三种不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床结局的比较
3种取精方式获得的精子进行ICSI治疗效果的比较
Ａｂ ｔａ ｔＯｂｅ ｔ ｅ Ｔｏｃ ｍｐ ｒ ｈ ｒａｍｅ ｔｏ ｔｏ ｓｏ Ｃ １ｗｉ ｐ ｒ ｒｔｉｖ ｄ ｂ ｈ ｅ ｉ ｅｅ ｔｗａ ｓ Ｍ ｅｈ ｄ Ｔｈ ｓｒｃ ： ｊｃｉ ｖ ｏ ａｅｔ ｅｔｅ ｔ ｎ ｕｃ ｍｅ ｆＩ Ｓ ｔ ｓ ｅ ｍ ｅｒ ｅ ｙｔ ｒｅｄｆ ｒｎ ｙ ． ｔｅ ｓ ｈ ｅ ｆ ｅ Ｉ １ｗａ ｅｆｒ ｄｒｓ ｅ ｔ ｅｙｗｉ ｈ ｐ ｒ ｂ ｊｃ ｌｔｏ ｐ ｒｕａ ｅ ｕ ｐｄｄ ｍａ ｐ ｒ ａ ｐｒｔ ｎａ ｄｔｓｉｕａ ｐ ｒ ａｐ— ＣＳ ｓｐ ｒｏ ｍｅ ｅ ｐ ｃｉ ｌ ｔ ｔ ｅｓ ｅｍ ｙｅａ ｕａｉｎ， ｅｃ ｔｎ ｏ ｓｅ ｉｉｙ ｌ ｅ ｍ ｓ ｉａｉ ｎ ｅ ｔ ｌｒｓ ｅｍ ｓ ｉ ｖ ｈ ｓ ｏ ｃ
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冻融和新鲜睾丸精子行卵胞质内单精子显微注射的妊娠结局对比分析
山 西 医 药 杂 志 ２０１８ 年 １１ 月 第 ４７ 卷 第 ２１ 期 ＳｈａｎｘｉＭｅｄＪ，Ｎｏｖｅｍｂｅｒ２０１８，Ｖｏｌ．４７，Ｎｏ．２１
冻融和新鲜睾丸精子行卵胞质内单精子显微注射的 妊娠结局对比分析
高彩凤 黎佩怡 李敦高 陈志云
【摘 要】 目的 对 比 分 析 冻 融 睾 丸 精 子、新 鲜 睾 丸 精 子 和 新 鲜 精 液 精 子 行 卵 胞 质 内 单 精 子 显 微 注 射 （ＩＣＳＩ）后形成的胚胎移植后的妊娠结局。方法 收集惠州市中心人民医院生殖 中 心 ２０１４ 年 １ 月 至 ２０１６ 年 ６ 月 总共１７９个ＩＣＳＩ周期，根据精子来源分为３组，１５２个周期为 新 鲜 精 液 精 子 组，２０ 个 周 期 为 新 鲜 睾 丸 精 子 组 和 ７ 个周期为冻融睾丸精子组。结果 睾丸精子冻融后行ＩＣＳＩ的 正 常 受 精 率、可 利 用 胚 胎 率、种 植 率、临 床 妊 娠 率、 早期流产率和活产率与其他２组比较差异均无统 计 学 意 义（犘＞０．０５）。结 论 在ＩＣＳＩ周 期 中，使 妊娠结局差异 无 统 计 学 意 义。冷 冻 保 存 睾 丸 精 子 可 减 少 无 精 子 症 患 者 反 复 睾 丸 活 检 带 来 的 睾 丸 损 伤 ，提 高 睾 丸 精 子 利 用 率 。
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．０２５３９９２６．２０１８．２１．００６ 基金 项 目：广 东 省 惠 州 市 科 技 计 划 项 目 课 题 （２０１６
Ｙ０２１） 作者单位：５１６００８ 广 东 省 惠 州 市 中 心 人 民 医 院 生 殖 中
心
（ＩＣＳＩ）技术生 育 患 者 自 己 的 后 代 。 ［１］ 这 两 种 方 法 的有效结合也促进了精子冻融技术的发展。睾丸 精子冻融技术可以避免反 复的 睾丸组 织活检，也 可 以简化体外受精的流程。然 而，目 前关于使 用 冻 融 睾丸精子行ＩＣＳＩ的有效 性 的 报 道 仍 不 充 分。 本 文 比较了惠州市中心人民医院 生 殖中 心 ２０１４ 年 １ 月 至２０１６年６月梗阻性无精子症患 者中使用 冻 融 睾 丸 精 子 和 新 鲜 睾 丸 精 子 行ＩＣＳＩ后 的 临 床 结 局 。 １ 对 象 和 方 法 １．１ 研 究 对 象
不同来源精子行卯胞浆内单精子注射临床结局分析
．
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中 国性 科 学 ２ １ 年 １ 第 ２ 卷第 １ 期 Ｔｅ ｈ ｅ ｕ ａｏ Ｈ ｍ ｎＳｘａｔ Ｏｔ ｂ ｒ０ ０２ ０月 １ ０ ｈ ｉ ｓ Ｊ ｒ ｌｆ ｕ ａ ｅ ｌ ｃｏ ｅ２ Ｃ ｎ ｅｏ ｎ ｕｉ ｙ ，１
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【 基金项 目】本项 目由北京大学第一 医院 ２ １ ０ １年院级青年基金
资助 。
【 第一作者简介 】郐艳荣（ ９９一） 助理研 究员、 １７ ， 硕士研 究生， 主要从 事辅助生殖技术专业研究 。
ห้องสมุดไป่ตู้
【 通讯作者 】徐阳 ， ， — ａ ： ｙ ｇ ＠ １６ｃｎ 女 Ｅ ｍ ｉ ｘ ａ ｍ ２ ．ｏ ｌｕ ｎ
不同来源精子对卵胞浆内单精子显微注射临床结局的影响
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・
临床 研 究 ・
不 同来 源 精 子 对 卵胞 浆 内单 精 子 显 微 注 射 临床 结 局 的影 响
李 宜学 田喜凤 樊桂玲 王振 荣 王 丽荣
适 当降低糖皮质激 素用 量后 ， 获得改善 。对照组未 发生不 良反 功能， 造成肺损伤 ， 进一步恶化病情 ， 也 给患者 生活和工作 带来
影响。复方茶硷片是哮 喘治疗 的临床常规类 用药 ， 其作 用机 制 主要在于茶碱可加强膈肌的收缩 ， 改善呼 吸功 能， 麻 黄碱有舒 张 应， 研究组患儿的整体不 良反 应发 生率 与对照 组 比较 ， 差异无 统计 学意义（Ｐ ＞ ０ ． ０ ５ ） ， 提示 吸和糖皮 质激 素用 药的安全性 。
利用吸人装置使糖皮质激素雾化直接 进入患 儿呼吸道 ， 可最 大 限度的提高药物 到 达肺 内的活 性 ， 加快 了药 物抗 炎作 用 的发
挥， 达 到治疗效果 。本研 究 中， 研究 组患 儿治疗 后 临床症 状评
分明显低于对照组 （ Ｐ＜ ０ ． ０ １ ） ， Ｆ Ｅ Ｖ Ｉ 改 善率 明显 高于对 照 ， 可增加心输 出量 ， 提 高供 氧量 Ｊ 。但复方茶硷 片临
床应用起效较慢 ， 大剂量或长期使用又具有一定 的不 良反应 ， 因
而配合吸人性糖皮 质激素用药可能达到更好的临床效果 。
吸人性 糖皮 质 激 素 对 哮喘 的治 疗 主要 取 决 于 其抗 炎 机 制＿ ６ Ｊ ： 细胞质 中存在糖皮质激素受体 （ Ｇ Ｒ ） ， 当糖皮质激 素进入
男 性 不 育 症 的治 疗 方 法 也 有 了很 大 突 破 。 在 这 些 不 育 症 患 者 １ 资 料 与 方 法
不同来源精子对卵胞浆内单精子注射助孕结局的影响
在争议 ， 本 中心 ２ ３个周 期 患者 的临 床 资料进 行 对 ８
而使用附睾精 子 的胚 胎卵 裂率 低 于精 液 精子 （０ ９ ％ Ｕ ９．５ Ｓ
９． ２ ， ０ ０ ） ４０ ％ Ｐ＜ ．５ 。结 论 若 能够 获 得 可 移 植 的 胚胎 ， 液 精
回顾 性分 析 ， 旨在 探讨精 液精子 、 附睾精 子和睾丸 精
子对 ＩＳ 助 孕结局 的影 响 ， ＣＩ 为无 精子 症 患者选 择 何 种精 子来 源提供依 据 。
１ 材 料与 方法
精子 、 附睾精 子和睾丸精子对 ＩＳ 助孕结局无 明显影响 ； ＣＩ 附 睾精子行 ＩＳ 形成 的胚 胎 ， 发育潜 力可能低 于精 液精 子 ＣＩ 其
行 ＩＳ 形 成 的胚 胎 。 ＣＩ
精 子组 ５ 周 期 。 比较 ３组 的受精 率 ， ４个 卵裂 率 ， 妊
娠率 和 流产 率 。
１ ３ 方 法 ．
林 ， ， 任 医 师 ， 士 生 导 师 ， 任 作 者 ， ． ａ ：Ｏ． 女 主 硕 责 Ｅ ｍ ｉ Ｃｎ ｌ
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三种不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床结局的比较
