酶联免疫试剂盒
人降钙素基因相关肽(CGRP)酶联免疫分析试剂盒 说明书
人降钙素基因相关肽（CGRP）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：1.56pg/ml-100pg/ml最低检测限：0.39pg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人CGRP，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中CGRP 含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗CGRP抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗CGRP抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的CGRP呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板（Assay plate）：一块（96孔）。
2.标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3.样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液（HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）7.辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）8.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
酶联免疫检测试剂盒的原理和应用(广州培训)
袋重新密封；标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露 在光线下。 9、试剂变质的迹象显色液若有任何颜色表明变质，应当弃之。0标准的 吸光度值小于个单位（OD450nm<0.5 ）时，表示试剂可能变质。
二、磺胺类药物等 ELISA检测方法 的介绍与注意事项
1、磺胺类药物ELISA试剂盒 2、氟喹诺酮类药物ELISA试剂盒 3、莱克多巴胺ELISA试剂盒 4、克仑特罗ELISA试剂盒 5、样本前处理与酶标分析注意事项
残留限量要求
磺胺类药物：在肌肉、肝脏样品中总量最高残留限量为100 g/kg 恩诺沙星、环丙沙星：在肌肉样品中最高残留限量为100 g/kg 莱克多巴胺：在猪肉样品中为不得检出。 克仑特罗：在猪肉样品中中为不得检出。
------农业部第235号文件
1、磺胺类药物试剂盒
试剂盒种类：磺胺三合一（SM2,SDM,SM1）、磺胺七合一(SMZ,SDZ,SMM,ST等)、 磺胺喹恶啉
的洗板顺序操作是ELISA测定程序中的要点。在洗板过程中如果出现板孔干燥 的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板排干后应立即 进行下一步操作。
5、注意事项
6、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。 7、不要使用过了有效日期的试剂盒，稀释或搀杂使用会引起灵敏度、
OD值的变化。不要交换使用不同批号的盒中试剂。 8、储存条件保存试剂盒于2-8℃，不要冷冻；将不用的微孔板放进自封
酶联免疫试剂盒elisa原理
酶联免疫试剂盒elisa原理
酶联免疫试剂盒（ELISA）是一种常用的生物化学检测方法，通常用于检测血清中某种特定的蛋白质或分子。
其原理如下：
1. 血清处理：血清样品需要进行预处理，例如稀释、蛋白质纯化等步骤。
2. 固定抗体：在试验板的孔中涂上特异性的抗原抗体，它们能够特异性地结合要检测的蛋白质。
3. 样品加入：将处理后的血清样品加入到试验孔中，样品中的目标蛋白质会与固定在孔中的抗体结合。
4. 清洗：将孔中的样品去除，并进行多次洗涤，以去除非特异性结合的成分。
5. 探针抗体加入：加入与目标蛋白质结合并标记有酶的探针抗体，这些抗体会特异性地结合在目标蛋白质上。
6. 再次清洗：将无法结合的探针抗体去除，并进行多次洗涤。
7. 反应溶液加入：加入适当的底物（如染色剂），使酶与底物发生反应，产生可视的信号（如颜色变化）。
8. 信号检测：通过光密度仪或其他相关仪器测量底物的反应产物的吸光度，将其转换为相对的蛋白质含量，从而得出目标蛋白质的相对浓度。
ELISA试剂盒原理的关键步骤是固相法，即将抗原或抗体固定在试验孔表面，从而使其能够与待检测物质特异性地结合。
通过结合酶标记的探针抗体和底物的反应，可以将待检测物质转换为可视的信号，并通过测量该信号的强度来确定目标物质的浓度。
酶联免疫试剂盒检测通则
酶联免疫试剂盒检测通则酶联免疫试剂盒（enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA）是一种常用的分析检测技术，广泛应用于生物医学领域。
本文将介绍酶联免疫试剂盒的基本原理、操作流程、质量控制和解释结果的方法。
一、酶联免疫试剂盒的基本原理酶联免疫试剂盒主要利用抗体与抗原之间的特异性识别和结合，通过酶标记物的检测实现对抗原或抗体的定量检测。
