03-04-028学习小结-酵母细胞大小的测量

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酵母细胞计数与大小测量【精选】

酵母细胞计数与大小测量【精选】

酵母细胞计数与大小测量一、目的与要求1. 了解血球计数板的构造和使用方法,并掌握使用血球计数板进行微生物计数的方法。

2. 学习用显微测微尺测量酵母细胞的大小,使大家对微生物大小有一种直观的认识。

3. 观察酵母细胞形态特征,出芽繁殖。

二、实验原理血球计数板是一块比普通载玻片厚得多的玻璃片,其上由四条平行槽构成的三个平台,中间的平台较宽,其中间又被一短槽隔成两半,每边平台上面各刻有一个方格网,即为此计数板的计数室。

计数室的长宽各为1 mm ,中间平台下陷0.1mm ,故盖上盖玻片后计数室的容积为0.1mm 3。

计数室有两种规格。

一种是16X25型,共有16个大格,每个大格又分为25个小格。

另一种是25X16型,共有25个大格,每个大格又分成16个小格。

应用血球计数板在显微镜下直接计数微生物细胞的数量,就是先测定若干个方格中的微生物细胞的数量。

再换算成每ml 菌液中微生物细胞数量。

显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。

目前国内外常用的计菌器有:血球计数板、Peteroff-Hauser 计菌器等。

显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如酵母、细菌、霉菌孢子等。

菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板。

血球计数板计数板是一块特制的载玻片,其上有四条槽构成三个平台;中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各刻有一个方格网,每个方格网共分为九个大方格,中间的大方格即为计数室。

计数室规格:①25(中格)×16(小格);②16(中格) ×25 (小格)。

每种规格计数室中的小方格都是400个。

计数室大小:每一个大方格边长为1mm,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度0.1mm,所以计数室的容积为0.1mm3。

本次使用的25个中方格:1mL菌悬液中含有细胞数=五个中格总菌数(A)/5×25×104×稀释倍数(B)微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。

观察酵母实验报告

观察酵母实验报告

一、实验目的本次实验旨在通过观察酵母菌的形态、生长特点以及繁殖方式,了解酵母菌的基本生物学特性,并探究酵母菌在不同环境条件下的生长情况。

二、实验原理酵母菌是一种单细胞真菌,属于真核微生物。

在适宜的条件下,酵母菌能够进行出芽生殖,即通过产生新的细胞壁和细胞膜,使子细胞从母细胞上分离出来。

此外,酵母菌在发酵过程中,可以将糖类物质转化为酒精和二氧化碳,这一过程在食品、酿酒和生物工程等领域有着广泛的应用。

三、实验材料与方法1. 实验材料- 酵母菌培养基- 培养皿- 显微镜- 显微镜玻片- 接种环- 酒精- 美蓝染液- 碘液2. 实验方法(1)酵母菌培养将酵母菌接种于培养基中,在适宜的温度和湿度条件下培养,使其生长繁殖。