三种不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床结局的比较目的：比较三种方法获得的精子行卵胞浆内单精子注射的临床结局。
方法：回顾性分析笔者所在医院2011年1月-2012年12月374个卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）治疗周期的妊娠结局，依据精子来源不同分为三组：射出精液组（A 组），经皮附睾穿刺和经皮睾丸穿刺取精子组（B组），供精组（C组），比较三组的受精率、卵裂率、优质胚胎率和临床妊娠率。
结果：A组的优胚率高于C 组（P＜0.017），三组患者的受精率、卵裂率、临床妊娠率比较差异无统计学意义（P>0.05）。
结论：精液、附睾或睾丸精子、供精行ICSI助孕的结局相近。
精子的成熟度、精子的冷冻可能并不影响最终的妊娠率。
不孕症夫妇中大约30%是男方因素导致不育而就诊的，而其中无精子症的发病率高达10%～15%[1]。
卵胞浆内单精子注射（ICSI）技术是治疗男性不育的有效方法[2]，经皮附睾穿刺和经皮睾丸穿刺取精子及供精为无精子症患者获得后代提供了可能。
本文对比射出精液、经皮附睾穿刺和经皮睾丸穿刺取精子、供精行ICSI助孕的结局，分析不同来源的精子对最终妊娠结局的影响。
1 资料与方法1.1 一般资料对笔者所在医院2011年1月-2012年12月374个卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）治疗周期的妊娠结局进行分析，不育原因是严重少弱畸精子症、无精子症。
依据精子来源不同分为三组：射出精液组（A组），308个周期；经皮附睾穿刺和经皮睾丸穿刺取精子组（B组），41个周期；供精组（C组），25个周期。
所有无精子症患者进入治疗周期前进行附睾穿刺或睾丸活检，以明确附睾或睾丸内有无活动精子。
若有活动精子则用附睾或睾丸穿刺所获精子，若无活动精子及不动精子则采用精子库中精子，入组的供精组患者当天解冻处理后的精子活率密度均符合ICSI标准。
拟定ICSI标准为：男方3次精液常规检查至少有2次以上符合以下任一标准：（1）严重少精症：一次射精的活精子密度≤2×106/mL；（2）少弱畸精症：精子密度>2×106/mL，但是0.05）。
不同指征患者卵胞浆内单精子注射治疗后临床结局的比较
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情 况 。 结 果 ① 三 组 患 者 年 龄 和 体 重 指 数 差 异 有 统 计 学 意义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） ； Ａ 组 患 者 年 龄 和 体 重 指 数 均 明 显小 于 其 Ｂ 、 Ｃ
组， Ｂ组年龄小于 ｃ组 ， 差异有统计学意义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） ； 不孕年限三组间差异无统计 学意义（ Ｐ＞０ ． ０ ５ ） 。② Ａ组患者受精
因 无 精 子 症 原 因行 Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ 术的患者 ； Ｂ组 ４ １ ６例 为 由 于 重 度 少 弱 精 子 症 原 因行 Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ 术的患者 ； Ｃ组 ５ ４例 为 由于 受 精 障
碍、 低受精原因行 Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ 术 的患 者 。 比较 各 组 年 龄 、 体重指数 、 不孕年 限、 卵子 受 精 、 胚胎卵裂 、 优质胚胎 、 临床 妊 娠 和 活 产
率［ ７ ３ ． ４ ９ ％（ １ １ ５ ６ ／ １ ５ ７ ３ ） 】 低于 Ｂ 、 Ｃ组 ［ ７ ６ ． ２ ５ ％（ ３ ０ ０ ８ ／ ３ ９ ４ ５ ） 、 ７ ８ ． ４ ７ ％（ ３ ３ ９ ／ ４ ３ ２ ） 】 ， 差异有统计学意义 （ Ｐ＜０ ． ０ ５ ） 。 胚 胎 卵 裂 率
【 摘要１目的 比较不 同指征患 者采 用卵胞浆 内单精子 注射 （ Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ ）治疗后 胚胎质量及临床结 局。 方法 选择 ２ ０ ０ ９年 １
不同来源精子应用于ICSI治疗的早期临床结局
不同来源精子应用于ICSI治疗的早期临床结局目的：比较不同来源精子应用于卵胞浆内单精子显微注射（ICSI）治疗的胚胎发育及早期临床结局。
方法：回顾性分析2014年1月-2016年6月因男性因素在郑州大学第三附属医院生殖中心行ICSI治疗的1 732个新鲜移植周期。
根据精子来源分为：A组射精组（n=1 253），B组经皮附睾精子抽吸（PESA）组（n=418），C组经皮睾丸精子取精（TESA）组（n=61）。
比较三组正常受精率、正常卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率、异位妊娠率、流产率、活产率及早产率。
结果：C组的正常受精率、正常卵裂率均低于A组和B组（P＜0.05），B组优质胚胎率高于A组和C组（P＜0.05），B组临床妊娠率高于A组（P＜0.05），三组异位妊娠率、流产率、活产率及早产率比较，差异均无统计学意义（P>0.05）。
结论：PESA和TESA均可以用于梗阻性无精子症患者的助孕，但就早期胚胎质量和临床妊娠率综合考虑，经皮附睾取精行卵胞浆内单精子显微注射术更优。
近年来，不孕不育发病率大幅上升，有资料显示全球不孕不育夫妇比例占15%，其中男性因素约占50%[1]。
自Palermo等[2]首次用卵胞浆内单精子显微注射术（intracytoplasmic sperm injection，ICSI）使体外受精（in-vitro fertilisation，IVF）或者透明带下人工授精（subzonal insemination，SUZI）不能妊娠的女性成功生育后，该技术便受到国内外学者的关注和研究。
ICSI技术是借助显微操作系统将单个精子直接注射入卵母细胞质内使其受精，它对精子数量和质量的要求大大降低，这对重度少弱精以及因梗阻性无精子症需要睾丸或者附睾取精的男性不育症患者具有重大意义。
目前应用于ICSI治疗的精子来源主要有三种：一种是射出精子，另外两种是经皮附睾精子抽吸术（percutaneous epididymal sperm aspiration，PESA）和经皮睾丸精子取精术（testicular sperm extraction，TESA）获得的精子[3]。
不同来源及不同处理方式的精子对人卵子胞浆内单精子注射结局的影响
