n e n s i s ) 、 西 藏红豆杉 ( T. wa l l i c h i a n a ) 、 中 国 红 豆 杉 (丁 . c h i n e n s i ) 、 南 方红 豆杉 ( c h i n e n s i s v a r —
摘要 : 以 南方 红 豆 杉 ( T . c h i n e n s i s v a r m a i r e i ) 的嫩 茎 为 外 植 体 , 探 讨 了不 同激 素 对愈 伤 组 织 诱 导 及 继 代 增 殖 的影 响 。 结果 表 明 : 以嫩 茎 为 外 植 体 , 愈 伤组 织 诱导 的 最佳 培 养基 为 : B 5 +2 , 4 ~D 2 . 0 mg / I +6 一B A0 .
表 1 红 豆 杉 愈 伤 组 织诱 导 的激 素 设 计
培 养 基 编 号 激素水平/ ( mg / L )
2, 4一 D 1 . 0+ 6 一 BA 0 . 5 2, 4一 D 2 . 0+ 6 一 BA 0 . 5 2, 4一 D 3 . 0+ 6 一B A 0 . 5
2, 4 一 D 2 . 0+ 6 一 BA 1 . 0 2, 4一 D 3 . 0+ 6 一 BA 1 . 0
NAA 1 . 0+ 6 一 BA 0 . 5
ma i r e i ) , 其 中 中 国 红 豆 杉 和 南 方 红 豆 杉 为 我 国 所 特
有 。
NAA 2 . 0+ 6 BA 0 . 5 NAA 3 . 0 + 6一 BA 0 . 5 NAA 1 . 0 + 6一 BA 1 . 0 NAA 2 . 0 + 6一 BA 1 . 0 NAA 3 . 0 + 6一 BA 1 . 0