丽春红染色液使用说明书
改良Van Gieson 丽春红S染色液使用说明
545ml
90ml
450ml
RT,避光
临用前,按 A:B=1:9 混合,即为改良 VG 染色液,即配即用。
产品说明: 胶原纤维(Collagen Fiber)是结缔组织中分布最广含量最多的一种纤维,广泛分布于各种脏 器,其中皮肤、巩膜、肌腱最丰富。Van Gieson 胶原纤维染色原理与阴离子染料分子的大 小和组织的渗透有关。分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的 组织,而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。PA 分子量小,丽春红和复红 次之,淡绿分子量最大。改良 VG 染色后,肌纤维呈黄色,胶原纤维呈红色。 本产品用于区分胶原纤维和肌纤维,鉴别组织器官的损失、硬化,鉴别肿瘤组织等实验。 染 色后胶原纤维呈鲜红色,肌纤维、神经胶质细胞胞质和红细胞呈黄色。 使用方法:
1、 切片常规脱蜡复水。 2、 苏木素染核(可选)。 3、 使用改良 VG 染色液染色 0.5-3min。
4、 弃染液,直接用 95%酒精液急速分化约数秒钟。 5、 无水乙醇脱水,二甲苯透明,封片,观察拍照。 染色结果:
胶原纤维
红色
肌纤维、神经胶质细胞胞质及红细胞
黄色
注意事项: 1. 试剂要现配现用,不可预先配制后放置,放置后会失去染色力。 2. 改良 VG 染色液的染色时间不宜过长,一般 1min 左右,可根据实验结果适当调整, 出现鲜红色为最佳。 3. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
改良 Van Gieson 丽春红 S 染色液使用说明 货号:G1338 规格:50 ml /100 ml /500ml 保存:室温密闭保存,有效期一年 产品组成:
名称
规格
50ml
100ml
丽春红染色液的配制及使用
丽春红染色液的配制及使用丽春红(PONCEAUS)是一种广泛用于生物化学和分子生物学实验中的缺陷染料,主要用于染色蛋白质凝胶和膜,也可用于检测核酸电泳结果。
下面将介绍丽春红染色液的配制方法和使用注意事项,并附上一些相关实验技巧。
配制丽春红染色液:材料:-丽春红染料粉末-乙醇-蒸馏水或去离子水步骤:1.称取适量的丽春红染料粉末并置于一个干燥的玻璃容器中。
建议根据实验需要确定染色液的浓度,通常可选用0.2-0.5%浓度的丽春红溶液。
2.用乙醇溶解染料粉末,可以先加入适量的乙醇湿润染料,再加入足够量的乙醇溶解。
溶解过程中可以用玻璃棒或磁力搅拌器轻轻搅拌。
3.在染料完全溶解后,加入足够的蒸馏水或去离子水将体积稀释至所需的终浓度。
4.最后,用滤纸或滤膜过滤染色液以去除悬浮物。
使用丽春红染色液的注意事项:1.染色前,确保蛋白质凝胶或膜已完成电泳,否则染色效果可能不佳。
2.准备一个干燥的容器,并将蛋白质凝胶或膜放入其中。
3.用足够的丽春红染色液完全浸泡蛋白质凝胶或膜,充分均匀搅拌,以确保染色效果均匀。
4.染色时间通常为10-30分钟,但染色时间应根据染料浓度和样品特性进行优化。
过长或过短的染色时间都可能对结果产生不良影响。
5.染色后,用蒸馏水或去离子水彻底洗涤蛋白质凝胶或膜,直至染色液中没有可见染料残留为止。
6.最后,可将染色后的蛋白质凝胶或膜进行成像或进一步处理。
一些相关实验技巧:1.在染色前,对蛋白质凝胶或膜进行固定可以提高染色效果和染色均匀性。
2.染色液中的染料浓度和染色时间可根据实验需求进行优化和调整。
3.若需要去除丽春红染色液残留在蛋白质凝胶或膜上的染色产品,可尝试用去离子水或含有10%乙酸溶液进行洗涤。
4.染色后的蛋白质凝胶或膜应避免长时间曝露在光线下,以免染色产品褪色。
丽春红染色液的配制及使用
丽春红染色液的配制及使用一、丽春红染色液的配制:1.原料准备:-丽春红色素-醋酸-纯水-pH试纸-温度计-搅拌器2.配方示例:-丽春红色素:5克-醋酸:10毫升-纯水:90毫升3.配制步骤:a.先将纯水倒入容器中,加热至60℃左右。
b.将丽春红色素加入容器中,并用搅拌器搅拌均匀。
c.逐渐加入醋酸,并继续搅拌,直至溶解均匀。
d.使用pH试纸检测液体的酸碱度,保持在3-4之间。
e.最后,用纯水调整液体体积至所需的量,继续搅拌均匀。
二、丽春红染色液的使用:1.准备工作:-预先将要染色的物品进行清洗,确保表面没有杂质。
-准备好必要的工具,如刷子、喷枪、刮板等。
-确定好染色的时间和环境,保持通风良好。
2.染色操作:a.首先,将丽春红染色液倒入适量的容器中。
b.根据染色需要,可以选择直接刷涂、喷涂或浸泡等方式。
c.涂抹均匀后,根据需要可以用刮板将涂料刮平整。
