生化需氧量测定中获得接种液的一种方法
五日生化需氧量的测定
实验七五日生化需氧量的测定生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。
测定BOD 的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。
本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。
该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关内容参阅教材第二章第五节。
一、实验目的和要求1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。
2．复习第二章第五节中的相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。
二、仪器1．恒温培养箱。
2．5～20L细口玻璃瓶。
3．1000～2000mL量筒。
4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。
6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4)，33.4g磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH 应为7.2。
2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。
4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。
5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至1000mL。
6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。
水质五日生化需氧量(bod5)的测定
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD）的测定。
方法的检出限为L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
HJ505-2009 水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法
生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物 的生物化学过程消耗的溶解氧。通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1） ℃的暗处培养 5d±4h 或(2+5)d±4h(先在 0～4℃的暗处培养 2d，接着在(20±1)℃的暗处培养 5d， 即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差， 计算每升样品消耗的溶解氧量，以 BOD5 形式表示。
2
稀释水中氧的浓度不能过饱和，使用前需开口放置 1 小时，且应在 24 小时内使用。剩余的 稀释水应弃去。 4.5 接种稀释水：根据接种液的来源不同，每升稀释水（4.4）中加入适量接种液（4.2）：城市生 活污水和污水处理厂出水加 1～10 ml，河水或湖水加 10～100 ml，将接种稀释水存放在（20±1） ℃的环境中，当天配制当天使用。接种的稀释水 pH 值为 7.2，BOD5 应小于 1.5mg/L。 4.6 盐酸溶液，c(HCl)=0.5mol/L：将 40ml 浓盐酸（HCl）溶于水中，稀释至 1000ml。 4.7 氢氧化钠溶液，c(NaOH)=0.5mol/L：将 20g 氢氧化钠溶于水中，稀释至 1000ml。 4.8 亚硫酸钠溶液，c(Na2SO3)=0.025mol/L：将 1.575g 亚硫酸钠（Na2SO3）溶于水中，稀释至 1000ml。此溶液不稳定，需现用现配。 4.9 葡 萄 糖 - 谷 氨 酸 标 准 溶 液 ： 将 葡 萄 糖 （ C6H12O6 ， 优 级 纯 ） 和 谷 氨 酸 （HOOC-CH2-CH2-CHNH2-COOH，优级纯）在 130℃干燥 1 小时，各称取 150mg 溶于水中，在 1000ml 容量瓶中稀释至标线。此溶液的 BOD5 为 210±20 mg/L，现用现配。该溶液也可少量冷冻 保存，融化后立刻使用。 4.10 丙烯基硫脲硝化抑制剂，ρ(C4H8N2S)= 1.0g/L：溶解 0.20g 丙烯基硫脲（C4H8N2S）于 200ml 水中混合，4℃保存，此溶液可稳定保存 14d。 4.11 乙酸溶液, 1+1。 4.12 碘化钾溶液,ρ(KI)=100 g/L：将 10g 碘化钾(KI)溶于水中，稀释至 100ml。 4.13 淀粉溶液,ρ=5 g/L：将 0.50g 淀粉溶于水中，稀释至 100ml。
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