一般分为直接法、间接法、竞争法和间接荧光法等几种。
1.直接法：将酶标记的特异性抗体与待检测样品中的抗原结合，然后通过染色反应来测定酶标记物的含量。
直接法的优势是操作简单，但灵敏度较低。
2.间接法：在待测样品中加入抗原，待抗原与样品中特异性抗体结合后，再加入与该特异性抗体结合的酶标记的二抗。
该方法的优点是灵敏度高，但操作相对复杂。
3.竞争法：待测样品中的抗原与酶标记的抗原竞争与特异性抗体结合，通过酶标记物的含量来定量待测样品中的抗原。
该方法适用于抗原多样性较高的情况。
4.间接荧光法：将荧光标记的抗体与待检测样品中的抗原结合，形成荧光抗原-抗体复合物。
再通过荧光检测系统进行荧光信号的定量。
该方法具有高灵敏度和高特异性的优势。
二、酶联免疫试剂盒的操作流程酶联免疫试剂盒的操作流程一般包括预处理样品、样品孵育、酶标物孵育、洗涤、加色反应和停止反应等步骤。
具体流程如下：1.预处理样品：将待检测样品进行灭活、稀释或提取，以便获得合适的样品浓度。
2.样品孵育：将预处理后的样品加入酶标板的孔中，有效接触酶标板的吸附相，孵育一段时间，使待测物与酶标特异抗体结合。
3.酶标物孵育：将酶标物与样品中的待测物相互作用，特异性结合，并形成抗原-抗体-酶标物复合物。
4.洗涤：用洗涤缓冲液多次洗涤酶标板孔，去除未结合的物质，提高试剂盒的特异性和灵敏度。
5.加色反应：将底物溶液加入酶标板孔，与酶标物反应，形成可见的色素。
6.停止反应：通过加入停止溶液停止酶反应，防止颜色继续发展，并使酶标板中的颜色稳定。
酶联免疫分析试剂盒说明书
人chemerin酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关液体中chemerin含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中chemerin水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入chemerin抗原、生物素化的抗人chemerin抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的chemerin呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为20,000pg/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释10,000pg/ml，5,000pg/ml，2,500pg/ml，1,250pg/ml，625pg/ml，312.5pg/ml，156pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml，临用前15分钟内配制。
如配制10,000pg/ml标准品：取0.5ml20,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml/瓶。
4.检测稀释液A：1×10ml/瓶。
5.检测稀释液B：1×10ml/瓶。
6.检测溶液A：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。
小鼠白细胞介素10(IL-10) 酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
仅供科研使用，不得用于临床检验。
小鼠白细胞介素10（IL-10 ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）说明书黄石市艾恩斯生物科技有限公司【产品名称】通用名称：小鼠白细胞介素10（IL-10 ）酶联免疫试剂盒（ELISA试剂盒）英文名称：Mouse Interleukin 10（IL-10 ）ELISA KIT【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠白细胞介素10（IL-10 ）的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。
在预包被抗小鼠白细胞介素10（IL-10 ）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入小鼠白细胞介素10（IL-10 ）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗小鼠白细胞介素10（IL-10 ）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中小鼠白细胞介素10（IL-10 ）的浓度正相关。
拟合校准品曲线，可以计算出样本中小鼠白细胞介素10（IL-10 ）的浓度。
【主要组成成分】主要成分校准品检测范围：15.6-1000pg/ml。
校准品已经通过测试，结果表明HBs抗原阴性，HIV1、HIV2和HCV抗体阴性，由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质，本品必须按照具有潜在的感染性进行处理，处理过程应当遵循通用的安全措施。
