产志贺毒素大肠埃希菌生物被膜形成能力与毒力基因表达的关系

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关于志贺毒素的研究进展

关于志贺毒素的研究进展金秋(淮阴卫生高等职业技术学校江苏淮安 223300)【中图分类号】R37 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）15-0187-02肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagie Escherichia coli，EHEC) O157：H7自1982年被确认为致病菌以来的20多年中，其引发的食物中毒在世界各地包括中国都有不同规模的暴发流行[1]。

肠出血性大肠埃希菌(EHEC)O157：H7是引起人类感染性腹泻的病原菌,由于可导致患者出血性肠炎(HC)、溶血性尿毒综合征(HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等病死率高的疾病[2],因而已成为威胁人群健康的重要公共卫生问题。

EHEC O157 ：H7 主要依靠它产生的志贺毒素、溶血素和对上皮细胞的粘附素引起人体的损害。

其中志贺毒素(Shiga toxin, Stx )，现已被认为是是引起人类溶血性尿毒综合征和血栓性血小板减少性紫癜最为重要的致病因子。

志贺毒素(Stx)的结构和致病机制志贺毒素作用于肠道引起腹泻，其病理表现为肠粘膜出血和水肿，伴有和EPEC（致病性大肠杆菌）引起的与紧密粘附/擦伤(A/E)相似的细胞损伤，志贺毒素与痢疾菌的毒素性质相近，志贺毒素（Stx）又名Vero细胞毒素(Verotoxin，VT)，Stx是肠出血性大肠杆菌表达的毒素，有Stx1和Stx2之分。

毒素由A、B二种亚基组成，一个A亚基单体与B亚基的五聚体以非共价键结合构成全毒素。

B亚基与细胞膜糖脂类受体球丙糖酰基鞘氨醇(Gb3) 或球丁糖酰基鞘氨醇(Gb4)特异性结合，介导A亚基进入靶细胞，然后被转移至高尔基体，再达内质网，最后A亚基被转至胞浆，在胞浆内被切割成A1（27KDa）和A2（4KDa）两个片段。

A1片段有酶活性，以葡萄糖水解酶的方式作用于核糖体，使大亚基28S rRNA第4324位腺嘌呤脱落，使氨酰tRNA不能进入核糖体的A位点[3]，导致真核细胞蛋白质合成终止。

牛肉样品中产志贺毒素大肠埃希氏菌和肠致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定

牛肉样品中产志贺毒素大肠埃希氏菌和肠致病性大肠埃希氏菌的分离鉴定朱应飞，聂　翔，熊丽霞，吴学平，占忠旭，匡佩琳（江西省检验检测认证总院食品检验检测研究院，江西南昌 330000）摘　要：于2018年9月—2019年3月，每个月从超市和农贸市场中抽取20个样本，共抽取140个牛肉及制品样本，在qPCR初筛时stx阳性率为45.8%，eae的阳性率为52.2%。

每月的stx初筛阳性率分别为65%、60%、80%、5%、25%、45%和40%；eae初筛阳性率分别为70%、70%、65%、0%、40%、65%和55%。

检出携带stx基因的产类志贺毒素大肠埃希氏菌样本4份，样本阳性菌株检出率为2.9%；检出携带eae基因的肠致病性大肠埃希氏菌样本12份，样本阳性菌株检出率为8.6%。

关键词：产志贺毒素大肠埃希氏菌；肠致病性大肠埃希氏菌；分离；鉴定Isolation and Identification of Shiga Toxin Producing Escherichia coli and Enteropathogenic Escherichia coli in BeefSamplesZHU Yingfei, NIE Xiang, XIONG Lixia, WU Xueping, ZHAN Zhongxu, KUANG Peilin (Jiangxi General Institute of Testing and Certification Food Testing Institute, Nanchang 330000, China)Abstract: From September 2018 to March 2019, 20 samples were taken from supermarkets and farmers’ markets every month, with a total of 140 beef and product samples taken. the positive rate of stx was 45.8%, and the positive rate of eae was 52.2%. The monthly positive rates of stx initial screening positive rates of 65%, 60%, 80%, 5%, 25%, 45%, and 40%, respectively; The positive rates of eae initial screening were 70%, 70%, 65%, 0%, 40%, 65%, and 55%, respectively. Four Shiga toxin producing Escherichia coli samples carrying the stx gene were detected, with a positive strain detection rate of 2.9%; From September 2018 to March 2019, 12 samples of enteropathogenic Escherichia coli carrying the eae gene were detected, with a positive strain detection rate of 8.6%.Keywords: Shiga toxin producing Escherichia coli; enterogenic Escherichi coli; separation; appraisal产志贺菌毒素的大肠杆菌（Shiga Toxin Producing Escherichia coli，STEC）和肠致病性埃希氏菌（Enterogenic Escherichi coli，EPEC）是世界上最重要的食源性病原体之一。

第七章志贺毒素

第七章志贺毒素1903年Conradi首次报道了志贺毒素(shiga toxin,ShT )。

静脉内注射志贺痢疾杆菌自溶物可以麻痹和杀死家兔。

后来证实不同的动物对ShT的致死效应表现出不同的敏感性,只有小鼠和兔子表现出神经症状。

50年代的研究认为，ShT不直接作用于神经元,不是神经毒素，但通过作用于脑脊髓的血管系统而引起激发性神经功能紊乱。

近年来Viley等报道ShT能通过轴突传送到大鼠的迷走神经元并杀死该处的神经元；Brown等未能证实通过轴突将ShT传送，也未证实大鼠的细胞毒性或特异性结合到成神经细胞瘤杂交细胞。

80年代人们制备出纯化的ShT，报道了其麻痹致死、细胞毒性和肠毒性等生物学活性。

一、ShT的化学结构和理化特性ShT的分子量约70kD，由A和B亚基两部分组成。

A亚基的前体分子量为32.5kD，成熟A亚基的分子量为32kD，由293个氨基酸残基组成；ShT共有5个B亚基，B亚基前体分子量为9.4kD，成熟B亚基的分子量为7.6kD，由69个氨基酸残基组成。

ShT和志贺样毒素(SLT1)，两者的A亚基无论是前体分子量、成熟分子量以及氨基酸残基组成基本相同，只是第45位氨基酸残基不同,ShT是苏氨酸,SLT是丝氨酸。

这是两种毒素具有相似的生物活性的物质基础；两者B亚基完全相同。

因此，许多研究者常将它们放在一起来研究。

A亚基由A1和A2部分组成，由二硫键联结，用胰蛋白酶可将二硫键打开。

A1分子量约27kD，具有催化酶活性，其C-末端将A1定位于内质网膜；A2的分子量为4kD。

ShT和SLT均不耐热，65℃30分钟不被灭活，若加热到90℃30分钟、98℃15分钟、100℃2分钟则失去全部毒素活性。

ShT的等电点是7.03，B亚基的等电点为5.67。

ShT不溶于蒸馏水而溶于含盐的溶液中，其溶解度有一个高的温度系数。

如1%的毒素溶液在5℃时能出现沉淀物，温度升高后该沉淀物既行溶解。

二、ShT的遗传学(一)、ShT 在染色体上的定位Tsutomu Sekizaki 等将高频转导痢疾志贺菌血清I型中的ShT基因的大肠杆菌(E.Coli)接合转化子(transconjuant)进行分析。

