2019年高考二轮复习专题课件——基因工程【上课用】
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高中生物基因工程课件
毒性和提高免疫原性。
基因工程疫苗的应用
03
预防传染病，如乙型肝炎疫苗、人乳头瘤病毒疫苗等，降低人
群发病率。
基因工程抗体
基因工程抗体的种类
包括单克隆抗体、双特异性抗体、人源化抗体等。
基因工程抗体的制备
通过基因工程技术克隆和表达抗体的重链和轻链可变区基因，与适 当的恒定区基因融合，在哺乳动物细胞中表达。
公众参与与透明度
加强公众参与和透明度，促进利益相关方的对话 和协商，共同制定符合各方利益的决策。
3
国际合作与协调
加强国际合作与协调，共同制定国际性的伦理准 则和法律法规，促进全球范围内的公平和平等。
谢谢
THANKS
生物固氮
通过基因工程技术将固氮基因转入植物，提高植 物的固氮能力，减少化肥使用。
生物农药
通过基因工程技术生产具有杀虫、杀菌作用的生 物农药，减少化学农药的使用。
基因编辑技术
利用基因编辑技术如CRISPR-Cas9等对作物进行 精确的基因改造，提高作物的抗逆性和产量。
05 基因工程与环境保护
CHAPTER
生物的遗传性状。
基因工程原理
基因工程基于分子生物学和遗传学 原理，通过改变生物体的基因组， 实现对生物性状的遗传改良。
基因工程操作步骤
基因工程的操作步骤包括基因克隆 、载体构建、受体细胞转化、基因 表达和产物分离纯化等。
基因工程的历史与发展
基因工程的起源
基因工程的未来发展
基因工程起源于20世纪70年代，当时 科学家发现了限制性内切酶和DNA连 接酶，为基因操作提供了工具。
基因工程在土壤修复中的应用
土壤修复是指通过各种手段改善土壤质量，降低土壤污染 对环境和人体健康的影响。基因工程技术可以帮助我们培 育出具有特定功能的植物，用于土壤修复。
基因工程人教版高三年级生物课堂PPT学习
注意！
E.Coli DNA连接酶只能连接双链DNA 互补的黏性末端 T4 DNA连接酶能连接双链DNA互补的 黏性末端 ，也能连接平末端、什么是目的基因？ 主要是指编码蛋白质结构基因 2、末端的DNA片段是 否一定是被同一种限制酶所切？
4、已知一个粘性末端如何确定相关酶识别
的序列？
例一：写出下列序列受EcoRI限制酶 作用后的黏性末端
CTTCATGAATTCCCTAA GAAGTACTTAAGGGATT
GAATTCCGTAGAATTCGGATT CTTAAGGCATCTTAAGCCTAA
非编码区
编码区
非编码区
RNA聚合酶 结合位点
外显子
内含子
❖ 真核细胞基因结构示意图
❖启动子：
❖1、功能：与RNA聚合酶特异性结合， 控制遗传信息的转录。
❖2、启动子与起始密码子有何区别？ ❖3、启动子的位置是否只能在编码区
的上游？
❖4、启动子发生突变，结果会如何？
❖ 编码区：
❖ 1、能够转录的区域，通过mRNA来编码蛋白 质的结构。
一定范围大小 DNA片段与
的DNA片段 时期的mRNA 3、中可用于物种间基因交 流的基因种类不同
2.遗传信息的传递都遵循中心法则 3.生物界共用一套遗传密码
什么是基因？ --基因是有遗传效应的DNA片段 基因如何控制生物的性状？
—通过基因的表达。即：通过转 录和翻译来控制蛋白质的合成
基因的结构如何？
原核生物的基因结构
非编码区
编码区
非编码区
RNA聚合酶 结合位点
原核细胞基因结构示意图
真核生物的基因结构
运载体的特点： （1）有一至多个限制酶的切点 （2）进入受体后可以进行自主复制 （3）有特殊的标记基因 （4）对受体细胞没有损害
2019年高考生物二轮专题复习课件：《基因工程》(共69张PPT)
基因工程 是指按照人们的愿望,进行严格的 设计,并通过体外DNA重组和转基因等技术,赋 予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人 们需要的新的生物类型和生物产品.(又叫DNA 重组技术)
考点一、基因工程诞生的理论基础：
(1)DNA是生物的主要遗传物质。 (2)基因是控制生物性状的基本单位。 (3)遗传信息的传递遵循中心法则。 (4)生物界共用一套遗传密码子多DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受 体菌
直接分离： 鸟枪法 人工合成 反转录法
2）噬菌体或某些动植物病毒
三、基因的载体 —“分子运输车”
3、载体的种类：
质粒是一般专指细菌、酵母菌和放线菌等生 物中核区以外的环状DNA分子。
质粒是基因工程最常用的运载体。
