人L选择素L-Selectin酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
HIV实验室ELISA检测方法
人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）1 试剂信息试剂厂家：北京万泰生物药业股份有限公司2 样本要求2.1 本试剂使用样品为人血清或血浆，含有EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验。
2.2 不能检测含悬浮纤维蛋白或聚集物，重度溶血的样品。
2.3 样品中应无微生物，可在2-8℃储存1周，长期储存应低温冻存，避免反复冻融。
2.4 使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。
3 检测步骤3.1 配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。
3.2 编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照1型、2型各1孔、空白对照1孔。
3.3 加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100μL。
3.4 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。
3.5 洗板：小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干。
3.6 加酶：每孔加入酶标试剂100μL，空白孔除外。
3.7 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。
3.8 洗板：操作同步骤5。
3.9 显色：每孔加入显色剂A、B液各50μL，轻轻震荡混匀，37±1℃避光显色30±1分钟。
3.10 测定：每孔加入终止液50μL，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。
4 参考值临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照A均值+0.12.5 检验结果的解释5.1 阴性对照孔A值≦0.10，阳性对照A值≧0.80，否则试验无效。
5.2 若有1孔阴性对照A值大于0.1应舍弃，若两孔或两孔以上阴性对照A值大于0.1，应重复试验。
5.3 阴性判定：样品A值<临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阴性。
5.4 阳性判定：样品A值≧临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阳性。
（注意：初试阳性应重新取样双孔复试。
复试阳性者应按《全国艾滋病检测技术规范》送HIV确证实验室进行确证实验。
碧云天 Human IgE ELISA Kit 产品说明书
Human IgE ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PI479Human IgE ELISA Kit96次产品简介：碧云天的Human IgE ELISA Kit (Human IgE Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即人总免疫球蛋白E 酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测人血清、血浆中的IgE 的ELISA 试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。
多次重复检测结果表明，最小检出量为14.3ng/ml ，本试剂盒采用特异性抗体识别人IgE ，与IgG 、IgA 没有交叉反应性，板内、板间变异系数均小于10%。
免疫球蛋白E (IgE)只能在哺乳动物身上发现。
IgE 存在于血液中，是免疫系统抵御细菌和病毒等外来物质入侵的重要工具。
IgE 是一类具有δ链的亲同种细胞抗体，是参与过敏性鼻炎、过敏性哮喘和湿疹等发病机制调节的主要抗体。
IgE 是组胺和白三烯等肥大细胞释放抗炎剂水平的主要调剂者。
尽管只有少量IgE 在血液中，但它还负责触发严重过敏反应。
IgE 在I 型超敏反应中起作用，I 型超敏反应表现为各种过敏性疾病，如过敏性哮喘、大多数类型的鼻窦炎、过敏性鼻炎、食物过敏，以及某些类型的慢性荨麻疹和特应性皮炎。
此外，有足够证据证明IgE 还参与免疫系统对寄生虫入侵的反应，并增加与癌症发病有关的白血细胞数量。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法(Sandwich ELISA)检测样品中人IgE 的浓度，其原理见图1。
人IgE 特异的单克隆捕获抗体已预包被于酶标板上，当加入标准品或样品时，其中的人IgE 会与捕获抗体结合。
当加入辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体后，辣根过氧化物酶标记人IgE 抗体与人IgE 结合，形成夹心的免疫复合物。
最后加入显色剂TMB 溶液，固相捕获的辣根过氧化物酶就会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质，在加入终止液后呈黄色。
elisa试剂盒原理
elisa试剂盒原理ELISA试剂盒（Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay，又译作免疫夹配酶联免疫吸附测定法）是一种常用的生物化学技术，它能够快速、灵敏地检测固定量的抗原或抗体。
它的原理建立在具有特异性的抗原与抗体发生免疫反应的基础上，并且利用酶联免疫吸附测定法将其特异性特性发挥到极致。
ELISA试剂盒的原理实际上是利用一种可用来衡量两种特定分子结合情况的“酶联免疫反应”，即抗体可以特异性地结合抗原（如病毒、细菌、细胞、植物体等），然后会把这种特异性关联变成数量上的增加。
这种数量上的增加是金属蛋白酶（enzyme）所带来的。
当抗原被特异性抗体结合时，同时伴随着金属蛋白酶在抗原上的结合，而金属蛋白酶又被某些特定物（如丙二醛或氯仿等）所诱导，从而使抗原上的特异性结合物产生数量上的增加。