(2)酵母菌形态观察用显微镜观察酵母菌的形态,包括细胞大小、形状、细胞壁结构、细胞质结构等。

(3)酵母菌繁殖方式观察观察酵母菌的出芽生殖过程,记录子细胞从母细胞上分离出来的时间、数量和速度。

(4)酵母菌生长情况观察在不同环境条件下(如温度、pH值、营养物质等),观察酵母菌的生长情况,记录其生长曲线。

四、实验结果1. 酵母菌形态观察酵母菌呈椭圆形或卵圆形,细胞壁厚,细胞质均匀。

在显微镜下,可见细胞核位于细胞中央,细胞质内含有一定数量的内质网、线粒体等细胞器。

2. 酵母菌繁殖方式观察酵母菌主要通过出芽生殖进行繁殖。

在适宜的条件下,母细胞在细胞壁上形成新的细胞壁和细胞膜,子细胞从母细胞上分离出来。

观察结果显示,子细胞从母细胞上分离出来的时间为10-15分钟,平均每10分钟产生一个子细胞。

3. 酵母菌生长情况观察(1)温度对酵母菌生长的影响在不同温度条件下,酵母菌的生长速度存在差异。

实验结果显示,在28-30℃的温度范围内,酵母菌生长速度最快;当温度低于15℃或高于35℃时,酵母菌生长速度明显减慢。

(2)pH值对酵母菌生长的影响酵母菌在pH值为4.5-5.5的环境中生长最佳。

实验结果显示,当pH值低于4.5或高于5.5时,酵母菌生长速度明显减慢。

酵母菌大小测定

酵母菌大小测定

知识点:测微尺法测定酵母菌大小情境:微生物大小测定任务:测微尺法测定酵母菌大小课程:食品微生物技术测微尺的构造1.构造目镜测微尺一块圆形玻片,其中央刻有精确的刻度,通常是将5mm划分为50格,每格等于100μm。

刻度的大小随着使用的目镜和物镜的放大倍数而改变,用前必须用物镜测微尺来标定。

物镜测微尺物镜测微尺为一块特制的载玻片,其中央有一小圆圈。

圆圈内刻有分度,将长1mm的直线等分为100小格,每小格等于10μm。

物镜测微尺目镜测微尺测微尺大小测定原理二、测微尺大小测定原理由于不同的物镜和目镜组合的放大倍数不同,目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不一样。

因此,用目镜测微尺进行大小测定时必须用镜台测微尺进行校正,以求出该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格的所代表的实际长度,然后根据微生物相当于目镜测微尺的格数,即可以计算出微生物个体的实际大小。

三、测微尺计算测微尺大小测定方法1.测微尺安装(1)取下目镜,旋下目镜上的目透镜,将目镜测微尺放入目镜的中隔板上,使有刻度一面朝下,再旋上目透镜,并装入镜筒内。

(2)将物镜测微尺置于显微镜的载物台上,使有刻度的一面朝上,同观察标本一样,使具有刻度的小圆圈位于视野中央。

(3)先用低倍镜观察,对准焦距,待看清物镜测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺的刻度与物镜测微尺的刻度相平行,并使两尺的左边第一条线相重合,再向右寻找两尺的另外一条重合线。

(4)记录二条重合线间的目镜测微尺的格数和物镜测微尺的格数。

2.标定(1)计算公式:(2)以同样方法,分别在不同倍率的物镜下测定目镜测微尺上每格的实际长度。

(3)如此测定后的目镜测微尺的尺度,仅适用于测定时所用的显微镜的目镜和物镜的放大倍数,若更换物镜,目镜的放大倍数时,必须再进行校正标定。

3.测量目镜测微尺标定完毕后,取下物镜测微尺,换上微生物标本片,将其固定在载物台上,先用低倍镜找到标本片图像,然后根据不同的微生物对象分别转换到高倍镜下,用目镜测微尺测量微生物细胞的直径或宽和长所占的格数,再依据所标定的高倍镜每一格的实际长度计算细胞的实际大小。

酵母细胞计数与大小测量

酵母细胞计数与大小测量
3.根据你的实验体会,说明血细胞计数板的误差主要来自于哪些方面?如何减少误差,力求准确?
答:血细胞计数的误差分别来源于技术误差和固有误差。其中由于操作人员采血不顺利,器材处理、使用不当,稀释不准确,细胞识别错误等因素所造成的误差属技术误差;而由于仪器(计数板、盖片、吸管等)不够准确与精密带来的误差称仪器误差,由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差(filed error)。仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正,但细胞分布误差却难于彻底消除。减少误差可以通过:①避免技术误差,纠正仪器误差;②缩小计数域误差或分布误差;③排除异常标本的干扰。
6.5
7.2
6.4
7.5
7.6
6.4
7.5
6.8
数据的格数为目镜测微尺上对应的格数
长轴
7.8
8.5
8.8
8.3
9.2
8.4
8.3
7.8
9.3
8.5
短轴
5.7
6.3
7.2
6.6
7.4
6.2
6.3
5.8
7.6
6.3
酵母菌长轴平均值(um)= 8.53um
酵母菌短轴平均值(um)= 6.75um
3.酵母菌稀释液的计数
三、实验仪器、材料和用具
1.实验用具
载玻片、盖片、200uL移液器及tip、擦镜纸、 装有蒸馏水的洗瓶。
2.实验仪器
普通生物显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、血球计数板、手动计数器。
3.菌种
稀释20倍的酿酒酵母溶液。
四、实验操作步骤
1.稀释:
1.1200rpm,28℃, 24h,用YPD培养基稀释15~25倍。(助教统一完成)