在取 卵 日无法取精并要求术前对正 常射 出精液进 行 冷冻保存 ； Ｐ Ｅ Ｓ Ａ冷冻 组 （ Ｅ组 ） 和Ｔ Ｅ Ｓ Ｅ冷冻 组 （ Ｆ组 ） ： ４ １ 个 周期 及 ２ ４个周 期 ，分 别 为采 冻 融 Ｐ Ｅ Ｓ Ａ及 Ｔ Ｅ Ｓ Ｅ精 子行 Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ １ ． ２ 方 法 １ ． ２ ． １ 控 制 性 超 促 排 卵 患 者 在 本 中心 均 采 用 常 规 长方 案 刺激 ， 卵泡发育成熟时 ， 予 肌 注 人 绒 毛 膜 促性腺激素 ５ ０ ０ ０ Ｉ Ｕ或 １ ０ ０ ０ ０ Ｉ Ｕ， 注射后 ３ ６～ ３ ８ ｈ在 Ｂ超 引导 下 经 阴道 取 卵 ，将 获 取 的 卵丘 一 卵母 细胞 复合 体置于 ５ ％Ｃ ０ ３ ７ ｏ Ｃ 培养箱 内培养 ４ ６ ｈ后选取 Ｍ Ｉ Ｉ 卵子行 Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ 注射 。 １ ． ２ ． ２ 经 Ｐ Ｅ Ｓ Ａ 获 附 睾 精 子 患 者 取 仰 卧 位 ， 予 ２ ％利 多 卡 因局 麻 ， 用 ５ ｍＬ注射 器 进行 经 皮 附睾 穿 刺， 抽 出 附睾 液 后 ， 显 微 镜 下 找 到 活 动 精 子 后 采 取 直 接 离 心 法 处理 ：如 多 次未 获 得 精 子 或 无 活 动 精 子， 考 虑行 Ｔ Ｆ Ｓ Ｅ 。 １ ． ２ ． ３ 经 Ｔ Ｅ Ｓ Ｅ获 睾 丸 精 子 患 者 体 位 、麻 醉 同 Ｐ Ｅ Ｓ Ａ。 用尖刀片在一侧睾丸切开约 ４ ｍ ｍ切 口， 切 开睾丸皮肤 、 睾丸 白膜 ， 切下少许组织加入无菌培 养液 中研 磨后 ，显微镜 下找到活动照精 子 的 来 源及 冷 冻与 否 分 为 ： Ａ 组射 精 组 （ ７ ７ ０个周 期 ） ， Ｂ组 经 皮 附睾 穿刺取 精 组 （ Ｐ Ｅ Ｓ Ａ， ４ ４个周 期 ） ， ｃ组睾丸切 开取精 组 （ Ｔ Ｅ Ｓ Ｅ， ３ ４个周 期 ） ， Ｄ组射 精冷 冻精 子组 （ ４ ６个周 期 ） ， Ｅ组 Ｐ Ｅ Ｓ Ａ 冷 冻组（ ４ １个周期 ） ， Ｆ组 Ｔ Ｅ Ｓ Ｅ冷冻组 （ ２ ４个 周期 ） ， 分别 比较上述 ６组 间的 受精 率 、 卵裂率 、 胚胎发 育情 况
不同来源精子对卵胞浆内单精子注射临床结局的影响
曾庆馀主编． 骨关节炎［ ］ 天津 ： Ｍ． 天津科技出版社 。９６ １２— １ ．８ ９
１ ３ ８．
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吕厚山主编． 关节炎外 科学 ［ ． Ｍ］ 北京 ： 人民军 医出版社 ，０ ２ ２０．
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ｍ ｄ ｌ８ ，Ｏ １ ：５ ｅ ，９ ２ ｌ （ ） １０—１４ ５．
Ｉ 文章编号】 １７－ ７ （０８０ － ０． ６３６ ５２０ ）４ ３９ ３ ５ ０ ０
不同来源精子行卵胞浆内单精子注射妊娠结局的比较
·论 著·不同来源精子行卵胞浆内单精子注射妊娠结局的比较黄翠玉1 王莉莉2 王芳1 朱照平1 肖宗辉1 黄菊11广东省妇幼保健院，广州 510010；2河源市妇幼保健院 517000通信作者：黄菊，Email：orange9822@ 【摘要】 目的 比较前次常规体外受精（In vitro fertilization，IVF）周期不受精/低受精的射出精子、重度少弱畸精子症患者的射出精子，以及梗阻性无精子症患者的睾丸精子，3种不同来源精子行卵胞浆内单精子注射（ICSI）后的妊娠结局。
方法 前次常规IVF周期不受精/低受精患者（A组，n=45）和重度少弱畸精子症患者（B组，n=345）采用射出精子获取精子，梗阻性无精子症患者（C组，n=110）采用睾丸穿刺抽吸术（TESA）获取精子，比较ICSI后的受精率、妊娠率和种植率等。
结果 A组女方年龄及不孕年限显著高于B、C组（均P＜0.05）。
C组的受精率和卵裂率显著低于A、B组（均P＜0.05）；3组间2PN（2 pronucleus）受精率（72.11%、73.85%、63.02%）差异均有统计学意义，其中B组的2PN受精率最高。
3组间优质胚胎率（61.50%、66.09%、67.96%）和可利用囊胚率（25.77%、26.27%、27.67%）差异均无统计学意义（均P＞0.05）。
3组间临床妊娠率（68.42%、71.97%、69.89%）、胚胎种植率（49.30%、50.17%、45.78%）、分娩率（55.26%、60.83%、53.76%）、单胎率（42.86%、52.36%、68.00%）、多胎率（57.14%、47.64%、32.00%）、异位妊娠率（0.00%、0.88%、1.54%）、流产率（7.69%、8.41%、12.31%）及早产率（33.33%、28.80%、26.00%）差异均无统计学意义（均P＞0.05）。
使用不同来源精子行卵胞浆内单精子注射对受精、胚胎发育及妊娠结
论著 临床研究һ基金项目:国家自然科学基金(３１８６０６３８)ꎻ广西医药卫生科研课题(Ｚ２０１５３０５)ꎻ广西南宁市青秀区科技计划(２０１８０２５)作者简介:张小慧(１９９０~)ꎬ女ꎬ硕士ꎬ研究实习员ꎬ研究方向:生殖医学ꎮ通信作者:薛林涛(１９８２~)ꎬ男ꎬ博士ꎬ副主任技师ꎬ研究方向:生殖医学ꎬ电子邮箱:ｌｔｘｇｘｕ＠１６３.ｃｏｍꎮ使用不同来源精子行卵胞浆内单精子注射对受精㊁胚胎发育及妊娠结局的影响һ张小慧㊀黄悦悦㊀王世凯㊀谭卫红㊀毛献宝㊀李政达㊀周亭亭㊀韦娉嫔㊀刘庆友㊀薛林涛(广西壮族自治区人民医院生殖医学与遗传中心ꎬ南宁市㊀５３００２１ꎬ电子邮箱:ｚｈａｎｇｘｈｓｃｕ＠１６３.ｃｏｍ)ʌ摘要ɔ㊀目的㊀探讨使用不同来源精子行卵胞浆内单精子注射(ＩＣＳＩ)对受精㊁胚胎发育及临床妊娠结局的影响ꎮ方法㊀回顾性分析接受ＩＣＳＩ治疗的７０３对不育夫妇的资料ꎬ根据精子来源分为正常精液组(Ａ组)５６例㊁少弱精子症组(Ｂ组)３６４例㊁附睾精子组(Ｃ组)１８７例和睾丸精子组(Ｄ组)９６例ꎮ比较４组精子ＤＮＡ碎片率㊁精子顶体完整率㊁正常受精率㊁胚胎发育参数及临床妊娠结局ꎮ结果㊀Ａ组与Ｂ组ＤＮＡ碎片率低于Ｃ组与Ｄ组ꎬ且顶体完整率高于Ｃ组与Ｄ组(均Ｐ<０.０５)ꎮＡ组的正常受精率高于Ｂ组㊁Ｃ组与Ｄ组ꎬ且Ｂ组的正常受精率高于Ｃ组(均Ｐ<０.０５)ꎮＢ组的优质胚胎率㊁囊胚形成率和可冻囊胚形成率低于Ｄ组(均Ｐ<０.０５)ꎮ４组的正常卵裂率㊁优质囊胚形成率㊁胚胎种植率㊁临床妊娠率㊁流产率㊁活产率㊁男女婴比例差异均无统计学意义(均Ｐ>０.０５)ꎮ结论㊀使用不同来源精子行ＩＣＳＩ治疗ꎬ会导致精子ＤＮＡ碎片率和顶体完整率存在差异ꎬ从而影响正常受精率ꎻ少弱精子症来源的精子可影响ＩＣＳＩ治疗周期胚胎发育结局ꎮʌ关键词ɔ㊀卵细胞浆内单精子注射ꎻ精子来源ꎻ精子参数ꎻ正常受精率ꎻ胚胎发育ꎻ临床妊娠ʌ中图分类号ɔ㊀Ｒ３２１.１㊀㊀ʌ文献标识码ɔ㊀Ａ㊀㊀ʌ文章编号ɔ㊀０２５３￣４３０４(２０１９)２３￣２９４９￣０５ＤＯＩ:１０.１１６７５/ｊ.ｉｓｓｎ.０２５３￣４３０４.２０１９.２３.０１ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈｓｐｅｒｍｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｏｕｒｃｅｓｏｎｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎꎬｅｍｂｒｙｏｎｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓＺＨＡＮＧＸｉａｏ￣ｈｕｉꎬＨＵＡＮＧＹｕｅ￣ｙｕｅꎬＷＡＮＧＳｈｉ￣ｋａｉꎬＴＡＮＷｅｉ￣ｈｏｎｇꎬＭＡＯＸｉａｎ￣ｂａｏꎬＬＩＺｈｅｎｇ￣ｄａꎬＺＨＯＵＴｉｎｇ￣ｔｉｎｇꎬＷＥＩＰｉｎｇ￣ｐｉｎꎬＬＩＵＱｉｎｇ￣ｙｏｕꎬＸＵＥＬｉｎ￣ｔａｏ(ＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅＭｅｄｉｃａｌａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＣｅｎｔｅｒꎬｔｈｅＰｅｏｐｌｅᶄｓＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＧｕａｎｇｘｉＺｈｕａｎｇＡｕｔｏｎｏｍｏｕｓＲｅｇｉｏｎꎬＮａｎｎｉｎｇ５３００２１ꎬＣｈｉｎａ)ʌＡｂｓｔｒａｃｔɔ㊀Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ㊀Ｔｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ(ＩＣＳＩ)ｕｓｉｎｇｓｐｅｒｍｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｏｕｒｃｅｓｏｎｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎꎬｅｍｂｒｙｏｎｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓ.Ｍｅｔｈｏｄｓ㊀Ｄａｔａｏｆ７０３ｉｎｆｅｒｔｉｌｅｃｏｕｐｌｅｓｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇＩＣＳＩｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｒｅｔｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙꎬａｎｄｔｈｅｃａｓｅｓｗｅｒｅａｓｓｉｇｎｅｄｉｎｔｏｎｏｒｍａｌｓｅｍｅｎｇｒｏｕｐ(ｇｒｏｕｐＡꎬｎ＝５６)ꎬｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａａｓｔｈｅｎｏｓｐｅｒｍｉａｇｒｏｕｐ(ｇｒｏｕｐＢꎬｎ＝３６４)ꎬｅｐｉｄｉｄｙｍａｌｓｐｅｒｍｇｒｏｕｐ(ｇｒｏｕｐＣꎬｎ＝１８７)ꎬｏｒｔｅｓｔｉｃｕｌａｒｓｐｅｒｍｇｒｏｕｐ(ｇｒｏｕｐＤꎬｎ＝９６)ｉｎａｃｃｏｒｄａｎｃｅｗｉｔｈｓｐｅｒｍｓｏｕｒｃｅ.ＴｈｅｒａｔｅｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎꎬｒａｔｅｏｆｓｐｅｒｍａｃｒｏｓｏｍｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙꎬｎｏｒｍａｌｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｒａｔｅꎬｐａｒａｍｅｔｅｒｓｏｆｅｍｂｒｙｏｎｉｃｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｇｎａｎｃｙｏｕｔｃｏｍｅｓｗｅｒｅｃｏｍｐａｒｅｄｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ.Ｒｅｓｕｌｔｓ㊀ＧｒｏｕｐＡａｎｄｇｒｏｕｐＢｏｂｔａｉｎｅｄａｌｏｗｅｒｒａｔｅｏｆＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｎｄａｈｉｇｈｅｒｒａｔｅｏｆｓｐｅｒｍａｃｒｏｓｏｍｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｇｒｏｕｐＣａｎｄｇｒｏｕｐＤ(ａｌｌＰ<０.０５).ＴｈｅｎｏｒｍａｌｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｇｒｏｕｐＡｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｇｒｏｕｐＢꎬｇｒｏｕｐＣｏｒｇｒｏｕｐＤꎬａｎｄｔｈｅｎｏｒｍａｌｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｇｒｏｕｐＢｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｇｒｏｕｐＣ(ａｌｌＰ<０.０５).Ｔｈｅｒａｔｅｏｆｈｉｇｈ￣ｑｕａｌｉｔｙｅｍｂｒｙｏꎬｆｏｒｍａｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆｂｌａｓｔｏｃｙｓｔａｎｄｆｒｅｅｚａｂｌｅｂｌａｓｔｏｃｙｓｔｗｅｒｅｌｏｗｅｒｉｎｇｒｏｕｐＢａｓｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｇｒｏｕｐＤ(ａｌｌＰ<０.０５).Ｔｈｅｒｅｗｅｒｅｎｏｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅｒａｔｅｏｆｎｏｒｍａｌｃｌｅａｖａｇｅꎬｆｏｒｍａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｈｉｇｈ￣ｑｕａｌｉｔｙｂｌａｓｔｏｃｙｓｔꎬｒａｔｅｏｆｅｍｂｒｙｏｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎꎬｃｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｇｎａｎｃｙｒａｔｅꎬｍｉｓｃａｒｒｉａｇｅｒａｔｅꎬｌｉｖｅｂｉｒｔｈｒａｔｅａｎｄｇｅｎｄｅｒｒａｔｉｏｏｆｎｅｗｂｏｒｎｓａｍｏｎｇｔｈｅｆｏｕｒｇｒｏｕｐｓ(ａｌｌＰ>０.０５).Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ㊀ＩＣＳＩｕｓｉｎｇｓｐｅｒｍｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｏｕｒｃｅｓｃａｎｃａｕｓｅｔｈｅｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｉｎｔｈｅｒａｔｅｓｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｎｄａｃｒｏｓｏｍｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙꎬａｎｄｔｈｅｒｅｂｙａｆｆｅｃｔｉｎｇｔｈｅｎｏｒｍａｌｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｒａｔｅꎻｔｈｅｓｐｅｒｍｓｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉａａｎｄａｓｔｈｅｎｏｓｐｅｒｍｉａｍａｙｉｍｐａｃｔｏｎｔｈｅｏｕｔｃｏｍｅｓｏｆｅｍｂｒｙｏｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｉｎＩＣＳＩｃｙｃｌｅ.ʌＫｅｙｗｏｒｄｓɔ㊀ＩｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎꎬＳｐｅｒｍｓｏｕｒｃｅｓꎬＳｐｅｒｍｐａｒａｍｅｔｅｒꎬＮｏｒｍａｌｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｒａｔｅꎬＥｍｂｒｙｏｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔꎬＣｌｉｎｉｃａｌｐｒｅｇｎａｎｃｙ㊀㊀卵胞浆内单精子注射(ｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎꎬＩＣＳＩ)是通过显微操作手段将精子直接注射入卵子胞浆内ꎬ从而辅助其完成受精的治疗手段ꎬ其在临床上的成功应用有效地解决了因男方精子质量差㊁精卵结合障碍㊁无精子症等因素导致的不育问题ꎮ目前由于男方病因不同ꎬＩＣＳＩ治疗周期中用于显微注射的精子来源有所差异ꎬ而不同来源精子对ＩＣＳＩ治疗的正常受精率㊁胚胎发育参数及临床妊娠结局的影响ꎬ仍然存在争议[１－２]ꎬ且其机制仍不清楚ꎮ近年来有研究显示ꎬ精子功能参数异常是辅助生殖治疗正常受精率及临床治疗结局的一个重要影响因素[３]ꎻ同时不同来源精子由于其所处阶段及生理微环境的差异ꎬ精子功能参数可能存在差异[４]ꎮ本研究通过比较使用不同来源精子行ＩＣＳＩ对受精㊁胚胎发育及临床妊娠结局的影响ꎮ１㊀资料与方法１.