ELISA试剂盒的工作原理以上就是ELISA试剂盒的基本原理，它主要利用酶联免疫吸附测定的特异性原理，将特定的抗原或抗体酶联到具有特异性的样品上，最后检测数量上的增加。
ELISA技术具有高灵敏度、简便快捷、操作可靠等优点，被广泛应用于疾病诊断、抗原定性与定量检测、免疫活性评价以及生物体病原学研究等诸多领域。
ELISA试剂盒的工作原理主要包括抗原与抗体的结合、酶的结合与产物的检测等环节。
首先呈现的是抗原及抗体的结合，抗原及抗体在液体相中可以特异性地结合；其后的酶的结合是将抗原及抗体结合后，利用具有特异性的金属蛋白酶，将酶与抗原结合，从而使得结合物数量上有所增加；最后一步是检测，也就是检测酶结合物产生的数量上的增加，从而获取结果。
ELISA试剂盒的优势如下：1、ELISA试剂盒测定结果灵敏，且能够进行大规模检测；2、较快，能将一个检测过程缩短到几个小时；3、机器操作简单，操作步骤以及参数设置较为容易；4、一次可进行大量检测，可降低成本；5、器具配置简单，耗材容易获得，操作较为方便；6、安全性较高，可大幅减少辐射风险；7、节省时间和成本，跨学科的分析。
人L选择素(L-SelectinCD62L)ELISA Kit - 生物在线 - 让科 …
人L选择素(L-Selectin/CD62L)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用产品编号：E0086h预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中L选择素(L-Selectin/CD62L)含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗L-Selectin/CD62L抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗L-Selectin/CD62L抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的L-Selectin/CD62L呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为2,000 ng/ml，将其稀释为400 ng/ml后，再做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)，分别稀释400 ng/ml，200 ng/ml，100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制200 ng/ml标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）400 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml 样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6.检测溶液A：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种常用的免疫学实验技术，用于检测体内特定抗原或抗体的存在和浓度。
ELISA检测试剂盒是用于进行ELISA实验的组合套装，包括抗体或抗原、酶标记物、底物、缓冲液等。
本文将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，以帮助用户顺利进行ELISA实验。
1.准备实验材料：-ELISA检测试剂盒：根据实验需要选择适当的ELISA检测试剂盒，确保其在储存和运输过程中无损坏。
-样本：准备需要检测的样本，如血清、尿液、组织提取物等。
确保样本的质量和浓度满足实验要求。
-微孔板：根据试剂盒的要求选择合适的微孔板，同时注意其质量有无污染。
-基本实验设备：如计量器、洗板机、显微镜等。
2.实验步骤：-取出储存在4℃的试剂，确保其达到室温（一般为20-25℃），再根据实验步骤进行下一步操作。
-预处理样本：根据试剂盒的说明书，进行样本的预处理，包括稀释、纯化、稳定化等步骤。
-加样：将样本按照试剂盒要求的体积加入微孔板中，通常每个孔需要加入100-200μL的样品。
-洗板：使用洗板机或手工操作，将孔中的杂质洗净。
洗板时应注意洗涤缓冲液的使用浓度和洗涤次数。
-加入特异性抗体：根据试剂盒的说明书，将稀释好的特异性抗体加入各孔中，确保操作的准确性和每孔的稀释倍数。
-洗板：重复第4步的操作，将未结合的抗体洗净。
-加入酶标记物：根据试剂盒的说明书，将稀释好的酶标记物加入各孔中，确保加入的量准确无误。
-洗板：重复第4步的操作，将未结合的酶标记物洗净。
-加入底物：将稀释好的底物加入各孔中，使其与酶标记物反应，生成可视化的颜色。
-终止反应：根据试剂盒的要求，在一定的反应时间后，加入终止剂停止反应。
终止剂的选择需符合试剂盒的要求。
-检测结果：使用酶标仪或目视观察检测孔中的颜色变化，通过测量吸光度或颜色强度来确定样本中目标物的浓度。
3.数据分析：-计算样本的结果：根据试剂盒的说明书，根据吸光度或颜色强度测量结果，计算样本中目标物的浓度。
人促红细胞生成素(EPO)-酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
仅供科研使用，不得用于临床检验。
人促红细胞生成素（EPO ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称：人促红细胞生成素（EPO ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）英文名称：Human Erythropoietin（EPO ）ELISA KIT【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。
在预包被抗人促红细胞生成素（EPO ）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人促红细胞生成素（EPO ）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗人促红细胞生成素（EPO ）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度正相关。
拟合校准品曲线，可以计算出样本中人促红细胞生成素（EPO ）的浓度。
【主要组成成分】主要成分校准品检测范围：47-3000pg/ml。
