肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)检测试剂盒(肉桂酸比色法)
4-羟基肉桂酸用途
4-羟基肉桂酸（4-Hydroxycinnamic Acid），也称为对羟基肉桂酸，是一种有机化合物，属于肉桂酸类化合物的一种。
它在医学、食品、化妆品等领域具有多种应用。
以下是一些常见的4-羟基肉桂酸的用途：
1. 抗氧化剂：4-羟基肉桂酸具有抗氧化性质，可以帮助中和体内自由基，减少氧化应激对细胞和组织的损害。
因此，它在保健品、药物和化妆品中被用作天然的抗氧化剂。
2. 抗炎作用：研究表明，4-羟基肉桂酸具有一定的抗炎作用，可能有助于减轻炎症反应和疼痛。
这使得它在药物研发中具有潜在的应用前景。
3. 抑制血糖：一些研究表明，4-羟基肉桂酸可能对血糖水平有调节作用，可能有助于改善胰岛素敏感性，对于糖尿病患者的血糖控制具有潜在益处。
4. 美白和护肤：由于其抗氧化性质，4-羟基肉桂酸可以用于护肤产品，帮助减轻肌肤的氧化损伤，有助于保持肌肤的健康和年轻状态。
5. 食品添加剂：4-羟基肉桂酸可以用作食品的天然添加剂，用于增加食品的抗氧化性和稳定性，延长食品的保质期。
需要注意的是，在使用4-羟基肉桂酸时，应遵循相关法规和规定，以确保其安全性和适当性。
此外，具体用途可能因不同产业和领域而有所不同，建议在使用前咨询专业人士的建议。
肉桂酸鉴别方法
肉桂酸鉴别方法
肉桂酸（Cinnamic acid）是一种芳香酸，常见于肉桂等植物中。
以下是一些肉桂酸的常见鉴别方法：
1. 熔点测定：肉桂酸的熔点是一个常用的鉴别方法。
通常，肉桂酸的熔点在128-131摄氏度之间。
通过测量样品的熔点并与已知标准进行比较，可以初步确定是否存在肉桂酸。
2. 红外光谱（IR）：使用红外光谱仪可以测定分子的振动模式。
肉桂酸在红外光谱上显示出特定的峰值，这可以与已知标准进行比较以进行鉴别。
3. 核磁共振谱（NMR）：使用核磁共振仪可以分析分子的核磁共振谱，从而确定分子结构。
肉桂酸在核磁共振谱上显示出特定的峰值，这可以用于鉴别。
4. 紫外-可见吸收光谱（UV-Vis）：肉桂酸在紫外区域有吸收峰，可以通过UV-Vis光谱仪来测定。
这也是一种常见的鉴别方法。
5. 显色反应：肉桂酸可以通过与一些特殊试剂的反应产生显色反应。
例如，与溴水反应，可以生成白色沉淀。
这种反应可以用于鉴别肉桂酸的存在。
6. 化学反应：肉桂酸可以通过一系列化学反应进行转化，形成特定的产物。
这些反应可以用于鉴别肉桂酸的存在，并确定其结构。
在进行鉴别时，通常会结合多种方法，以提高鉴别的准确性。
如果你需要具体的实验方法，建议查阅相应的化学或实验室手册，或者咨询专业化学实验室的技术人员。
柑橘果实粒化过程中木质素生物合成与调控研究进展
柑橘果实粒化过程中木质素生物合成与调控研究进展张旭; 王小佳; 黎思辰; 董甜甜; 汪志辉【期刊名称】《《浙江农业学报》》【年(卷),期】2019(031)012【总页数】10页(P2131-2140)【关键词】柑橘; 汁胞粒化; 木质素; 关键酶; 转录因子【作者】张旭; 王小佳; 黎思辰; 董甜甜; 汪志辉【作者单位】四川农业大学园艺学院四川成都611130; 四川农业大学果蔬研究所四川成都611130【正文语种】中文【中图分类】S666柑橘果实易在成熟期和采后贮藏的过程中发生汁胞粒化现象，表现为汁胞变硬，颜色变白，风味变淡，导致果实品质严重下降，甚至丧失商品价值。
相关研究表明，在沙田柚、红肉蜜柚和伦晚脐橙的粒化汁胞中观察到明显的木质化现象，粒化汁胞中存在显著的木质素积累现象[1-2]。
利用低场核磁成像对伏令夏橙粒化汁胞进行研究发现，随着汁胞粒化程度的加剧，结合水数量增加，木质素含量与粒化程度呈显著正相关[3]。
木质素作为植物细胞壁的主要组成部分，与纤维素、半纤维素、果胶等物质交叉联接。
木质素的合成能够对植物细胞起重要的保护作用，增强植物细胞抵抗病害和逆境的能力。
但就园艺商品而言，木质素的积累会造成果实品质的下降，对园艺产业的发展是不利的。
木质素生物合成的研究已经持续了很长时间，由于其合成途径是一个非常复杂的过程，目前关于木质素生物合成的机理仍在不断探索中。
1 木质素的组成木质素是由苯丙烷单体及其衍生物聚合形成的复杂酚类聚合物，依据不同的苯丙烷单体可将木质素分为由香豆醇合成的对-羟基苯基木质素(H)、由松伯醇合成的愈创木基木质素(G)、由芥子醇合成的紫丁香基木质素(S)三种类型[4]。
不同的植物含有的木质素类型和组成比例不同，果树上的研究发现，砀山酥梨果实中主要以G、S 型木质素为主，且G/S的比值会影响木质素的降解，从而决定果实中石细胞含量[5]。
琯溪蜜柚粒化汁胞中发现木质素主要为G型木质素[6]。
植物木质素的合成与调控研究进展