微生物生理生化和酵母细胞大小的测定

微生物生理生化和酵母细胞大小的测定
其他应用
酵母细胞的大小还可能在其他工业应用中发挥潜在价值,如食品添加 剂、酶的生产等。
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感谢聆听
详细描述
图像分析法是一种基于计算机视觉技术的测量 方法,通过图像处理软件对酵母细 胞图像进行分析和测量。该方法具有自动化、高效率的优点,但需要特定的软件 支持,且对图像质量要求较高。
03
酵母细胞生长的生理生化变化
酵母细胞生长过程中的代谢变化
糖酵解
在酵母细胞生长过程中,糖酵解 是主要的能量来源。糖酵解过程 中,葡萄糖被分解为丙酮酸,并
释放能量供细胞使用。
乙醇发酵
当氧气供应不足时,酵母细胞会进 行乙醇发酵,将丙酮酸转化为乙醇 和二氧化碳。
脂肪酸合成
在某些条件下,酵母细胞可以合成 脂肪酸,作为储存能量的形式。
酵母细胞生长过程中的细胞器变化
线粒体
高尔基体
随着酵母细胞的生长,线粒体的数量 和大小也会增加,以满足细胞对能量 的需求。
高尔基体在酵母细胞的分泌活动中起 重要作用,随着细胞的生长,高尔基 体的数量和形态也会发生变化。
05
酵母细胞大小与工业应用
酵母细胞大小对酒精发酵的影响
1 2
酒精发酵效率
较大的酵母细胞通常具有更高的发酵效率,因为 它们具有更大的体积和更多的酶,能够更快地分 解糖分。
产物浓度
酵母细胞的大小会影响酒精的产量和浓度,因为 较大的细胞内有更多的酶,可以产生更多的酒精。
3
发酵周期
较小的酵母细胞可能需要更长的发酵周期,因为 它们内部的酶较少,分解糖分速度较慢。
营养条件
营养物质的供应对酵母细胞大小有显著影响。在营养充足的 环境下,细胞生长迅速,体积较大;而在营养受限的环境中 ,细胞生长速度减慢,体积相对较小。

酵母菌大小测定及显微镜直接计数

酵母菌大小测定及显微镜直接计数

实验一:酵母菌大小测定一、实验器材1、菌种:酵母菌液体培养物2、仪器和其他物品目镜测微尺,镜台测微尺,普通光学显微镜,擦镜纸,载玻片,滴管等。

二、实验目的及要求1、学习并掌握使用显微测微尺测定微生物大小的方法。

2、掌握对不同形态细菌大小测定的分类学基本要求,增强对微生物细胞大小的感性认识。

三、基本原理微生物细胞的大小是微生物基本的形态特征,也是分类鉴定的依据之一。

微生物大小测定需借助测微尺---目镜测微尺和镜台测微尺,两者配合使用。

镜台测微尺是一个在特制载玻片中央封固的标准刻尺,其尺度总长为1mm,精确分为10个大格,每个大格又分为10个小格,共100个小格,每个小格10μm。

镜台测微尺并不直接用来测量细胞的大小,而是用于校正目镜测微尺每格地相对长度。

目镜测微尺是一块可放入接目镜内的圆形小玻片,其中央有精确的等分刻度,一般有等分为50小格和100小格两种。

测量时,需将其放在接目镜中的隔板上,用以测量经显微镜放大后的细胞物像。

由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同,目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。