校准品已经通过测试，结果表明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。
2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
Elabscience 人抑制素B(INHB)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
2022年修订第一版（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断!）产品货号：E-EL-H0313c产品规格：96T/48T/24T/96T*5Elabscience 人抑制素B(INHB)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Human INHB(Inhibin B) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话技术部电话************电子邮箱（销售）********************电子邮箱（技术）**************************网址：具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。
Copyright ©2021-2022 Elabscience Biotechnology Co.,Ltd. All Rights Reserved目录用途 (3)基本性能 (3)检测原理 (3)试剂盒组成及保存 (4)试验所需自备物品 (5)样品收集方法 (5)注意事项 (6)■ 试剂盒注意事项 (6)■ 样品注意事项 (6)样本稀释方案 (6)检测前准备工作 (7)操作步骤 (8)结果判断 (10)技术资源 (10)典型数据 (10)性能 (11)■ 精密度 (11)■ 回收率 (11)■ 线性 (11)声明 (12)Intended use (13)Character (13)Test principle (13)Kit components & Storage (14)Other supplies required (15)Sample collection (15)Note (16)■ Note for kit (16)■ Note for sample (16)Dilution Method (17)Reagent preparation (17)Assay procedure (18)Calculation of results (20)Technical resources (20)Typical data (20)Performance (21)■ Precision (21)■ Recovery (21)■ Linearity (21)Declaration (22)用途该试剂盒用于体外定量检测人 血清、血浆或其他相关生物液体中INHB浓度。
ELISA试剂及溶液配制及实验步骤
ELISA试剂及溶液配制及实验步骤ELISA（酶联免疫吸附实验）是一种广泛应用于生物化学和生物医学研究领域的分析技术。
它通过酶标记的抗体与目标物结合，并利用酶的催化作用来测量目标物的含量。
下面将介绍ELISA实验所需的试剂及溶液配制以及实验步骤。
一、试剂及溶液配制1.涂板液：将PBS溶液（1X，pH7.4）加入10%胎牛血清（FBS）中，最终浓度为1%。
用该液体涂覆96孔酶标板，在4℃下静置过夜。
涂板液的制备可以在使用前一天进行。
2.阻断缓冲液：根据实验需求选择合适的阻断缓冲液，常用的有3%BSA（牛血清蛋白）或者5%乳清。
3.洗涤缓冲液：配制PBS-T缓冲液（PBS中加入0.1%的Tween-20）。
4.标准曲线样品：按照实验需要选择合适的标准品，并按照厂家提供的方法配制标准曲线样品浓度序列。
5.样品：收集待测物样品，如血清、尿液、细胞上清等。
将样品离心去除杂质，获得清洁的上清液。
6.酶标记的一抗：选择特异性强、纯度高的一抗，如兔抗体、小鼠抗体等。
根据实验目的和待测物的性质选择合适的抗体。
7.酶标记的二抗：选择与一抗宿主不同的宿主动物制备的酶标记二抗。
根据一抗的种类和宿主动物选择相应的二抗。
8.辣根过氧化物酶标记物质（HRP）：将HRP与一抗或者二抗结合，用于检测目标物的存在。
二、ELISA实验步骤1.将涂板液倒出，用PBS-T洗板3次，每次将洗液孔内保持在饱和状态，吸尽孔内液体。
2.加入阻断缓冲液100μL/孔，孵育1小时，此过程是为了避免非特异性结合。
3.吸尽阻断缓冲液，加入稀释好的标准品和样品，每孔100μL，通常每个样品需要取3个重复孔。
同时，加入相同体积的PBS作为空白对照。
4.孵育2小时，室温孵育条件可在37℃下进行。
5.吸尽样品/标准品，用洗涤缓冲液洗板3次，每次将洗液孔内保持在饱和状态，吸尽孔内液体。
ELISA试剂用洗涤缓冲液洗涤是为了去除非特异性结合物质。
6.向每个孔中加入适量的酶标记的一抗，孵育1小时。
ELISA检测试剂盒使用指南
ELISA检测试剂盒使用指南ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的免疫学实验方法，用于检测病原体、抗体或其他分子的存在和浓度。
它具有高灵敏度、高特异性、易操作和较低成本的优势，被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和免疫学领域。
本篇文章将介绍ELISA检测试剂盒的使用指南，包括实验准备、试剂的使用步骤和结果解读。
一、实验准备1.阅读检测项目的说明书：在使用试剂盒前，仔细阅读说明书，了解试剂的使用方法、灵敏度和特异性等关键信息。
2.样本准备：根据实验要求，准备样本。
如果需要检测血清中的抗体水平，可以采集血液样本，离心分离血清；如果需要检测细胞培养上清中的分子，将上清收集，并使其清晰，避免细胞或杂质的污染。
3.样本预处理：根据实验需求，对样本进行必要的预处理。
例如，可以通过加热、稀释、酶解等方式来处理样本，以改变样本组分和浓度。
4.准备品质控制样品：制备阳性和阴性控制样品，用于评估试剂盒和实验操作的稳定性和准确性。
5.实验器材准备：准备所需实验器材，如酶标板、移液器、微孔板洗涤仪等。
确保器材的干净和完整，并按照说明书要求对其进行预处理。
二、试剂使用步骤1.试剂准备：根据说明书要求，将试剂从冰箱中取出，并在室温下放置一段时间使其恢复到室温。
确保试剂瓶盖紧闭，并避免暴露在直接阳光下。
2.实验操作：按照说明书的要求，将试剂加入到酶标板中，并根据实验设计进行标准曲线的设置。
