微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察分解
微生物学实验一 微生物制片及形态观察
实验一微生物制片及形态观察一、显微镜油镜的使用显微技术是微生物检验技术中最常用的技术之一。
显微镜的种类很多，在实验室中常用的有：普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜和电子显微镜等。
1. 结构光学显微镜是由光学放大系统和机械装置两部分组成。
光学系统一般包括目镜、物镜、聚光器、光源等；机械系统一般包括镜筒、物镜转换器、镜台、镜臂和底座等（图1－1）。
图1－1 光学显微镜结构图标本的放大主要由物镜完成，物镜放大倍数越大，它的焦距越短。
焦距越小，物镜的透镜和玻片间距离（工作距离）也小。
油镜的工作距离很短，使用时需格外注意。
目镜只起放大作用，不能提高分辨率，标准目镜的放大倍数是十倍。
聚光镜能使光线照射标本后进入物镜，形成一个大角度的锥形光柱，因而对提高物镜分辨率是很重要的。
聚光镜可以上下移动，以调节光的明暗，可变光栏可以调节入射光束的大小。
显微镜用光源，自然光和灯光都可以，以灯光较好，因光色和强度都容易控制。
一般的显微镜可用普通的灯光，质量高的显微镜要用显微镜灯，才能充分发挥其性能。
有些需要很强照明，如暗视野照明、摄影等，常常使用卤素灯作为光源。
2. 原理显微镜的放大效能（分辨率）是由所用光波长短和物镜数值口径决定，缩短使用的光波波长或增加数值口径可以提高分辨率，可见光的光波幅度比较窄，紫外光波长短可以提高分辨率，但不能用肉眼直接观察。
所以利用减小光波长来提高光学显微镜分辨率是有限的，提高数值口径是提高分辨率的理想措施。
要增加数值口径，可以提高介质折射率，当空气为介质时折射率为1，而香柏油的折射率为1.51，和载片玻璃的折射率（1.52）相近，这样光线可以不发生折射而直接通过载片、香柏油进入物镜，从而提高分辨率。
显微镜总的放大倍数是目镜和物镜放大倍数的乘积，而物镜的放大倍数越高，分辨率越高。
3. 使用方法1）低倍镜观察先将低倍物镜的位置固定好，然后放置标本片，转动反光镜，调好光线，将物镜提高，向下调至看到标本，再用细调对准焦距进行观察。
实验一显微镜的使用及微生物形态的观察
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果 • 实验总结
01 实验目的
掌握显微镜的使用方法
掌握显微镜的基本操作
包括调整焦距、照明调节、移动载玻片等。
了解显微镜的保养和清洁
定期清洁显微镜，保持其良好的工作状态。
熟悉不同倍率下的观察效果
04
原生动物属于真核生物，根据形态和运动方式可分为鞭毛虫、变形虫、 纤毛虫等。
微生物在自然界中的作用和意义
分解有机物
微生物在自然界中起到分解有机物的作用，将动 植物残体和排泄物等有机物分解成简单的无机物 ，如二氧化碳和水，为其他生物提供营养。
促进植物生长
一些微生物能够促进植物的生长和发育，如根瘤 菌能够与豆科植物共生形成根瘤，为植物提供氮 素营养；菌根真菌能够与植物根系形成共生关系 ，为植物提供磷素营养等。
03 实验步骤
显微镜的准备
01
02
03
清洁显微镜
使用柔软的湿布擦拭显微 镜的表面，确保显微镜干 净无尘。
检查显微镜部件
确保显微镜的目镜、物镜、 载物台等部件完好无损， 没有损坏或松动。
调整光源
打开显微镜的光源，确保 光源亮度适中，没有闪烁。
样本的制备
选择样本
选择要观察的微生物样本，如细菌、藻类、原生 动物等。
详细地观察。
观察和记录微生物形态
观察记录
在观察过程中，注意记录不同微生物的形态特征，并 绘制简单的显微镜图像或使用相机拍摄记录。
分析结果
根据观察记录，分析微生物的种类、数量和分布情况， 并得出实验结论。
整理器材
实验结束后，清洁并整理好显微镜和相关器材，以便 下次使用。
微生物学实验教程
微生物学实验内容实验一 . 显微镜的使用及细菌的简单染色实验二 . 细菌的革兰氏染色实验三 . 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别实验四 . 酵母菌的数量测定实验五 . 酵母菌的大小测定实验六 . 微生物菌落的观察实验实验七 . 霉菌的形态观察实验八 . 培养基的制备与灭菌实验九 . 放线菌的形态及菌落特征的观察实验十 . 微生物的纯种分离培养实验一 . 普通光学显微镜的使用一、目的要求1. 学习并掌握油镜的原理和使用方法。
2. 复习普通台式显微镜的结构、各部分的功能和使用方法。
