鸭瘟病毒分子生物学探讨

合集下载

鸭瘟病毒AV1221株UL24基因的克隆与原核表达的开题报告

鸭瘟病毒AV1221株UL24基因的克隆与原核表达
的开题报告
一、研究背景及意义
鸭瘟病是一种由鸭瘟病毒引起的急性传染病，主要在水禽中流行，严重影响了禽业的发展。

鸭瘟病毒的基因组为非分段负链RNA，包括6种基因，分别是N、P、M、F、H、L，其中UL24基因编码的蛋白质是一种磷酸酶，参与了病毒的复制及杀伤宿主细胞的作用。

因此，对UL24基因的克隆及表达有助于揭示鸭瘟病毒的致病机制，为病毒的诊断、预防及控制提供理论依据。

二、研究内容及方法
本研究计划克隆鸭瘟病毒AV1221株UL24基因，并进一步将其克隆到原核表达载体中进行表达和纯化。

具体步骤如下：
1. 获取鸭瘟病毒AV1221株RNA，根据UL24基因序列设计引物并进行PCR扩增。

2. 将扩增产物克隆到质粒载体pET28a(+)中。

3. 转化大肠杆菌BL21(DE3)表达菌，通过IPTG诱导表达目的蛋白。

4. 采用亲和层析技术纯化目的蛋白。

5. 对纯化后的UL24蛋白进行鉴定及功能分析。

三、预期结果
本研究预期能够成功克隆到鸭瘟病毒AV1221株UL24基因，并在原核中表达和纯化目的蛋白。

通过对纯化后的蛋白进行鉴定及功能研究，揭示UL24蛋白在鸭瘟病毒的致病机理中的作用，为病毒的预防及控制提供理论依据。

鸭瘟强毒TK基因的原核表达及在感染鸭组织亚细胞定位研究的开题报告

鸭瘟强毒TK基因的原核表达及在感染鸭组织亚细胞定位研究的开题报告一、研究背景鸭瘟是一种由鸭瘟病毒（Duck Plague Virus, DPV）引起的急性、高度致死的病毒性疾病。

DPV是一种双链DNA病毒，它具有高度的致病性和传染性，可导致鸭群的大面积死亡。

鸭瘟病毒分为三个亚型，分别是I 型、II型和III型。

其中，I型是最为常见的亚型，也是最具致病性的亚型。

DPV的感染过程中，TK基因被认为是一个重要的基因。

TK基因编码嘌呤核苷酸代谢酶，它可以在DPV复制和繁殖过程中发挥重要的作用。

此外，TK基因还可以参与DPV对宿主细胞的感染和侵染，从而影响DPV 的病毒性和病原性。

目前，尽管对于DPV的研究已经取得了一定的进展，但是对于TK基因的功能和表达机制还存在很多不明确的地方。

因此，本文计划采用原核表达技术和组织亚细胞定位研究等方法，对TK基因在DPV感染过程中的作用进行探究。

二、研究目的和内容本文的研究目的主要有两个方面：1. 借助原核表达技术对TK基因进行表达通过对TK基因进行原核表达，将其表达为大量蛋白质，以便于进一步研究其生物学功能和作用机理。

同时，研究TK基因在原核下的表达情况，可以为进一步研究其在DPV感染中的作用提供一定的基础。

2. 对TK基因在感染鸭组织中的亚细胞定位进行研究TK基因在DPV感染中的具体作用机制还不十分清楚，因此，研究其在感染鸭组织中的亚细胞定位可以更全面地了解其生物学功能。

