大肠菌群检验原始记录-平板计数法-2016版-5样
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3.培养
将以上VRBA平板倒置于36.0±1.°C,培养18h~24h（//时〜/_/时）并
分别计数可疑和典型菌落。
4.平板菌落数选择
选取菌落数在15~150CFU之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环。
5.证实试验（接种BG1.B）
从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，少于10个菌落的挑取全部典型和可疑菌落，分别移种于BG1.B肉汤管内，36°C±1°C培养24h~48h,（//时〜/_/时）观察产气
大肠菌群检验原始记录（平板计数法）
检验单位
检验员
检验日期
至
环境条件
温度℃,相对湿度%
检验依据
GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第二法
样品名称
产品批号
仪器设备及耗材：
电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、PH计、移液器
培养基及试剂：
结晶紫中性红胆盐琼脂培养基（VRBA）：m1.配制日期：
第三稀释度
结果
CF∪∕m1.□CFU∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品4
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CF∪∕m1.□CFU∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品
5
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU∕m1.□CFU∕g□
2.接种VRBA
选择适宜的2~3个连续稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），吸取Im1.于无菌平皿内，每个稀释度接种两个平皿。同时分别吸取1m1.生理盐水加入两个无菌平皿内作为空白对照。及时将15~20m1.融化并恒温至46℃的VRBA倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀，待琼脂凝固后，再加3~4m1.VRBA覆盖平板表层。同时再以只加VRBA的平皿，作为VRBA的空白对照。将平板翻转，培养。
情况。凡BG1.B肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。
6.结果与报告
6.1每g（m1.）样品中大肠菌群数：证实为大肠菌群阳性的试管÷接种总管数X平板菌落数X稀释倍数按“四舍五入”原则修约，保留2位有效数字，无菌落生长以VI乘以最低稀释倍数报告。
6.2称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/m1.为单位报告。
用Im1.无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液Im1.,沿管壁缓慢注于盛有9m1.稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），在振荡器上振荡混匀，制成1：IoO的样品匀液。
按上面步骤操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次Im1.无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min.
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
糊也
VRBA空白（仅VRBA）
生理盐水+VRBA
BG1.B空白（仅BG1.B）
报告人
报告日期
复核人
复核日期
样品1
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU∕m1.□CFU∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品2
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU∕m1.□CF∪∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品3
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
煌绿乳糖胆盐肉汤（BG1.B）：m1.配制日期：
无菌生理盐水：m1.配制日期：
实验过程：
1.样品处理和稀释：
1.1如需要，使用Imo1./1.氢氧化钠或ImOI/1.盐酸将样品调整PH在6.5~7.5之间。
2.2制备样品稀释液
根据样品状态，无菌操作，称取/无菌吸取25g（m1.）样品，加入到225m1.无菌生理盐水中充分混匀，制成1:10样品匀液。
将以上VRBA平板倒置于36.0±1.°C,培养18h~24h（//时〜/_/时）并
分别计数可疑和典型菌落。
4.平板菌落数选择
选取菌落数在15~150CFU之间的平板，分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。典型菌落为紫红色，菌落周围有红色的胆盐沉淀环。
5.证实试验（接种BG1.B）
从VRBA平板上挑取10个不同类型的典型和可疑菌落，少于10个菌落的挑取全部典型和可疑菌落，分别移种于BG1.B肉汤管内，36°C±1°C培养24h~48h,（//时〜/_/时）观察产气
大肠菌群检验原始记录（平板计数法）
检验单位
检验员
检验日期
至
环境条件
温度℃,相对湿度%
检验依据
GB4789.3-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》第二法
样品名称
产品批号
仪器设备及耗材：
电子天平、洁净工作台、电热恒温培养箱、立式压力蒸汽灭菌器、水浴锅、PH计、移液器
培养基及试剂：
结晶紫中性红胆盐琼脂培养基（VRBA）：m1.配制日期：
第三稀释度
结果
CF∪∕m1.□CFU∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品4
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CF∪∕m1.□CFU∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品
5
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU∕m1.□CFU∕g□
2.接种VRBA
选择适宜的2~3个连续稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液），吸取Im1.于无菌平皿内，每个稀释度接种两个平皿。同时分别吸取1m1.生理盐水加入两个无菌平皿内作为空白对照。及时将15~20m1.融化并恒温至46℃的VRBA倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀，待琼脂凝固后，再加3~4m1.VRBA覆盖平板表层。同时再以只加VRBA的平皿，作为VRBA的空白对照。将平板翻转，培养。
情况。凡BG1.B肉汤管产气，即可报告为大肠菌群阳性。
6.结果与报告
6.1每g（m1.）样品中大肠菌群数：证实为大肠菌群阳性的试管÷接种总管数X平板菌落数X稀释倍数按“四舍五入”原则修约，保留2位有效数字，无菌落生长以VI乘以最低稀释倍数报告。
6.2称重取样以CFU/g为单位报告,体积取样以CFU/m1.为单位报告。
用Im1.无菌吸管或微量移液器吸取1：10样品匀液Im1.,沿管壁缓慢注于盛有9m1.稀释液的无菌试管中（注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面），在振荡器上振荡混匀，制成1：IoO的样品匀液。
按上面步骤操作，制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用1次Im1.无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕，全过程不得超过15min.
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
糊也
VRBA空白（仅VRBA）
生理盐水+VRBA
BG1.B空白（仅BG1.B）
报告人
报告日期
复核人
复核日期
样品1
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU∕m1.□CFU∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品2
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
第三稀释度
结果
CFU∕m1.□CF∪∕g□
VRBA疑似大肠菌群菌落数
接种BG1.B管数
BG1.B阳性管数
样品3
稀释度
第一稀释度
第二稀释度
煌绿乳糖胆盐肉汤（BG1.B）：m1.配制日期：
无菌生理盐水：m1.配制日期：
实验过程：
1.样品处理和稀释：
1.1如需要，使用Imo1./1.氢氧化钠或ImOI/1.盐酸将样品调整PH在6.5~7.5之间。
2.2制备样品稀释液
根据样品状态，无菌操作，称取/无菌吸取25g（m1.）样品，加入到225m1.无菌生理盐水中充分混匀，制成1:10样品匀液。