二 . 显微镜的基本结构及油镜的工作原理现代普通光学显微镜利用目镜和物镜两组透镜系统来放大成像，故又常被称为复式显微镜。
它们由机械装置和光学系统两大部分组成。
在显微镜的光学系统中，物镜的性能最为关键，它直接影响着显微镜的分辨率。
而在普通光学显微镜通常配置的几种物镜中，油镜的放大倍数最大，对微生物学研究最为重要。
与其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻片与镜头之间加滴镜油，这主要有如下二方面的原因：1. 增加照明亮度油镜的放大倍数可达 100Χ，放大倍数这样大的镜头，焦距很短，直径很小，但所需要的光照强度却最大。
从承载标本的玻片透过来的光线，因介质密度不同（从玻片进入空气，再进入镜头），有些光线会因折射或全反射，不能进入镜头，致使在使用油镜时会因射入的光线较少，物像显现不清。
所以为了不使通过的光线有所损失，在使用油镜时须在油镜与玻片之间加入与玻璃的折射率（n=1.55）相仿的油镜（通常用香柏游，其折射率 n=1.52）。
2. 增加显微镜的分辨率显微镜的分辨率或分辨力 (resolution or resolving power) 是指显微镜能辨别两点之间的最小距离的能力。
从物理学角度看，光学显微镜的分辨率受光的干涉现象及所用物镜性能的限制，可表示为：（公式 P16 ）式中λ= 光波波长；NA=物镜的数值孔径值。
光学显微镜的光源不可能超出可见光的波长范围（ 0.4--0.7μm），而数值孔径值则取决于物镜的镜口角和玻片与镜头间介质的折射率，可表示为： NA=n × sin α式中α为光线最大入射角的半数。
实验一显微镜的使用及细菌形态观察
03
实验时间安排不够合理
本次实验时间安排较为紧张，导致部分同学在规定时间内未能完成实验。
建议合理安排实验时间，确保同学有足够的时间进行实验操作和观察。
对未来实验的展望与计划
拓展观察对象
了解细菌的基本形态
学习识别不同种类的细菌，了解其基 本形态特征，如球形、杆形、螺旋形 等。
通过观察不同细菌的形态，理解其在 生物学和医学领域的应用价值。
学习细菌的观察与识别
掌握细菌的染色和观察方法， 了解常用的染色技术和原理。
学习使用显微镜观察细菌的形 态、大小、排列等特征，提高 实验操作技能和观察能力。
04
革兰氏阳性菌
在显微镜下观察到革兰氏阳性 菌呈圆形或椭圆形的外观，细
胞壁厚，表面光滑。
革兰氏阴性菌
革兰氏阴性菌呈杆状或球状， 细胞壁薄，表面粗糙。
大肠杆菌
大肠杆菌呈杆状，两端钝圆， 无芽孢和鞭毛。
葡萄球菌
葡萄球菌呈葡萄串状排列，无 芽孢和鞭毛。
细菌形态特征的描述与分类
根据革兰氏染色结果，可以将细 菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴
性菌两类。
根据细菌的形状、大小、排列方 式等特征，可以初步判断细菌的
种类。
不同种类的细菌具有不同的形态 特征，如球菌、杆菌、螺旋菌等。
实验结论的总结与归纳
通过观察显微镜下细菌的形态特 征，可以初步判断细菌的种类。
革兰氏染色是区分革兰氏阳性菌 和革兰氏阴性菌的重要方法。
了解不同种类细菌的形态特征对 于临床诊断和治疗具有重要意义。
增强团队合作意识
在实验过程中，我与同学们相互协作， 共同完成实验任务，增强了团队合作 意识。
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告
显微镜的使用及细菌形态结构的观察报告一、引言显微镜是一种用来观察微小物体的仪器，它可以放大物体的细节，使我们能够看到肉眼无法观察到的细节。
在生物学中，显微镜被广泛应用于研究细胞和微生物等微小生物体的结构和功能。
本报告将介绍显微镜的使用方法以及如何观察细菌形态结构。
二、材料和方法1. 显微镜：本次实验使用的是光学显微镜。
2. 细菌样本：从实验室中获取了多种不同类型的细菌样本。
3. 玻片和盖玻片：用于制作样品载玻片。
4. 意式染色剂：用于染色处理，增强对细菌形态结构的观察。
三、显微镜使用方法1. 调整光源：打开显微镜后，在透明底座上放置一个白色纸片，调整光源位置和亮度，使得纸片上呈现均匀明亮的白色。
2. 调整目镜：将目镜对准眼睛，调节焦距，使得目视舒适且清晰。
3. 调整物镜：选择合适的物镜，将其转至位置，并调节焦距，使得样品清晰可见。
4. 调整聚光镜：根据需要调整聚光镜的大小和位置，以增强样品的亮度和对比度。
四、细菌形态结构观察方法1. 制作载玻片：在干净的玻片上挤出一滴细菌悬液，在另一个玻片上盖上一张盖玻片，轻轻压紧。
2. 意式染色处理：将制作好的载玻片浸泡在意式染色剂中，静置5-10分钟。
3. 洗涤处理：用蒸馏水洗涤载玻片数次，直到洗涤后水不再有颜色。
