三七活血片质量标准研究

三七活血片质量标准研究

目的建立三七活血片的质量标准。方法采用薄层色谱法对制剂中的三七、血竭进行鉴别。采用高效液相色谱法测定赤芍中芍药苷的含量，色谱柱为Shim-pack（岛津）C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.3%磷酸水溶液（15.2∶84.8，V/V），检测波长为230 nm，柱温为30 ℃，流速为1.0 mL/min。结果三七、血竭的薄层色谱特征斑点分离清晰，阴性无干扰。芍药苷在0.269 6～1.348 μg范围内线性关系良好（r=0.999 8）；供试品溶液在24 h内稳定，平均加样回收率为98.68%，RSD=0.78%（n=6）。结论本研究所建立的方法简单、准确可靠、重复性好，可用于控制三七活血片的质量。

Abstract：Objective To establish the quality standard for Sanqi Huoxue Tablets. Methods Notoginseng Radix et Rhizoma and Draconis Sanguis in Sanqi Huoxue Tablets were identified by TLC qualitatively；The content of paeoniflorin in Paeoniae Radix Rubra was determined by HPLC. The separation was performed on Shim-pack-C18 column （150 mm×4.6 mm，5 μm）with mobile phase consisted of acetonitrile-0.3% phosphoric acid （15.2：84.8，V/V）at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 230 nm，and the column temperature was 30 ℃. Results Notoginseng Radix et Rhizoma and Draconis Sanguis in Sanqi Huoxue Tablets could be identified by TLC and separated well. Paeoniflorin was in a good linear relationship between 0.269 6–1.348 μg，with a correlation coefficient of 0.999 8. Solution was stable within 24 h，and the average recovery of paeoniflorin was 98.68%，RSD=0.78%. Conclusion The established method is simple，accurate and sensitive，and can be applied to the quality control of Sanqi Huoxue Tablets.

Key words：Sanqi Huoxue Tablets；quality standard；Notoginseng Radix et Rhizoma；Draconis Sanguis；TLC；HPLC；paeoniflorin

三七活血片是在吉林省中医院院内制剂三七活血胶囊基础上确定的实验方剂，由三七、赤芍、血竭、骨碎补等7味中药组成，具有活血止血、散瘀止痛等作用，用于急性软组织损伤等症临床疗效显著，药理

实验表明该制剂在减轻损伤组织，促进血肿吸收和瘀斑消散等方面作用确切[1]。为有效控制三七活血片的质量，保证用药安全有效，本研究建立三七活血片的质量控制方法。采用薄层色谱法，以三七的主要功效成分人参皂苷Rg1、Rb1及三七皂苷R1为对照，对方中三七进行定性鉴别。为增加方法的专属性及信息的全面性，以血竭特征性成分血竭素高氯酸盐及血竭对

照药材为对照，对方中血竭进行定性鉴别。处方中赤芍用量最大且为主要药味，故采用高效液相色谱法（HPLC）对其镇痛抗炎的有效成分芍药苷进行含量测定，并进行方法学验证。

1 仪器与试药

LC-10 AT高效液相色谱仪（日本岛津公司），SPD-10A紫外检测器（日本岛津公司），KQ-250型超声波处理器（天津奥特赛恩斯仪器公司），AE163电子天平（瑞士梅特勒公司）。

人参皂苷Rg1对照品（批号110703-201128，供含量测定用）、三七皂苷R1对照品（批号110745- 201318供含量测定用）、人参皂苷Rb1对照品（批号110704-201223，供含量测定用）、血竭素高氯酸盐对照品（批号110811-201105，供含量测定用）、血竭对照药材（批号906-9905）、芍药苷对照品（批号110736- 201337，供含量测定用），中国食品药品检定研究院。3批三七活血片（批号20140601、20140602、20140603，0.5 g/片）及阴性对照品，吉林省中医药科学院制剂室自制。硅胶G板（手铺，青岛海洋化工有限公司），水为纯净水（杭州娃哈哈集团有限公司）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。2 方法与结果

2.1 定性鉴别

2.1.1 三七取三七活血片3片，研细，加甲醇30 mL，超声处理（功率500 W，频率20 kHz）20 min，过滤，滤液蒸干，残渣加水15 mL微热使溶解，加乙醚振摇提取3次，每次20 mL，弃去乙醚液，水液继用水饱和正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，再用正丁醇饱合氨试液洗涤2次，每次15 mL，弃去碱液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。取去掉三七的其他药材，按三七活血片制备工艺操作，制成不含三七的阴性样品，按供试品溶液制备方法，制备不含三七的阴性对照溶液。另取人参皂苷Rb1、Rg1及三七皂苷R1对照品，分别加甲醇制成每1 mL各含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述5种溶液各4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）10 ℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色斑点，其Rf值适宜，显色清晰，阴性对照无干扰，专属性较好。

2.1.2 血竭取三七活血片2片，研细，加乙醚10 mL，超声处理（功率500W，频率20 kHz）5 min，过滤，滤液作为供试品溶液。取除血竭的其他药材，按三七活血片制备工艺制成不含血竭的阴性样品，按供试品溶液制备方法，制备不含血竭的阴性对照溶液。另取血竭对照药材0.1 g，同法制成对照药材溶液。再取血竭素高氯酸盐对照品，加甲醇制成每1 mL含0.2 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法[2010年版《中华人民共和国药典》（一部）附录ⅥB]试验，吸取上述4种溶液各4 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（19∶1）为展开剂，展开，取出，晾干[2-3]。供试品色谱中，在与对照药材及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，其Rf值适宜，显色清晰，阴性对照无干扰，专属性较好。

2.2 含量测定