大肠杆菌HPI毒力岛ybtA、fyuA基因的研究的开题报告
开题报告_567
侯雨丰等的研究表明：不同水浴温度对大肠杆菌完全杀灭所需时间为：56℃时需要5h；60℃时需要2h；65℃时需要1h；70℃时需要1h[11]。
李向阳、邵卫华等的研究表明：大肠杆菌的最适宜生长温度为38℃，而最高生长温度为41.6℃，最低生长温度为8.46℃。从食品保存来说，当温度大41.6℃时，大肠杆菌不能成活，而低于8.46℃时大肠杆菌不再繁殖。所以，食品应在大于41.6℃时杀菌，然后放在低于8.46℃时保存[14]。
李向阳、于静涛等的研究表明：温度T/ K分别为：307K、309K、310K、311K、313K、314K时，大肠杆菌的生长率分别为：0.0165、0.0216、0.0229、0.0244、0.0160、0.0075。对大肠杆菌，它的最佳生长温度为310～311K,而到315K时这些细菌就不能成活了[15]。
一、本课题研究的主要内容ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ目的和意义
1、主要内容
大肠杆菌在受污染食品中存在极为广泛，也是引起食物中毒的主要菌群之一。食品中大肠杆菌是各个国家规定必检的病原菌，该菌可引起肾衰竭等严重食物中毒并发症，严重危害消费者的身心健康[1]。大肠杆菌也是生肉、水产品和蔬菜中最主要的食品致病菌之一[2]。
大肠杆菌是典型的革兰氏阴性菌，是最常见的肠道致病菌，也是食品检测最常见的目标菌之一[3]。大肠杆菌是埃希菌属（Escherichis）的一个典型种，它包括肠杆菌科（Enterobacteriaceae）和埃希菌属中绝大部分有运动能力的革兰氏阴性杆菌[4]。大肠菌群主要来源于人及温血动物粪便，一般多用来作为食品中的粪便污染指标[5]。
犊牛腹泻大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因的检测
犊牛腹泻大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因的检测方光远;范红结;张玉红;张姝;陈钟鸣;顾亚凤;何小明【期刊名称】《金陵科技学院学报》【年(卷),期】2008(024)002【摘要】采用多重PCR方法检测南京部分地区分离的110株犊牛腹泻大肠杆菌中肠细胞脱落位点毒力岛(LEE)和强毒力岛(HPI).对LEE毒力岛检测其核心区的ler和eaeA基因,对HPI毒力岛检测其irp2和fyuA基因.同时对LEE和/或HPI阳性大肠杆菌进行了O血清型的鉴定.在分离的110株犊牛腹泻大肠杆菌中,具有LEE和/或HPI毒力岛的菌株33株,占30%(33/110).LEE毒力岛基因检测结果为9.1%(10/110)的菌株ler和eaeA基因的扩增阳性.HPI毒力岛基因检测结果为25.5%(28/110)的菌株irp2和fyuA基因扩增阳性.0.9%(1/110)的菌株irp2阳性.5.5%(6/110)的菌株irp2、fyuA、ler和eaeA基因扩增都为阳性.在33个LEE 和/或HPI毒力岛阳性分离株中,O78和O36血清型菌株分别占定型菌株的34.6%(9/26)和27%(7/26).9.1%的犊牛腹泻大肠杆菌携带LEE,25.5%的菌株携带耶尔森菌HPI,O78和O36为牛源携带LEE和/或HPI毒力岛大肠杆菌常见血清型.【总页数】6页(P92-97)【作者】方光远;范红结;张玉红;张姝;陈钟鸣;顾亚凤;何小明【作者单位】金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏,南京,210038;南京农业大学动物医学院,江苏,南京,210095;金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏,南京,210038;金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏,南京,210038;金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏,南京,210038;金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏,南京,210038;金陵科技学院动物科学与技术学院,江苏,南京,210038【正文语种】中文【中图分类】S858.23;S855.12【相关文献】1.致犊牛腹泻大肠杆菌对小鼠致病性及LEE、 HPI毒力岛的检测 [J], 元振杰;王燕;夏晨阳;陈晓英;刘建枝;马勋2.我国部分地区猪源大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因的检测 [J], 陈祥;赵娟;高崧;苗晓青;刘静;黄莉莉;焦新安;刘秀梵3.犊牛腹泻大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因的序列测定及分析 [J], 方光远;范红结;张玉红;陈钟鸣;顾亚凤;张志成4.狐狸源大肠杆菌毒力岛基因HPI、LEE的检测 [J], 高光平;朱利霞;张东林;赵希艳;闫艳娟;高桂生;史秋梅;郭顺立5.犊牛腹泻源大肠杆菌耐药情况及HPI相关基因的检测 [J], 高海慧;黎玉琼;高小斐;王培柱;吴学青;康晓冬;梁小军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大肠杆菌中简单快速的基因定点诱变的方法学研究的开题报告
大肠杆菌中简单快速的基因定点诱变的方法学研究
的开题报告
一、研究背景与意义