五日生化需氧量稀释和接种法质量控制评价
五日生化需氧量稀释和接种法质量控制评价五日生化需氧量（BOD5）是一个重要的水质指标，用于评估水体中有机物污染的程度。
BOD5是指在规定的条件下，微生物在五天内分解水中某些可氧化物质，特别是有机物，所消耗的溶解氧的量。
这个指标对于了解水体的健康状态，预测水体中生物的生存情况，以及评估水体的自净能力等方面都具有重要意义。
在BOD5的测定中，稀释与接种法是一种常用的方法。
这种方法适用于含有较多有机物的地面水、工业废水和生活污水的测定。
通过稀释，可以将样品中的有机物浓度降低到适宜的程度，保证降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。
接种则是为了引入能够分解废水中有机物的微生物，特别是在不含或少含微生物的工业废水中。
对于使用稀释与接种法测定BOD5的质量控制，以下几点是重要的：1. 准确控制稀释倍数：根据水样的具体情况，选择合适的稀释倍数。
如果BOD5未超过6mg/L，则不必稀释，可直接测定。
对于高浓度的废水，需要进行适当的稀释，以使BOD5在适宜的范围内。
2. 保证接种液的质量：接种液的质量对于测定结果的准确性至关重要。
应按照国家标准制备接种液，并保证其菌种丰富、活性良好。
如果使用购买的接种液，应选择质量可靠的产品，并对其性能进行验证。
3. 严格控制实验条件：BOD5的测定需要在恒温条件下进行，温度波动不应超过±1℃。
同时，要保证充足的溶解氧供应，以支持微生物的活性。
4. 实验操作的规范性：在实验过程中，应按照标准的操作程序进行样品处理、接种、培养和测定等步骤。
操作人员应经过培训，熟悉实验流程和注意事项，避免操作失误对结果的影响。
5. 实验室内的质量控制：定期进行实验室内的质量控制，包括空白实验、平行样测定、加标回收实验等。
这些质量控制措施有助于发现实验中的异常情况，及时纠正误差，保证测定结果的准确性。
6. 定期校准仪器和设备：用于BOD5测定的仪器和设备应定期进行校准，确保其准确性和稳定性。
校准过程中发现的问题应及时处理，以保证测定结果的可靠性。
五日生化需氧量测定方法
生化需氧量（BOD5）稀释与接种法GB7488--87 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。
当其污染水域后，这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。
水体因缺氧造成鱼类及其它水生生物的死亡。
水体中含有的有机物成分复杂，难以一一测定其成分。
人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗的氧，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个重要指标。
生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。
测定生化需氧量的水样，采集时应充满并密封于瓶中。
在0—4℃下进行保存。
一般应在6小时内进行分析。
若需要远距离转运，在任何情况下，贮存时间不应超过24小时。
概述1．方法原理生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
此生物氧化全过程进行的时间很长，如在20℃培养时，完成此过程需100多天。
目前国内外普遍规定于20±1℃培养5d，分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升（mg/L）表示。
对某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培养测定，以降低其浓度和保证有充足的溶解氧。
稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1 mg/L以上。
为了保证水样稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气（或通入氧气），以便稀释水中溶解氧接近饱和。
稀释水中还应加入一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐、钙、镁和铁盐等），以保证微生物生长的需要。
对于不含或少含微生物的工业废水，其中包括酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。
本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超过6000 mg/L的水样。
HJ505-2009 水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法
1
生物引入水样中进行接种。
4 试剂和材料