大肠埃希菌毒力基因研究进展

大肠埃希菌毒力基因研究进展张金宝;李晓娜;王桂琴【摘要】大肠埃希菌是寄生于人或动物肠道内的一种肠杆菌科的革兰阴性菌，常引起幼畜严重腹泻和败血症、猪水肿病、人的出血性结肠炎-溶血性尿毒综合征、新生儿脑膜炎及肾炎等多种疾病，其毒力基因主要有escs、eaeA、Stx1、Stx2、Stx2e、sep、esp、astA、aggA、hlyE、ST （STa、STb）、LT 等。

论文主要介绍eaeA、Stx2e、ST（STa、STb）、astA 4个毒力基因的来源、结构、所致疾病及其与大肠埃希菌耐药性之间的相关性，旨在为动物疾病的传染源及疾病的流行病学调查和防控提供相关证据。

%Escherichia coli is a Gram-negative bacteria of Enterobacteriaceae in the intestine of human or animals .It often causes severe diarrhea and sepsis in young animals ,pig edema disease ,human hemor-rhagic colitis-hemolytic uremic syndrome ,neonatal meningitis and nephritis and other diseases .Its viru-lence genes mainly includeescs ,eaeA ,Stx1 ,Stx2 ,Stx2e ,Sep ,esp ,astA ,aggA ,hlyE ,ST (STa ,STb) ,LT ,etc .This article briefly described the source ,structure ,the illness caused of the eaeA ,Stx2e , ST (STa ,STb) and astA ,and the correlation between virulence genes and E .coli resistance .The aim is to provide relevant evidence for the infectious source of animal diseases and epidemiology investigations and control .【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2014(000)008【总页数】5页(P70-73,74)【关键词】大肠埃希菌;毒力基因;耐药性【作者】张金宝;李晓娜;王桂琴【作者单位】宁夏大学农学院，宁夏银川750021;宁夏大学农学院，宁夏银川750021;宁夏大学农学院，宁夏银川750021【正文语种】中文【中图分类】S852.612大肠埃希菌是澳大利亚医学家Escherich在1885年借助显微镜首次发现的。