通过对TK基因在感染鸭肝、肾等组织中的亚细胞定位的研究，可以了解TK基因的功能和DPV感染的机理。

三、研究方法和技术路线1. TK基因的克隆和构建通过PCR技术扩增DPV TK基因，并使用限制性内切酶将其插入原核表达载体中。

2. 原核表达和纯化将构建好的原核表达载体转化入大肠杆菌，在含IPTG的LB培养基中诱导原核表达。

使用亲和层析技术纯化表达的蛋白质。

3. 蛋白质鉴定和定量通过SDS-PAGE和Western blot技术对表达的蛋白质进行鉴定和定量。

疑似鸭瘟病毒的分离培养、鉴定

使病毒部分失活或全部失活。在ｐ．～９０的环境下稳Ｈ５０．
定；在ｐ．但Ｈ３０和ｐ１的环境下则很快被破坏。ｐ．Ｈ１Ｈ７０８０温度一２ ℃ 至一７ ℃ 是保存病毒的最适条件【。．、００
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
有７毒株同源性都很高，在９％以上，个均７这也反映出ＤＡＮ
病毒变异很小的特点。３３由于Ｖ４疫苗毒株Ｐ２基因核苷酸序列第４４位置．Ｆ３１处的Ｔ碱基突变为Ａ，此位置形成一个新的终止密码子在ＴＡ，样就造成了核苷酸序列的重大改变，致了该疫苗Ａ这导
较慢，发病和流行有日趋严重之势，出现了一些新的特点。并
种仍引起发病。病毒对热的抵抗力也较强，０２ｈ５ ℃ ５℃ 、６３ｎ６ ℃ １ｎ处理，可破坏病毒的感染性。室温０ｍｉ、０５ｍｉ才２Ｃ需经３后病毒才丧失感染力。病毒对乙醚和氯仿敏２０ｄ感，３ ℃ 下经胰酶、凝乳蛋白酶及脂肪酶作用１，在７胰８ｈ可
１１３试验雏鸭、～１．９２日龄鸭胚：于中国农科院畜牧所购鸭孵化场。
ＤＶ对外界环境具有较强的抵抗力，报道，含病毒Ｐ据将肝脏保存于一１℃ ～一２ ℃ 条件下，时３７ｄ，００历４后给健鸭接

鸭瘟的防治与诊断

家禽科学
鸭瘟是鸭的一种急性败血性传染病，本病传染迅速，发病率和致
引起大批死亡，造成严重的经济损
一、病原体钟均可致弱和杀灭病毒。

对常用的消毒剂敏感，病毒对低温的抵抗力
二、诊断
1．流行病学诊断。

在自然情
鸭瘟的防治与诊断
科学养殖
的饲料、饮水、用具和运输工具等，是造成鸭瘟传播的重要因素。

其传播途径主要是消化道，也可以通过交配、眼结膜和呼吸道而传染；吸血昆虫也可能成为本病的传
走动。

病初流出浆液性分泌物，眼周围的羽毛沾湿，以后变黏性或脓性分泌物，将眼睑黏连。

部分病鸭头颈部肿胀，俗称为“大头瘟”。

病鸭下痢，排绿色或灰白色稀粪，黏膜留有溃疡斑痕。

泄殖腔黏膜表面覆盖一层灰褐色或绿色的坏死结痂，粘着牢固，不易剥离，黏膜上有出血斑点和水肿。

头颈肿胀的病鸭，皮下组织有黄色胶样浸润。

鼻
点或灰色坏死灶；产蛋鸭的卵泡增大，并有充血和出血，有时卵泡破裂引起腹膜炎。

组织学变化表
脉红细胞崩解，血管周围常有淡染
家禽科学
科学养殖
织有的呈纤维素样坏死。

4．实验室诊断。

（1）病毒分离鉴定。

采集病死鸭的肝脏、脾脏等组织，无菌处理后分别接种于9～14日龄非免疫鸭的基础之上，重点进行疫苗预防。

1.预防。

在没有发生鸭瘟的地区或鸭场，应当着重做好预防工作，定期注射疫苗。

对于肉鸭，于7日龄左右进行首免，0.5头份/只
家禽科学
科学养殖。

鸭瘟病毒GD株TK_dUTPase和PK基因的克隆及序列分析

0. 25 L, DNA 模板 8 L , 超纯水28. 75 L 。反应条件 ( 其中 T K 、 dUT Pase 和 PK 基因的退火温度分别为 50 ∀ 、 54. 5 ∀ 和 53 ∀ ) : 94 ∀ 预变性 4 min; 94 ∀ 40 s, 50 ∀ 45 s, 72 ∀ 2 min 30 s, 循环 29 次; 最后 72 ∀ 延伸 10 min。反应结束后 , 取 5 L P CR 产物用 8 g/ L 的琼脂糖凝胶进行电泳检测。 1. 2. 4 PCR 产物的纯化、克隆及重组质粒的酶切鉴定 PCR 扩增产物回收纯化 , 操作按说明书进行。然后将 PCR 纯化产物与 PT A2 载体连接, 转入 T OP10 感受态细胞。随机挑取单菌落 , 分别接种含有 Amp ( 100 g / m L ) 的 L B 培养液中, 37 ∀ , 200 r/ min 振荡培养过夜。用质粒抽提试剂盒提取质粒并用 Eco R 酶切鉴定 , 酶切产物经 8 g/ L 琼脂糖凝胶电泳检测。 1. 2. 5 序列比较分析将获得 T K 、 dU T Pase 和 P K 基因的编码区的核苷酸序列和氨基酸序列与国内已发表的 4 株有代表性的 DPV 毒株 : DP V clone 03 株 ( 国内弱毒疫苗毒株) , DPV AV1221 株 ( 国内标准强毒株 ) , DPV Chv 株 ( 四川分离株 ) , DP V VAC 株( 国内弱毒疫苗毒株 ) 的相应核苷酸和推导的氨基酸序列进行同源性分析比较。
中图分类号 : S852. 659. 1 文献标识码 : A 文章编号 : 1007 5038( 2010) 05 0053 05
鸭瘟 ( Duck plag ue, DP ) 又名鸭病毒性肠炎 ( Duck viral ent er it is, DVE) , 是由鸭瘟病毒 ( Duck plag ue v ir us, DPV) 引起鸭、鹅及多种雁形目禽类的一种急性败血性传染病。 DPV 基因组具有典型的疱疹病毒的特征 , 为双股 DNA, 大小约为 150 kb[ 1] 。整个基因组分为 UL ( long unique region ) 和 U S ( shor t unique region) 区 , 两端为 T R 区, UL 区和 US 区的连接处有 IR 区。由于 DPV 基因组庞大 , 并存在广泛的非必需区 , 可以作为表达外源基因的载