d.将染色物品置于通风处晾晒,使染色液充分渗透并固化。
e.固化时间一般需要24小时左右,具体时间根据染色物品材质而定。
f.染色固化完成后,用清水进行彻底冲洗,确保染色液彻底清洗掉。
g.最后,将染色物品晾干或进行必要的后处理,如烘干、氧化等。
三、注意事项:1.配制过程中要注意个人安全,避免将液体接触到皮肤或眼睛,如有接触应立即用清水冲洗。
2.染色液使用过程中要保持通风良好,避免吸入有害气体。
3.不同的材质有可能对染色效果产生影响,建议事先进行小样测试。
4.在使用过程中要避免交叉染色,对不同颜色的物品要分别处理。
5.染色液固化后会形成不可撤销的颜色,使用者需谨慎操作,避免不必要的损失。
WB试验常见问题解答
[1]各位朋友:请教关于SDS-PAGE的问题。
我的配胶体系如下:15%分离胶 4%浓缩胶水 2.3ml 2.7ml30%丙烯酰胺 5.0ml 0.67mlTris-HCL PH8.8 2.5ml PH6.8 0.5ml10%SDS 0.1ml 0.04ml10%APS 0.1ml 0.04mlTEMED 0.004ml 0.004ml我的蛋白分子量是11kd,浓缩胶60V,40min,分离胶90V,70min。
跑胶时总是跑不直,呈抛物线型,请问是什么原因?我的试剂都是新配置的。
谢谢!!!答:【1】胶的配制方法;配制不同体积15%胶 SDS-PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升)15%胶 (毫升) : 5 -- 10 --15-- 20-- 30-- 50蒸馏水: 0.5 -- 1.0-- 1.5 -- 2.0 -- 3.0 --5.030%Acr-Bis(29:1): 2.5 -- 5.0 -- 7.5 -- 10.0 -- 15.0-- 25.01M Tris, pH8.8: 1.9-- 3.8 -- 5.7-- 7.6-- 11.4 -- 19.010%SDS :0.05-- 0.1-- 0.15 -- 0.2-- 0.3-- 0.510%过硫酸铵: 0.05 -- 0.1 --0.15-- 0.2 -- 0.3 -- 0.5TEMED: 0.002-- 0.004 -- 0.006 -- 0.008 -- 0.012 -- 0.02配制不同体积4%胶 SDS-PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升)4%浓缩胶(两块胶,5ml)超纯水: 3.16ml40%Acr/Bic(37.5:1): 0.5ml0.5 mol/L Tris•HCl(pH6.8): 1.26ml10%SDS : 50 微升μ微升μ10%AP(过硫酸胺): 25TEMED : 5 微升μ加TEMED后,立即混匀即可灌胶。
【2】注意玻璃板一定要洗干净,这一点比较重要。
GENMED 丽春红染色溶液产品说明书
GENMED SCIENTIFICS INC. U.S.A GMS12202 v.A GENMED丽春红染色溶液产品说明书(中文版)主要用途GENMED丽春红红染色溶液是一种旨在通过使用显色染料丽春红(Ponceau S)与蛋白质氨基基团的结合并显示红色蛋白条带,快速、敏感、可逆地检测在聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)、PVDF膜、硝酸纤维素膜(Nitrocellulose membrane;NC)、醋酸纤维素膜(cellulose acetate)上的蛋白成分的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
适用于蛋白凝胶电泳和WESTERN BLOT 印迹膜的蛋白检测。
产品即到即用,性能长期稳定,着色清晰灵敏,可检测250纳克以上的蛋白。
技术背景丽春红染色剂(Ponceau S)是一种水溶性的阴离子重氮染料,由重氮氨基偶氮苯二磺酸(diazotized4-amino-1,1’-azobenzene-3,4’-disulfonic acid; Acid Yellow 9)和萘酚二磺酸(2-naphthol- 3,6-disulfonic acid;R acid)耦合到四钠盐上。
其分子式为C22H12N4Na4O13S4,分子量为760.6。
最大吸收光谱为520nm波长。
带负电荷的丽春红分子与正电荷的蛋白质氨基基团结合,也可以非共价键形式与蛋白质非极性区域结合。
产品内容GENMED染色液(Reagent A)30毫升产品说明书1份保存方式保存GENMED染色液(Reagent A)在室温下,避免光照,有效保证6月用户自备染色塑料盒:用于纤维膜蛋白印迹染色的容器实验提示方法一、醋酸纤维素膜染色实验开始前,完成蛋白质电泳和转印。
