细胞离子成像

MetaFluor离子成像/FRET系统—MF-R
Molecular Devices的离子成像系统，能够提供整个系统和系统升级服务。系统内包含的高精度和高 速度部件能够为高速度离子成像分析和高精度比例成像，配合最高水平的MetaFluor软件系统，能够用 于：
●神经细胞，心肌细胞，骨骼肌细胞，胰岛细胞等 ●各种离子（Ca2+、Mg2+、Zn2+、K+、Clwenku.baidu.com、Na+、pH）的荧光比值测量以及单波长荧光测量。 ● 快速的FRET测量。
目前世界上胞内钙离子的主流测量方法分为电
测量法和光测量法。其中，光测量法利用能与离子 特异性结合的荧光探针来测 定细胞荧光强度的 变化， 若利用标准溶液来制作标准曲线，甚至可以测量出 胞内离子（包括钙离子和其他金属和非金属离子） 的绝对浓度，是目前世界上测量胞内游离钙离子浓 度最为权威的方法之一！
荧光共振能量转移(FRET)是指两个荧光发色基 团在足够靠近时，当供体分子吸收一定频率的
细胞离子成像
细胞离子成像/FRET简介
钙离子是生命活动最重要的离子之一，通过测 定细胞内游离钙离子浓度，科研工作者可以得知肌 肉收缩、神经信号传导、细胞间通讯、激素反应等 生命活动的重要信息。
另外，许多非金属阴离子，如H+，NO等及细胞 膜电位的检测和线粒体膜电位的快速检测对于观察 细胞的生物学特性有着重要的价值。
离子成像方法
非 比 例成像法 采用Fl uor -3，Fluo-4等荧光试剂标记细胞内 离子（如钙离子），当离子浓度升高，荧光信 号增强，根据荧光信号的强弱变化确定离子浓 度的改变。实验方法简单，易受漂白等影响。
比 例 成像法
采用Indor-1或Fura-2等荧光试剂标记细胞内离 子（如钙离子），结合离子的结合态试剂与非结 合态试剂激发/发射光谱不同，当离子浓度改变时， 通过结合态和非结合态试剂获得的荧光图像进行
长 寿 命 光 源系统 多 种 类 型 的CCD
系 统 与 膜 片钳联 用
实 时 获 得 离子图 像和 离 子 绝 对 浓度值
应用实例
同时展示多波长图像和自定义的测量曲线。当对之前的图像进行二次分 析时，通过鼠标点击曲线任意位置能够快速展示出与之相对应的图像。
CHO细胞标记Fura-2 图像来源： the Biomedical Sciences short course , Marine Biological Laboratory, Woods Hole, MA. Courtesy of Lynda Pierini, PhD, Cornell Medical Center, Ken Dunn, PhD, Indiana University-Purdue University,and Professor ColinIzzard, SUNY University of Albany.
光子后被激发到更高的电子能态，在该电子回
到基态前，通过偶极子相互作用，实现了能量
向邻近的受体分子转移（即发生能量共振转 移）。FRET是一种非辐射能量跃迁，通过分子间 的电偶极相互作用，可以检测分子发生的共价 键结合和分子构象改变。因此利用FRET可以进行 细胞内离子变化、蛋白磷酸 化、细胞信号通路 、 蛋白修饰、细胞内分子的相互作用和蛋白相互 作用等。
实 验自动化 •能够通过Journal功能自行设计和更改实验 流程，实现实验流程自动化 •通过Journal在实验任意步骤控制外设进行 细胞刺激，灌流的开关等，并将流程自动化。 •对于Indo1和FRET实验，可以进行双发射通 道同时成像和分析。。
实 时 FRET成像分析 •能够实时进行各种FRET对的成像 •实时进行供体/FRET比例成像，成像速度快且灵敏。 •与外部设备同步，自动检测外界刺激后不同时间 点的FRET改变。
除法计算，即可获得准确离子浓度。离子浓度测 量准确，且不受光漂白的影响。
FRET法 Cameleon YC3.6是基于绿色荧光结合荧光共振能量 转移(FRET)技术的Ca2+指示器。当钙离子与Cameleon蛋 白结合后，Cameleon蛋白空间三维结构发生改变，CFP 和YFP基团紧密相邻，从而发生FRET，并通过CFP和FRET 的比例成像计算，指示出离子的变化。
能 够整合多种外围设备 MF-R比例成像系统能够整合多种外周设备，包
括与膜片钳联用，整合自动灌流设备等。并能通过 自动控制外围设备实现实验无人值守自动化。
实 时获得细胞离子绝对浓度 系统能够无限制圈选感兴趣区域（ROI）与细
胞，能够在图像采集的过程中实时获得荧光亮度曲 线、比例亮度曲线和离子浓度绝度值。
光 源系统 高精度高稳定性的光源系统，能够确保稳定可
靠的离子浓度测量，同时提供超长寿命，无需频繁 更换灯泡。
波 长切换 高速的切换装置，能够快速切换激发光波长，
方便快速的进行比例和非比例成像分析。
成 像检测器 MF-R比例成像系统可根据使用要求配置多种检
测器，包括CCD，s CMOS和EMCCD，提供高分辨率、 高速度、高灵敏度的实验结果。