人脑胶质瘤细胞系miRNA表达谱初步研究
《2024年miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》范文
《miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》篇一摘要：本研究初步探讨了miRNA-29b对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用及其潜在机制。
通过实验分析，我们发现miRNA-29b 能够显著抑制U251细胞的增殖，并揭示了其可能的作用途径。
本研究的成果为胶质瘤的治疗提供了新的思路和理论依据。
一、引言：胶质瘤是一种常见的中枢神经系统肿瘤，具有高复发率和死亡率。
近年来，随着分子生物学技术的发展，microRNA （miRNA）在肿瘤发生发展中的作用逐渐成为研究热点。
miRNA-29b作为一种重要的调控分子，在多种肿瘤中表现出抑癌作用。
因此，研究miRNA-29b对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用及其机制，对于胶质瘤的治疗具有重要意义。
二、材料与方法：1. 材料：本实验选用U251人脑胶质瘤细胞系作为研究对象，并使用miRNA-29b模拟物和抑制剂进行干预。
2. 方法：（1）细胞培养与转染：将U251细胞培养于适宜的培养基中，并使用脂质体法将miRNA-29b模拟物或抑制剂转染至细胞。
（2）细胞增殖检测：通过MTT法检测细胞增殖情况。
（3）蛋白表达检测：利用Western blot检测相关蛋白的表达水平。
（4）信号通路分析：通过生物信息学分析，探讨miRNA-29b对相关信号通路的影响。
三、实验结果：1. miRNA-29b对U251细胞增殖的抑制作用：实验结果显示，转染miRNA-29b模拟物的U251细胞增殖受到显著抑制，而转染抑制剂的细胞则表现出增殖增强的趋势。
2. miRNA-29b对相关蛋白表达的影响：Western blot结果显示，miRNA-29b能够上调某些抑癌基因的表达，同时下调促癌基因的表达。
3. miRNA-29b对信号通路的影响：生物信息学分析表明，miRNA-29b可能通过调控PI3K/AKT、MAPK等信号通路，从而抑制U251细胞的增殖。
四、讨论：本研究初步揭示了miRNA-29b对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用及其可能的作用机制。
MicroRNA在脑胶质瘤临床应用中的研究进展
25 Journal of China Prescription Drug Vol.16 No.8·综述·第二，颅内出血。
颅内出血是脑血管病临床治疗中常见的严重性并发症之一，也是患者死亡的主要原因之一，研究认为可能是因为患者使用血管再通溶栓药物治疗作用所引起的血-脑脊液屏障出现损坏，动脉溶栓药物的个体化药物剂量控制不当造成，机械取栓和支架植入治疗后患者血管壁损伤则是因为治疗后强化血小板治疗所引起的，因此需要在患者治疗中及治疗后严密监测意识情况及症状变化情况，患者进行头部CT检查则可确诊。
患者如果确诊，要对出血情况进行处置，情况严重时则要进行外科手术。
第三，灌注过度。
患者临床治疗过程中，医护人员保证患者血管灌注和血流动力学情况稳定，是防止出现灌注过度的关键。
综上所述，脑血管病介入治疗方法从最早的研究兴起、受到不断质疑到有效安全性被广大临床研究试验证明，介入治疗方法的应用范围、应用方式、治疗适应和禁忌的规范标准制定都不断被完善，在目前介入治疗已经被全球医疗机构所公认为治疗大动脉粥样硬化型缺血性脑血管病的首选治疗方法。
参考文献[1] 李添添，丁杨楠，吴江，等. 血管介入治疗再内皮化修复的研究进展. 生物医学工程学杂志，2016，（1）：177-183.[2] 蒋雄京，李彬. 动脉粥样硬化性肾动脉狭窄的介入治疗. 中华医学信息导报，2015，30（18）：19.[3] 张萍. 冠状动脉粥样硬化性心脏病合并糖尿病患者介入治疗中进口和国产药物洗脱支架的应用. 中西医结合心血管病电子杂志，2017，5（3）：1-2.[4] 唐胜惠，杨朝品. 冠状动脉介入治疗冠心病的研究进展. 中国医学工程，2017，4（6）：35-38.[5] 杨熙园，沈雅平，龙吉甫，等. 下肢动脉硬化闭塞症的介入治疗现状及其研究进展. 2016全国慢性病诊疗论坛，2016，5（2）：18-21.[6] 钱吉利，高倩萍. 动脉粥样硬化治疗的研究进展. 医学综述，2017，23（15）：2993-2997.[7] 温玉星，顾宇翔，黄绍崧，等. 颅内外血管重建治疗老年动脉粥样硬化型缺血性脑血管病. 中华神经外科疾病研究杂志，2016，15（1）：54-57.[8] 张海侠，王刘敏，刘新峰. 颈动脉钙化与缺血性脑血管病. 国际脑血管病杂志，2015，（3）：204-208.[9] 陈潇祎，庄仲，赵锡海. 颈动脉粥样硬化斑块进展与脑缺血事件相关性的影像学研究进展. 中国卒中杂志，2017，12（6）：538-543.[10] 胡皓月，冯占辉，廖付军. 颈动脉粥样硬化与缺血性进展性脑卒中的研究进展. 中西医结合心血管病电子杂志，2017，5（23）：12-13.[11] 王猛. 大动脉粥样硬化型缺血性脑血管病手术治疗临床效果分析. 医学理论与实践，2016，29（16）：2179-2180.[12] 郑大勇. 缺血性脑血管动脉病溶栓介入治疗临床疗效分析. 中外医疗，2015，（2）：66-67.[13] 王其新. 冠状动脉粥样硬化性心脏病介入治疗回顾与展望. 实用老年医学，2015，29（1）：3-5.[14] 王凯，蒋国民，田丰，等. 老年高血压合并动脉粥样硬化性肾动脉狭窄患者的介入治疗. 中华老年心脑血管病杂志，2015，17（10）：1033-1035.脑胶质瘤，是临床上最为常见的一类中枢神经系统肿瘤[1]，病理分级越高的脑胶质瘤，其病变组织与正常组织之间的分界越不明显，此时，手术方法无法对病变组织进行切除，与此同时，这种病理分级程度越高的患者，采用化疗、放疗过程中的耐药性越明显[2]。
microRNA-107在胶质瘤和胶质瘤干细胞中的生物学功能研究的开题报告
microRNA-107在胶质瘤和胶质瘤干细胞中的生物学功能研究的开题报告背景和研究意义：胶质瘤是一类恶性脑肿瘤，其治疗效果一直不够理想，导致患者的生存率不高。
因此，对于胶质瘤的研究十分重要，有望改善其治疗效果，提高患者的生存率。
近年来，越来越多的研究表明，microRNA（miRNA）在胶质瘤的发生和发展中发挥了非常关键的作用。
miRNA-107是一种高度保守的miRNA，在多种癌症中都有表达。
现已证实miRNA-107与神经元发生和发展有关，同时研究还表明miRNA-107在多种肿瘤中也有作用，对肿瘤细胞的增殖、移动和凋亡等方面都有影响。
这启示我们miRNA-107可能也在胶质瘤中发挥了作用。
本研究旨在探究miRNA-107在胶质瘤中的表达水平及其对胶质瘤及胶质瘤干细胞生物学行为的影响，从而深入研究miRNA-107在胶质瘤的发生和发展中的作用机制，也有望为胶质瘤的治疗提供更为详细的理论指导。
研究内容和方法：1. 制备胶质瘤组织样本和胶质瘤干细胞收集20例胶质瘤患者的组织样本，同时分离出胶质瘤干细胞。
对于胶质瘤组织样本，用实时定量PCR（qRT-PCR）法检测其中miRNA-107的表达水平，同时采用免疫组化法检测其在组织中的定位；对于胶质瘤干细胞，利用表面标志物CD133进行分离和纯化，之后检测miRNA-107的表达水平。
2. miRNA-107对胶质瘤和胶质瘤干细胞的影响a.细胞增殖实验将胶质瘤和胶质瘤干细胞分别分组（miRNA-107表达组和对照组），测定细胞增殖率以及细胞周期分布，观察miRNA-107是否能影响瘤细胞增殖及增殖后代的周期静态状态。
b.细胞凋亡实验分别将胶质瘤和胶质瘤干细胞分组（miRNA-107表达组和对照组），测定细胞的凋亡率和细胞周期分布，观察miRNA-107是否影响瘤细胞凋亡。
c.迁移实验用Transwell小室检测胶质瘤和胶质瘤干细胞在miRNA-107表达与否下的迁移能力。
