酶联免疫试剂盒
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境。 操作简单:步骤多少。 保护操作人员的健康:无有害试剂。
有效期:
运输、保存方式。
完整试剂盒保存时间。 才开后重复多次使用的保存时间。
谢 谢!
标准曲线 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 5 10 标准品浓度 15 y = -13.279Ln(x) + 67.033 R 2 = 0.9984
百分吸光值(B/B0)
20
25
标准曲线(半对数) 90 80 y = -13.279x + 67.033 R 2 = 0.9984
准确度和精密度:
准确度即对检测对象的有无、含量的判定
结果和实际情况的符合程度。(灵敏度、 特异性、回收率)
精密度:对同一个样品多次重复检测、不
同时间段检测、不同批次产品对同一样品 检测的结果相近程度。(检测结果稳定可 靠)
使用便捷性:
样品前处理的繁琐程度:
花费时间:少量样品和大量样品的时间差。 对设备和环境的要求:专用设备、反应环
基本原理
酶联免疫采用抗原与抗体的特异反应将待
测物与酶连接,然后通过酶与底物产生显 色反应,测定的对象可以是抗体也可以是 抗原。
实现定量/半定量检测
检测对象的多少会影响显色反应的程度,
在一定的范围内,他们二者之间的这种关 系符合某种数学规律(二元方程),使用 该二元方程可以同过其中一个互相计算出 另一个对应的数值。在同一块酶标板上, 我们可以通过数个已确知数值的检测对象 和它们的反应结果得到方程,然后通过其 他检测对象的反应结果计算出检测对象的 数值。
百分吸光值(B/B0)
70 60 50 40 30 20 10 0 -1.5 -1 -0.5 0 0.5 1 1.5 标准浓度对数值 2 2.5 3 3.5
酶联免疫的分类:
(一)双抗体夹心法
(二)间接法 (三)竞争法 (四)双位点一步法 (五)捕获法测IgM抗体 (六)应用亲和素和生物素的ELISA
(三)竞争法
wk.baidu.com
(一)双抗体夹心法
试剂盒:
酶标板(包被物)、标准品、抗体、酶标
物、洗涤液、底物溶液、终止液、文件。
样品稀释液、样品处理液。
包装。
试剂盒检测限:
试剂盒本身酶联反应能够达到的下限。 样品处理过程中对检测对象的稀释倍数。
目前在试剂盒应用中对不同的对象检测限不同: 对于国家规定禁用的检测对象,追求检测限最低 化;而针对国家规定限量的检测对象,如果自身 检测限指标很好则强调低检测限(很多客户都很 重视这一点),如果检测限不如竞争对手,则强 调该试剂盒完全能够满足检测需要。
enzyme-linked immunosorbent assay ELISA 在康正,我认为需要对酶联免疫试剂盒主 要进行两方面的了解: 酶联免疫试剂盒本身 ①酶联免疫的原理、②分类、③试剂盒
1.
检测样品以及试剂盒性能指标 ①检测限、②准确度和精密度、 ③使用便捷性、④有效期
2.