大肠杆菌（Escherichia coli）是广泛存在于自然界的一种常见细菌，是微生物学、生化学及基因工程学研究中最常用的模式生物之一。
大肠杆菌的遗传机制被广泛应用于基因工程、代谢工程、药物合成及疫苗开发等领域，其高效的工具箱为研究人员提供了广泛的选择性。
然而，传统的基因线性定点编辑技术存在诸多局限性，包括复杂、费时、低效及成本高昂等问题。
因此，通过诱变技术进行基因定点编辑是一种简单、快速及成本稍低的方法，而且还可以增加细菌的生存竞争力和适应性。
因此，开发一种简单快速的基因定点诱变方法具有重要的研究意义和应用前景。
二、研究目的
本研究旨在开发一种简单快速的基因定点诱变技术，以大肠杆菌为模型生物，尝试解决现有线性定点编辑技术存在的诸多局限性。
三、研究方法或步骤
本研究将采用以下方法或步骤：
1. 筛选易感突变株：通过使用抗生素或其它毒性化合物筛选易感细菌株；
2. 采用化学诱变剂进行随机定点诱变：将易感突变株暴露于各种化学诱变剂，以锁定特定位点或改变读框，通过筛选和DNA测序来确认突变；
3. 研究突变机制：通过生化和分子遗传学技术来确定引起突变的机制，例如解析突变位点特征和突变表型等；
4. 研究突变功能：通过生长速度、代谢产物和药敏性等生理生化性质来分析突变的功能。
四、研究预期结果
通过本研究的努力，将开发出一种简单快速的基因定点诱变技术，该技术可以应用于大肠杆菌的基因编辑和基因功能研究，并能够解决现有线性定点编辑技术存在的诸多局限性。
同时，研究的结果还将有助于深入了解基因突变机制，并为构建更强健的微生物群提供途径。
新生仔猪源大肠杆菌主要毒力因子的分子流行病学及其免疫防制的开题报告
新生仔猪源大肠杆菌主要毒力因子的分子流行病学及其免
疫防制的开题报告
一、研究背景
大肠杆菌是新生仔猪肠道常见菌群之一，但某些菌株却能引起新生仔猪的肠道炎症、腹泻等疾病，严重影响猪养殖业的发展。
目前已确认的大肠杆菌毒力因子有F4、F5、F6、F18、F41等多种，其中F4、F5、F6是新生仔猪肠道炎症与腹泻的主要病原毒力因子。
因此，对新生仔猪源大肠杆菌主要毒力因子的分子流行病学及其免疫防制进行研究，具有重要意义和实用价值。
二、研究内容
本研究拟对新生仔猪源大肠杆菌主要毒力因子的分子流行病学及免疫防制展开研究，具体研究内容包括：
1.收集新生仔猪源大肠杆菌菌株，进行生化鉴定和分子生物学检测。
2.对收集的大肠杆菌菌株进行多重PCR检测，筛选出F4、F5、F6阳性菌株并进行进一步基因测序和分析。
3.通过菌株的群体遗传学分析，探讨不同来源、不同时间和不同地区猪场中F4、F5、F6阳性大肠杆菌菌株的分布和种类。
4.评估F4、F5、F6阳性大肠杆菌菌株的毒力和抗性表现，探讨毒力和抗性之间的相关性。
5.利用分离出的F4、F5、F6阳性大肠杆菌菌株，研发相应的疫苗和药物防制方法。
三、研究意义
本研究旨在深入探讨新生仔猪源大肠杆菌主要毒力因子的分子流行病学，并探讨针对不同毒力菌株的免疫防制方式，从而为新生仔猪的健康养殖提供理论依据和实践指导。
通过本研究，或可从根本上减少猪场中大肠杆菌感染的风险，保障猪肉和衍生品的质量安全，符合现代养殖业绿色、健康、可持续的发展趋势。
大肠杆菌毒力基因
大肠杆菌的毒力基因包括黏附素基因（K88、K99、987P、F41、F18）、毒素基因（Stx1、Stx2、Sta、Stb、LT）、溶血素（HylA）、HPI毒力岛（FyuA、irp2）和Lee毒力岛（eaeA）等。
其中，黏附素基因是介导细菌与靶细胞相结合的蛋白质，能够使细菌快速突破一道道屏障并直接感染机体。
毒素基因则分为不耐热肠毒素和耐热肠毒素，它们由位于质粒上的三种毒力基因编码。
另外，大肠杆菌在人的尿道、体液和血液中可使iroN的表达增强，UPEC536株的iroBCDEN基因簇定位于III毒力岛上，有研究者认为iroN可增强大肠杆菌苯磷二酚铁结合性复合物-肠菌素的铁摄取能力。
除此之外，还有气杆菌素、耶尔森菌强毒力岛等毒力因子。
以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅相关文献或咨询专业人士。
大肠杆菌的毒力与肠道疾病的相关研究
大肠杆菌的毒力与肠道疾病的相关研究引言大肠杆菌是一种常见的肠道细菌，在人类和动物的肠道中广泛存在。
它可以分为致病性和非致病性两种类型。
近年来，大肠杆菌感染引起的肠道疾病在全球范围内呈上升趋势，给人类健康带来了巨大威胁。
因此，了解大肠杆菌的毒力机制以及其与肠道疾病的关系具有重要意义。
本论文旨在探讨大肠杆菌的毒力特征及其与肠道疾病的相关研究。
首先，我们将介绍大肠杆菌的基本特征和分类。
其次，我们将深入研究大肠杆菌的毒力机制，包括毒素的产生和作用方式。
然后，我们将探讨大肠杆菌与肠道疾病之间的关系，包括病原菌定植、感染机制以及致病性基因的表达调控。
接下来，我们将介绍大肠杆菌感染所引起的症状和发病机制，以及其可能的传播途径。
然后，我们将探讨预防大肠杆菌感染的措施，包括个人卫生和食品安全等方面。
接着，我们将介绍常用的大肠杆菌检测方法，以便及时发现和控制感染源。
此外，我们还将关注大肠杆菌致病性基因的研究，以了解其在疾病发展中的作用。
最后，我们将介绍当前的药物治疗方法，并总结以上内容。
通过本论文的研究，我们希望能够加深对大肠杆菌毒力和肠道疾病发生机制的理解，为预防和治疗相关疾病提供科学依据，保障人类健康。
大肠杆菌的毒力研究大肠杆菌是一种革兰氏阴性菌，具有复杂的毒力机制。
其致病性主要与多种毒素的产生和作用相关。
其中，肠毒素（enterotoxin）是导致胃肠道症状的重要因素。
肠毒素可以通过进食受污染的食物或水源进入人体消化系统，引起腹泻、呕吐等症状。
此外，毒力相关蛋白质也参与了大肠杆菌的致病过程。