１㊀临床资料㊀回顾性分析２０１０年１月至２０１６年１１月在本中心接受ＩＣＳＩ技术治疗的７０３对不育夫妇临床资料ꎮ纳入病例均满足ＩＣＳＩ技术治疗的临床指征:(１)严重少弱精子症(精液浓度<５ˑ１０６/ｍＬ或前向运动百分率<１０％)ꎻ(２)前次体外受精失败或正常受精率<３０％ꎻ(３)采卵当日精液经密度梯度离心处理后前向运动精子总数<１ˑ１０６条ꎻ(４)男方为梗阻性无精子症ꎮ纳入标准:(１)女方年龄ɤ３７岁ꎻ(２)女方经过体格检查㊁病史询问㊁妇科Ｂ超及内分泌㊁血液生化检查ꎬ除单纯输卵管因素外ꎬ未发现其他可能影响生育的疾病ꎻ(３)夫妇双方染色体核型分析未见异常ꎮ将体外射精采集精子的病例分为正常精液组(Ａ组)５６例ꎬ少弱精子症组(Ｂ组)３６４例ꎻ将手术从睾丸或附睾取得精子的病例分为附睾精子组(Ｃ组)１８７例ꎬ睾丸精子组(Ｄ组)９６例ꎮ１.２㊀方法１.２.１㊀精液采集:男方禁欲２~７ｄꎬ在女方取卵当日上午采用手淫法采集精液ꎬ收集于清洁广口的塑料无菌杯中ꎬ用非连续密度梯度离心法结合上游法[５]行优化处理ꎬ３７ħ培养箱孵育备用ꎮ梗阻性无精男性于女方取卵当日ꎬ采用经皮附睾精子抽吸术或经皮睾丸精子抽吸术[６]采集精液ꎬ采用直接离心法[５]１６４０ｒ/ｍｉｎ离心５ｍｉｎ进行优化处理ꎬ去上清后３７ħ培养箱孵育备用ꎮ１.２.２㊀精子ＤＮＡ碎片率检测:使用精子染色质扩散法[７]检测优化后精子ＤＮＡ碎片率ꎬ按照西班牙ＨａｌｏｔｅｃｈＤＮＡＳ.Ｌ.公司的Ｈａｌｏｓｐｅｒｍ 试剂盒(批号:４０７８１０５)说明书进行操作ꎮ精子ＤＮＡ碎片化判定标准:精子头部产生光晕宽度小于精子核直径的１/３ꎬ或精子头部无光晕ꎬ或精子头部不着色或核形态不规则ꎮ精子ＤＮＡ碎片率＝ＤＮＡ碎片化的精子数/精子总数ˑ１００％ꎮ１.２.３㊀精子顶体完整率:采用异硫氰酸荧光素标记的豌豆凝集素法[５]评估精子顶体功能ꎮ使用磷酸盐缓冲液将优化后精液浓度调整至５ˑ１０６/ｍＬꎬ取１０μＬ均匀涂抹于干净载玻片上ꎬ自然干燥ꎻ将精子涂片置于９５％的无水乙醇中固定３０ｍｉｎꎬ自然干燥后置于２５μｇ/ｍＬ的荧光染料中４ħ避光染色８~１２ｈꎻ取出玻片ꎬ用去离子水轻微洗涤冲洗１０ｓ后封片ꎻ４５０~４９０ｎｍ激发光下使用４００倍油镜观察精子涂片ꎬ至少计数４００个精子ꎮ精子头部一半以上荧光染色明亮且均匀则判定为顶体完整精子ꎬ精子仅在赤道带出现荧光带或者顶体区无荧光染色则判定为自发顶体反应精子ꎮ顶体完整率＝顶体完整精子数/精子总数ˑ１００％ꎮ１.２.４㊀ＩＣＳＩ受精:所有女方根据年龄㊁激素水平和卵巢储备功能行促排卵方案ꎬ当直径达１８ｍｍ及以上的卵泡数量ȡ２枚时ꎬ进行扳机ꎬ扳机３６ｈ后行卵泡穿刺ꎮ取卵４~６ｈ后挑选形态好㊁活力正常的精子对每个成熟卵母细胞行ＩＣＳＩꎮ取卵后７２ｈ参考卵裂期胚胎评分系统[８]ꎬ对卵裂期胚胎进行质量评估标准ꎮ卵母细胞受精后第５天㊁第６天ꎬ观察囊胚形成情况ꎬ参照人类囊胚评分系统[９]进行囊胚分级ꎮ根据子宫内膜情况行新鲜胚胎移植ꎮ胚胎移植后ꎬ第１４天检测尿或血人绒毛膜促性腺激素ꎬ第４~５周Ｂ超检测孕囊和胎心ꎬ电话随访妊娠情况及产科结局ꎮ１.３㊀观察指标㊀比较４组的精子ＤＮＡ碎片率㊁精子顶体完整率㊁正常受精率㊁正常卵裂率㊁优质胚胎率㊁囊胚形成率㊁可冻囊胚形成率㊁优质囊胚形成率㊁移植周期数㊁移植胚胎数㊁每周期移植胚胎数㊁胚胎种植率㊁临床妊娠率㊁流产率㊁活产率和男女婴性别比ꎮ其中正常受精率＝２个原核受精卵数/注射成熟卵母细胞数ˑ１００％ꎻ正常卵裂率＝２个原核卵裂胚胎数/２个原核受精卵总数ˑ１００％ꎻ优质胚胎率＝优质胚胎数/２个原核卵裂胚胎数ˑ１００％ꎻ囊胚形成率＝囊胚形成数/囊胚培养总数ˑ１００％ꎻ可冻囊胚形成率＝可冻囊胚数/囊胚培养总数ˑ１００％ꎻ优质囊胚形成率＝优质囊胚数/囊胚培养总数ˑ１００％ꎻ胚胎种植率＝孕囊数/移植胚胎数ˑ１００％ꎻ临床妊娠率＝Ｂ超观察到妊娠的周期数/移植周期数ˑ１００％ꎻ流产率＝流产的周期数/移植周期数ˑ１００％ꎻ活产率＝活产的周期数/移植周期数ˑ１００％ꎻ男女婴性别比＝出生男婴数/出生女婴数ꎮ１.４㊀统计学分析㊀采用ＳＰＳＳ２２.０软件进行统计学分析ꎮ满足正态分布的计量资料以(ｘʃｓ)表示ꎬ多组比较采用单因素方差分析ꎬ组间比较用ＬＳＤ￣ｔ检验ꎬ不满足正态分布的计量资料以[Ｍ(Ｑ１ꎬＱ３)]表示ꎬ比较采用秩和检验ꎻ计数资料以例数或百分比表示ꎬ比较采用χ２检验ꎮ以Ｐ<０.０５为差异有统计学意义ꎮ２㊀结㊀果２.１㊀４组患者基本情况及精子参数比较㊀Ｂ组的男方年龄大于Ｃ组与Ｄ组ꎬＡ组与Ｂ组的女方年龄均大于Ｃ组与Ｄ组(均Ｐ<０.０５)ꎮＡ组与Ｂ组精子ＤＮＡ碎片率低于Ｃ组与Ｄ组ꎬ而精子顶体完整率高于Ｃ组与Ｄ组(均Ｐ<０.０５)ꎮ见表１ꎮ表１㊀不同分组患者基本情况及精子参数比较(ｘʃｓ)指标Ａ组(ｎ＝５６)Ｂ组(ｎ＝３６４)Ｃ组(ｎ＝１８７)Ｄ组(ｎ＝９６)Ｆ(χ２/Ｈ)值Ｐ值男方年龄(ｘʃｓꎬ岁)３４.３４ʃ４.８６３４.４０ʃ６.０９３２.４３ʃ５.０６ｂ３２.７９ʃ４.９９ｂ４.２０３㊀０.００６女方年龄(ｘʃｓꎬ岁)３１.９３ʃ２.６９３０.９７ʃ３.５１２９.４８ʃ３.８１ａｂ２９.８６ʃ３.６８ａｂ８.３０１<０.００１精子ＤＮＡ碎片率[Ｍ(Ｑ１ꎬＱ３)ꎬ％]３.５０(１.１８ꎬ７.４８)１６.３０(８.３０ꎬ３５.００)２８.４０(１７.１０ꎬ５０.５０)ａｂ３２.６０(２２.１０ꎬ４２.８０)ａｂ１３１.２３３<０.００１精子顶体完整率(ｘʃｓꎬ％)８４.９６ʃ１１.４９６２.８５ʃ２１.６７４４.０２ʃ２５.０５ａｂ４９.２１ʃ１３.３０ａｂ４０.８６７<０.００１㊀㊀注:与Ａ组比较ꎬａＰ<０.０５ꎻ与Ｂ组比较ꎬｂＰ<０.０５ꎮ２.２㊀４组正常受精率与胚胎质量比较㊀Ａ组的正常受精率高于Ｂ组㊁Ｃ组与Ｄ组ꎬ且Ｂ组的正常受精率高于Ｃ组(Ｐ<０.０５)ꎮＢ组的优质胚胎率㊁囊胚形成率和可冻囊胚形成率低于Ｄ组(Ｐ<０.０５)ꎮ４组的正常卵裂率㊁优质囊胚形成率差异均无统计学意义(均Ｐ>０.０５)ꎮ见表２ꎮ表２㊀不同来源精子正常受精率与胚胎质量对比指标Ａ组(ｎ＝５６)Ｂ组(ｎ＝３６４)Ｃ组(ｎ＝１８７)Ｄ组(ｎ＝９６)χ２值Ｐ值获卵数(个)５４０３８４５２１５８１０７４ ＭⅡ卵母细胞数(个)４０７３０８４１６８４８３６正常受精率８０.３４％(３２７/４０７)７０.７８％(２１８３/３０８４)ａ６６.６９％(１１２３/１６８４)ａｂ６８.５４％(５７３/８３６)ａ３１.２７５<０.００１正常卵裂率９９.０８％(３２４/３２７)９９.７７％(２１７８/２１８３)９９.７３％(１１２０/１１２３)９９.６５％(５７１/５７３)４.４７５㊀０.２１５优质胚胎率５０.３１％(１６３/３２４)４５.３２％(９８７/２１７８)４７.７７％(５３５/１１２０)５１.３１％(２９３/５７１)ｂ８.３７７㊀０.０３９囊胚形成率５６.００％(９８/１７５)４８.２３％(６８０/１４１０)４９.１１％(３３１/６７４)５６.２２％(２２６/４０２)ｂ１０.６９５㊀０.０１４可冻囊胚形成率２８.５７％(５０/１７５)１９.０８％(２６９/１４１０)２３.５９％(１５９/６７４)２７.１１％(１０９/４０２)ｂ１８.５００<０.００１优质囊胚形成率１０.２９％(１８/１７５)９.７２％(１３７/１４１０)９.５０％(６４/６７４)１０.９５％(４４/４０２)０.６９９㊀０.８７４㊀㊀注:与Ａ组比较ꎬａＰ<０.０５ꎻ与Ｂ组比较ꎬｂＰ<０.０５ꎮ２.３㊀４组临床结局比较㊀４组每周期移植的胚胎个数㊁胚胎种植率㊁临床妊娠率㊁活产率㊁流产率和男女婴性别比差异均无统计学意义(均Ｐ>０.