鸭瘟病毒强、弱毒株TK基因的克隆与生物信息学分析

一ｙ
疫原性不变，因而ＴＫ基因是疱疹病毒构建缺失疫苗的首选靶基因Ｉ。本研究通过对鸭瘟病毒强、弱毒株ＴＫ基因的克隆与生物信息学分析，为进一步明确ＤＰＶＴＫ基因的功能提供了依据。１材料与方法１．１毒株和质粒ＤＰＶＡＶｌ２２１株购于中国兽医药品监察所，ＤＰＶ鸡胚化弱毒疫苗株购于广西丽原生物股份有限公司，ＰＭＤ—ｌ９ＴＶｅｃｔｏｒ购于天根生化科技有限公司。１．２主要试剂ＤＮＡ纯化回收试剂盒、质粒／Ｊ、提取试剂盒、感受态细胞ＪＭ１０９均购于天根生化科技有限公司，ＰｈｕｓｉｏｎＨｉｇｈ—ＦｉｄｅｌｉｔｙＰＣＲＫｉｔ购于Ｎｅｗ
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｄｕｃｋｐｌａｇｕｅｖｉｒｕｓ（ＤＰＶ）：ＴＫｇｅｎｅ；ＴＫｐｒｏｔｅｉｎ；Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓａｎａｌｙｓｉｓ
收稿日期：２０１７—１２—２８基金项目：国家农业科技成果转化资金项目—— 国家科技部农业项目“规模化养鸭场标准化健康养殖技术示范与推广 ”（２０１３ＧＢ２Ｆ０００４２２）作者简介：任攀（１９９１一），男（仡佬族），贵州正安县人，在读硕士，研究方向：兽医免疫学。
关键词：鸭瘟病毒；ＴＫ基因；ＴＫ蛋白；生物信息学分析
ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＢｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓＡｎａｌｙｓｉｓｏｎｔｈｅＴＫＧｅｎｅｏｆＤＰＶＳＶｉｒｕｌｅｎｔａｎｄＶａｃｃｉｎｅＳｔｒａｉｎ

鸭疫里氏杆菌分子生物学研究进展

鸭疫里氏杆菌分子生物学研究进展
刘佳丽;张喜宏;姜英武;谷春华;高云航
【期刊名称】《动物医学进展》
【年(卷),期】2010(031)011
【摘要】鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)感染是当前严重危害养鸭业的主要传染病之一.目前,国内外主要集中于RA毒力相关基因、耐药相关因子、DNA指纹图谱技术、16 S rDNA特性分析技术、随机扩增多态性DNA技术、免疫原性相关蛋白、RA基因文库的构建、单克隆抗体和原生质体的制备、噬菌体的发现等分子生物学方面进行研究.为了更好的预防和控制该病,论文概述了近年来鸭疫里氏杆菌分子生物学研究进展,为进一步研究提供参考.
【总页数】5页(P74-78)
【作者】刘佳丽;张喜宏;姜英武;谷春华;高云航
【作者单位】吉林农业大学动物科技学院,吉林长春,130118;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春,130118;吉林省敦化市牧业管理局,吉林敦化,133700;吉林省敦化市牧业管理局,吉林敦化,133700;吉林农业大学动物科技学院,吉林长春,130118【正文语种】中文
【中图分类】S852.612
【相关文献】
1.鸭疫里氏杆菌病药物防治研究进展 [J], 吴华;李胜利;侯百枝;陈华;胡功政
2.鸭疫里氏杆菌病诊断方法研究进展 [J], 么乃全;高云航;徐凤宇;张敏;王全凯
3.鸭疫里氏杆菌外膜蛋白研究进展 [J], 杜金玲;牟巍;赵亚荣;郭书豪;卢会英
4.鸭疫里氏杆菌病的研究进展 [J], 张文通;魏凤;李峰;沈志强
5.鸭疫里氏杆菌病的研究进展 [J], 张文通;魏凤;李峰;沈志强
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