然后进行下列操作。
1.将含有蛋白的醋酸纤维膜置于染色塑料盒里2.小心加入适量的( 毫升/平方厘米)的GENMED染色液(Reagent A),覆盖膜表面3.室温下,孵育5分钟,避免光照4.继续后续酸化、固定、清理处理(注意:建议使用GENMED蛋白质转印印迹膜丽春红(Ponceau S)染色试剂盒-GMS30081)方法二:PVDF膜或硝酸纤维素膜染色实验开始前,完成蛋白质电泳和转印。
百度文库-Masson染色液说明书
广州市外显子生物技术有限公司Http//Masson染色液说明书货号:S-1518规格:20ml产品组成:名称规格保存Weigert铁苏木素A液20ml RT避光Weigert铁苏木素B液20ml RT避光丽春红酸性品红染液20ml 2-4℃低温环境磷钼酸溶液20ml 2-4℃低温环境苯胺蓝染液20ml 2-4℃低温环境盐酸酒精分化液1%冰醋酸溶液20ml 2-4℃低温环境20ml 2-4℃低温环境简介:利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色,与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关,根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来。
储存条件:本试剂盒应贮存于2-4℃低温环境。
有效期:原包装未开封试剂有效期为12 个月,在有效期内的已开封试剂应在开封后 6 个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
操作步骤:1.切片脱蜡至水。
2.Weigert铁苏木素使用前Weigert铁苏木素A、B 液等比例混合。
染10-20分钟,流水稍洗。
3.盐酸酒精分化,流水冲洗数分钟。
4.丽春红酸性品红染液染5-10分钟,蒸馏水稍冲洗。
5.磷钼酸溶液处理约5分钟,去掉溶液,不用水洗,直接用苯胺蓝染液复染5分钟。
6.1%冰醋酸处理1分钟,95%酒精脱水。
7.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树脂封固。
注意事项:1.Weigert铁苏木素分A、B两液,应于临用前将两液等份混合使用,而不宜预先混合,否则容易氧化沉淀而逐渐失去染色力。
2.磷钼酸处理时可在镜下控制,见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。
染色结果:骨组织×200 结果判定:胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色,弹力纤维呈棕色,肌纤维、纤维素和红细胞染红色,细胞核染蓝黑色。
Masson三色染色操作规程
Masson染色,操作规程实验目的: Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一实验原理:Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。
孔隙的大小,决定了组织的渗透性。
如孔隙小,组织结构致密,渗透性低;孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。
如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。
由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.而染料分子的大小,主要由其分子量来体现。
小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。
一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。
试剂仪器:Harris 氏苏木精:苏木精0.4g,硫酸铝钾6g,黄色氧化汞0.16g,蒸馏水80ml。
将蒸馏水预热,预热过程中加入硫酸铝钾,沸腾后拔下电源,加入苏木精,接通电源再度沸腾后,拔掉电源,缓慢加入氧化汞,搅拌混匀,冷却后第二天加入5%比例的冰醋酸即可用。
透明玻璃瓶装缓慢氧化可省略冰醋酸,长期有效。
Masson丽春红酸性复红液:丽春红0.7g,酸性复红0.3g,蒸馏水99ml,冰醋酸1ml。
1%冰醋酸水溶液:冰醋酸1 ml,蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液:磷钼酸1g,蒸馏水100 ml。