4. 干燥处理：将载玻片放置在通风处晾干。
五、结果与讨论1. 观察细胞形态结构：通过显微镜观察，可以看到不同类型的细菌具有不同的形态结构。
如球菌呈圆形或半球形，链状菌呈长条状等等。
通过染色处理后观察可以更加清晰地看到这些形态特征。
2. 观察细胞大小：通过显微镜观察，可以测量细菌的大小。
不同类型的细菌大小也不同，如球菌直径一般在0.5-1微米之间，链状菌长度则在数十到数百微米之间。
3. 观察细胞结构：通过显微镜观察，可以看到一些特殊的结构，如某些细菌具有鞭毛、纤毛或胞外多聚物等附属结构。
这些结构对于细菌的运动和生长有着重要的作用。
六、实验注意事项1. 实验过程中要注意卫生和安全。
显微镜的使用和微生物的形态观察
实验内容
1、显微镜的使用 2、微生物的形态观察
普通光学显微镜的结构
由一组光学放大系统、调 节系统及机械支持系统组成。
1、机械系统部件：镜座、 载物台、物镜转换器、镜 筒和调节器等。
2、光学放大系统部件：反 光镜、聚光器、物镜和目 镜等。
显微镜的使用
用显微镜观察肉眼看不到的微生 物，但大多数微生物用高倍镜也看 不清，需要用油镜（100×）观察。 用油镜观察时，镜头必须浸入香柏 油里 。
杆状细菌代表1-大肠杆菌
螺旋菌的典型代表-钩端螺旋体
细菌的特殊结构-鞭 毛
微生物第二大类-放线菌
❖ 放线菌菌丝
放线菌轮生菌丝
螺 旋菌丝
放线菌菌丝及孢子丝
微生物的第三大类：霉菌 霉菌菌丝的典型结构-1.无隔菌丝和
有隔菌丝
霉菌菌丝的典型结构-2。根霉的假根 及孢子囊孢子
霉菌菌丝的典型结构3.青霉的青霉穗
菌落形态
菌落是由某一微生物的单个细胞或 孢子在培养基表面繁殖后形成的肉眼 可见的集落。
菌落形态在一定程度上是个体细胞 形态结构在群体上的反映。
菌落形态特征
从菌落的大小、气味、颜色、表 面有无光泽，是否透明、干燥程度、 粘稠度、菌落隆起情况、边缘是否 整齐等角度描述四大类型菌群的菌 落形态特征
观察要求
霉菌菌丝的典型结构3.曲霉的足细胞
足细胞
分生孢子
霉菌菌丝的典型结构4. 毛霉的孢子
微生物的第四大类：酵母菌
假丝
❖ 酿酒 酵母
实验要求
❖ 每位同学必须观察的涂片为： 细菌三型涂片、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、
四联球菌、八叠球菌、金黄色球菌、放线菌、 酿酒酵母、青霉、曲霉、匍枝根霉
环境微生物学-环境微生物学-实验一 显微镜使用及微生物观察
实验一：显微镜的使用及菌体形态观察一、实验目的1、掌握光学显微镜的结构、原理，学习光学显微镜的操作方法和保养。
2、观察细菌、放线菌、真核微生物的个体形态及真菌孢子类型，学习生物图的绘制。
3、学习用压滴法制作标本片。
二、实验仪器和材料显微镜、载玻片、盖玻片，75%二甲苯、吸管、烧杯，香柏油，擦镜纸、吸水纸、浮游生物网示范片：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、放线菌、酵母菌、青霉、曲霉、根霉、梨头霉、毛霉。
三、实验原理（一）显微镜的结构和光学原理显微镜分机械装置和光学系统两部分。
1、机械装置（1）镜筒：镜筒上端装目镜，下端接转换器。
镜筒有单筒和双筒两种。
单筒有直立式和后倾斜式（倾角为45o）。
双筒都是倾斜式的，并有屈光度调节装置，以备视力不同者调节使用。
两筒之间可调距离，以适应两眼宽度不同者调节使用。
（2）转换器：转换器装在镜筒的下方，其上有三个孔或四个孔。
不同规格的物镜旋转安装在各孔上，在显微镜不使用时，旋下物镜，用护盖盖住。
（3）载物台：载物台为方形（多数）或圆形的平台，中间有一光孔，孔的两侧各装一个夹片，右端夹片固定，左端夹片可旋转，载物台上还有移动器（其上有刻度标尺，用以标记玻片的位置），可纵向和横向移动，移动器的作用是夹住和移动标本片。
（4）镜臂：镜臂支撑镜筒、载物台、聚光器和调节器。
镜臂有固定式和活动式（可改变倾斜度）两种。
有弧形和折形两种。
移动显微镜时用手握住镜臂进行移动。
（5）镜座：镜座为马蹄形和方形，具有一定的质量，支撑整台显微镜，马蹄形的镜座在其上有一可旋转的反光镜。
（6）调节器：调节器包括粗螺旋调节器和细螺旋调节器。
可调节物镜与所需观察的物体之间的距离。
2、光学系统及其光学原理显微镜的总放大倍数为物镜的放大倍数和目镜放大倍数的乘积。
（1）目镜目镜一般有10×、16×两种，高级的显微镜还有5×和20×。
目镜上标有：N.A.1.25、100×、“OI”、160/0.17、0.16等字样，其中：N.A.1.25为数值孔径，100×为放大倍数，“OI”（即Oil immersion ）表示油镜、160表示镜筒长，0.17表示要求盖波片的厚度，0.16为工作距离。
