Menke体外产气法

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体外产气法评价反刍动物饲料营养价值的研究

体外产气法评价反刍动物饲料营养价值的研究

体外产气法评价反刍动物饲料营养价值的研究王芳;徐元君;牛俊丽;赵勐;张养东;张开展;卜登攀【摘要】试验旨在通过体外产气法评定反刍动物常用饲料原料的营养价值.饲料原料包括3种能量饲料(玉米、玉米皮、麸皮)和3种粗饲料(苜蓿草粉、苜蓿干草、玉米秸秆),通过体外发酵试验,测定各种饲料原料2、6、12、24 h累积产气量、体外发酵参数及营养物质降解率,并分析不同类型饲料发酵动力学参数及发酵动力学与营养成分之间的相关关系.结果表明,能量饲料中,玉米体外发酵24 h的产气量(GP24)、理论最大产气量(A)最高,产气曲线的平滑度(B)与其他能量饲料相比没有显著差异(P>0.05);玉米的干物质降解率(DMD)最高,玉米皮的中性洗涤纤维降解率(NDFD)最高,麸皮的粗蛋白质降解率(CPD)最高;粗饲料间GP24差异不显著(P>0.05),苜蓿草粉的GP24、A、DMD、CPD均最高,而粗饲料间B部分差异不显著(P>0.05);GP24和A与粗蛋白质(CP)、中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、灰分(Ash)均呈极显著负相关关系(P<0.01).综上所述,不同类型饲料间产气量及动力学参数存在显著差异,能够为奶牛日粮配制提供参考.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2016(043)001【总页数】8页(P76-83)【关键词】体外产气法;能量饲料;粗饲料;营养价值【作者】王芳;徐元君;牛俊丽;赵勐;张养东;张开展;卜登攀【作者单位】中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;北京中地种畜有限公司,北京100028;中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,动物营养学国家重点实验室,北京100193;CAAS-ICRAF农用林业与可持续畜牧业联合实验室,北京100193;东北农业大学食品安全与营养协同创新中心,哈尔滨150030【正文语种】中文【中图分类】S963.3精饲料是反刍动物日粮的重要组成部分,其品质的优劣直接关系到日粮的营养水平。

海姆立克急救法ppt

海姆立克急救法ppt

检查口腔,如异物已经被冲出,迅速用手指 从口腔一侧钩出。
呼吸道异物取出后应及时检查呼吸心跳,如 无,应立即行心肺复苏术。
成人“海姆立克”急救手法(孕妇)
若患者为即将临盆之孕妇或非常肥胖致施救者双手 无法环抱腹部做挤压,则在胸骨下半段中央(CPR按 压部位)垂直向内做胸部按压,直到气道阻塞解除。
自己是受害者,孤立无援
AHA的BLS教程: 1.施救者站在或跪在患者后面,
并将双手环绕在患者腰部。 2.一手握拳 3.将握拳的拇指侧紧抵患者腹
部,位于脐上和胸骨下的腹 中线上。
红十字会教程: 用左手将病 人背部轻轻推向前,使病人 处于前倾位,头部略低,嘴 要张开,有利于呼吸道异物 被排出。
另一手置于拳头上并握 紧,双手急速、冲击性地、 向内上方压迫其腹部,反复 有节奏、有力地进行,以形 成气流把异物冲出。
婴儿呼吸道异物窒息急救方法
AHA的BLS教程:若是小於1岁以下之婴儿,有呼吸 道异物,则不可做哈姆立克急救法,以免伤及腹腔内 器官,应改为拍背压胸法。方法为:一手置于婴儿颈 胸部(开放气道),另一手置于婴儿颈背部,将婴儿 骑跨在操作者前臂。
翻转后仍将婴儿趴在操作者前臂,依靠在操作者的 大腿上,头部稍向下前倾略低于胸部。在其背部两肩 胛骨间用掌根拍背5次,依患者年纪决定力量的大小。 小心托住婴儿的头部和颈部,将婴儿翻正。操作者的 前臂靠在大腿上,保持婴儿的头部低于其躯干。在婴 儿胸骨下半段,用食指及中指压胸5次,以每秒钟一 次的速度重覆上述动作直到异物吐出或变得没有反应。
AHA的BLS教程: 4.另一只手握住握拳的手,向
上快速按压患者腹部。 5.反复快速按压,直到把异物
从气道排出。 6.每一次新的快速按压都应该
有独立的明确操作,以便于 解除梗阻。

利用体外瘤胃发酵法评价桑叶与羊草的组合效应

利用体外瘤胃发酵法评价桑叶与羊草的组合效应

利用体外瘤胃发酵法评价桑叶与羊草的组合效应罗阳;王洪荣;侯启瑞【摘要】本试验旨在利用体外瘤胃发酵法研究不同比例的桑叶与羊草之间的组合效应,从而筛选出两者之间的最佳组合比例.将桑叶和羊草分别以0:100(T0组)、20:80(T20组)、40:60(T40组)、60:40(T60组)、80:20(T80组)、100:0(T100组)的比例混合后作为底物,进行连续72 h的体外产气培养和体外批次培养试验.结果表明:1)随着底物中桑叶比例的提高,理论产气量、累积产气量、培养液微生物蛋白(MCP)浓度和体外有机物消化率(IVDOM)都有升高的趋势;2)在72 h时,T100组的理论最大产气量、累积产气量和IVDOM都显著高于其他各组(P<0.05),T60和T100组的培养液MCP浓度显著高于其他各组(P<0.05);3)在48和72 h时,T60、T80和T100组培养液pH显著低于其他各组(P<0.05);4)在72 h时,T60、T80和T100组培养液的总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸浓度没有显著差异(P>0.05),但都显著高于其他各组(P<0.05);5)在6、12和72 h时,T60、T80和T100组的培养液氨氮(NH3-N)浓度显著高于其他各组(P<0.05);6)T60组的多项组合效应(MFAEI)要高于其他各组.综上所述,桑叶与羊草的组合能够改善体外瘤胃发酵特性,即存在正组合效应,其中桑叶与羊草的最佳比例为60:40.%This experiment aimed to use in vitro ruminal fermentation method to investigate the associative effects of different combinations of mulberry leaves ( ML) and Leymus chinensis ( LC) , and screened the opti-mum combination ratios of ML and LC. ML and LC were mixed at the ratios of 0:100 ( T0 group) , 20:80 ( T20 group) , 40:60 ( T40 group) , 60:40 ( T60 group) , 80:20 ( T80 group) and 100:0 ( T100 group) , re-spectively. The mixtures were used as the fermentation substrate and incubated in vitro for 72 h for an in vitro fermentation gasproduction test and a batched in vitro fermentation test. The results showed as follows:1) the-ological maximum gas production, accumulated gas production, microbial protein ( MCP ) concentration in culture fluid and in vitro digestibility of organic matter ( IVDOM ) had increasing trends with the increase of ML ratio in substrate;2) at 72 h, theological maximum gas production, accumulated gas production and IV-DOM in T100 group were significantly higher than those in other groups ( P<0.05) , and MCP concentration in culture fluid in T60 and T100 groups was significantly higher than those in other groups ( P<0.05);3) at 48 and 72 h, culture fluid pH in T60, T80 and T100 groups was significantly lower than that in other groups ( P<0.05);4) at 72 h, total volatile fatty acid ( TVFA) and acetate concentrations in culture fluid in T60, T80 and T100 groups had no significant differences ( P>0.05) , but they were all significantly higher than those in other groups ( P<0.05); 5) at 6, 12 and 72 h, the concentration of ammonia nitrogen ( NH3-N) in culture fluid in T60, T80 and T100 groups was significantly higher than that in other groups ( P<0.05);6) the multi-ply factor associative effect index ( MFAEI) in T60 group was higher than that in other groups. In conclusion, the combination of ML and LC can improve in vitro fermentation characteristics, they have associative effect, and their optimum combination ratio is 60:40.【期刊名称】《动物营养学报》【年(卷),期】2018(030)006【总页数】10页(P2359-2368)【关键词】桑叶;羊草;体外瘤胃发酵法;组合效应【作者】罗阳;王洪荣;侯启瑞【作者单位】扬州大学动物科学与技术学院,扬州 225009;扬州大学动物科学与技术学院,扬州 225009;中国农业科学院蚕业研究所,镇江 212018【正文语种】中文【中图分类】S816桑(Morus alba L.)是我国传统的药食兼用植物[1]。