本标准所用试剂除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯化学试剂。 4.1 水：实验用水为符合 GB/T 6682 规定的 3 级蒸馏水，且水中铜离子的质量浓度不大于 0.01 mg/L，不含有氯或氯胺等物质。 4.2 接种液：可购买接种微生物用的接种物质，接种液的配制和使用按说明书的要求操作。也可 按以下方法获得接种液。 4.2.1 未受工业废水污染的生活污水：化学需氧量不大于 300mg/L，总有机碳不大于 100mg/L； 4.2.2 含有城镇污水的河水或湖水； 4.2.3 污水处理厂的出水； 4.2.4 分析含有难降解物质的工业废水时，在其排污口下游适当处取水样作为废水的驯化接种 液。也可取中和或经适当稀释后的废水进行连续曝气，每天加入少量该种废水，同时加入少量生 活污水，使适应该种废水的微生物大量繁殖。当水中出现大量的絮状物时，表明微生物已繁殖， 可用作接种液。一般驯化过程需 3～8 d。 4.3 盐溶液 4.3.1 磷酸盐缓冲溶液：将 8.5g 磷酸二氢钾（KH2PO4）、21.8g 磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g 七 水合磷酸氢二钠（Na2HPO4·7H2O）和 1.7g 氯化铵（NH4Cl）溶于水中，稀释至 1000ml，此溶液 在 0～4℃可稳定保存 6 个月。此溶液的 pH 值为 7.2。 4.3.2 硫酸镁溶液，ρ(MgSO4)= 11.0g/L：将 22.5g 七水合硫酸镁（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀 释至 1000ml，此溶液在 0～4℃可稳定保存 6 个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。 4.3.3 氯化钙溶液，ρ(CaCl2)= 27.6g/L：将 27.6g 无水氯化钙（CaCl2）溶于水中，稀释至 1000ml， 此溶液在 0～4℃可稳定保存 6 个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。 4.3.4 氯化铁溶液，ρ(FeCl3)= 0.15g/L：将 0.25g 六水合氯化铁（FeCl3·6H2O）溶于水中，稀释 至 1000ml，此溶液在 0～4℃可稳定保存 6 个月，若发现任何沉淀或微生物生长应弃去。 4.4 稀释水：在 5～20L 的玻璃瓶中加入一定量的水，控制水温在(20±1)℃，用曝气装置（5.9） 至少曝气 1 小时，使稀释水中的溶解氧达到 8mg/L 以上。使用前每升水中加入上述四种盐溶液 （4.3）各 1.0ml，混匀，20℃保存。在曝气的过程中防止污染，特别是防止带入有机物、金属、 氧化物或还原物。
水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨作者：姜辉来源：《科学导报·学术》2020年第60期【摘要】测定BOD5的准确性受接种液质量直接影响。
通过制备7种接种液，采取测定空白试验样品和标准溶液，分析7种接种液的制备方法产生的接种液质量是否合格，得出结论：夏季花园土和常温自来水混合搅拌均匀后制备的接种液质量最优，有着较好稳定性。
【关键词】BOD5;接种液;接种稀释水生化需氧量（BOD5）是污染水中经常性检测的水质指标之一。
测定BOD5有多种获取接种液方法，本文测定空白试验样品和标准溶液，分析7种接种液的制备方法产生的接种液质量是否合格。
一、接种液的来源与制备根据查阅相关文献资料中，选择7种接种液预处理方法，下文将介绍7种接种液的来源与制备。
第一，取乌龟缸中的乌龟水和第二遍淘米水，按照5：1比例倒入烧杯内搅拌均匀后，使用曝气装置对混合水充氧。
溶液充氧至饱和溶解氧后，用湿润洁净纱布盖住烧杯口，放置36℃恒温环境下培养24h，培养完成后取上清液待用。
[1]第二，取乌龟缸中的乌龟水和第二遍淘米水，按照5：1比例倒入烧杯内搅拌均匀后，使用曝气装置对混合水充氧。
溶液充氧至饱和溶解氧后，用湿润洁净纱布盖住烧杯口，放置36℃恒溫环境下培养15h，培养完成后取上清液待用。
第三，取乌龟缸中的乌龟水和第二遍淘米水，按照5：1比例倒入烧杯内搅拌均匀后，使用曝气装置对混合水充氧。
溶液充氧至饱和溶解氧后，用湿润洁净纱布盖住烧杯口，放置36℃恒温环境下培养4h，培养完成后取上清液待用。
第四，取50g的冬季花园土，并放入500ml的常温自来水中搅拌均匀后，用湿润洁净纱布盖住烧杯口处，放置36℃恒温环境下培养15h，培养完成后取该混合溶液上清液待用。
第五，取50g的冬季花园土，并放入500ml的常温自来水中搅拌均匀后，用湿润洁净的白色纱布完整盖住烧杯口，放置20℃恒温环境下培养4h，培养完成后取上清液待用。
第六，取50g的室内温度约20℃的家养花盆土，并放入500ml的常温自来水中搅拌均匀后，用湿润洁净纱布盖住烧杯口，放置20℃恒温环境下培养4h，培养完成后取上清液待用。
BOD5测定稀释与接种法关键技术(精)
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国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库
BOD5测定稀释与接种法关键技术
2.稀释与接种法原理