植物木质素的合成与调控研究进展丁霄;曹彩荣;李朋波;吴翠翠;曹美莲;杨六六【摘要】木质素作为植物次生细胞壁的重要组分,分布于输导组织和木质化组织细胞壁中,不仅具有提高细胞壁的隔水性和机械强度,而且在提高植物的抗病抗逆方面也发挥着重要作用.对植物木质素的种类、合成调控和利用基因工程从源头调控植物木质素含量等方面的研究现状进行了概述;随着转基因技术的发展,有望通过更多更有效的途径来改变植物木质素的组成.【期刊名称】《山西农业科学》【年(卷),期】2016(044)009【总页数】6页(P1406-1411)【关键词】木质素;合成与调控;基因工程【作者】丁霄;曹彩荣;李朋波;吴翠翠;曹美莲;杨六六【作者单位】山西省农业科学院棉花研究所,棉花种质资源利用与分子设计育种山西省重点实验室,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,棉花种质资源利用与分子设计育种山西省重点实验室,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,棉花种质资源利用与分子设计育种山西省重点实验室,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,棉花种质资源利用与分子设计育种山西省重点实验室,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,棉花种质资源利用与分子设计育种山西省重点实验室,山西运城044000;山西省农业科学院棉花研究所,棉花种质资源利用与分子设计育种山西省重点实验室,山西运城044000【正文语种】中文【中图分类】Q943.2木质素是植物经类苯丙酸途径合成的单体经进一步分化形成的3个苯丙烷衍生物通过化学键聚合而成的高分子化合物[1]。
其大量存在于植物的木质部纤维素纤维之间，通过形成交织网来硬化细胞壁，能够使木质部维持极高的硬度，以形成植株的形态，承载整株植物的重量，并形成较强的抗压能力，因此，木质素在维管植物的进化中发挥着重要作用[2]。
在木本植物中，木质素占25%～30%；在草本植物中，木质素占16%；在自然界有机物中的含量仅次于纤维素，是植物转化太阳能形成的重要有机物之一[3]。
肉桂酸的制备
肉桂酸的制备肉桂酸，化学式C9H8O2，是一种有机化合物，属于有机酸。
它具有香甜的香味，常用于食品调味和药物制剂中。
肉桂酸能够通过不同的方法进行制备，下面将介绍几种常见的制备方法。
1. 肉桂醛氧化法肉桂醛是肉桂酸的前体，可以通过氧化反应得到肉桂酸。
反应中一般使用氧化剂氧气或过氧化苯甲酰来氧化肉桂醛。
具体步骤如下：（1）将肉桂醛溶于适量的无水乙醇；（2）逐渐加入氧气或过氧化苯甲酰，控制反应温度在80-100℃，反应时间为数小时；（3）反应结束后，用冷水冷却反应液，产生沉淀；（4）过滤沉淀，并用乙醇洗涤几次，最后用醚提取；（5）用水减压蒸馏，得到肉桂酸的无色液体。
2. 石英光解法肉桂酸也可以通过石英光解法进行制备。
具体步骤如下：（1）将肉桂醇溶解于干燥的醋酸中；（2）将溶液置于石英反应器内，通过真空脱气，去除氧气；（3）将石英反应器置于紫外线光源下，照射数小时；（4）反应结束后，用乙醚提取产物；（5）用纯水洗涤乙醚层，然后用无水氯化钠干燥；（6）用减压蒸馏，得到肉桂酸的无色液体。
3. 纳米铁催化法最近研究发现，纳米铁在催化反应中能够将芳香酮还原得到肉桂醛，并最终形成肉桂酸。
具体步骤如下：（1）将纳米铁与乙酸混合搅拌，并在反应室中进行超声处理；（2）加入未稳定的芳香酮溶液，反应温度一般控制在室温下；（3）反应结束后，用橡胶头滴管分离上层有机相；（4）用洗涤液进行水相的清洗，并用无水氯化钠干燥；（5）用减压蒸馏，得到肉桂酸的无色液体。
肉桂酸的制备方法有多种，上述所列举的只是其中几种常见的方法。
研究人员也在不断探索新的制备方法，如酶法、电化学法等。
通过不同的制备方法，可以得到高纯度的肉桂酸，以满足不同领域的需求。
高效液相色谱法测定食品中肉桂酸钾的含量
分析检测高效液相色谱法测定食品中肉桂酸钾的含量袁 明，余春平（武汉能迈科实业有限公司，湖北武汉 430010）摘 要：目的：建立了高效液相色谱法测定食品中肉桂酸钾含量的方法。
方法：甲醇-0.5%磷酸（50∶50，V/V）溶液为流动相，流速1 mL/min，UVD检测器检测光源285 nm。
采用外标法测量食品中肉桂酸钾的添加量。
结果：肉桂酸钾浓度在0～1.0 mg/mL，外标曲线拟合度为0.999 4，拟合度高且具有较宽的线性范围，检测过程中主峰与杂质峰能较好地分离，设备的重复性，样品处理方法的稳定性和处理过程中肉桂酸钾的回收率，样品配制后的稳定性均满足分析要求，测得香辣萝卜干中肉桂酸钾的添加量为0.329 0 mg/g。
结论：该方法能较高效、稳定、无毒的检测出食品中肉桂酸钾的含量。