病原生物与免疫学考试题及答案

病原生物与免疫学考试题及答案一、单选题（共100题，每题1分，共100分）1.下列属于细胞免疫的是（）A、中和作用B、调理作用C、抗肿瘤D、激活补体E、以上都不是正确答案：C2.下列真菌能使腐烂水果发出酒味的是A、酵母菌B、青霉C、灵芝D、蘑菇E、香菇正确答案：A3.紫外线多用于空气消毒是因为（）A、紫外线穿透力弱B、空气不能用其他方法C、用于空气效果最好D、紫外线可引起细菌变异E、紫外线对人无伤害正确答案：A4.引起流感世界大流行的病原体是A、副流感病毒B、甲型流感病毒C、乙型流感病毒D、丙型流感病毒E、流感病毒正确答案：B5.土壤中距地面（）深细菌数量最多A、15-20mB、10-20mC、20-30mD、2mE、5-10m正确答案：B6.肥达实验O凝集效价高、H凝集效价不高，则A、细胞免疫功能如低下B、肠热症早期或交叉反应C、肠热症可能性小D、肠热症可能性大E、预防注射或回忆反应正确答案：B7.质粒的结构是（）A、单链RNAB、单链DNAC、双链DNAD、双链RNAE、都不是正确答案：C8.病人进行肾脏移植术后出现排斥反应属于（）A、共同抗原B、同种异型抗原C、异种抗原D、异嗜性抗原E、自身抗原正确答案：B9.刺激机体具有记忆性的抗原是（）A、外毒素B、脂多糖C、荚膜多糖D、聚合鞭毛素E、以上都不是正确答案：A10.关于T细胞描述不正确的一项（）A、表面有抗原识别受体B、有CD2分子C、介导体液免疫D、分两个亚群E、都不对正确答案：C11.鉴定C群链球菌的实验是A、胆汁七叶苷实验B、RYR实验C、CAMP实验D、GBUR实验E、Optochin实验正确答案：D12.致病菌侵入血流并大量繁殖，产生毒性代谢产物引起全身症状称（）A、败血症B、菌血症C、毒血症D、带菌者E、局部感染正确答案：A13.噬菌体（）A、严格宿主特异性B、可用滤菌器除去C、含DNA和RNAD、抵抗力比细菌强E、都是正确答案：A14.干扰素抗病毒的主要作用作用是在于A、诱导细胞产生抗病毒蛋白B、阻止病毒脱壳C、阻止释放D、阻止病毒吸附E、诱导细胞免疫正确答案：A15.固有免疫不包括（）A、皮肤黏膜屏障B、吞噬细胞吞噬作用C、血脑屏障D、细胞免疫E、胎盘屏障正确答案：D16.细菌的合成性代谢产物是（）A、色素B、细菌素C、热原质D、维生素E、以上均是正确答案：E17.---是消灭鼠疫的根本性措施A、预防接种B、加强预防宣传C、开展流行病学检测D、拔除鼠疫的自然疫源地E、加强国境卫生检疫正确答案：D18.下列疾病中，可形成慢性抗原携带状态的是A、带状疱疹B、麻疹C、流行性乙型脑炎D、乙型肝炎E、脊髓灰质炎正确答案：D19.流感病毒最易发生变异的成分是A、RNA多聚酶B、M蛋白C、RNPD、HA和NAE、以上都是正确答案：D20.超声波裂解细菌的机制是（）A、干扰RNA合成B、干扰蛋白质合成C、空化作用D、破坏细胞膜E、引起酶的紊乱正确答案：C21.与外毒素相同免疫原性的物质是（）A、抗毒素B、干扰素C、细菌素D、抗生素E、类毒素正确答案：E22.下列病毒中不属于肠道病毒的是A、风疹病毒B、柯萨奇病毒C、脊髓灰质炎病毒D、轮状病毒E、埃可病毒正确答案：A23.细胞免疫的活化阶段不包括（）A、T细胞活化B、释放细胞因子C、分化成Tc细胞D、Th细胞活化E、以上都是正确答案：E24.与立克次体有共同抗原成分的细菌是A、产期杆菌B、绿脓杆菌C、痢疾志贺菌D、变形杆菌E、大肠埃希菌正确答案：D25.脂多糖的毒性成分是（）A、脂蛋白B、类脂AC、核心多糖D、特异多糖E、磷壁酸正确答案：B26.下列不属于G+菌细胞壁结构的是（）A、M蛋白B、磷壁酸C、脂多糖D、五肽交联桥E、肽聚糖正确答案：C27.与细菌耐药性有关的质粒是（）A、F质粒B、R质粒C、Col质粒D、Vi质粒E、以上均是正确答案：B28.Ⅱ型超敏反应的发生机制（）A、IC沉积激活补体B、CTL特异性杀伤靶细胞C、肥大细胞脱颗粒D、补体依赖的细胞毒作用E、吞噬细胞的吞噬作用正确答案：D29.鼠疫是我国法定传染病A、甲类B、乙类C、丙类D、丁类E、以上均不是正确答案：A30.链球菌抗原构造中与致病性相关的抗原是A、O抗原B、M抗原C、SPAD、K抗原E、Vi抗原正确答案：B31.接种乙肝疫苗属于（）A、免疫耐受B、免疫抑制C、主动免疫D、被动免疫E、过继免疫正确答案：C32.干扰素抗病毒的作用特点中不包括A、免疫调节B、只能针对某种病毒，作用有特异性C、种属特异性D、抗肿瘤E、间接灭活病毒正确答案：B33.属于G+菌的是（）A、炭疽杆菌B、霍乱弧菌C、变形杆菌D、伤寒杆菌E、大肠杆菌正确答案：A34.乙醇消毒时的有效浓度是（）A、40-50%B、99%C、70-75%D、50-60%E、90%正确答案：C35.具有中和外毒素作用的抗体是（）A、IgMB、IgDC、IgED、IgAE、IgG正确答案：E36.属于非细胞型微生物的是（）A、病毒B、真菌C、细菌D、放线菌E、支原体正确答案：A37.革兰氏染色法的关键操作步骤是（）A、酒精脱色B、复红复染C、碘媒染D、都不是E、结晶紫染色正确答案：A38.抗体IgD主要分布的细胞是（）A、T细胞B、B细胞C、NK细胞D、吞噬细胞E、肥大细胞正确答案：B39.机体在感染后，病原菌未立即消失，仍在体内存留一定时间，与机体处于相对平衡称（）A、带菌状态B、隐性感染C、急性感染D、显性感染E、慢性感染正确答案：A40.与鉴别脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌有关的实验是A、乳糖发酵B、葡萄糖发酵C、麦芽糖发酵D、蔗糖发酵E、果糖发酵正确答案：C41.有关衣原体发育周期的描述错误的是A、始体在发育周期中无感染性B、每个发育周期需要20-40个小时C、始体较原体大，有致密的核质D、始体在空泡内以二分裂形式繁殖形成子代原体E、原体具有感染性正确答案：C42.系统性红斑狼疮属于（）A、Ⅱ型超敏反应B、都不是C、Ⅲ型超敏反应D、Ⅳ型超敏反应E、Ⅰ型超敏反应正确答案：C43.痰结核杆菌培养，应选用的培养基是A、普通琼脂培养基B、血平板C、巧克力色培养基D、沙包培养基E、罗氏培养基正确答案：E44.下列不属于活疫苗的是（）A、狂犬病疫苗B、麻疹疫苗C、脊灰疫苗D、卡介苗E、甲肝疫苗正确答案：A45.初步将志贺菌从肠道杆菌中鉴别出来的生化反应方法是A、胆汁溶解实验B、半固体双糖含铁培养基接种实验C、尿素分解实验D、培养基中加亚碲酸钾E、菊糖发酵实验正确答案：B46.流行性感冒的病原体是A、流感病毒B、鼻病毒C、呼吸道合胞病毒D、流感杆菌E、脑膜炎病毒正确答案：A47.如果肥达反应实验结果是H：1：640、 O：1：320、PA：1：80、PB1：80，该患者可能是A、甲型副伤寒沙门菌所致副伤寒B、肖氏沙门菌所致副伤寒C、伤寒沙门菌感染D、回忆反应E、预防注射正确答案：C48.用于霍乱弧菌培养的培养基是A、碱性蛋白胨水B、碱性琼脂平板C、庆大霉素平板D、TCBSE、以上都可以正确答案：E49.对热抵抗力最强的无芽胞菌是（）A、金葡菌B、链球菌C、大肠杆菌D、结核杆菌E、军团菌正确答案：A50.血型鉴定时，待检红细胞与抗A抗体凝集属于（）A、沉淀反应B、凝集反应C、标记技术D、中和反应E、都不是正确答案：B51.用人工方式获得的免疫力称（）A、过继免疫B、主动免疫C、人工免疫D、都不是E、被动免疫正确答案：C52.战时特异性预防破伤风应注射A、活菌苗B、外毒素C、抗毒素D、死菌苗E、类毒素正确答案：E53.破伤风抗毒素引起的过敏性休克属于（）A、Ⅲ型超敏反应B、Ⅰ型超敏反应C、Ⅱ型超敏反应D、Ⅳ型超敏反应E、都不是正确答案：B54.干扰素既可干扰病毒又可抗肿瘤，还可干扰免疫反应，此特点属于（）A、多源性B、拮抗性C、多向性D、多效性E、协同性正确答案：D55.无鞭毛的细菌在半固体培养基中的生长现象是（）A、在表面生长B、沉淀生长C、澄清透明D、沿穿刺线生长E、混浊生长正确答案：D56.细菌生长环境中非必须物质（）A、蛋白质B、温度C、有机物D、水E、气体正确答案：C57.最易发生变异的病毒是A、腮腺炎病毒B、脊髓灰质炎病毒C、麻疹病毒D、呼吸道合胞病毒E、流感病毒正确答案：E58.引起普通感冒最常见的病毒是A、鼻病毒B、呼吸道合胞病毒C、冠状病毒D、流感病毒E、副流感病毒正确答案：E59.在胎儿期，唯一能够通过胎盘的抗体是（）A、IgAB、IgMC、IgED、IgGE、IgD正确答案：D60.Ⅳ型超敏反应发生机制是（）A、IC沉积激活补体B、CTL特异性杀伤靶细胞C、肥大细胞脱颗粒D、吞噬细胞的吞噬作用E、都不是正确答案：B61.在脾脏中定居的免疫细胞不包括（）A、B细胞B、吞噬细胞C、T细胞D、树突状细胞E、以上都是正确答案：D62.根据是否需要氧气分类不包括（）A、链球菌B、微需氧菌C、专性厌氧菌D、都不是E、专性需氧菌正确答案：A63.与结核杆菌抗酸性有关的成分是A、索状因子B、磷脂C、分枝菌酸D、蜡质DE、硫酸脑苷脂正确答案：C64.哪项不是厌氧芽孢菌的特点A、均为革兰阳性杆菌B、都能形成芽孢C、都是通过伤口感染D、均为厌氧菌E、主要分布于土壤正确答案：C65.支原体与病毒的相同点是A、对抗生素敏感B、含有两种核酸C、能在无生命培养基上生长繁殖D、能通过滤菌器E、胞膜中含大量胆固醇正确答案：D66.通过对DNA进行截取或加工处理制备的抗体称（）A、单克隆抗体B、多克隆抗体C、基因抗体D、都是E、都不是正确答案：C67.下列细菌中繁殖最慢的是A、脑膜炎奈瑟菌B、丙型链球菌C、肺炎链球菌D、结核分枝杆菌E、大肠埃希菌正确答案：D68.关于抗HBC-IgM，正确的叙述是A、由HBV的表面抗原刺激产生B、在血清中可长期存在C、有抗HBV再感染的作用D、阳性为早期诊断HBV感染的依据之一E、阳性表示疾病开始恢复正确答案：C69.毒性作用最强的外毒素是（）A、肉毒毒素B、金葡菌肠毒素C、霍乱肠毒素D、白喉外毒素E、破伤风痉挛毒素正确答案：A70.结核分枝杆菌引起的干酪样坏死属于（）A、Ⅰ型超敏反应B、Ⅳ型超敏反应C、Ⅱ型超敏反应D、都不是E、Ⅲ型超敏反应正确答案：B71.能被CD4+T细胞特异性识别的抗原是（）A、CD2B、CD3C、MHC-I类分子D、MHC-II类分子E、CD8正确答案：D72.细菌学中最经典的染色方法是（）A、抗酸染色法B、单染C、革兰染色法D、亚甲蓝染色法E、不染色法正确答案：C73.关于流脑的叙述，下列哪一项是错误的A、主要致病因素是内毒素B、95%以上由B群脑膜炎球菌引起C、人类为唯一的传染源D、主要通过飞沫传播E、暴发型以儿童为主正确答案：C74.下列哪种细菌可利用“冷增菌”A、流感嗜血杆菌B、淋病奈瑟菌C、炭疽芽孢杆菌D、产单核李斯特菌E、红斑丹毒丝菌正确答案：D75.下列不属于G+菌的是（）A、破伤风梭菌B、炭疽杆菌C、白喉杆菌D、霍乱弧菌E、肺炎球菌正确答案：D76.下列微生物中，与人类生活的关系密切，且对人类有益的是A、黄曲霉菌B、痢疾杆菌C、肺炎双球菌D、木耳、乳酸菌E、霍乱弧菌正确答案：D77.灭活是指在理化因素的作用下使病毒失去A、感染性B、融合细胞性C、血凝特性D、诱导干扰素的能力E、抗原性正确答案：A78.下列抗体中哪一种不是单体结构（）A、IgDB、IgEC、IgGD、IgME、以上都不是正确答案：D79.补体参与的超敏反应有（）A、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型超敏反应B、都不是C、Ⅱ、Ⅲ型超敏反应D、Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型超敏反应E、Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型超敏反应正确答案：C80.最常见的化脓性细菌A、大肠杆菌B、乙链菌C、肺双菌D、金葡萄球菌E、变形杆菌正确答案：D81.在肠道杆菌的生化反应中，不符合的是A、乳糖发酵阴性B、O/F实验为F型C、氧化酶阴性D、触酶阳性E、硝酸盐还原阳性正确答案：A82.龙胆紫的消毒机制是（）A、干扰RNA合成B、氧化作用C、损伤细胞膜D、抑制细菌繁殖E、灭活酶的活性正确答案：D83.下列可以用紫外线消毒的是（）A、皮肤B、纸张C、水蒸气D、玻璃E、病房正确答案：E84.脊髓灰质炎患者的传染性排泄物主要是A、粪B、血C、鼻咽分泌物D、尿E、眼分泌物正确答案：A85.Rh阴性的母亲再次怀了一个Rh阳性的胎儿，会引起（）A、新生儿溶血B、血清病C、肾小球肾炎D、都不是E、输血反应正确答案：A86.不属于细菌细胞质结构的是（）A、核糖体B、质粒C、脂多糖D、异染颗粒E、胞质颗粒正确答案：C87.外源性感染不包括（）A、病畜B、带菌者C、带菌动物D、病人E、正常菌群正确答案：E88.真空压力蒸汽灭菌法灭菌时间只需要（）A、15-20minB、1-2hC、3-4minD、1-2minE、5-10min正确答案：C89.葡萄球菌产生的毒素是A、耐热核酸酶B、透明质酸酶C、杀白细胞素D、凝固酶E、荚膜正确答案：C90.化脓性炎症，其浓汁粘稠、病灶局限，这是由于病原菌产生A、透明质酸酶B、耐热核酸酶C、链道酶D、普激酶E、血浆凝固酶正确答案：E91.在半固体培养基表现为无动力的菌属是A、大肠埃希菌属B、变形杆菌属C、沙门菌属D、沙雷菌属E、志贺菌属正确答案：E92.金黄色葡萄球菌产生的侵袭性酶是（）A、链道酶B、透明质酸C、胶原酶D、血浆凝固酶E、链激酶正确答案：D93.下列能产生志贺样毒素的大肠埃希菌是A、EIECB、ETECC、EPECD、EHECE、EaggEC正确答案：D94.鉴定葡萄球菌致病性的重要指标是A、产生溶素B、产生血浆凝固酶C、产生色素D、具有SPAE、发酵葡萄糖正确答案：B95.关于质粒不正确的是（）A、双股环状DNAB、生长繁殖必须的C、控制耐药性D、控制毒力E、可以遗传正确答案：B96.抗体IgG是在出生（）月后才能合成的A、6B、7C、8D、3E、5正确答案：D97.下列特点属于真菌主要特征的是A、全是单细胞个体B、具有真正细胞核C、具有根、茎、叶D、细胞内含有叶绿素E、以上都不对正确答案：B98.下列选项中符合IgA特点的是（）A、含量最多的B、能穿过胎盘C、初乳中含量最多D、半衰期最长E、出现最早正确答案：C99.淋巴结的功能不包括（）A、净化作用B、储存淋巴细胞C、免疫反应场所D、淋巴细胞的产生E、过滤正确答案：D100.再次应答产生的抗体主要是（）A、IgGB、IgMC、IgED、IgAE、IgD正确答案：A。