０５)ꎮ见表３ꎮ表３㊀４组分临床结局对比指标Ａ组(ｎ＝５６)Ｂ组(ｎ＝３６４)Ｃ组(ｎ＝１８７)Ｄ组(ｎ＝９６)Ｆ(χ２)值Ｐ值移植周期数(个)４７２８７１５６６４移植胚胎数(个)９９５８３３１８１２８每周期移植胚胎数(ｘʃｓꎬ个)２.１１ʃ０.４８２.０３ʃ０.４７２.０４ʃ０.３９２.００ʃ０.３１０.５５６０.６４４胚胎种植率３５.３５％(３５/９９)２７.６２％(１６１/５８３)２９.２５％(９３/３１８)３１.２５％(４０/１２８)２.７８３０.４２６临床妊娠率５３.１９％(２５/４７)４１.１２％(１１８/２８７)４４.２３％(６９/１５６)４６.８８％(３０/６４)２.７８１０.４２７流产率２.１３％(１/４７)５.５７％(１６/２８７)５.１３％(８/１５６)６.２５％(４/６４)１.１１８０.７７３活产率５１.０６％(２４/４７)３５.５４％(１０２/２８７)３９.１０％(６１/１５６)４０.６３％(２６/６４)４.３４３０.２２７男女婴性别比１５ʒ１８６９ʒ７２３９ʒ３８１７ʒ２００.３７１０.９４６３㊀讨㊀论精子在睾丸中生成时已经具有完整的父源遗传物质和功能活性的顶体蛋白酶ꎬ进入附睾并经头㊁体㊁尾运行后ꎬ精子核进一步成熟ꎬ同时顶体外膜抗原分布改变ꎬ最后精子通过生殖管道获得受精能力ꎮ不同来源的精子ꎬ精子核组装程度和顶体的成熟度不同ꎬ因此受精结局有所差异[１０]ꎮ当精子核ＤＮＡ损伤时ꎬ其进入卵子后精子核染色质解聚受到影响ꎬ进而影响受精ꎬ而高ＤＮＡ碎片率与ＩＣＳＩ治疗的正常受精率呈负相关[３]ꎮ顶体内生物活性蛋白酶促进卵子激活和精子核染色质的解凝缩ꎬ从而促进受精[１１]ꎮ本研究结果显示ꎬ４组的正常受精率差异有统计学意义(Ｐ<０.０５)ꎬ其中Ａ组㊁Ｂ组的正常受精率均高于Ｃ组ꎬ提示不同来源精子用于ＩＣＳＩ治疗ꎬ正常受精率存在差异ꎻ同时ꎬＡ组㊁Ｂ组的ＤＮＡ碎片率低于Ｃ组ꎬ而顶体完整率高于Ｃ组(Ｐ<０.０５)ꎬ这提示由于不同来源精子的ＤＮＡ碎片率和顶体完整率不同ꎬ可能导致ＩＣＳＩ的正常受精率存在差异ꎮ胚胎发育到４~８细胞阶段时ꎬ合子基因组开始激活ꎬ父源基因对胚胎发育的影响开始显现ꎮ尽管有研究结果显示射出精子和睾丸精子的囊胚形成率和囊胚质量无明显差异[１２－１３]ꎬ但本研究结果显示Ｂ组的优质胚胎率㊁囊胚形成率和可冻囊胚率低于Ｄ组(Ｐ<０.０５)ꎮ其原因可能有３个方面:首先ꎬ未成熟的精子生成后从生精小管向附睾迁移的过程中产生活性氧ꎬ引起精子氧化应激损伤ꎬ致使精子的结构和功能受损[１４]ꎬ同时由于环境㊁生活习惯㊁肥胖㊁感染或者其他疾病等原因ꎬ少弱精子症患者精子的微环境变差ꎬ产生的超氧化物浓度高ꎬ精子氧化应激损伤更严重[１５]ꎬ而睾丸中的精子中心粒等受损伤小[１６]ꎬ使其所形成的胚胎发育潜能好ꎻ其次ꎬ本研究中睾丸精子来源于梗阻性无精子症患者ꎬ而大多数此类患者睾丸的生精功能正常ꎬ但少弱精子症患者多数生精功能受损ꎬ表观遗传异常ꎬ表观遗传通过调节基因表达和细胞的功能ꎬ最终影响胚胎的质量[１７]ꎻ最后ꎬ射出精子的浓度和前向运动率与精子染色体的非整倍性呈负相关[１８]ꎬ少弱精子症的染色体精子非整倍性升高[１９]ꎬ非整倍性的精子导致胚胎染色体异常ꎬ少弱精子症患者的胚胎发育潜能比正常精液者差ꎮ因此ꎬ少弱精子症患者行ＩＣＳＩ治疗时所获胚胎的发育潜能差ꎬ临床上应予以重视ꎮ本研究结果还显示ꎬ４组的胚胎种植率㊁临床妊娠率㊁流产率㊁活产率㊁男女婴性别比差异均无统计学意义(Ｐ>０.０５)ꎬ与赵杰等[２０]的研究结果相同ꎮ这可能是由于用于ＩＣＳＩ的精子数量非常有限ꎬ故优先选择活力和形态最好的精子ꎬ以减小精子异常对ＩＣＳＩ结局的影响ꎮ精子进入胞质后可进一步进行生理选择ꎬ以顺利完成受精ꎬ并促进受精卵发育成优质胚胎ꎮ而临床胚胎移植时需要经过严格的胚胎质量筛选ꎬ挑选质量最佳的胚胎移植入宫腔ꎬ也从一定程度上淘汰染色体异常的胚胎ꎬ并减少精子缺陷对临床结局的影响ꎮ综上所述ꎬＩＣＳＩ周期使用不同来源精子会导致精子ＤＮＡ碎片率和顶体完整率存在差异ꎬ从而影响正常受精率ꎮ少弱精子症来源的精子可影响ＩＣＳＩ治疗周期的胚胎发育结局ꎬ因此少弱精子症患者进行ＩＣＳＩ治疗前ꎬ有必要进行精子功能检查评估ꎬ加强男科临床治疗ꎬ改善精子质量和功能ꎬ以提高临床治疗结局ꎮ参㊀考㊀文㊀献[１]㊀ＤｅｍｉｒＢꎬＡｒｉｋａｎＩＩꎬＢｏｚｄａｇＧꎬｅｔａｌ.ＩＣＳＩｏｕｔｃｏｍｅｏｆｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｓｅｖｅｒｅｏｌｉｇｏｓｐｅｒｍｉａｖｓ.ｎｏｎ￣ｏｂｓｔｒｕｃｔｉｖｅａｚｏｏｓｐｅｒｍｉａ[Ｊ].ＣｌｉｎＥｘｐＯｂｓｔｅｔＧｙｎｅｃｏｌꎬ２０１２ꎬ３９(２):１４１－１４３. [２]㊀孙惠君ꎬ李㊀博ꎬ陈书强ꎬ等.不同种类精液异常对辅助生殖临床结局的影响[Ｊ].中国男科学杂志ꎬ２０１６ꎬ３０(２):２１－２５.[３]㊀ＸｕｅＬＴꎬＷａｎｇＲＸꎬＨｅＢꎬｅｔａｌ.ＥｆｆｅｃｔｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇ￣ｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｎｃｌｉｎｉｃａｌｏｕｔｃｏｍｅｓｆｏｒＣｈｉｎｅｓｅｃｏｕｐｌｅｓｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇｉｎｖｉｔｒｏｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｒｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＪＩｎｔＭｅｄＲｅｓꎬ２０１６ꎬ４４(６):１２８３－１２９１. [４]㊀ＥｓｔｅｖｅｓＳＣꎬＳáｎｃｈｅｚ￣ＭａｒｔíｎＦꎬＳáｎｃｈｅｚ￣ＭａｒｔíｎＰꎬｅｔａｌ.Ｃｏｍ￣ｐａｒｉｓｏｎｏｆｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅｏｕｔｃｏｍｅｉｎｏｌｉｇｏｚｏｏｓｐｅｒｍｉｃｍｅｎｗｉｔｈｈｉｇｈｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｕｎｄｅｒｇｏｉｎｇｉｎｔｒａｃｙｔｏｐｌａｓｍｉｃｓｐｅｒｍｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈｅｊａｃｕｌａｔｅｄａｎｄｔｅｓｔｉｃｕｌａｒｓｐｅｒｍ[Ｊ].Ｆｅｒ￣ｔｉｌＳｔｅｒｉｌꎬ２０１５ꎬ１０４(６):１３９８－１４０５.[５]㊀谷翊群ꎬ陈振文ꎬ卢文红ꎬ等.世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册[Ｍ].５版.北京:人民卫生出版社ꎬ２００５:１６－２８ꎬ１３８[６]㊀何泳志ꎬ李大文ꎬ成俊萍ꎬ等.精子ＤＮＡ完整率㊁精子顶体完整率及反应率对补救卵泡浆内单精子注射术的影响[Ｊ].南方医科大学学报ꎬ２０１６ꎬ３６(１):１４０－１４４. [７]㊀ＦｅｒｎáｎｄｅｚＪＬꎬＭｕｒｉｅｌＬꎬＲｉｖｅｒｏＭＴꎬｅｔａｌ.Ｔｈｅｓｐｅｒｍｃｈｒｏｍａｔｉｎｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎｔｅｓｔ:ａｓｉｍｐｌｅｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎ[Ｊ].ＪＡｎｄｒｏｌꎬ２００３ꎬ２４(１):５９－６６. 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附睾和睾丸冷冻精子行卵胞浆内单精子注射临床效果的分析
