小鼠B细胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit试剂盒
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
癌胚抗原(CEA)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
蛙皮素614BBELISA试剂盒说明书
蛙皮素6-14(BB)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液蛙皮素6-14(BB)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
蛙皮素6-14(BB)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
蛙皮素6-14(BB)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
蛙皮素6-14(BB)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
高迁移率族蛋白B1HMGB1ELISA试剂盒说明书
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
碧云天Mouse TNF-α ELISA Kit (小鼠TNF-α酶联免疫吸附检测试剂盒)说明书
Mouse TNF-α ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PT512Mouse TNF-α ELISA Kit96次产品简介:碧云天的Mouse TNF-α ELISA Kit (Mouse Tumor Necrosis Factor-α Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit),即小鼠肿瘤坏死因子-α酶联免疫吸附检测试剂盒,是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的TNF-α的试剂盒。
本产品检测灵敏度高,特异性强,重复性好。
多次重复检测结果表明,最小检出量为30.8pg/ml ,与人TNF-α、sTNF RIs 、TNF RII 等均没有交叉反应,板内、板间变异系数均小于10%。
TNF-α,即TNF 、TNF α或TNFalpha ,也称cachectin 、cachexin 或TNFSF1A 。
TNF-α由巨噬细胞、上皮细胞等多种细胞在细菌感染、内毒素刺激、病毒或寄生虫感染时产生。
肿瘤坏死因子超家族(Tumor necrosis factor superfamily)共约19个成员,包含由巨噬细胞等产生的TNF-α和T 淋巴细胞产生的TNF-β(也称Lymphotoxin-alpha),以及FASL 、TRAIL 、CD40L 、CD27L 、CD30L 等。
TNF-α与TNF-β在结构上有一定的相似性,并且在氨基酸水平有28%的同源性,它们拥有共同的受体TNFR1和TNFR2。
由于TNF-α的生物学活性占TNF 总活性的70%~95%,因此目前常说的TNF 多指TNF-α。
TNF (Tumor Necrosis Factor)因为能诱导细胞死亡而得名,实际上其很多时候诱导的细胞死亡为细胞凋亡。
人TNF-α有两种形式,一种是由233个氨基酸组成的跨膜蛋白同源三聚体(homotrimers),另外一种是该跨膜蛋白在TNF-α转化酶TACE(TNF-α converting enzyme)的作用下切除信号肽,形成成熟的157个氨基酸的可溶性TNF-α单体(分子量为17KDa)的同源三聚体。
小鼠 IL-6 Elisa试剂盒
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
Beijing BLKW Biotechnology Co., Ltd. Tel:010-57158602/52872342 blkwbio@
3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;
4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
Hirano, T. et al. (1986) Nature 324:73.
Beijing BLKW Biotechnology Co., Ltd. Tel:010-57158602/52872342 blkwbio@
ELISA Kit for the Quantitative Analysis of Mouse IL-6
Introduction
Interleukin 6 (IL-6) is a multifunctional protein that plays important roles in host defense, acute phase reactions, immune responses, hematopoiesis and differentiation of nervous system. The IL-6 gene product is a single chain protein with a molecular mass ranging from 21 to 28 kDa, depending on the cellular source.IL-6 proteins are expressed by variety of cells, such as T cells, macrophages, fibroblasts, hepatocytes, vascular endothelial cells. Since IL-6 plays a wide variety of biological functions, it is also known as interferonβ2 (IFN-β2), B cell stimulating factor-2 (BSF-2), hybridoma growth factor, hepatocyte stimulating factor, cytotoxic T-cell differentiation factor, or macrophage & granulocyte inducer (MGI-2A).