体外法评价活性酵母及其发酵饲料对瘤胃发酵参数的影响

体外法评价活性酵母及其发酵饲料对瘤胃发酵参数的影响

体外法评价活性酵母及其发酵饲料对瘤胃发酵参数的影响张政;张棋炜;杨晶晶;高民;胡红莲;刘大程【摘要】本研究选择7株酿酒酵母菌(Saccharom yces cerevisiae,编号为XR4、YL5、YN7、XI 8、BC、SL、AQ)、5株产朊假丝酵母菌(Candida utilis,编号为SC18、SR12、Y J2、YD6、BY)及1株热带假丝酵母(Candida tropicalis,编号为BR),采用体外产气法研究其对体外瘤胃发酵参数的影响.结果显示,与对照组相比,活性酵母菌株对产气量均未产生显著影响(P>0.05);酵母发酵饲料SC18、XR4、BY、AQ和BC组产气量显著升高(P<0.05),且这5组产气量增长率均优于其对应的活性酵母组(P<0.05).13株酵母菌中的10株活性酵母及其发酵饲料均能使菌体蛋白含量显著增加(P<0.05),且大部分活性酵母菌蛋白增长率均高于其对应的发酵饲料(P<0.05).活性酵母及其发酵饲料对氨态氮含量均未产生明显影响(P>0.05).活性酵母YD6、BR、SC18、YL5、XR4、SR12、BY、BC组总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组(P<0.05),酵母发酵饲料YD6、BR、Y J2、SC18、SR12、SL、YL5、XR4组总挥发性脂肪酸含量显著高于对照组(P<0.05).综上所述,活性酵母可显著提高菌体蛋白含量及挥发性脂肪酸含量,其中BY、XR4、BC效果更佳;酵母发酵饲料可显著提高产气量、菌体蛋白含量、挥发性脂肪酸含量,其中SC18、BY、BC效果更佳;酵母发酵饲料在增加产气量、总挥发性脂肪酸含量上效果要优于其活性酵母.%This study was aimed to investigate the effect of active yeast and yeast fermented feeds on rumen fermentation parameters in vitro.13 strains active yeasts and their fermented feeds (7 strains of Saccharomyces cerevisiae,namely XR4,YL5,YN7,XL8,BC,SL and AQ;5 strains of Candida utilis,namely SC18,SR12,YJ2,YD6 and BY,and 1 strains of Candida tropicalis,namely BR) were chosen and rumen fermentation parameterswere measured by in vitro gas production technique.The results showed that:There was no significant effects of active yeasts on gas production (P >0.05),however,the gas production of SC18,XR4,BY,AQ and BC groups was significantly increased by the fermented feeds (P<0.05).Meanwhile,the gas production rate of those fermented feeds was significantly higher than the corresponding active yeasts (P<0.05).10 yeast strains and their fermented feeds significantly increased the bacterial crude protein production (P<0.05),and the protein growth rate of most of these active yeasts was higher than that of fermented feeds (P<0.05).The activie yeasts and fermented feeds showed no significant effect on ammoniacal nitrogen content (P>0.05).Active yeast (YD6,BR,SC18,YL5,XR4,SR12,BY and BC) and yeasts fermented feeds (YD6,BR,YJ2,SC18,SR12,SL,YL5 and XR4) could significantly increase the total VFAs comapred to control group (P<0.05).In conclusion,active yeast could significantly increase the contents of bacterial crude protein and total VFAs,especially the BY,XR4 and BC.Gas production,bacterial crude protein and VFAs were significantly increased by fermented feeds,especially SC18,BY and BC.Fermented feeds had shown better effect on the increament of the gas production and VFAs compared to active yeasts.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2017(044)009【总页数】9页(P2629-2637)【关键词】活性酵母;酵母发酵饲料;体外产气法;瘤胃发酵参数【作者】张政;张棋炜;杨晶晶;高民;胡红莲;刘大程【作者单位】内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,呼和浩特010018;内蒙古农牧业科学院动物营养研究所,呼和浩特010030;内蒙古农牧业科学院动物营养研究所,呼和浩特010030;内蒙古农业大学兽医学院,呼和浩特010018;农业部动物疾病临床诊疗技术重点实验室,呼和浩特010018【正文语种】中文【中图分类】S816.7近年来,学者们一直致力于活性酵母和酵母发酵饲料的研究,旨在通过调控瘤胃发酵功能来提高反刍动物生产性能。

不同浓度枯草芽孢杆菌对体外瘤胃发酵特性的影响

不同浓度枯草芽孢杆菌对体外瘤胃发酵特性的影响

不同浓度枯草芽孢杆菌对体外瘤胃发酵特性的影响李月明;栾嘉明;张敏;金英海;夏广军;耿春银【摘要】本研究利用体外产气量法,以生产中较为常见的TMR(精粗比60:40)为发酵底物,通过单因素试验设计,研究了低、高剂量(1.14×1010、2.27×1010 CFU/kg)枯草芽孢杆菌对体外发酵12、48 h瘤胃产气动力学参数、瘤胃发酵参数等指标的影响;同时根据24 h产气量预测枯草芽孢杆菌对底物代谢能值(M E)、有机物消化率(OMD)及微生物蛋白(MCP)产量的影响,旨在为其合理应用提供理论依据.结果显示:在产气动力学方面,与对照组(CON)相比,低剂量组(T1)和高剂量组(T2)均显著提高了24、48 h的产气量(P<0.05),且T2组显著高于T1组(P<0.05);与对照组相比,T1组发酵12 h甲烷(CH4)含量显著增加(P<0.05),T2组无明显变化(P>0.05).在瘤胃发酵参数方面,与对照组相比,T1组12 h各发酵参数均无显著变化(P>0.05),T2组氨氮(NH3-N)浓度显著增加(P<0.05),但其他发酵指标均无显著变化(P>0.05);T1组发酵48 h丁酸及戊酸含量显著降低(P<0.05),T2组pH显著降低(P<0.05)、总挥发性脂肪酸含量显著升高(P<0.05);T1及T2组其他48 h瘤胃发酵指标均无显著变化(P>0.05).T1、T2组OMD、ME及MCP产量均显著高于对照组(P<0.05);T2组OMD和ME均显著高于T1组(P<0.05).综合上述结果,不同浓度的枯草芽孢杆菌对精粗比为60:40的TMR发酵参数均有一定程度的改善,但其效果存在一定的差异,高添加量(2.27×1010 CFU/kg)的效果更好.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2019(046)004【总页数】7页(P1031-1037)【关键词】芽孢杆菌;体外产气法;瘤胃发酵【作者】李月明;栾嘉明;张敏;金英海;夏广军;耿春银【作者单位】延边大学农学院 ,延吉133000;延边大学农学院 ,延吉133000;延边大学农学院 ,延吉133000;延边大学农学院 ,延吉133000;延边大学农学院 ,延吉133000;延边大学农学院 ,延吉133000【正文语种】中文【中图分类】S816.7芽孢杆菌制剂作为一种潜在的抗生素替代品,与酵母菌、乳酸杆菌相比,具有能以孢子形式存在及可耐受高温、高压、强酸、强碱、酶、药物等不良环境的特点[1],其在动物生产中的应用前景更为广泛。

牛羊类反刍动物饲料的营养成分评定

牛羊类反刍动物饲料的营养成分评定

牛羊类反刍动物饲料的营养成分评定1 饲料营养成分评定方法1.1 常规成分分析法我国目前沿用的饲料成分常规分析法是德国人Hennebery和Stohmann于1862年在Weende实验站提出的概略养分分析方法。

该方法将饲料成分划分为水分、粗蛋白质、粗纤维、粗脂肪、粗灰分、无氮浸出物6大营养成分来评定饲料的营养价值。

由于每一类都可细分且结构复杂,所以称为“粗养分”。

Weende分析方法是饲料营养价值评定的基础,自诞生以来就在饲料的营养价值评定中起着十分重要的作用,但该方法对纤维成分的划分很不明确,不能很好地区分纤维素、半纤维素和木质素。

1.2 范式纤维分析法范氏(Van Soest)分析方法是在Weende分析方法的基础上建立起来的,对粗纤维和无氮浸出物这两个指标进行了修正和重新划分。

对于反刍动物来讲,仅用常规营养成分来评价粗饲料的营养价值是不够的,因为粗饲料的消化率与纤维物质关系密切,而粗纤维并不能完全代表所有的纤维物质,粗纤维除了包含所有的纤维素外,还包含部分半纤维素和木质素。

在评定饲草和纤维性饲料时,一旦测出饲料的NDS(中性洗涤可溶物)、ADF(酸性洗涤纤维)、NDF(中性洗涤纤维)、ADL(酸性洗涤木质素),就可以单独或配合使用这些测定值来评定饲料的营养价值。

邓卫东等研究表明,饲料干物质体外消化率与NDF呈极显著负相关(P<0.01),与CP含量呈显著正相关,而且粗饲料干物质体外消化率(IVDMD)与CP、ADF和ADL含量之间存在显著的回归关系,回归方程分别为:Y=103.678-1.981×ADF+2034×ADL(R2=0.897);Y=18.083+1.650×CP(R2=0.813)。

VanSoest分析方法对动物纤维性物质营养研究和高产奶牛饲料营养价值评定的发展和进步作出了历史性贡献。

但是由于反刍动物具有特殊的消化道结构及消化生理,因此仅根据化学分析很难说明反刍动物对饲料的消化和利用情况,因而不能较好地反映饲料的营养价值,在使用过程中存在一定的局限性。

连续培养瘤胃模拟发酵的工作参数设置研究进展

连续培养瘤胃模拟发酵的工作参数设置研究进展

连续培养瘤胃模拟发酵的工作参数设置研究进展伍梦楠;沈维军;张佩华;陈东【摘要】体外培养法作为反刍动物营养学研究的重要方法,主要有批次培养法和连续培养法两种。

由于连续培养法能够更好地模拟瘤胃内发酵情况,其应用也更为广泛。

但连续培养瘤胃模拟装置的主要运行参数多,如温度、pH、稀释率、缓冲液与瘤胃液接种比、搅拌速率与方式等,且不同运行参数设置以及参数的组合对试验结果影响较大,因此作者在总结前人研究结果的基础上,就不同工作参数对连续培养瘤胃模拟发酵过程中挥发性脂肪酸、干物质消失率、pH、酶活、原虫数量、微生物蛋白等指标的影响进行了综述。