产志贺毒素大肠杆菌流行病学及主要毒力因子研究进展

产志贺毒素大肠杆菌流行病学及主要毒力因子研究进展旷代;潘海建;杨筱薇;李赞阳;张建民【摘要】产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,STEC)是一类能引起包括水样腹泻、出血性结肠炎、尿毒综合症等一系列人体疾病的人畜共患肠道致病菌,其感染在世界范围内包括中国都有过暴发流行.文章阐述了STECO157血清型和非O157血清型的分布特征及流行趋势,同时还对该病的主要毒力因子进行了综述,以期为该病的防控提供科学依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2013(040)008【总页数】5页(P180-184)【关键词】产志贺毒素大肠杆菌;流行病学;毒力因子【作者】旷代;潘海建;杨筱薇;李赞阳;张建民【作者单位】上海交通大学农业与生物学院,上海200240;华南农业大学兽医学院,广东广州 510642;上海交通大学农业与生物学院,上海200240;上海交通大学农业与生物学院,上海200240;上海交通大学农业与生物学院,上海200240;上海交通大学农业与生物学院,上海200240【正文语种】中文【中图分类】S852.61产志贺毒素大肠杆菌（Shiga toxin－producing Escherichia coli，STEC）是一种人畜共患肠道致病菌，能产生志贺毒素并引起水样腹泻（watery diarr hea）、出血性肠炎（he morr hagic coltis，HC）、血栓性血小板紫癜（TTP）和溶血性尿毒综合症（hemol ytic－uremic syndr o me，HUS）等一系列严重的疾病甚至死亡。

O157型是STEC中致病力最强、流行趋势最广及发病率最高的血清型，同时近年来非O157血清型引起的食物中毒也持续上升，应该引起警惕。

目前世界范围内对STEC仍缺乏有效的控制手段，研究正处在初步阶段，作者主要就其流行病学理论和主要毒力因子致病机制的相关研究进展作一简要综述。

大肠杆菌毒力基因

大肠杆菌的毒力基因包括黏附素基因（K88、K99、987P、F41、F18）、毒素基因（Stx1、Stx2、Sta、Stb、LT）、溶血素（HylA）、HPI毒力岛（FyuA、irp2）和Lee毒力岛（eaeA）等。

其中，黏附素基因是介导细菌与靶细胞相结合的蛋白质，能够使细菌快速突破一道道屏障并直接感染机体。

毒素基因则分为不耐热肠毒素和耐热肠毒素，它们由位于质粒上的三种毒力基因编码。

另外，大肠杆菌在人的尿道、体液和血液中可使iroN的表达增强，UPEC536株的iroBCDEN基因簇定位于III毒力岛上，有研究者认为iroN可增强大肠杆菌苯磷二酚铁结合性复合物-肠菌素的铁摄取能力。