《2024年miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》范文
《miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》篇一一、引言近年来，随着人类对肿瘤疾病的深入研究，越来越多的肿瘤标志物和其作用机制被发现。
其中，微小RNA（miRNA）作为一种重要的基因调控因子，其在肿瘤发生、发展和转移中起着至关重要的作用。
U251人脑胶质瘤是一种恶性程度极高的中枢神经系统肿瘤，因此寻找有效的方法抑制其生长，具有重要的理论价值和实际意义。
本论文将对miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究进行详细阐述。
二、miRNA-29b与U251人脑胶质瘤细胞miRNA-29b是一种在多种肿瘤中发挥重要作用的miRNA，其具有调控肿瘤细胞生长、转移和凋亡等生物学功能。
近年来，越来越多的研究表明，miRNA-29b在U251人脑胶质瘤细胞中表达异常，可能成为治疗该肿瘤的潜在靶点。
三、miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长的实验研究1. 材料与方法本实验采用U251人脑胶质瘤细胞作为研究对象，通过转染miRNA-29b模拟物和抑制剂，观察其对U251细胞生长的影响。
同时，利用PCR、Western Blot等分子生物学技术，检测相关基因和蛋白的表达变化。
2. 结果与分析（1）miRNA-29b对U251细胞生长的抑制作用实验结果显示，转染miRNA-29b模拟物后，U251细胞的增殖速度明显减缓，细胞周期受到阻滞，S期细胞比例降低，G0/G1期细胞比例增加。
同时，细胞凋亡率也有所增加。
这些结果表明，miRNA-29b能够抑制U251细胞的生长。
（2）miRNA-29b对相关基因和蛋白的影响通过PCR和Western Blot等分子生物学技术检测发现，转染miRNA-29b模拟物后，与细胞增殖、凋亡等相关的基因和蛋白表达发生了明显变化。
其中，某些与肿瘤发生、发展和转移相关的基因表达被抑制，而某些促进细胞凋亡的基因表达被激活。
这些结果表明，miRNA-29b可能通过调控相关基因和蛋白的表达来抑制U251细胞的生长。
miRNA在胶质瘤组织和细胞中的表达及作用
表达 ， 影 响其 相关信 号 转导途 径 ， 能增 加肿 瘤细 胞凋
亡， 抑制 肿瘤 细 胞 生 长 和 侵 袭 ， 提 高 胶 质 瘤 组 织 对
放、 化疗 的敏 感性 。 在体 内 ， ｍ ｉ Ｒ － ２ １至少 可通 过 调 控三 条 信 号 转导 通路 促进 肿瘤 的增 殖 、 转 移 。第 １条 是 表 皮 生 长 因 子 受体 （ Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ） 通路 ， 上 调 ｍｉ Ｒ 一 ２ １可促 进 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ及 下游 Ｐ Ｉ ３ Ｋ ／ Ａ ｋ ｔ 信 号通 路活 性 ， 提 高 细胞增 殖 和侵袭 能力 ； 下 调 ｍｉ Ｒ － ２ １可抑 制 Ｅ Ｇ Ｆ Ｒ通 路 ， 抑 制 人 脑 胶 质 瘤 细胞增 殖 Ｊ 。第 ２条是 ｍ ｉ Ｒ 一 ２ １ 通路 ， 通过 抑制 靶 点基 质金 属 蛋 白酶 （ ＭＭ Ｐ） 抑 制 因子 Ｒ Ｅ Ｃ Ｋ、 ＭＭＰ
中图分类号 ： Ｒ ６ ５ １ ． １
文献标志码 ： Ａ
文章编号 ： １ ０ ０ ２ — ２ ６ ６ Ｘ（ ２ ０ １ ３ ） ３ ３ ＿ ｏ １ ０ ０ ＿ ０ ４
ｍｉ Ｒ Ｎ Ａ是 调节 ｍ Ｒ Ｎ Ａ 转 录和 翻译 的一类 非 编 码小 Ｒ Ｎ Ａ， 可 与特定 的 ｍＲ Ｎ Ａ ３ Ｕ Ｔ Ｒ区完 全或 部 分 互 补而调 节蛋 白质 翻译 过 程 ， 在 细 胞 的 增殖 、 凋亡 、
游调 控基 因表 达 ， 参 与肿 瘤 的发生 、 发展 。 ２ ｍ ｉ Ｒ Ｎ Ａ与胶 质瘤及 其表 达谱
质瘤 组织 中的表 达 与肿 瘤 分 级 呈 正 相关 ， 其 表 达 低 的癌 症 患者平 均 生存 期 比表 达 高 者 长 ， 可 能作 为一
种 标记 区别 Ｇ Ｂ Ｍ 和 间变 性 星 形 细 胞 瘤 。Ｂ ａ ｒ ａ ｎ ｉ ．
人类肿瘤细胞中miRNA的表达及其在疾病诊断与治疗中的意义
人类肿瘤细胞中miRNA的表达及其在疾病诊断与治疗中的意义miRNA是一种小分子RNA，其长度约为20-25个核苷酸，且多为线性双链结构。
在生物体中，miRNA的作用是通过与mRNA结合，抑制特定基因的转录和翻译。
miRNA通过诱导靶基因的降解或抑制其翻译，从而发挥调控细胞转录和译后水平的重要作用。
近年来，越来越多的研究表明，miRNA在许多疾病的发生和发展中起着重要的非常规调节作用。
一、miRNA在人类肿瘤细胞中的表达miRNA具有组织特异性和调节表达模式，它们可以参与多个生理和病理过程，如细胞增殖、分化、凋亡和细胞周期。
人类肿瘤细胞中的miRNA表达模式的改变与不同类型的癌症存在密切的关联。
实际上，许多肿瘤细胞中的miRNA表达是与癌症瘤进展和预后强相关的，这使得miRNA成为一种极具变化的生物标志物。
例如，miR-21是一种高度表达的miRNA，它在大量癌症中高表达并与病情严重程度有关。
miR-21在肺癌、胃癌和乳腺癌中被发现有显著升高的表达水平。
另外，miR-155的表达也在许多癌症中得到扩大，包括乳腺癌、胃癌、结肠癌和肝癌等。
因此，miRNA在癌症研究和癌症诊断的应用潜力也崭露头角。
二、miRNA在疾病诊断中的应用miRNA在癌症的早期诊断中的表现表明，其在其他疾病的诊断中也具有广泛的应用潜力。
比如，在心血管疾病中，许多miRNA与各种疾病相关的表达模式被发现了。
例如，心肌梗死后，miR-1的表达显著升高。
此外，miR-21与心肌缺血和高血压有关。
因此，miRNA对心血管疾病、肾脏疾病等疾病的早期诊断和治疗也具有重要意义。
三、miRNA在疾病治疗中的应用miRNA参与的渠道相对简单，因此它们作为治疗靶点及治疗疾病的潜在药物靶标也受到极大的关注。
调节特定miRNA已成为一种可靠的治疗癌症的方式之一。
目前在研究中的miRNA治疗药物有miR-16-mimic和miR-34a等，用于临床试验阶段的miRNA药物有MRX34、SAR, etc.miRNA-mRNA网络的研究也可以为药物发现和临床治疗提供更多的思路和安排，例如，针对某些细胞上调miR-21表达的癌症疗法应该考虑抑制miR-21的表达。
复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达 及作用机制研究
复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达及作用机制研究miRNA-200c在复发胶质瘤组织中的表达近年来的研究发现，miRNA-200c在胶质瘤的复发过程中起着重要的作用。
miRNA-200c 的表达水平在复发胶质瘤组织中明显升高，与初发性胶质瘤组织相比存在显著差异。
进一步的实验研究表明，miRNA-200c的高表达与胶质瘤的复发和恶化密切相关，提示miRNA-200c可能参与了复发胶质瘤的生长、侵袭和转移过程。
miRNA-200c的作用机制miRNA-200c在复发胶质瘤中的作用机制主要包括两个方面，一是对肿瘤细胞增殖和转移的调控，二是对肿瘤干细胞的影响。
miRNA-200c通过调控一系列靶基因，参与了复发胶质瘤细胞的增殖和转移过程。
研究发现，在复发胶质瘤组织中，miRNA-200c通过抑制一些抑癌基因的表达，如PTEN、p53等，同时增加一些促癌基因的表达，如c-Myc、Bcl-2等，使肿瘤细胞的增殖速度加快、侵袭和转移能力增强，从而促进了胶质瘤的复发和恶化。
miRNA-200c还对胶质瘤干细胞的特性产生影响。
胶质瘤干细胞是胶质瘤复发和耐药的重要原因，而miRNA-200c的高表达能够促进胶质瘤干细胞的增殖和自我更新，同时抑制其分化和凋亡，使得胶质瘤干细胞不断地产生，并在治疗后很快恢复，从而导致胶质瘤的复发和难以治愈。