%In vitro culture method is an important way to research in ruminant dietetics,including batch and continuous culture methods.Because the continuous culture method can better simulate the conditions of fermentation in rumen,it was applied more widely.There are many operation parameters of rumen simulation technique involved in continuous culture,such as temperature, pH,dilution rate,the proportion of buffer to rumen fluid,stirring rate andway,meanwhile,dif-ferent operation parameters and their combinations will have a great influence on the fermentation results.On the basis of summarizing the results of previous studies,the authors review the effects of different parameters on volatile fatty acid,dry matter disappearance rate,pH,enzyme activity,number of protozoa and microbial protein,in dual-flow continuous culture system in this paper.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2017(044)001【总页数】7页(P106-112)【关键词】体外培养;连续培养系统;运行参数【作者】伍梦楠;沈维军;张佩华;陈东【作者单位】湖南农业大学动物科学技术学院,长沙 410000;湖南农业大学动物科学技术学院,长沙 410000;湖南农业大学动物科学技术学院,长沙 410000;湖南农业大学动物科学技术学院,长沙 410000【正文语种】中文【中图分类】Q482反刍动物营养传统研究方法主要有体内法或半体内法,均需要利用活体动物进行试验。

体外产气法和尼龙袋法测定饲料营养成分的比较

体外产气法和尼龙袋法测定饲料营养成分的比较

体外产气法和尼龙袋法测定饲料营养成分的比较摘要:以玉米、豆粕、啤酒糟和玉米秸青贮为对象,分别测定了每种饲料的体外产气参数和瘤胃尼龙袋发酵参数,比较2种方法测定饲料营养成分发酵的异同及相互关系。

结果表明,2种方法在评价玉米干物质(dry matter,dm)和有机物(organic matter,om),豆粕dm,啤酒糟om 48 h消失率方面存在显著差异(p瘤胃尼龙袋技术(in situ nylon bag technique, isnbt)是一种评定饲料在瘤胃内降解速度和程度的方法,因其简便易行、成本低,且能提供较可靠的参数,成为现今评定反刍动物饲料营养价值的重要方法,已得到广泛应用,但对大量样品进行评价时,会受到时间及动物数量的限制[1]。

体外产气量法(in vitro gas production technique,ivgp)是模拟静态的瘤胃发酵,依据发酵与产气高度相关的体外研究方法。

自menke等[2]成功应用该技术预测发酵底物的营养价值以来,因其简便、经济、评价效率高等优点,现已广泛用于饲料营养价值的评定。

但体外产气法作为一种体外模拟技术,试验环境有别于动物实际生理状况(如发酵的累计),同时各种类型的饲料产气量不同,且产气量并不能直接平衡不同种饲料之间的降解程度[3]。

为比较上述2种方法评定不同饲料营养成分的发酵特点及两种方法评价参数间的相互关系,特进行本次研究。

1 材料与方法1.1 试验动物4头健康,年龄为21月龄,体重420±30 kg,装有永久性瘤胃瘘管的利木赞×复州黄牛杂交阉牛为试验动物。

试验在中国农业大学肉牛研究中心实验基地(北京大兴区魏善庄镇)——金维福仁清真食品有限公司肉牛养殖场进行。

1.2 日粮与饲养管理试验牛日粮配制参照nrc(1996)肉牛营养需要配成全混合日粮(total mixer ration,tmr),日粮组成及营养成分见表1。

试验牛在牛棚内栓饲,单槽饲养,每天08∶30和16∶30分2次饲喂,自由饮水。

体外产气法评定黔北麻羊常用饲料营养价值研究

体外产气法评定黔北麻羊常用饲料营养价值研究

体外产气法评定黔北麻羊常用饲料营养价值研究韩晓洁;李凌云;莘海亮;田兴舟;段永邦;赵丽丽;吴文旋【摘要】试验以黔北麻羊为瘤胃液供体,以麦麸、DDGS、鱼粉、玉米皮、米糠、豆腐渣和青干草、麦冬草、黑麦草、高羊茅草为精粗饲料,应用瘤胃体外产气法检测累积产气量(GP)、发酵参数(a、b、c)和有机物消化率(OMD),评定其营养价值.结果表明,精饲料、粗饲料GP均随时间的延长而增加(P<0.05).至发酵72 h结束,精饲料中GP、OMD值以玉米皮(63.89 mL、64.70%)、麦麸(57.07 mL、61.75%)、豆腐渣(56.36 mL、60.01%)较高,具有较高的营养价值,DDGS(47.59 mL、46.38%)次之,鱼粉(30.51 mL、32.47%)、米糠(10.85 mL、18.87%)相应较低(P<0.05);粗饲料中GP、OMD值以黑麦草(44.31 mL、49.63%)最高,营养价值最高;高羊茅草(37.01 mL、41.32%)、青干草(34.21 mL、40.97%)次之;麦冬草(28.82 mL、35.08%)最低(P<0.05).精饲料中玉米皮、豆腐渣和麦麸营养价值较高,粗饲料中黑麦草营养价值较高.本研究结果可为黔北麻羊日粮配制提供参考.【期刊名称】《家畜生态学报》【年(卷),期】2014(035)004【总页数】5页(P40-44)【关键词】瘤胃体外产气;产气量;有机物消化率;饲料;黔北麻羊【作者】韩晓洁;李凌云;莘海亮;田兴舟;段永邦;赵丽丽;吴文旋【作者单位】贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;凯里畜牧兽医办公室,贵州凯里556000;贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025;贵州大学动物科学学院,贵州贵阳550025【正文语种】中文【中图分类】S811.6羊作为反刍动物,在营养生理上与单胃动物存在很大的区别,最突出表现在其瘤胃的独特功能。

Menke体外产气法

Menke体外产气法

Menke体外产气法(Syringe系统)——管子(一)基础知识体外产气法主要理念通过体外产气装置模拟瘤胃发酵体外产气系统组成体外产气装置:产气管(相当于独立的瘤胃)、恒温水浴摇床(模拟瘤胃温度和蠕动速度);微生物培养液:由瘤胃液与人工唾液按1:2的体积比混合,搅拌均匀而成影响实验成败的主要因素实验过程中产气装置的温度,整个操作过程的厌氧状态、微生物活力是影响实验成败的关键(二)试验前准备试配产气管①更换注入口处老化的塑胶管;②试配外管和内塞,要求推拉自如又不过松(现已将可匹配的外管和内塞统一编号,依号装配即可)。

称量样品①产气管编号;②用自制的带长柄的称量纸,准确称取待测样品约200mg(DM),置于体外产气管底部,注意不要让样品进入产气管注入口和沾染30ml以上管壁;③样品称取完毕后,管塞上均匀涂抹凡士林,将管塞塞回对映的外管,扣好夹子。

配制原液正式实验前一天,配制好人工唾液中的微量元素溶液(A液)、缓冲液(B液)、常量元素溶液(C液)和刃天青溶液(D液)(可过量配制,常温下存放,配制方法见附表1)。

其它①调试恒温水浴摇床的温度至39±0.5℃,摇动速度5×10转/min,如果使用两个恒温水浴摇床要求两者温度和摇动速度尽量一致,另外还需要将一多联水浴锅温度调至39±0.5℃(以实际量取温度为准);②准备二层、四层、六层纱布各2-4块(纱布可重复使用);③贮备两瓶热水,准备收集瓶(收集和过滤瘤胃液用)、水桶、温度计,以备次日取瘤胃液用。

(三)正式试验配制人工唾液①将恒温水浴摇床、多联水浴锅打开后;②计算人工唾液需要量:体外培养时每根产气管内微生物培养液的体积是30ml(10ml瘤胃液和20ml人工唾液),依据试验设计的产气管数计算人工唾液和瘤胃液的需要量(预留20%,以备操作手法不当造成浪费);③配制还原剂(E液,见附表1);④按附表2的顺序和比例将配制好的各原液混合后,置入水浴摇床或水浴锅内,通入CO2气体(气流不易过大),使人工唾液由蓝色转变为粉红色,最终为无色。

反刍动物

反刍动物

三、实施计划
利用实验室的恒温水浴摇床、购买培养瓶、
塑料三通阀、玻璃注射器、微电脑时控开关等, 根据实施方案中人工瘤胃装置设计,制作反刍动 物人工瘤胃。
四、可行性分析
本试验由从事动物营养的老师和具有电器装
备与修理经验的老教师共同指导,试验组同学对 本试验兴趣浓厚,可以确保试验的顺利完成 。
四、创新点和预
恒温水浴摇床
图1 拟装置的反刍动物人工瘤胃简图
人工瘤胃的装置主要功能
恒温水浴摇床中的水温恒定在38-39℃,模拟了反刍动物 瘤胃温度恒定(38-39℃)的特点。
恒温水浴摇床的摆动,模拟反刍动物瘤胃瘤胃的收缩功能。 注射器收集瘤胃气体。饲料在反刍动物瘤胃中消化的同时, 产生大量的气体,而饲料在瘤胃内发酵产生的气体的多少, 常常用来评定饲料的消化情况。所以,用注射器收集饲料 发酵产生的气体,通过收集气体的量,来评价饲料在瘤胃 中的消化与降解情况。 配制微电脑时控开关。微电脑时控开关起到定时的作用。 用它可控制饲料在瘤胃中的降解的时间。
一、立项依据
饲料进入反刍动物瘤胃后,由于微生物的 发酵,产生大量的CO2、CH4气体。因此,饲料在 瘤胃内发酵产生的气体的多少,常常用来评定饲 料的消化情况。体外产气法是目前发达国家采用
最多的用来评价放牧家畜饲草饲料饲用价值的技
术之一。
一、立项依据
大量研究表明,将饲料样品用瘤胃液培养24h, 其产气量(CO2和CH4)与体内消化率测定值之间 存在强的相关关系。根据这一原理,Menke(1998) 提出用人工瘤胃产气法来测定有机物质消化率和 单个饲料或混合饲料的代谢能值。卢德勋(2003) 提出了依多项指标综合指数评价瘤胃发酵,为更 进一步用人工瘤胃测定反刍动物对饲料的消化提 供了综合评价手段。 因此,探讨制作反刍动物人工瘤胃装置,对 研究反刍动物对饲料的消化提供技术手段。