1%苯胺蓝水溶液:苯胺蓝1g,蒸馏水100 ml,冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液:光绿 1g,蒸馏水100 ml实验操作程序:1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀(甲醛固定的组织此步可略)。
丽春红染色步骤
丽春红染色步骤
以丽春红染色步骤为标题,写一篇文章,要求符合标题内容
丽春红染色是一种常见的染发方法,可以让头发变得更加美丽。
下面是丽春红染色的步骤:
1. 准备工作
在染发前,需要准备好染发剂、手套、毛巾、梳子等工具。
同时,还需要注意保护头发,可以在染发前涂上一些护发素,以免头发受损。
2. 染发剂的调配
将染发剂倒入染发盒中,按照说明书上的比例加入氧化剂,然后用梳子将染发剂和氧化剂充分混合。
3. 涂抹染发剂
戴上手套,将染发剂均匀地涂抹在头发上,注意不要漏掉任何一处。
如果需要染整个头发,可以从头顶开始涂抹,然后逐渐向下涂抹。
4. 等待时间
根据染发剂的说明书,等待一定的时间,让染发剂充分渗透到头发中。
一般来说,等待时间为20-30分钟。
5. 清洗头发
等待时间结束后,用温水将头发彻底清洗干净,直到水变得清澈为止。
然后用毛巾轻轻擦干头发。
6. 定型
染发后,可以使用定型产品,让头发更加美丽。
可以使用发蜡、发胶等产品,根据自己的喜好选择。
以上就是丽春红染色的步骤,希望对大家有所帮助。
在染发过程中,一定要注意保护头发,避免头发受损。
同时,也要注意染发剂的质量,选择正规的品牌,以免对身体造成伤害。
考马斯亮蓝染色及丽春红染色操作规程
考马斯亮蓝染色及丽春红染色操作规程附录7:考马斯亮蓝染色及丽春红染色操作规程
1. 考马斯亮蓝染色
1.1 染色液配制
醋酸脱色液。
5%(V/V)甲醇,7%(V/V)醋酸,88%HO。
2
固定液。
50%(V/V)甲醇,10%(V/V)冰醋酸,40%HO。
2
考马斯亮蓝染液。
50%(V/V)甲醇,0.05%(V/V)考马斯亮蓝,10%(V/V)冰醋酸,40%HO。
2
1.2.实验步骤
将胶条置于固定液中,摇床固定1 h;? 倒掉固定液,加考马斯亮蓝染液染色2 h;?去离子水漂洗1-2次,脱色液漂洗1次;? 脱色液中脱色1 h,最后置于去离子水中。
2. 丽春红染色
2.1. 染色液配制
10×丽春红染液
丽春红S 2g
三氯乙酸 30g
磺基水杨酸 30g
加蒸馏水至 100ml。
使用时将其稀释10倍,即为应用液。
2.2. 实验步骤转膜完成后,取出膜在甲醇里泡1分钟;?将膜于双蒸水中漂洗数次后,浸入丽春红染液着色;? 室温下,于摇床上轻摇5-30 min;? 将染好的膜置于双蒸水中漂洗数次,不要洗的太久,只需把表面的丽春红洗掉即可,此时可看到红色的蛋白条带。
P0022丽春红染色液
丽春红染色液产品简介:丽春红(Ponceau S)染色液可以用于PVDF膜、硝酸纤维素膜(nitrocellulose membrane)和醋酸纤维素膜(cellulose acetate membrane)上的蛋白的检测。
丽春红带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合,从而形成红色的条带。
丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS或其它适当溶液洗去。
本试剂盒使用方便,本底低,灵敏度较高,对蛋白的检测下限是250纳克。
保存条件:室温保存,一年有效。
注意事项:丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:1.将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中,摇动3-5分钟或更长时间,直至出现清晰条带。
对结果作适当记录。
2.用蒸馏水,PBS或其它适当溶液漂洗2-3次,每次3-5分钟,去除丽春红,进行后续的Western检测。
使用本产品的文献:1. Wang C, Xie H, Liu X, Qin Q, Wu X, Liu H, Liu C.Role of nuclear factor-κB in volatile anaesthetic preconditioning with sevoflurane during myocardial ischaemia/reperfusion.Eur J Anaesthesiol. 