不同苦瓜多糖的体外抗氧化活性研究
苦瓜中主要活性物质及其生理功能的研究进展
苦瓜，别名凉瓜，属于葫芦科植，主要产地为亚热带地区或者热带。
我国属于亚热带气候，国内大部分地区均有种植苦瓜。
苦瓜是我国的一种日常蔬菜。
苦瓜作为药食两用食物，很早人们就已经开始对它进行研究。
目前的研究表明，苦瓜中含有蛋白质、脂肪、糖类和纤维素，其含量分别为0.9、0.2、3.2 g/100 g与1.1 g/100 g，维生素的含量为114.11 mg/100 g[1]。
苦瓜中富含的活性物质具有多种生理功能，例如抗氧化性、降血糖、抗肿瘤与提高免疫力等，这些生理功能对药物研究具有很大的帮助。
1 苦瓜中主要活性物质1.1 苦瓜多糖苦瓜多糖主要存在于苦瓜果实中，根、茎、叶中基本不含多糖成分。
苦瓜多糖是一种杂多糖，目前的研究主要集中于水溶液苦瓜多糖。
马景蕃[2]等人通过单因素实验研究水溶性多糖提取的最佳工艺条件，当料水比、浸提时间、乙醇添加量和提取温度在最佳条件时，提取率达8.8%。
高鹤[3]对苦瓜中多糖含量进行分析，证明苦瓜中主要含有半乳糖醛酸、半乳糖以及葡萄糖等单糖，占比分别为54.53%、34.99%和10.48%；红外光谱图在 1 740 cm-1（酯羰基）、1 630 cm-1（游离羧酸基）、1 200～1 450 cm-1（不对称和对称拉伸）处有吸收，这表明多糖中连接了一些蛋白质以及酸性糖结构。
1.2 苦瓜皂苷苦瓜根、茎和果实中均含有一定的苦瓜皂苷，其中根、茎中的含量接近且高于果实中的含量[4]。
苦瓜皂苷主要包括两种：三萜类皂苷和甾体类皂苷。
刘慧娟等人的研究表明，苦瓜中含量最高的单体皂苷是苦瓜皂K，最少的是Kuguacin N，前者为后者的47倍[5]。
1.3 苦瓜黄酮黄酮类化合物广泛各类植物中，主要为多酚类代谢物。
目前国内对苦瓜黄酮的研究主要是果实中的黄酮类化合物，对于苦瓜其他部位的黄酮类化合物的研究较少。
张宏梅[6]等人对影响黄酮提取率的料液比、提取温度、提取时间和乙醇浓度进行了单因素控制实验，在最优条件下，苦瓜果实中总黄酮提取量可达到4.12 mg/g，含量在各类植物中较高。
苦瓜多糖降血糖活性成分的研究
54 Acta Nutrimenta Sinica,Feb.,2008, V ol.30 No.1苦瓜多糖降血糖活性成分的研究董 英，张慧慧(江苏大学食品生物工程学院，镇江212013)【摘 要】目的 研究苦瓜多糖最佳降糖活性成分的降血糖功能及其机制。
方法 比较苦瓜水提多糖和苦瓜碱提多糖对链脲霉素（STZ）诱导的糖尿病小鼠的降糖效果，初步分析其降糖机制。
结果 苦瓜碱提多糖200和400 mg/kg bw都可显著降低STZ糖尿病小鼠的血糖葡萄糖耐量及肝糖原的含量，果糖胺的含量同样也有所降低。
分子量最大的苦瓜碱提多糖降糖活性最好。
结论 大分子量苦瓜多糖的降糖效果较好，其机制可能是通过减弱STZ对胰岛β细胞的损伤或改善受损β细胞的功能，从而起到调节血糖的作用。
[营养学报，2008，30（1）：54－56]关键词：苦瓜；碱提多糖；血糖；葡萄糖耐量中图分类号：R151 文献标识码：A 文章编号：0512-7955（2008）01-054-03STUDIES ON COMPONENTS WITH ANTIHYPERGLYCEMIC EFFECT OF MOMORDICACHARANTIA L. POLYSACCHARIDESDONG Ying，ZHANG Hui-hui(School of Biological and Environmental Engineering, Jiangsu University, Zhenjiang 212013, China)【Abstract】 Objective To investigate the antihyperglycemic effect and the most effective com- ponent of Momordica charantia L. and its mechanism. Method Water-extracted and alkali-extracted Momordica charantia L. polysaccharides with different molecular weight on streptozotocin induced diabetes mellitus mice were carried out. The antihyperglycemic mechanism was preliminarily analyzed. Results Alkali-extracted Momordica charantia L. polysaccharides could lower blood sugar, improve glucose tolerance and increase the content of hepatic glycogen significantly at the dose of both 200 and 400mg/kg bw. The content of fructosamine was also lowered. Conclusion The component of alkali extracted Momordica charantia L polysacchaides with maximal molecular weight possessed the best antihyperglycemic effect. [ACTA NUTRIMENTA SINICA, 2008, 30(1)：54－56]Key words：Momordica charantia L.；alkali-extracted polysaccharides； blood glucose；glucose tolerance苦瓜全株，特别是种子和果实有明显的降血糖、抗肿瘤、抗病毒、杀精和堕胎等药理作用[1]。
苦瓜多糖的研究概述论文