研究表明，大肠杆菌的毒力特征与其基因组中的毒力岛（pathogenicity island）密切相关。
这些毒力岛是由一系列毒力相关基因构成的DNA片段，可编码毒素、附着因子和其他与感染相关的蛋白质。
大肠杆菌的不同毒力岛之间存在差异，导致不同菌株的毒力程度各异。
除了毒力岛，大肠杆菌还可以通过菌体表面的附着因子实现对宿主细胞的定植和侵袭。
肉鸡大肠杆菌毒力基因的研究
由 佳264003；3. 山东益生畜牧兽医科学研究院，山东 烟台 265508；4. 诸城外贸有限责任公司，山东 淮坊鸡大肠杆菌病(colibacillosis )是由鸡源致病性大肠杆菌(Escherichia coli，E.coli )引起的细菌性传染病。
大肠杆菌的多种毒力因子共同决定着细菌的致病性，在宿主受到大肠杆菌的侵袭进而引发疾病的过程中，这些毒力因子共同作用，互相协调。
目前，已知的主要毒力基因有：铁离子获得系统(耶尔森菌毒力岛、气杆菌素)、黏附素、温度敏感血凝素、血清抗性蛋白、肠细胞脱落位点毒力岛、毒素、ColV 和ColBM 质粒等。
本试验通过PCR 方法对胶东地区肉鸡大肠杆菌进行毒力基因研究，以掌握肉鸡大肠杆菌毒力基因的分布情况，为深入研究大肠杆菌致病机理、制定有效防控措施提供数据支持。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 病料胶东地区多家祖代和父母代肉种鸡场、规模化商品肉鸡场疑似感染大肠杆菌的发病鸡心脏、肝脏、脾脏、气囊；祖代和父母代肉种鸡场的死亡鸡胚、1日龄雏鸡卵黄囊。
从以上病料中分离到169株大肠杆菌。
1.1.2 培养基和试剂(见表1)1.1.3主要仪器设备(见表2)1.2 方法1.2.1 引物设计根据GenBank 上已发表的毒力基因序列，用Primer 5.0软件设计出大肠杆菌13种毒力相关基因的13对特异性引物，如表3所示，由英潍捷基(上海)贸易有限公司合成。
1.2.2 模板制备将大肠杆菌分离株接种于麦康凯培养基，37 ℃下培养18～24 h，挑取数个单菌落，溶于1 mL 灭菌的生理盐水中，摇匀制成细菌悬液，100 ℃煮沸10 min，12 000 r/min 离心5 min，取上清500 μL 至灭菌离心管中， －70 ℃保存备用。
1.2.3 反应体系及程序PCR 反应体系：2×PCR Master Mix(含中图分类号：S852.61 文献标志码：A 文章编号：1001-0769(2022)06-0041-06摘 要：本研究从胶东地区规模化肉鸡场疑似病鸡的心脏、肝脏、脾脏、气囊中，以及祖代、父母代肉种鸡场1日龄雏鸡的卵黄囊、死亡鸡胚中，分离鉴定出169株大肠杆菌，通过PCR 方法对大肠杆菌分离株进行13种毒力基因检测。
致病性大肠杆菌毒力岛插入位点的特征性研究
致病性大肠杆菌毒力岛插入位点的特征性研究叶长芸【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2004(020)0z1【摘要】@@ 毒力岛是细菌染色体上具有特殊结构特征并与细菌致病性具有相关性的分子量较大的DNA片段,目前已在致病菌里发现有33个功能明确的毒力岛,其中致病性大肠杆菌中就有12个.已有资料发现许多毒力岛往往在染色体上的tRNA 位点处插入,而tRNA因其特殊的空间结构和保守的二级结构为外源性DNA的插入提供了有利条件.那么tRNA位点到底与毒力岛的存在与获得,是否有规律可寻.为此,我们以大肠杆菌K-12的染色体全序列为参照,在包括其所有tRNA位点在内的区域设计引物,对6类致泻性大肠杆菌和Shigella f2a进行了染色体上tRNA位点的完整性分析,并用杂交加以证实.【总页数】2页(P24-25)【作者】叶长芸【作者单位】中国疾病预防控制中心传染病预防控制所,北京,102206【正文语种】中文【中图分类】R3【相关文献】1.猪、牛和兔粪中致病性大肠杆菌LEE毒力岛的检测分析 [J], 高荣琨;王丽芳;李锐;郑明学2.致泻性大肠杆菌和福氏2a志贺氏菌染色体上毒力岛和基因组岛插入相关的tRNA位点的研究 [J], 王蕾;叶长芸;赵爱兰;孙晖;徐建国3.禽致病性大肠杆菌(CVCC1565)中耶尔森菌强毒力岛核心区的检测 [J], 许丽;祁克宗;彭开松4.水貂源致病性大肠杆菌生物被膜形成能力、耐药性及毒力岛基因检测与分析 [J], 夏琦琦;温珊珊;马斯琪;吴强;赵丽丽;魏成威;葛俊伟;陈洪岩5.貉源致病性大肠杆菌HPI毒力岛相关基因检测及序列分析(英文) [J], 张艳英;史秋梅;高桂生;李跃;高光平;房海;陈翠珍;杨月琳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
腹泻仔貉检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌
ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ ｉｒｈ ａ ａ ｈ ｇ ｎｃｔ ｓａ ｄ ｅ ｅｉｐ ｎ ｙ Ａ；Ｙｅｓｎａ ｅ ｔｒｃ ｌｔｃ ：ｄａ ｒ ｅ ；ｐ ｔ ｏ ｅ ｉｉ ｉｌｎ ｓｇ ｎ ｒ ２ ａ ｄ ｆ ｕ ｙ ｒｉｉ ｎ ｅｏ ｏｉｉａ；ｙ ｕ ｇｒ ｃｏ ｎ ｄ ｇ ｏ ｎ ａ ｃ ｏ ｏ ｓ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ ： ｎｄ ｓ ａ ｈｅ ｍ ｅ ｈａ ｉ ｍ Ｔｏ ｕ ｅｒ ｔ ｎｄ ｔ ｃ ｎ ｓ ｏｆＥ． ｃ ｌ ａ ｅ ｄｉｒ ｈｅ ｎ ｏｕ ａ ｃ ｏｎ ｄｏ ， Ｈ ＰＩｐａ ｈｏ ｎ ｃｔ ｓａｎ ｏ ｉｃ ｕｓ ｄ ａ ｒ ａ ｉ ｙ ｎｇ ｒ ｃ ｏ ｇｓ ｔ ｇｅ ｉｉｙ ｉｌ ｄｓ
中 国 人 兽 共 患 病 学 报