采用尼龙袋法和体外产气法对白酒糟和醋糟营养价值的评定和比较

采用尼龙袋法和体外产气法对白酒糟和醋糟营养价值的评定和比较

采用尼龙袋法和体外产气法对白酒糟和醋糟营养价值的评定和比较2011年9月第3期(总第152期)草食家畜(季刊)采用尼龙袋法和体外产气法对白酒糟和醋糟营养价值的评定和比较薄玉琨,杨红建,王雯熙,刘华,王锐&lt;1.中国农业大学动物科技学院,北京100193;2.新疆农业大学动物科学学院,新疆乌鲁木齐830052)摘要:本研究采用尼龙袋法和体外发酵产气法对白酒糟和醋糟的营养成分,代谢能,瘤胃降解率,产气动力学特性进行了比较研究.结果表明,白酒糟粗蛋白质(CP)含量为154.33.4e4kgDM,代谢能(ME)估测值为6.730.29I'J,l【gDM,CP瘤胃有效降解率(ED)为D.36D102;醋糟的CP含量为50.12.0gDM,ME估测值为5.750.03kJ/kgDM,CP的ED值为0.120.01;醋糟的粗脂肪,纤维,钙含量均显着高于白酒糟(P&lt;O.05),但白酒糟在CP含量,ME值,瘤胃降解率消化率要显着高于醋糟(氏0.05).总而言之,白酒糟和醋槽的NDF和ADF瘤胃消化率较高,具有成为过瘤胃蛋白饲料原料的必要条件,是优质的饲料资源;白酒糟的总体营养价值优于醋糟.关键词:尼龙袋法;体外产气法;白酒糟;醋糟中图分类号:$816.15文献标识码:A文章编号:1003—6377(2011)03—0034-05新疆地区是我国重要的牛羊产品生产区.2008年奶牛和肉牛存栏336.0万头,绵羊和山羊存栏3025.7万只,生产牛肉32.4万t,羊肉46.0万t,牛奶和羊奶共142_3万t,羊毛8.4万t.但由于其特定的气候与地理条件,大豆,玉米等常规饲料原料产量难以满足新疆草食动物畜牧业的发展需要.所以,因地制宜,充分开发利用当地的非常规饲料资源是降低畜禽养殖成本,提高经济效益的一条重要途径.发达国家和一些饲料资源短缺的地区十分重视非常规饲料资源的开发利用,如美国已测定完成杏仁皮和橡树籽等超过400种非常规饲料的营养价值【".谷类发酵后产生的白酒糟和醋糟属糟渣类非常规饲料饲料.其中,白酒糟是价格低廉的酿酒副产品,为淡褐色,具有令人舒适的发酵谷物的味道,略具烤香及麦芽昧.据文献报道,白酒糟的基础营养成分为CP130~275g/ksDM,粗纤维160~280g/kgDM,粗脂肪35-11Og, kgDM,灰分35—155g/kgDM,磷1-4.5g/kgDM,钙1-8.g/ kgDMt21.研究发现,用白酒糟代替部分精料饲喂肉牛,能够增加育肥牛的体重,降低饲料成本13].醋糟是酿醋工业主要的下脚料,据报道,其基础营养成分为CP60-100g/kgDM,粗脂肪20-50g/kgDM,无氮浸出物200-300g/kgDM,粗灰分130~170g/kg收稿日期:2011-04—20基金项目:国家肉牛牦牛现代产业技术体系(nycytx-38). 作者简介:薄玉琨(1985一),男,硕士,主要从事非常规饲料的营养价值评定研究.DM,钙2.5.5g/kgDM,磷1.6-3.7g/kgDM嗍.目前,用瘤胃尼龙袋法和体外产气法测定和比较白酒糟或醋糟在反刍动物饲养中营养价值的研究还未见报道.本文旨在利用这两种方法对白酒糟和醋糟直接作为饲料原料的营养价值和可消化性进行评定和比较,为合理地利用白酒糟和醋糟,弥补新疆地区常规饲料的短缺提供理论与应用依据.1材料和方法1.1原料的选择和处理本试验所用白酒糟和醋糟在2010年1月收集于新疆石河子,奎屯,乌鲁木齐等地的肉牛养殖户养殖现场.新采集的白酒糟和醋糟含水分较多.白酒糟呈褐色,质地柔软,有类似青贮的香味.醋糟为深褐色,有粘性.将两种原料晒干后粉碎,过20目筛,密封避光保存.1.2基础营养成分分析本研究采用AOAC(1999)介绍的方法嘲对饲料中干物质(DM),有机物(OM),粗脂肪(EE),粗蛋白(CP),钙和总磷的含量进行了测定.无灰分中性洗涤纤维(NDF)和酸性洗涤纤维(ADF)采用V anSoe~t等(1991)的方法进行测定网.1-3代谢能的计算为得到更为准确的代谢fl~(ME)数据,本实验采用6种公式来计算代谢能值.1-4体外试验1.4.1体外发酵利用本研究室研制开发的AGRS—I型体外发酵产气自动记录装置fAutomatedGas2011年9月第3期(总第152期)草食家畜(季刊) RecordingSystem,AGRS)tn进行体外发酵试验,其产气原理详见参考文献[al.试验开始前,参照Menkeand Steingass(1988)所推荐的方法配制缓冲液,配制完成后向其中持续注入CO2,至pH为6.8为止,置于39.【二水浴中恒温静置,备用.瘤胃液采集自2头干奶期瘤胃瘘管奶牛,每头每日饲喂25kg混合日粮(饲料每千克含有83g苜蓿干草,167g羊草,250g玉米青贮和500g精料),平均分成两份.每日06:00和18:00各饲喂一次.试验牛分栏饲养,充足饮水.晨饲后1h采集瘤胃液.经四层纱布过滤后,滤液置于于39℃水浴中保温,通入N2,不断搅拌,备用.在发酵液配制前,向每个150mL厌氧发酵瓶中加入0.5g待测饲料样品,在持续通入N2的同时,将50mL 预热好的缓冲液和25mL瘤胃液先后注射入发酵瓶中,加塞密封,并通过输液器导管连通AGRS发酵系统和采样气袋,在39℃发酵72h后,将发酵瓶中的发酵液转移至离心管中,10,000xg离心10min后,取上清液用于氨态氮(NH,一N),挥发性脂肪酸(VFA)的测定,气袋中收集的气样用于CO,CH,Hz浓度的测定.采用指数函数模型Y=a+b(1一e-d)f1ol通过非线性拟合出产气发酵参数.其中Y为AGRS系统在t时间记录到的累积产气量,a为快速降解部分的产气量,b为缓慢降解部分的产气量,C为缓慢降解部分的产气速率.l-4.2NH,一N,VFA和发酵气体浓度的测定NH,一N的浓度通过酶标仪进行测定(V erdouw,1978),波长设为660nm[itl.发酵液中VFA浓度和发酵气体中C0,CH, H:浓度参照本研究室Zhang和Y ang(2011)所使用的气相色谱方法嗍测定.1.4.3DM,ADF和NDF的体外消化率的测定参照Tilly和Terry(1963)两步法来测定体外干物质消化率", 首先配制新鲜瘤胃液和缓冲液(1:lv/v)的混合溶液,持续通入CO:,39℃水浴静置备用.称取0.5g待测饲料于150mL发酵瓶中,每个饲料样品有两个平行组.向发酵瓶中加入50mL上述混合溶液,39℃厌氧发酵48h后.将一个平行组的发酵瓶中的发酵液转移至离心管中, 10,000xg离心10min,离心的剩余物在65℃下烘干和称重后,测定其DM,ADF和NDF含量,计算获得瘤胃液培养一步法体外DM消化率(IVDMD1),NDF消化率(NDFD)和ADF消化率(ADFD).向发酵结束后另一平行组发酵瓶中注射2mL酸性胃蛋白酶溶液,密封,继续在39℃厌氧发酵24h后,将发酵液转移至离心管中.10,000xg离心10min测定其中DM含量,得到两步法体外干物质消化率(IVDMD2).1.5瘤胃尼龙袋法测定干物质和蛋白质的消失率按照岳群等(2007)的方法"4】,准确称取3g样品,小心装入尼龙袋中(规格7cmxllca,孔径42m),在瘤胃中消化0,2,6,12,24,36和48h后取出.试验用牛为3头健康,体重约600kg的装有永久瘤胃瘘管的夏南牛(夏洛莱×南阳牛).提供维持13粮,包括2.5kg干草,l0kg青贮和5kg精料,平均分成三份,每1306:00,12:00和18:00饲喂.取出的尼龙袋于65℃中烘干不少于48h,直至恒重,称量并计算剩余DM含量,收集尼龙袋中饲料残余物并测定其CP含量,根据公式DR=a+b(1一e1和ED=a+b[c/(c+k)]t"1(rskov和McDonald,1980)计算DM和CP的动态降解参数(a,b和C)及有效降解率(ED).其中DR为t时间内DM的消失率,a为快速降解部分,b为缓慢降解部分,C为b的降解速率,k为瘤胃流通速率,本试验中k值取0.06/ht.1.6统计和分析先用Excel进行初步的数据处理,再使用SAS软件的ANOV A和T检验对数据进行分析.2结果2.1基础营养成分测定结果(见表1)表1白酒糟和醋糟基础营养成分的测定结果g,kgDM注:同列中肩标不同者表示差异显着(P&lt;0.05).无肩标者表示同列中数据差异不显着.除表4外,下同.白酒糟和醋糟的基础营养成分如表1所示.其中,CP和磷的含量为白酒糟高于醋糟(P&lt;0.05),其他成分均为醋糟均高于白酒糟(P&lt;0.05).2.2DM,ADF和NDF的体外消化率以及体外发酵产气的试验结果DM,ADF和NDF体外消化率和体外产气结果如表2所示.白酒糟IVDMD,NDFD,ADFD,产气动力学参数a,b值均显着高于醋糟(P&lt;0.05).