除此之外，还有气杆菌素、耶尔森菌强毒力岛等毒力因子。

以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅相关文献或咨询专业人士。

细菌的毒力因子与致病机制

细菌的毒力因子与致病机制细菌是一类微生物，它们存在于自然界的各个环境中，包括土壤、水体、空气等。

虽然细菌在人体内也有一定的益处，但某些细菌也会引发各种疾病。

细菌的致病能力与其毒力因子以及致病机制密切相关。

一、细菌的毒力因子细菌的毒力因子是指细菌通过分泌或表达的一系列物质，使其具有致病能力。

这些毒力因子可以分为外毒素和内毒素两种。

1. 外毒素：外毒素是细菌分泌到细菌外部的一类毒性物质，包括肽类毒素、蛋白质毒素、脂质毒素等。

例如，白喉杆菌分泌的白喉毒素可以破坏宿主细胞的结构和功能，导致白喉病的发生。

大肠杆菌分泌的肠毒素能够引起食物中毒，导致腹泻和腹痛等症状。

2. 内毒素：内毒素是细菌细胞壁成分的一种，当细菌死亡或受到损伤时，内毒素会释放到周围环境中。

内毒素主要由脂多糖组成，具有强烈的炎症反应作用。

例如，脑膜炎双球菌的内毒素可以引起脑膜炎的发生，严重时甚至危及生命。

二、细菌的致病机制细菌的致病机制主要包括黏附、侵入、繁殖和破坏宿主细胞等过程。

1. 黏附：细菌通过表面的附着因子与宿主细胞表面的受体结合，从而实现在宿主细胞上的定植和繁殖。

例如，大肠杆菌通过其菌毛附着因子与肠道上皮细胞表面的受体结合，从而引发尿路感染等疾病。

2. 侵入：细菌通过黏附后，利用一系列的蛋白酶、溶菌酶等分泌物质，破坏宿主细胞的结构，进而侵入宿主细胞内部。

例如，沙门菌通过分泌的溶菌酶破坏肠道上皮细胞的结构，侵入宿主细胞内部，引发沙门菌感染。

3. 繁殖：细菌在宿主细胞内部利用宿主的营养物质进行繁殖。

细菌的快速繁殖会导致宿主细胞的死亡，进一步加重疾病的病情。

例如，结核分枝杆菌在宿主巨噬细胞内繁殖，导致肺结核的发生。

4. 破坏宿主细胞：细菌在宿主细胞内或外部分泌一系列的毒素，破坏宿主细胞的结构和功能。

这些毒素可以引起宿主细胞的溶解、凋亡或功能障碍，从而导致疾病的发生。

例如，破伤风杆菌分泌的破伤风毒素可以破坏神经细胞，导致破伤风的发生。

总结：细菌的毒力因子与致病机制是细菌引发疾病的关键因素。

毒力基因概念

毒力基因概念毒力基因概念简述什么是毒力基因？•毒力基因是指在生物体中存在的一种基因，能够导致生物产生毒性，对其自身或其他生物产生有害影响。

•这些基因可以影响生物发育、代谢、免疫系统等方面的功能，进而导致对生物产生毒性反应。

毒力基因的分类•毒力基因可以分为多种类型，包括细菌毒力基因、病毒毒力基因和真菌毒力基因等。

•不同类型的毒力基因具有不同的作用机制和致病方式。

细菌毒力基因•细菌毒力基因通常存在于细菌的染色体中，可以使细菌产生毒性因子，如毒素和表面抗原。

•这些基因可以使细菌对宿主产生感染和致病能力。

病毒毒力基因•病毒毒力基因是指病毒基因组中编码能够导致对宿主产生毒性反应的基因。

•这些基因可以使病毒在宿主体内复制和扩散，导致疾病的发生和发展。

真菌毒力基因•真菌毒力基因是指真菌基因组中编码能够导致对宿主和其他生物产生毒性的基因。

•真菌毒力基因可以使真菌对宿主产生感染和侵袭，引起各种疾病。

毒力基因的研究意义和应用•研究毒力基因可以帮助人们更好地了解生物的致病机制和生物相互作用规律。

•这对于预防和治疗疾病、控制病原微生物的传播具有重要意义。

疫苗研发•通过研究毒力基因，可以更好地了解病原微生物的致病机制，为疫苗的研发提供理论依据。

•基于毒力基因的研究，可以帮助科学家确定病原微生物中关键的毒力因子，从而设计相应的疫苗。

抗菌药物开发•了解细菌毒力基因有助于开发针对这些基因的抗菌药物。

•抑制或阻断细菌毒力基因的表达，可以削弱细菌的毒性，帮助治疗相关疾病。

病毒治疗策略•病毒毒力基因的研究可以为病毒治疗策略的制定提供依据。

•通过干扰病毒毒力基因的表达，可以减弱病毒对宿主的致病能力，从而实现治疗效果。

结语•毒力基因是导致生物产生毒性和对宿主产生有害影响的基因。

•研究毒力基因对于预防和治疗疾病、控制病原微生物传播具有重要意义。

毒力基因的调控机制•毒力基因的表达受到多种调控机制的控制，包括转录调控、转录后调控和翻译后调控等。

大肠杆菌毒性因子的特性和毒性机制

大肠杆菌毒性因子的特性和毒性机制大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，它们可以帮助消化食物、维持身体健康，但也有些大肠杆菌会产生毒性因子，引起食物中毒等疾病。

本文将讨论大肠杆菌毒性因子的特性和毒性机制。

一、大肠杆菌毒性因子的特性1. 毒性因子的类型大肠杆菌毒性因子有多种类型，常见的有肠毒素（Enterotoxin，ET）、肠黏附素（Adhesin，Adh）、外毒素（Exotoxin，Exo）等。

这些毒性因子的特点各不相同，但都能导致人体不适并引起疾病。

2. 分布范围大肠杆菌是一种广泛存在于自然环境中的细菌，包括土壤、水体、动物的肠道等地方。

因此，它们的毒性因子也存在于各种不同的环境中，可能会在不同的场合被人体摄入，产生危害。

3. 毒性效应大肠杆菌毒性因子的毒性效应主要有两种，一种是导致胃肠道疾病，包括腹泻、呕吐等；另一种则是影响其他部位的器官，比如肝脏、肾脏等，引起严重的中毒反应。

二、大肠杆菌毒性机制大肠杆菌毒性因子的毒性机制十分复杂，涉及多种分子机制的相互作用。

下面分别从分泌、结构、作用机制、与免疫反应等几个方面来介绍大肠杆菌毒性因子的毒性机制。

1. 分泌机制大肠杆菌毒性因子产生后，需要被分泌到菌外环境中才能产生毒性效应。

在大肠杆菌中，毒性因子可以通过分泌通道被分泌到周围环境中，其中较为常见的是Type III 分泌系统（TTSS）或Type VI 分泌系统（T6SS）。

这些分泌系统能够将毒性因子快速、有针对性地释放到目标细胞中，提高了细胞的感染率和感染效率。

2. 结构特点大肠杆菌毒性因子的结构特点各异，但通常具有多段多氨基酸序列和众多的功能位点。

其中较为重要的一类功能位点是拥有磷酸二酯酶（Phosphodiesterase，PDE）活性的位点，这类位点可以降解靶细胞内的环腺苷酸（Cyclic Adenosine Monophosphate，cAMP）或环磷酸腺苷酸（Cyclic Guanosine Monophosphate，cGMP），进而改变细胞的内部信号传导和代谢通路，引起细胞死亡、炎症反应等。

临床微生物学检验技术考试题库及答案(二)

临床微生物学检验技术考试题库及答案2、（正常菌群）条件致病性微生物——临床上多引起内源性感染。

3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素）4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白）5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。

结构由聚糖骨架、四肽侧链和五肽交联桥（G-菌无。

是溶菌酶、青霉素作用部位）6、细菌的主要遗传物质：核质（染色体）、质粒（存在于胞质，双链闭合环状DNA分子）、转位因子7、细菌特殊结构：荚膜（保护，致病，抗原性，鉴别）、芽胞、鞭毛（运动器官）、菌毛（普通菌毛—粘附，致病性；性菌毛—接合方式转移遗传物质）*将芽胞是否被杀死而作为判断灭菌效果的指标8、L型（细胞壁缺陷）菌落：①“油煎蛋”（荷包蛋）样菌落（典型L型细菌）。