实验一 显微镜油镜的使用和细菌形态的观察
实验一显微镜油镜的使用和细菌形态的观察本次实验主要介绍了显微镜油镜的使用以及细菌形态的观察。
显微镜是生物科学中最基本最必要的仪器，也被称为生命科学研究的窗口。
而观察细菌形态则是微生物学重要的研究内容之一，对于深入了解微生物的特性和分类十分关键。
一、显微镜油镜的使用1、准备工作在使用显微镜前，需要对仪器做一些准备工作，具体如下：（1）检查显微镜是否清洁干净。
使用棉花棒和无水酒精擦拭镜头和接口。
（2）插入镜片，拧紧螺丝。
注意，平光镜的凹面朝上。
（3）透镜的高度应调整至最高点，油镜周围涂上润滑油。
（4）在准备好玻片后，使用无菌针将样本划到玻片上。
2、操作步骤（1）将玻片插入载置物台。
调整光源，使其在镜片下方成圆形状。
（2）使用低倍放大的物镜，在载置物台下调整样本位置，然后转动焦点，调整到最清晰的位置。
（3）切换到高倍物镜。
在不移动载置物台的情况下，调整焦距直至视野内的细胞详细可见。
（4）将油镜轻轻接触载置物台上的镜片，调节光源以得到最佳观察效果。
（5）旋转调节管，使细胞从上到下等比例进入视野，观察细菌的形态、大小、数量等。
二、细菌形态的观察1、细菌分类根据细菌的细胞形态、大小、结构和移动方式等特征，可以将细菌分为不同的分类。
细菌形态既包含单细胞长条状物、圆球体等基本形态，又包括复杂的细胞、菌株组成的群体等。
常见的细菌形态有以下几种：（1）球菌（cocci）：球形或椭圆形的细胞。
（2）杆菌（bacilli）：棒状或柱状的细胞。
在实验过程中，使用显微镜观察样本，发现细菌形态上虽然存在一定的差异，但一般表现为以下情况：（1）球菌或细圆菌：呈球形，直径一般在0.5-2μm之间。
（3）螺旋菌：呈螺旋形，长度几乎无限制，直径0.5-1μm左右。
然而，即使细菌大小、形态有所不同，它们的细微结构也存在着明显的相似性，这种结构相似性在分类学上具有相当的意义。
细菌形态的观察是微生物学中非常重要的基础工作，通过观察细菌的形态、大小、数量等，能够更好地了解微生物的生长繁殖规律，对于深入研究微生物的特性、分类以及对环境的影响等方面具有非常重要的价值。
显微镜的使用及微生物形态的观察实验报告
显微镜的使用及微生物形态的观察实验报告实验介绍
在生物学领域中，显微镜是一项非常重要的工具，可以帮助我们观察
和研究微小生物的结构和形态。
本次实验旨在使用显微镜观察微生物
的形态，了解微生物的结构、特征和功能。
实验流程
首先，我们需要取得一些样本，以便观察微生物的结构和形态。
这可
以通过在自然环境中收集样本（例如河流、湖泊、土壤等）或购买商
业制备的标本来实现。
在本次实验中，我们使用了商业制备的标本，
这些标本已经是干燥的，所以需要添加液体以便观察微生物。
接下来，我们需要准备显微镜。
将显微镜调整到所需的放大倍率，然
后取出标本，并用差压计夹住标本。
将标本夹在样品挂架上，并将挂
架固定到镜台上。
将镜头对准样本，用调节钮来调整样品的焦距，使其清晰可见。
然后，根据所需的放大倍率，旋转目镜直到图像清晰。
在观察和记录样本时，应注意保护显微镜免受污染或损坏。
实验结果
通过观察样本，我们可以看到微生物的各种结构和形态。
例如，原核生物是一种单细胞生物，具有各种形状和大小，可以自由游动。
真菌是一种多细胞生物，其细胞结构和功能类似于植物，但没有叶绿素。
还可以观察到许多微生物中的特殊结构，例如细菌的鞭毛和鞭毛，它们可以帮助微生物在水中移动。
结论
通过本次实验，我们了解了显微镜的使用方法，学习了微生物的结构和形态。
这对于我们理解微生物的功能和作用是非常重要的，可以帮助我们更好地控制和利用微生物。
此外，本次实验还帮助我们掌握了观察和记录生物的技能，这对于我们的未来学习和研究是非常有帮助的。
试验一显微镜的使用及微生物形态的观察
三、实验步骤
(一)显微镜的结构和各部分的作用 机械部分主要包括:
1.镜筒 2.载物台 3.调节器
光学部分主要包括:
1.接目镜 2.接目镜 3.集光器 4.反光镜
显微镜的结构
三、实验步骤
(二)显微镜的使用和保护方法 1.低倍镜的使用方法 2.高倍镜的使用方法
三、实验步骤
3.显微镜的保护法
一、实验目的
了解活性污泥或生物膜中微生物及微型动物 的数量及生长状况。
二、材料与器皿
(一)显微镜、载玻片、盖玻片、微型动物计数板； (二)活性污泥(或生物膜)样品。
三、方法与步骤