标准曲线用于测量未知样品的数量，并计算出浓度。
3.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行孵育。
孵育温度和时间应根据实验要求进行调整。
4.洗涤：使用洗涤缓冲液对酶标板上的不特异性结合物进行洗涤。
洗涤过程应准确控制洗涤孔板次数和洗涤液的体积。
5.补液：在洗涤完成后，加入辣根过氧化物酶标况稀释液，促进酶标物与特异性结合物的反应。
6.孵育：根据试剂盒的要求，将酶标板放入孵育箱中进行二次孵育。
7.反应停止：根据试剂盒的要求，加入相应的停止液，停止酶反应。
ELISA试剂盒操作方法
ELISA试剂盒操作方法ELISA（酶联免疫吸附法）是一种常用的实验技术，用于检测目标物（如蛋白质、抗原或抗体）的存在和浓度。
ELISA试剂盒是ELISA实验的核心，包括特定的试剂和材料，用于执行特定的步骤和操作。
以下是一般ELISA试剂盒的操作方法，包含以下步骤：1.准备实验样品：收集所需分析物的样品（例如血清、细胞上清液或组织提取液等），并适当保存或稀释以便后续操作。
2.预处理步骤：根据实验的目的和试剂盒的要求，进行样品的预处理。
这可能包括去除干扰物质、离心、稀释或加热等处理步骤。
3.涂覆酶联免疫板：打开试剂盒中提供的酶联免疫板，将其放置在工作台上。
将涂覆物质（如抗体或抗原）加入到每个酶联免疫孔中，通常使用多通道移液器或微量移液器进行操作。
涂覆后，尽量避免泡沫和交叉污染。
4.触发剂孵育：将涂覆后的酶联免疫板放入孵育箱或板上孵育器中，在适当的温度下孵育一段时间。
此步骤的目的是固定涂覆物质，并优化其活性。
5.洗涤：将试剂盒中提供的缓冲液加入酶联免疫孔中，并倾斜孔盘轻轻敲打或使用洗板仪进行洗涤，以去除未结合的物质和杂质。
通常，洗涤液需要多次更换，充分洗涤以获得更好的准确性和灵敏度。
6. 过量引物（Block）：加入试剂盒提供的阻断缓冲液至孔中，目的是防止非特异性结合的发生。
阻断时间可以根据试剂盒的要求进行调整。
7.加入样品和控制物质：将处理好的样品和控制物质，如阳性对照和阴性对照，加入到各个酶联免疫孔中。
注意要根据试剂盒的要求进行适当的稀释。
8.孵育和洗涤：将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中，按照试剂盒的要求进行孵育。
完成孵育后，继续进行洗涤步骤，以去除未结合的物质。
9.检测剂加入：将检测试剂（通常是特异性抗体或酶标记物质）加入酶联免疫孔中。
如有需要，可以进一步稀释试剂以适应实验要求。
10.再次孵育和洗涤：将孔盘放回孵育箱或板上孵育器中，对要求进行的步骤进行孵育。
完成孵育后，进行洗涤步骤以去除未结合的物质。
ELISA操作规程
ELISA操作规程标题：ELISA操作规程引言概述：ELISA（酶联免疫吸附试验）是一种常用的生物化学分析技术，广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物研发等领域。
本文将详细介绍ELISA的操作规程，包括实验前准备、试剂配制、板涂覆、标准曲线绘制、样品检测等五个部分。
一、实验前准备：1.1 清洗实验用具：使用去离子水和洗涤剂彻底清洗酶标仪、试剂瓶、试管、多孔板等实验用具，确保无任何污染物残留。
1.2 检查试剂有效期：查看试剂瓶上的标签，确保试剂的有效期未过期，避免实验结果的误差。
1.3 准备实验台：清洁实验台面，并准备好所需的实验用品，如移液器、离心机、显微镜等。
二、试剂配制：2.1 样品稀释液的配制：根据实验需要，选择适当的稀释液，如PBS（磷酸盐缓冲液）或BSA（牛血清白蛋白）溶液，并按照比例将其与样品混合。
2.2 酶标板涂层液的配制：将涂层抗体或抗原稀释至适当浓度，并将其均匀涂布在酶标板上，以便捕获待测物。
2.3 酶标记液的配制：将酶标记的抗体与酶底物反应，形成酶标记复合物，用于检测酶标板上的待测物。
三、板涂覆：3.1 预处理酶标板：将酶标板孔位用PBS或BSA溶液预处理，以避免非特异性吸附。
3.2 加入涂层液：将配制好的涂层液加入到酶标板孔位中，保持孔位内液体的均匀分布，避免气泡的产生。
3.3 孵育酶标板：将涂层的酶标板在适当的温度和时间下进行孵育，以促使待测物与涂层抗体或抗原发生特异性结合。
四、标准曲线绘制：4.1 准备标准品：选择适当的标准品，按照不同浓度进行稀释，以建立标准曲线。
4.2 加入标准品：将不同浓度的标准品加入到酶标板孔位中，每个浓度设置多个重复孔位，以获得可靠的结果。
4.3 检测与测定：使用酶标仪测定各个孔位的吸光度值，并根据标准品的吸光度值绘制标准曲线，以后续样品的检测提供参考。
五、样品检测：5.1 样品处理：将待测样品与稀释液混合，并按照操作规程将混合液加入到酶标板孔位中。
elisa试剂盒原理
elisa试剂盒原理ELISA（又称酶连结免疫吸附试验）是一种常用的免疫分析研究手段，是一种用于检测特定抗原或抗体的生化分析方法，由分子生物学家Edward Kabat在1970年提出，通过酶连结表面抗原（ELISA）来检测抗原特异性抗体，可以在几小时内检测得到大量特异性抗体，目前ELISA试剂盒在生物化学、分子生物学、药物研究、免疫学以及肿瘤等学术研究中以及临床上发挥着重要的作用。
ELISA仪器可以检测出抗原特异性抗体，有两种形式，沉淀式和双抗原ELISA。
沉淀式ELISA试剂盒利用抗原结合试剂盒中的特异性抗体，将抗原特异性抗体沉积在反应物磁珠或磁芯上，这种方法通常用于特定的病毒检测。
双抗原ELISA试剂盒中，两种特异性抗体分别结合在抗原特异位点上，由于它们之间的特异性结合，使抗原结合试剂盒的两种特异性抗体的吸附形成一个特异性抗体复合物，这种方法通常用于细胞因子的检测。
ELISA试剂盒的原理是，当被检测物质被抗体识别时，抗体可通过两种方式与目标物质结合，一是特异性结合，二是特异性抗体-受体结合（一种特殊的蛋白质-蛋白质相互作用）。
当特异性结合或抗体-受体结合发生时，抗体与特定抗原的结合会形成一个复合物，这个复合物可与另一种特定的抗体结合能力非常弱，把特定抗原与第二种特异性抗体结合在一起形成一个抗原复合物，从而形成一个复合体。
ELISA试剂盒有两种，一种是发光ELISA（FELISA），另一种是酶标ELISA（ELISA），原理是将一种特定抗体和一个特定抗原结合后，形成一个抗原-抗体复合物，再加上酶，并利用酶的活性将反应物矿化，产生定量的发光信号，来检测与抗原结合的抗体的数量。
酶标ELISA依赖于特定的色素，将抗原及抗原特异性抗体复合物标记在特定的位置，然后加入能够将特定的色素变色的酶，最终可以根据变色程度来判别待检样本是否携带抗原。