表2体外DM,NDF和ADF消失率以及72h产气发酵参数2-3白酒糟和醋糟的代谢能估测如表3所列,白酒糟ME值在6.12-7.02kJ/kgDM之间,其中ME1,ME2,ME3差异不显着;醋糟在4.55—6.75kJ/kgDM之间,其重ME1,ME2,ME4差异不显着;白酒糟ME平均值高于醋糟(尺O.05).352011年9月第3期(总第152期)草食家畜(季刊)注:表3中,ME1=146xGP+7xCP+22.4xEE+1242;ME2=0.145xGP+O.00412xCP+0.00650xC P2/1000+0.0206xEE+1:54;ME3=3.16+0.0695xGP+0.00007300xGP2+0.O0732xCP/1000+0.02052XEE/1 0OO;ME4=1.56+0.1390×Gp+0.007400xCP+0.01780xEE;ME5=-0.58+0.1590xGP+0.0102~CP+0.03140xEE;ME6=1.20+0.1456xGP+0.00076575xCP+0.01642~EE.其中GP(gasproduction)表示24h气体产量,单位mL/200mgDM/24h;EE为粗脂肪,单位g,1(gDM【Tl.2.4NH3-N,VFA和发酵气体摩尔百分比例测定结果如表4所示,本试验中白酒糟的总VFA产量豆着高于醋糟(P&lt;0.05),而干醋渣的H产量显着高于白酒糟(P&lt;0.05).表4NH3一N,VFA产生量和发酵气体摩尔百分比例测定结果注:袁4中,同行中肩标不同者表示差异显着,所标字母在字母表排列顺序靠前者为较大值.2.5干物质和祖蛋白的瘤胃降解率参数高于醋糟(P&lt;O.05).表5中,白酒糟DM和CP的a,b,c和ED值均显着表5饲料千物质和粗蛋白质瘤胃降解率参数比较3讨论'3.1基础养分和代谢能分析本试验所测白酒糟与余有贵等(2oo7)所总结的我国白酒糟基础营养成分相比,DM和总磷含量略有偏高,钙含量略低,其余指标相近.而CP含量与中国饲料成分及营养价值表[161中米糠和次粉(151g,kgDM和154g/kgDM)等相近似,但略高于燕麦(142g/kgDM).同国外测定的啤酒糟(CP254g/kgDM,EE63g/kgDM)相比【1l,本试验中自酒糟CP含量明显偏低,EE含量略高.而醋糟CP含量仅略高于小麦秸秆中的CP含量(48g/ksDM)t.同蛋白含量相似的米糠(ME11.29kJ/kgDM)Iml相36比,白酒糟代谢能显着较低.而醋糟的代谢能与中国饲料成分及营养价值表【161中的苜蓿草粉近似(5.65-6.40.H/kgDM).本研究所采用的6个计算公式都是通过24h的产气量,CP含量和EE含量三个因素来对代谢能进行测算,各公式的计算结果的差异主要由于公式中不同因素系数不同所致.根据试验结果,我们认为使用MEl和ME2对白酒糟和醋糟的代谢能进行评定相对更为合适.3.2DM,NDF和ADF的体外消化率以及体外发酵产气数据分析白酒糟和醋糟的消化率与燕麦等优质牧草的体外消化率(0.4|D一0.76)fl71相似.同白酒糟相比,醋糟的DM 2011年9月第3期(总第152期)草食家畜(季刊)消化率较低,这可能与醋糟中相对较高的NDF含量有关.有研究表明,饲料中NDF的含量与体外消化率成负相关.McNiven等(2002)研究表明【191,运用一步法与两步法结合的方式,可估测过瘤胃蛋白的小肠消化情况.白酒糟的IVDMD1和IVDMD2之差达到了0.115,醋糟为0.076,表明这两种饲料可以作为潜在的过瘤胃蛋白饲料原料.NDFD和ADFD是评定反刍动物粗饲料纤维品质的重要指标.白酒糟的ADFD和NDFD均显着高于醋糟,同时,两种饲料的NDFD均高于松香草(70%)和杂交象草(58%)等优质牧草91.较高的纤维消化率可能之前发酵有关,现代酿造工业中通常加入纤维素酶以促进发酵,这造成酒糟和醋糟在试验中易于被进一步分解消化.通过体外发酵可间接反映饲料在瘤胃中的消化情况.研究显示[2ol,根据饲料组成与体外产气情况能够较为准确地预测体内DM降解率和代谢能(R=0.98).醋糟在产气量上与完熟期燕麦48h发酵I2得到的最大产气量近似(136mL/gDM),远低于啤酒糟的产气量ll8l (201.3mugDM).白酒糟的a值比醋糟高3.58,可能是由于白酒糟中含有较多的CP引起的.有研究表明,快速降解部分与CP含量正相关㈤.b值和GPmax主要与无灰分NDF的含量和消化性成正相关[221,但本研究结果中,纤维含量较高的醋糟的b值和GPmax却低于白酒糟,这可能与醋糟相对较低的纤维消化率有关.3.3NH3一N,VFA和发酵气体摩尔百分比例结果分析NH3一N能够为瘤胃微生物的生长提供氮源,但过多的NH一N意味着只有很少的蛋白质能够进入小肠.本试验中所得的两种饲料测定结果均在前人所报道瘤胃液中NH3一N浓度范围(10.00-12.95mmol/L)lz~l之内. VFA是反刍动物和其瘤胃微生物维持和生长的主要能量来源.Gatachew(20O4)研究指出发酵产气量与VFA含量成正相关.另有报道指出,饲料发酵产气量主要是与饲料中的CP含量和纤维特性有关71.而在本试验中,CP含量高,纤维消失率高的白酒糟也有着显着较高的总VFA产量.CH的排放会导致全球气候变暖并对臭氧层造成破坏.同时,也造成能量的巨大浪费.研究显示,饲料总能的6%会以CH的形式排放到大气中,而CH的产生量受饲料中EE含量影响较大,二者成负相关[251.但是本试验中的两种饲料在CH4产生量上没有显着性差异, 这可能与其EE含量均较低有关.3.4尼龙袋法测定干物质和粗蛋白消失率从瘤胃养分降解动力学参数来看,白酒糟DM和CP的消化性能显着优于醋糟,且CP含量与已报道的次粉,米糠,燕麦相当,瘤胃消化率与三者相比则有所偏低.白酒糟DM中的快速降解部分含量与中国饲料成分和营养价值表中可可豆皮(a=O.08)相似,但缓慢降解部分含量和消化速率都要低于可可豆皮(b=0.53,c=O.08).白酒糟CP的消化性能和前人对啤酒糟的研究结果近似,但"b"值较干啤酒糟低0.17[.同常见的饲料原料相比,醋糟DM和CP的有效降解率比较低(0.101和0.123),且瘤胃发酵速度较慢(二者c值为0.009和0.018),这可能与其较低的CP和较高的NDF含量有关.4结论以上结果表明,新疆地区的白酒糟和醋糟中均含有较丰富的营养成分,干物质和纤维消化率较高,作为新型的饲料资源具有良好的开发应用前景.二者相比,醋糟的脂肪,纤维和钙含量均显着高于白酒糟.但白酒糟的总体营养价值(CP含量,ME,体外产气指标,总VFA 产量,体内和体外消化率)优于醋糟,其粗蛋白消化率与干啤酒糟相似,可直接作为蛋白质饲料.参考文献:【1]李玫译.美国FEEDSTUFFS副产品与非常规饲料成分表(2006版)[J].饲料广角,2006,(17):34-36.【2】余有贵,.曾传广.白酒糟开发蛋白质饲料的研究进展U】.中国饲料,2007,(1):12—15.【3】周福,朱权,张雷,等.白酒糟对肉牛育肥效果的影响【J].草食动物,2009,(11):44.【4】蒋爱国.酱油渣和醋糟的营养价值和发酵技术[JJ. 农村新技术,2010,(2):42—43.f51OmeialMethodsofAnalysis,l6thedn.Astsociationl0£AnalyticalChemists.AOAC1999.:WashingtonD.C.【6】V anSoestPJ,RobertsonJB,LewisBA.Methods.fordietaryfiber,neutralfiber,andnonstarchpolysa—ceharidesinrelationtoanimalnutrition.J.DairySic. 1991,f74):3583-3597.【7】LeeM,HwangSY,ChiouPW.Metabolizableenergy ofroughageinTaiwan.SmallRuminRes.2000,36f31:251-259.【8】ZhangDF,Y angHJ.Invitroruminalmethanogenesisofahay—richsubstrateinresponsetodifferentcomb—. inationsupplementsofNitrocompounds,pyromellitic diimideand.2一bromoethanesulphonate.Anita.FeedSci 『J].Technol,2011,(163):20—32.【9】杨红建,宋正河,祝仕平,等.一种发酵微量气体产生量数据自动采集存储装置及方法:中国,ZL20o61o0l1301.X『P1.2007212219.【10】MenkeKH,SteingassH.Estimationoftheenergetic feedvalueobtainedfromchemicalanalysisandin vitrogasproductionusingrumenfluid[J].Anim.Res. 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利用体外培养法测定精补料的营养价值