需要但未提供的材料及耗材1、酶标仪2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml量筒7、无粉一次性乳胶手套【储存条件及有效期】1、2-8℃保存，切勿冷冻，有效期6个月。
2、开封使用后，包被微孔板放入带有干燥剂的自封袋中，密闭自封袋，并将全部试剂放回2-8℃冰箱。
检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
清洗去除非特异抗体。
抗人 IgM 的辣根过氧化物(HRP)结合物加入后在 37℃下孵育 1 小时。此步骤与之前形成的抗原抗 体复合物结合。
洗去未结合物。
加入 TMB 底物，底物由过氧化物酶水解，减少底 物的液体产生蓝色产物。
加入终止液，蓝色变为黄色并且在由 ELISA 读数 仪在波长为 450nm 上读取吸光度。 吸光度与结合到包被抗原的特异性抗体的水平成
公式计算：
COL=样本吸光度/COV COV:临界值 NC:阴性质控 COL:临界指数 3. 结果解释： 图 1：肺炎衣原体抗体与 450nm 下吸光度之间的关系
吸光度 （450nm） O.D<1.4XC
OV 1.4XCOV≤ O.D≤1.5×
COV
COL
<1.4
1.41.5
结果
阴性 没有检 测 IgM 抗体 临界值 低水 平的 IgM 抗体
1) 阳性质控：吸光度应在 450nm 波长下≥0.8。 2) 阴 性 质 控 ： 阴 性 质 控 的 吸 光 度 平 均 值 在 450nm 波长下为 0.1< NC ≤ 0.4 2. 计算 COV 和 COL 值：
COV=NC×2 NC=在 450nm 波长下检测两个阴性质控吸光度的平均 值
人可溶性糖蛋白 130（sgp130;sCD130）酶联免疫分析(ELISA) 试剂盒使用说明书
人可溶性糖蛋白130（sgp130;sCD130）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织等样本中可溶性糖蛋白130（sgp130;sCD130）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性糖蛋白130（sgp130;sCD130）水平。
用纯化的人可溶性糖蛋白130（sgp130;sCD130）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入人可溶性糖蛋白130（sgp130;sCD130），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人可溶性糖蛋白130（sgp130;sCD130）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人可溶性糖蛋白130（sgp130;sCD130）含量。
注：标准品浓度依次为：800、400、200、100、50、0 ng/mL.样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
AKT蛋白酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人AKT蛋白（AKT）酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织等样本中AKT蛋白（AKT）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人AKT蛋白（AKT）水平。
用纯化的人AKT蛋白（AKT）捕获抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被的微孔中依次加入人AKT蛋白（AKT），再与HRP标记的检测抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人AKT蛋白（AKT）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人AKT蛋白（AKT）含量。
试剂盒组成：样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
HE4 测定试剂盒（酶联免疫吸附法） 说明书
产品编号：404-10
产品使用说明书 2008 年 02 月
有效期至 批号 生产日期 目录号 制造商 包含有<96>个测试
酶联免疫吸附试剂盒 规格：96 人份
体外诊断医疗器械 温度范围
使用说明 生物危险性 试剂盒组成 来源于小鼠
来源于人类
用途 HE4 EIA 是酶联免疫方法定量测定人血清中 HE4 含量的试剂盒。本测定试剂盒可用于辅助监控对侵袭性
1×15mL
2℃～8℃贮存，至瓶签所标示的有效期
生物素标记的 HE4 单克隆抗体来源于小鼠，浓度约为 1μg/mL。其中包含磷酸盐缓冲液（pH 7.2），牛血清白 蛋白，封闭剂，清洁剂，惰性红色染料以及非叠氮钠化合物作为防腐剂。直接使用。
酶结合物 HE4 抗体
示踪液，HRP 标记的 HE4 抗体
1×0.75mL
稳定性如下表所示：
组分
数量
第一次开封后试剂的贮存和稳定性
微孔板
链霉亲和素包被的微孔板
1块
2℃～8℃贮存至微孔板上标示的失效期
12×8，链霉亲和素包被的微孔板条，可拆分。打开包装后，应立即将未使用的微孔板条放入装有干燥剂的铝