ELISA试剂盒有三个主要部分，即抗原、特异性抗体和酶，各种ELISA试剂盒可以检测出不同的抗体和抗原，比如病毒抗原特异性抗体、细胞因子以及艾滋病抗原等抗体，ELISA试剂盒在检测用途、研究和临床诊断上都有不错的效果。
211246920_巨噬细胞极化在腹主动脉瘤形成中的研究进展
巨噬细胞极化在腹主动脉瘤形成中的研究进展①吴亦昊张昊涂思梅殷宇涵韩彦槊（大连理工大学生命科学与药学学院，盘锦 124221）中图分类号R543.1+6 文献标志码 A 文章编号1000-484X（2023）05-1065-08［摘要］慢性炎症反应是腹主动脉瘤（AAA）形成和破裂的核心环节。
有研究证明，循环单核细胞源性巨噬细胞的极化状态可通过多种途径调控AAA的发生发展。
浸润后的巨噬细胞受不同刺激极化为以M1型和M2型巨噬细胞为主的各类极化表型，既能通过释放细胞因子作用于其他免疫细胞调控炎症反应，也能通过细胞间通讯影响细胞外基质（ECM）的重塑过程。
本文就巨噬细胞极化在AAA发生发展中的研究进展进行综述，旨在揭示巨噬细胞极化影响AAA的机制，以期通过作用于巨噬细胞极化的靶点治疗AAA。
［关键词］腹主动脉瘤；巨噬细胞；极化；细胞通讯；靶点Research progress of macrophage polarization in formation of abdominal aortic aneurysmWU Yihao，ZHANG Hao，TU Simei，YIN Yuhan，HAN Yanshuo. School of Life and Pharmaceutical Sciences，Dalian University of Technology， Panjin 124221， China［Abstract］Chronic inflammatory response is the key link in formation and rupture of abdominal aortic aneurysm （AAA）. Studies have proved that the polarization types of circulating monocyte-derived macrophages can regulate the occurrence and development of AAA through a variety of ways. Infiltrated macrophages are polarized by different stimuli into various types of polarization phenotypes，mainly M1 and M2 macrophages， which can not only regulate inflammatory response by releasing cytokines on other immune cells， but also through intercellular communication affects the remodeling process of extracellular matrix （ECM）. This review summarizes the research progress of macrophage polarization in occurrence and development of AAA， aiming to reveal the mechanism of macrophage polarization affecting AAA， in order to treat AAA by acting on targets of macrophage polarization.［Key words］Abdominal aortic aneurysm；Macrophages；Polarization；Cell communication；Target腹主动脉瘤（abdominal aortic aneurysm，AAA）是由多种因素引起的具有潜在破裂风险的主动脉局部病理扩张性疾病。
ELISA实验步骤及所需试剂耗材
转载自拓诚生物 2011年03月06日09:37ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。
它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。
此项技术自70年代初问世以来，发展十分迅速，目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。
(一)原理ELISA是以免疫学反应为基础，将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。
由于抗原、抗体的反应在一种固相载体──聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行，每加入一种试剂孵育后，可通过洗涤除去多余的游离反应物，从而保证试验结果的特异性与稳定性。
在实际应用中，通过不同的设计，具体的方法步骤可有多种。
即:用于检测抗体的间接法(图a)、用于检测抗原的双抗体夹心法(图b)以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。
比较常用的是ELISA双抗体夹心法及ELISA间接法。
(二)操作步骤方法一用于检测未知抗原的双抗体夹心法:1.包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg／ml。
在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。
次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。
(简称洗涤，下同)。
2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。
然后洗涤。
(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。
37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分钟。
5.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。