BOD5是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗 处培养5d分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度DO1和DO2，则：
BOD5（mg/L）= DO1−DO2 ①稀释：有机物含量过高（BOD5>6 mg/L）的样品需适当稀释后测定； ②接种：不含或含微生物少的工业废水（如酸性废水、碱性废水、高温 废水、冷冻保存废水和氯化处理废水等）应接种后测定BOD5以引进能 分解废水中有机物的微生物。
BOD5测定稀释与接种法关键技术
10.空白试样
（1）稀释法测定：空白试样为稀释水，需要时每升稀释水中加 入2ml丙烯基硫脲硝化抑制剂； （2）稀释接种法测定：空白试样为接种稀释水，必要时每升接 种稀释水中加入2 ml丙烯基硫脲硝化抑制剂。
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BOD5测定稀释与接种法关键技术
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国家职业教育水环境监测与治理专业教学资源库
BOD5测定稀释与接种法关键技术
6.BOD5水样采集
（1）水样应充满并密封于棕色玻璃瓶中，样品量>1000 ml； （2）密封于棕色玻璃瓶的水样应在0～4℃的暗处运输和保存， 并于24 h内尽快分析； （3）24 h内不能分析的水样应冷冻保存，分析前样品需解冻、 均质化和接种。
定前均需将样品搅拌均匀。
（4）除藻类：含大量藻类的样品，测定前要用1.6μm滤孔的滤膜过滤。
（5）补充营养盐：电导率<125μS/cm的原水样，需加入适量等体积的四种营养
盐溶液，使其电导率大于125μS/cm 。
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五日生化需氧量的测定稀释接种法课件
规范操作
严格遵守操作规程，确保每个 步骤都准确无误，可以减小操 作误差。
菌种纯化
对菌种进行纯化处理，确保菌 种的纯度和活性，可以减小菌 种误差。
浓度梯度，测定对应的五日生化需氧量值，从而确定最佳的接种物浓度。
03
接种物浓度的应用范围
不同的水样和不同的实验条件下，适宜的接种物浓度可能不同，因此在
实际应用中需要根据具体情况选择适宜的接种物浓度。
03
实验材料和步骤
实验材料
稀释接种法测定五日生化需氧量所需的仪器和试剂
溶解氧测定仪、恒温水浴、稀释接种管、接种环、接种针、恒温培养箱、五日生化需氧量 标准样品等。
菌种误差
接种的菌种可能存在误差，如菌种不 纯或活性不足等，需要对菌种进行纯 化和活性验证。
减小误差的方法
校准仪器
对实验中所使用的仪器进行校 准和验证，可以减小仪器误差。
控制环境
对实验环境中的温度、光照、 湿度等环境因素进行控制，可 以减小环境误差。
重复实验
通过重复实验可以减小随机误 差和偶然误差，提高实验结果 的准确性。
实验用水
蒸馏水或去离子水，用于稀释接种和培养基制备。
接种菌种
适合的微生物菌种，用于消耗水样中的溶解氧。
实验步骤
1. 准备稀释接种管 将接种环和接种针清洁干净，然后放入恒温水浴中加热灭 菌。每个接种管中加入适量的灭菌培养基，并用灭菌的接 种针将菌种接种到培养基中。
2. 稀释样品 将待测水样进行适当的稀释，以便在接种管中得到适合的 接种量。
结果计算
根据实验数据，计算每个稀释度 的溶解氧减少量。
使用适当的公式计算五日生化需 氧量（BOD5），通常采用平均
值法或最大值法。
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨【摘要】本研究旨在探讨在测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性。
在我们阐述了研究背景和研究意义。
在我们探讨了直接采集自然水体、自制接种液和商业接种液三种获取接种液的方法，并详细介绍了实验步骤和实验对比结果。
在我们讨论了不同取得接种液的途径，对实验结果进行了分析，并展望了未来研究的方向。
通过本研究，我们可以更好地理解不同方法获取接种液对于BOD5测定的影响，为环境水质监测提供参考依据。
【关键词】测定BOD5、接种液、可行性、自然水体、自制接种液、商业接种液、实验步骤、实验对比结果、取得途径、实验结果分析、研究展望。
1. 引言1.1 研究背景BOD5是水质指标中常用的参数之一，用来反映水体中的有机物污染程度。
测定BOD5时，接种液的选择对实验结果影响很大。
目前常用的获取接种液的方法有直接采集自然水体、自制接种液和使用商业接种液。
每种方法都有其优缺点，需要对其可行性进行深入探讨。
研究背景部分我们将探讨各种获取接种液的方法的优劣势，为后续实验对比结果的分析提供依据。
通过比较不同途径获取接种液对BOD5实验结果的影响，可以得出最适合实验需要的接种液来源。
这样可以为今后的BOD5测定实验提供更具有实用性和准确性的方法。
对于研究BOD5时不同获取接种液方法的可行性进行探讨具有重要的意义。
1.2 研究意义测定BOD5是水环境监测中一项重要的指标，能够反映水体中有机物的污染程度和污染源的影响。