结论miRNA-200c在复发胶质瘤组织中的高表达与胶质瘤的复发和恶化密切相关，其作用机制包括对肿瘤细胞增殖和转移的调控，以及对胶质瘤干细胞的影响。
miRNA-200c具有重要的治疗前景，对于寻找胶质瘤治疗的新靶点和策略具有重要的临床意义。
未来，应加强对miRNA-200c在胶质瘤复发中的作用机制的深入研究，并研发针对miRNA-200c的新型治疗策略，为胶质瘤患者的治疗和预后带来新的突破。
复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达 及作用机制研究
复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达及作用机制研究【摘要】复发胶质瘤是一种具有高度侵袭性和复发性的恶性肿瘤，miRNA-200c在其中扮演着重要的角色。
本研究旨在探究miRNA-200c在复发胶质瘤组织中的表达情况以及其作用机制。
研究结果表明，miRNA-200c在复发胶质瘤中表达水平明显升高，并且通过调控相关信号通路参与了肿瘤的发生和发展过程。
进一步实验证实，miRNA-200c的表达与胶质瘤复发紧密相关，并且在治疗中具有潜在应用价值。
未来的研究方向包括深入探究miRNA-200c的作用机制以及开发相关药物靶向疗法。
miRNA-200c在复发胶质瘤中具有重要作用，对临床诊疗具有重要意义，为未来的治疗策略提供了新的思路。
【关键词】复发胶质瘤、miRNA-200c、表达、作用机制、影响、治疗、应用、未来研究方向、临床意义、研究方向。
1. 引言1.1 研究背景复发胶质瘤是一种常见的恶性脑肿瘤，其治疗难度和预后较差。
miRNAs是一类具有重要调控作用的非编码RNA，在多种肿瘤中发挥重要作用。
miRNA-200c是miRNA-200家族中的一员，已有研究表明其在多种肿瘤中的表达水平与肿瘤的发生、发展及预后密切相关。
关于miRNA-200c在复发胶质瘤组织中的表达及作用机制的研究还相对较少，对其在复发胶质瘤中的具体作用机制还存在争议。
研究miRNA-200c在复发胶质瘤中的表达及作用机制对于揭示复发胶质瘤的发病机制、寻找新的治疗靶点具有重要意义。
本研究旨在探讨miRNA-200c在复发胶质瘤组织中的表达情况以及其可能的作用机制，为临床治疗提供新的思路和方法。
1.2 研究目的本研究的主要目的是探究miRNA-200c在复发胶质瘤组织中的表达情况及其作用机制，分析miRNA-200c对胶质瘤复发的影响，探讨miRNA-200c在治疗中的应用潜力，并展望未来miRNA-200c的研究方向。
通过深入研究miRNA-200c在复发胶质瘤中的作用机制，可以为相关研究提供新的思路和方法，为临床治疗提供新的靶点，促进胶质瘤治疗的进步和转化。
人脑胶质瘤中miR-106b-25基因簇表达的研究
２ ８１
基础 － １ ０ ６ ｂ ￣ － － ． ２ ５ 基 因簇表 达的研 究： ｌ ：
ｒ ｏ — ｏ ｎ ｃ ｏ ｌ ｏ ｇ ｙ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ Ｎｅ ｕ ｒ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｉ ｎ ｓ ｔ ｉ ｔ ｕ ｔ ｅ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ Ｍｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｙ ｔ Ｇ ｅ ｎ ｅ ｒ ａ ｌ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ， Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ ３ ０ ０ ０ ５ ２ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ． Ｔ ｈ ｉ ｓ ｗｏ ｒ ｋｗ ａ ｓ ｓ ｕ ｐ ｐ ｏ ｓ ｅ ｄｂ ｙＴ ｈ ｅ Ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｎ ａ ｕｒ ｔ ａ ｌ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ Ｆ ｏ ｕ ｎ ｄ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ （ ｒ ｉ ｏ ． ８ １ １ ０ １ ９ １ ５ ） ， Ｔ ｈ ｅ Ｐ ｒ ｏ ｊ ｅ ｃ ｔ ｏ ｆ Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ Ａｐ ｐ ｌ ｉ ｅ ｄ Ｂ ａ ｓ ｉ ｃ ａ ｎ ｄ Ｃ ｕ ｔ ｔ ｉ ｎ ｇ — ｅ ｄ ｇ ｅ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ（ Ｎｏ ． １ ２ Ｊ ｃ Ｑ ＮＪ ｃ ０ ６ ９ ０ ０ ） ， ａ ｎ ｄ Ｔ ｈ ｅ Ｔ ｉ ａ ｎ ｊ ｉ ｎ Ｍｕ ｎ ｉ ｃ ｉ ｐ ａ ｌ Ｈｅ ａ ｌ ｔ ｈ Ｂ ｕ ｒ ｅ ａ ｕ Ｓ ｃ ｉ ｅ ｎ ｔ ｉ ｉ ｆ ｃ ａ ｎ ｄ
Ｄｅ ｐ ａ ｒ ｔ ｍｅ ｎ ｔ ｏ ｆ Ｎｅ ｕ ｒ ｏ ｓ ｕ ｒ ｇ ｅ ｒ ｙ ， ｔ ｈ ｅ Ｓ ｅ ｃ ｏ ｎ ｄ Ａｆ ｉｌ ｆ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ Ｈｏ ｓ ｐ ｉ ｔ ａ ｌ ｏ ｆ Ｎａ ｎ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｎａ ｎ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ３ ３ ０ ０ ０ ６ ； Ｌ ａ ｂ ｏ ｒ ａ ｔ ｏ ｒ ｙ ｏ ｆ Ｎｅ ｕ —
脑胶质瘤恶性进展中MiRNAs与转录因子的相互作用
脑胶质瘤恶性进展中MiRNAs与转录因子的相互作用摘要：胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤，尽管进行了手术联合同步放化疗的多模式治疗，但是胶质瘤患者的预后依然很差，因此，深入挖掘胶质瘤发生和进展的分子机制，并以此为基础开发新型靶向治疗药物显得尤为重要。
MicroRNAs是指长度约17-22个核苷酸的非编码RNAs，具有高度保守序列。
MicroRNAs发挥生物学功能主要是转录基因沉默（post-transcriptional gene silencing，PTGS）。
其主要与靶信使RNA（message RNAs，mRNA）的3’端非翻译区（3’-untranslated regions，3’-UTR）结合，miRNA与mRNA依据其结合程度的不同（部分互补或完全互补），发挥转录降解或者是翻译抑制的作用。
最新研究表明，部分miRNA能够通过与靶mRNA的5’端非翻译区（5’-untranslated regions，5’-UTR）结合，从而增强mRNA的稳定性。
关键词：脑胶质瘤；miRNAs；转录因子；恶性进展Argonaute(AGO)蛋白都具有Piwi结构域，在miRNA通路中发挥多种功能。
它们通过产生ac-pre-miRNA，参与了miRNA装配的过程，介导mRNA降解、去稳定作用或者转录抑制。
另外，AGO2蛋白可以在转录后调控调节miRNA丰度，内源性AGO2的减少会降低成熟miRNA的表达和活性。
AGO2的这个特殊功能是独立于它的剪切功能及内切酶活性的。
为探索lncRNA FGF14-AS2促进胶质瘤细胞恶性生物学行为的分子机制，有研究通过qRT-PCR明确了lncRNA FGF14-AS2在细胞中的分布，结果提示lncRNA FGF14-AS2主要定位于细胞质中。
细胞质中的长链非编码RNA倾向于通过吸附miRNA发挥其调控功能。