关键词：高效液相色谱法（HPLC）；食品；肉桂酸钾Detection of Potassium Cinnamate in the Food by HPLCYUAN Ming, YU Chunping(Wuhan Landmark Industrial Co., Ltd., Wuhan 430010, China)Abstract: Objective: To establish a method for the determination of potassium cinnamate in food by high performance liquid chromatography. Method: Methanol-0.5% phosphoric acid (50∶50,V/V) solution was used as the mobile phase, the flow rate was 1 mL/min, and the UVD detector detected the light source at 285 nm. The external standard method was used to measure the addition of potassium cinnamate in food. Result: The concentration of potassium cinnamate was 0～1.0 mg/mL, and the fitting degree of the external standard curve was 0.999 4. The fitting degree was high and had a wide linear range. During the detection process, the main peak and impurity peak could be well separated. The repeatability, the stability of the sample treatment method, the recovery rate of potassium cinnamate during the treatment process, and the stability of the sample after preparation all meet the analysis requirements.The added amount of potassium cinnamate in spicy dried radish was measured to be 0.329 0 mg/g. Conclusion: This method can detect the content of potassium cinnamate in food with high efficiency, stability and non-toxicity.Keywords: High Performance Liquid Chromatography(HPLC); food; potassium cinnamate肉桂酸钾在食品添加剂、香精香料、畜牧业、日化用品等工农业领域有着极其广泛的应用。
肉桂酸实验报告
一、实验目的1. 了解肉桂酸的制备原理和方法；2. 掌握水蒸气蒸馏的原理、用处和操作；3. 学习并掌握固体有机化合物的提纯方法：脱色、重结晶。
二、实验原理肉桂酸是一种重要的有机化合物，广泛应用于香料、医药、农药等领域。
本实验采用苯甲醛和乙酸酐为原料，通过Perkin反应制备肉桂酸。
Perkin反应是一种有机合成方法，其主要原理是：在弱碱作用下，乙酸酐脱去一个H原子，形成CH3COOCOCH2-负离子，然后与苯甲醛发生亲核加成反应，生成肉桂酸。
反应方程式如下：C6H5CHO + (CH3CO)2O → C6H5COCH3 + CH3COOH三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 无水碳酸钾- 苯甲醛- 乙酸酐- 氢氧化钠水溶液- 1:1盐酸- 活性炭2. 实验仪器：- 150ml三口烧瓶- 500ml烧杯- 玻璃棒- 量筒- 200温度计- 直形冷凝管- 电磁炉- 球形冷凝管- 表面皿- 滤纸- 布氏漏斗- 吸滤瓶- 锥形瓶四、实验步骤1. 准备反应装置：将无水碳酸钾、苯甲醛和乙酸酐按一定比例混合，放入150ml 三口烧瓶中。
2. 加热反应：将反应混合物加热至回流，维持回流状态1小时。
3. 水蒸气蒸馏：在反应结束后，将反应混合物进行水蒸气蒸馏，以分离未反应的苯甲醛。
4. 脱色：将水蒸气蒸馏后的溶液加入适量的活性炭，搅拌均匀，过滤。
5. 重结晶：将脱色后的溶液加入适量的盐酸，使肉桂酸析出晶体，过滤、洗涤、干燥。
五、实验结果1. 理论产量：0.05148g2. 实际产量：6.56g3. 产率：6.56/7.41100% = 88.53%六、实验讨论1. 产率较高的原因：1) 抽滤后没有干燥，成品中还含有一些水分，使产率偏高；2) 加活性炭脱色时间太短，加入活性炭量太少。
2. 注意事项：1) 加热时最好控制温度在150~170℃；2) 在进行水蒸气蒸馏时，要保证水蒸气蒸馏装置的密封性；3) 脱色时，活性炭的加入量不宜过多，以免影响产率；4) 重结晶时，盐酸的加入量不宜过多，以免影响肉桂酸的纯度。
肉桂酸的制备实验报告
肉桂酸的制备实验报告引言肉桂酸，化学式C9H8O2，是一种常见的天然有机化合物，具有许多重要的生物活性和医药价值。
肉桂酸广泛存在于植物中，如肉桂、白桦等。