品 A
1×8mL
2℃～8℃贮存至瓶签上标示的失效期
5 瓶，冻干粉
复溶后在 2℃～8℃稳定 4 周，在-20℃ 或更低温度时可稳定 4 个月。
含有 HE4 抗原的标准品溶于含有牛血清白蛋白和惰性黄色染料的磷酸盐缓冲溶液中，并且含有非叠氮化合物作 为防腐剂，以冻干粉状存在。在使用之前用蒸馏水或去离子水进行复溶。 注：标准品 HE4 的准确浓度具有批号特异性，而且标示于每瓶的标签上。
底物液 TMB
TB-IGRA酶联免疫分析试剂盒说明书
人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T10pg/ml-240pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）水平。
用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA），再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）浓度。
标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
酶联免疫试剂盒elisa原理(一)
酶联免疫试剂盒elisa原理(一)酶联免疫试剂盒（ELISA）原理解析什么是酶联免疫试剂盒（ELISA）？•ELISA是一种常用于生物医学研究和临床诊断的试验方法。
•它基于酶标记的免疫技术原理，用于检测样品中特定蛋白质、抗体或其他生物分子。
ELISA的工作原理ELISA试剂盒通常由以下几个关键组分组成：1.固相酶标板：通常为96孔板，内壁涂有特定的抗原或抗体。
2.标准品：已知浓度和活性的特定蛋白质，用于制作标准曲线进行定量分析。
3.样品：待测蛋白质或抗体的来源。
4.酶标记的二抗：特异性与待检测的目标蛋白质或抗体结合的二抗（抗体）。
5.底物：酶标记的二抗与底物反应产生可测量的信号。
ELISA的基本步骤ELISA通常包括以下几个基本步骤：1.准备：准备实验所需材料，包括试剂盒、样品和标准品等。
2.涂覆：将待检测抗原或抗体溶液加入固相酶标板孔中，并在静置条件下使其吸附于酶标板孔内壁。
3.阻断：加入一种阻断剂防止未被固定的表面结合位点与样品中非特异性蛋白质结合。
4.孵育：将样品、标准品和质控样品加入不同孔中，与固定在孔内壁的抗原或抗体发生特异性结合反应，并在适当的条件下进行孵育。
5.洗涤：用缓冲液洗涤孔中未结合的样品，以去除非特异性结合物。
6.检测：加入酶标记的二抗，与已结合的目标蛋白质或抗体发生结合反应。
7.洗涤：再次用缓冲液洗涤除未结合的酶标记的二抗。
8.底物作用：加入底物，使酶标记的二抗与底物发生化学反应，生成可测量信号。
9.停止反应：加入停止液停止底物的反应，防止信号进一步发展。
10.分析：使用光谱仪等设备测量反应产物的吸光度，根据标准曲线定量分析待测样品中目标蛋白质或抗体的浓度。
ELISA的优势与应用•ELISA具有高灵敏度和特异性，可用于检测多种生物分子，包括蛋白质、抗体、荷尔蒙等。
•它被广泛应用于临床诊断、药物研发、食品安全监测和环境检测等领域。
•ELISA可以定量检测目标生物分子，因此被广泛用于疾病诊断和监测治疗效果等临床应用。
TB-IGRA酶联免疫分析试剂盒说明书
人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围： 96T 10pg/ml-240pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）水平。
用纯化的人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA），再与HRP标记的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人结核分枝杆菌Y-干扰素（TB-IGRA）浓度。
试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
总IgE检测试剂盒(酶联免疫法)说明书
总IgE检测试剂盒（酶联免疫法）说明书[产品名称][通用名称] 总IgE检测试剂盒(酶联免疫法)[英文名称] Total IgE ELISA适应症：过敏性疾病、蠕虫病、湿疹性或非湿疹性皮炎、IgE骨髓瘤等。
临床意义：1）>100 IU/ml水肿Churg-2）IgE ∙∙∙∙∙T∙2∙∙∙在下列疾病中可有IgE缺陷：∙X-染色体相关低丙种球蛋白血症；∙严重的联合免疫缺陷（SCID）；∙毛细管扩张性运动失调；∙肺纤维化疾病；∙极少数的健康人。
[检验原理] 试剂盒中每个微孔板条有8个可拆分的包被有抗人IgE多克隆抗体的微孔。
第一次温育时，稀释后的样本在微孔中反应。
如果样本阳性，特异性IgE与抗体结合。
为了检测结合的IgE，加入能发生颜色反应的酶标抗人IgE抗体（酶结合物）进行第二次温育。
然后加入酶底物，发生颜色反应。
通过标准品1-4绘制的标准曲线来确定IgE浓度。
效。
1.包被有抗原的微孔板：自第一次开封后，抗原包被的微孔板在干燥的2-8?C的环境中保存4个月。
2.清洗缓冲液：稀释后的缓冲液于2-8?C最多可稳定4周。
[样本要求]样本：人血清或EDTA、肝素、柠檬酸盐抗凝的血浆。