最常用的质粒是 大肠杆菌的质粒， 其中常含有抗药基 因，如四环素的标 记基因。质粒的存 在与否对宿主细胞 生存没有决定性作 用，但复制只能在 宿主细胞内成。 • 大肠杆菌的质粒：
※ 利用PCR技术扩增目的基因
二、基因表达载体的构建 (核心)
1、基因表达载体的作用 a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并 遗传给子代
b、同时使目的基因能表达和发挥作用
二、基因表达载体的构建
2、基因表达载体的组成
目的基因 启动子 终止子
标记基因
二、基因表达载体的构建
化学合成
目的基因
比较上述三种目的基因提取方法的优缺点
优点 鸟枪法
操作简便 成本低
缺点
工作量大，盲目，分 离出来的有时并非一 个基因 操作过程麻烦，mRNA 很不稳定，要求的技 术条件较高 仅限于合成核苷酸 对较少化学合成 专一性最强 法
※ 利用PCR技术扩增目的基因
前提：一段已知目的基因的核 苷酸序列(合成引物) 原理：DNA的复制 条件：模板DNA、引物、四种脱 氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶等。 过程：变性→复性(退火)→延伸 结果：目的基因的数量呈指数增加(2n)
考点一、基因工程诞生的理论基础：
(1)DNA是生物的主要遗传物质。 (2)基因是控制生物性状的基本单位。 (3)遗传信息的传递遵循中心法则。 (4)生物界共用一套遗传密码子多DNA 片段,导入受体菌的群体中储存,各个受 体菌
直接分离： 鸟枪法 人工合成 反转录法
2）噬菌体或某些动植物病毒
三、基因的载体 —“分子运输车”
3、载体的种类：
质粒是一般专指细菌、酵母菌和放线菌等生 物中核区以外的环状DNA分子。
质粒是基因工程最常用的运载体。
最常用的质粒是 大肠杆菌的质粒， 其中常含有抗药基 因，如四环素的标 记基因。质粒的存 在与否对宿主细胞 生存没有决定性作 用，但复制只能在 宿主细胞内成。 • 大肠杆菌的质粒：
※ 利用PCR技术扩增目的基因
二、基因表达载体的构建 (核心)
1、基因表达载体的作用 a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并 遗传给子代
b、同时使目的基因能表达和发挥作用
二、基因表达载体的构建
2、基因表达载体的组成
目的基因 启动子 终止子
标记基因
二、基因表达载体的构建
化学合成
目的基因
比较上述三种目的基因提取方法的优缺点
优点 鸟枪法
操作简便 成本低
缺点
工作量大，盲目，分 离出来的有时并非一 个基因 操作过程麻烦，mRNA 很不稳定，要求的技 术条件较高 仅限于合成核苷酸 对较少化学合成 专一性最强 法
※ 利用PCR技术扩增目的基因
前提：一段已知目的基因的核 苷酸序列(合成引物) 原理：DNA的复制 条件：模板DNA、引物、四种脱 氧核苷酸、耐热的DNA聚合酶等。 过程：变性→复性(退火)→延伸 结果：目的基因的数量呈指数增加(2n)
2019届高考生物二轮复习专题七选考第Ⅱ课时基因工程与克隆技术(选修③)课件(适用全国)
第Ⅱ课时
基因工程与克隆技术(选修③)
串点成面——自成体系
点点落实(一) 基因工程
01
一过基础
1．基因工程的 3 种操作工具
2．基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取途径
方法 直接______
较小基因 ，直接利用 DNA 化学 已知核苷酸序列的 _________
对照组(A)
131I治疗组(B)
单克隆抗体治 疗组(C)
解析
给GD模型小鼠腹腔注射 给GD模型小鼠腹腔注射溶于 0.1 mL无菌生理盐水 0.1 mL无菌生理盐水的131I
提能增分检测
课堂巩固落实
1．(2018· 全国卷Ⅱ)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发 下会发出绿色荧光， 这一特性可用于检测细胞中目的基因 的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接 在 GFP 基因的 5′末端，获得了 L1GFP 融合基因(简称 为甲)，并将其插入质粒 P0，构建了真核表达载体 P1，其 部分结构和酶切位点的示意图如下，图中 E1～E4 四种限 制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：