选择合适的接种液对BOD5的准确性和可靠性有着至关重要的影响。
通过研究不同获取接种液方法的可行性，可以为BOD5测定提供更多选择，提高测试的可靠性和准确性。
研究也可以为减少实验成本和简化操作流程提供更多思路。
通过比较不同获取接种液方法的实验结果，可以更好地了解它们的优缺点，为实际应用提供参考和建议。
研究对于水环境监测领域具有一定的理论和实践意义。
希望通过本研究的探讨，能够为BOD5测定方法的改进和优化提供一定的参考和借鉴，进一步推动水环境质量监测工作的发展。
五日生化需氧量测定中选择优良接种液的重要性
五日生化需氧量测定中选择优良接种液的重要性摘要：生化需氧量是水质环境监测的重要参数，是水体受污染程度的重要指标之一。
接种稀释水是五日生化需氧量质量控制的关键，主要介绍了接种液的来源，稀释接种水的制备方法，BOD5 测量实例。
结果显示此法制备的稀释水在测量BOD5时得到的分析结果准确可靠。
关键词：BOD5；接种液；稀释水；溶解氧生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5形式表示。
对于不含或少含微生物的工业废水，包括酸性废水，碱性废水、高温废水或经氯化处理的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解水中有机物的微生物。
BOD5的测定过程长达5天，当实验失败时，由于样品的时效性问题，很多测定难以重新进行，导致无法报出准确分析数据。
获得含有足够微生物的接种稀释水，是（BOD5）分析能否顺利进行的关键因素之一。
1、接种液来源①含有城市污水的河水或湖水，河水或湖水10-100 ml；②污水厂进水口，污水1—10ml。
2、接种液的加入量①城市污水的河水或湖水，每1L稀释水中接种液的加入量为60mL。
②污水厂进水，每1L稀释水中接种液的加入量为10mL。
3、制备稀释水所用试剂①磷酸盐缓冲溶液：将8.5g磷酸二氢钾、21.8g磷酸氢二钾、33.4g七水合磷酸氢二钠、1.7g氯化钠溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH值为7.2.②硫酸镁溶液：将22.5g七水合硫酸镁溶于水中稀释至1000mL。
③氯化钙溶液：将2.76g无水氯化钙溶于水中稀释至1000mL。
④氯化铁溶液：将0.25g六水合氯化铁溶于水中稀释至1000mL。
4、稀释水制备稀释水的质量是分析好标样的前提条件。
五日生化需氧量(BOD5)测定中接种液的几种获取方法
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表% 水样号 $ % + ! ’ 2 5 4
空白实验 ()*’ 值 培养时间 1 天 培养前溶解氧 -. ’ ’ ’ ’ ’ ’ ’ ’ ’# %! 2# ’% 2# ’% 2# &% 2# &% 2# &% 2# &% 2# &% / 0 $ 培养后溶解氧 -. !# 2& 2# +2 2# +2 ’# 52 ’# 52 ’# 52 ’# 52 ’# 52 / 0 $ ()*’ 测定值 -. &# 2! &# $2 &# $2 &# %2 &# %2 &# %2 &# %2 &# %2 / 0$
分析的实例说明用这此方法配制的接种稀释水进行标准样品的考核空白实验值的测定和控制样品及工业和生活废水的分析均获得了满意的分析结果空白实验值的测定笔者在分析的工作中用花园土浸出液和城市生活污水为接种液做空白实验水样号培养时间1水样号培养时间1标准样品的分析笔者曾参加过玉溪十五规划抚仙湖入湖河流实际样品考核在考核过程中笔者分别采用上述几种法对接种稀释水进行了配制并用其对样品进行了接种稀释现将结果选列于表用花园土浸出液和城市生活污水为接种液考核样品分析结果水样号水样稀释培养前滴定空白液培养前水样稀释培养后绝对偏差相对偏差为接种稀释水在培养液中所占比例为标准样品在培养液中所占比例其中相对误差中的负号已省略控制样品的分析为检验这些方法配制的接种稀释水的质量用葡萄糖3的控制样随成批样品一同分析分别称取在8干燥的葡萄糖谷氨酸各
!# %" 标准样品的分析
笔者曾参加过玉溪 “十五规划” 抚仙湖入湖河流 ()*’ 实际样品考核， 在考核过程中， 笔者分别采用上 述几种 法对接种稀释水进行了配制， 并用其对样品进行了接种稀释， 现将结果选列于表 + 中# 从表中可 见， 所有考核样品的分析结果均在样品保证值的范围内， 相对误差均较小 #
水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法
水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法HJ505-20091. 适用范围1.1 本方法适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
1.2 本方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2 mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与接种法的测定上限为6000mg/L。