因此,用目镜测微尺测量微生物大小时,必须先用镜台测微尺进行校正,以求该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度。

然后根据微生物细胞相当于目镜测微尺的格数,即可计算出细胞实际大小。

四、操作步骤1、装目镜测微尺(换目镜)把目镜上的透镜旋下,将目镜测微尺刻度朝上放在目镜镜筒内的格板上,然后旋上目镜透镜,再将目镜插入镜筒内。

※双目显微镜的左目镜通常配有屈光度调节环,不能被取下,因此使用双目显微镜时目镜测微尺一般都安装在右目镜中。

2、校正目镜测微尺(1)放镜台测微尺将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。

(2)校正先用低倍镜观察,将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央,调节焦距,当清晰地看到镜台测微尺的刻度后,转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。

03-04-022酵母菌细胞大小测量的步骤(精)

03-04-022酵母菌细胞大小测量的步骤(精)

酵母菌细胞大小测量的步骤:
一、制备酵母菌悬液
二、酵母水浸片的制作
在干净的载玻片中央加一滴菌悬液,从侧面盖上一片盖玻片(先将盖玻片一边与菌液接触,然后慢慢将盖玻片放下使其盖在菌液上),应避免产生气泡,并用吸水纸吸去多余的水分(菌液不宜过多或过少,否则,在盖盖玻片时,菌液会溢出或出现气泡而影响观察;盖玻片不宜平着放下,以免产生气泡)。

三、接目测微尺的标定并记录标定结果(方法见材料三)
低倍镜下倍目镜测微尺每格长度是μm。

高倍镜下倍目镜测微尺每格长度为μm。

四、酵母菌大小的测量
显微镜放入酵母菌水浸片,先在低倍镜下找到目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量酵母菌菌体的长,宽各占几格(不足一格的部分估计到小数点后一位数)。

测出的格数乘上目镜测微尺每格的标定值,即等于该菌的长和宽。

选取10个不同大小酵母细胞进行大小测定并记录结果(观察到的是平均大小)。

5、维护及整理
测量完毕,换上原有的显微镜目镜(或取出接目测微尺,目镜放回镜筒),用擦镜纸将测微尺擦拭干净后放回盒内保存,并按照显微镜的使用和维护方法擦拭物镜。

03-02-012实训报告-酵母细胞的计数

03-02-012实训报告-酵母细胞的计数

《发酵过程控制技术》子情境:活性干酵母发酵过程-酵母细胞数的计数实训报告书专业: 生物技术及应用班级:姓名:学号:活性干酵母发酵过程—酵母细胞数的计数实训报告姓名:同组人员:实验日期:实验地点:微生物基础实训室指导教师:刘鹏成绩:1.麦芽汁琼脂平板的制作(1)麦芽汁琼脂培养基的配制称取市售商品麦芽汁培养基130.1g,加入蒸馏水或去离子水1 L,加入2%琼脂。

搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管或三角瓶,115℃高压灭菌15min,备用。

(2)麦芽汁琼脂平板的制作将配制好的麦芽汁琼脂培养基稍冷却,倒入已灭菌的平板中,以铺满皿底为准(约15-20mL),冷却待凝。

我们小组共制作了24个麦芽汁琼脂平板,共8个浓度,每个浓度3个平行。

用记号笔做好了稀释度标记。

2.原始菌液的稀释吸取原始菌液1ml,放入9ml已灭菌的无菌水中,此稀释度为10-1,试管混匀,并取混匀后的菌液1ml放入9ml无菌水中,此稀释度为10-2,以此类推,共稀释8个浓度梯度。