CD62L)ELISA试剂盒简介说明
人L选择素（L—Selectin/CD62L）ELISA试剂盒简介说明试验原理：本试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）.已知待测物质浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将待测物质和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中指标的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制：试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板（96T）半块（48T）塑料膜板盖1块半块标准品1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）空白对比1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）标准品稀释缓冲液1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）生物素标记抗体1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）亲和链酶素HRP 1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）停止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）自备料子：1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
人L选择素（LSelectin/CD62L）ELISA试剂盒样品收集、处置及保管方法：1、血清操作过程中躲避任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2、血浆EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。
1000×g离心30分钟去除颗粒。
3、细胞上清液1000×g离心10分钟除颗粒和聚合物。
4、组织匀浆将组织加入适量生理盐水捣碎。
1000×g离心10分钟，取上清液5、保管假如样品不立刻使用，应将其分成小部分70 ℃保管，躲避反复冷冻。
尽可能的不要使用溶血或高血脂血。
ELISA实验步骤及所需试剂耗材
ELISA实验步骤及所需试剂耗材第一步：涂布抗原1.96孔酶联免疫板（ELISA板）2.定性或定量的抗原或抗体溶液将所需的抗原溶液均匀涂布在ELISA板的孔中，通常使用100μL的抗原溶液加入每个孔，并在4℃下孵育过夜。
第二步：阻断1.阻断缓冲液（例如，3%牛血清蛋白）使用200μL的阻断缓冲液加入到每个孔中，并在室温下孵育2小时，以阻止非特异性结合。
第三步：添加抗体1.目标抗原特异性抗体2.酶标记的二抗（例如，HRP-抗鼠抗体，HRP-抗人抗体）分别添加100μL的抗体溶液和酶标记的二抗溶液到每个孔中，并在室温下孵育2小时，使抗体与抗原结合。
第四步：洗涤1.洗涤缓冲液（例如，PBS-T）使用洗涤缓冲液洗涤ELISA板的孔，将洗涤缓冲液加入孔中，静置2分钟，然后丢弃液体。
重复此步骤3次，以确保除去非特异性结合的物质。
第五步：酶底物添加1.酶底物（例如，TMB底物）添加100μL的酶底物到每个孔中，使其与酶标记的二抗反应，产生可检测的颜色反应。
第六步：反应终止1.停止溶液（例如，2M的硫酸）加入50μL的停止溶液到每个孔中，终止酶活性，使产生的颜色反应停止。
第七步：测定1.ELISA板读取仪使用ELISA板读取仪测量每个孔的吸光度，通常在450nm波长下测量，以确定抗原或抗体的浓度。
除了上述试剂和耗材外，还有一些其他重要的试剂和耗材也是需要的，例如：1.样品或标准物质：用于建立浓度标准曲线和样品浓度测量。
2.缓冲液：用于制备反应液和洗涤缓冲液。
3.小型离心机：用于混合和离心试管或孔板。
4.显微镜和玻片：用于观察ELISA结果和图像记录。
5.吸管和移液器：用于取样和溶液转移。
6.温度控制设备：用于控制实验过程中的温度。
L-选择素及其配体足萼糖蛋白在结肠癌发生、发展中的 表达和意义
·短篇论著·L⁃选择素及其配体足萼糖蛋白在结肠癌发生、发展中的表达和意义刘 斌1 陈杏林1 王哲民1 陈柳勇1 蒋云飞1 李善高2*杭州市临安区第一人民医院消化内科1（311300） 浙江中医药大学附属第一医院消化内科2背景：结肠癌的早期诊治能有效改善患者的预后，简单有效且敏感的筛查指标对及早识别早期癌症及其癌前病变具有重要意义。
L⁃选择素是细胞黏附分子，足萼糖蛋白（PODXL）是其配体，两者在癌症的发生、发展中发挥关键作用。
目的：探讨L⁃选择素及其配体PODXL在结肠癌中的表达和意义。
方法：收集2020年11月—2022年11月杭州市临安区第一人民医院和浙江中医药大学附属第一医院的病理标本120例（增生性息肉、结肠腺瘤、结肠癌各40例），另取正常肠黏膜组织20例作为对照。
采用qRT⁃PCR和免疫组化法分别检测L⁃选择素、PODXL mRNA和蛋白表达。
采用蛋白质印迹法测定L⁃选择素和PODXL蛋白表达，并分析其与结肠癌临床病理参数的关系。
此外，收集60例结肠癌患者血清标本。
以ELISA法检测血清L⁃选择素和PODXL浓度。
结果：结肠腺瘤组L⁃选择素和PODXL mRNA和蛋白表达明显高于正常对照组、增生性息肉组（P<0.05），而结肠癌组又显著高于正常对照组、增生性息肉组和结肠腺瘤组（P<0.05）。
不同病理类型、淋巴结转移、Dukes分期的结肠癌患者中L⁃选择素和PODXL 蛋白表达相比差异有统计学意义（P<0.05）。
结肠癌组织中L⁃选择素表达与PODXL表达具有显著正相关性（r=0.855，P<0.001）。
初发组血清L⁃选择素和PODXL浓度显著低于复发组，未转移组亦显著低于转移组（P<0.05）。
术后3个月血清L⁃选择素和PODXL浓度显著低于术后3 d和术前（P<0.05）。
结论：L⁃选择素和PODXL可能参与了结肠癌发生、发展的病理过程，属于致癌蛋白，可为结肠癌的预防和早期诊治提供参考价值，通过早期筛查病变可在一定程度上改善结肠癌患者的预后。
人白细胞介素35(IL-35)ELISA试剂盒说明书