鲜 附睾或睾 丸精 子为对 照组（８ １０个 周期 ） 估两 组 的受精率 、胚 胎质量 、妊 娠率和 种植率 。结 果 冻 精组 、对 照组 分别注射 成熟 Ｍ Ｉ期 卵子 。评 Ｉ ２５ １９ 个 ， ４ 、 ８６ 冻精 组的 受精率 、 卵裂率和 优胚 率分 别为（９ ＋２ ．％、９ ．±８ ８％、６ ．４２． ％； 照组分 别 为（１ Ｍ ５ ） （７ｉ １．） ７． ０ ） （６ ８ ７ ７ ． ） （１ －６８ 对 ８ ２ ） ８ ． ．％、９ ． １ ％、 ９ ８ ＋ ３ （９ ： ９ ） ４ ．． ．％，两 组间均无 显 著性差 异 （ ４－ ５ ＋ ２ Ｐ＞Ｏ０ ） ．５ 。冻精 组共妊娠 ８例 ，宫外 孕 １例 。对照组共 妊娠 ６ ，流产 ｌ ７例 ３例， １ 引产 （ 娠 ２ 例 妊 ８周
◎
于洪君 王秀霞 许 木
瑭Ｄ教 Ｄ远Ｏ ￣ＵＦ ＴＣＣ ＡＡ 代Ｔ Ｎ程 ＣＩ ＥＨ Ｏ
第 ０下期 ２ ｌ第 ０ ６半 ８８ ９ １ 期月 ０月 ６ 卷 ・ 单精子注射临床效果的 分析
蓬 孙晓玲 程东凯 刘
１沈阳东方 医疗集团菁华 医院生殖 中心生殖 实验 室 （ １０ ５ １０ ０ ）
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不同来源精子行卵胞浆内单精子显微注射结局分析
不同来源精子行卵胞浆内单精子显微注射结局分析罗莉;赵静;李东红;闫春芳;杨贵忠【期刊名称】《中国妇幼健康研究》【年(卷),期】2012(023)003【摘要】目的探讨不同来源精子行卵胞浆内单精子显微注射后的妊娠结局.方法回顾分析218个卵胞浆内单精子显微注射周期,按精子来源分为射出精子组190个周期,附睾穿刺取精组12个周期,睾丸穿刺取精组16个周期,比较3组的受精率、卵裂率、优质胚胎率和临床妊娠率等指标.结果睾丸穿刺取精组较射出精子组及附睾穿刺取精组的受精率、卵裂率高,经比较差异均有统计学意义(χ2值分别为15.27、10.83、7.87、4.25,均P<0.05);睾丸穿刺取精组与射出精子组及附睾穿刺取精组临床妊娠率比较差异均无统计学意义(χ2值分别为1.67、0.94,均P>0.05);3组间的流产率、畸形率均为0,差异均无统计学意义(均P>0.05).结论附睾穿刺取精组及睾丸穿刺取精组来源精子行卵胞浆内单精子显微注射助孕可获得与射出精子组相似的临床妊娠率.【总页数】3页(P297-299)【作者】罗莉;赵静;李东红;闫春芳;杨贵忠【作者单位】西安第四医院生殖医学科,陕西,西安,710004;西安第四医院生殖医学科,陕西,西安,710004;西安第四医院生殖医学科,陕西,西安,710004;西安第四医院生殖医学科,陕西,西安,710004;西安第四医院生殖医学科,陕西,西安,710004【正文语种】中文【中图分类】R321.33【相关文献】1.不同来源精子行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射所得胚胎冻融及移植后妊娠结局比较 [J], 贺贞;朱明辉;杨丹2.不同来源精子行卯胞浆内单精子注射临床结局分析 [J], 郐艳荣;廖秦平;杨慧霞;徐阳;贺占举;王晟;张蕾;薛晴;尚鹃;陈菲;鞠慧岩;左文莉3.不同来源冻融精子行卵胞浆内单精子注射的临床结局分析 [J], 宋文妍;赵万里;杨庆岭;孙莹璞;姚桂东;杨洪毅;金海霞;辛志敏4.不同来源精子对卵胞浆内单精子显微注射临床结局的影响 [J], 李宜学;田喜凤;樊桂玲;王振荣;王丽荣5.不同来源精子行卵胞浆内单精子注射临床妊娠结局分析 [J], 曹金凤;杜元杰;赵志明;李立鹏;王玮;崔娜;郝桂敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同来源精子行卯胞浆内单精子注射临床结局分析
不同来源精子对ICSI助孕结局的比较黄亚;王荣祥;郭丽;吴国平【期刊名称】《临床军医杂志》【年(卷),期】2013(0)10【摘要】目的比较无精子症患者附睾或睾丸精子、重度少和(或)弱精子症患者精子以及非男方因素不育患者精子行卵胞浆内单精子注射(ICSI)后的临床治疗效果。
方法非男方因素患者(n=62)和重度少和(或)弱精子症患者(n=102)采用射出的精子,无精子症患者(n=24)采用经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)或睾丸穿刺抽吸术(TESA)获取精子,比较ICSI后的受精率、妊娠率和种植率等。
结果非男方因素患者组女方年龄显著高于重度少和(或)弱精子症患者组以及无精子症患者组(P<0.05),然而三组患者的平均获卵数、MⅡ期卵数以及正常受精率差异无统计学意义(P>0.05)。
非男方因素患者组的卵裂率显著高于无精子症患者组(P<0.05),但三组患者的优质胚胎率、临床妊娠率以及胚胎种植率差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论 PESA-ICSI和TESA-ICSI治疗部分无精子症患者可获得与重度少和(或)弱精子症患者甚至非男方因素不育患者同等的临床妊娠率和种植率,是治疗梗阻性和非梗阻性无精子不育症的有效手段。
【总页数】4页(P1060-1063)【关键词】不育症;无精子症;附睾精子;睾丸精子;弱精子症【作者】黄亚;王荣祥;郭丽;吴国平【作者单位】解放军第455医院生殖医学中心;解放军第85医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R698.2【相关文献】1.不同源性精子经ICSI-ET助孕术后的临床结局及子代安全性研究 [J], 贺晓;李博;孙丹;黄剑磊2.不同来源精子行ICSI助孕临床结局分析 [J], 孙庆云;曹金凤;杜元杰;周亮;朱序理;王跃;赵志明3.不同来源精子DNA碎片指数、顶体完整性与卵胞浆内单精子注射技术助孕结局相关性分析 [J], 殷晨星;李澎涛;于晓光;邢鹏;王娜;师楠;孟娜娜;王玉真4.不同来源精子行ICSI助孕1662个周期治疗结局分析 [J], 霍雷;金海霞;孙莹璞;宋文妍;苏迎春;郭艺红;王芳5.不同手术方式来源精子对ICSI助孕结局影响的研究 [J], 陈鑫;徐鸿毅;刁红录;张颖;张昌军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同来源精子对ICSI助孕结局的比较
不同来源精子对ICSI助孕结局的比较黄亚;王荣祥;郭丽;吴国平【期刊名称】《临床军医杂志》【年(卷),期】2013(0)10【摘要】目的比较无精子症患者附睾或睾丸精子、重度少和(或)弱精子症患者精子以及非男方因素不育患者精子行卵胞浆内单精子注射(ICSI)后的临床治疗效果。
方法非男方因素患者(n=62)和重度少和(或)弱精子症患者(n=102)采用射出的精子,无精子症患者(n=24)采用经皮附睾穿刺抽吸术(PESA)或睾丸穿刺抽吸术(TESA)获取精子,比较ICSI后的受精率、妊娠率和种植率等。
结果非男方因素患者组女方年龄显著高于重度少和(或)弱精子症患者组以及无精子症患者组(P<0.05),然而三组患者的平均获卵数、MⅡ期卵数以及正常受精率差异无统计学意义(P>0.05)。
非男方因素患者组的卵裂率显著高于无精子症患者组(P<0.05),但三组患者的优质胚胎率、临床妊娠率以及胚胎种植率差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论 PESA-ICSI和TESA-ICSI治疗部分无精子症患者可获得与重度少和(或)弱精子症患者甚至非男方因素不育患者同等的临床妊娠率和种植率,是治疗梗阻性和非梗阻性无精子不育症的有效手段。