3.涂布取2ml吸量管,按照浓度由低到高的顺序,吸取0.5ml菌液于相应浓度标记的平板中,用涂布器将菌液涂布均匀。

每个浓度三个平行。

4.平板的培养及计数我们组将涂布好的平板至于培养箱中25℃,倒置培养。

24小时后,选择菌落密度适宜的平板,同等浓度平板计数结果取平均值。

选取结果如下图所示。

经计数,酵母菌落总数为125个,此平板为稀释度为10-4 ,经计算原始发酵液中酵母菌浓度为2.5×106 CFU/mL。

教师评语:该报告实训步骤清晰,操作各环节准确合理,数据真实有效。

并且,在操作过程中存在疑问以及问题及时跟老师沟通,跟同组同学进行讨论。

实训报告规范写作,对实验过程中的操作及结果进行归纳和分析。

不足之处是没有将染菌平板的原因进行分析,该组同学在实际微生物操作中,还存在一些不足,希望该组同学能够加以改正。

酵母菌大小的测定及计数实验流程

酵母菌大小的测定及计数实验流程

酵母菌大小的测定及计数实验流程下载提示:该文档是本店铺精心编制而成的,希望大家下载后,能够帮助大家解决实际问题。

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实验八酵母菌细胞数量和大小的测定

实验八酵母菌细胞数量和大小的测定

(二)酵母细胞大小的测定
1、利用血球计数板在中、高倍镜下(10×、40×)标定目镜 测微尺。 2、取一滴酵母菌菌悬液制成水浸片。 3、移去血球计数板,换上酵母菌水浸片,先在低倍镜下找到 目的物,然后在高倍镜下用目镜测微尺来测量酵母菌菌体 的长,宽各占几格(不足一格的部分估计到小数点后一位 数)。测出的格数乘上目镜测微尺每格的校正值,即等于 该菌的长和宽。选取10个不同大小酵母细胞进行大小测定 并记录结果(观察到的是平均大小)。
目镜测微尺的标定:
用低倍镜观察,当看到血球计数板的小方格后,转动目镜, 使目镜测微尺与小方格平行,移动推动器,寻找两条完全重合 的刻度线,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和小方格的 格数。因为小方格每格长50μm,所以由下列公式可以算出目镜 测微尺每格所代表的长度。
两重合线间计数室小方格数×50 目镜测微尺每格长度(μm)=
两重合线间目镜测微尺格数
1、记录目镜测微尺的标定结果,以及所测 量的酵母细胞大小。目尺格数=1cm=100格 物镜 4× 目尺格数 小方格数 目尺校正值(μm)
10×
显微镜下对应的测微尺格数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 平均值(μm)
长 宽
四、实验方法 (一)血球计数板计数
1、检查血球计数板 2、菌悬液加样(先盖盖玻片) 3、显微镜下计数并记录 4、清洗血球计数板(用水冲洗,不要用硬物或刷子去刷)
上次实验及实验报告
实验八 酵母菌细胞数量、大小
的测定
一、实验目的
1、学习利用血球计数板直接计数微生物细胞的方法 2、学习测定微生物细胞大小的方法
二、实验材料
1、菌种:酿酒酵母培养液 2、器材:血球计数板、目镜测微尺
三、实验原理及结果记录