人白细胞介素-35（IL-35）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书厦门慧嘉生物科技有限公司本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中白细胞介素35（IL-35）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素35（IL-35）水平。
用纯化的人白细胞介素35抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素35，再与HRP标记的IL-35抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-35呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人白细胞介素35（IL-35）浓度。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
乳腺癌前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin水平与前哨淋巴结转移的关系及意义
乳腺癌前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin水平与前哨淋巴结转移的关系及意义马友龙;张敏【期刊名称】《临床误诊误治》【年(卷),期】2023(36)1【摘要】目的探讨乳腺癌前哨淋巴结中八聚体结合转录因子-4(Oct-4)、血管内皮生长因子-D(VEGF-D)、L-选择素(L-selectin)水平与前哨淋巴结转移(SLNM)的关系及意义。
方法选取2020年4月—2022年7月收治的147例乳腺癌,根据SLNM情况分为SLNM组67例、无SLNM组80例,比较2组及不同T分期、区域淋巴结分期患者前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin水平,采用多因素Logistic回归分析寻找乳腺癌SLNM的危险因素,采用决策曲线分析(DCA)和临床影响曲线(CIC)分析前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin评估SLNM的临床效用和与实际情况的符合度。
结果SLNM组前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin水平高于无SLNM组(P<0.01)。
随着T分期和区域淋巴结分期升高,前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin水平逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05)。
前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin均是乳腺癌患者SLNM的独立危险因素(P<0.01);绘制DCA曲线显示,前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin评估乳腺癌患者SLNM均有正向的净获益,临床效用排序:Oct-4、L-selectin、VEGF-D,三者联合较单独指标评估的临床获益度均明显升高;绘制CIC显示,阈概率值>0.6时,三者联合评估SLNM与实际情况具有较高的符合率。
结论乳腺癌前哨淋巴结中Oct-4、VEGF-D、L-selectin水平与SLNM及肿瘤分期有关,是患者发生SLNM的一个潜在机制,三者联合评估SLNM具有良好的临床获益度,可作为评估乳腺癌患者SLNM的可靠方法。
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仅供科研使用，不得用于临床检验。
人L选择素（L-Selectin）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）说明书
黄石市艾恩斯生物科技有限公司
【产品名称】
通用名称：人L选择素（L-Selectin）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）
英文名称：Human L-Selectin（L-Selectin）ELISA KIT
【包装规格】
48人份/盒，96人份/盒
【预期用途】
仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人L选择素（L-Selectin）的浓度。
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。
在预包被抗人L选择素（L-Selectin）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人L选择素（L-Selectin）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗人L选择素（L-Selectin）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人L选择素（L-Selectin）的浓度正相关。
拟合校准品曲线，可以计算出样本中人L选择素（L-Selectin）的浓度。
【主要组成成分】
主要成分
校准品检测范围：0.625-40ng/ml。
校准品已经通过测试，结果表明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材
1、酶标仪
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml量筒
7、无粉一次性乳胶手套
【储存条件及有效期】
1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。
2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
3、开封后，按照建议的条件保存，校准品、包被微孔板和HRP标记抗体，有效期为14天，其他成分在标签标明的有效期内是稳定的。
【适用仪器】
半自动的酶标仪，如Thermo MK3，或者国产酶标仪。
【样本要求】
样本类型和采集
以下只是列出样品采集的一般指南。
所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。