利用体外培养法测定精补料的营养价值

利用体外培养法测定精补料的营养价值艳城【摘要】本次试验中利用体外培养法测定2个不同比例全混日粮的精补饲料的消化率、体外发酵产气量、氨氮浓度,由这些指标评定了饲料的营养价值。

结果表明,1号样品(100%精补饲料)的干物质(DM)、粗蛋白(Cp)、中性洗涤纤维(NDF)的消化率依次为:71.74%、91.54%、32.19%。

2号样品(70%的精补饲料+30%的羊草)的干物质(DM)、粗蛋白(Cp)、中性洗涤纤维(NDF)的消化率依次为:61.91%、77.95%、30%。

1号样品的最大产气量为91.194mL,2号样品的最大产气量为92.737mL。

试验显示.不同比例的全混日粮被瘤胃消化和利用的比率不同,营养价值也有所不同。

【期刊名称】《当代畜禽养殖业》【年(卷),期】2012(000)011【总页数】7页(P8-14)【关键词】绒山羊;体外产气;营养价值;精粗比【作者】艳城【作者单位】内蒙古农业大学,内蒙古呼和浩特010020【正文语种】中文【中图分类】S826通过饲料营养价值评定,可以了解和掌握各种动物对饲料养分的利用情况、需要量及其变化规律,为科学饲养奠定理论基础。

目前,评定饲料营养价值的方法主要有概略养分分析法、体内法和体外法。

概略养分分析法是评定饲料营养价值的一种常用方法,如总能、总磷、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维等的测定方法。

但利用此法所得的饲料养分与动物消化吸收的养分之间存在很大差异,不足以准确地反映饲料的实际营养价值。

体内法是评定饲料在瘤胃内降解率的直接方法。

体内法测定动物对饲料的采食量、消化率和利用率,并以此评估饲料的营养价值。

然而,应用传统的体内法来检测饲料的消化率,实验周期长、费用高,并且需要大量的样品,不便于大规模进行。

另外,由于实验动物个体间差异较大,实验结果可重复性较差,不利于测定方法的标准化。

随着动物消化生理研究的深入和技术手段的创新,利用动物体外消化模拟技术来研究饲料的营养价值已成为可能。

植物精油对体外瘤胃发酵、甲烷产量及底物降解率的影响

植物精油对体外瘤胃发酵、甲烷产量及底物降解率的影响

植物精油对体外瘤胃发酵、甲烷产量及底物降解率的影响曹玉伟; 寇占英; 贾淼; 李艳玲【期刊名称】《《动物营养学报》》【年(卷),期】2019(031)010【总页数】11页(P4746-4756)【关键词】植物精油; 瘤胃发酵; 甲烷产量; 底物降解率【作者】曹玉伟; 寇占英; 贾淼; 李艳玲【作者单位】北京农学院动物科学技术学院北京 102206; 中国动物疫病预防控制中心北京 100125【正文语种】中文【中图分类】S816在畜牧养殖生产过程中,反刍动物瘤胃发酵生成的甲烷(CH4)和部分氨态氮(NH3-N)会以间接或直接的方式排出体外,不仅导致反刍动物饲料能量的严重浪费,同时也对生态环境造成严重影响[1]。

因此,我们研究降低瘤胃CH4的生成对提高反刍动物生产效率和环境保护具有双重意义。

而植物精油以其高效、绿色、无残留的特点作为畜禽饲料添加剂逐渐引起人们的关注。

最早发现的大部分植物精油具有广谱的抗菌性和良好的抑菌效果[2-3],在反刍动物生产中,其主要通过影响瘤胃微生物的活性,从而影响瘤胃发酵[4]。

有研究发现,植物精油可以改变挥发性脂肪酸(VFA)含量及比例并影响瘤胃发酵模式,促进氨基酸的累积,降低NH3-N含量,同时抑制CH4产生[5-7],进而影响饲粮营养物质的消化率和动物生长性能[8-9]。

目前,对于植物精油的大部分研究集中在其对反刍动物瘤胃发酵和CH4产量的影响,而对营养物质消化影响的研究较少。

在实际应用中,如果植物精油的添加不显著影响VFA的含量,同时还可以降低CH4产量和氮的排放,那么可以认为是对生产比较有利的,而如果植物精油的添加在抑制CH4生成的同时造成了营养物质消化率的显著下降,那么总体上认为其对动物的生产并不是有利的[10]。

因此,对于植物精油的添加,我们需要研究其降低CH4以及影响营养物质消化率的平衡点。

已有研究发现,香芹酚、丁子香酚、茴香油均可在一定程度降低体外瘤胃CH4的产生[11-12],且丁子香酚对体外瘤胃发酵无显著影响[13]。

人工瘤胃技术的应用与研究进展

人工瘤胃技术的应用与研究进展

FEED & FEEDING饲料饲养2018·9收稿日期:2018-01-24作者简介:李莉(1992-),女,广东惠州人,硕士生,研究方向为反刍动物动物营养。

通讯作者:张佩华,副教授,硕士生导师,研究方向为草食动物营养与饲料。

人工瘤胃技术的应用与研究进展.李莉1,2,张佩华1,2(1.湖南农业大学动物科学技术学院,长沙 410128;2.湖南畜禽安全生产协同创新中心,长沙 410128)中图分类号:S823.4 文献标识码:A 文章编号:1004-4264(2018)09-0011-03DOI: 10.19305/ki.11-3009/s.2018.09.003摘 要:人工瘤胃技术是利用体外方法进行反刍动物瘤胃消化方面研究的一项技术,由于其自身的优势及进展,在国内外应用广泛。

本文综述了人工瘤胃技术的分类、优缺点及研究进展,以期为同行进行相关研究提供参考。

关键词:人工瘤胃技术;分类;应用;进展瘤胃是反刍动物的第一胃,约占总容积的85%。

瘤胃能消化饲料中大约50%的粗纤维和70%~80%的可消化物质,是迄今已知的降解纤维物质能力最强的天然发酵罐。

因此,瘤胃在反刍动物消化过程中起着巨大的作用。

反刍动物瘤胃消化一直都是国内外研究的热点,不论是在生态方面,还是在经济方面都具有重大研究价值。

由于反刍动物瘤胃是一个复杂的动态生物发酵罐,微生物构成系统复杂,而动物活体实验存在环境参数不易控制、需要动物多、实验周期长、费用相对较高等缺陷,难以直接在活体动物上开展实验,故各种体外瘤胃研究技术应运而生。

人工瘤胃即是模拟瘤胃生理功能的体外模拟系统,能相对减少动物活体实验的限制,在反刍动物瘤胃消化研究中得到了广泛应用。

现今人工瘤胃技术主要分为批次培养法(包括两步法、产气法)和连续培养法。

1 人工瘤胃技术分类1.1 批次培养法批次培养法又称短期人工瘤胃模拟技术,是将瘤胃液和发酵底物加入发酵容器内,经过一定时间的发酵培养后,测定微生物、挥发性脂肪酸、氨氮等指标变化情况,主要包括两步法(Tilley和Terry)[1]和产气法(Menke等)[2]。

体外产气实践技能要求

体外产气实践技能要求

体外产气实践技能要求
体外产气是指通过特定的方法和技巧,使患者在不依赖呼吸机的情况下产生并维持自主呼吸。

体外产气实践技能要求包括以下方面:
1.理论知识:了解呼吸生理学原理和呼吸系统疾病的基本知识,掌握体外产气的适应症和禁忌症等相关知识。

2.评估患者:熟练掌握患者的评估技巧,包括观察患者的呼吸频率、呼吸深度、呼吸节律等,评估患者是否具备进行体外产气的条件。

3.气道管理:掌握气道管理技能,包括正确的头位、清创、吸痰等操作,确保气道通畅,减少分泌物的潴留。

4.体外产气器械的选择和使用:了解不同种类的体外产气器械,包括面罩、喉罩、鼻导管等,掌握器械的选择和正确使用方法。

5.产气技术:掌握产气技术,包括控制患者的吸气和呼气时间、吸气和呼气的流量等,确保患者的气道压力和吸气氧浓度在安全范围内。

6.监测和调节:熟练掌握监测患者的呼吸频率、血氧饱和度、气道压力等指标,及时调节产气参数,确保患者的安全和舒适。

7.危急情况处理:掌握危急情况下的处理技巧,如气道堵塞、血氧饱和度下降等,能够迅速采取措施保障患者的生命安全。

8.团队合作:具备良好的团队合作精神,与医生、护士等团队成员密切配合,确保患者得到及时有效的治疗。

9.安全措施:掌握体外产气的安全措施,如正确使用气道管理器械、注意消毒和清洁、防止交叉感染等,确保患者的安全。

10.沟通技巧:具备良好的沟通技巧,能够与患者和家属进行有效的交流,解释体外产气的目的、方法和风险等,增强患者的合作意识。

Menke体外产气法

Menke体外产气法

Menke体外产气法(Syringe系统)——管子(一)基础知识体外产气法主要理念通过体外产气装置模拟瘤胃发酵体外产气系统组成体外产气装置:产气管(相当于独立的瘤胃)、恒温水浴摇床(模拟瘤胃温度和蠕动速度);微生物培养液:由瘤胃液与人工唾液按1:2的体积比混合,搅拌均匀而成影响实验成败的主要因素实验过程中产气装置的温度,整个操作过程的厌氧状态、微生物活力是影响实验成败的关键(二)试验前准备试配产气管①更换注入口处老化的塑胶管;②试配外管和内塞,要求推拉自如又不过松(现已将可匹配的外管和内塞统一编号,依号装配即可)。