达科为IL-2 ELISA试剂盒说明书
1、 产品简介:
达优®小鼠 IL-2 ELISA 试剂盒是通过酶联免疫吸附技术,定量 检测细胞培养上清液和小鼠血清、血浆和其他体液中天然和重组 IL-2 的浓度。本试剂盒为预包被板,“夹心一步”完成,整个过程 孵育时间不超过 2.5 小时,洗涤 8 次,操作时间大大减少。本试剂 盒专用于科研,而非用于诊断。
1513预包被elisa试剂盒系列产品小鼠elisa试剂盒dkw12200004848tdkw122000096mouseifnelisakit预包被减步法96tdkw12201104848tdkw122011096mouseil1elisakit预包被减步法96tdkw12201204848tdkw122012096mouseil1elisakit预包被减步法96tdkw12202004848tdkw122020096mouseil2elisakit预包被减步法96tdkw12204004848tdkw122040096mouseil4elisakit预包被减步法96tdkw12205004848tdkw122050096mouseil5elisakit预包被减步法96tdkw12206004848tdkw122060096mouseil6elisakit预包被减步法96tdkw12210004848tdkw122100096mouseil10elisakit预包被减步法96tdkw12212004848tdkw122120096mouseil12p70elisakit预包被减步法96tdkw12212304848tdkw122123096mouseil12il23p40elisakit预包被减步法96tdkw12217004848tdkw122170096mouseil17aelisakit预包被减步法96tdkw12222004848tdkw122220096mouseil22elisakit预包被96tdkw12271004848tdkw122710096mousetgf1elisakit预包被96tdkw12272004848tdkw122720096mousetnfelisakit预包被减步法96tdkw12273404848tdkw122734096mousevegfaelisakit预包被96tdkw12282004848tdkw122820096mouseigeelisakit预包被96tdkw12273904848tdkw122739096mousemcp1elisakit预包被96t16人elisa试剂盒dkw12100004848tdkw121000096humanifnelisakit预包被减步法96tdkw12101204848tdkw121012096humanil1elisakit
联科生物技术 细胞因子 ELISA 试剂盒
联科生物技术有限公司 全国免费电话:800 8571 184第四章细胞因子ELISA 试剂盒简介:美国Peprotech公司作为知名的重组细胞因子生产商,开发出了50余种细胞因子的ELISA检测试剂盒,试剂盒的检测灵敏度高,检测范围宽,为您的科研提供了又一有力的工具。
试剂盒组分及重悬方法:包被抗体--100ug 经抗原亲和纯化的包被抗体,冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃,保存两个月;-20℃分装冻存可贮存6个月检测抗体--100ug 经抗原亲和纯化的生物素标记的检测抗体,冻干粉重悬--用1ml无菌蒸馏水重悬成100ug/ml的贮存液保存--4-8℃,保存两个月;-20℃分装冻存可贮存6个月标准品--准确计量的重组细胞因子冻干粉,具体含量见说明书重悬--按说明书1ml无菌蒸馏水重悬成适当浓度的贮存液保存--4-8℃,保存1周;-20℃分装冻存可贮存2个月亲合素偶联的过氧化物酶--60ul/瓶,液体分装--分装到10只小瓶中,每瓶6ul保存---20℃分装冻存可贮存2年实验所需的材料:ELISA酶标板:推荐Nunc maxisorp,产品编号:442404Tween-20:推荐Sigma,产品编号:P-7949BSA(牛血清白蛋白):推荐Sigma,产品编号:A-7030ABTS底物溶液:推荐Sigma,产品编号:A-3219Dulbecco's PBS(10X):推荐Gibco BRL,产品编号:14200-075相关溶液配制:PBS:用无菌蒸馏水将10X PBS稀释为1X PBS洗涤液:含0.05% Tween-20的PBS封闭液:含1% BSA的PBS,过滤除菌,4℃保存1周稀释液:含0.05% Tween-20和0.1% BSA的PBS,过滤除菌,4℃保存1周注:以上所有试剂在使用前必须复温至室温。
包板:1) 用PBS将包被抗体稀释成1ug/ml,立即加到酶标板中,每孔100ul;2) 密封酶标板,室温孵育过夜;3) 吸除孔中的液体,并用300ul洗涤液洗孔4次;4) 最后一次洗涤后,将酶标板倒置除去残留的液体,并倒扣在吸水纸吸干孔沿上的液体;5) 每孔加300ul封闭液,室温孵育至少1小时;6) 吸除孔中的液体,并洗孔4次。
B细胞淋巴瘤因子2elisa试剂盒
B细胞淋巴瘤因子2elisa试剂盒B细胞淋巴瘤因子2elisa试剂盒供应商:上海樊克生物有限公司ELISA试剂盒规格:(1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔(2)规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔保存条件:2-8℃低温保存保质期:6个月,所有试剂盒均提供最新批次。
试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。
2.B细胞淋巴瘤因子2elisa试剂盒Note on the use of enzyme standard instrument: 3.1 sample name file settings due to the part of the test sample is not necessarily continuous, the name of the sample is particularly important. At the same time should do the sample files and file name absorbance values remain the same, so if V later absorbance files, sample name files can be automatically at the same time out; if large quantities of samples with different number of different micro plate (in the file suffix form).4.The 2 model procedures set a laboratory test of different manufacturers may use the same kit, but different kit set control number, threshold criteria may be inconsistent, eliasa a sample program is not consistent. In order to facilitate the use of the template can be used in the document with the suffix to be distinguished.B细胞淋巴瘤因子2elisa试剂盒Elisa kit specimen requirements:1 specimen