2010 Aug;27(8):747-56.2. Wu Y, Feng W, Zhang H, Li S, Wang D, Pan X, Hu S.Ca2+-regulatory proteins in cardiomyocytes from the right ventricle in children with congenitalheart disease.J Transl Med. 2012 Apr 2;10:67.3. Jiang X, Ge H, Zhou C, Chai X, Deng H.The role of transforming growth factor β1 in fractional laser resurfacing with a carbon dioxide laser.Lasers Med Sci. 2013 Jul 3.4. Wang X, Lin H, Sui J, Cao L.The effect of fish matrix on the enzyme-linked immunosorbent assay of antibiotics.J Sci Food Agric. 2013 May;93(7):1603-9. doi: 10.1002/jsfa.5931. Epub 2012 Nov 14.5. Wang HJ, Tan YZ.Methods for assessing effects of Wnt/β-catenin signaling in senescence of mesenchymal stem cells.Methods Mol Biol. 2013;976:111-30. doi: 10.1007/978-1-62703-317-6_9.6. Xie H, Liu X, Wang C, Zhu J, Yang C, Liu C, Liu H, Wu X.The changes of technetium-99m-labeled annexin-V in delayed anesthetic preconditioning during myocardial ischemia/reperfusion.Mol Biol Rep. 2014 Jan;41(1):131-7. doi: 10.1007/s11033-013-2845-3. Epub 2013 Nov 6.。
钌红染色液
钌红染色液
简介:
钌红(Ruthenium Red)分子式为 Ru3O2Cl6.14(NH3),CAS 号为 11103-72-3,分子 量为 786.35,外观为红色晶体,可用做电压敏感的钙离子通道抑制剂。Leagene 钌红染色
液 在植物病虫害组织切品染色中,可将宿主植物组织中菌丝体和孢子染成红色。本试剂仅用 于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
有效期: 12 个月有效。
相关:
编号 DB0082 DG0005 DH0006 DJ0001 DM0002 PW0053 TO1013
名称 改良番红 O-固绿软骨染色液 糖原 PAS 染色液 苏木素伊红(HE)染色液 普鲁士蓝染色液(核固红法) 姬姆萨染色液(1:9) Western 抗体洗脱液(碱性) 丙二醛(MDA)检测试剂盒(TBA 比色法)
组成:
名称 钌红染色液 使用说明书
编号 DM0201 Storage
10ml RT 避光 1分
操作步骤(仅供参考):
1、 制备好的切片入钌红染色液中,浸染 1-3min。 2、 对于较难染色的样本,应适当延长染色时间。
染色结果:
菌丝体和孢子ຫໍສະໝຸດ 红色注意事项:1、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
丽春红染色液说明书
北京普利莱基因技术有限公司 电话:************,62053186 Email:***********************Applygen Technologies Inc. DocRev: 201910 Page 1 of 1 丽春红染色液 (Membrane Staining Solution) P1600描述:SDS-PAGE 电泳转膜后为快速检查蛋白是否成功转到膜上或需要将膜上的不同泳道剪切下来,可把膜浸入可逆染色液染色,膜上的蛋白条带将被染成红色,过程完全可逆而且不会影响Western Blot 后续操作。
用水冲洗或直接将染色的膜放入封闭液即可完全洗去膜上的染色。
染色溶液可以回收并反复使用。
适用:硝酸纤维素膜和PVDF 膜的蛋白可逆染色。
储存:室温保存 12个月有效操作步骤:1. 完成蛋白转膜后,将膜完全浸入足量的染色液中,室温孵育2-5分钟,更长的时间并不能明显加深染色。
2.用自来水或蒸馏水快速清洗膜2-3次或用连续水流冲洗,直到膜上红色蛋白条带逐渐显现(期间要仔细进行观察)。
继续冲洗,染色将快速消退。