本实验旨在通过合成的方法制备肉桂酸，并通过物理和化学性质的检测来验证合成产物的纯度和结构。
实验步骤材料准备•乙酸苄酯（C9H10O2）•无水乙醇（C2H5OH）•氢氧化钠（NaOH）•稀盐酸（HCl）•氯化钠（NaCl）•过滤纸•玻璃棒•磁力搅拌器•250 mL圆底烧瓶•水浴装置实验步骤1.在250 mL圆底烧瓶中加入10 g乙酸苄酯和100 mL无水乙醇。
2.开启磁力搅拌器，将玻璃棒放入圆底烧瓶中，并将烧瓶放入水浴装置中进行加热。
3.加热过程中，将适量的氢氧化钠溶解于100 mL无水乙醇中。
4.将溶解好的氢氧化钠溶液缓慢滴加到圆底烧瓶中。
5.继续加热并搅拌反应混合物，保持水浴温度在70-80摄氏度之间，反应时间持续2小时。
6.完成反应后，关掉加热和搅拌装置。
7.将反应混合物倒入250 mL滤液漏斗中，用少量的无水乙醇洗涤圆底烧瓶，并将洗涤液加入滤液漏斗中。
8.使用过滤纸过滤出固体产物，并用无水乙醇洗涤固体产物，直至洗涤液无色。
9.将固体产物放置在通风干燥的地方，晾干数小时。
10.称取干燥后的固体产物，记录产物质量。
结果与讨论结果根据实验步骤，我们成功制备了肉桂酸。
制备过程中，乙酸苄酯和氢氧化钠发生酯水解反应，生成肉桂酸和醇。
通过滤液和洗涤，我们将产物纯化并获得了固体的肉桂酸产物。
讨论在制备肉桂酸的过程中，需要注意以下几点： - 控制反应温度和时间：反应温度过高会导致产物分解，反应时间过长可能导致副反应的发生。
在本实验中，我们将反应温度保持在70-80摄氏度，反应时间为2小时，以确保产物的高纯度和产率。
- 洗涤产物：为了去除反应中形成的杂质和副产物，我们使用无水乙醇洗涤产物。
洗涤过程需要进行多次，直到洗涤液无色为止。
- 产物的纯化和干燥：通过滤液和洗涤得到的固体产物还需放置在通风干燥的地方晾干，以获得干燥的肉桂酸产物。
肉桂酸说明书
肉桂酸-4-羟化酶（Cinnamic acid-4-hydroxylase，C4H）
试剂盒说明书
微量法100管/96样
注意：正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
C4H 又称反式肉桂酸-4-单氧化酶，多存在于高等植物、酵母、菌类中，该酶催化肉桂酸羟化作用产生4-香豆酸盐，是苯丙烷途径中继L-苯丙氨酸解氨酶之后的第二个关键酶。
测定原理：
C4H 催化肉桂酸和NADP 生成4-香豆酸盐和NADPH，在340nm 下测定NADPH 生成速率，即可反映C4H 活性。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制：
提取液：100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体25 mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2 瓶，-20℃保存；。
肉桂酸-4-羟基化酶提取液
肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)提取液简介：肉桂酸-4-羟基化酶是催化桂皮酸形成咖啡酸、香豆酸的酶。
该酶多存在于高等植物、酵母、菌类可溶性部分物质，属于细胞木质素合成途径中间的关键酶，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。
Leagene 肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)提取液主要用于裂解植物组织，提取样品中的肉桂酸-4-羟基化酶。
该试剂仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、 蒸馏水2、 离心管或试管3、 匀浆器或研钵4、 低温离心机操作步骤(仅供参考)：1、取植物组织清洗干净，切碎。
2、加入肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)提取液，冰浴情况下充分捣碎或研磨。
3、离心，留取上清液。
4、冻存，用于肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)的检测或其他用途。
计算：组织或植物粗酶液获得率(ml)=上清液体积(ml)/组织或植物质量×100%注意事项：1、 待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂，同时需避免反复冻融。
2、 所测样本的值高于标准曲线的上限，应用肉桂酸-4-羟基化酶提取液稀释样品后重新测定。
编号 名称 CS0371 CS0371 Storage 肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)提取液 100ml 500ml 4℃ 避光 使用说明书 1份3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。