２ ２， ２ （ ） ０１ ８ ２ Ｃｈｉ ｅ ｅＪ ｒ ｌｏ ｏ ｓ ｓ ｎ ｓ ｎａ ｆ Ｚｏ ｎｏ ｅ ｏｕ １ ９ ７
文 章 编 号 ： ０ ２ ６ ４ ２ １ ） ２ １９ ４ １ ０ —２ ９ （ ０ ２ ０ —０ ７ 一Ｏ
腹泻仔貉检 出携 带耶尔森菌 ＨＰ 毒力岛的大肠杆菌 Ｉ
Ｔ Ｃ ＧＡ ３ ， 游 引 物 ： Ｔ Ｇ Ｃ ＡＣ Ｇ － 下 ５ Ｃ ＧＣ Ａ ＧＧＡＴ—
１ １ １ 供试 菌株 ２ １ ． ． ０ １年 ６ —８月 份 ， 皇岛 市 区 秦 各县 养貉 场 的乌苏 里 仔 貉 流行 １种 腹 泻 ， 昌 黎县 仅
各 貉场发 病 率 ３ （ ５场／ ０ ５ ３ １ ０场 ） 貉 场 内仔 貉 发 ， 病 率 ３ ～４ （ ５ １ ０ １ ５只／ ０ ５ ０只 ～２ ０只／ ０ ０ ５ ０只 ） ，
通讯作者 ： 史秋 梅 ，Ｅ ｉ ｈｑｕ ｉ ｙ ｈ ｏ ｃ ｍ． ｎ ｍａｌ ｉｉｍｅ＠ ａ ｏ ． ｏ ｃ ：ｓ 作者单位 ： 河北 科 技 师 范 学 院 动 科 院 河 北 省 预 防 兽 医 学 重 点 实 验
大肠杆菌毒力岛HPI相关基因缺失株的研究
Ｓｔｕｄｙｉｎｇ
ｏｎΒιβλιοθήκη ｒｅｌａｔｅｄ ｇｅｎｅ ｄｅｌｅｔｉｏｎ ｏｆ ＨＰＩ ｉｎ Ｅ．ｃｏｌｉ ｓｔｒａｉｎｓ
国家自然基金项目
Ｃ３０８００８２ １
研究生：王晨娟
导师：成大荣副教授
扬州大学兽医学院 二０一二年五月
王晨娟人肠杆菌毒力岛ＨＰＩ相关基因缺失株的研究
是决定该菌致病性和毒力的重要因素之一。我们已发现ＨＰＩ存在于多种肠道杆菌中，如大
不仅赋予病原体这样特殊的致病力，与感染过程有关，而且在细菌进化过程中同样扮演重 要角色。为揭示ＨＰＩ毒力岛对大肠杆菌毒力的影响，本文做了三个方面的研究：
一是利用Ｒｅｄ重组系统对２株ＨＰＩ＋菌的这四个基因的单基因缺失株分别进行基因敲 回，筛选出敲回成功的菌株。ｉｒｐｌ、ｉｒｐ２、ｆｙｕＡ、ｙｂｔＡ是ＨＰＩ毒力岛的四个关键结构基因， 与毒力岛的毒性有着密切的关系，本实验先合成出含有重组同源臂的这四个基因的部分
寇氏法计算ＬＤ５０，比较该基因敲除前后对其毒力的影响变化。对死亡小鼠进行剖检，记录
扬州大学硕士学位论文
２
一
肉眼病理变化，以及进行细菌分离和毒力基因的ＰＣＲ鉴定。数据分析发现原始野生毒株与 基因缺失株对小鼠的毒力有明显的区别，有菌毛的菌株致病性明显强于没有菌毛的菌株， 这表明ＨＰＩ毒力岛与大肠杆菌的毒力相关。
帔摘要
耶尔森菌强毒力岛（ｈｉｇｈ
ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ
ｉｓｌａｎｄ，ＨＰＩ）是最早发现于耶尔森园甲面，大小
勰
１
从３６ ｋｂ到４３ ｋｂ，能够编码摄取铁载体耶尔森菌素（ｙｅｒｓｉｎｉａｂａｃｔｉｎ，Ｙｂｔ）的基因及其调节基
因（ｉｒｐｌ、ｉｒｐ２、ｆｙｕＡ），与铁摄取与调节有关，是表达小鼠致死表型不可缺少的遗传单元；
携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛大肠杆菌的毒力基因分析
携带小肠结肠炎耶尔森菌HPI毒力岛大肠杆菌的毒力基因分析杨小平;徐建国【期刊名称】《中国热带医学》【年(卷),期】2007(7)9【摘要】目的探索HPI毒力岛阳性大肠杆菌的毒力基因存在情况。
方法使用PCR 和杂交技术对152株HPI毒力岛阳性的大肠杆菌进行相关毒力基因检测。
结果在152株携带HPI毒力岛的大肠杆菌中,基本上未检出常见的5类致泻性大肠杆菌的毒力基因,但是部分菌株检出泌尿道致病性大肠杆菌PAI毒力岛基因yc73和prrA 以及RTX毒力岛基因rtx615。
结论这些大肠杆菌和已知的致泻性大肠杆菌有明显不同,携带HPI毒力岛的大肠杆菌可能包括几个不同的群,可能存在其它的尚未发现的毒力因子,有必要继续进行进一步研究。
【总页数】3页(P1508-1510)【关键词】毒力岛;致泻性大肠杆菌;毒力基因【作者】杨小平;徐建国【作者单位】中国疾病预防控制中心【正文语种】中文【中图分类】R387.21【相关文献】1.我国腹泻病患者和家畜家禽粪便标本中携带小肠结肠炎耶尔森氏菌HPI毒力岛的大肠杆菌的调查 [J], 程伯鲲;崔树玉;温宪芹;姜桂香;李连青;刘巧突;赵斌秀;叶长芸;徐建国2.腹泻仔貉检出携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌 [J], 张艳英;史秋梅;房海;陈翠珍;刘亚君;杨月琳3.105株携带耶尔森菌强毒力岛大肠杆菌的毒力基因型和部分菌株毒力因子序列研究 [J], 吕殿红;魏文康;黄忠;温肖会4.云南战区部队首次检出携带耶尔森菌HPI毒力岛基因irp^(-2)的大肠杆菌 [J], 李刚山;朱姝媛;范泉水;侯敏;徐庆;邱薇;龙沛然;周卫国;尹惠琼5.由携带耶尔森菌HPI毒力岛的大肠杆菌引起的腹泻 [J], 董雪;高丹;刘权恕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
大肠埃希菌强毒力岛致病机制研究进展