实验八酵母菌细胞数量和大小的测定

实验八酵母菌细胞数量和大小的测定

a.平面图(中间平台分为两半,各刻有一个方格网)
b.侧面图(中间平台与盖玻片之间有高度为0.1毫米的间隙)
1mm/20格
5X4
4X5
1/400mm2
血球计数板计数网的分区和分格
小格
中格
如菌体位于中格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左 线不数右线,以减少误差。可拍照后从图片上计数。
小格
中格
如菌体位于中格的双线上,计数时则数上线不数下线,数左 线不数右线,以减少误差。可拍照后从图片上计数。
镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片,一般将lmm等分为100格, 是专门用来校正目镜测微尺的。当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重 新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。也可用血球计数板来进行标定,血球 计数板每个小方格的边长为50μm。
目镜测微尺的标定:
用低倍镜观察,当看到血球计数板的小方格后,转动目镜, 使目镜测微尺与小方格平行,移动推动器,寻找两条完全重合 的刻度线,计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和小方格的 格数。因为小方格每格长50μm,所以由下列公式可以算出目镜 测微尺每格所代表的长度。
上次实验及实验报告
实验八 酵母菌细胞数量、大小
的测定
一、实验目的
1、学习利用血球计数板直接计数微生物细胞的方法 2、学习测定微生物细胞大小的方法
二、实验材料
1、菌种:酿酒酵母培养液 2、器材:血球计数板、目镜测微尺
三、实验原理及结果记录
1、显微直接计数法 (血球计数板)
血球计数扳的构造
0ห้องสมุดไป่ตู้1毫米
目镜测微尺每格长度(μm)=
两重合线间计数室小方格数×50 两重合线间目镜测微尺格数
1、记录目镜测微尺的标定结果,以及所测 量的酵母细胞大小。目尺格数=1cm=100格

03-04-013实训指南-酵母细胞大小的测量

03-04-013实训指南-酵母细胞大小的测量

天津现代职业技术学院
实训安排
序号具体实训内容学时(2)实训方式
1 分配任务(发放生产指令),发放引导文;
组织几个学习小组;每组各选出一名组
长各学习;小组熟悉显微镜的操作,并
按使用说明进行调试。

10分钟
引导教学
分组讨论
2 各学习小组成员根据各自学习,通过讨
论等方式,确定酵母细胞大小测量。

20分钟
3 根据酵母细胞大小测量方案,教师参与
实施酵母细胞大小测量;
在酵母细胞大小测量方案中要注重与实
际检测工作相结合,整个过程要模拟实
际工厂镜检岗位。

这个过程中师生共同分析、完成酵母细
胞大小的测量。

50分钟
4 各组成员对酵母细胞大小测量结果进行
评价;
各班组成员对任务的组织、策划、实施
等过程进行自评和互评;
教师就各组成员在不同阶段的个方面的
表现情况进行评价;
教师根据测量结果及方案实施过程中情
况提出问题,学生通过讨论方式尝试给
出解释方法,教师总结归纳解决方法。

10分钟
分组讨论
教师监督
5 撰写、提交实训报告和实训总结小组总结。

4、酵母大小及数量测定

4、酵母大小及数量测定

格 μm
计数大格 细胞数量
1
2
3
2、 酵母菌悬液浓度 =来自(计算过程) =个 / mL (科学计数法)
盖玻片
计数区, 高度0.1mm
放大
1个计数室边长= 1 x 1 mm 包含 5 x 5个大格
1个大格= 4 x 4个小格
四、作 业 (一)微生物细胞大小测定 1、目镜测微尺校正:在40x下,目镜测微尺 格与镜台测微尺 相当,因为镜台测微尺1小格=10 μm,故目镜测微尺1小格= 2、酵母菌大小测定: 1 长(格数) 宽(格数) (二)细胞数量测定 1、统计3个大格中的细胞数量 2 3 4 5 平均格数 平均长度 (精确到 0.1格) (单位:μm )
实验四
酵母细胞的大小及数量测定
一、实验内容: 测定酵母细胞的大小,单位体积内的细胞数量 二、实验材料:1、菌种:酿酒酵母( Saccharomyces cerevisiae ) 2、器材:显微镜、血球计数板、镜台测微尺、目镜测微尺 三、实验步骤: (一)细胞大小测定 1、对目镜测微尺的校正 镜台测微尺有刻度的一面朝上,置显微镜载物台上(目镜测微尺已 在镜筒中),先用10x找到镜台尺刻度,然后在40x进行目镜测微尺校正。 2、细胞大小的测量 酵母菌悬液滴在载玻片上,盖上盖玻片,置显微镜载物台上。显 微镜光圈调暗, 用目镜测微尺测量细胞宽和长。 (二)细胞数量测定 在血球计数板计数区滴加菌悬液后再盖上盖玻片。显微镜光圈调暗, 于10 X 找到计数区,再在10 X 或 40 X 下计数。(数3个大格)。