浅谈鸭瘟病毒的分离与鉴定方法

鸭瘟（ＤｕｃｋＰｌａｇｕｅ，ＤＰ），是由鸭瘟病毒（Ｄｕｃｋｐｌａｇｕｅ
ｖｉｒｕｓ，ＤＰＶ）引起的鸭、鹅和天鹅等水禽的一种急性接触
性传染病，其特征是流行广泛、传播迅速、发病率和死亡率高，严重威胁养鸭业的发展。
敏红细胞在相应抗原存在时会凝集而进行检侧。该法３ｈ
可判读结果，操作简便，不需昂贵的设备试剂，致敏细胞可长期保存，但敏感性较明胶颗粒凝集试验及问接免
疫荧光试验分别低２５倍和６５倍，不适合小量ＤＰＶ检测。
２．１．１血清中和试验（ｓＮ】血清学试验主要采用固定血清
／稀释病毒法，根据中和指数Ｍ做出判定：０＜Ｍ＜Ｉ．５说明未
２．２．１核酸探针技术
核酸探针技术是最早用于ＤＰＶ诊
感染ＤＰＶ，Ｍ≥１．７５表示受到感染。血清中和试验结果准
中进行的抗原抗体免疫沉淀反应。特点是简单、特异、
试验条件要求低，既可定性又可定量，易于推广，但敏感性不好。
２．１．４反向间接血凝试验（ＲＰＨＡＲＰＨＡ法利用抗体致
１鸭瘟病毒分离
ＤＰＶ主要侵害免疫器官，病毒的分离一般采用发病
山东畜牧兽医
２０１４年第３５卷
浅谈鸭瘟病毒的分离与鉴定方法

鸭疫里默氏杆菌分子生物学研究进展

纹图谱技术进行其亚型的确定研究。
Ｒｍｅ等利用１限制性核酸内切酶对鸭疫里默氏ｉｌｒ７种
４个长的可阅读框架。其中２个被命名为ＶａＤ１Ｖｐｐ和ａＤ２的可测读框架所编码的蛋白质可被认为与毒力蛋白相关。ｐＦ含有的被命名为ＲｐＣＣ１ｅＡ１的可阅读框架所编码的蛋白质，与奈瑟双球菌（ｉｅｉｇｎｒｅｅ、肠弯曲杆菌Ｎｅｓｒｏｏｒａ）ｓａｈ
中图分类号：￥５．１８２６
文献标识码：Ｂ
文章编号：１０．５９２０）２０５．４０８０８（０８０．１７０
鸭疫里默氏杆菌（ｅｒｌｎｔｅｔｅ，Ｒ是一种ＲｉｅａａａｐｓｆｒＡ）ｍｅｌｉｉ
毒力基因之一。
１Ｒ分子生物学研究概况Ａ
１１Ｄ．ＮＡ指纹图谱技术的应用ＤＮＡ指纹技术以ＤＡＮ
一
Ｃａｇ等对从台湾分离的６ｈｎＯ株Ｒ菌株研究后表明大Ａ部分菌株含有质粒 …】。其中６Ｏ％的分离株（６６）３／０中含有个３９ｋ．ｂ的质粒，１２％的分离株（／０中含６５ｋ７６）．ｂ和１ｂ的质粒，５％的分离株（／０含有２９ｋ６ｋ３６）．ｂ、１ｂ和６ｋ１ｂ的质粒，１８ｋ３％的分离株（４６）含有质粒。３９ｋ１／０不．ｂ
的质粒，被命名为ｐＦ，经测序获得了全序列，包含了ＣＣ１