大肠埃希菌强毒力岛致病机制研究进展卢琴;严玉霖;高洪;高利波;赵汝;李祥峰;邵志勇;臧雅婷;崔艳艳【摘要】大肠埃希菌(Escherichia coli)常引起婴儿和幼畜(禽)严重腹泻和败血症.近年来对于大肠埃希菌强毒力岛(HPI)致病机制的研究已有大量文献记载,但大肠埃希菌具体的致病机制目前尚不明确.研究表明耶尔森菌强毒力岛与一些肠道致病菌的致病性密切相关,如大肠埃希菌、沙门菌、克雷伯菌等.引起大肠埃希菌致病的因素多种多样,如气候变化,应激,机体本身状况等.论文就大肠埃希菌HPI的结构基因及其分子致病机制的研究现状进行综述.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2013(034)004【总页数】3页(P94-96)【关键词】强毒力岛;致病因素;分子致病机制【作者】卢琴;严玉霖;高洪;高利波;赵汝;李祥峰;邵志勇;臧雅婷;崔艳艳【作者单位】云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201;云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201【正文语种】中文【中图分类】S852.614大肠杆菌病是由致病性大肠埃希菌（E.coli）引起的急性肠道传染病的总称。
大肠埃希菌是动物肠道共生菌的正常组分。
通过其他的致病菌和基因重组发生水平转移，特别是己获得毒力基因的大肠埃希菌菌株能在人和动物间引起大范围的肠道或肠道外感染［1］。
在猪和牛，肠道外大肠埃希菌能引起新生幼畜败血症死亡［2］。
一般来说，大肠埃希菌通常不致病，但当宿主免疫力下降或细菌移位侵入肠道外组织器官时，可引起宿主感染，严重的甚至可导致败血症、新生儿脑膜炎。
犊牛腹泻大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因的检测及特性分析的开题报告
犊牛腹泻大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因的检测及特
性分析的开题报告
一、研究背景和意义
犊牛腹泻是犊牛最常见和最严重的疾病之一，极其容易引起犊牛死亡，给养殖业带来了极大的经济损失。
大肠杆菌是引起犊牛腹泻的主要病原菌，以前有很多研究表明，大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因与犊牛腹泻的发生有很大关系。
因此，对这些毒力岛相关基因进行检测和特性分析，对于研究犊牛腹泻的病因和预防具有重要的意义。
二、研究内容和方法
1、研究内容：
本项目旨在检测犊牛腹泻大肠杆菌LEE和HPI毒力岛相关基因，分析它们的特性和表达，探究它们引起犊牛腹泻的机制和影响因素。
2、研究方法：
（1）从不同地区的犊牛腹泻患牛中收集不同（也可相同）菌株，利用PCR技术检测LEE和HPI毒力岛相关基因，并对扩增产物进行酶切和测序验证。
（2）从不同发病时期的犊牛腹泻患牛中采集粪便样品，提取细菌RNA，利用RT-PCR技术检测LEE和HPI毒力岛相关基因的表达情况，并分析其在不同发病时期和病原致病力之间的关系。
（3）比较不同菌株LEE和HPI毒力岛相关基因的序列和表达差异，探究其对犊牛腹泻病原菌的病原性和毒力的影响因素。
三、研究预期结果和意义
本研究将对犊牛腹泻的病原菌研究提供新的思路和理论基础，有望为犊牛腹泻的预防和治疗提供新的策略和方法，从而降低犊牛腹泻的发生率和死亡率，给养殖业带来实际的经济效益。
云南楚雄规模化猪场仔猪大肠杆菌HPI基因调查及耐药性分析
云南楚雄规模化猪场仔猪大肠杆菌HPI基因调查及耐药性分析JING Linxi;GAO Feilong;SHAN Chunlan;LIU Chaoying;WANG Shiyu;YAN Yulin;GAO Hong【摘要】为研究规模化猪场大肠杆菌高致病性毒力岛(high pathogenicity island,HPI)基因流行特征及其耐药性,本试验从云南省楚雄州地方猪场采集粪便及肛门拭子,应用麦康凯培养基、生化鉴定管及PCR扩增对大肠杆菌进行分离鉴定,分别通过PCR反应、动物回归试验及纸片扩散法研究分离菌株的HPI基因携带情况、致病性及耐药性.结果显示,共分离获得78株大肠杆菌,分离率为83.87％,HPI基因携带率高达96.15 ％;24 h内,HPI阳性菌株致小鼠死亡率100％,HPI阴性菌株致小鼠死亡率75％,对照组无小鼠死亡,表明HPI基因可提高小鼠死亡率;药敏试验结果显示,分离菌株对四环素、氨苄西林、复方新诺明、卡那霉素、庆大霉素、头孢他啶及阿米卡星的耐药率分别为88.46％、84.62％、73.08％、53.85％、38.46％、19.23％和5.13％,对多黏菌素B不耐药.本试验结果可为防治大肠杆菌相关疾病提供一定的理论依据.【期刊名称】《中国畜牧兽医》【年(卷),期】2019(046)006【总页数】7页(P1849-1855)【关键词】HPI基因;irp2基因;致病性;耐药性【作者】JING Linxi;GAO Feilong;SHAN Chunlan;LIU Chaoying;WANG Shiyu;YAN Yulin;GAO Hong【作者单位】;;;;;;【正文语种】中文【中图分类】S858.28大肠杆菌(E.coli)为革兰氏阴性短杆菌，成对或单个存在，部分血清型可致仔猪黄白痢、猪水肿病等传染病[1]。
由于部分养殖场滥用抗生素药物，使大肠杆菌中多重耐药菌株大量出现[2-3]。
大肠杆菌双顺反子表达载体中各基因表达水平的研究的开题报告
大肠杆菌双顺反子表达载体中各基因表达水平的研
究的开题报告
一、研究背景
大肠杆菌（Escherichia coli）广泛应用于生物工程、制药、农业等多个领域，然而，人们对其感染性和毒性关注度也越来越高。
因此，研究
大肠杆菌内部各基因表达水平的变化，对于理解其生存与致病机制具有
重要意义。
本研究通过构建大肠杆菌双顺反子表达载体，研究其中各基
因表达水平的变化，从多个角度全面探究其基因表达调控机制，为其他
相关领域的研究提供理论支持。
二、研究内容和方法
1.构建大肠杆菌双顺反子表达载体，包括转录单位、双顺反子序列
和不同的表达基因。
2.利用PCR技术扩增内部参照基因的特异序列，将其插入到载体中
作为内部标准，作为基因表达的定量依据。