为了初步筛选lncRNA FGF14-AS2吸附的miRNA，检索了在线生物信息数据库——Lncbase，初步检索出lncRNA FGF14-AS2能够吸附的miRNAs，共40个。
microRNA与人脑胶质瘤的研究进展
microRNA与人脑胶质瘤的研究进展万意;王勇;王之敏;黄强【摘要】microRNAs(miRNAs)是一类长度为19~25个核苷酸的非编码小分子RNA,它主要通过与靶基因mRNA3'UTR完全或不完全配对,导致靶标mRNA降解或转录后翻译抑制,参与细胞凋亡、增殖及分化等生理过程.miRNAs可通过调控其靶基因参与的信号通路,调节胶质瘤的形成和发展,发挥癌基因或抑癌基因的作用,与人脑胶质瘤发生发展密切相关,为胶质瘤的分子病理及诊断和治疗提供新的策略.【期刊名称】《神经损伤与功能重建》【年(卷),期】2011(006)004【总页数】3页(P299-301)【关键词】miRNA;人脑胶质瘤;靶基因【作者】万意;王勇;王之敏;黄强【作者单位】上海交通大学苏州九龙医院神经外科,江苏,苏州,215021;上海交通大学仁济医院神经外科,上海,200127;上海交通大学苏州九龙医院神经外科,江苏,苏州,215021;苏州大学附二医院神经外科,江苏,苏州215004【正文语种】中文【中图分类】R741.02;R739.4人脑胶质瘤是最常见的原发性脑肿瘤,在治疗过程中有很多方法,但预后仍然不佳[1]。
手术不可能全切,血脑屏障的存在也使化疗药物难以完全到达肿瘤部位[2,3]。
此外,胶质瘤的异质性高,病因未明,临床进展缓慢也是造成其治疗困难的原因。
近年来,一种高度保守的基因调节因子 microRNA(miRNA)的出现,可能为胶质瘤的治疗增加新的思路[4,5]。
1 miRNA的产生及功能特点miRNA是能通过序列特异性的方式来调节基因表达的一系列非编码小分子RNA,由19～25个核苷酸组成,目前的研究认为它们对转录后水平的基因表达起抑制作用,从而参与细胞的分化、凋亡和代谢等生理过程[6]。
miRNA的前身是 pre-miRNA,其在Dicer酶的作用下被剪切成约22nt的双链miRNA。
成熟的miRNA 会从各自的pre-RNA的5'端释放出来,参与剩余的转录后调控过程[7-9]。
miRNa-221222表达与胶质瘤放射敏感性的相关性研究的开题报告
miRNa-221222表达与胶质瘤放射敏感性的相关性
研究的开题报告
1. 研究背景
胶质瘤是中枢神经系统最常见的恶性肿瘤之一，放疗是治疗胶质瘤
的有效手段之一。
无论是对于初诊胶质瘤还是复发性胶质瘤，放疗治疗
都具有一定的疗效。
然而，患者的放疗敏感性差异很大，因此研究胶质
瘤的放射敏感性机制和影响因素，对于提高放疗疗效、缓解胶质瘤患者
痛苦和提高生命质量有重要意义。
2. 研究目的
miRNAs是一类由20-22个核苷酸组成的单链RNA分子，参与了细
胞信号转导、基因表达调控以及细胞增殖和凋亡等生命过程。
miR-221和miR-222是miRNAs家族的两个重要成员，与胶质瘤的发生和发展密切相关。
本研究旨在探讨miR-221/222在胶质瘤放射敏感性中的作用和机制，为解释胶质瘤的放射敏感性提供新的科学依据。
3. 研究方法
3.1 研究对象：选取一组胶质瘤患者作为研究对象。
3.2 实验设计：首先采集患者胶质瘤组织标本，并检测miR-221/222的表达水平。
其次，将胶质瘤标本进行放射治疗，观察胶质瘤的放射反应。
最后，对比分析miR-221/222的表达水平和胶质瘤的放射反应，探
究二者之间的关联性。
3.3 实验过程：采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术检测miR-221/222的表达水平，并用统计学方法对结果进行分析。
4. 研究意义
该研究的结果将为胶质瘤放疗的个体化治疗提供新的理论依据。
通过探究miR-221/222的作用机制，能够进一步研究miRNAs在肿瘤治疗中的应用潜力，为胶质瘤的临床治疗提供新思路和临床指导。
脑胶质瘤患者血清miR-21、miR-221、miR-222和miR-10b的相对表达量及临床意义
脑胶质瘤患者血清miR-21、miR-221、miR-222和miR-10b的相对表达量及临床意义朱建军;李春生【摘要】目的探讨血清中miR-21、miR-221、miR-222和miR-10b对脑胶质瘤恶性程度的鉴别价值.方法采用Real-timePCR技术检测34例低级别脑胶质瘤患者和50例高级别脑胶质瘤患者miR-21、miR-221、miR-222和miR-10b的相对表达量,使用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)评价其诊断价值.结果与低级别脑胶质瘤组相比,高级别脑胶质瘤组血清miR-10b、miR-21和miR-221的相对表达量均显著升高,且差异具有统计学意义,miR-222相对表达量的差异无统计学意义.ROC曲线评价血清miR-10b、miR-21和miR-221对于脑胶质瘤恶性程度的诊断价值,miR-10b的曲线下面积(area under curve,AUC)值最大,为0.722(0.694,0.751),对于低级别脑胶质瘤的诊断敏感性和特异性分别为79.41％和78.00％.使用二元Logistic回归分析评价血清miR-10b、miR-21和miR-221联合检测对于脑胶质瘤恶性程度的诊断价值,其曲线下面积为0.915(0.855,0.977),对于低级别脑胶质瘤的诊断敏感性和特异性分别为85.29％和88.00％.与miR-10b、miR-21和miR-221单独检测的诊断价值相比,其曲线下面积均有显著提高(P=0.026、P=0.012、P=0.008).结论 miR-10b、miR-21和miR-221联合诊断可以为临床脑胶质瘤患者的鉴别诊断提供一种潜在的辅助诊断方法.【期刊名称】《标记免疫分析与临床》【年(卷),期】2015(022)006【总页数】3页(P511-513)【关键词】脑胶质瘤;血清;微小RNA;受试者工作特征曲线;二元Logistic回归分析【作者】朱建军;李春生【作者单位】秦皇岛市青龙满族自治县医院脑外科,河北秦皇岛066500;秦皇岛市青龙满族自治县医院脑外科,河北秦皇岛066500【正文语种】中文脑胶质瘤是临床上一种常见的原发性颅脑肿瘤，预后较差。
复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达 及作用机制研究
复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达及作用机制研究胶质瘤是一种常见的恶性中枢神经系统肿瘤，通常具有高度侵袭性和复发性。
miRNA-200c是一种微小RNA，在多种肿瘤类型中都具有重要的调控作用。
近年来的研究表明，miRNA-200c在胶质瘤的发生和发展中发挥着重要作用。
在本文中，我们将重点讨论复发胶质瘤组织中miRNA-200c的表达及其可能的作用机制。
miRNA-200c是miRNA-200家族的一员，已经被证实在多种肿瘤中表达异常，并且与肿瘤的侵袭性、转移能力以及预后密切相关。
miRNA-200c在肿瘤细胞中起着抑制作用，可以抑制细胞增殖、侵袭和转移，同时还可以诱导细胞凋亡。
miRNA-200c被认为是一种潜在的肿瘤治疗靶点。
在胶质瘤中，miRNA-200c的表达水平通常下调，特别是在复发胶质瘤组织中，其表达水平更低。
miRNA-200c的低表达与胶质瘤的恶性程度、预后相关性很高。
研究发现，miRNA-200c 的下调可以促进胶质瘤细胞的侵袭和转移，同时也与化疗药物的抵抗性相关。
深入研究miRNA-200c在胶质瘤中的作用机制对于揭示肿瘤发生发展的分子机制，并且为患者的个体化治疗提供重要的理论基础。
miRNA-200c在胶质瘤中的作用机制涉及多个信号通路和靶基因。
研究表明，miRNA-200c通过调控E-cadherin、ZEB1和ZEB2等转录因子的表达，影响了胶质瘤细胞的上皮-间质转化过程，从而影响了细胞的侵袭和转移能力。
miRNA-200c还可以调控胶质瘤干细胞的自我更新和分化能力，进而影响肿瘤的发生和发展。