相关：编号名称CC0007 磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)CS0001 ACK红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)DC0032 Masson三色染色液DF0135 多聚甲醛溶液(4% PFA)NR0001 DEPC处理水(0.1%)PS0013 RIPA裂解液(强)TC1167 尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。
紫草宁生物合成途径中的代谢与调控
紫草宁生物合成途径中的代谢与调控1.背景知识介绍1.1 紫草及紫草宁紫草（学名：Lithospermum erythrorhizon），为紫草科紫草属植物。
又名山紫草、紫丹、紫草根，分布于日本、朝鲜以及中国大陆的辽宁、山西、湖南、甘肃、山东、湖北、广西、四川、陕西、贵州、江西、河北、河南等地，生长于海拔50米至2,500米的地区，多生长在山坡草地，目前尚未由人工引种栽培。
紫草是一种重要的药用植物，其功效是凉血，活血，解毒透疹。
用于血热毒盛，斑疹紫黑，麻疹不透，疮疡，湿疹，水火烫伤。
紫草根部富含红色的萘醌类次生代谢产物——紫草宁及其衍生物。
紫草宁又称紫草素，英文名称：Shikalkin，英文别名：5,8-Dihydroxy-2-(1-hydroxy-4-methylpent-3-enyl)naphthalene-1,4-dione，即5,8-二羟基-2-[(1R)-1-羟基-4-甲基戊-3-烯基]萘-1,4-二酮，结构式如下：紫草宁为赤褐色针状晶体(由苯重结晶)。
熔点149℃。
旋光度-167°±10°(在苯中)。
能溶于普通有机溶剂，以及甘油动植物油脂和碱性水溶液。
难溶于碳酸氢碱溶液。
与氢氧化碱金属作用显蓝色。
由于紫草素具有多种生物学活性，以紫草素为先导化合物开发抗炎、抗肿瘤、抗病毒新药的研究已成为热点课题，除此之外，紫草素还是良好的天然色素，已广泛用于食品、化妆品和印染工业中。
1.2紫草宁及其衍生物的药理作用1.2.1 抗肿瘤活性近年来，紫草次生代谢物的抗肿瘤活性倍受关注。
紫草素能够抑制肝癌肿瘤细胞增殖[1]、诱导生殖系统肿瘤细胞凋亡[2]，并兼具调控机体免疫的功能。
紫草素在体外一定浓度范围内能抑制人白血病Ｋ562细胞增殖，诱导其凋亡。
甲基丙烯酰紫草素具有较好的体内外抗肿瘤作用，作用机制可能与诱导细胞凋亡和抑制NF-zB p50的活性有关[3]。
乙酰紫草素可通过诱导细胞凋亡来抑制胃癌SGC-7901细胞在体内外的增殖[4]。
3,5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸
3,5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸
3,5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸是一种化学名为caffeic acid的化
合物，也被称为3,5-bis(1,1-dimethylethyl)-4-hydroxycinnamic acid或2-trans-caffeic acid。
它是一种天然的酚酸，广泛存在于许
多植物中，包括薄荷、迷迭香、葡萄及其酒、酸橙等。
这种化合物有许多生物活性，具有抗氧化、抗發炎、抗菌、抗癌
和心血管保护等功效。
因此，在医药、食品、化妆品等领域都有广泛
的应用。
研究表明，3,5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸可以通过多种方式发挥
其保健作用。
首先，它可以通过中和自由基和其他化合物，保护细胞
免受损伤。
此外，它还可以通过抑制炎症反应，减少可能引发细胞病
变的慢性炎症。
此外，3,5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸对心脏健康也有正面的影响。
研究表明，对这种化合物进行长期摄入可以降低心脏病和中风的风险。
它还可以减少血脂和胆固醇水平，保护血管的健康。
最后，3,5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸还被认为具有抗肿瘤的效果。
研究表明，它可以通过破坏癌细胞控制和减缓癌细胞生长，从而抑制
癌症的形成和发展。
总之，3,5-二叔丁基-4-羟基肉桂酸是一种非常有价值的化合物，因其多种功效而备受关注。
未来的研究将继续探索它的生物活性以及
在医药、食品、化妆品等领域中的潜在应用。
化学实验报告——肉桂酸的合成
肉桂酸的制备一、 实验目的和要求1、 学习肉桂酸的合成方法；2、 掌握Perkin 反应的原理和应用；3、 掌握回流操作；4、 熟练水蒸汽蒸馏和重结晶操作。
二、 实验内容和原理芳香醛和酸酐在碱性催化剂作用下，可以发生类似羟醛缩合的反应，生成α，β-不饱和芳香醛，称为Perkin 反应。