稳定性：待测患者样本于2-8?C可储存14天，稀释后的样本需在同一个工作日检测。
样本稀释：患者样本用样本缓冲液1:10稀释。
例如，可取100μl血清用900μl样本缓冲液稀释并使用混匀器混匀(加样枪不适合于混匀）。
注意：标准品和对照品已经稀释，直接使用，勿需再稀释！[检验方法]试剂的准备和稳定性注意：所有试剂在使用前均应在室温（18-25?C）平衡约30分钟。
试剂首次开封后，在无污染的情况下，于2-8?C保存，可稳定至所标示的有效期。
- 抗原包被的微孔：直接使用。
在外包装密封线咬合部的上端剪开保护袋，为防止板条受潮，只有当微孔板平衡到室温后才可打开包装。
剩余板孔应立即放回保护袋并封好（保留干燥剂）。
从第一次打开保护袋起，抗原包被的微孔可在干燥的2-8?C的环境中保存4个月。
人巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围：15.6pg/ml-1000pg/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人M-CSF，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中M-CSF 含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述巨噬细胞集落刺激因子（macrophage colony stimulating factor，M-CSF）又称为集落刺激因子-1（CSF-1），是造血系统重要的细胞因子。
M-CSF主要调节单核-巨噬细胞系细胞的生长、增殖和分化。
多种细胞均可产生M-CSF，包括成纤维细胞、子宫内膜中分泌型上皮细胞、骨髓基质细胞、脑星状细胞、成骨细胞；LPS等激活的巨噬细胞、B细胞、T细胞和内皮细胞等；此外，多种肿瘤细胞如原粒细胞性白血病、淋巴母细胞性白血病、肺腺癌细胞、乳腺癌和卵巢癌等。
人和小鼠天然M-CSF为糖蛋白，由二硫键连接的同源双体，分子量40～90kDa。
人M-CSF前体长度554～256个氨基酸不等，均有32个氨基酸的信号肽和23个氨基酸的穿膜部分。
膜结合型M-CSF表达在单层培养的成纤维细胞，可刺激表达M-CSF受体的巨噬细胞的粘附和增殖。
成熟M-CSF分子靠近N端150氨基酸在与M-CSF受体结合中起关键作用，人和小鼠M-CSF分子这个区域结构高度保守，其同源性达80％。
人和小鼠M-CSF基因定位于5对染色体，与GM-CSF、IL-3、IL-4、IL-5、IL-13和酸性FGF基因密切连锁。
M-CSF受体为高亲和力，表达于循环的单核细胞和组织巨噬细胞以及胎盘滋养层细胞。
人多巴胺(DA)酶联免疫分析试剂盒说明书
人多巴胺（DA）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中多巴胺（DA）含量。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗DA抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗DA抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的DA呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为5,000pg/ml，将其稀释为1,000pg/ml后，再做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别稀释1,000pg/ml，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2 pg/ml，15.6pg/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0pg/ml，临用前15分钟内配制。
如配制500pg/ml 标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）1,000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf 管中，混匀即可，其余浓度以此类推3.样品稀释液：1×20ml。
4.检测稀释液A：1×10ml。
5.检测稀释液B：1×10ml。
6.检测溶液A：1×120μl（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（100μl/孔），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如10μl检测溶液A加990μl检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
7.检测溶液B：1×120μl/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。
酶联免疫试剂盒检测通则-最新国标
酶联免疫试剂盒检测通则1 范围本文件描述了酶联免疫试剂盒的检测一般要求和检测过程。
本文件适用于酶联免疫试剂盒的检测。
2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。