3.将双顺反子表达载体转化入大肠杆菌中，采用荧光素法测定不同
基因的表达水平，分析各基因表达的调控机制。
4.在达到平衡状态后，对菌体的生长速率、形态等进行观察和记录，以了解双顺反子对大肠杆菌生长发育的影响。
三、研究意义和预期结果
本研究将构建大肠杆菌双顺反子表达载体，通过实验研究各基因表
达水平的变化以及双顺反子对大肠杆菌生长发育的影响，从而探究调控
机制，为相关领域的研究提供支持。
结果预期将为理解大肠杆菌的生存
与致病机制提供新的视角，为研究基因调控提供新思路和新方法。
大肠埃希菌毒力基因研究进展
大肠埃希菌毒力基因研究进展张金宝;李晓娜;王桂琴【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2014(000)008【摘要】大肠埃希菌是寄生于人或动物肠道内的一种肠杆菌科的革兰阴性菌，常引起幼畜严重腹泻和败血症、猪水肿病、人的出血性结肠炎-溶血性尿毒综合征、新生儿脑膜炎及肾炎等多种疾病，其毒力基因主要有escs、eaeA、Stx1、Stx2、Stx2e、sep、esp、astA、aggA、hlyE、ST （STa、STb）、LT 等。
论文主要介绍eaeA、Stx2e、ST（STa、STb）、astA 4个毒力基因的来源、结构、所致疾病及其与大肠埃希菌耐药性之间的相关性，旨在为动物疾病的传染源及疾病的流行病学调查和防控提供相关证据。
%Escherichia coli is a Gram-negative bacteria of Enterobacteriaceae in the intestine of human or animals .It often causes severe diarrhea and sepsis in young animals ,pig edema disease ,human hemor-rhagic colitis-hemolytic uremic syndrome ,neonatal meningitis and nephritis and other diseases .Its viru-lence genes mainly includeescs ,eaeA ,Stx1 ,Stx2 ,Stx2e ,Sep ,esp ,astA ,aggA ,hlyE ,ST (STa ,STb) ,LT ,etc .This article briefly described the source ,structure ,the illness caused of the eaeA ,Stx2e , ST (STa ,STb) and astA ,and the correlation between virulence genes and E .coli resistance .The aim is to provide relevant evidence for the infectious source of animal diseases and epidemiology investigations and control .【总页数】5页(P70-73,74)【作者】张金宝;李晓娜;王桂琴【作者单位】宁夏大学农学院，宁夏银川750021;宁夏大学农学院，宁夏银川750021;宁夏大学农学院，宁夏银川750021【正文语种】中文【中图分类】S852.612【相关文献】1.大肠埃希菌ETT2毒力岛ECs3703基因和HPI毒力岛irp2基因双重LAMP检测方法的建立 [J], 蔡树东;成大荣;朱善元;吴双;左伟勇2.蛋源大肠埃希菌的分离鉴定及毒力基因和耐药基因检测 [J], 吴海滨;杨娟;黄超;周杰珑;吴培福3.昆明动物园孔雀源大肠埃希菌毒力基因及耐药基因检测 [J], 吴海滨;杨娟;周杰珑;刘安荣;杨超;吴培福4.大肠埃希菌强毒力岛核心基因fyuA研究进展 [J], 王庄;张泽辉;刘耀川;张德显;刘明春5.牛源非O157产志贺毒素大肠埃希菌耐药基因和毒力基因发生共转移 [J], 佟盼盼;张凌;谢金鑫;张萌萌;唐雪林;张毅;夏利宁;苏战强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
三种细菌HPI核心区ybtE基因核苷酸序列及推导氨基酸序列的比较研究
三种细菌HPI核心区ybtE基因核苷酸序列及推导氨基酸序列的比较研究张冬梅;王斌【期刊名称】《安徽医科大学学报》【年(卷),期】2008(043)003【摘要】目的比较三种肠聚集性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和鼠疫耶尔森菌HPI毒力岛核心区ybtE基因的同源性.方法 PCR扩增肠聚集性大肠埃希菌(EAEC)17-2 ybtE基因的完整序列,克隆后测序.用ABIPRISM软件对该ybtE基因序列与已知的鼠疫耶尔森菌HPI的ybtE基因以及小肠结肠炎耶尔森菌HPI的irp5基因进行核苷酸序列和推导氨基酸序列比较.结果核苷酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和98.2%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为98.2%;推导氨基酸序列,EAEC17-2与鼠疫耶尔森菌及小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性分别为99.8%和97.6%,鼠疫耶尔森菌与小肠结肠炎耶尔森菌之间的同源性为97.8%.结论 ybtE基因作为HPI的功能基因高度保守,EAEC中的HPI可能来源于Yps HPI.