催化剂通常是相应酸酐羧酸钾或钠盐，有时也可用碳酸钾或叔胺代替，典型的例子是肉桂酸的制备：3CH COOK6532653170180C H CHO+(CH CO)O C H CH=CHCOOH+CH COOH C︒−−−−→ 碱的作用是促使酸酐发生烯醇化反应，生成乙酸酐碳负离子，接着碳负离子与芳醛发生亲核加成，第三步是中间产物的氧酰基交换产生更稳定的β-酰氧基丙酸负离子，最后经β-消去产生肉桂酸盐。
用碳酸钾代替乙酸甲，反应周期可明显缩短。
反应机理如下：H 3CCO CCH O O O COO 3CCO CO O 2HH 3CCOCH 2OC O CH 3OO C O3OO -HClOOH虽然理论上肉桂酸存在顺反异构体，但Perkin 反应只得到反式肉桂酸(熔点133℃)。
顺式异构体(熔点68℃)不稳定，在较高的反应温度下很容易转变为热力学更稳定的反式异构体。
肉桂酸可用于制备L-苯丙氨酸、用作冠心病药心可安的中间体，还可用于制造局部麻醉剂、杀菌剂、止血药等；在香料工业用于制取苯基丙烯酸甲酯、乙酯和苯酯，用作食品、化妆品香料，有较好保香作用；用于农药工业生长促进剂、长效杀菌剂、果品蔬菜的防腐剂等；还用于生产感光树脂的主要原料乙烯基肉桂酸。
肉桂酸是测定铀、钒及分离钍的试剂。
三、主要物料及产物的物理常数四、主要仪器设备仪器磁力搅拌器；球形冷凝管；回流装置；水蒸气蒸馏装置；抽滤装置；水循环真空泵；热水漏斗。
试剂苯甲醛(新蒸)；乙酸酐(新蒸)；无水碳酸钾；氢氧化钠；浓盐酸；乙醇。
五、操作方法和实验步骤实验装置图：加热回流装置 保温过滤装置水蒸气蒸馏装置六、 实验结果与分析实验合成肉桂酸粗产品(未干燥)共9.38g ，呈微黄色粉末状固体，很像奶粉。
肉桂酸
• 合成(Ⅱ) 所使用的催化剂主要有：CuCl2 、 CuCl、FeCl3 、PPh3 和脂肪胺
• 生成(Ⅲ) 所使用的催化剂主要有：FeCl3 、 ZHn3PCOl24、与CHF2S3COO4OH 、HCOOHHOAc、
• 该合成工艺实现了以廉价化工产品为原料, 高收率制备肉桂酸, 且使用的催化剂常见且 低廉, 是最有工业化前景的合成方法。
二氧化碳、氧化钾。 灭火方法：
消防人员必须穿全身耐酸碱消防服。灭火时尽可能将容器从火场移至空旷处。 应急处理：
隔离泄漏污染区，限制出入。建议应急处理人员戴防尘面具（全面罩），穿 防毒服。避免扬尘，小心扫起，置于袋中转移至安全场所。也可以用大量水 冲洗，洗水稀释后放入废水系统。若大量泄漏，用塑料布、帆布覆盖。收集 回收或运至废物处理场所处置。 操作注意事项：
主要用途
•肉桂酸为中间体合成多种酯类化合物（香料） •合成医药、农药、塑料和感光树脂的原料 •测定铀钒及分离钍的试剂 •用作植物生长促进剂 •果品蔬菜的防腐剂 •乙内酰的阻燃剂 •长效杀菌剂
•……
肉桂酸在食品添加剂的应用：
1.肉桂酸用微生物酶法合成L-苯丙氨酸，L-苯丙氨酸是重要的食品添 加剂-甜味阿斯巴甜（Aspartame）的主要原料。
• ★Ag/C 的氧化效果优于其它催化剂★
• Ag/C 具有较好的表面吸附性能, 被吸附的 反应物在催化剂表面发生氧化反应, 并释放 出热量, 然后氧化产物自催化剂表面脱附, 扩散到液相中并带走热量。
• ⒉肉桂酸钠的酸化
将滤液用1：1 的盐酸调节pH 至6～7 , 加入 活性炭，加热搅拌30 min ,抽滤,滤液冷却至 室温,再用1：1 的盐酸调节溶液的pH 为1～ 2 , 有大量晶体析出,静置后抽滤, 水洗得无 色针状晶体肉桂酸,在低于50 ℃以下真空干 燥。
水稻水杨酸通路基因
水稻水杨酸通路基因是指参与水稻体内水杨酸生物合成和信号转导途径的基因。
水杨酸（Salicylic acid，SA）是一种重要的植物激素，参与调控植物生长发育、抗病抗逆等多种生理过程。
在水稻中，水杨酸通路基因主要包括以下几个关键基因：
1. 苯丙氨酸解氨酶（Phenylalanine ammonia-lyase，PAL）：PAL是水杨酸生物合成途径中的关键酶，催化苯丙氨酸生成肉桂酸。
2. 肉桂酸羧化酶（Cinnamate 4-hydroxylase，C4H）：C4H是水杨酸生物合成途径中的另一种关键酶，催化肉桂酸生成对羟基肉桂酸。
3. 对羟基肉桂酸还原酶（4-coumarate-CoA ligase，4CL）：4CL催化对羟基肉桂酸生成对羟基肉桂酰辅酶A。
4. 异黄酮合酶（Isochorismate synthase，ICS）：ICS是水杨酸生物合成途径中的关键酶，催化对羟基肉桂酰辅酶A生成异黄酮。
5. 异黄酮氧化酶（Isochorismate oxidase，ISO）：ISO催化异黄酮生成水杨酸。
6. 水杨酸羧化酶（Salicylic acid carboxylase，SAMT）：SAMT催化水杨酸生成水杨酸甲酯。
7. 水杨酸受体（Salicylic acid binding protein，SABP）：SABP是水杨酸信号转导途径中的关键蛋白，与水杨酸结合后调控下游基因表达。
8. 非表达蛋白（Nonexpressor of pathogenesis-related genes，NPR1）：NPR1是水杨酸信号转导途径中的关键调控因子，调控病程相关基因的表达。
