病原微生物第8章细菌感染的检查方法与防治原则

血清中抗体效价升高≥4倍者方有意义 凝集试验：肥达试验、外斐试验、显微镜凝集试验等 种类： 沉淀试验：梅毒VDRL、RPR试验等 中和试验：抗“O”试验等 补体结合试验：Q热柯克斯体抗体检测等
5、动物试验
主要用于分离、鉴定致病菌，测定菌株产毒性等
6、药物敏感试验
纸片琼脂法
测量抑菌环直径
第二节 细菌感染的特异性预防
靛基质（吲哚）试验（I） 硫化氢试验 尿素分解试验
4、血清学鉴定
已知抗体（抗血清） 待检抗原（未知菌）
直接法——玻片凝集试验（定性试验）
血清学诊断
用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无 原理：
相应特异性抗体和其效价的动态变化，可作为某些 传染病的辅助诊断。(抗原→未知抗体)
标本： 双份血清标本，恢复期血清中抗体效价比急性期
区别要点
免疫物质 接种次数 免疫出现时 间 免疫维持时 间
人工主动免 疫
抗原 1~3次 慢，2~4周
人工被动免疫
抗体或细胞因子 等 1次 快，立即
长，数年~数 月
短，2~3周
第三节、细菌感染的治疗
思 考 题
一、名词解释
1．活菌（疫）苗 2．死菌（疫）苗 3．类毒素 4．抗毒素 5．人工被动免疫 6．人工主动免疫
海南医学院免疫学与微生物学教研室
牛莉娜
目的要求
1.掌握： （1）病原菌的常规分离与鉴定方法原则和常 用的检测细菌抗原的方法。 （2）人工自动免疫和人工被动免疫的概念。 （3）常用生物制品的概念和特点。 （4）细菌标本的采集与送检的主要原则。 2.熟悉：抗菌药物的主要作用机制。 3.了解：临床感染性疾病用药的基本原则及检 测细菌对药物敏感性的常用方法。
霍乱弧菌、螺 旋体
鞭毛染色、异染颗粒、
负染法
直接涂片染色镜检
脑膜炎奈瑟菌（革兰染色）
结核分枝杆菌（抗酸染色）
2、细菌培养
按不同目的把标本接种在普通琼脂平板、血液 琼脂平板或选择培养基，以获得细菌的纯培养。
3、生化试验
糖发酵试验
糖类代谢 VP试验（Vi）
甲基红试验（M）
枸橼酸盐利用试验（C）
蛋白质代谢
人工被动免疫
人工被动免疫(artificial passive immunity)注射含有 特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体，或 细胞因子等免疫制剂，使机体即刻获得特异性免疫， 作用及时。
作用：治疗，紧急预防
抗毒素 主要生物制品： 丙种球蛋白(麻疹、甲肝、脊髓灰质炎)
人工主动免疫与人工被动免疫的区别
偶可发生回复突变，毒力回升，接种后发病。联合疫苗在 试用中。
活疫苗与死疫苗的区别
区别点
制品特点 制备方法 接种次数和接种 量 接种反应
活疫苗
减毒或无毒的疫苗 通过非正常培养得到减毒株 1次，量小 可在体内增殖，类似轻型感 染或隐性感染 体液免疫和细胞免疫 1~5年或更长
死疫苗
死菌，仍保持免疫原性 通过物理或化学方法使病 原体失活 2~3次，量大 在体内不增殖，可出现发 热、全身或局部肿痛等反 应 体液免疫 0.5~1年
二、问答题
1．简述进行细菌学检查时对标本采集和送检过程应 遵守的原则。 2．列表比较人工自动免疫与人工被动免疫的区别。 3．列表比较活疫苗与死疫苗的主要区别。 4．简述病原菌检出的主要程序。
（三）病原菌的抗原检测
（1）酶免疫技术（EIA）：淋病奈瑟菌、肠道菌检测。 （2）协同凝集：用SPA测脑膜炎奈瑟菌、志贺菌、沙门菌菌可 溶性抗原作早期诊断。 （3）免疫荧光技术（IF）：痢疾志贺菌荧光 Ab→培养基+粪 便标本 荧光球。 （4）对流免疫电泳(CIE):测脑膜炎奈瑟菌 （5）免疫印迹技术
第一节 一.病原菌检测
细菌感Baidu Nhomakorabea的诊断
（一）标本的采集与运送原则
1. 早期采集 2. 无菌采集 3. 正确采集标本 4. 尽快送检 5. 标本做好标记
（二）细菌分离培养与鉴定
形态学检查 细菌培养 生化试验 血清学鉴定 动物试验 药物敏感试验
1、形态学检查
不染色的标本——观察细菌大致的外表轮廓以及有无动力 染色的标本——细菌形态学的观察 单染法——只显示细菌的形态与排列 复染法——可观察细菌的形态及其染色特性 革兰染色（Gram’ stain)——最常用最重要的分类鉴别法 抗酸染色（Acid-fast stain) 特殊染色法——荚膜染色、芽胞染色、
（四）病原菌核酸的检测

1、核酸杂交技术 2、PCR技术 3、基因芯片技术 （gene chips）
人工主动免疫
人工主动免疫(artificial active immunity)：将疫苗 或类毒素接种于人体，使机体产生获得性免疫力 的一种防治微生物感染的措施。 作用：预防
死疫苗 主要生物制品： 活疫苗 亚单位疫苗 基因工程疫苗 重组载体疫苗 核酸疫苗 类毒素
人工主动免疫
（1）死疫苗(killed vaccine)是用物理、化学方法杀死 病原微生物，但仍保持其免疫原性的一种生物制剂。 如白百破、伤寒、流脑、乙脑、流感、钩端螺旋体等。
（2）活疫苗（living vaccine）是通过独立变异或人工 选择法而获得的减毒或无毒株，或从自然界直接选择出来 的弱毒或无毒株经培养后制成的疫苗。 BCG、鼠疫、炭疽、脊髓灰质炎和麻疹疫苗等。
免疫应答的类型 免疫维持时间
毒力回升与安全 性
疫苗的稳定性
有可能，对免疫缺陷者有危 险
相对不稳定
不可能，安全性好
相对稳定
人工主动免疫
（3）基因工程疫苗：目的基因 基因产物
导入
原核或真核细胞
（如乙肝疫苗）
（4）重组载体疫苗：
蛋白质抗原基因
基因整合
培养 转入
减毒的病毒或细菌
表达
基因产物
疫苗
人工主动免疫
生物制品：人工免疫的免疫原、免疫血清、细胞
制剂及诊断制剂的生物性制剂。
人工免疫：采用人工方法将疫苗、类毒素等或含
有某种特异性抗体、细胞免疫制剂等接种于人体， 以增强宿主体的抗病能力。
主动免疫 被动免疫
自然免疫 人工免疫 自然免疫 人工免疫
患病、隐性感染 疫苗、类毒素 胎盘、初乳 抗毒素、丙球
（5）亚单位疫苗： 除去病原体的核酸，提取其表面抗原制备的疫苗。 如脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌表面的特异性多糖+ 吸 附剂制成疫苗（不含类脂、无毒）、流感疫苗、乙肝疫 苗等，这种疫苗防止减毒活疫苗回复突变和肿瘤病毒潜 在的致癌作用。
（6）DNA疫苗：
即基因疫苗或核酸疫苗（第三代疫苗），这种核酸 既是载体又能在真核细胞中表达抗原，诱导产生细胞毒 杀伤功能的T细胞，有效预防病毒、胞内寄生菌及寄生虫 引起的传染。