分子生物学技术在畜禽疾病防控中的应用

分子生物学技术在畜禽疾病防控中的应用随着畜牧养殖业的发展，畜禽疾病成为了制约其发展的重要因素。

传统的防疫手段往往无法对付一些复杂的疫情，因此科学家们开始寻求新的技术手段来应对这些挑战。

分子生物学技术正是其中之一。

一、分子生物学技术的概述分子生物学是研究生命活动分子机理的科学，其核心是探索生命中的基因、蛋白质、核酸等分子结构和功能。

一般来说，分子生物学的技术主要包括PCR、DNA测序、基因克隆、基因组学、蛋白质组学、基因芯片等。

在畜禽疾病防控中，分子生物学技术主要应用于检测、鉴定、筛选、改良等方面。

比如，在检测某一种病原体时，可以利用PCR技术来扩增它的DNA序列，然后通过比对DNA序列库来确定其种类。

或者，通过基因芯片技术可以在众多的样本中快速筛选出可能存在病原体的标本。

二、分子生物学技术在疫情监测中的应用疫情的监测是畜禽疾病防控的重要环节之一。

而传统的疫情监测往往需要依靠人工抽血、尸检等方法进行病原体检测，而这样的方法不仅工作量大，而且检测结果的准确性也无法保证。

而分子生物学技术可以在病原体数量较低的情况下完成检测，并且准确性更高。

例如，在禽流感的检测中，研究人员可以通过RNA提取和PCR扩增技术来检测病原体的RNA序列，从而判断是否存在禽流感病原体。

此外，基因芯片技术可以同时筛选多种可能存在的病原体，极大地提高了检测效率和准确性。

三、分子生物学技术在疫苗研发中的应用疫苗是畜禽疾病防控的重要手段之一。

传统的疫苗研发往往需要依靠动物接种，而这样的方法不仅成本高昂，而且会给动物带来痛苦。

而使用分子生物学技术，则可以极大地缩短疫苗研发时间，同时也能够降低动物接种的数量和强度。

例如，在H7N9禽流感疫苗的研发中，研究者使用基因工程技术将H7N9禽流感病毒表面的HA和NA基因与其他病毒基因组合，制造出能够诱导人体产生抗体的疫苗。

这种疫苗可以避免病毒生产中的某些问题，同时也能够提高疫苗的稳定性和抗原性。

四、分子生物学技术在病原体基因分析中的应用病原体基因分析是分子生物学在畜禽疾病防控中的另一项重要应用。

鸭瘟病毒的分子生物学研究进展

鸭瘟病毒的分子生物学研究进展陈建君;张毓金;杨增岐;宋长绪【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2003(024)006【摘要】鸭瘟病毒属疱疹病毒科、α-疱疹病毒亚科.其核酸结构为线状双股DNA,衣壳为二十面体对称,有囊膜.鸭瘟病毒的DNA具典型的疱疹病毒DNA的特征,大小约为150 kb,两端为末端重复序列,中间有内部重复序列.囊膜蛋白为疱疹病毒的主要保护性抗原,它在介导病毒进入细胞,以及病毒的成熟与释放中均起重要的作用.疱疹病毒的囊膜蛋白主要有糖蛋白B(Glycoprotein B,gB)、gC、gD、gE、gI等.其他蛋白如Ul36、Ul37等在病毒的成熟与释放中也起重要的作用.国内外已有多人建立起鸭瘟的PCR检测方法,而其基因工程疫苗的研究报道较少.但参考其他疱疹病毒特别是伪狂犬病的基因工程疫苗的研究,可以推测鸭瘟的基因工程疫苗研究也大有可为.【总页数】4页(P25-28)【作者】陈建君;张毓金;杨增岐;宋长绪【作者单位】广东省农业科学院兽医研究所,广东广州,510640;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100;广东省农业科学院兽医研究所,广东广州,510640;西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨陵,712100;广东省农业科学院兽医研究所,广东广州,510640【正文语种】中文【中图分类】S858.32【相关文献】1.鸭瘟病毒的免疫学研究进展 [J], 赵军;杨孝朴;宋晓育2.鸭瘟病毒分子生物学探讨 [J], 潘书磊;林伯全3.鸭瘟病毒的研究进展 [J], 董嘉文;黄永亮;梁月凤;郭霄峰4.鸭瘟病毒实验室检测方法研究进展 [J], 庄金秋;梅建国;王艳;姚春阳;沈志强5.鸭瘟病毒的某些分子生物学特性 [J], 余克伦;陆光进;贺东升因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

鸭瘟病毒TK基因及其编码蛋白的生物信息学分析

维普资讯
安徽农业科学，ｕｎｌｆｎｕＪｒａｏＡｈｉｏ
．ｃ．０７３（１：９５ Βιβλιοθήκη ６Ｓｉ２０，５３）９３ —９３
责任编辑
陈娟
责任校对
俞洁
鸭瘟病毒Ｔ基因及其编码蛋白的生物信息学分析Ｋ
宋潘华奇，得华，２黎应胜，泽２（甘省西临农学，肃洮３ｏ２肃业学物学，肃州杨宇１肃定市洮业校甘临７５；．农大动医院甘兰．０甘ｏ
ｗｒｆｄｎＫｐｔｎｔｓｌｐｔｎｓｏｄｔｃｒｓｏｅｔｔＫｗｓｉｒｅ，ｄａｈｄｇｅｆｉｉｒｗｔｔｅｅｓ — ｅｏｉＴｏｉ；ｅｅｔｏｒｅｃｒｔｅｈｗｄｈＴａｍｘｐｔｎａｄａｉｅｅｏｓｌｉｉｈｈｒｓｉｅｕｎｒｅｈｒｕｓｆｏｉｅｎｓｕｕａｄｅｏｉｎｈ曲ｒｍａｔｈｅｐｍｙ
似。生物信息学分析结果说明，鸭瘟病毒蛋白具有疱疹病毒胸苷激酶的活性， Ⅸ 鸭瘟病毒７Ｋ基因可能为鸭瘟病毒的非必需毒力基因。关键词鸭瘟病毒；Ｋ基因；Ｋ蛋白；ＴＴ结构；功能；生物信息学分析
Ｑ７文献标识码Ａ文章编号０１ — ６ｌ２∞）ｌ０９５０５７６ｌ（Ｏ３一９３ — ２中图分类号
７０７；．３００３甘肃省临洮县畜牧兽医局，甘肃Ｉ７００）临洮３５０
摘要
运用生物信息学方法，对鸭瘟病毒基因的基本元件和Ｋ蛋白的理化性质、Ｔ结构、能进行分析。明确了功