肉桂酸的制备实验
肉桂酸的制备实验一、实验原理???????利用柏琴（Perkin）反应制备肉桂酸。
一般认为脂肪酸钾盐或钠盐为催化剂，提供CH3COO-负离子，从而使脂肪酸酐生成负碳离子，然后负碳离子和醛或羧酸衍生物（酐和酯）分子中的羰基发生亲核加成，形成中间体。
在珀金反应中，是碳酸钾夺取乙酐分子中的α－Ｈ，形成乙酸酐负碳离子。
实验所用的仪器必须是干燥的。
主反应：副反应：???????在本实验中，由于乙酸酐易水解，无水碳酸钾易吸潮，反应器必须干燥。
提高反应温度可以加快反应速度，但反应温度太高，易引起脱羧和聚合等副反应，所以反应温度控制在150~170℃左右。
未反应的苯甲醛通过?机理：三、药品（13）抽滤装置????在,以及研细的（一）制备阶段：???????1.安装反应装置：按(1)合成装置图，三口烧瓶的中间口连接空气冷凝管【注：冷凝管上口不能用塞子塞住，要与大气相通，常压反应】，侧口插入一根200℃温度计，温度计要求插入液面以下【注：水银球不能接触瓶壁】，另一侧口加一个空心塞。
???????2.投料：在250ml三口烧瓶中依次放入3ml新蒸馏过的苯甲醛、8ml新蒸馏过的醋酐以及研细的4.2g无水碳酸钾。
【应在放空心塞的侧口依次加入药品】???????3.加热：缓缓加热，回流45min。
要控制加热速度，使三口瓶内温度计读数不能超过170℃。
由于反应中二氧化碳逸出，可观察到反应初期有大量泡沫出现。
（二）纯化阶段：???1.分解未反应的原料乙酸酐：反应完毕，在搅拌下向反应液中分批加入20ml水???2.使肉桂酸转化为肉桂酸钠盐：慢慢加入碳酸钠中和反应液至pH等于8。
???3.除去未反应的原料苯甲醛：然后进行水蒸汽蒸馏，蒸出未反应完的苯甲醛。
???4.脱色与吸附树脂状物：待三口烧瓶中的剩余液体冷却后，加入活性炭煮沸10-15min，进行趁热过滤；【(1)加活性炭时三口瓶内的剩余液体只需要稍微冷却即可；(2)此步水蒸气蒸馏装置先不要拆卸，只需在三口瓶的侧口加入活性炭后，继续蒸馏10min即可，这样做操作简单，同时又可以彻底除去未反应的苯甲醛；(3)若拆卸了水蒸气蒸馏装置，那么当加完活性炭煮沸时，需要安装回流装置，在三口瓶的中间口连接回流冷凝管，两侧口需要用空心塞堵上，操作上较麻烦。
生物合成对羟基苯甲酸的研究进展-微生物学报
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至 4HBA 的 一 系 列 基 因 从 门 多 萨 假 单 胞 菌 Pseudomonas mendocina KR1 菌株引入到该菌 株的染色体中，构建成 DOT-T1E-24 菌株。这一 系列基因包括：tmoABCDEF，编码甲苯单加氧 酶，催化的反应是在甲苯的 4 位引入一个羟基 生成甲酚 (p-Cresol)；pcuBXA 编码甲酚单加氧 酶 ， 催 化 将 甲 酚 氧 化 为 4- 羟 基 苯 醇 (4-Hydroxybenzyl alcohol) 和 进 一 步 氧 化 为 4-羟 基 苯 醛 (4-Hydroxybenzyl aldehyde) 的 两 步反应；pcuC 编码 4-羟基苯醛脱氢酶，催化生 成 4HBA 的 反 应 。 在 摇 瓶 分 批 培 养 条 件 下 DOT-T1E-24 菌株成功将甲苯转化成 4HBA，并 得到 12 mmol/L 的积累记录。从石油成分甲苯 出发，理论上一个甲苯可以合成一个 4HBA。
Abstract: 4-Hydroxybenzoate (4HBA) is an important chemical compound used for synthesis of liquid crystal. Production of 4HBA from renewable resources is an effective mean to solve problems such as environmental pollution and petroleum shortage. This review briefly introduces the chemical synthesis of 4HBA from oil compounds, and mainly describes the progress in 4HBA biosynthesis from renewable resources by plants and microorganisms. In most intriguing aspect of plant-based synthesis of 4HBA is the appeal of directly synthesizing a chemical from CO2. However, the
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肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)检测试剂盒(肉桂酸比色法)
简介：