称量样品①产气管编号;②用自制的带长柄的称量纸,准确称取待测样品约200mg(DM),置于体外产气管底部,注意不要让样品进入产气管注入口和沾染30ml以上管壁;③样品称取完毕后,管塞上均匀涂抹凡士林,将管塞塞回对映的外管,扣好夹子。

配制原液正式实验前一天,配制好人工唾液中的微量元素溶液(A液)、缓冲液(B液)、常量元素溶液(C液)和刃天青溶液(D液)(可过量配制,常温下存放,配制方法见附表1)。

其它①调试恒温水浴摇床的温度至39±0.5℃,摇动速度5×10转/min,如果使用两个恒温水浴摇床要求两者温度和摇动速度尽量一致,另外还需要将一多联水浴锅温度调至39±0.5℃(以实际量取温度为准);②准备二层、四层、六层纱布各2-4块(纱布可重复使用);③贮备两瓶热水,准备收集瓶(收集和过滤瘤胃液用)、水桶、温度计,以备次日取瘤胃液用。

(三)正式试验配制人工唾液①将恒温水浴摇床、多联水浴锅打开后;②计算人工唾液需要量:体外培养时每根产气管内微生物培养液的体积是30ml(10ml瘤胃液和20ml人工唾液),依据试验设计的产气管数计算人工唾液和瘤胃液的需要量(预留20%,以备操作手法不当造成浪费);③配制还原剂(E液,见附表1);④按附表2的顺序和比例将配制好的各原液混合后,置入水浴摇床或水浴锅内,通入CO2气体(气流不易过大),使人工唾液由蓝色转变为粉红色,最终为无色。

体外产气法评价水培大麦苗替代苜蓿、燕麦对奶牛瘤胃发酵特性的影响

体外产气法评价水培大麦苗替代苜蓿、燕麦对奶牛瘤胃发酵特性的影响

体外产气法评价水培大麦苗替代苜蓿、燕麦对奶牛瘤胃发酵特性的影响任澎;冯娟;李若诚;刘建新;王迪铭【期刊名称】《中国畜牧杂志》【年(卷),期】2022(58)9【摘要】试验旨在通过体外产气法来探究水培大麦苗替代苜蓿、燕麦对奶牛瘤胃发酵特性的影响。

采用单因素试验设计,设5个组,分别用0%(对照组)、25%、50%、75%、100%的水培大麦苗替代发酵底物中的苜蓿和燕麦(风干基础),每个处理组设12个重复,用Menke体外产气法进行发酵试验。

试验测定不同时间点(2、4、6、9、12、24、36、48 h)产气量(GP)、24 h和48 h干物质降解率(IVDMD)、48 h潜在产气量和产气常数及48 h发酵液pH、挥发性脂肪酸(VFA)、微生物蛋白(MCP)以及氨态氮(NH3-N)等指标。

结果表明:75%和100%大麦苗组的48 h IVDMD高于其他三组(P<0.05);经48 h体外发酵后,50%、75%和100%大麦苗组的总VFA浓度高于对照组(P<0.05),50%、75%和100%大麦苗组乙酸高于对照组(P<0.05),75%和100%大麦苗组丙酸高于对照组(P<0.05),100%大麦苗组的异丁酸、异戊酸高于对照组(P<0.05),50%、75%和100%大麦苗组丁酸高于对照组(P<0.05);25%大麦苗组MCP低于对照组(P<0.05),100%大麦苗组MCP高于对照组(P<0.05);25%、75%和100%大麦苗组NH3-N浓度高于对照组(P<0.05);除上述指标外,其余指标在试验组与对照组间无显著性差异。

本试验条件下,水培大麦苗替代苜蓿、燕麦对瘤胃发酵特性具有改善效果。

【总页数】5页(P233-237)【作者】任澎;冯娟;李若诚;刘建新;王迪铭【作者单位】浙江大学动物科学学院【正文语种】中文【中图分类】S823.5【相关文献】1.大叶枸草粉替代苜蓿草粉、豆粕、玉米及混合精料对瘤胃体外发酵特性的影响2.体外产气法评价木薯渣替代压片玉米对奶牛瘤胃发酵特性的影响3.体外产气法评价不同分级指数玉米青贮—苜蓿干草组合发酵特性4.体外产气法评价发酵桑叶对湖羊瘤胃发酵参数的影响5.体外产气法研究百脉根及其缩合单宁对瘤胃发酵特性及降解率的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

排气法的操作方法

排气法的操作方法

排气法的操作方法排气法是一种通过调整呼吸来调节身体和情绪的方法。

它已经存在了数千年,许多文化和传统都使用了这种方法来提高身体健康和精神状态。

在这篇文章中,我将详细介绍排气法的操作方法,并解释一些其对身心健康的益处。

首先,让我们来了解一下排气法的原理。

排气法基于人体的呼吸系统,它利用深长的吸气和缓慢的呼气来刺激神经系统和放松身体。

通过排气法,我们可以慢慢减少心率、降低血压、舒缓紧张的情绪,并提高注意力和专注力。

在开始排气法前,首先找到一个安静、干净且舒适的地方。

可以选择任何适合你的位置,比如坐在椅子上、躺在床上或坐在地上。

关闭电视和其他干扰物,让自己专注于这个过程。

接下来,开始调整你的呼吸。

慢慢地吸气,感受空气进入你的鼻子,填满你的肺部。

吸气时,注意将腹部向外推,让呼吸更加深入。

吸气的时间可以逐渐延长,但不要感到不适。

一旦你感到舒适,停止吸气。

在吸气后,慢慢地开始呼气。

像吸气一样,呼气时也应该感到舒适,不用强迫。

注意放松身体,让呼气是自然而然地发生。

当你呼气时,腹部推向内部,让空气从你的肺部完全排出。

重复这个过程。

在一开始,你可能只能坚持几分钟,但随着练习的进行,你可以逐渐增加时间。

建议每天坚持至少15分钟的排气法,但你可以根据自己的时间和需求进行调整。

除了基本的排气法之外,还有许多不同的排气技巧可以尝试。

例如,你可以尝试使用手指按压鼻孔,使空气只能从一侧呼出。

这种技巧可以调节大脑的活动,提高专注力。

还有“火焰呼吸法”,它是一种有效的减压方法,可以帮助你释放压力。

这种方法可以通过深长的呼吸来创造出一个虚拟的内火,然后把焦点放在这个火焰上。

排气法可以带来许多身心健康的益处。

由于它放慢了呼吸和心率,它可以帮助我们减轻紧张和焦虑。

通过深呼吸,我们可以增加氧气供应,改善肺部功能,增强免疫系统和能量水平。

此外,它还可以改善睡眠质量,减少失眠的发生。

除了身体上的益处外,排气法还可以帮助我们改善情绪和心理状态。

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Menke体外产气法(Syringe系统)——管子(一)基础知识体外产气法主要理念通过体外产气装置模拟瘤胃发酵体外产气系统组成体外产气装置:产气管(相当于独立的瘤胃)、恒温水浴摇床(模拟瘤胃温度和蠕动速度);微生物培养液:由瘤胃液与人工唾液按1:2的体积比混合,搅拌均匀而成影响实验成败的主要因素实验过程中产气装置的温度,整个操作过程的厌氧状态、微生物活力是影响实验成败的关键(二)试验前准备试配产气管①更换注入口处老化的塑胶管;②试配外管和内塞,要求推拉自如又不过松(现已将可匹配的外管和内塞统一编号,依号装配即可)。

称量样品①产气管编号;②用自制的带长柄的称量纸,准确称取待测样品约200mg(DM),置于体外产气管底部,注意不要让样品进入产气管注入口和沾染30ml以上管壁;③样品称取完毕后,管塞上均匀涂抹凡士林,将管塞塞回对映的外管,扣好夹子。

配制原液正式实验前一天,配制好人工唾液中的微量元素溶液(A液)、缓冲液(B液)、常量元素溶液(C液)和刃天青溶液(D液)(可过量配制,常温下存放,配制方法见附表1)。

其它①调试恒温水浴摇床的温度至39±0.5℃,摇动速度5×10转/min,如果使用两个恒温水浴摇床要求两者温度和摇动速度尽量一致,另外还需要将一多联水浴锅温度调至39±0.5℃(以实际量取温度为准);②准备二层、四层、六层纱布各2-4块(纱布可重复使用);③贮备两瓶热水,准备收集瓶(收集和过滤瘤胃液用)、水桶、温度计,以备次日取瘤胃液用。

(三)正式试验配制人工唾液①将恒温水浴摇床、多联水浴锅打开后;②计算人工唾液需要量:体外培养时每根产气管内微生物培养液的体积是30ml(10ml瘤胃液和20ml人工唾液),依据试验设计的产气管数计算人工唾液和瘤胃液的需要量(预留20%,以备操作手法不当造成浪费);③配制还原剂(E液,见附表1);④按附表2的顺序和比例将配制好的各原液混合后,置入水浴摇床或水浴锅内,通入CO2气体(气流不易过大),使人工唾液由蓝色转变为粉红色,最终为无色。

采集与处理瘤胃液为方便读取12h产气量,瘤胃液最好在7:30前取回。

所取瘤胃液为早饲前2h瘤胃液。

①到牧场后,将热水倒入水桶,调节水温度至39±0.5℃,用于瘤胃液保温(应经常用热水调节);②用真空泵抽取三只湖羊的瘤胃液,混合,倒入收集瓶(注意盖上瓶盖,以防氧气对微生物的影响);③回到实验室后,将收集瓶置于水浴锅内,四层纱布过滤(应尽量快,以保持微生物的活力),获得的滤液用CO2气体饱和;④用量筒量取所需量的无色人工唾液和瘤胃液混合,不间断地通入CO2气体。