1、细胞培养上清：4000rpm条件下离心20min，去除细胞颗粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
2、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，4000rpm条件下离心20min，小心地分离出血清，保存在- 20℃以下，避免反复冻融。
3、血浆：肝素，EDTA，或柠檬酸钠作为抗凝剂。
在4000rpm条件下，离心20分钟取上
清，血浆保存在-20℃以下，避免反复冻融。
样本在2-8℃条件下，可以储存72h，或者在- 20℃储存6个月。
样本收集后，不是一次检测完，请按一次用量分装冻存，避免反复冻融，使用时在室温下解冻，确保样品均匀充分解冻。
【检验方法】
1、使用前，所有的组分都要至少复温30min，确保充分复温到室温。
2、浓缩洗涤液：从冰箱取出的浓缩洗涤液，会有结晶产生，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解。
浓缩洗涤液与蒸馏水，按1:20稀释，即1份的浓缩洗涤液，添加19份的蒸馏水。
3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1体积充分混合，混合后15分钟内使用。
1、所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
2、按前面试剂准备中描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
3、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
4、设置标准品孔、样本孔和空白孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL，样本孔加待测样本50μL，空白孔不加。
5、除空白孔外，标准品孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL。
6、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
7、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置20s，甩去洗涤液，吸水纸上拍干。
8、如此重复4次（共洗板5次）。
若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高检测的精度。
洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。
9、将底物A和B按1:1体积充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。
用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱温育15min。
10、所有孔加入终止液50μL，在酶标仪上读取各孔吸光度（OD值）。
【检验结果的解释】
检测完成后，以标准品浓度做为纵坐标，对应的吸光度（OD值）作为横坐标，利用计算机软件，采用四参数Logistic曲线拟合（4-pl），创建标准曲线方程，通过样本的吸光度（OD 值），利用方程计算样品的浓度值。
如果样品被稀释，通过上述方法测的的浓度值，要乘以稀释倍数，才是样品的最终浓度。
【检验方法的局限性】
1、仅供科研使用，不得用于临床诊断。
2、在试剂盒标示的有效期内使用，过期产品不得使用。
3、跟其他厂家的试剂盒或者组分不能混用。
4、使用试剂盒配套的样品稀释液。
5、如果样本值高于最高标准品浓度值，请将样本适当稀释后，再重新测定。
6、待测样本中存在的人抗鼠等异嗜抗体会干扰检测结果，检测前，请排除该因素。
7、通过其他方法得到的检测结果，与本试剂盒测定结果不具有直接的可比性。
【产品性能指标】
1、物理性能
试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。
微孔板铝箔袋应真空包装，无破损漏气。
2、剂量反应曲线线性
校准品剂量反应曲线相关系数r值，大于等于0.9900。
3、精密度
批内精密度：三组已知的高、中、低浓度样品，进行二十次在同一个板块内精度评估。
批内变异系数CV%小于10%。
批间精密度：三组已知的高、中、低浓度样品，进行二十次在不同板块内精度评估。
批间变异系数CV%小于15%。
4、灵敏度
最低检出剂量小于。
5、回收率
三组已知的高、中、低浓度样品，进行五次回收率评估，回收率在85%-115%之间。
6、特异性
本试剂盒识别天然和重组人L选择素（L-Selectin），与结构类似物无交叉。
7、稳定性
2℃-8℃保存，有效期6个月。
【注意事项】
生物安全
1、检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。
2、试剂盒的液体组分中，含有proclin-300防腐剂，可能引起皮肤过敏反应，避免吸入烟雾与皮肤接触。
3、底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入烟雾。
戴上防护手套，实验完成后彻底洗手。
技术提示
1、混合蛋白溶液时，避免起泡。
2、加校准品与样本时，每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头，公共组分应该悬臂加样，避免交叉污染。
3、合适的温育时间，和充分的洗涤步骤，是保证实验结果准确性的必要条件。
4、底物溶液为无色液体，保存过程中变为蓝色，代表底物溶液已经失效，不得使用。
5、终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致，加入终止液后，蓝色底物产物，会瞬间变为黄色。
6、实验中，用剩的板条，应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
7、所有液体组分，使用前充分摇匀，严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。
废物处理
所有使用或未使用的试剂，所有污染性的一次性材料，应当遵循传染性或潜在传染性产品的处理程序，每个实验室都有责任根据其实验的类型和危险性级别，进行废物和污物的处理，同时要严格依照有关规定对待所有的废物和污物。