肉桂酸-4-羟基化酶是催化桂皮酸形成咖啡酸、香豆酸的酶。
该酶多存在于高等植物、酵母、菌类可溶性部分物质，属于细胞木质素合成途径中间的关键酶，研究该酶可以探讨多种生物细胞发育过程中木质素沉积的代谢机理，为减少水果石细胞含量提高其品质提供依据。
Leagene肉桂酸-4-羟基化酶(C4H)检测试剂盒(肉桂酸比色法)检测原理是以肉桂酸作为底物，在酶促反应的最适条件下采用每隔一定时间测定产物生成量的方法，于分光光度计或酶标仪290nm处检测吸光度，以吸光度变化所需酶量进行计算。
该试剂盒主要用于植物组织的裂解液或匀浆液、血清等样品中内源性的肉桂酸-4-羟基化酶活性，尤其适用于检测水果中肉桂酸-4-羟基化酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、蒸馏水
2、研钵或匀浆器
3、离心管或试管
4、低温离心机
5、水浴锅或恒温箱
6、比色杯或酶标板
7、分光光度计或酶标仪
操作步骤(仅供参考)：1、准备样品：编号
名称TE0407
100T
Storage
试剂(A):C4H Lysis buffer250ml4℃避光试剂(B):C4H Assay buffer5ml4℃避光试剂(C):NADPH1支-20℃
使用说明书1份
①植物样品：取植物组织或水果中层果肉，加入C4H Lysis buffer，冰浴情况下充分捣碎研磨或匀浆，离心，留取上清液，冻存，用于肉桂酸-4-羟基化酶的检测。
②血浆、血清和尿液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，冻存，用于肉桂酸-4-羟基化酶的检测。
③细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，离心，取上清液，冻存，用于肉桂酸-4-羟基化酶的检测。
④高活性样品：如果样品中含有较高活性的肉桂酸-4-羟基化酶，可以使用蒸馏水或C4H Lysis buffer稀释进行恰当的稀释。
2、配制NADPH工作液：取NADPH加入蒸馏水，充分溶解，即为NADPH工作液。
该
NADPH工作液保存2周，-20℃保存3个月。
3、加样：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。
如果样品中的C4H活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
样品的检测最好能设置2平行管，求平均值。
加入物(ml)对照管测定管
蒸馏水 1.657 1.607
待测样品0.050.05
C4H Assay buffer－0.05
NADPH工作液0.0430.043
C4H Lysis buffer0.250.25
4、C4H检测：
①分光光度计检测：立即以分光光度计，比色杯光径1.0cm，以对照管为对照，测定测定管的吸光度(A测定0)。
准确孵育后，立即加入C4H终止液终止反应(备选方案)，用C4H碱性基液调节pH，以分光光度计，比色杯光径1.0cm，以对照管为对照，测定测定管的吸光度(A测定1)。
注意：加入终止液终止反应不是必须步骤，可准确孵育后直接以分光光度计，比色杯光径1.0cm，以对照管为对照，测定测定管的吸光度(A测定1)。
②酶标仪检测：立即以酶标仪测定，其余同分光光度计检测操作。
计算：
C4H活性单位的定义：在该实验条件下，每1h吸光度变化0.01所需酶量为一个活性单位。
组织样本C4H(U)={(A测定1-A测定0)×V T}/(W×V S×0.01×t)
式中：A测定1=孵育1h后测定管的吸光度值
A测定0=加入C4H Lysis buffer后立即测定的测定管吸光度值
W=组织样本的重量(g)
V T=提取酶液的总体积(ml)
V S=测定时所用酶液体积(ml)
液体样本C4H(U)=(A测定1-A测定0)/(0.01×t)
式中：A测定1=孵育1h后测定管的吸光度值
A测定0=加入C4H Lysis buffer后立即测定的测定管吸光度值
t=反应时间
注意事项：
1、待测样品中不能含有酶抑制剂，同时需避免反复冻融。
2、获得上清液为C4H酶液，应尽快检测，亦可保存。
3、加入C4H终止液终止反应后，最好采用C4H碱性基液调节pH，以便检测更为准确。
4、C4H碱性基液具有一定腐蚀性，请小心操作。
5、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定。
但本试剂盒不推荐用酶标仪进
行检测，如需酶标仪检测，每次检测指标不宜过多，否则操作时间不一，有可能导致样本间的差异。
6、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
相关：
编号名称
CC0007磷酸缓冲盐溶液(10×PBS,无钙镁)
CM0004LB培养基
DC0032Masson三色染色液
DF0135多聚甲醛溶液(4%PFA)
NR0001DEPC处理水(0.1%)
PS0013RIPA裂解液(强)
TC1167尿素(Urea)检测试剂盒(脲酶波氏比色法)。