在治疗方面，miRNA-200c的表达与化疗药物的敏感性密切相关。
研究表明，miRNA-200c的下调可以导致胶质瘤细胞对多种化疗药物的抵抗性增加，包括顺铂、氮芥、卡铂和氯氮芥等。
针对miRNA-200c的调控可能成为提高胶质瘤化疗疗效的一种新策略。
除了在胶质瘤细胞中的作用外，miRNA-200c在肿瘤微环境中也具有重要作用。
人胶质瘤细胞及组织中miRNA-221、miRNA-222表达变化及意义
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山东 医药 ２ １ ０２年第 ５ ２织 中 ｍ Ｒ Ａ ２ １ ｉＮ 一２ ｍ Ｒ Ａ ２ ２表 达 变化 及 意 义 ｉ Ｎ 一２ 、
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《2024年miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》范文
《miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》篇一一、引言随着科技的不断进步，分子生物学和生物医学研究已经进入了崭新的阶段。
特别是近年来，对于microRNA（miRNA）的研究越来越深入，其在各种癌症生长、扩散以及耐药性等方面的重要作用已逐渐被揭示。
本篇论文主要关注的是miRNA-29b对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用及其机制的研究。
我们将深入探讨这一生物现象的原理和影响，为胶质瘤的早期诊断和后续治疗提供理论支持。
二、研究目的与意义在各种类型的肿瘤中，胶质瘤因其复杂的基因变异和免疫响应而显得尤为难以治疗。
而miRNA-29b作为一种重要的调控因子，其对于U251人脑胶质瘤细胞的生长抑制作用的研究，将有助于我们更深入地理解胶质瘤的生长机制，并为未来的胶质瘤治疗提供新的可能性和思路。
此外，本研究还有助于深化我们对miRNA 在癌症发展中的作用的理解，推动整个领域的发展。
三、材料与方法我们的研究采用了U251人脑胶质瘤细胞系作为实验对象。
我们通过将miRNA-29b进行基因表达过表达和抑制实验，然后对细胞生长的改变进行了详细的研究。
在细胞生长抑制的过程中，我们通过观察和分析基因的表达情况、细胞信号传导的改变等机制，从而确定miRNA-29b抑制细胞生长的具体机制。
四、实验结果我们的实验结果显示，过表达miRNA-29b后，U251人脑胶质瘤细胞的生长明显受到抑制。
在基因表达层面，我们发现与细胞生长、增殖和凋亡相关的基因表达发生了显著变化。
在信号传导层面，我们发现某些关键的信号通路被激活或抑制，这可能是导致细胞生长抑制的原因之一。
五、结果分析我们分析这些实验结果发现，miRNA-29b在抑制U251人脑胶质瘤细胞的生长中可能起到多重作用。
一方面，它可以调节基因的表达，影响细胞的增殖和凋亡过程；另一方面，它可能通过影响某些关键的信号通路来影响细胞的生长和活动。
这些发现为我们理解miRNA-29b在胶质瘤生长中的作用提供了新的视角。
《2024年miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》范文
《miRNA-29b抑制U251人脑胶质瘤细胞生长及其机制的初步研究》篇一一、引言近年来，随着生物医学技术的不断进步，人们对于肿瘤疾病的研究越来越深入。
其中，miRNA（微小RNA）作为一类重要的基因调控因子，在肿瘤的发病机制、诊断及治疗等方面发挥着重要作用。
本研究旨在探讨miRNA-29b对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用及其潜在机制，为胶质瘤的治疗提供新的思路和方向。
二、材料与方法1. 材料本实验所使用的U251人脑胶质瘤细胞购自ATCC细胞库。
实验所使用的miRNA-29b模拟物和抑制剂购自生物公司。
2. 方法（1）细胞培养与转染：采用常规的细胞培养技术对U251人脑胶质瘤细胞进行培养，并利用脂质体法将miRNA-29b模拟物和抑制剂转染至细胞中。
（2）细胞增殖检测：利用MTT法检测转染前后细胞的增殖情况。
（3）蛋白质印迹法（Western Blot）：检测转染miRNA-29b 后相关蛋白的表达情况。
（4）数据分析：实验数据采用SPSS软件进行分析处理，并进行统计学检验。
三、实验结果1. 细胞增殖情况通过MTT法检测U251人脑胶质瘤细胞的增殖情况，结果显示，转染miRNA-29b模拟物后，细胞的增殖能力明显受到抑制，而转染miRNA-29b抑制剂后，细胞的增殖能力则有所增强。
这一结果表明miRNA-29b对U251人脑胶质瘤细胞的生长具有抑制作用。
2. 蛋白质表达情况通过Western Blot检测转染miRNA-29b后相关蛋白的表达情况，发现miRNA-29b的过表达能够显著降低胶质瘤细胞中某些关键蛋白的表达水平，如某转录因子、某些促癌基因等。
这一结果表明miRNA-29b可能通过调控这些关键蛋白的表达来抑制U251人脑胶质瘤细胞的生长。
四、讨论本研究初步探讨了miRNA-29b对U251人脑胶质瘤细胞生长的抑制作用及其潜在机制。
实验结果显示，miRNA-29b能够显著抑制U251细胞的增殖，并可能通过调控某些关键蛋白的表达来发挥这一作用。
脑胶质瘤恶性进展关键 miRNA 表达的研究
脑胶质瘤恶性进展关键 miRNA 表达的研究马瑞敏;康熙雄;杨春娇;赵晖;张国军【摘要】Objective To identify the key miRNAs involved in the malignant progression of gliomas . Methods Comprehensive miRNAs profiling was performed in 198 glioma tissues with different pathological grade u‐sing miRNA array .Quantitative real‐time reverse transcription PCR(qRT‐PCR) was used to validate the expression levels of the key miRNAs ,which expressed differentially in glioma tissues with different pathological grade .The MTT assay ,cell cycle assay and colony formation assay were performed to investigate the effect of key miRNAs on the proliferation of tumor cells .Results Compared to grade Ⅱ gliomas miR‐374a ,miR‐590‐3p ,miR‐374b ,miR‐29c , miR‐153 were upregulated ,and let‐7c ,miR‐544 ,let‐7a ,miR‐132 ,miR‐7d were downregulated in grade Ⅲ gliomas .The expression levels of miR‐374a and miR‐544 were validated by qRT‐PCR and the results were consistent with the re‐sults of array .The H4 cells transfected with miR‐374a mimics showed increased cell proliferatio n rates ,and the num‐ber of colony formation was increased .The H4 cells transfected with miR‐544 mimics showed decreased cell prolifera‐tion rates ,and the