(一)压片标本的制备 1. 取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放在洁净 的载玻片中央(如混合液中污泥较少，可待其沉淀 后，取沉淀的活性污泥一小滴放在载玻片上；如 混合液中污泥较多，则应稀释后进行观察)。
实验一 显微镜的使用及微生物 形态的观察
一、实验目的
1.学习普通光学显微镜的使用方法。 2.结合生物滤池生物膜及曝气池活性污泥的观
察,认识原生动物、菌胶团等微生物的形态,并 学习测量微生物大小的方法。
二、实验器材
1.生物滤池滤料、活性污泥法曝气池混合液。 2.显微镜、目测微尺、物测微尺、载玻片、
(1)显微镜应放置在干燥的地方,使用时避免 强烈的日光照射。
(2)接物镜或接目镜不清洁时,应当用擦镜纸 或软绸揩擦。
(3)用完显微镜后,应当立即放到镜匣中。
三、实验步骤
(三)活性污泥和生物膜的观察
1.标本的制备
(1)活性污泥
取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放 在洁净的载玻片的中央(如混合液中污泥较 少，可待其沉淀后,去沉淀污泥一小滴加到 载玻片上；如混合液中污泥较多，则应稀 释后进行观察)显微镜的使用及微生物形态 的观察。
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法
实验一显微镜的使用、细菌形态和结构观察与革兰氏染色法一、显微镜的使用普通光学显微镜是一种精密的光学仪器。
以往最简单的显微镜仅由几块透镜组成，而当前使用的显微镜由一套透镜组成。
普通光学显微镜通常能将物体放大1500—2000倍。
（一）显微镜的构造普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置，一为光学系统，这两部分很好的配合，才能发挥显微镜的作用。
1、显微镜的机械装置显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件（1）镜座镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成。
在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大系统部件的基础。
（2）镜筒镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与接物镜（装在转换器下）间的暗室。
从物镜的后缘到镜筒尾端的距离称为机械筒长。
因为物镜的放大率是对一定的镜筒长度而言的。
镜筒长度的变化，不仅放大倍率随之变化，而且成像质量也受到影响。
因此，使用显微镜时，不能任意改变镜筒长度。
国际上将显微镜的标准筒长定为160mm，此数字标在物镜的外壳上。
（3）物镜转换器物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物镜（低倍、高倍、油镜）。
Nikon显微镜装有四个物镜。
转动转换器，可以按需要将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的接目镜构成一个放大系统。
（4）载物台载物台中央有一孔，为光线通路。
在台上装有弹簧标本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使得镜检对象恰好位于视野中心。
（5）推动器是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿轴的金属架构成的，好的显微镜在纵横架杆上刻有刻度标尺，构成很精密的平面座标系。
如果我们须重复观察已检查标本的某一部分，在第一次检查时，可记下纵横标尺的数值，以后按数值移动推动器，就可以找到原来标本的位置。
（6）粗动螺旋粗动螺旋是移动镜筒调节接物镜和标本间距离的机件，老式显微镜粗螺旋向前扭，镜头下降接近标本。
新近出产的显微镜（如Nikon显微镜）镜检时，右手向前扭载物台上升，让标本接近物镜，反之则下降，标本脱离物镜。
《食品微生物》实验一 ：显微镜的构造、使用及细菌基本形态观察20190917
金黄色葡萄球菌 大肠杆菌 炭疽芽孢杆菌
细菌三型片 Leabharlann 放线菌细菌名称形态？例如长杆状、 短杆状 、球状。
曲 霉
青霉菌
分生孢子
六、显微镜的擦拭与维护观察结束后，先降载物台，取下载玻片，用擦镜纸擦周围的油。用擦镜纸分别擦拭物镜和目镜。先擦镜头上的油，沾二甲苯擦，擦镜纸再擦。 将物镜转成倒“八”字形，低倍镜向前，高倍镜向后。 同时把聚光镜降下，以免物镜和聚 光镜发生碰撞危险。把显微镜放回原处。 “两低一个倒八字”