鸭瘟病毒强毒感染鸭肠道菌群的分子解析

鸭瘟病毒强毒感染鸭肠道菌群的分子解析杨晓燕;程安春;汪铭书;齐雪峰;丁轲;陈孝跃【期刊名称】《黑龙江畜牧兽医》【年(卷),期】2009()7【摘要】应用ERIC—PCR法对鸭瘟病毒强毒株经皮下和口服感染20日龄鸭的十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠中细菌菌群的结构多样性和动态变化进行了检测。

结果表明：对照鸭肠道内的菌群结构相对稳定，其中十二指肠和空肠的ERIC—PCR条带最少，盲肠最多；皮下感染24h和口服48h前，各肠段ERIC—PCR扩增条带没有明显变化，皮下感染48h的鸭盲肠、口服感染72h的鸭盲肠和回肠条带数量明显增加，随着感染时间的延长，条带数呈逐渐减少的趋势，死亡鸭各肠段的条带最少。

对ERIC—PCR扩增条带中主带的测序结果表明，大肠杆菌、志贺菌、沙门杆菌等需氧菌或兼性厌氧菌成为皮下感染鸭的直肠、口服感染鸭的盲肠（回肠和直肠）的优势菌群；口服感染鸭的回肠中一个未知菌成为优势菌群。

【总页数】4页(P13-16)【关键词】ERIC—PCR;鸭瘟病毒感染鸭;肠道菌群结构【作者】杨晓燕;程安春;汪铭书;齐雪峰;丁轲;陈孝跃【作者单位】四川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心,四川雅安625014;动物疾病与人类健康四川省重点实验室,四川雅安625014;大理学院生命科学与化学学院,云南大理671000;西北农林科技大学动物医学院,陕西杨凌712100【正文语种】中文【中图分类】S858.32【相关文献】1.鸭α-干扰素基因疫苗肌肉注射免疫鸭抗鸭瘟强毒感染的研究 [J], 周雪;程安春;汪铭书;杨梅;段坤;卢菲;程志萍;刘闯2.鸭瘟强毒人工感染雏鸭的显微和超微病理学变化 [J], 刘忠伟;杨颖;江楠;罗乐;文明3.鸭瘟弱毒疫苗早期免疫的研究：雏鸭早期免疫与人工感染鸭瘟病毒的... [J], 谭诗文;范存军4.鸭肠炎病毒感染对鸭肠道菌群多样性的影响 [J], 杨霞;蒲翠敏;胡安东;张飘;杨颖;程振涛;文明5.基因枪轰击注射鸭α-干扰素基因疫苗对免疫鸭抗鸭瘟强毒感染的影响 [J], 周雪;程安春;汪铭书;杨梅;段坤;卢菲;程志萍;刘闯;陈孝跃;陈斌因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

鸭疫里氏杆菌分子生物学研究进展

（．林农业大学动物科技学院，林长春１０１；．林省敦化市牧业管理局，林敦化１３０）１吉吉３１８２吉吉３７０
摘要：疫里氏杆菌（ｉｍｅｅｌｎｔｅｔｒＲ感染是当前严重危害养鸭业的主要传染病之鸭Ｒｅｒｌａａｉｓ，Ａ）ａｐｉ
胶内酶解和肽质量指纹图谱分析，ｗ１为热休克蛋白Ｈｓ２ｐ０家族成员，、３为转座酶，Ｗ２Ｗ推测它们可能与里氏杆菌的毒力密切相关。
２耐药相关因子的研究
细菌耐药性的产生机制分为自发性基因突变和耐药基因掺人，细菌耐药基因不仅由其染色体携带，还常由染色体外的质粒、座子（ｒｎｐｓｎＴｎ或转ｔａｓｏｏ，）
２３基因盒一合子系统．整
蔡秀磊口］用ＰＲ技术对鸭疫里氏杆菌浙江应Ｃ上研究该菌耐药性产生与传播机制。整合子可变区
扩增得到两种大小不同基因盒，长度分别为１０８４
ｂ（ｎ— 和２３２ｂ（ｎ— ）ＩＩ中含有一个耐ｐＩＩＡ）５ｐＩＩ。ｎ— ＢＡ
白质与毒力有关，并且证明ＶａＤ１列仅存在于含ｐ序质粒的Ｒ菌株中。ＷｅｇＳＣ等Ｌ从大小为Ａｎ４］
５６ｋ的质粒ｐＦ２中发现一个插入序列元件Ｉ — ．ｂＣＣＳ
Ｒｌ为编码毒力相关类蛋白基因，且为首次在革ａ，并