number of colony formation was decreased .GBMs demonstrated a significant increase in miR‐196b tran script levels compared to the mean expression levels observed in grade grade Ⅱ and Ⅲ gliomas .The glioma cells transfected with miR‐196b mimics showed increased cell proliferation rates and could increase the fraction of S‐phaseproportion of cell cycle .C onclusion MiR‐374a ,miR‐544 and miR‐196b ,which expressed differentially in glioma tis‐sues with different pathological grade ,may push the malignant progression of gliomas by influencing cell prolifera‐tion .%目的：寻找影响胶质瘤恶性进展的关键微小RNA（miRNA）。
胶质母细胞瘤患者外周血中miRNA特异性表达研究
胶质母细胞瘤患者外周血中miRNA特异性表达研究董伦;宿建辉;王晓东;张恒柱;韩崇旭;魏民【摘要】目的检测GBM患者和健康人外周血中miRNA的异常表达.方法利用基因芯片分析GBM患者和正常对照者血清中miRNA的表达量,然后进一步进行靶基因的生物信息学分析.结果 miRNA芯片表明在血清中15例GBM组和15例正常对照组的外周血miRNA表达有明显差异.752种miRNA中,GBM组有95种miRNA表达上调,22种表达下调.(倍数≥2.0,P＜0.01).通过深入分析,我们发现GBM患者miR-576-5p、miR-340和miR-626过表达,但miR-320、let-7g-5p、miR-7-5p低表达.进一步相关生物信息学分析,我们发现,他们在脑胶质瘤信号通路的调控中发挥重要的作用.结论与正常人比较,以上6种miRNA在GBM患者外周血中有显著差异.外周血中的miRNA表达谱中一些特异性表达的miRNA可能作为高特异性和灵敏度诊断胶质瘤的新靶向标志物.【期刊名称】《中华神经外科疾病研究杂志》【年(卷),期】2016(015)005【总页数】4页(P401-404)【关键词】胶质瘤;微小RNA;基因芯片;外周血【作者】董伦;宿建辉;王晓东;张恒柱;韩崇旭;魏民【作者单位】扬州大学临床医学院神经外科,江苏扬州225001;扬州大学临床医学院医务处,江苏扬州225001;扬州大学临床医学院神经外科,江苏扬州225001;扬州大学临床医学院神经外科,江苏扬州225001;扬州大学临床医学院中心实验室,江苏扬州225001;扬州大学临床医学院神经外科,江苏扬州225001【正文语种】中文【中图分类】R341脑胶质瘤是神经外科临床工作中最常见的原发性颅内恶性肿瘤。
其发病机制不明确，迄今仍缺乏早期准确、客观、系统的诊断指标。
胶质瘤的形成与发展是一个复杂的过程[1]。
美国在2010对胶质母细胞瘤分子分型进行了报告。
微阵列芯片分析人胶质瘤miRNA差异表达谱
【研究原著】微阵列芯片分析人胶质瘤miRNA 差异表达谱杨立坚,彭健作者单位:中南大学湘雅医院外科,湖南长沙410008作者简介:杨立坚(19662),男,长沙人,副主任医师,硕士。
研究方向:神经外科临床与基础。
【摘要】 目的 检测人胶质瘤与非肿瘤脑组织中微小RNA (miRNA )的表达差异情况。
方法 选取经手术切除的胶质瘤组织标本及非肿瘤脑组织,分别提取总RNA 和小分子RNA ,在miRNA 微阵列芯片中杂交检测,通过芯片扫描和数据聚类分析,并通过实时荧光定量R T 2PCR 验证,获得该病异常miRNAs 表达谱。
结果 筛选出5个胶质瘤的相关miRNAs ,其中表达上调2个,表达下调3个。
其中上调的有miR 218b 、miR 2486;下调的有miR 2237、miR 296、miR 221,差异表达情况得到定量R T 2PCR 的证实。
结论 筛选出的差异表达miRNAs 可能参与胶质瘤的发生发展。
【主题词】 微阵列分析;神经胶质瘤/代谢;微RNAs/代谢【中图分类号】 R739.4 【文献标识码】 A 【文章编号】 100926647(2010)2024789205The differentially expressed miRNA in human glioblastoma based Microarray YA N G L i 2j ian ,P EN GJ ian.De partment of S urgery X iangy a Hos pital ,Cent ral S outh Universit y ,Changsha 410008,China 【Abstract 】 Objective To explore the differentially expressed micro RNAs in glioblastoma and to the relation 2ship between pathogenesis using miRNA microarray.Methods The tumor tissue glioblastoma and non 2tumors tissue were obtained f rom undergoing surgical resection.Total RNA ,including the small RNAs ,was extracted and isola 2ted respectively.Hybridization was carried out on miRNA microarray chip.Real 2time quantitative R T 2PCR was per 2formed to confirm results obtained by microarray analysis.R esults Five miRNAs have been identified ,2of them were up 2regulated and the remaining three were down 2regulated in cancer tissues.The differential expression of miR 218b 、miR 2486、miR 2237、miR 296、miR 221was confirmed by microarray analysis.Conclusion The differentially expressed micro RNAs miRNA genes in this study may be involved in the pathogenesis of human glioblastoma.【MeSH 】 Microarray Analysis ;G lioma/metabolism ;MicroRNAs/metabolism 胶质瘤(glioma )是中枢神经系统最常见的肿瘤。
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主堡控经处叠苤盍塑§生垒旦筮丝鲞箜鱼翅垦！垫』堕璺！！唑臻：』！塑！塑：ｙ些丝，塑！：垒２．ｍｉＲＮＡ的提取：Ｔｒｉｚｏｌ一步法提取肿瘤细胞总ＲＮＡ，５０１ｘｇ总ＲＮＡ用Ａｍｂｉｏｎ公司的ｍｉＲＮＡ分离试剂盒富集和纯化ｍｉＲＮＡ，方法如下：总ＲＮＡ和５倍体积的裂解／结合缓冲液相混合，加入１／１０体积的ｍｉＲＮＡ匀浆添加剂，冰上孵育１０ｍｉｎ，加人１／３体积的无水乙醇，充分混匀后将混合液通过一个滤管，收集液体加入２／３体积的无水乙醇，并且充分混匀后９５℃预热洗脱液二次过滤。
３．ｍｉＲＮＡ微阵列杂交：ｍｉＲＮＡ微阵列表达谱芯片包括针对人４３５个成熟ｍｉＲＮＡ。