2. 术语和定义五日生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是分解有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
条件为（20±1）℃培养5天，分别测定样品培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。
3. 方法原理将水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h或（2+5）d±4 [先在0~4℃的暗处培养2d，接着在（20±1）℃的暗处培养5d，即培养（2+5）d]，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量。
若样品中的有机物含量较多，BOD5的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化出力等的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质是，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。
4. 试剂和材料分析时，只采用公认的分析纯试剂和蒸馏水或同等纯度的水（在全玻璃装置中蒸馏的水或去离子水），水中含铜不应高于0.01mg/L，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。
4.1 接种液取POL YSEED 胶囊1 粒溶于装有250ml稀释水的烧杯中。
将烧杯置于磁力搅拌器上搅拌曝气1h。
曝气结束，放置0.5h后倾出全部清液，将该清液置于磁力搅拌器上搅拌，此接种液最多能放置二天。
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨
BOD5是水体中有机物质被微生物分解的能力的参数之一。
对于测定水体中BOD5的方法，获取接种液是一个重要的环节。
本文将探讨几种获取接种液方法的可行性。
一、田野现场采集接种液
田野现场采集接种液是一种常见的获取接种液方法。
其优点是接种液来源真实可靠，
能够反映当地环境的微生物特征；同时，采集和运输成本也比较低。
但是，该方法也存在
一些缺点：田野环境和季节变化等因素会影响接种液的质量和数量，导致接种液质量不稳定；采集过程中不可避免地会夹杂其他微生物，使得接种液中的目标微生物比例不纯。
二、实验室培养接种液
实验室培养接种液是一种较为常见的获取接种液方法。
该方法通过将当地水样或者废
水中的微生物在实验室中培养、扩展，然后制成接种液进行BOD5测定。
该方法的优点是操作简单，能够稳定获得高质量的接种液。
但是，该方法也存在一些缺点：由于水样中的微
生物具有一定的适应性，获取的接种液培养一段时间后可能产生失活和死亡的现象；同时，实验室培养接种液也无法完全反映原生态水环境中微生物的特征。
三、药店购买接种液
上述三种方法都有其优缺点，选择合适的接种液获取方法需要根据实际情况进行选择。
无论使用哪种方法，都需要在获取完接种液之后进行检测，以保证接种液的质量和稳定性。
只有获得了高质量的接种液才能保证BOD5测定结果的准确性。
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨
测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性探讨【摘要】本文通过探讨测定BOD5时几种获取接种液方法的可行性，旨在为该领域提供有效的实验方法。
在研究背景中，介绍了BOD5测定的重要性和应用价值；研究目的在于比较不同获取接种液方法的优劣；研究意义在于为环境监测和水质评估提供科学依据。
在分别探讨了直接从自然水体中获取接种液、使用活性污泥、废水、纯培养后的活性污泥以及市售活性污泥等方法。
通过比较它们的适用性，提出了方法选择建议，并展望未来的研究方向。
本研究为BOD5测定方法提供了实用性和可操作性的建议，有望在环境监测领域有所贡献。
【关键词】关键词：BOD5、接种液、测定、方法、可行性、自然水体、活性污泥、废水、纯培养、市售、比较、建议、展望。
1. 引言1.1 研究背景水体中的有机物主要来源于植物和动物的代谢物，以及工业和生活废水的排放。
这些有机物的分解产生的氧化物及微生物的氧化作用导致水体中氧气含量下降，威胁水体中的生态系统。
BOD5（5天生化需氧量）是评价水体有机物污染程度的重要指标之一，能够反映出水体中微生物对有机物的降解能力。
在BOD5的测定中，需要使用接种液来激活水样中的微生物，促进有机物的分解。
而不同的接种液来源可能会对BOD5的测定结果产生影响，因此有必要对不同获取接种液方法的可行性进行探讨。
从自然水体中获取接种液是一种常见的方法，但由于水体中微生物种类繁多，接种液的性质不稳定，可能会导致测定结果不准确。
使用活性污泥接种液可获得较高的微生物活性，但操作复杂且成本较高。