collection as soon as possible to carry out the extraction, extraction according to the relevant literature, the extraction should be carried out as soon as possible after the experiment. If notImmediately to the test, the specimen can be stored at -20 degrees C, but should avoid repeated freezing and thawing2 could not detect the NaN3 containing samples, because NaN3 inhibited the activity of horseradish peroxidase (HRP).Kit operation procedure:1 dilution of the standard product: this kit provides a standard sample of the standard, the user can be diluted in a small test tube according to the following chart. 12 g/L 5 standard product original times standard 150 l with 150 l standarddiluent, 6 g/L 4 standard 150 l 5 standard with 150 l Standard diluent,3 g/L 3 standard 150 l4 standard addition 150 l standarddiluent, 1.5 g/L 2 standard 150 l 3 standard with 150 l Standard diluent, 0.75 g/L 1 standard 150 l 2 standard with 150 l standarddiluent.2 add sample: respectively, the blank hole (blank control hole without samples and enzyme labeled reagents, and the rest of the steps are the same), the standard hole, sample hole to be measured. In the ELISA coated standard plate accurate sample 50 L, pore Zhongxian sample dilution test of 40 L, then added 10 L samples to be measured (sample final dilution 5 times). The sample is added to the bottom of the enzyme labeled plate hole, as far as possible without touching the wall of the hole.3 temperature Education: with the sealing plate membrane sealing plate 37 degrees Celsius for 30 minutes.4 solution: 30 times the concentration of the washing liquid with distilled water 30 times diluted standby5 washing: Uncover closure plate membrane, discard liquid, dry, add washing buffer to every well, standing for 30 seconds after discarding, repeat 5 times, dry by pat.6 enzymes: each hole is added to the enzyme labeled reagent 50 mu L, except the blank hole.7 Wen Yu: operation with 3.8 washing: operation with 5.9 Color: each hole to add the color agent A50 L, and then add the color agent B50 L, gently shake mix, 37 degrees to avoid light color 10 minutes.10 termination: 50 mu l per hole plus end solution, termination reaction (at this time blue, yellow).11: the determination of blank zero absorbance at 450nm in order to measure the hole (OD). The determination should be carried out within 15 minutes after the addition of the liquid.B细胞淋巴瘤因子2elisa试剂盒Matters needing attention:1 kit from the cold storage environment should be taken at room temperature balance 15-30 minutes after the use of the enzyme labeled plate Kaifeng, such as after the end of the plate, the plate should be stored in a sealed bag.2 washing buffer will crystallization, heated the water solubilization dilution, washing does not affect the results.3 each step sample should be used, and often to check its accuracy, in order to avoid the test error. A sample within 5 mins, ifthenumberofsampleismuch, recommend to use volley like.4 please make the standard curve at the same time, it is better to do the hole. Such as samples to be measured matter content is too high (the sample od high standardproduct the first hole hole OD), please first sample dilution multiples (n times) were measured and calculated please then multiplied by the total dilution ratio (n * * 5).5 closure plate membrane only a one-time use, to avoid cross contamination.6 substrate please avoid light preservation.7 in strict accordance with the instructions of the operation, the results of the test must be determined in accordance with the enzyme standard instrument readings.8 all samples, washing liquid and all kinds of waste should be treated as infectious agents.9 different batches of this reagent can not be mixed.10 if there is a difference between the specification and the English specification.