其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 19489 实验室生物安全通用要求GB/T 4889 数据的统计处理和解释正态分布均值和方差的估计与检验GB/T 27404 实验室质量控制规范食品理化检测3 术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。
4 一般要求产品酶联免疫试剂盒应附产品说明书，或等同的指导性文件。
实验室实验室的生物安全管理应符合GB 19489中的相应要求。
检测人员检测人员应熟悉相关法律法规、检测方法原理，掌握质量检测操作规范、技术标准、质量管理和实验安全等专业知识和技能。
检测指标标准曲线相关系数、灵敏度、精密度、正确度和特异性。
5 检测过程检测样品的选择及制备5.1.1 阴性样品与待分析样品应来源于同一物种，并具有相似的结构特性，包括不含有或方法学未能检出目标分析物的样品，以及含有或添加其他与目标分析物结果类似物质（易产生交叉反应）的样品，按酶联免疫试剂盒说明书的步骤进行前处理。
5.1.2 阳性样品是指含有目标分析物的待测样品，按酶联免疫试剂盒说明书的步骤进行前处理。
5.1.3 阴性样品和阳性样品应具有基质符合性，以及与实际样品所含除目标分析物外其他成分的相似性，重点考虑典型样品基质或相似基质，综合考虑蛋白、脂肪、水分、糖分、高聚物或多聚体物质、色泽、酸碱性等影响检测的组分进行区分选择。
5.1.4 对于多种目标分析物的检测，尽可能对全部目标分析物进行检测，若因客观条件限制不能检测全部目标分析物，宜对所有目标分析物进行分类（如结构类似程度、危害程度等），每一类至少选择一种目标分析物进行检测。
5.1.5 阳性样品或阴性样品宜采用国家有证标准物质、参考物质或者质量控制品等，选择适宜的实验室标准分析方法或经典方法对样品中的目标分析物进行仪器测定，确认所有阴性样品不能检出目标分析物，确认所有阳性样品中目标分析物的浓度。
大鼠白介素 4(IL-4)酶联免疫分析试剂盒 说明书
检测，或将标本放于 -20℃或-80℃保存，但应避免反复 冻融。 2. 血浆：可用 EDTA 或肝素作为抗凝剂，标本采集后 30 分钟内于 2 - 8° C 1000 x g 离心 15 分钟，或将标本放于 -20℃或-80℃保存，但应避免反复 冻融。 3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g 离心 20 分钟，取上清即可检测，或将标本放 于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。 注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。 标本的稀释原则： 首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准 曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。最后计算浓度 时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。 标准品的稀释原则：2 瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至 1ml，盖好后静置 10 分钟以上， 然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为 50 ng/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释 50 ng/ml， 25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，0.78 ng/ml，样品稀释液直接作 为标准浓度 0 ng/ml，临用前 15 分钟内配制。 如配制 25 ng/ml 标准品：取 0.5ml（不要少于 0.5ml）50 ng/ml 的上述标准品加入含 0.5ml 样品稀释液的 Eppendorf 管中，混匀即可，其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则： 临用前以生物素标记抗体稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制 （每孔 100μl），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。如 10μl 生物素标记抗体加 990μl 生物素标 记抗体稀释液的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则： 临用前以辣根过氧化 物酶标记 亲和素稀 释液稀释，稀释前根据预先计算好 的每次实 验所需 的 总量配制（每孔 100μl），实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。如 10μl 辣根过氧化物酶标记亲和 素加 990μl 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内 配制。