②颗粒型菌落（简称G型菌落）③丝状菌落（简称F型菌落）。

高渗环境生长。

（环丙沙星）9、自营菌：以无机物为原料；异营菌(腐生菌：以无生命的有机物质为营养物质；寄生菌：以宿主体内有机物为原料),所有致病菌都是异营菌。

10、细菌营养物质：水、碳源、氮源、无机盐类和生长因子。

11、细菌个体的生长繁殖方式：无性二分裂，在对数期以几何级数增长12、细菌分类（伯杰）等级依次为界、门、纲、目、科、属、种（最小分类单位）。

13、常用的细菌培养方法是：需氧培养法、二氧化碳培养法和厌氧培养法；14、通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板，置于空气或含5%～10%CO2的气缸中培养，大部分细菌可于24～48h生长良好。

15、血清学诊断时，一般要在病程早期和晚期分别采血清标本2～3份检查，抗体效价呈4倍或以上增长才有价值。

16、透射电子显微镜适于观察细菌内部的超微结构；扫描电子显微镜适于对细菌表面结构及附件的观察。

17、细菌染色的基本程序：涂片（干燥）→固定→初染→染色（媒染）→（脱色）→（复染，使脱色菌体着色）。

18、胃部细菌喜酸，肠道细菌喜碱19、SS琼脂有较强的抑菌力，用于志贺菌和沙门菌的分离。

微生物学药学专业内毒素致病菌

H抗原刺激机体主要产生lgG抗体。
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13
Vi抗原
因与毒力有关而命名为Vi抗原。
由聚-N-乙酰-D-半乳糖胺糖醛酸组成。
不稳定，经60℃加热、石碳酸处理或人工传代培养易破坏或丢失。
新从患者标本中分离出的伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌等有此抗原。
Vi抗原存在于细菌表面，可阻止O抗原与其相应抗体的反应。
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17
肠热症（伤寒和副伤寒）
细菌到达小肠后，侵入肠壁淋巴组织，在其中大量繁殖，并进血流，引起第一次菌血症。病人有发热、全身不适、乏力等。
细菌随血流至骨髓、肝、脾、肾、胆囊、皮肤等并在其中繁殖，并再次进入血流，引起第二次菌血症。此期症状明显，病人持续高热，相对缓脉，肝脾肿大及全身中毒症状，皮肤出现玫瑰疹。血中的白细胞数量显著下降。
内毒素致病菌
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1
内毒素
内毒素存在于菌体内，是菌体的结构成份。
细菌在生活状态时不释放出来，只有当菌体自溶或用人工方法使细菌裂解后才释放，故称内毒素。
大多数革兰氏阴性都有内毒素，如沙门氏菌、痢疾杆菌、大肠杆菌、奈瑟氏球菌等
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2
内毒素的作用
内毒素对组织细胞的选择性不强，不同革兰氏阴性细菌的内毒素，引起的病理变和临床症状大致相同。 ①发热反应 ②糖代谢紊乱 ③血管舒缩机能紊乱 ④弥漫性血管内凝血
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所致疾病
志贺氏菌引起的细菌性痢疾是最常见的消化道传染病，夏秋季多见。
日光直接照射30分钟，56-60℃10分即被杀死，对酸、高温和化学消毒剂很敏感，1%石炭酸中15-30分钟即被杀死。
对氯霉素、磺胺类、链霉素敏感，但易产生耐药性。

临床微生物学检验技术考试题库及答案

临床微生物学检验技术考试题库及答案一、单选题1.细菌单位是A. dmB. cmC. mmD.umE. nm答案：D2.对下列细菌大小表述错误的是A.葡萄球菌体直径约1umB.大肠埃希菌长约2〜3umC.阴沟肠杆菌宽约0.3〜0.5umD.霍乱弧菌体长2〜3umE.布鲁菌长2~3um答案：E3.下列细菌菌体形态呈链状排列的是A.卡他布兰汉菌B.屎肠球菌C.腐生葡萄球菌D.肺炎克雷伯菌E.淋病奈瑟菌答案：B4.下列细菌菌体形态呈螺旋形排列的是A.表皮葡萄球菌B.产酸克雷伯菌C.克氏耶尔森菌D.鼠咬热螺菌E.鲍氏志贺菌答案：D5.下列不属于细菌基本结构的是A.细胞壁B.芽胞C.细胞膜D.核质E.细胞质答案：B6.不属于革兰阴性细菌细胞壁成分的是A脂蛋白 B.聚糖骨架 C.四肽侧链 D.五肽交联桥 E.脂多糖答案：D7.革兰阳性细菌细胞壁具有很强抗原性的成分是A.外膜B.肽聚糖C.磷壁酸D.聚糖骨架E.五肽交联桥答案：C8.下列菌有细胞壁外膜层的是A.粪肠球菌B.溶血葡萄球菌^新型隐球菌 D.产酸克雷伯菌E.克柔假丝酵母菌答案：D9.下列不属于细菌细胞质基本成分的是A.水B.聚糖骨架C.无机盐、糖D.蛋白质、脂类E.核酸答案：B10.控制细菌某些特定遗传性状的是A.核质B.胞质颗粒C.质粒D.核糖体E.蛋白质答案：C11.细菌细胞质中决定菌体嗜碱性的物质是A.核糖核酸B.质粒C.蛋白质口.双链闭环DNA E.脂类答案：A12.细菌的主要遗传物质是A.核糖核酸B.脂类C.质粒D.核质E.蛋白质答案：D13.不属于细菌特殊结构的是A.荚膜B.核质C.鞭毛D.菌毛E.芽胞答案：B14.对细菌荚膜功能表述不正确的是A.对细菌具有保护作用B.致病作用C.抗原性D.有特殊的H抗原E.鉴别细菌的依据之一答案：D15.下列对细菌鞭毛表述不正确的是A.是由细胞质伸出的蛋白质丝状物B.长度超过菌体数倍C.弧菌都具有鞭毛D.革兰阴性杆菌都具有鞭毛E.螺菌都具有鞭毛答案：D16.下列有菌毛的细菌是A.表皮葡萄球菌B.肺炎链球菌C.金黄色葡萄球菌D.霍乱弧菌E.结核分枝杆菌答案：D17.细菌的DNA存在于A.蛋白质B.染色体和质粒中C.细胞质染色体外D.细胞壁E.聚糖骨架中答案：B18.下列不属于细菌细胞膜的结构和化学成分的是A.脂质B.载体蛋白C.多糖D.酶E.磷壁酸答案：E19.下列能将雄性菌的某些遗传物质转移给雌性菌的特殊结构是A.单鞭毛B.普通菌毛C.性菌毛口.双鞭毛 E.周鞭毛答案：C20.典型L型细菌菌落是A.油煎蛋样菌落B.光滑型菌落C.丝状菌落D.G型菌落E.F型菌落答案：A21.细菌的RNA主要存在于A.细胞壁B.聚糖骨架C.胞质D.脂多糖E.蛋白质答案：C22.细菌所含核糖核酸占细菌干重的A.5% B,10% C,15% D,20% E,25%答案：B23.细菌L型的特点不包括A.形态多形性B.染色不确定性C.渗透压敏感性D.生化反应增强E.对抗生素抵抗答案：D50.从患者标本中新分离的L型菌落常呈A.颗粒型B.荷包蛋样C.丝状菌落D.露珠样E.脐状菌落答案：A51.细菌需氧呼吸最终电子受体是A. H2OB. O2C. CO2D. ATPE. ADP答案：B26.螺形菌属于A.细菌B.螺旋体C.杆菌D.病毒E.真菌答案：A27.属于细菌遗传物质的是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：B28.细菌的内毒素的化学成分是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：A29.内毒素是G-菌的菌体成分的A.肽聚糖B.脂多糖C.磷壁酸D.胞壁酸E.脂蛋白答案：B30.细菌贮存营养物质的是A.脂多糖B.质粒C.胞质颗粒D.荚膜E.鞭毛答案：C31.测量细菌大小的单位是A. cmB. nmC. mmD. umE. dm答案：D32.细菌的特殊结构不包括A.芽抱B.荚膜C.中介体D.菌毛E.鞭毛答案：C33.关于细胞壁的功能，下列不正确的是A.维持细菌固有形态B.与细胞内外的物质交换有关C.决定细菌的分裂D.是细菌外层结构，比较坚韧.且具有高度弹性E.带有多种抗原决定簇，决定了菌体的抗原性答案：C34.革兰阳性菌细胞壁特有成分为A.外膜B.磷壁酸C.脂多糖D.肽聚糖E.脂蛋白答案：B35 .革兰阳性菌细胞壁的特点是A.较疏松B.无磷壁酸C.有脂多糖D.有脂蛋白E.肽聚糖含量多答案：E36 .革兰阴性菌细胞壁特有组分是A.肽聚糖B.磷壁酸 C,氨基酸 D.外膜E.细胞膜答案：D37 .具有物质转运与生物合成和分泌等作用的细菌结构是41 .细菌的遗传物质是A.染色体、核糖体、质粒B.染色体、核糖体、转位因子C.染色体、中介体、转位因子D.染色体、核糖体、中介体E.染色体、质粒、转位因子答案：E42 .质粒是细菌的A.核质RNAB.胞浆中的异染颗粒C.核质DNAD.染色体外的DNAE.胞浆中的RNA 答案：D 43 .关于荚膜的叙述，正确的是A.是细菌侵袭力的组成部分B.与细菌运动有关C.与细菌分裂有关A.细胞壁B.细胞质C.核质答案：E38 .细菌合成蛋白质的场所是A.中介体B.细胞膜C.核糖体答案：C39 .能维持细菌固有外形的是A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜答案：B40 .细菌核质的特点是A.有典型细胞核结构B.含组蛋白E.DNA 呈线状答案：C D.异染颗粒 E.细胞膜 D.胞质颗粒 E.核质 D.细胞质 E.中介体 C.无核膜与核仁 D.含两条染色体D.与细菌染色有关E.与细菌接合有关答案：A44.细菌的运动器官是A.荚膜B.芽胞C.性菌毛D.鞭毛E.普通菌毛答案：D45.关于细菌菌毛叙述，正确的是A.与细菌运动有关B.与细菌染色有关C.与细菌分裂有关D.与细菌黏附有关E.与细菌抵抗力有关答案：D46.细菌的休眠形式是A.荚膜B.芽胞C.性菌毛D.普通菌毛E.鞭毛答案：B47.细菌菌体中含量最多的成分是A.水B.无机离子C.酶D.有机物E.肽聚糖答案：A48.决定细菌抗原性的是A.细胞核B.细胞壁C.细胞膜D.细胞质E.中介体答案：B二、多选题1.下列有关芽胞的叙述不正确的是A.芽胞容易着色B.芽胞对理化因素的抵抗力强C. 一个芽胞遇适宜环境只生成一个繁殖体D.芽胞是细菌的休眠状态E.细菌都产生芽胞答案：AE2.细菌特殊结构包括A.细胞壁B.荚膜C.细胞膜D.细胞质E.菌毛答案：BE临床微生物学检验技术考试题库及答案2、（正常菌群）条件致病性微生物一一临床上多引起内源性感染3、G+菌特有成分：磷壁酸（重要表面抗原，可用于细菌血清学分型）（外毒素）4、G-菌特有成分：外膜层（由脂多糖（内毒素）、脂质双层（磷脂）、脂蛋白）5、G+菌和G-菌细胞壁的共同成分是肽聚糖。