上海樊克生物有限公司专业的提供elisa试剂盒,人elisa试剂盒,猪elisa试剂盒,大鼠elisa试剂盒,小鼠elisa试剂盒,羊elisa试剂盒,植物elisa试剂盒等等,更多优惠,来电咨询!谢谢!B细胞淋巴瘤因子2elisa试剂盒注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
miR-25通过靶向BCL2L11在脓毒症致AKI细胞模型中发挥保护性作用
miR-25通过靶向BCL2L11在脓毒症致AKI细胞模型中发挥保护性作用吴斌,王美堂「摘要]目的研究微小RNA(microRNA,miR)-25对脂多糖(LPS)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)增殖、凋亡和炎症的影响及作用机制。
方法用脂多糖(1ipopo1ysaccharide,LPS)处理HK-2细胞建立脓毒症致AKI的体外细胞模型,检测miR-25的表达水平。
分别转染miR-25模拟物(mimic)及抑制剂(inhibitor),观察LPS诱导HK-2细胞损伤时,miR-25对细胞活性、炎症反应和凋亡的作用。
双荧光素酶报告系统检测miR-25和BCL2L11的靶向关系,并通过将BCL2L11过表达质粒和miR-25mimic 共转染后进行LPS诱导处理,验证BCL2L11对miR-25减轻LPS诱导HK-2细胞损伤的逆转作用。
结果实验发现经LPS诱导HK-2细胞中miR-25表达水平下调(P<0.05);过表达miR-25可提高LPS刺激后HK-2细胞的活性(P<0.05),降低凋亡因子Bax的表达(P<0.05),抑制剪切的半胱氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)和cleaved Caspase-9的活化(P<0.05),并可上调BCL-2抗凋亡蛋白的表达,另外还可减少炎性细胞因子的表达(P<0.05)。
此外,荧光素酶报告基因检测发现BCL2L11是miR-25的直接作用靶点,即BCL2L11的表达受miR-25的负调控(P<0.05),另外BCL2L11可逆转miR-25对LPS刺激HK-2细胞炎症和凋亡的抑制作用(P<0.05);结论本研究揭示miR-25可能通过靶向BCL2L11在LPS诱导的HK-2细胞中发挥抗炎和抗凋亡作用。
「关键词]脓毒症;急性肾损伤;miR-25;BCL2L11中图分类号R631.2文献标识码A文章编号1004-0188(2021)04-0282-05doi:10.3969/j.issn.1004-0188.2021.04.002MiR-25plays protective role in sepsis-induced AKI cell model by targeting BCL2L11Wu Bin,Wang Meitang Emergency Department,Changhai Hospita1,Shanghai,200082,China0对ective To study the effects of microRNA(miR)-25on the pro1iferation,apoptosis and inflammation of human rena1tubu1ar epithe1ia1ce11s(HK-2)induced by1ipopo1ysaccharide(LPS)and its under1ying mechanism.Me出ods HK-2ce11s were treated with LPS to estab1ish an in vitro sepsis-induced AKI ce11mode1,and the expression1eve1of miR-25was measured.Mir-25 mimics and inhibitors were transfected respective1y,and the effects of miR-25on ce11viabi1ity,inf1ammation and apoptosis were observed when HK-2ce11s were treated with LPS.A dua11uciferase reporter system was used to detect the targeting re1ationship between miR-25and BCL2L11,and the reverse effects of BCL2L11on a11eviating LPS-induced HK-2ce11injury by miR-25was verified by cotransfection of BCL2L11overexpression p1asmid and miR-25mimic for LPS induction.Results It was found that the expression of miR-25was downregu1ated in LPS-induced HK-2ce11s(P<0.05).Overexpression of miR-25cou1d increase the viabi1ity of HK-2ce11s treated with LPS(P<0.05),decrease the expression of apoptosis factor Bax(P<0.05),suppress the activation of c1eaved caspase-3and c1eaved caspase-9(P<0.05),upregu1ate the expression of anti-apoptotic protein BCL-2,and decrease the expression of inflammatory cytokines(P<0.05).In addition,1uciferase reporter gene assay showed that BCL2L11was the direct target of miR-25,that is,the expression of BCL2L11was negatively regulated by miR-25(P<0.05).Moreover, BCL2L11cou1d reverse the inhibitory effects of miR-25on inf1ammation and apoptosis of HK-2ce11s induced by LPS(P<0.05). Conclusion This study reveals that miR-25may play anti-inflammatory and anti-apoptotic roles in LPS-induced HK-2cells by targeting BCL2L11.words]sepsis;acute kidney injury;miR-25;BCL2L11脓毒症是由感染因素引起的最致命的全身性炎症综合征,可引起休克、多器官功能障碍综合征,甚至死亡[1]。