人血清白蛋白(HSA)酶联免疫吸附测定试剂盒 说明书
人血清白蛋白（HSA）酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中HSA含量。
实验原理本试剂盒应用竞争抑制酶标免疫分析法测定标本中待测物质水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被抗体的微孔中同时加入酶标的抗原和待测抗原，被测抗原与酶标记抗原对特异性抗体进行竞争结合。
经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
待测标本浓度越高，标记抗原和抗体的结合就越受到抑制，显色愈浅。
显色的深浅与酶量呈正相关，而与样品中待测物质含量呈负相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）2.标准品：2瓶，每瓶临用前以0.8ml样品稀释液稀释，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100ug/mL，做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释）后，分别稀释成100ug/mL，33.3ug/mL，11.1ug/mL，3.7ug/mL，1.23ug/mL，样品稀释液直接作为标准浓度0ug/mL，临用前15分钟内配制。
如配制33.3ug/mL标准品：取0.5ml（不要少于0.5ml）100ug/mL的上述标准品加入含有1ml 样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3.样品稀释液：1×20ml/瓶。
4.检测溶液A：2×120ul/瓶（1：100）临用前以检测稀释液A1：100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔50ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
5.检测稀释液A：2×10ml/瓶。
6.底物溶液：1×10ml/瓶。
7.浓洗涤液：1×30ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
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准确度和精密度：
准确度即对检测对象的有无、含量的判定
结果和实际情况的符合程度。（灵敏度、 特异性、回收率）
精密度：对同一个样品多次重复检测、不
同时间段检测、不同批次产品对同一样品 检测的结果相近程度。（检测结果稳定可 靠）
使用便捷性：
样品前处理的繁琐程度：
花费时间：少量样品和大量样品的时间差。 对设备和环境的要求：专用设备、反应环
enzyme-linked immunosorbent assay ELISA 在康正，我认为需要对酶联免疫试剂盒主 要进行两方面的了解： 酶联免疫试剂盒本身 ①酶联免疫的原理、②分类、③试剂盒
1.
检测样品以及试剂盒性能指标 ①检测限、②准确度和精密度、 ③使用便捷性、④有效期
2.
标准曲线 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 5 10 标准品浓度 15 y = -13.279Ln(x) + 67.033 R 2 = 0.9984
百分吸光值（B/B0）
20
25
标准曲线（半对数） 90 80 y = -13.279x + 67.033 R 2 = 0.9984
（三）竞争法
（一）双抗体夹心法
试剂盒：
酶标板（包被物）、标准品、抗体、酶标
物、洗涤液、底物溶液、终止液、文件。
样品稀释液、样品处理液。
包装。
试剂盒检测限：
试剂盒本身酶联反应能够达到的下限。 样品处理过程中对检测对象的稀释倍数。
目前在试剂盒应用中对不同的对象检测限不同： 对于国家规定禁用的检测对象，追求检测限最低 化；而针对国家规定限量的检测对象，如果自身 检测限指标很好则强调低检测限（很多客户都很 重视这一点），如果检测限不如竞争对手，则强 调该试剂盒完全能够满足检测需要。
基本原理
酶联免疫采用抗原与抗体的特异反应将待
测物与酶连接，然后通过酶与底物产生显 色反应，测定的对象可以是抗体也可以是 抗原。
实现定量/半定量检测
检测对象的多少会影响显色反应的程度，
在一定的范围内，他们二者之间的这种关 系符合某种数学规律（二元方程），使用 该二元方程可以同过其中一个互相计算出 另一个对应的数值。在同一块酶标板上， 我们可以通过数个已确知数值的检测对象 和它们的反应结果得到方程，然后通过其 他检测对象的反应结果计算出检测对象的 数值。
境。 操简单：步骤多少。 保护操作人员的健康：无有害试剂。
有效期：
运输、保存方式。
完整试剂盒保存时间。 才开后重复多次使用的保存时间。
谢 谢！
百分吸光值（B/B0）
70 60 50 40 30 20 10 0 -1.5 -1 -0.5 0 0.5 1 1.5 标准浓度对数值 2 2.5 3 3.5
酶联免疫的分类：
（一）双抗体夹心法
（二）间接法 （三）竞争法 （四）双位点一步法 （五）捕获法测IgM抗体 （六）应用亲和素和生物素的ELISA