产志贺毒素大肠杆菌基因分型技术的研究进展

Advances in Microbiology 微生物前沿, 2020, 9(3), 125-132Published Online September 2020 in Hans. /journal/ambhttps:///10.12677/amb.2020.93018产志贺毒素大肠杆菌基因分型技术的研究进展张世钦1，汪雯2，吉小凤2，王梓晨1，白芷烨1，李红梅1*，王翔1，董庆利11上海理工大学医疗器械与食品学院，上海2农产品质量安全危害因子与风险防控国家重点实验室(筹)，浙江省农业科学院农产品质量标准研究所，农业农村部农产品质量安全风险评估实验室(杭州)，浙江杭州收稿日期：2020年8月19日；录用日期：2020年9月9日；发布日期：2020年9月16日摘要产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli, STEC)是重要的食源性致病菌，能引起人和动物发生腹泻、出血性肠炎和溶血性尿毒综合症等疾病。

为了更好的开展STEC检测、表征、分子进化分析及溯源调查，本文对国内外STEC基因分型技术包括基于酶切扩增分型方法、基于全基因组测序(Whole genome sequencing, WGS)分型方法以及多位点串联重复序列分析(MLVA)、DNA微阵列(DNA microarray)和成簇规律间隔短回文重复序列(CRISPR)分型技术研究进展进行综述，并对基因分型研究方法存在的问题进行探讨，为STEC的溯源追踪和流行病学调查提供参考。

关键词产志贺毒素的大肠杆菌，分型技术，全基因组测序Research Progress in Genotyping of ShigaToxin-Producing Escherichia coliShiqin Zhang1, Wen Wang2, Xiaofeng Ji2, Zichen Wang1, Zhiye Bai1, Hongmei Li1*,Xiang Wang1, Qingli Dong11School of Medical Instrument and Food Engineering, University of Shanghai for Science and Technology,Shanghai2State Key Laboratory for Managing Biotic and Chemical Threats to the Quality and Safety of Agro-Products (Currently Being Established), MOA Laboratory of Quality & Safety Risk Assessment for Agro-Products(Hangzhou), Institute of Quality and Standard of Agricultural Products, Zhejiang Academy of AgriculturalSciences, Hangzhou Zhejiang*通讯作者。

大肠埃希菌毒力基因

大肠埃希菌毒力基因
大肠埃希菌（Escherichia coli）是一种革兰氏阴性杆菌，常见于人和动物的肠道中。

大肠埃希菌中含有一些毒力基因，这些基因使得某些菌株具有致病性。

其中最常见的毒力基因包括：
1. 肠毒素基因（Enterotoxin genes），大肠埃希菌可能携带产生肠毒素的基因，如stx1和stx2基因，这些毒素可引起溶血性尿毒症综合征（Hemolytic Uremic Syndrome，HUS）和肠道出血性大肠杆菌感染（Enterohemorrhagic E. coli，EHEC）。

2. 贴附因子基因（Adherence factor genes），大肠埃希菌可能含有编码贴附因子的基因，如eae基因，这些因子使得细菌能够在肠道黏膜上附着并引起肠道感染。

3. 毒力调控基因（Virulence regulation genes），大肠埃希菌的毒力受到一系列调控基因的控制，如hlyF和ler基因，它们调控着毒素的产生和释放。