小鼠β2糖蛋白1抗体IgAGMβ2GP1IgAGMelisa试剂盒使用
小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1lgA/G/M)elisa 试剂盒使用说明书Elisa kit规格:48孔配置/96孔配置标准品稀释液:1.5ml X 1瓶酶标试剂:3 ml X 1 瓶(48) /6 ml X 1 瓶(96)【小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1 IgA/G/M) elisa试剂盒】本试剂仅供研究使用计算:以标准物的浓度为横坐标,0D值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的0D值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。
试剂盒组成:封板膜:2片(48) /2片(96)说明书:1份密封袋:1个标准品:2700ng/L 0.5ml X 1 瓶0.5ml X 1 瓶2-8C保存酶标包被板:1X 48 1X 96 2-8 C保存样品稀释液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂A液:3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存显色剂B液: 3ml X 1 瓶 6 ml X 1 瓶2-8 C保存终止液:3ml X 1 瓶6ml X 1 瓶2-8 C保存浓缩洗涤液:(20ml X 20倍)X 1瓶 (20ml X 30倍)X 1瓶2-8C保存实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠 B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1IgA/G/M)水平。
用纯化的小鼠B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1 IgA/G/M)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入 B 2糖蛋白1抗体IgA/G/M( B 2-GP1IgA/G/M),再与HRP标记的B 2糖蛋白1抗体lgA/G/M( B 2-GP1 IgA/G/M) 抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
小鼠B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)-ELISA试剂盒说明书
小鼠B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号:E-EL-M0175(本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!)声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。
适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Bcl-2浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗小鼠Bcl-2抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的Bc l-2会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗小鼠Bcl-2抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗小鼠Bcl-2抗体与结合在包被抗体上的小鼠Bcl-2结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。
用酶标仪在450nm波长处测OD值,Bcl-2浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中Bc l-2的浓度。
标本收集:1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。
避免使用溶血,高血脂标本。
3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
靶向Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1反义核酸抑制消化系肿瘤细胞增殖效果的差异
靶向Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1反义核酸抑制消化系肿瘤细胞增殖效果的差异蒋建伟;吴风云;何金花;廖晓莉;王威;吴志慧【摘要】目的比较靶向Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1反义核酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASO)对消化系统肿瘤细胞(肝癌HepG2细胞、胃癌MGC-803细胞、结肠癌Lovo细胞)的增殖抑制作用和致凋亡作用的差异.方法分别合成靶向Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1的反义核酸和随机序列反义核酸(random oligodeoxynucleotide,RODN),采用脂质体LipofectamineTM2000转染细胞,WST法检测相同浓度的5种ASOs对肝癌HepG2细胞、胃癌MGC-803细胞、结肠癌Lovo细胞的增殖抑制作用和致凋亡作用.结果 Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1等5种ASOs中,不论是对细胞增殖抑制还是致凋亡作用,均以Bcl-xl ASO、Mcl-1 ASO的作用效果较好.结论在Bcl-2、Bcl-xl、Mcl-1、Bcl-w、A1等5种ASOs中,Bcl-xl ASO、Mcl-1 ASO可明显抑制消化系肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2010(026)008【总页数】6页(P1093-1098)【关键词】反义核酸;Bcl-2;Bcl-xl;Mcl-1;增殖;凋亡;肿瘤细胞【作者】蒋建伟;吴风云;何金花;廖晓莉;王威;吴志慧【作者单位】暨南大学医学院生化教研室,广东,广州,510630;暨南大学医学院生化教研室,广东,广州,510630;浙江省温州市平阳县人民医院,浙江,温州,325400;暨南大学医学院生化教研室,广东,广州,510630;广东省广州市番禺区中心医院检验科,广东,广州,511440;暨南大学医学院生化教研室,广东,广州,510630;暨南大学医学院生化教研室,广东,广州,510630;暨南大学医学院生化教研室,广东,广州,510630【正文语种】中文【中图分类】R329.24;R329.25;R735.022线粒体相关的细胞凋亡途径通过Bcl-2家族蛋白的调节。
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