鸭瘟病毒UL36基因的生物信息分析

基金项目：内江职业技术学院 2019 年度院级教科研课题立项项目“内职院 [2019]129 号”编号 NZ2019D06。
作者简介：戴碧红（1988—），女，讲师，硕士研究生，研究方向：动物生物制品。
2.2 信号肽与跨膜区预测结果显示，该编码蛋白存在信号肽切割位点概率 0.0032；存
在跨膜区概率几乎为 0。 2.3 亚细胞定位
Poultry [M].14th Edition.New Jersey：John Wiley and Sons，2019： 446-497. [2] King A，Lefkowitz E，Adams MJ.Virus taxonomy：ninth report of the international committee on taxonomy of viruses[M].San Diego： Elsevier Academic Press，2011：1221-1234. [3] Thomas C Mettenleiter.Herpesvirus assembly and egress[J].Journal of Virology，2002，76（4）：1537-1547. [4] Newcomb W，Brown J.Time-Dependent Transformation of the Herpesvirus Tegument[J].Journal of Virology，2009，83（16）： 8082-8089. [5] 郑斌，詹希美.信号肽序列及其在蛋白质表达中的应用[J].生物技术通讯，2005，16（3）：296-298. [6] 邱建丁，梁汝萍，谭学才，等.膜蛋白跨膜区段的预测分析[J].高等学校化学学报，2004，25（5）：831-836.
DPV UL36 基因，GenBank 登录号为 EU422985；DPV UL36 编码蛋白，GenBank 登录号为 ABZ81707。 1.2 分析软件及方法

鸭瘟病毒分子生物学探讨

料,每天饲喂次数由2~3次增至3~4次,即夜间加喂一餐,能提高日采食量30%左右。

每天至少清洗食槽一次,于中午11时下班前,把早上未吃完料清出,料槽加满清水,母猪能得到充足饮水或戏水,下一餐先清洗食槽再喂食,可收到十分满意的效果。

(3)夏季在每吨哺乳母猪料中添加200~500g维生素C和200g维生素E或添加碳酸氢钠250g或吡啶酸铬300mg,都能增强母猪抗热应激能力,提高母猪免疫力。

2)降低产后“三联症”的发生概率,把好分娩母猪产前、产中、产后护理关。

(1)产前护理:在妊娠期要控制好母猪体况保持在2.5~3.5分(5分制计分法)。

上产床时间适当比其他季节推迟3d左右。

进产房前应做好产房消毒和母猪体表的清洗和消毒。

(2)产中护理:加强对分娩母猪的护理和观察,做好乳房和外阴的清洁、消毒。

在仔猪产出2~3头后可对分娩母猪实施输液保健,每头母猪至少输5%葡萄糖生理盐水1500mL并加入甲硝唑100mL、缩宫素20单位以防产后感染。

(3)产后护理:观察分娩后母猪体温变化情况,注意有无胎衣残留,恶露有无排尽,是否发生便秘等异常情况,对症治疗。

3)夏季应防止热应激造成分娩母猪的各项生理指标异常,减少因猪呼吸道疾病的发生和胃肠机能紊乱而造成的死亡率升高。

必须为分娩母猪提供舒适的环境才能有效降低母猪死亡率。

总之,夏季分娩母猪面对挑战的主要应对措施是千方百计地做好分娩舍降温工作,消除或减轻分娩母猪的热应激,既可以预防产后“三联症”,又可以控制猪场呼吸道和消化道急性疾病引发的突发死亡,从而提升猪群的健康水平,提高母猪的繁殖成绩。

1鸭瘟概况鸭瘟(Duck plague,DP),是由鸭肠炎病毒(Duck enteritis virus,DEV)引起的鸭、鹅及多种雁形目动物的一种急性、热性、败血性传染病。

具有流行广泛、传播迅速、发病率和死亡率高的特征[1]。

1923年,Baudet 首次在荷兰报道,之后在法国、美国、印度等国家流行[2-3]。

鸭瘟病毒UL30基因原核表达及在鸭胚成纤维细胞内的定位的开题报告

鸭瘟病毒UL30基因原核表达及在鸭胚成纤维细胞内
的定位的开题报告
本开题报告通过对鸭瘟病毒UL30基因进行分析，探讨了该基因的原核表达及在鸭胚成纤维细胞内的定位。

以下是详细内容：
研究背景：
鸭瘟病是一种由鸭瘟病毒引起的疾病，主要危害鸭、鹅等禽类。

鸭
瘟病毒的基因组由双链DNA组成，其中UL30基因编码的是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。