吸取微生物培养液用空的产气管吸取微生物培养液30ml,通过三通管推入已经装有样品的产气管。

记录初始微生物培养液量排气过程:将注入口处夹子打开的同时,用手下拉管塞,以防样品冲入塑胶管;摇晃产气管使样品与瘤胃液混合后,旋转管塞,排出管内空气;读数:将产气管竖直,注入口向下,读取刻度。

排气后的产气管应随机置于恒温水浴摇床内培养(摇床在操作过程中处于摇动状态,以免温度上升)。

空白对照和标准对照实验过程中要有至少3个空白对照和3个标准干草对照(样多时,对照一定要多,尤其是空白对照)。

空白对照不加样品直接加入30ml 微生物培养液,标准干草对照以200mg (DM )干草(优质的过80目筛的羊草)为底物,加入30ml 微生物培养液。

为了消除操作顺序和恒温水浴摇床条件的差异,要求空白对照和标准对照平均分布于试验前期、中期和后期,放置于水浴摇床的不同位置。

记录产气量 培养2、4、6、9、12、24、36、48、72、96h 时(试验样品为粗料,一般培养到72h 或96h ;精料一般培养到24h 或48h 即可终止培养,若要计算产气常数,一般要72h ),记录产气管的刻度读数(读数时轻摇产气管,旋动管塞后读数,读数时,以管塞刻度的中部为准)。

如果产气量过多,下一时间点产气量可能超出刻度范围,则需放气,其操作与排气相同。

产气量计算 ()[]空白t t GP V V WGP --⨯=0200(管子)式中,GP t 为样品在t 时刻的产气量(ml );V t 为样品发酵t 小时后,产气管刻度读数(ml );V 0为样品在开始培养时产气管刻度读数(ml );W 为样品干物质重(mg );GP 空白为空白对照在t 时刻的产气量,其计算方式与GP t 一致。

重复试验 要求体外产气试验至少培养两次,两次标准干草产气量相对偏差小于10%(若标准干草产气量与实验室积累的平均值29.5相差太大,应考虑重作,检查动物状况)。

(四)样品采集测定项目 取样时间 取样部位 取样量 重复数 处理保存温度 VFA 实际需要 上清液 1ml - 加入0.2ml 8.2%偏磷酸,20000g 离心10min4℃ NH 3-N 24或48h 混合液 5ml - -20℃ MCP24或48h混合液24ml--20℃附表1:人工唾液原液配制表 A 、微量元素溶液:CaCl 2.2H 2O 13.2g; MnCl 2.4H 2O 10.0g; CoCl 2.6H 2O 1.0g; FeCl 3.6H 2O 8.0g; 加蒸馏水至100ml B 、缓冲液:NH 4HCO 3 4.0g; NaHCO 3 35.0g; 加蒸馏水至1000mlC 、常量元素溶液:Na 2HPO 4.12H 2O 9.45g KH 2PO 4 6.2gMgSO 4.7H 2O 0.6g 加蒸馏水至1000mlD 、0.1%刃天青溶液:100mg 刃天青溶解于 100ml 蒸馏水E 、还原剂溶液(现用现配):1M NaOH 4.0ml Na 2S 9.H 2O 625mg 加蒸馏水95ml 附表2:人工唾液配制表(1000ml ) 顺 序 原 液体积(ml ) 1 蒸馏水520.2 2微量元素溶液(A 液)0.1整个过程要尽量快,特别是吸培养液和排气,最好不要超过15min3 缓冲液(B液)208.14 常量元素溶液(C液)208.15 0.1%刃天青溶液(D液) 1.06 还原剂溶液(E液)62.4嘌呤法测定体外微生物蛋白产量(一)操作流程图标准曲线制备样品处理℃水浴4冷却加入6ml 28.5mM NH4H2PO490-95℃水浴15min冷却6ml 0.2M NH4H2PO4用85%–30.2ml 0.4M AgNO35℃避光、过夜4℃4.5ml pH = 2 的蒸馏水冲洗4℃90-95℃水浴30min40.5M HCl 稀释40倍(二)试剂配制及具体操作2、测定步骤A .酵母RNA 标准曲线的制作:① 分别称取5、15、25、35、45、55mg 酵母RNA 于10ml 离心管中,并加入2ml 0.6M HClO 4,于90 - 95℃水浴1小时,冷却;② 再分别加入6ml 28.5mM NH 4H 2PO 4,于90 - 95℃水浴15min ,冷却后在3000g ,4℃条件下离心10min ;③ 取1.6ml 上清液,向上清夜中加入6ml 0.2M NH 4H 2PO 4溶液,并用85%磷酸调整溶液pH 为2–3(一般需85%磷酸25µl );④ 取调整pH 值后的溶液3.8ml ,并向其中加入0.2ml 0.4M AgNO 3,混合,于5℃条件下避光、过夜;⑤ 过夜后于3000g ,4℃条件下离心10min ,弃上清液;用4.5ml pH = 2 的蒸馏水冲洗沉淀;再于3000g ,4℃条件下离心10min ,弃上清液;⑥ 向沉淀中加入5ml 0.5M HCl 溶液,混匀,在90 - 95℃条件下水浴30min 后,以3000g 离心10min ;⑦ 上清液用0.5M HCl 稀释40倍后,以0.5M HCl 溶液作参比,在260nm 下比色,根据光密度值作出标准曲线。

B .培养液中微生物蛋白质的测定:① 取8ml 均匀发酵液于3个10ml 离心管,在20000g ,4℃条件下离心20min ;弃上清液后加入2.104ml 0.6M HClO 4,于90 – 95℃水浴1小时,冷却;② 按照制作标准曲线的步骤②-⑥操作;③ 以0.5M HCl 溶液作参比,在260nm 下比色,根据光密度值和标准曲线求出RNA 测定值;④ 根据下面公式计算微生物蛋白氮产量:其中,RNA 含氮量为17.83%,细菌氮中RNA 含氮量为10%。

浙江大学奶业科学研究所微生物蛋白氮(mg/ml )= RNA 测定值(mg/ml )×RNA 含氮量×稀释倍数细菌氮中RNA 含氮量比色法测定培养液氨态氮浓度(一)操作流程图标准曲线制备样品处理摇匀、静置10min0号管液作参比700nm下比色(二)试剂配制及具体操作1 试验试剂2 测定步骤A、氨氮标准系列溶液制备①准确称量0.382g氯化铵,用0.2M盐酸溶解,并定容到100ml,作为保存液,在冰箱中可存放数月。

②取保存液10ml,用蒸馏水稀释定容至100ml,为工作液。

含氮量为10mg/100ml。

③取工作液0、1、2、4、6ml置于5个编号的50ml容量瓶内,接着分别加入蒸馏水10、9、8、6、/4ml,使之都成为10ml,再用0.2M盐酸定容。

这就是每100ml中含氮量为0、0.2、0.4、0.8、1.2mg的标准系列溶液。

B、比色与计算①准确量取标准系列溶液0.4ml分置于5个10ml试管内,各管中再依次加入D液和E液2ml,摇匀,静置10分钟后比色。

波长700nm,0.5cm的比色皿,用不含氮的0号管液作空白对照。

记录各消光值。

②用消光值作自变量,溶液含氮量作从变量导出回归方程式。

③样品处理:取5ml瘤胃培养液在3500-4000转/分下,离心10分钟,量取2ml上清液(若含氮量较高,可取1ml上清液再加1ml蒸馏水),置于15ml试管内,再加入8ml 0.2M 盐酸至10ml摇匀(稀释倍数为5或10)。

比色操作同:准确量取各溶液0.4 ml 置于10ml试管内,各管内再依次加入D液和E液2ml,摇匀,静置10分钟后比色。

波长700nm,0.5cm的比色皿,用不含氮的0号管液作空白对照。

记录各消光值。

把测得的消光值代入回归公式,计算的结果乘以样品稀释的倍数就是原样中氨氮的含量。

浙江大学奶业科学研究所柱温体外发酵产物中挥发性脂肪酸浓度的测定(一)操作流程图(二)试剂配制及具体操作1 混标制备按表1或表2中梯度,配制6个梯度的混合标样,用于制作标准曲线。

表1 乙酸、丙酸和丁酸混合标样的配制 (umol / ml )1 2 3 4 5 6 乙酸 10 20 40 80 160 320 丙酸 1 2 4 8 16 32 丁酸 12481632表2 乙酸、丙酸和丁酸混合标样的配制 (ul / ml )1 2 3 4 5 6 乙酸 0.571 1.143 2.285 4.570 9.140 18.280 丙酸 0.075 0.149 0.299 0.598 1.196 2.390 丁酸 0.0920.1840.3670.7351.4702.9392 上机测定HP-INNOW AX (19091N-133)毛细管柱,30m ×0.25mm ×0.25µm200℃ 220℃采用程序升温,80℃持续1min 后,以15℃/min 升温至170℃后维持1.5min载气为高纯氮,压力为100kpa,总流量63.8ml/min ,柱流量1.19ml/min,分流比50,吹扫流量3ml/min ,循环流量30ml/minH 2流量40ml/min ,空气流量400ml/min 2µl浙江大学奶业科学研究所样品中乙、丙、丁酸浓度测定色谱柱检测室温度载气及流速检测室气体流速 进样量发酵气体中甲烷含量的测定(一)标准曲线建立用10µl 的微量注射器分别抽取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0µl 的甲烷标准气,上机,根据甲烷的浓度和其峰面积的关系,确定甲烷的标准曲线。

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