实验二酵母菌大小的测定和细胞计数实验目的学会测

实验二酵母菌大小的测定和细胞计数实验目的学会测

(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上 加盖专用的厚玻片。 (4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖 玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水 纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数 室内。 (5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要 按对角线位,取左上、右上、左下、右下4个中格 (即100个小格)的酵母菌数。如果规格为25格 ×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需 再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
实验二 酵母菌大小的测定和细胞计数 一、实验目的 1、学会测微尺和血球计数板的使用方法。 2、建立对微生物大小的概念。
二、实验材料 1、显微镜、物镜测微尺、目镜测微尺、血球计数 板、载玻片等。 2、麦芽汁培养基、酵母菌。 3、吸管、吸水纸等。
三、实验原理 (一)酵母菌大小的测定原理 所有微生物的大小需要用刻有一定刻度的测微 尺来测量,先用绝对长度的物镜测微尺来校正不表 示绝对长度的目镜测微尺,计算后者每格所代表的 实际长度,然后放上待测的标本,用目镜测微尺测 定标本上微生物细胞占目镜测微尺的格数,就可计 算该微生物的大小。酵母菌的直径约8-10μ m。
五、思考题及实验作业 1.若更换不同放大倍数的目镜和物镜时,必须用物镜测 微尺标定目镜测微定酵母细胞大小的结果。 (1)接目镜倍数是 ;低倍镜倍数 ;高倍镜倍数 。 (2)低倍镜下,接目镜测微尺 格=物镜测微尺 格。 目镜测微尺每格= μ m。 (3)高倍镜下,接目镜测微尺 格=镜台测微尺 格。 目镜测微尺每格= μ m。 (4)酵母菌测量结果填表 (5)酵母菌直接计数结果报告 每1ml样品含酵母细胞 个。
(二)酵母细胞计数原理 微生物常用的计数方法有两种,即直接计数法 和间接计数法。前者利用血球计数板在显微镜下直 接计数,能立即得到数值,但死活细胞都计数在内。 后者是在乎板上长成菌落后再计数,反应较真实, 但费时太长。本实验是利用血球计数板进行直接计 数。计数前需对样品做适当稀释,按照规定方法及 计算公式运算后,即可得出实际数值。

酵母菌大小测定

酵母菌大小测定

• 接目測微計為玻璃圓板,中央刻有50格之等距離劃
• 接物測微計為一長形載玻片,通常以lmm分為
100個分格,每格為0.0l mm,即l0μm之大小
線,可置於接目鏡
測微計之使用
將接目測微計放人接目鏡內
接物測微計放於載物檯上,並移至照明上方之中央處。 先以低倍物鏡觀察,以粗調節輪調整至出現接物測微計,
再以細調節 調整至影像清晰,徐徐轉動接目鏡,使接目測微計之刻 度與接物測微計上的一端某刻度重疊 (如左端),其另一 端亦需重疊 (如右端)
依下式計算1格接目測微計之μm數:
接物測微計格數 10m 接目測微計格之 m數 接目測微計格數
儀器與器具
裝置接目測微鏡
1 3
取出接目測微鏡 2 4
酵母菌大小
50分鐘
食品檢驗分析
目的


瞭解利用測微鏡測定酵母菌大小的原理 熟練顯微鏡觀察酵母菌的形態作 利用測微計測定酵母菌大小 能繪製酵母菌形態 計算酵母菌大小
原理


要檢定菌種種類時,需先明瞭菌株形態特徵, 使用顯微鏡的視野,以接目測微計與接物測微 計正確量測細菌大小 測微計之構造
蓋回接目鏡
打開接目鏡並放置接目測微鏡
安置接目鏡並觀察是否安裝完整
安置接物測微鏡
1
2
打開接物測微鏡
放置接物測微鏡並觀看計算
顯微鏡下的接物及接目測微鏡計算
10m
接物測微計格數 接目測微計格之 m數 接目測微計格數
23
49 1 2 3 4 5 6 7
49 23 26
接目測微鏡 接物及接目測微鏡 1
10m
接物測微計格數 接目測微計格之 m數 1 接目測微計格數