(3)科研人员分别从实验组和对照组细胞中提取蛋白质， 经处理检测 后获得相对荧光值(在适宜条件下，荧光素酶可催化荧光素发生氧 化反应并发出荧光)，其结果如图乙所示。 ①实验组为将重组载体导入含 R7 的家蚕胚胎细胞中， 对照组 1 的 处理为将含有荧光素酶基因的表达载体 ( 不含对应 3′UTR 的 DNA 片段)导入含 R7 的家蚕胚胎细胞中，则对照组 2 的处理应为 _______________________________________________________。 ②依据实验结果可推知， R7 影响基因 B 的表达，即通过遵循 ________________原则， R7 与基因 B 所转录的 mRNA 的 3′UTR 结合，进而________(填“促进”或“抑制”)基因 B 的表达。
基因工程与克隆技术(选修③)
串点成面——自成体系
点点落实(一) 基因工程
01
一过基础
1．基因工程的 3 种操作工具
2．基因工程的基本操作程序 (1)目的基因的获取途径
方法 直接______
较小基因 ，直接利用 DNA 化学 已知核苷酸序列的 _________
对照组(A)
131I治疗组(B)
单克隆抗体治 疗组(C)
解析
给GD模型小鼠腹腔注射 给GD模型小鼠腹腔注射溶于 0.1 mL无菌生理盐水 0.1 mL无菌生理盐水的131I
提能增分检测
课堂巩固落实
1．(2018· 全国卷Ⅱ)某种荧光蛋白(GFP)在紫外光或蓝光激发 下会发出绿色荧光， 这一特性可用于检测细胞中目的基因 的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白(L1)基因连接 在 GFP 基因的 5′末端，获得了 L1GFP 融合基因(简称 为甲)，并将其插入质粒 P0，构建了真核表达载体 P1，其 部分结构和酶切位点的示意图如下，图中 E1～E4 四种限 制酶产生的黏性末端各不相同。回答下列问题：
(3)科研人员分别从实验组和对照组细胞中提取蛋白质， 经处理检测 后获得相对荧光值(在适宜条件下，荧光素酶可催化荧光素发生氧 化反应并发出荧光)，其结果如图乙所示。 ①实验组为将重组载体导入含 R7 的家蚕胚胎细胞中， 对照组 1 的 处理为将含有荧光素酶基因的表达载体 ( 不含对应 3′UTR 的 DNA 片段)导入含 R7 的家蚕胚胎细胞中，则对照组 2 的处理应为 _______________________________________________________。 ②依据实验结果可推知， R7 影响基因 B 的表达，即通过遵循 ________________原则， R7 与基因 B 所转录的 mRNA 的 3′UTR 结合，进而________(填“促进”或“抑制”)基因 B 的表达。
高考生物基因工程专题复习超全-93页PPT资料
单链
连接部位
在两DNA片段之间 形成磷酸二酯键
将单个脱氧核苷 酸加到已存在的 核酸片段上，形 成磷酸二酯键
相同点
都能形成磷酸二酯键
种类 项目
作用 底物
作用 部位
限制酶
DNA分子 磷酸二
酯键
DNA连 接酶
DNA分子 片段
磷酸二 酯键
DNA 聚合酶
脱氧核苷酸
磷酸二 酯键
解旋酶
DNA 分子 碱基对间 的氢键
为——ACTAG和GATC——。少数限制酶却可识别不止一种 碱基序列。
“分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶
１.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。
２.DNA连接酶的种类
E·coliDNA连接酶：连接黏性末端
T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端
3.DNA连接酶的作用部位：
脱氧核苷酸链上相邻的两个脱氧核苷 酸之间的磷酸二酯键
DNA连接酶
DNA连接酶无特异性，其催化DNA片段末端 形成磷酸二脂键。连接情况有两种：一是 催化互补的粘性末端连接，二是催化平末 端连接。只要是相同的粘性末端、平末端 DNA连接酶就能催化连接，而与切割的限制 酶无关。
DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？
连接DNA链
DNA连接酶
双链
DNA聚合酶
基因工程专题复习
１. 基因工程的概念
这种技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪 切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合， 然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体 细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。