光学系统：物镜：是显微镜中最重要的部分，由许多块透镜组成。其作用是将标本上的待检物进行放大，形成一个倒立的实像，一般显微镜有3~4个物镜，根据使用方法的差异可分为干燥系和油浸系两组。干燥系物镜包括低倍物镜（4~10x）和高倍物镜（40~45x），使用时物镜与标本之间的介质是空气；油浸系物镜（90~100x）在使用时，物镜与标本之间加有一种折射率与玻璃折射率几乎相等的油类物质（香柏油）作为介质。目镜：一般由2~3块透镜组成。其作用将由物镜所形成的实像 进一步放大，并形成虚像而印入眼帘。一般显微镜的标 准目镜是10x。
四、操作步骤1.接通电源：根据所用物镜的放大倍数，调节光亮度调节钮、 调节虹彩光圈的大小，使视野内的光线均匀、 亮度适宜。2.油镜的使用（观察细菌）：在待检部位加一滴香柏油，固定到载物台上。高倍镜（油镜）使用方法：首先，将油镜转入光路，将聚光镜升至最高位置并开足光圈，获得较强光线。其次，侧面注视，用粗调节钮小心上升载物台，使油镜浸到香柏油内，并压住油向四周扩散，再稍微上升载物台，镜头有压缩迹象。最后，眼睛对准目镜，先用粗调焦旋钮慢慢下降载物台，然后再用细调焦旋钮调出清晰图像为止，仔细观察并作记录。如果油镜离开油面仍未找到，重复上述过程。
实训1普通光学显微镜的使用微生物形态学
实训1普通光学显微镜的使用微生物形态学普通光学显微镜是一种常见的显微镜，常用于观察微生物的形态学。
在微生物形态学研究中，可以利用普通光学显微镜观察微生物的形态、结构和组织等特征，从而对微生物的分类、形态变化、生活习性以及疾病诊断等方面进行研究。
使用普通光学显微镜观察微生物形态的过程需要注意以下几个步骤。
首先，将需要观察的样品制备成薄片。
在制备样品时，可以选择将微生物直接涂布在载玻片上或者将微生物培养液滴在载玻片上，然后再覆盖一张盖玻片，使得样品薄而均匀。
之后可以用染色法对微生物进行染色增强对比度，便于观察。
接下来，将载玻片放置在显微镜的载物台上，并逐渐转动调整光源。
适当调整光源可以提高图像的清晰度。
可以使用孔光阑和光源亮度调节装置来调整光线的强度和均匀度，以便获得清晰的图像。
在观察时，需要正确调整镜头的焦距。
首先用低倍镜观察确定感兴趣区域的位置，然后再调整为高倍镜进行观察。
在调整焦距时，可以用粗调控制大范围的焦距变化，然后再用细调进行微小的调整，以获得清晰的图像。
观察过程中，可以通过调整机械臂和旋钮来移动载物台，以便于观察样品不同区域的微生物形态。
可以通过连续观察多个视野来全面了解微生物的形态和结构。
在观察过程中，需要将目镜对准自己的眼睛，并通过调整聚合度和检览度来获得舒适的观察体验。
同时，还需要注意保持目镜和物镜的清洁，以避免灰尘影响观察效果。
观察结束后，应当将载玻片等清理干净，并将显微镜关闭。
同时，需要将观察结果记录下来，并进行进一步的分析和研究。
总之，普通光学显微镜在微生物形态学中的应用是非常重要的。
通过合理的调整显微镜的参数，可以观察到微生物的形态、结构和组织等特征，进而对微生物进行分类和研究。
掌握普通光学显微镜的使用技巧，对于微生物形态学研究具有重要的意义。
显微镜的使用及微生物形态的观察
第15页
五、操作步骤
（1）置显微镜于平稳试验台上，镜座距试验台边缘约 3-4 ㎝， 镜检者姿势要端正，普通用左眼观察，右眼便于绘图或统 计，两眼必须同时睁开，以降低疲劳，亦可练习左右眼均 能观察。
（2）调整光源、光线较强天然光源宜用平面镜；光线较弱天 然光源或人工光源宜用凹面镜。
显微镜的使用及微生物形态的观察
镜把物镜造成像再次放大，不增加分辨力，上面普通标
有4×、10×、16×等放大倍数，可依据需要选取。普通
可按与物镜放大倍数乘积为物镜数值孔径 500-700 倍，
最大也不能超出 1000 倍选择。目镜放大倍数过大，反而
影响观察效果。
显微镜的使用及微生物形态的观察
第5页
聚光器（condenser）：光源射出光线经过聚光器汇聚成光锥照射标本， 增强明度和造成适宜光锥角度，提升物镜分辨力。聚光器由聚光镜 和虹彩光圈（iris diaphragm）组成，聚光镜由透镜组成。虹彩光 圈由簿金属片组成，中心形成圆孔，推进把手可随意调整透进光强 弱。调整聚光镜高度和虹彩光圈大小，可得到适当光照和清楚图像。
数值孔径、放大倍数、镜筒长度、焦距等主要参数。如 10×/0.25 ；160/0.17 ，其中 “10 ×”表示放大倍数， “0.25” 表示数值孔径（numerical aperture）， “160/0.17”分别表示镜筒长度和所需盖玻片厚度 （mm）。
目镜（coular lens）：装于镜筒上端，由两块透镜组成。目
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毛霉与根霉