Ｔ４ＲＮＡ连接酶标记ｍｉＲＮＡ后４２℃杂交过夜，４２℃、２×ＳＳＣ和室温、０．２×ＳＳＣ洗涤。
扫描芯片扫描后读取杂交信号采用ＳＡＭ２．１与正常人脑组织ｍｉＲＮＡ表达谱芯片杂交结果比较后挑选差异表达ｍｉＲＮＡ并应用Ｃｌｕｓｔｅｒ３．０分析结果。
４．ｍｉＲＮＡ蛋白质作用靶点的初步研究：ｈａｓ—ｍｉＲ一２１锁核酸（１０ｃｋｅｄｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ，ＬＮＡ）修饰的反义寡核苷酸序列为５７一ＴＣＡＡＣＡＴＣＡＧＴＣＴＧＡＴＡＡＧＣＴＡ一３’，对照无意义序列（Ｓｃｒａｍｂｌｅｄｓｅｑｕｅｎｃｅ，Ｓｃｒ）为５’一ＣＡＴｒＡＡＴＧＴＣＧＧＡＣＡＡＣＴＣＡＡＴ一３’（北京赛百胜合成）。
Ｏｌｉｇｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ常规转染Ｕ２５１细胞７２ｈ后收集细胞应用ｍｉＲ一２１原位杂交试剂盒（武汉博士德公司）检测表达水平的变化，苏木素复染细胞核。
对转染前后细胞提取总蛋白进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检查ＳＥＦｒｒ一７的表达。
结果１．ｍｉＲＮＡ微阵列杂交结果：晶芯＠哺乳动物ｍｉＲＮＡ微阵列芯片在４个亚阵均有质量控制点和ｕ６内参点，每一个ｍｉＲＮＡ均有３个技术重复点。
ＳＡＭ分析结果发现在胶质瘤细胞系中一致表达上调的ｍｉＲＮＡ相对较少，ｈｓａ—ｍｉＲ一１５ｂ、ｈｓａ—ｍｉＲ一１０６ｂ、ｈｓａ—ｍｉＲ一２２１、ｈｓａ—ｍｉＲ一２７ａ、ｈｓａ—ｍｉＲ一２１、ｈｓａ—ｍｉＲ一２２２、ｈｓａ—ｍｉＲ一２３ｂ、ｈｓａ—ｍｉＲ一２３ａ等８种ｍｉＲＮＡ一致表达上调超过正常脑组织的２倍；一致表达下调的ｍｉＲＮＡ数量较多，包括ｈｓａ—ｍｉＲ一１、ｈｓａ—ｍｉＲ一１２４ａ、ｈｓａ—ｍｉＲ一１２６、ｈｓａ—ｍｉＲ一１２７、ｈｓａ—ｍｉＲ一１２８ａ、ｈｓａ—ｍｉＲ一１２８ｂ、ｈｓａ—ｍｉＲ一１３２、ｈｓａ—ｍｉＲ一１３７、ｈｓａ—ｍｉＲ一２１９、ｈｓａ—ｍｉＲ一２２３、ｈｓａ—ｍｉＲ一３２３、ｈｓａ—ｍｉＲ一３２９、ｈｓａ—ｍｉＲ一３３０、ｈｓａ—ｍｉＲ一３３８、ｈｓａ—ｍｉＲ一３４２、ｈｓａ—ｍｉＲ一４５１、ｈｓａ—ｍｉＲ一４９５、ｈｓａ—ｍｉＲ一９５等１８种ｍｉＲＮＡ一致表达下调为正常脑组织的５０％以下。
通过聚类分析发现：人脑胶质母细胞瘤细胞系ＴＪ８９９、ＴＪ９０５和Ｕ２５１的ｍｉＲＮＡ表达谱可以聚类在一起，而ＴＪ８６１、Ａ１７２和Ｈ４可以聚类在一起。
２．下调ｍｉＲ一２１的表达后上调Ｕ２５１细胞系中ＳＥ门７的表达：ｍｉＲ一２１原位杂交结果表明，Ｕ２５１胶质瘤细胞在细胞核出现棕黄色阳性杂交信号，在阳性信号区域中可以显示出核仁区域的阴性信号区域；在对照无意义序列转染Ｕ２５１细胞后原位杂交的ｍｉＲ一２１阳性信号分布与对照细胞一致，Ｕ２５１细胞转染针对ｈａｓ—ｍｉＲ一２１序列设计的ＬＮＡ修饰的反义寡核苷酸７２ｈ后原位杂交结果表明Ｕ２５１细胞核内没有ｍｉＲ一２１的杂交信号（图１）。
这表明ＬＮＡ修饰的反义寡核苷酸可以在明显抑制成熟ｍｉＲ一２１的产生和表达。
Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ发现Ｕ２５１细胞和对照无意义序列转染Ｕ２５ｌ细胞ＳＥＰＴ７的表达水平较低，而转染ＬＮＡ修饰的反义寡核苷酸７２ｈ后ＳＥＰＴ７的表达明显上调（图２）。
图１Ｕ２５ｌ细胞转染反义ｍｉＲ一２１反义寡聚核苷酸前后原位杂交分析ｍｉＲ一２１亚细胞定位与表达（ＤＡＢ染色×１００）在Ｕ２５１胶质瘤细胞核出现棕黄色阳性杂交信号，在阳性信号区域中可以显示出核仁区域的阴性信号区域、细胞质没有阳性信号（Ｕ２５１组）；ｂ．在对照无意义序列转染Ｕ２５ｌ细胞后原位杂交的ｍｉＲ一２１阳性信号分布与对照细胞一致（Ｓｃｒ无意义序列转染组）；ｃ．Ｕ２５ｌ细胞转染针对ｈａｓ—ｍｉＲ一２１序列设计的ＬＮＡ修饰的反义寡核苷酸７２ｈ后原位杂交结果表明Ｕ２５１细胞核内没有棕黄色阳性信号，呈现苏木素复染后的紫色（ＬＮＡ修饰反义治疗组）讨论ｍｉＲＮＡ有３个明显的结构特征：（１）ｍｉＲＮＡ广泛存在且本身不具有开放阅读框架；（２）ｍｉＲＮＡ通常的长度大约为２２个核苷酸大小，其中２１—２３ｎｔ长度的ｍｉＲＮＡ占８４％。
但在３７端可以有１—２个碱基的长度变化；（３）成熟的ｍｉＲＮＡ结构为单链结构¨Ｊ。
成熟的ｍｉＲＮＡ的作用转录后水平通过促进靶ｍｉＲＮＡ的降解和（或）抑制翻译过程而发挥负调控基因表达的过程。
ｍｉＲＮＡ在不同的物种之间具图２Ｕ２５１细胞转染反义ｍｉＲ一２１反义寡聚核苷酸前后Ｗｅｓｔｅｍｂｌｏｔ分析ＳＥＰＴ７表达。
Ｕ２５１细胞和Ｓｃｒ无意义序列转染组ＳＥＰＴ７弱表达，ＬＮＡ修饰的反义寡核苷酸转染组ＳＥＰＴ７表达明显上升，说明ｍｉＲ一２１调控ＳＥＰＴ７的表达有高度的保守性，这种保守性跨越物种的范围很大，从低等的线虫到人类。
ｍｉＲＮＡ的保守性、时序表达特异性和组织表达特异性提示它在生命活动的基本层面发挥作用。
Ｃｉａｆｒ色等旧。
通过微阵列的方法比较了９例原发性胶质母细胞瘤与强化边缘２ｃｍ处“正常瘤周脑组织”的ｍｉＲＮＡ表达谱，结果发现超过半数的肿瘤组织过表达下面的ｍｉＲＮＡ：包括ｍｉＲ一１０ｂ、ｍｉＲ一１３０ａ、ｍｉＲ一２２１、ｍｉＲ一１２５ｂ一１、ｍｉＲ一１２５ｂ一２、ｍｉＲ一９—２、ｍｉＲ一２１、ｍｉＲ一２５和ｍｉＲ一１２３；而ｍｉＲ一１２８ａ、ｍｉＲ一１８１ｃ、ｍｉＲ一１８１ｂ和ｍｉＲ一１８１ａ在部分肿瘤组织中表达下调；ｍｉＲ一２１作为表达上调的ｍｉＲＮＡ代表，在胶质瘤组织中的表达水平是瘤周“正常组织”表达水平的１．８～９．３倍；而在胶质母细胞瘤细胞系中，其表达水平比正常脑组织表达水平要高１．６倍旧Ｊ。
该小组进一步对１０例胶质母细胞瘤细胞系的ｍｉＲＮＡ表达谱进行了研究，发现细胞系中过表达下面的ｍｉＲＮＡ：包括ｍｉＲ一２２１、ｍｉＲ一２３ａ、ｍｉＲ一２４—２、ｍｉＲ一２４—１、ｍｉＲ一２３ｂ、ｍｉＲ一２４—１／ｍｉＲ一２７ｂ／ｍｉＲ一２３ｂ、ｍｉＲ一２１、ｍｉＲ一１９１和ｍｉＲ一２２０；而ｍｉＲ一１８１ａ、ｍｉＲ一１８１ｂｌｍｉＲ一１２８ｃｌｍｉＲ一１９７、ｍｉＲ一１８１ＣｌｍｉＲ一１２５ｂ一２、ｍｉＲ一９９ａ／ｌｅｔＴｃ／ｍｉＲ一１２５ｂ一２和ｍｉＲ一１２５ｂ一１在细胞系中表达下调【３Ｊ。
Ｃｈａｎ等＂１通过微阵列的方法进一步在胶质母细胞瘤标本和肿瘤细胞系的研究中发现ｍｉＲ一２１在胶质母细胞瘤标本和肿瘤细胞系中均出现过表达，ＡＳ—ｍｉＲ一２１可以使肿瘤细胞增殖能力下降，Ｃａｓｐａｓｅ一３、７酶活性上升明显，肿瘤细胞凋亡增加细胞的生长并诱导凋亡。
最近的研究发现一１，ＡＳ—ｍｉＲ一２１也可以和肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配基（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ—ｒｅｌａｔｅｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｄｕｃｉｎｇｌｉｇａｎｄ，Ｓ—ＴＲＡＩＬ）协同作用，在体外实验和动物实验研究中均可以明显通过上调Ｃａｓｐａｓｅ通路的活性抑制肿瘤生长、诱导凋亡。
本研究中比较分析了不同胶质瘤细胞系的ｍｉＲＮＡ的微阵列表达谱，发现在胶质瘤细胞系中一致表达上调的ｍｉＲＮＡ相对较少，而一致表达下调的ｍｉＲＮＡ数量较多。
部分表达趋势明确的ｍｉＲＮＡ与前述研究结果¨。
４１相吻合。
由于ｍｉＲＮＡ作用机制在于转录后下调目的基因表达，因此一致性差异表达的ｍｉＲＮＡ可能在胶质瘤恶性进展过程中作用显著。
ＳＥＰＴ７是隔蛋白家族成员之一，本研究小组前期应用ｃＤＮＡ微阵列研究胶质瘤基因表达谱，发现ＳＥＰＴ７基因在所有胶质瘤基因表达谱中与正常脑组织相比较均明显下调”Ｊ；并对较大样本采用ＲＴ—ＰＣＲ方法验证取得同样结果，并发现ＳＥＰＴ７可能是与肿瘤发生的相关基因之一【６。
７Ｊ。
前述研究【３１表明ｍｉＲ一２１可能是胶质瘤中的一个高表达的ｍｉＲＮＡ并具有抑制肿瘤生长的作用，本研究发现转染反义寡核苷酸７２ｈ后ｍｉＲ一２１杂交信号明显减弱而ＳＥＰＴ７的表达明显上调；因此可以确定ｍｉＲ一２１是胶质瘤的ｍｉＲＮＡ癌基因（ＯｎｃｏｍｉＲ），其在恶性胶质瘤作用机制之一为ｍｉＲ一２１过表达后下调ＳＥｍ表达而参与肿瘤的发生。