一、基因工程的原理及技术
1、原理：
基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境
连接部位
在两DNA片段之间 形成磷酸二酯键
将单个脱氧核苷 酸加到已存在的 核酸片段上，形 成磷酸二酯键
相同点
都能形成磷酸二酯键
种类 项目
作用 底物
作用 部位
限制酶
DNA分子 磷酸二
酯键
DNA连 接酶
DNA分子 片段
磷酸二 酯键
DNA 聚合酶
脱氧核苷酸
磷酸二 酯键
解旋酶
DNA 分子 碱基对间 的氢键
为——ACTAG和GATC——。少数限制酶却可识别不止一种 碱基序列。
“分子缝合针” —ＤＮＡ连接酶
１.作用：连接磷酸二酯键,而不是氢键。
２.DNA连接酶的种类
E·coliDNA连接酶：连接黏性末端
T4DNA连接酶：连接黏性末端和平末端
3.DNA连接酶的作用部位：
脱氧核苷酸链上相邻的两个脱氧核苷 酸之间的磷酸二酯键
DNA连接酶
DNA连接酶无特异性，其催化DNA片段末端 形成磷酸二脂键。连接情况有两种：一是 催化互补的粘性末端连接，二是催化平末 端连接。只要是相同的粘性末端、平末端 DNA连接酶就能催化连接，而与切割的限制 酶无关。
DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同点和不同点？
连接DNA链
DNA连接酶
双链
DNA聚合酶
基因工程专题复习
１. 基因工程的概念
这种技术是在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪 切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合， 然后导入受体细胞内进行无性繁殖，使重组基因在受体 细胞内表达，产生出人类所需要的基因产物。
一、基因工程的原理及技术
1、原理：
基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术
操作环境
2019版高考生物总复习专题29基因工程课件
(1)为了获得丙种蛋白质的基因,在已知丙种蛋白质氨基酸序列的基础
上,推测出丙种蛋白质的
序列,据此可利用
方法合成目的
基因。获得丙种蛋白质的基因还可用
和
法。
(2)在利用上述丙种蛋白质基因和质粒载体构建重组质粒的过程中,常
需要使用
酶和
酶。
(3)将含有重组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共同培养,筛选
出含有丙种蛋白质的愈伤组织,由该愈伤组织培养成的再生植序列已知
⑧ 化学方法合成 聚合酶链式反应(PCR)扩增
2.形成重组DNA分子
一般用⑨ 相同的 限制性核酸内切酶分别切割含有目的基因的供体
DNA分子和载体(如质粒),使其产生相同的粘性末端(或平末端),然后用
DNA连接酶将两者连接在一起,形成重组DNA分子。
(2)DNA连接酶 功能:将末端碱基互补的2个DNA片段连接起来。 (3)载体 a.最常用的载体——质粒 实质:是能够⑥ 自主复制 的双链环状DNA分子,是一种特殊的遗传 物质,在细菌中以独立于拟核之外的方式存在。 b.其他载体:噬菌体、植物病毒和动物病毒等。
二、基因工程的基本操作步骤 1.获得目的基因 (1)目的基因:人们所需要的基因。如:人的胰岛素基因、植物的抗病基 因等。
的危害。
(4)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,则
该植株的种子
(填“含有”或“不含”)丙种蛋白质基因。
解析 本题考查抗虫作物培育过程的相关知。已知 丙种蛋白质氨基酸序列,可通过推测丙种蛋白质的基因序列,然后利用 化学方法人工合成丙种蛋白质基因。(2)在构建重组质粒的过程中,需 要使用限制性核酸内切酶和DNA连接酶,前者能识别特定的核苷酸序 列,使每条链特定部位的核苷酸之间的磷酸二酯键断开,使其形成粘性 末端(或平末端),被喻为“分子手术刀”;后者能将两个带有相同粘性末 端(或平末端)的DNA片段连接起来,被称为“分子针线”。(3)将含有重 组质粒的农杆菌与甲种农作物的愈伤组织共同培养,可筛选出含有丙种
2019届二轮复习 基因工程 课件(全国通用)