【总页数】4页(P1060-1063)【关键词】不育症;无精子症;附睾精子;睾丸精子;弱精子症【作者】黄亚;王荣祥;郭丽;吴国平【作者单位】解放军第455医院生殖医学中心;解放军第85医院妇产科【正文语种】中文【中图分类】R698.2【相关文献】1.不同源性精子经ICSI-ET助孕术后的临床结局及子代安全性研究 [J], 贺晓;李博;孙丹;黄剑磊2.不同来源精子行ICSI助孕临床结局分析 [J], 孙庆云;曹金凤;杜元杰;周亮;朱序理;王跃;赵志明3.不同来源精子DNA碎片指数、顶体完整性与卵胞浆内单精子注射技术助孕结局相关性分析 [J], 殷晨星;李澎涛;于晓光;邢鹏;王娜;师楠;孟娜娜;王玉真4.不同来源精子行ICSI助孕1662个周期治疗结局分析 [J], 霍雷;金海霞;孙莹璞;宋文妍;苏迎春;郭艺红;王芳5.不同手术方式来源精子对ICSI助孕结局影响的研究 [J], 陈鑫;徐鸿毅;刁红录;张颖;张昌军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同来源精子对卵胞浆内单精子注射治疗结局的影响
不同来源精子对卵胞浆内单精子注射治疗结局的影响张志宏;朱海波;张馨月;邓舒;刘睿智;侯毅【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2014(23)3【摘要】目的分析不同来源精子对卵胞浆内单精子注射术(ICSI)治疗后的胚胎发育及治疗结局的影响. 方法回顾性分析来我院行ICSI助孕治疗的144对不育夫妇(共154个周期),其中96个周期(A组,89对夫妇)的精子来源为严重少、弱精子症患者的射出精子,32个周期(B组,30对夫妇)为附睾精子,26个周期(C组,25对夫妇)为睾丸精子.比较三组经ICSI治疗后的2PN率、2PN卵裂率、优质胚胎率、种植率、妊娠率. 结果 B组的2PN率、2PN卵裂率、优质胚胎率、妊娠率和种植率与A组相比,均无统计学差异(P＞0.05);C组2PN率、优质胚胎率低于A组、B组(P ＜0.01),而妊娠率、种植率3组间无统计学差异(P＞0.05). 结论尽管睾丸精子行ICSI可能影响受精及早期胚胎发育,但与严重少弱精患者的射出精子及附睾来源的精子行ICSI的妊娠结局没有显著差异.【总页数】4页(P252-255)【作者】张志宏;朱海波;张馨月;邓舒;刘睿智;侯毅【作者单位】吉林大学白求恩第一医院生殖医学中心产前诊断中心,长春130021;吉林大学白求恩第一医院生殖医学中心产前诊断中心,长春130021;吉林大学白求恩第一医院生殖医学中心产前诊断中心,长春130021;吉林大学白求恩第一医院生殖医学中心产前诊断中心,长春130021;吉林大学白求恩第一医院生殖医学中心产前诊断中心,长春130021;吉林大学中日联谊医院泌尿外科,长春130031【正文语种】中文【相关文献】1.不同精子来源及参数对卵胞浆内单精子注射术结局的影响 [J], 谭巧;刘能辉;李艳萍;刘冬娥;陈仙花2.不同来源精子对卵胞浆内单精子注射助孕结局的影响 [J], 冯翠娥;丛林;章志国;贺小进;赵丽华3.不同来源精子对卵胞浆内单精子注射临床结局的影响 [J], 方伟芬;冯雪;张波;周红;甘贤优;周莉;刘茵4.使用不同来源精子行卵胞浆内单精子注射对受精、胚胎发育及妊娠结局的影响[J], 张小慧; 薛林涛; 黄悦悦; 王世凯; 谭卫红; 毛献宝; 李政达; 周亭亭; 韦娉嫔; 刘庆友5.不同来源精子对梗阻性无精子症ICSI治疗结局影响的研究进展 [J], 陈其桂;李大文;李金燕因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同辅助生殖技术方法获得的单胎儿分娩结局的比较
不同辅助生殖技术方法获得的单胎儿分娩结局的比较文宏贵;兰灵;杨娜;罗红;谭长秀;刘军霞【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2014(23)11【摘要】目的比较体外受精(IVF)、卵胞浆内单精子注射(ICSI)以及补救性卵胞浆内单精子注射(R-ICSI)3种授精方式单胎出生儿的结局,探讨ICSI/R-ICSI授精对新生儿结局的影响. 方法回顾性分析了2005年至2012年本中心接受辅助生殖技术(ART)助孕治疗并单胎分娩的周期4 051例,根据授精方式不同分为:IVF组(3 406例)、ICSI组(558例)和R-IC-SI组(87例).分析各组出生儿早产率、低体重比率、性别比和新生儿出生缺陷数据. 结果 IVF、ICSI和R-ICSI 3组出生儿早产率分别为4.2％、5.2％和5.7％,无统计学差异(P＞0.05);低体重儿比率分别为14.0％、13.4％和17.2％,无统计学差异(P＞0.05);出生儿性别(男/女)比分别为1.005∶1、1.036∶1和0.64∶1,无统计学差异(P＞0.05);新生儿出生缺陷分别为2.14％、2.53％和3.61％,无统计学差异(P＞0.05). 结论不同辅助生殖技术方法不影响单胎儿分娩结局.【总页数】3页(P894-896)【作者】文宏贵;兰灵;杨娜;罗红;谭长秀;刘军霞【作者单位】重庆市妇幼保健院遗传与生殖研究所,重庆400013;重庆市妇幼保健院遗传与生殖研究所,重庆400013;重庆市妇幼保健院遗传与生殖研究所,重庆400013;重庆市妇幼保健院遗传与生殖研究所,重庆400013;重庆市妇幼保健院遗传与生殖研究所,重庆400013;重庆市妇幼保健院遗传与生殖研究所,重庆400013【正文语种】中文【相关文献】1.胎儿不同出生体质量对产程进展及分娩结局的影响 [J], 王莉2.辅助生殖技术受孕双胎与自然受孕双胎的产前超声筛查结果及胎儿的健康状况比较观察 [J], 蒋华景;郭津含;陈静;林丽璇;熊剑3.预测不同胎儿体重与分娩结局的相关性分析 [J], 孟静雯;周杰;黄璐4.母体与胎儿脊柱同侧体位对单胎初产妇分娩结局及胎儿枕后位的影响 [J], 庞飞飞5.无创产前胎儿染色体非整倍体筛查在辅助生殖单胎中的临床应用 [J], 刘晓艳;胡潇月因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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孕 的结局 相 近 。精 子 的成 熟度 、精 子 的冷冻 可能并 不 影响 最终 的妊娠 率 。
【 关键词 】 卵胞浆 内单精 子注射； 射 精液； 附睾睾丸精子 ； 供精 ； 临床妊娠率
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医院 ２ ０ １ １ 年１ 月一 ２ ０ １ ２ 年 １ ２月 ３ ７ ４个 卵胞 浆 内单 精 子显 微 注射 （ Ｉ Ｃ Ｓ Ｉ ）治疗 周 期 的妊 娠 结局 ，依 据精 子 来 源 不 同分 为 三组 ：射 出精 液组 （ Ａ组 ） ，经皮 附睾 穿刺 和 经皮 睾丸 穿刺 取精 子组 （ Ｂ组 ） ，供精 组 （ ｃ组 ） ，比较 三 组 的受 精 率 、卵 裂 率 、优 质 胚 胎 率 和 临 床妊 娠 率 。 结 果 ： Ａ组 的优 胚 率 高 于 ｃ组 （ Ｐ ＜ ０ ． ０ １ ７ ） ，三 组 患 者 的受
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《 中国 医 学 创 新》 第１ １ 卷第３ ２ 期（ 总 第３ １ ４ 期） ２ ０ １ ４ 年１ １ 月 论
著 Ｌ ｕ ｎ ｚ ｈ ｕ
三种 不 同来 源 精子行 卵胞 浆 内单 精 子注射 临床结局 的 比较
张丹① 谭 丽① 赵 冬梅 ①
【 摘要 】 目的：比较三种方法获得 的精子行卵胞浆 内单精子注射的临床结局。方法 ：回顾性分析笔者所在
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