4. 荚膜相关基因（Capsule-related genes），一些大肠埃希菌含有编码荚膜相关蛋白的基因，荚膜有助于细菌在宿主内生存并
引起感染。

这些毒力基因使得某些大肠埃希菌菌株具有致病性，可能引起从轻微腹泻到严重肠道感染甚至全身性感染的疾病。

科学家们对这些毒力基因进行了深入研究，以便更好地了解大肠埃希菌的致病机制，并寻求预防和治疗这些疾病的方法。

同时，监测食品和饮用水中的大肠埃希菌毒力基因也是防控疾病传播的重要手段之一。

大肠埃希菌药物耐药机制的分子生物学研究

大肠埃希菌药物耐药机制的分子生物学研究大肠埃希菌是人类常见的肠道细菌之一，同时也是引起腹泻和肠道感染的主要病原菌之一。

然而，随着抗生素的过度使用和滥用，大肠埃希菌的耐药性不断加强，传统的抗生素治疗大肠埃希菌感染逐渐失效。

因此，探究大肠埃希菌的耐药机制以及寻找新的治疗方法成为当前迫切的问题。

大肠埃希菌的耐药机制大肠埃希菌的耐药机制主要包括基因突变、水平基因转移和表观遗传学等方面。

基因突变是大肠埃希菌产生耐药性的主要途径之一。

一些基因突变会导致大肠埃希菌获得对抗生素的抵抗能力。

例如，一些基因突变可以使大肠埃希菌对氨基糖苷类抗生素不敏感，从而产生相应的抵抗能力。

水平基因转移也是大肠埃希菌产生耐药性的重要途径之一。

水平基因转移是指细菌通过吸收外源性的DNA片段来获得外源性基因。

大肠埃希菌可以通过共享质粒、嗜菌体和碎片DNA等渠道来获得外源性基因，从而获得相应的耐药性。

例如，暴露在抗生素中的大肠埃希菌会产生β-内酰胺酶，这种酶可以分解β-内酰胺类抗生素，从而使大肠埃希菌获得相应的抗药性。

表观遗传学是指没有改变DNA序列而改变DNA表达方式的一类机制。

表观遗传学机制包括DNA甲基化、组蛋白修饰和非编码RNA等方面。

一些表观遗传学机制会影响细胞对抗生素的敏感性。

例如，组蛋白修饰可以影响细胞对β-内酰胺类抗生素的敏感性，从而导致大肠埃希菌产生相应的抗药性。

分子生物学研究为了更好地探究大肠埃希菌的耐药机制，分子生物学研究成为非常有必要的方法之一。

分子生物学是研究生物大分子（主要是核酸和蛋白质）结构和功能的学科。

分子生物学的研究方法包括PCR、基因克隆、蛋白质表达和纯化等方面。

PCR是聚合酶链式反应的缩写。

PCR技术具有高特异性、高敏感性和快速等特点。

PCR技术可以用于扩增特定的DNA序列，从而探究大肠埃希菌的耐药机制。

基因克隆是将DNA序列插入到质粒或噬菌体中，从而进行分子生物学研究的重要方法之一。

基因克隆可以用于获得大肠埃希菌耐药相关基因的表达载体，从而进行抗药性相关的功能研究。

细菌感染后毒力因子的表达与调控机制

细菌感染后毒力因子的表达与调控机制细菌是一类小型的微生物生物体，它们作为一种生命形式在地球上已经存在了几十亿年，随着科学技术的不停发展，人们对于细菌的研究也日益深入。

细菌不仅可以生产药物、为人类服务，还可以引起各种疾病、给人类造成危害。

细菌感染后，是怎样表达出自身的毒力因子的呢？本文将为大家介绍细菌感染后毒力因子的表达与调控机制。

一、细菌感染后的毒力因子毒力因子指的是细菌在感染后分泌的具有病原性的分子物质，也叫做细菌毒素。

细菌感染后，会在其细胞内合成一系列的毒力因子，这些毒力因子会分泌到外部，并进入宿主细胞内，破坏宿主细胞及其周围环境，导致宿主细胞死亡或者受损，引起一系列疾病。

例如，大肠杆菌就可以在感染宿主后产生毒力因子细菌外毒素(Escherichia coli Exotoxin)和内毒素(endotoxin)，它们会导致宿主体内的免疫系统激活，引起一系列炎症反应，抑制人体的免疫功能，从而引起肠胃炎、腹泻等病症。

二、毒力因子的表达在细菌感染后，毒力因子的表达是与感染后的细菌状态、病原性等因素密切相关的。

（一）细菌状态细菌状态分为生长期、凋亡期和休眠期。

在感染宿主前，处于生长期的细菌会进行大量的合成，准备向外分泌毒素。

而处于凋亡期的细菌分泌出的毒素会更具攻击性，因为它们是紫外线、药物或高温处理后生还的菌种，表现出了比活生生菌株更强的进攻能力。

休眠状态的菌体，它们会在极端条件下生存，发挥需要时顶峰的能力。

（二）细菌基因表达细菌基因表达是细菌分泌毒素的关键。

毒素基因通常被编码为独特的蛋白质，被称为毒素蛋白。

存在于二级代谢产物中的蛋白质和基因表达与生存没有太大关系，而存在于染色质中的蛋白质会随着基因启动子的表达而表现出不同的催化活性，从而产生毒素。

三、调控机制（一）环境因素的影响环境因素对毒力因子的表达和毒素基因的转录有直接影响。

许多毒素的表达与环境因素密切相关。

例如，一些细菌在休眠时不会合成或分泌毒力因子，这是因为缺乏外界时间的刺激。

大肠埃希菌

大肠埃希菌1.概况：大肠埃希菌是肠道中重要的正常菌群，婴儿出生数小时后就进入肠道中并终生伴随，能为宿主提供一些营养作用的合成代谢产物，宿主免疫能力下降或细菌侵入肠道外组织或器官，即可成为条件致病菌，引起肠外感染，以化脓性感染和泌尿道感染最为常见，某些血清型大肠埃希菌具有致病性，能导致人类腹泻。

2.形态：中等大小的革兰阴性杆菌无芽孢，多数菌株有周身鞭毛，能运动；有菌毛包括普通菌毛和性菌毛3.体内分布：大肠杆菌在人和动物的肠道内，大多数于正常条件下是不致病的共栖菌，在特定条件下（如侵入肠外组织或器官）可致病。

但少数大肠杆菌与人和动物的大肠杆菌病密切相关，它们是病原性大肠杆菌，正常情况下极少存在于健康机体。

4.培养：兼性厌氧菌，营养要求不高，在普通的琼脂平板37℃培养24小时后，埃希菌形成圆形凸起灰白色S型菌落。

在液体培养基中均匀浑浊的生长。

5.生化反应：能发酵葡萄糖等多种糖类，产酸并产气，绝大多数菌株能发酵乳糖，可与沙门菌，志贺菌等区别。

吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC试验）为++--，IMViC试验为此结果，可判断为典型的大肠埃希菌，表明被检物已被粪便污染，有传播肠道传染病的危险6.抗原构造：大肠杆菌抗原主要有O、K和H三种，已确定的大肠杆菌菌体（O）抗原有173种，表面（K）抗原有80种，鞭毛（H）抗原有56种。

O抗原凝聚相对较慢，呈颗粒状。

H抗原刺激机体主要产生IgG类抗体，H抗原的凝集出现较快，呈絮状。

K抗原位于O抗原外层，为多糖，与细菌侵袭力有关。

7.生物学特性：本属细菌对干燥、腐败、日光等因素具有一定的抵抗力，在外界条件下可以生存数周或数月。

对化学消毒剂的抵抗力不强，一般常用消毒剂和消毒方法均能达到消毒目的。

通常情况下，对多种抗菌药物敏感。

但由于长期滥用抗生素，对常用抗生素耐药现象普遍，不仅影响该病防制效果，而且亦成为公共卫生关注的问题。

8.致病物质定植因子：又称黏附素（adhesin），可与黏膜表面细胞的特异性受体相结合而定植于黏膜，这是大肠杆菌引起的大多数疾病的先决条件。