3. 根据蛋白染色条带,检查蛋白是否成功转到膜上。
用铅笔或圆珠笔对相应的蛋白位置做标记后,可将膜上的不同泳道安全剪切下来。
4. 染色的膜无须进一步处理,可直接进行Western Blot 封闭步骤。
此时封闭液可能变红,但不影响后续操作。
说明:1. 冲洗不足或将导致蛋白条带染色与膜背景的反差小,不易观察;冲洗过度将洗去膜上的染料,使蛋白条带过分退色,此时可加入膜染色液,重新进行染色。
2. 由于染色试剂的可逆性质,膜上的蛋白条带将会退色。
膜上轻微染色不影响后续免疫实验。
3. 染色液可以回收并反复使用10次以上,但反复回收将使染液效力降低。
安全性:无特殊毒性,有刺激性。
按一般化学品操作规程处理即可。
染色剂使用方法
使用染色剂时,可以参考以下步骤:
1. 浸泡:将需要染色的物品放入染色液中浸泡,时间根据染色物品材质和染色剂种类而定,通常需要30分钟至几个小时。
浸泡时间过长容易导致染色过度,颜色过深。
2. 洗涤:浸泡时间结束后,将物品取出并用清水洗净,直到水清为止。
同时应该注意不要过于搅拌,以免色素掉落。
3. 定色:经过洗涤后,需要将染色物品进行定色。
使用方法是将定色剂倒入水中,将染色物品放入液中浸泡一段时间,将染色剂固定在物品上。
定色剂的种类也因染料种类而异,需根据具体情况选择定色剂。
此外,在使用染色剂时,需要注意一些常见错误使用方法及解决方法。
例如,染色结果不均匀、染色剂流失、洗涤不彻底和定色时间不足等问题。
针对这些问题,可以采取相应的解决方法,例如在浸泡前先将物品用清水浸泡10-15分钟、使用专业染色剂、使用大量清水多次换水直到水变清、确保染色剂能充分固定在物品上等。
总的来说,使用染色剂需要按照正确的步骤进行操作,注意细节和技巧,以保证染色效果良好。
常用弹力纤维染色方法
常用弹力纤维染色方法显示弹性、胶原纤维的双重组合染色法【试剂配制】(1)维多利亚蓝染色液维多利亚蓝(Victoria blue)2g糊精0.5g间苯二酚4g蒸馏水200ml 将上述物质混合后加热煮沸,边煮边搅拌,约5min。
然后用另一容器取30%三氯化铁水溶液25ml,另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中,继续煮沸3min,不断搅拌溶液呈胶体状。
去火冷却过滤,将滤纸上的残渣连同滤纸放在60℃恒温箱中烤干。
残渣呈深蓝色细颗粒状粉末,再溶于400ml 的70%乙醇液中。
然后加浓盐酸4ml和苯酚5g,放置至成熟后使用。
(2)丽春红S染色液0.5%丽春红15ml苦味酸饱和水溶液(1.22%)85ml。
【染色方法】(1)中性甲醛液固定组织,石蜡切片,常规脱蜡至水。
(2)切片入70%乙醇中洗2分钟。
(3)将切片浸入盛有维多利亚蓝液中染0.5~2小时。
(4)直接入95%乙醇中分色数秒钟。
(5)浸入蒸馏水洗2分钟。
(6)用丽春红S液滴染切片5分钟。
(7)直接用无水乙醇冲洗多余染色液2次。
(8)将切片在空气中或冷风干燥。
(9)二甲苯透明,中性树胶封固。
【结果】弹性纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景呈淡黄色。
【注意事项】(1)维多利亚蓝液可每次反复使用效果不减,溶液在室温中保存可用数年,染色时还可以缩短时间。
(1)维多利亚蓝液在乙醇中分色后,要立即浸入水中,此后在镜下观察纤维的深浅度,如果较深可以再分色。
丽春红液染色后要用无水乙醇从切片一端快速冲洗,并将切片斜放,稍干燥即透明封固,防止过于干燥使切片产生黑色颗粒。
WB试验常见问题解答
[1]各位朋友:请教关于SDS—PAGE的问题。
我的配胶体系如下:15%分离胶4%浓缩胶水2.3ml2.7ml30%丙烯酰胺5。
0ml 0。
67mlTris—HCL PH8。
8 2。
5ml PH6.8 0.5ml10%SDS 0.1ml 0。
04ml10%APS 0。
1ml 0.04ml TEMED 0。
004ml 0.004ml 我的蛋白分子量是11kd,浓缩胶60V,40min,分离胶90V,70min.跑胶时总是跑不直,呈抛物线型,请问是什么原因?我的试剂都是新配置的。
谢谢!!!答:【1】胶的配制方法;配制不同体积15%胶SDS—PAGE分离胶所需各成分的体积(毫升) 15%胶(毫升): 5 --10 --15--20--30--50 蒸馏水: 0。
5 -- 1.0-- 1.5 -- 2.0 --3。
0 --5.0 30%Acr-Bis(29:1): 2。
5 --5。
0 --7.5 --10。
0 --15。
0--25.0 1M Tris, pH8。
8: 1.9--3。
8 --5.7--7.6--11。
4 --19。
0 10%SDS :0。