显微镜的使用及微生物形态的观察
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青霉
分生孢子梗
分生孢子 小梗 梗基 附枝
显微镜的使用及微生物形态的观察
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顶囊 分生孢子梗
实验1 显微镜使用及形态观察
实验一. 显微镜使用及细菌三型观察
一.目的要求
p41
学习并掌握油镜的使用方法 观察细菌的三种形态
二.油镜的使用基本原理
镜头简介
物镜在显微镜的光学系统中，物镜是最重要 的部件，物镜的放大倍数有10×(低倍)、 20×(中倍)、40～65×(高倍)和100×(油镜) 几种。在使用低倍、中倍、高倍物镜进行标 本观察时，物镜与载玻片之间的折光介质为 空气，这些物镜统称为干燥系物镜，而放大 倍为100的油镜在使用时须在玻片上滴加香柏 油，将油镜浸入到油滴中，使物镜与载玻片 之间的折光介质为油，故油镜被称为油浸系 物镜
3.显微镜用毕后的处理：
上升镜筒，取下载玻片; 擦镜纸先擦去油，再用擦镜纸蘸取擦镜
液擦残留油迹，最后再用干净的擦镜纸 擦试； 清洁其他部件； 各部分还原。
10x细菌三型观察观察
40x细菌三型观察
100x细菌三型观察
100x观察
100x大肠杆菌
100x葡萄球菌
作业p46－47
绘细菌三形图 思考题:用油镜观察时应注意哪些问题？
在载玻片和镜头之间滴加香柏油有什么 作用？
无菌操作过程
实验一显微镜使用及细菌三型观察 实验二原核微生物的形态观察及染色 实验三真核微生物形态观察 实验四 培养基的制备 实验五 培养基的使用特点和微生物接种方法 实验六 细菌的快速生化鉴定、水中大肠菌群的测定 实验七 细菌的药敏实验、水中大肠菌群的测定 实验八 污水中噬菌体的分离与效价测定 实验九 质粒提取与电泳 实验十病毒的分离与培养 实验十一 病毒的血凝和血凝抑制 实验十二 ELISA
结语
谢谢大家！
三.操作步骤
1.显微镜使用的一般规则: 焦距:由粗调到细调 镜头:由低倍到高倍 视野:低倍寻找,高倍固定
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2-5
实验三
微生物的染色
一. 目的
1. 学习微生物的染色技术，掌握微生物的 单染色法和革兰氏染色法。 2. 学习油镜的操作。
3-1
二．染色原理和油镜的工作原理
1．油镜工作原理
油镜的放大倍数最大（100），故镜头焦距短，直 径小,但所需光照强度却最大。从标本片透过的光线 是从玻片进入空 气，再进入镜头。由于玻璃和空气 的介质密度不同，有些光会 因折射或反射而 不能进入 镜头。物象就显 现不清。 为了不使通过的 光线有 所损失，须在油镜与玻片 之间加入折射率和玻璃 (n=1.52）相仿的香柏油 (n=1.515)。故而称之为 “油镜”。
二. 实验器材
1. 2. 3. 4. 活性污泥混合液。 单胞藻、新月藻、草履虫等示范片。 显微镜、载玻片、盖玻片。 目测微尺、物测微尺。
2-1
三. 实验内容
1. 微生物大小的测定 (1) 标定目镜测微尺 装在目镜上的目测微尺中央刻有等分为 100 格 或更多格的标尺，使用前要用物测微尺标定。物测 微尺中央刻有1mm长的标尺，等分为100格，10μ m ／格。将物测微尺的刻度朝上放在载物台上，用低 倍镜找出物测微尺的刻度，移动物测微尺使其第一 条线与目测微尺的第一条线重合，顺着刻度线找出 另一条重合线。算出低倍镜下目测微尺每格的长度。 换高倍镜用同样方法标定出高倍镜下目测微尺每格 的长度。
1-2
显微镜放大倍数 = 目镜放大倍数 × 物镜放大倍数
物镜上的标识：
1 .25 (0.65、0.25) ↓
数值孔径
100(40、10） ↓
放大倍数
160 / 0.17 ↓ ↓
镜筒长 盖玻片厚度
N.A. = n﹒s i n α / 2 n — 玻片和物镜之间的折射率。 α — 光线最大射入角。 分辨率（最大可分辨距离）＝λ/ N.A. 数值孔径： λ—波长
1-1
三. 实验内容 (一) 显微镜的构造和使用方法 1. 构造 机械部分: 镜筒(双筒，两筒间距离可调，上装有目镜） 转换器（3孔，装有物镜） 载物台（中央圆孔、弹簧夹、移动器） 调节器（粗调、细调） 镜臂（支撑作用） 镜座（上有光源，亮度可调） 光学部分：目镜（10×、16×） 物镜（低倍镜10×、高倍镜40×、油镜100×） 聚光器（内有光圈调节） 光源（光量可调）
2-2
测 微 尺 示 意 图