↓ ↓ ——GGATCC—— ——GATC—— ——CCTAGG—— ——CTAG—— ↑ ↑ 图(a) (1)经 BamHⅠ酶切后得到的目的基因可以与上述表达载 ↓ ——GAATTC—— ——CTTAAG—— ↑
体被________酶切后的产物连接，理由是___________ ______________________________________________。
位点分别为 G AATTC 和 CCC GGG，在图中画出两种 限制酶切割 DNA 后产生的末端。
↓ ↓
(2)写出产生的末端的种类：①产生的是 黏性末端；②产生的 是 平末端 。
(3)EcoRⅠ限制酶和 SmaⅠ限制酶识别的 碱基序列 不同，切割 位点 不同 (填“相同”或“不同”)，说明限制酶具有专一性 。
图(b)
图(c)
(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的 有________________和________________， 其中既能连接黏 性末端又能连接平末端的是______________。
解析
返回
2．(2016•江苏高考，有改动)下表是几种限制酶识别序列及其 切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其 中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
第十三单元 现代生物科技专题(选修3) 单击此处编辑母版标题样式
第一讲
基因工程
考点一 考点二
基因工程的操作工具 基因工程的基本操作程序
考点三
考点四
基因工程的应用与蛋白质工程
DNA的粗提取与鉴定
课堂一刻钟 研真题——知命题点·查薄弱点·清迷盲点
课下达标检测
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考点一
基因工程的操作工具
体被________酶切后的产物连接，理由是___________ ______________________________________________。
位点分别为 G AATTC 和 CCC GGG，在图中画出两种 限制酶切割 DNA 后产生的末端。
↓ ↓
(2)写出产生的末端的种类：①产生的是 黏性末端；②产生的 是 平末端 。
(3)EcoRⅠ限制酶和 SmaⅠ限制酶识别的 碱基序列 不同，切割 位点 不同 (填“相同”或“不同”)，说明限制酶具有专一性 。
图(b)
图(c)
(3)DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，常见的 有________________和________________， 其中既能连接黏 性末端又能连接平末端的是______________。
解析
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2．(2016•江苏高考，有改动)下表是几种限制酶识别序列及其 切割位点，图1、图2中标注了相关限制酶的酶切位点，其 中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：
第十三单元 现代生物科技专题(选修3) 单击此处编辑母版标题样式
第一讲
基因工程
考点一 考点二
基因工程的操作工具 基因工程的基本操作程序
考点三
考点四
基因工程的应用与蛋白质工程
DNA的粗提取与鉴定
课堂一刻钟 研真题——知命题点·查薄弱点·清迷盲点
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考点一
基因工程的操作工具
2019年高考生物二轮专题复习课件：《基因工程的应用蛋白质工程的崛起》 (共99张PPT)
第一步：将反应体系（包括双链模板、引物、 耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核糖核苷酸 以及酶促反应所需的离子等）加热至90～95 ℃，使双链DNA模板两条链之间的氢键打开， 变成单链DNA，作为互补链聚合反应的模板。 第二步：将反应体系降温至55～60 ℃，使两 种引物分别与模板DNA链3′端的互补序列互 补配对，这个过程称为复性（退火）。
四、各种提取目的基因的方法种提取目的基因的方法
操作简单，工作量大，具一定盲目性， PCR法 反转 录法
化学 合成法
人工 合成 基因
五、PCR的基本原理 PCR扩增是获取目的基因的一种非常
有用的方法，也是进行分子鉴定和检测的
一种很灵敏的方法。PCR的扩增反应过程 包括以下几个主要过程。