05--0.1--0。
15 --0.2--0。
3--0.5 10%过硫酸铵:0.05 --0.1 --0.15--0。
2 --0.3 --0.5 TEMED:0。
002--0.004 --0。
006 --0。
008 --0.012 --0.02 配制不同体积4%胶SDS—PAGE浓缩胶所需各成分的体积(毫升) 4%浓缩胶(两块胶,5ml)超纯水: 3.16ml40%Acr/Bic(37。
5:1): 0。
5ml0。
5 mol/L Tris•HCl(pH6.8):1.26ml10%SDS :50 微升μ微升μ10%AP(过硫酸胺):25 TEMED :5 微升μ加TEMED后,立即混匀即可灌胶.【2】注意玻璃板一定要洗干净,这一点比较重要.如果玻璃板洗不干净,很容易造成楼主所说的现象。
丽春红染色液安全操作及保养规程
丽春红染色液安全操作及保养规程在日常生活中,我们经常会使用丽春红染色液进行染发操作,但是如果操作不当或者没有保养好相关设备,就会给大家带来一定的安全隐患和健康风险。
因此,为了确保您的使用安全和设备健康,本文将介绍丽春红染色液的安全操作和保养规程。
一、安全注意事项在使用丽春红染色液进行染发操作时,需要注意以下事项:1. 带手套操作染发液具有腐蚀性,所以在进行搅拌、涂抹等操作时必须戴手套。
手套要选用专业染发手套,避免染发液渗透手套侵害皮肤。
2. 避免触及皮肤和衣服染发液如果溅到皮肤、衣服上,容易引起皮肤刺激、染囊肿、毛囊炎等健康问题。
使用染发液时,一定要注意避免溅到皮肤和衣服上。
3. 避免吸入染发液中的氨会释放出有机气体,在搅拌和涂抹的时候会有氨味。
过多吸入有机气体和氨气会导致头痛、晕厥等不适。
使用染发液时,一定要注意避免吸入气体,可以开窗通风或者戴口罩减少气味刺激。
4. 禁止进食染发液是一种化学物质,禁止口服或者误食。
如果不慎误食,应立即漱口或喝牛奶,然后尽快就医。
5. 儿童必须远离染发液对于儿童来说是一种高危化学品,儿童一定要与染发液保持距离,避免误食或者误触。
在开展染发操作时,最好将儿童安全送至外出活动,避免误入染发室。
二、设备保养规程除了操作人员本身的安全之外,设备的保养维护也不可忽视。
保持设备的清洁和正常维护,能够提高设备的使用寿命、减少操作失误和安全隐患。
1. 保持设备的清洁染发室、染发椅、染发盆等设备要保持清洁,避免染发液、染发剂、皮屑等杂物积存影响设备卫生。
在使用完毕后,及时使用消毒液对设备进行消毒。
2. 经常润滑设备对于染发室内的床椅、水龙头、涂抹工具等机械设备,要经常进行润滑处理,减少磨损,增加设备的使用寿命。
如果设备存在噪音等问题,及时拨打设备维护热线进行处理。
3. 定期检查设备染发液、染发剂等化学品具有易挥发性、易挥散性、易泄漏等特点,在染发器具混合和喷涂的过程中容易滴漏或者挥发,因此在操作完毕后需要检查染发机等设备是否存在缺陷,及时维修。
masson三色染色液使用方法
Masson三色染色液说明书【产品名称】Masson三色染色液【包装规格】货号:DC0032套组包装规格:8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒【预期用途】主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】Masson三色染色又称马松染色,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法,所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织,苯胺蓝的分子量很大,染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】试剂组成主要成分1、Weigert铁苏木素A液苏木素2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁3、酸性乙醇分化液乙醇4、蓝化液碳酸盐5、丽春红品红染色液丽春红、品红6、乙酸溶液乙酸7、磷钼酸溶液磷钼酸8、苯胺蓝染色液苯胺蓝【储存条件及有效期】5℃~35℃保存,原包装未开封染色液的有效期为l8个月,在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完,每次用后应及时拧紧瓶盖,以免挥发或变质。