本研究发现部分ｍｉＲＮＡ的表达可能是胶质瘤的重要特征和潜在治疗靶点，并初步验证了ｍｉＲ一２１调控ＳＥＰＴ７的表达。
需要指出的是，在胶质瘤的研究中缺乏大样本、具有代表性的ｍｉＲＮＡ的表达谱数据，因此有关胶质瘤ｍｉＲＮＡ特征谱及其与调控靶蛋白的确认工作需要进一步深入研究。
参考文献［１］李振宇．ｍｉＲＮＡ与肿瘤发生．中山大学研究生学刊（自然科学、医学版）．２００６，２７：７４－７９．［２］Ｃｉａｆｒ６ＳＡ，ＧａｌａｒｄｉＳ，ＭａｎｇｉｏｌａＡ，ｅｔａ１．ＥｘｔｅｎｓｉｖｅｍｏｄｕｌａｔｉｏｎｏｆｏｆｍｉｃｍＲＮＡｓｉｎｐｒｉｍａｒｙｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａ．ＢｉｏｃｈｅｍＢｉｏｐｈｙｓＲｅｓＣｏｍｍｕｎ．２００５．３３４：１３５１－１３５８．［３］ＣｈａｎＪＡ，ＫｒｉｃｈｅｖｓｋｙＡＭ，ＫｏｓｉｋＫＳ．ＭｉｃｍＲＮＡ－２１ｉｓａｎｔｉ—ａｐｏｐｔｏｔｉｅｆａｃｔｏｒｉｎｈｕｍａｎｇｌｉｏｂｌａｓｔｏｍａｃｅｌｌｓ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００５，６５：６０２９６０３３．［４］ＣｏｒｓｔｅｎＭＦ，ＭｉｒａｎｄａＲ，ＫａｓｍｉｅｈＲ，ｅｔａ１．ＭｉｃｍＲＮＡ－２１ｋｎｏｃｋ—ｄｏｗｎｄｉｓｒｕｐｔｓｇｌｉｏｍａｇｒｏｗｔｈｉｎｖｉｖｏａｎｄｄｉｓｐｌａｙｓｓｙｎｅ晒ｓｔｉｃｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｗｉｔｈｎｅｕｒａｌｐｒｅｃｕｒｓｏｒｃｅｌｌｄｅｌｉｖｅｒｅｄＳ－ＴＲＡＩＬｉｎｈｕｍａｎｇｌｉｏｍａｓ．ＣａｎｃｅｒＲｅｓ，２００７，６７：８９９４－９０００．［５］贾志凡，浦佩玉，康春乍，等．星形细胞肿瘤ＳＥＰＴＴ／ｈＣＤＣｌ０的表达研究．中华神经外科杂志，２００６，２２：６３６－６３９．［６］贾志凡．浦佩下，康春生，等．隔蛋白７抑制胶质瘤生长的体内研究．中华硅微外科杂志，２００７，３０：２９３－２９５．［７］贾志凡，浦佩玉，康春牛，等．隔蛋亡Ｉ７逆转胶质瘤恶性表型的体内实验研究．中华肿瘤杂志，２００８，３０：２６－３０．（收稿：２００６－０４—２６修回：２００８－０３·２８）（本文编辑：张萍）人脑胶质瘤细胞系miRNA表达谱初步研究作者：康春生， 浦佩玉， 贾志凡， 张安玲， 周旋， 王广秀， KANG Chun-sheng， PU Pei-yu ， JIA Zhi-fan， ZHANG An-ling， ZHOU Xuan， WANG Guang-xiu作者单位：天津市神经病学研究所神经肿瘤室,天津医科大学总医院神经外科,300052刊名：中华神经外科杂志英文刊名：CHINESE JOURNAL OF NEUROSURGERY年，卷(期)：2008,24(6)被引用次数：17次1.Chan JA;Krichevsky AM;Kosik KS MicroRNA-21 is an antiapoptotic factor in human glioblastoma cells [外文期刊] 20052.贾志凡;浦佩玉;康春生隔蛋白7逆转胶质瘤恶性表型的体内实验研究 20083.贾志凡;浦佩玉;康春生隔蛋白7抑制胶质瘤生长的体内研究[期刊论文]-中华显微外科杂志 2007(4)4.贾志凡;浦佩玉;康春生星形细胞肿瘤SEPTT/hCDC10的表达研究[期刊论文]-中华神经外科杂志 2006(10)5.Corsten MF;Miranda R;Kasmieh R MicroRNA-21 knockdown disrupts glioma growth in vivo and displays synergistic cytotoxicity with neural precursor cell delivered S-TRAIL in human gliomas[外文期刊] 20076.Ciafre SA;Galardi S;Mangiola A Extensive modulation of a set of microRNAs in primary glioblastoma [外文期刊] 2005(4)7.李振宇miRNA与肿瘤发生 20061.李翠英.王丽.高玉真人性化护理管理的探索与体会[期刊论文]-中国卫生质量管理2008,15(4)2.张春智.康春生.杨卫东.王广秀.张安玲.浦佩玉.ZHANG Chun-zhi.KANG Chun-sheng.YANG Wei-dong.WANG Guang-xiu.ZHANG An-ling.PU Pei-yu反义miRNA-221/222上调p27kip1抑制胶质瘤细胞生长的体外研究[期刊论文]-中华神经外科杂志2009,25(2)1.王坤.贾志凡.张安玲.王广秀.郝建伟.浦佩玉反义miR-30a-5p对人脑胶质瘤细胞U251生长的抑制作用[期刊论文] -中华实验外科杂志 2011(7)2.孙鹏鹏.王雪峰.赵鑫.刘晓谦.王智.岳武MiR -26a在垂体腺瘤中表达的研究[期刊论文]-中华神经外科杂志2011(9)3.杨旸.张春智.杨卫东.韩磊.张安玲.浦佩玉.康春生敲低U251细胞miR-221/222表达对其基因组表达的影响[期刊论文]-中华神经外科杂志 2011(7)4.翟博智.张春智.韩磊.浦佩玉.康春生miR-221与miR-222通过靶基因TIMP3调控胶质瘤细胞侵袭能力[期刊论文]-中华神经外科杂志 2011(7)5.兰凤鸣.岳晓.韩磊.杨旸.史振东.张安玲.任玉.浦佩玉.康春生反义miR-21通过RECK抑制胶质瘤细胞侵袭性生长的体内外研究[期刊论文]-中华神经外科杂志 2011(1)6.南阳.钟跃.康春生.韩磊.张安玲.浦佩玉microRNA-451对人脑胶质瘤细胞株A172增殖和凋亡的影响[期刊论文]-中华实验外科杂志 2010(10)7.南阳.韩磊.张安玲.浦佩玉.钟跃.康春生miR-451对胶质瘤细胞株A172生物学特征的影响[期刊论文]-中华神经外科杂志 2010(9)8.张春智.康春生.杨卫东.王广秀.贾志凡.浦佩玉共抑制miR-221/222表达上调PUMA促进胶质瘤U251细胞凋亡的体外研究[期刊论文]-中华神经外科杂志 2010(8)9.周旋.任玉.王广秀.杨旸.于士柱.浦佩玉.康春生脑胶质瘤中miR-21以及EGFR信号通路异常表达的相关性研究[期刊论文]-中华神经外科杂志 2010(8)10.宋毅军.张姝.程焱颞叶癫(癎)大鼠海马中miRNA表达谱的检测和分析[期刊论文]-中华神经科杂志 2010(3)11.张春智.康春生.浦佩玉.王广秀.贾志凡.张安玲.韩磊.许鹏反义microRNA-221与反义microRNA-222抑制人脑胶质瘤细胞的体外与体内生长[期刊论文]-中华肿瘤杂志 2009(10)12.周旋.任玉.许鹏.王广秀.贾志凡.张安玲.徐嵩.浦佩玉.康春生反义miR-21抑制U251人脑胶质瘤细胞株增殖的体外研究[期刊论文]-中华神经外科杂志 2009(8)13.张春智.康春生.杨卫东.王广秀.张安玲.浦佩玉反义miRNA-221/222上调p27kip1抑制胶质瘤细胞生长的体外研究[期刊论文]-中华神经外科杂志 2009(2)14.张春智.康春生.浦佩玉microRNA-221和microRNA-222与恶性肿瘤的研究进展[期刊论文]-国际肿瘤学杂志2009(1)15.张春智.王广秀.康春生.杜汋.浦佩玉反义miR-221/222上调p27~(kipl)对胶质母细胞瘤U251的放射增敏作用[期刊论文]-中华医学遗传学杂志 2009(6)16.张春智.康春生.杨卫东.王广秀.张安玲.浦佩玉反义miR-221/222上调Cx43恢复人胶质瘤细胞系U251细胞间缝隙连接通讯的体外研究[期刊论文]-中国现代神经疾病杂志 2009(6)17.康春生.浦佩玉脑胶质瘤信号转导通路研究进展[期刊论文]-中国现代神经疾病杂志 2008(5)本文链接：/Periodical_zhsjwkzz98200806028.aspx。