酵母菌计数t和大小测定

酵母菌计数t和大小测定

微生物的大小测定及显微镜直接计数一、实验目的1、学习并掌握用测微尺测定微生物细胞大小的方法。

2、了解血细胞计数板的构造及计数原理。

3、掌握使用血细胞计数板进行微生物计数的方法。

二、实验原理1、微生物大小测定原理微生物细胞的大小是微生物的形态特征之一,也是分类鉴定的依据之一。

其测量工具有目镜测微尺和镜台测微尺。

镜台测微尺是中央部分刻标准刻尺的载玻片,其尺度总长为1mm,精确分为10个大格,每个大格又分为10个小格,共100小格,每一小格长度为0.01mm,即10μm。

如图1。

图1 镜台测微尺中央部分及镜台测微尺校正目镜测微尺目镜测微尺,如图2,是一块可放入接目镜内的圆形小玻片,其中央有精确的等分刻度,一般有等分为50小格和100小格两种。

测量时,需将其放在接目镜中的隔板上,用以测量经显微放大后的细胞物象。

由于不同显微镜或不同的目镜和物镜组合放大倍数不同,目镜测微尺每小格在不同条件下所代表的实际长度也不一样。

图2 目镜测微尺格数两重合线间目镜测微尺格数两重合线间镜台测微尺目镜测微尺每格长度10*2、测定微生物细胞数量的方法很多,通常采用的有显微直接计数法和平板计数法。

本次试验采用显微直接计数法。

显微直接计数法:将少量待测样品的悬浮液置于一种特定的具有确定容积的载玻片上(又称计菌器),于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。

显微计数法适用于各种含单细胞菌体的纯培养悬浮液,如酵母、细菌、霉菌孢子等。

菌体较大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球计数板,一般细菌则采用彼得罗夫·霍泽(Petrof Hausser )细菌计数板或Hawksley 计数板。

三种计数板的原理和部件相同,只是细菌计数板较薄,可以使用油镜观察。

而血球计数板较厚,不能使用油镜,计数板下部的细菌不易看清。

显微计数法的优点是直观、快速、操作简单,缺点则是所测得的结果通常是死菌体和活菌体的总和,且难以对运动性强的活菌进行计数。

血球计数板是一块特制的厚型载玻片,载玻片上有4条槽而构成3个平台。

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天津现代职业技术学院
学习子情境活性干酵母发酵过程检验--酵母细胞大小的测量
学习小结
姓名:班级:日期:
活性干酵母发酵过程检验--酵母细胞大小的测量这个任务结束了,在整个任务实施的过程中,我深深体会到以我们学生为主体学习方式的优势,通过引导文的学习,引导我们认识了酵母菌,弄清楚了酵母菌个体形态。

酵母菌的大小及芽殖酵母的形态;微生物细胞大小测量的意义;测微尺的构造及标定方法;测微尺测定酵母细胞大小的主要步骤。

并且通过引导,我们自己动手查阅资料,从而确定了酵母细胞大小的测量方案。

通过整个策略的实施让我们学会了很多关于发酵过程检测监测岗位,微生物镜检操作岗位应该具备的专业知识;了解微生物最常用的测量大小的方法及原理;测定的主要流程是怎样的;掌握了酵母细胞大小与发酵过程控制的关系等。

在整个策略的实施还锻炼了我们同学之间的团队工作能力,与人沟通的能力,以及重视工作安全和保护能力。

培养我们吃苦耐劳,爱岗敬业的精神。

这些都对于将来适应岗位打下了坚实的基础。

但对于整个实训过程,也存在很多缺陷,比如各项仪器操作并不熟练,需要加强练习。

对于自主学习新技术、新知识的能力还有欠缺。

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