【样本要求】组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等,流水冲洗,常规脱水包埋;2、切片常规脱蜡至水;3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液,用Weigert铁苏木素染色液染色,流水稍洗;4、酸性乙醇分化液分化数秒,流水冲洗数分钟;5、蓝化液返蓝数秒,流水冲洗数分钟;6、丽春红品红染色液染色数分钟,流水稍冲洗;7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液,用乙酸工作液洗切片;8、磷钼酸溶液处理后,倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗);9、苯胺蓝染色液复染,倾去玻片上染色液(不用水洗);10、用乙酸工作液处理切片,至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制);11、95%乙醇迅速脱水,无水乙醇脱水数次后,二甲苯透明,中性树胶封固。
Masson 三色染色试剂盒使用说明
Masson三色染色试剂盒使用说明Masson三色染色是结缔组织染色知更鸟最经典的一种方法,是显示组织中纤维的主要方法之一,是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关:分子的大小由分子量来体现,小分子量容易穿透结构致密、渗透性低的组织;而大分子量则只能进入结构稀松的、渗透性高的组织。
然而,淡绿或苯胺蓝的分子量很大,因此Masson染色后肌纤维呈红色,胶原纤维呈绿色或蓝色,主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
Masson试剂盒的特点:◆染色稳定;◆分化时间短,1-2分钟;◆色彩清楚鲜艳;◆使用范围广,适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色;◆所染切片保存时间长且不易褪色。
产品组成:试剂(A-1)苏木素染色液25ml试剂(A-2)三氯化铁水溶液25ml试剂(B)盐酸乙醇分化液50ml试剂(C)氨水水溶液50ml试剂(D)丽春红酸性品红染色液50ml试剂(E)乙酸水溶液50ml试剂(F)磷钼酸水溶液50ml试剂(G)苯胺蓝染色液50ml注:临用时取A1、A2等量混合,成为试剂A,不可预先配制后放置,因染色液的色素根与铁会化合。
形成不容性沉淀,等量混合后,一般24小时后失去人力。
主要成分:试剂(A):主要由苏木素和三氯化铁组成。
试剂(B):主要由乙醇和盐酸水溶液组成。
试剂(C):主要由稀氨水水溶液组成。
试剂(D):主要由丽春红和酸性品红组成。
试剂(E):主要由乙酸水溶液组成。
试剂(F):主要由磷钼酸水溶液组成。
试剂(G):主要由苯胺蓝和弱酸组成。
操作步骤:固定液应选用甲醛盐溶液、中性福尔马林试剂(10%,NBF)进行固定。
1、试剂(A)染色5min-10min。
2、试剂(B)分化、水洗。
3、试剂(C)返蓝、水洗。
4、蒸馏水或者去离子水洗1min。
5、试剂(D)染色5-10min。
6、试剂(E)洗1min。
7、试剂(F)洗1-2min8、试剂(E)洗1min。
9、直接放入试剂(G)中染色1-2min。
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温馨提示 为了您的自身安全,使用试剂前,请做好防护,如穿实验服,带手套等。
储存温度 室温保存。
包装清单 产品编号
HCY047
品名 丽春红染色液
说明书
产品包装 100mL 1份
1
使用说明 1. 将 PVDF 膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液中,摇动 3~5min 或更长 时间,直至出现清晰条带。对结果作适当记录。 2. 用蒸馏水,PBS 或其它适当溶液漂洗 2~3 次,每次 3~min,去除丽春红,进行后续的 Western 检测。
注意事项 丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。
杭州昊鑫生物科技股份有限公司
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丽春红染色液
产品简介 丽春红染色液可用于 PVDF 膜、硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜上的蛋白的检测。丽春红
带负电荷,可以与带正电荷的氨基酸残基结合,同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合, 从而形成红色的条带。
丽春红对蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸馏水,PBS 或其它适当溶液洗去。