该基因与病毒的DNA合成过程密切相关，并可能在病
毒复制中起到关键作用。

研究内容：
本研究旨在探讨鸭瘟病毒UL30基因在原核表达及在鸭胚成纤维细胞内的定位情况。

首先，通过PCR扩增鸭瘟病毒UL30基因，并克隆到原核表达质粒内。

随后，将该质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中，利用IPTG诱导表达。

通过SDS-PAGE和Western blot分析合成的重组蛋白，探讨UL30基因的原核表达情况及其表达水平。

其次，在鸭胚成纤维细胞中，利用免疫荧光技术探讨UL30基因的定位情况。

通过将UL30基因与荧光标记融合，将其转染到鸭胚成纤维细胞中。

通过荧光显微镜观察细胞中荧光标记的分布情况，以推测UL30基因的定位情况。

研究意义：
本研究通过对鸭瘟病毒UL30基因的原核表达及在鸭胚成纤维细胞内的定位探究，可为后续研究鸭瘟病毒重要基因的功能提供基础支持，并
为鸭瘟病疫苗的研究与开发提供理论支持。

鸭瘟综述-徐晓娟

鸭瘟病毒研究进展徐晓娟1综述郭霄峰1 XXX2 审阅（1华南农业大学兽医学院，广东广州510642；2广州格雷特生物科技有限公司，广东广州）鸭瘟（Duck plague, DP），又名鸭病毒性肠炎（（Duck virus enteritis, DVE），是鸭、鹅和其他雁形目禽类的急性、热性、败血性传染病，是目前对世界范围内水禽养殖业危害最为严重的疫病之一[1]。

该病已被国际兽疫局认定为B 类传染病，我国动物防疫法也将其列入二类动物疫病[2]。

荷兰学者Baudet[3]于1923 年首次发现该病后，其流行范围逐步扩大，相继在法国(1949)、美国(1950)、印度(1963)、比利时(1964)、英国1972)、泰国(1976) 和加拿大(1976)被发现。

1957 年，黄引贤在我国广州报道发现了鸭瘟。

1957～1965 年，本病广泛流行于我国南部、中部和东部的一些养鸭业较为发达的省市[4]，1983 年，廖德惠报道了四川省存在鸭瘟，并且分离到鸭瘟病毒。

至今，全国各地均有本病的报道。

目前，鸭瘟仍然是阻碍我国养鸭业发展的重要传染病之一。

1 鸭瘟病毒基本特性DP的病原是鸭瘟病毒（DPV），又名鸭病毒性肠炎病毒（DEV），属疱疹病毒科、疱疹病毒亚科，也称鸭疱疹病毒Ⅰ型( Duck hcrpcsivirusⅠ)[5]，是一种泛嗜性全身性感染的病毒。

DPV 为线性双链DNA病毒，成熟病毒粒子直径150～380nm，呈球形，有囊膜，在CsCl 中浮密度为1.272 g / ml，无血凝特性和血细胞吸附作用。

除有芯髓、衣壳、囊膜等常见结构外，在衣壳和囊膜间还有疱疹病毒所特有的皮层成分[6]。

，DPV 各毒株在毒力上存在差异，但在免疫学特性上却是相同的，迄今为止，只发现一种血清型。

该病毒对热、pH及脂溶剂（乙醚、氯仿等）均较敏感，56℃10 min 会丧失感染力，80℃5 min 即可死亡，在pH3和pH11的环境下也很快被灭活[7]。

鸭瘟病毒实验室检测方法研究进展

行．而且该病在一个大流行期后常呈地方性流
行，长期危害养鸭业．造成巨大的经济损失ｌ２因ｌ
的胚体出血、水肿，肝出血、坏死，部分绒毛尿囊膜上有灰白色坏死灶。若初代分离为阴性时．收获鸭胚绒毛尿囊膜均质化处理后盲传２４代可
简要综述．以期为病毒的进一步深入研究和疾病的有效防控提供参考１病毒分离与鉴定ＤＰＶ主要侵害免疫器官．病毒的分离一般采
用发病急性期或者死亡后的病鸭血液、肝脏、脾
（Ｄｕｃｋｖｉｒａｌｅｎｔｅｒｉｔｉｓ，ＤＶＥ）．是由疱疹病毒科的
制。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｕａｎｉｎｑｉｕ２Ｏ０３＠１６３．ｃｏｎｒ
瘟抗体的经典方法该试验主要采用固定血清／稀释病毒法．最常用的细胞为ＤＥＦ。Ｗｏｌｆ等（１９７４）
２０１５．２
合攻毒保护试验或电镜观察及血清学诊断加以确诊。低毒力或非致病毒株可能不引起临床症状．此时应检测存活鸭体内抗体水平２血清学方法
２．１血清中和试验（ＮＴ）ＮＴ是被公认的检测鸭
水禽世界
综
述
２Ｏ１５．２
鸭痘病考雾验室检测方珐研究递展