废水接种液和纯培养后的活性污泥接种液相对容易获取，但对水质要求较高。
市售活性污泥接种液具有较高的稳定性和活性，但价格较高。
对不同接种液方法的适用性进行比较和评估，选择合适的接种液方法对BOD5的准确测定具有重要意义。
未来可进一步研究新型接种液的开发，提高BOD5测定的准确性和效率。
1.2 研究目的研究目的是为了探讨不同获取接种液方法在测定BOD5时的可行性，并比较它们的适用性，为相关领域的研究和实践提供参考。
五日生化需氧量的检测方法
五日生化需氧量的检测方法生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。
当其污染水域后，这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧，从而破坏水体中氧的平衡，使水质恶化。
水体因缺氧造成鱼类及其他水生生物的死亡。
水体中所含的有机物成分多而杂，难以一一测定其成分。
人们常常利用水中有机物在肯定条件下所消耗的氧，来间接表示水体中有机物的含量，生化需氧量即属于这类的一个紧要指标。
生化需氧量的经典测定方法，是稀释接种法。
测定生化需氧量的水样，采集时应充分并密封于瓶中。
在0——4摄氏度下进行保存。
一般应在6h内进行分析。
若需要远距离转运。
在任何情况下，贮存时间不应超过24h。
概述方法原理生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质、特别是有机物所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。
此生物氧化全过程进行的时间很长，如在20摄氏度下培育时，完成次过程需要100多天。
目前国内外普遍规定于20加减1摄氏度培育5d，分别测定样品培育前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的毫克/升表示。
对某些地面水及大多数工业废水，因含较多的有机物，需要稀释后再培育测定，以降低其浓度和保证有充分的溶解氧。
稀释的程度应使培育中所消耗的溶解氧大于2mg/L，而剩余溶解氧在1mg/L以上。
为了保证水样稀释后有充足的溶解氧，稀释水通常要通入空气进行曝气，便稀释水中溶解氧接近饱和。
稀释水中还应加入肯定量的无机营养盐和缓冲物质，以保证微生物生长的需要。
对于不含或少含微生物的工业废水，其中包括酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理的废水，在测定BOD5时应进行接种，以引入能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在着难于被一般生活污水中的微生物以正常速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微生物引入水样中进行接种。
本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L，zui大不超过6000mg/L的水样。
当水样BOD5大于6000mg/L，会因稀释带来肯定的误差。
环境监测 生化需氧量的测定
实验七生化需氧量的测定生化需氧量(BOD)是指在规定的条件下，微生物分解水中某些可氧化物质(主要是有机物)的生物化学过程中消耗溶解氧的量，用以间接表示水中可被微生物降解的有机类物质的含量，是反映有机物污染的重要类别指标之一。
测定BOD的方法有稀释接种法、微生物传感器法、活性污泥曝气降解法、库仑滴定法、测压法等。
本实验采用稀释接种法测定污水的BOD。
该方法也称五天培养法(BOD5)，即取一定量水样或稀释水样，在20℃±1℃培养五天，分别测定水样培养前、后的溶解氧，二者之差为BOD5值，以氧的mg/L表示，其相关内容参阅教材第二章第八节。
一、实验目的和要求1．掌握用稀释接种法测定BOD5的基本原理和操作技能。
2．复习第二章第八节中的相关内容，提出为保证测定准确度，应当控制好哪些条件。
二、仪器1．恒温培养箱。
2．5～20L细口玻璃瓶。
3．1000～2000mL量筒。
4．玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长200mm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板。
5．溶解氧瓶：200～300mL，带有磨口玻璃塞，并具有供水封用的钟形口。
6．虹吸管：供分取水样和添加稀释水用。
三、试剂1．磷酸盐缓冲溶液：将8.58磷酸二氢钾(KH2PO4)，2. 75g磷酸氢二钾(K 2HPO4)，33.4g磷酸氢二钠(Na2HPO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于水中，稀释至1000mL。
此溶液的pH 应为7.2。
2．硫酸镁溶液：将22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释至1000mL。
3．氯化钙溶液；将27.5g无水氯化钙溶于水，稀释至1000mL。