(2) 微生物大小的测量 将物测微尺取下，换上标本片，选择适当物 镜测量微生物的长度和宽度占目测微尺的格数，再 按目测微尺1格的长度算出微生物的长度和宽度。
2-3
2.压滴法观察活性污泥中生物相
（1）压滴法制作标本片 用滴管取活性污泥混合液一小滴，放在 载玻片中央。取一块盖玻片先将一边与混合 液接触，然后慢慢将盖玻片放下使其盖在混 合液上。片内不能有气泡。 （2）观察活性污泥中生物相 先用低倍镜观察活性污泥中菌胶团、原 生动物、后生动物。画出所观察到的生物形 态图。标明名称、放大倍数和微生物的大小。
微生物实验
实验一 显微镜的使用及微生物形态观察 实验二 活性污泥生物相及藻类形态观察
实验三 微生物的染色
实验四 微生物细胞数的计数
实验五活性污泥不同微生物种群的分离培养 与鉴别
实验一 显微镜的使用及微生物形态观察
一. 目的 1. 了解普通光学显微镜的构造，学习显微 镜的使用方法和保养。（高、低倍镜的使用） 2. 观察蓝细菌、霉菌、酵母菌、放线菌的 个体形态，学会生物图的绘制。 二. 实验器材 1. 光学显微镜 2. 示范片：颤藻、曲霉、青霉、酵母菌、 放线菌。
2-4
3. 观察几种藻类的个体形态
观察几种藻类的个体形态，画出生物形态图， 标明名称、放大倍数。 四.实验结果 1.低、高倍镜下目测微尺每格的长度。 2.画出2~3种污泥中所观察到的生物形态图。 标明名称、放大倍数和微生物的大小。 3.画出两种藻类生物形态图，标明名称、放大 倍数和微生物的大小。 。
1-5
（二）微生物形态的观察
1. 用低倍镜和高倍镜观察颤藻、 曲霉、青霉、酵母菌、放线菌、 星藻示范片。 2. 画出微生物形态图，并标明 显微镜的放大倍数。10╳ຫໍສະໝຸດ 10颤藻1-6
实验二 活性污泥生物相的观察 一. 目的
1.学习测量微生物大小。 2.学习用压滴法制作标本片。 3. 观察几种原、后生动物，菌胶团及藻类个体形态。
1-3
2. 显微镜的使用 低倍镜的使用
（1）双手取出显微镜置于实验台上，接上电源，打开开 关，调节合适光量。 （2）转动转换器，将低倍镜移至正下方。调节两目镜镜 筒间的距离。 （3）将载玻片放在载物台上夹住，移动观察对象于圆孔 正中。 （4）侧视物镜，转动粗调将载物台上移，至载玻片距物 镜头约５ｍｍ时停止。 （5）双眼向目镜里观察，同时旋转粗调节器使载物台缓 慢下移，若标本显出但不清晰，可用细调节器调至清晰。若 粗调旋转太快，超过焦点没有看到标本，则必须重复（4）、 (5)步骤。不能在眼睛观察目镜的同时旋转粗调，以防物镜与 载玻片相碰撞，造成损坏。
1-4
高倍镜的使用
在用低倍镜找到观察目标后，若需要进一步放大观察，
将其移到视野中央。用转换器将高倍镜移到镜筒下方，将光
量调大一点。若标本不清晰，用细调上下转动使之清晰。 （此时不再动粗调）
３．显微镜的维护
（１）将载物台降至最低，取下标本片。
（２）将光量调至最小，关上电源。
（３）用镜头纸先檫目镜、物镜，再擦显微镜其它部分。 （４）将显微镜放入镜箱，还原。
易与带负电荷的菌体结合使之着色。经染色后的
菌体细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下很
容易观察。
3-2
3．革兰氏染色法：
革兰氏染色法将细菌分为 G＋ 和 G- ，这由两类细菌细胞 壁的结构和组成的不同而决定。用结晶紫初染后，所有的细 菌都染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫 - 碘的复合物，增强了染料与菌体的结合力。用乙醇脱色处 理时，两类细菌的脱色效果是不同的。G ＋ 细菌的细胞壁主 要由肽聚糖形成的网状结构组成，且壁厚、类脂含量低，用 乙醇脱色时使细胞壁脱水、网状结构孔径缩小，通透性降低， 使得结晶紫—碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经 洗脱和复染仍然保持初染剂的蓝紫色。G-细菌则不同，由于 其细胞壁肽聚糖层较薄，类脂含量高，所以在脱色处理时， 类脂被乙醇溶解，细胞壁的通透性增大，使结晶紫—碘的复 合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复 染剂的颜色。 3-3
2．单染色法：
微生物不但个体微小，且无色半透明。要在显 微镜下观察清楚，必须染上颜色 。微生物细胞中
含有大量的蛋白质等一类两性电解质：在酸性溶
液中结合质子带正电；在碱性溶液中给出质子而
带负电。等电点一般在 pH=2~5。所以，在中性、
碱性或弱酸性溶液中，微生物细胞通常带负电荷。 碱性染料在电离时，染色部分是带正电荷的，容