【总页数】4页(P244-247)【作者】张冬梅;王斌【作者单位】安徽医科大学,卫生管理学院,合肥,230032;安徽医科大学,公共卫生学院,合肥,230032【正文语种】中文【中图分类】R378.21;R394.2;R394-3【相关文献】1.PRRSV-SCQ株结构蛋白基因核酸序列分析及其氨基酸序列推导 [J], 颜其贵;郭万柱;欧洋;张焕容;袁孟伟;王晓玉;樊汶樵;赖维莉;张传斌2.京白梨等品种S基因型鉴定及新基因S_(28)和S_(30)的核苷酸序列分析 [J], 张妤艳;吴俊;衡伟;张绍铃3.内源性逆转录病毒长末端重复序列在嗜酸性粒细胞增多症的基因表达及核苷酸序列分析 [J], 滕智平;张萍;秦效英;潘秀英;郝乐;徐红;史惠琳;江滨;曾毅;陆道培4.1997～2000年我国华东地区HIV-1分离株抗原决定簇氨基酸及其编码核苷酸序列的变化 [J], 王斌;钱冬萌;傅继华;鲁晓晴;闫志勇;方荣;吴虹5.Y.pestis纤溶蛋白溶酶原活化因子的核苷酸序列及其与E.coli的ompT基因和S.typhimurium的E基因的关系 [J], 刘志奇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
致病性大肠埃希菌HPI研究进展
致病性大肠埃希菌HPI研究进展
臧雅婷;严玉霖;高洪;高利波;赵汝;李祥峰;邵志勇;卢琴;崔艳艳
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2012(33)12
【摘要】强毒力岛(HPI)首先在耶尔森菌属中发现,由于水平转移等原因在致病性大肠埃希菌中也有发现,这在基础生命和生命科学领域已成为对HPI研究的热点.随着研究的不断深入,HPI与人及动物的致病关系非常密切,目前研究发现铁载体与细菌致病性有着重要的关系.论文主要对致病性大肠埃希菌HPI的基本特征、流行病学特征、HPI的获取机制、HPI与致病性关系的研究现状做以综述.
【总页数】4页(P153-156)
【作者】臧雅婷;严玉霖;高洪;高利波;赵汝;李祥峰;邵志勇;卢琴;崔艳艳
【作者单位】云南农业大学动物科学技术学院,云南昆明650201
【正文语种】中文
【中图分类】S852.612
【相关文献】
1.尿路致病性大肠埃希菌疫苗的研究进展 [J], 曹阳;魏殿军
2.禽致病性大肠埃希菌黏附素研究进展 [J], 魏宽翠;夏玉龙;马兴树
3.致病性大肠埃希菌毒力因子致病性及研究进展 [J], 严丹红;郝葆青;吴润;农向
4.尿道致病性大肠埃希菌研究进展 [J], 胡海燕; 刘佳; 赵青; 闫丽华
5.肠外致病性大肠埃希菌毒力因子研究进展 [J], 柴迎锦; 顾晓晓; 邬琴; 周霞; 韩猛立; 钟发刚; 黄新; 张星星
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鸭致病性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛的分子流行病学调查
鸭致病性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛的分子流行病学调查于学辉;王英;王远微;汤承;杨晓农;程安春【期刊名称】《西南民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2007(033)006【摘要】为了解耶尔森菌强毒力岛(HPI)在鸭致病性大肠杆菌中的流行情况,根据HPI结构基因irp2和fyuA参考序列设计了引物,用PCR方法对从成都等地分离的64株鸭致病性大肠杆菌和28株健康雏鸭泄殖腔拭子分离的大肠杆菌基因进行了扩增和检测,并对5个菌株相关基因进行了克隆和序列分析.结果表明,irp2和fyuA 携带率在鸭大肠杆菌病分离株分别为40.6%(26/64)和39.1%(25/64),在健康鸭泄殖腔大肠杆菌分离株分别25.0%(7/28)和21.4%(6/28).鸭大肠杆菌病分离株携带fyuA和irp2的阳性率显著高于健康鸭大肠杆菌分离株(P＜0.05),HPI毒力岛的携带率与菌株的致病性呈明显的正相关.分析表明相关基因与GenBank中参考序列的同源性高达98%以上.【总页数】5页(P1316-1320)【作者】于学辉;王英;王远微;汤承;杨晓农;程安春【作者单位】西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,6100411;四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,四川雅安,625014;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,6100411;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,6100411;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,6100411;西南民族大学生命科学与技术学院,四川成都,6100411;四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心,四川雅安,625014;动物疫病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安,625014【正文语种】中文【中图分类】S858.32【相关文献】1.奶牛乳腺炎源大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛相关基因的检测及序列分析 [J], 徐继英;杨志强;陈化琦;刘俊林;邢娟;李建喜;李宏胜2.中国肠产毒性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛的检测 [J], 张冬梅;俞守义;唐根富3.产毒性和致病性大肠杆菌中小肠结肠炎耶尔森菌强毒力岛的检测 [J], 王勇;王红;向前;孙素霞;俞守义4.禽致病性大肠杆菌(CVCC1565)中耶尔森菌强毒力岛核心区的检测 [J], 许丽;祁克宗;彭开松5.禽致病性大肠杆菌中耶尔森菌强毒力岛的分子流行病学调查 [J], 金文杰;郑志明;秦爱建;刘岳龙;邵红霞;张永志;黄训良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