4，氯化铁溶液；将0.25g氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水，稀释至1000mL。
5．盐酸溶液(0.5mol/L)：将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀释至100mL。
6．氢氧化钠溶液(0.5mol/L)：将20g氢氧化钠溶于水，稀释至1000mL。
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从上述分析实例可看出，在用上述方法配制接种稀释水，可以得到满意结果，准确度高，误差较小，而且由此获得接种液简单易行且有很好稳定性，比较适合我厂废水性质，方法可行。
样品名称
稀释倍数
空白样品BOD5值mg/L
样品BOD5测定值mg/L
进口
20
0.49
121
进口
40
0.49
124
调节池
20
0.64
89
调节池
40
0.64
86
酸化池
25
0.58
69
酸化池
50
0.58
70
出水
10
0.72
15
出水
20
0.72
12
由表3数据可见，以同种接种稀释水不同的稀释倍数分析同一废水样品所得分析结果相差不大，这在BOD5分析中已经相对比较小，因此用上述方法接种稀释水用来测定我厂BOD5值结果可信，准确度较高。
注：以上样品中，f1＝0.98 f2＝0.02
由表2中结果可见，所有控制样品的BOD5值均符合GB7488-87《水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法》中关于控制样品测定值范围规定。
4.3废水分析
在对污水厂进口水质分析中，用上述接种水进行接种分析所得一些数据列于表3中
表3废水样品测定结果
表1空白试验BOD5值
编号
培养时间
培养前溶解氧mg/L
培养后溶解氧mg/L
BOD5测定值mg/L
1
5
8.40
7.67
0.73
2
5
8.36
7.92
0.44
3
5
8.17
7.45
0.72
4
5
8.217.520.69 Nhomakorabea5
5
8.09
7.21
0.88
6
5
8.15
7.84
0.31
7
5
8.26
7.41
0.85
8
5
8.23
驯化废水获取接种液测定生化需氧量
张连秀王鹏
（良村开发区污水处理厂河北石家庄052165）（河北师范大学河北石家庄）
摘要接种稀释水质量直接决定生化需氧量测定准确与否的关键因素。介绍了直接用工业废水驯化微生物以培养适合测定生化需氧量的接种液，并通过实践分析培养方法的可行性和测定结果的准确性。
关键词生化需氧量BOD5驯化接种液
表2控制样品测定结果
样品名称
培养前溶解氧mg/L
培养后溶解氧mg/L
空白样品BOD5值mg/L
样品控制值mg/L
样品理论值mg/L
葡萄糖－L谷氨酸
7.75
3.04
0.47
212
180～230
葡萄糖－L谷氨酸
7.97
3.46
0.62
195
180～230
葡萄糖－L谷氨酸
8.02
3.21
0.79
201
180～230
1接种液来源
取自污水厂总进口24小时取样器中混合水样，每天200ml，连续取10天。
2接种液的预处理
将1000ml蒸馏水和第一天取得的200ml水样混合置于相应大容器中，连续不间断进行曝气充氧，每天在同一时间在取样器中取样向该容器中倒入水样，连续取样10天。当容器中的水样出现大量絮凝物，水样明显由混浊变澄清时，说明接种液就可以进行接种。
生化需氧量指在规定条件下微生物分解存在水中的有机物所进行生物化学过程所需要的溶解氧的量。此生物氧化过程如果在20℃培养时，需要100多天。目前国内外普遍采用在20℃±1℃下培养5天，分别测定培养前后的溶解氧，二者之间差值即为BOD5值，以mg/L表示。
笔者长期在石家庄经济技术开发区污水处理厂从事BOD5分析工作，而污水厂主要接收开发区内企业的工业废水和少量生活污水，其又以制药废水为主。制药废水成分复杂，有很强的微生物毒性。因此在测定BOD5过程中，需要将驯化的微生物引入水样进行接种。经过长期实践积累，总结出一种驯化微生物培养接种液的方法。该方法简单易行且以此测得的BOD5值较准确。
7.62
0.61
由表1可见，所有空白试验BOD5值均在方法规定的0.3～1.0mg/L范围之内。
4.2控制样品的分析
为了核验该方法配制的接种稀释水的质量，用葡萄糖、L－谷氨酸配制成的BOD5值为180～230mg/L的控制样品随成批样品一同分析。分别称取103℃干燥1h的葡萄糖、L－谷氨酸各（150±1）mg溶于水中，配制成1000ml的溶液，混合均匀，分析样品的同时将20ml葡萄糖－谷氨酸的标准溶液用同一种接种稀释水稀释至1000ml，按照BOD5的操作步骤操作。部分样品分析结果列于表2。
3接种稀释水的配制
在稀释被测水样前配制接种稀释水。将培养好的接种液取上清液作为接种液，每升稀释水中加入5ml接种液。
4分析的实例说明
用此法配制的接种稀释水进行空白试验和控制样品及工业废水的分析均获得满意的分析结果。
4.1空白试验值的测定
笔者在进行我厂BOD5分析工作中，用上述接种液做空白试验所得结果列于表1。