第一步：将反应体系（包括双链模板、引物、 耐高温的DNA聚合酶、四种脱氧核糖核苷酸 以及酶促反应所需的离子等）加热至90～95 ℃，使双链DNA模板两条链之间的氢键打开， 变成单链DNA，作为互补链聚合反应的模板。
四、各种提取目的基因的方法
操作简单，工作量大，具一定盲目性，转 录法
化学 合成法
人工 合成 基因
四、各种提取目的基因的方法
操作简单，工作量大，具一定盲目性，级细菌”
D．基因工程在农业生产上的应用主要是培育
DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反应过
程都是在PCR扩增仪中完成的。
六、核酸分子杂交法（即DNA探针法）
六、核酸分子杂交法（即DNA探针法） 该方法是根据碱基互补配对原则，把 互补的双链DNA解开，把单链的DNA小片 段用同位素、荧光分子或化学发光催化剂 等进行标记，之后同被检测的DNA中的同 源互补序列杂交，从而检出所要查明的
品中的标记过的DNA探针，进行基因分析，就
2019高考生物二轮复习第16讲基因工程与细胞工程课件
参考答案
①DNA连接酶 ④药物
②基因表达载体的构建 ⑤基因
③将目的 ⑦全
基因导入受体细胞 能性 ⑧体细胞杂交
⑥自然界中没有 ⑩动物细胞核
⑨细胞增殖
化学法
抗原
总纲目录
高频命题点1 高频命题点2 基因工程 细胞工程
高频命题点1
1.基因工程常考的3种基本工具(填空) (1)限制性核酸内切酶:识别特定① 点上切割DNA分子。
解析 (1)已知MAP30蛋白的氨基酸序列,可以用化学合成方法 获得MAP30蛋白的基因。利用PCR技术扩增该基因,PCR反应体 系的主要成分应该包含4种脱氧核糖核苷酸、模板DNA、引 物、热稳定DNA聚合酶、扩增缓冲液(含Mg2+)和水等。(2)构建 基因表达载体需要使用到的酶是限制酶和DNA连接酶;为了避免 出现“目的基因自我环化”、“目的基因在运载体上反向连 接”的问题,可分别使用两种限制酶去剪切目的基因和运载体。 (3)可用植物组织培养技术得到愈伤组织大规模生产MAP30蛋 白,可通过抗原-抗体杂交技术检测MAP30的基因是否在南瓜果 实中成功表达。(4)用含不同浓度MAP30蛋白培养液培养弧菌,
(2)以P基因序列为基础,获得P1基因的途径有修饰 基因或合成 基因。所获得的基因表达时是遵循中心法
则的,中心法则的全部内容包括 的复制;以及遗传信息在不同分子之间的流动,即: 。
(3)蛋白质工程也被称为第二代基因工程,其基本途径是从预期蛋 白质功能出发,通过 和
,进而确定相对应的脱氧核苷酸序列,据此获得基因,再经表 达、纯化获得蛋白质,之后还需要对蛋白质的生物 鉴定。 进行
。
图(c)
(3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶,常见的有 和 末端的是 ,其中既能连接黏性末端又能连接平 。
高考生物二轮复习第16讲基因工程课件高三全册生物课件
(单选)。
A.含B基因的染色体缺失 聚合酶失活
基因发生基因突变 基因的启动子无法启动转录
(2)从水稻体细将该序列与Luc基因(表达的荧光素
酶能催化荧光素产生荧光)连接成融合基因(表达的蛋白质能保留
两种蛋白质各自的功能),然后构建重组表达载体。
分子杂交技术 功显示
(DNA 和 mRNA 之 出杂
间)
交带
第三步
目的基因是否翻译成蛋 白质
抗原—抗体杂交
个体水平 鉴定
根据目的基因表达出的性状判断,包括做抗虫、抗病的 接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的强弱;对基因 工程产品与天然产品的功能进行活性比较,以确定功 能是否相同
12/9/2021
10
二、蛋白质工程 1.蛋白质工程
12/9/2021
11
2.蛋白质工程与基因工程的比较
蛋白质工程
基因工程
预期蛋白质功能→设计预期 过 的蛋白质结构→推测应有的 程 氨基酸序列→找到相对应的
获取目的基因→基因表达 载体的构建→将目的基因 导入受体细胞→目的基因
脱氧核苷酸序列 区 别实 定向改造或生产人类所需的
①E·coli DNA 连 接酶只能连接黏 性末端 ②T4 DNA 连接酶 能连接黏性末端 和平末端
①能在宿主细胞内稳 定存在并大量复制 ②有一个至多个限制 酶切割位点 ③具有特殊的标记基 因
12/9/2021
2
限制酶
DNA 连接酶
载体
常用 类型
ESmcoaRⅠⅠ限限 制制 酶酶、E酶 酶·c、olTi 4DDNNAA连连接接
步骤组成一轮循环。
(4)PCR扩增时,复性温度的设定是成败的关键。复性温度过高会破