仔猪大肠杆菌F4受体基因的精细定位的开题报告
仔猪大肠杆菌F4受体基因的精细定位的开题报告一、研究背景猪是我国重要的经济动物之一，在农业生产中起着重要的作用。
仔猪腹泻是猪养殖业中常见的疾病，严重影响了猪的生长和发展。
其中，仔猪大肠杆菌F4引起的腹泻是最严重的一种。
利用分子生物学技术深入研究仔猪大肠杆菌F4的受体基因对于防治仔猪腹泻具有重要意义。
二、研究目的通过精细定位仔猪大肠杆菌F4受体基因，进一步了解其在猪肠道内的作用及其与病原的相互作用。
为防治仔猪腹泻提供科学依据。
三、研究方法1. 选取已知F4受体基因关键位点进行SNP筛选。
2. 对选取的SNP位点进行PCR扩增，测序后进行基因型分析。
3. 根据基因型数据进行关联分析，确定F4受体基因的精细位置。
四、研究意义1. 对猪腹泻的发病机理有深入的认识。
2. 探究F4受体基因与病原的相互作用，为猪肠道微生态平衡的调整提供科学依据。
3. 为研究其他猪重要性状的基因定位提供参考。
五、研究进度安排1. 根据已有文献及数据库筛选SNP位点，进行标记选择。
2. 筛选选择后的SNP位点，PCR扩增，得到目标产物。
3. DNA测序，分析基因型。
4. 根据基因型数据进行关联分析，精细定位F4受体基因。
六、预期成果1. 确定F4受体基因的精细位置。
2. 对猪腹泻的发病机理进行深入探究。
3. 为防治仔猪腹泻提供科学依据。
七、研究难点1. SNPs位点筛选。
2. 基因型数据的准确性。
3. 精细定位受体基因时可能受到样本数量和遗传多样性的限制。
综上所述，通过该研究可以深入了解F4受体基因在猪肠道内的作用及其与病原的相互作用，为防治仔猪腹泻提供科学依据。
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大肠杆菌HPI毒力岛ybtA、fyuA基因的研究的开
题报告
一、研究背景
大肠杆菌（Escherichia coli）是一种常见的肠道菌，在正常情况下不会对人体造成伤害。
然而，某些菌株可能会携带特定毒力因子，例如肠
毒素、血凝素、侵袭性因子等，引发严重的感染和疾病，如肠炎、泌尿
道感染、败血症等。
其中，HPI毒力岛（High-Pathogenicity Island）是
导致大肠杆菌致病性增强的重要因素之一。
HPI毒力岛是一段长度为43kb的DNA片段，含有多个与毒力相关
的基因，已在许多致病性大肠杆菌菌株中发现。
其中，ybtA基因编码氧
合酶，参与非典型源铁离子的摄取和转运，从而使菌株对铁元素获得优势，增强其生长能力和毒力。
fyuA基因编码菌体外分泌系统，能够分泌
铁载体受体FyuA，使得菌株可以有效地吸收铁元素。
因此，ybtA、fyuA基因被认为是HPI毒力岛中的两个重要毒力因子，具有重要的研究价值。
二、研究目的
本研究旨在探究大肠杆菌HPI毒力岛中ybtA、fyuA基因的功能及其对菌株生长和毒力的影响，以期深入了解该毒力岛的致病机制，为预防
和治疗大肠杆菌感染提供理论基础。
三、研究内容
1. 构建ybtA、fyuA基因突变菌株。
采用基因克隆技术，构建ybtA、fyuA基因的突变菌株，其中：
a. ybtA基因突变菌株：通过基因敲除技术，将ybtA基因从HPI毒
力岛中删除，构建ybtA缺失菌株。
b. fyuA基因突变菌株：通过点突变技术，将fyuA基因突变，构建fyuA突变菌株。
2. 分析构建菌株生长行为。
对构建的ybtA缺失菌株和fyuA突变菌株，分别进行生长曲线分析和细胞比较分析，研究它们生长行为的差异，并将其与野生型菌株进行比较。
3. 研究构建菌株毒力表现。
通过细菌致病人血清的血清凝集试验和致小鼠败血症试验，研究构建菌株的致病性表现，并比较其与野生型菌株的致病力。
四、研究意义
本研究将有助于深入研究大肠杆菌HPI毒力岛的致病机制，增进对该菌株的认识，为进一步防治大肠杆菌感染提供理论基础和实验依据。
同时，探究ybtA和fyuA基因的功能和作用，将有望为发掘新的治疗靶点提供思路。
五、研究方法
1. 基因克隆技术：PCR扩增、酶切、连接、转化等。
2. 细菌培养和菌株构建：血平板、LB培养液、转化、筛选等。
3. 细胞生长行为分析：生长曲线分析、细胞比较分析等。
4. 细菌致病性分析：血清凝集试验、小鼠败血症试验等。
六、研究进度安排
1. 前期准备期（1个月）：文献调研，材料购置，菌株培养和基因测序等。
2. 菌株构建期（3个月）：构建ybtA缺失和fyuA突变菌株。
3. 细胞生长行为分析期（3个月）：对构建的菌株进行生长曲线分析和细胞比较分析。
4. 细菌致病性分析期（3个月）：通过细菌致病性分析，研究构建菌株的致病性表现。
5. 论文撰写期（2个月）：分析实验数据，完成实验报告和论文撰写。
七、预期成果
1. 构建大肠杆菌ybtA缺失菌株和fyuA突变菌株。
2. 分析构建菌株的生长行为和毒力表现。
3. 探究HPI毒力岛关键基因ybtA和fyuA的功能和作用。
4. 发表相关学术论文。