目录摘要 (2)1. 苦瓜多糖的研究概述 (2)2. 苦瓜生物活性研究 (2)2.1. 苦瓜多糖免疫调节作用 (2)2.2. 苦瓜多糖抗氧化作用 (2)3. 苦瓜多糖的研究进展 (3)3.1. 苦瓜多糖的提取 (3)3.2. 苦瓜多糖的纯化和结构分析 (3)3.3. 苦瓜多糖的功能活性研究 (4)总结 (5)参考文献 (5)致谢 (6)苦瓜多糖研究进展园林食品加工系食品加工专业 060……指导教师郭祖锋摘要苦瓜是人们生活中的一种常用蔬菜,同时也是重要的功能食品原料。
现代研究表明,苦瓜具有提高免疫力、降血糖、抑菌和抗氧化等作用,并明确苦瓜多糖(Momordica charantia polysaccharide,简称MCP)是其重要生物活性成分之一。
目前国内外对MCP的研究主要集中在降血糖方面,对其抗氧化和免疫活性方面的研究较少,并且所用多糖样品多为未经纯化的粗多糖,无法全面了解苦瓜多糖的作用机理、多糖活性组分与其活性作用之间的量效、构效关系。
本文对MCP体内外的抗氧化和免疫活性进行了深入研究,用抗氧化和免疫指标对分离组分进行了活性追踪,并对获得的活性组分进行结构分析,旨在为MCP药物及功能性食品开发提供一定的理论依据。
关键词：苦瓜多糖纤维素酶分离纯化免疫调节抗氧化1.苦瓜多糖的研究概述苦瓜中的活性成分主要是苦瓜多糖和苦瓜皂苷。
苦瓜多糖( momordic acharantia polysaccharide，简称 MCP)是一种由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成的杂多糖。
多糖作为一种几乎无毒副作用的天然提取物，在治疗肿瘤、免疫力低下、高血糖、衰老、病毒性疾病等方面疗效独特。
2.苦瓜生物活性研究2.1.苦瓜多糖免疫调节作用苦瓜多糖高中低剂量组均能显著性抑制肿瘤的生长，其中低剂量到高剂量组具有剂量依赖性，高剂量组抑瘤效果减弱，可能与多糖的双向调节性有关，在一定浓度范围内能抑制肿瘤生长，但浓度过大同时可能会产生营养作用，与部分抑制瘤细胞作用相抵消。
苦瓜有效部位降糖活性的比较研究
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实验方法
苦瓜降糖有效部位的提取 取未成熟的新鲜苦瓜， 洗净去籽后， 称取* 94， 放于匀浆器中， 再加 *" 5/ 蒸馏水， 搅碎后分成 *
等份。第 一 份： 用 * """ 5/ $), 乙 醇 回 流 提 取 每次! :， 提取物减压浓缩至稠膏， 分别用乙酸 ! 次， 乙酯和正丁醇萃取， 乙酸乙酯、 正丁醇萃取物及剩 余物分别浓缩至干， 再于烘箱中烘干后粉碎， 分别
#56215 7158795:7 （ 992; ・< ! = ） ( ’ D. E = ’ ./ .J ’ &F E = ’ (H .( ’ == E = ’ JH .( ’ H& E G ’ &( .( ’ /D E G ’ F= ./ ’ DH E G ’ GG .( ’ /J E G ’ DG .( ’ G( E / ’ =& .G ’ GF E . ’ .F %&’( $
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苦瓜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究
苦瓜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究苦瓜具有很高的药用和营养价值，其中的多糖是其中一种重要的成分。
多糖具有广泛的生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。
因此，对苦瓜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究具有重要的意义。
首先，苦瓜多糖的分离纯化工作是研究的基础。
目前，常用的分离纯化方法主要包括超滤、凝胶渗透层析、离子交换层析和疏水层析等技术。
其中，超滤技术是一种常用的初步纯化方法，可以通过根据分子量大小的差异来分离多糖。
凝胶渗透层析则可以进一步将多糖分离纯化，根据多糖的大小分离出不同的组分。
离子交换层析则可以通过多糖的电性差异来实现分离。
疏水层析可以根据多糖与固定相的亲疏水性来实现分离。
通过这些方法的结合应用，可以有效地分离苦瓜多糖，并获得纯度较高的样品。
在分离纯化苦瓜多糖的基础上，可以进一步研究其抗氧化性能。
抗氧化性是多糖的一种重要的生物活性。
现有的研究表明，苦瓜多糖具有明显的抗氧化活性，可以清除体内的自由基，保护细胞免受损害。
苦瓜多糖的抗氧化性主要来自于其中的多糖成分，这些成分可以通过捕捉自由基和调节氧化还原系统来发挥作用。
因此，可以通过抗氧化实验来评估苦瓜多糖的抗氧化性能。
抗氧化实验的方法较多，最常用的是自由基清除实验和氧化指标的测定。
自由基清除实验可以评估多糖对自由基的清除能力，如DPPH自由基清除实验和ABTS自由基清除实验等。
氧化指标的测定可以从多个方面评估多糖的抗氧化性能，如过氧化氢酶活性、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、还原力等。
通过这些实验，可以准确地评估苦瓜多糖的抗氧化性能，并为其在医药和营养品领域的应用提供科学依据。
综上所述，苦瓜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究对于深入了解苦瓜的药用和营养价值具有重要的意义。
通过选择合适的分离纯化方法，可以获得高纯度的苦瓜多糖样品。
进一步研究其抗氧化性能，可以评估其在抗氧化的应用中的潜力。
这些研究结果可以为苦瓜多糖的进一步开发和应用提供科学依据。
苦瓜分离纯化物抗氧化活性试验的研究
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 与 试 剂 ．
收 稿 日期 ： ０ ７—０ ２０ ３—０ １ 修 回 日期 ：０ ７—０ ２０ ３—２ ６
１ ２ 仪器及 设 备 ．
层 析柱 ， 内径 ２ ５ｃ 长 ６ ｍ， 海 泸西 分 析 ． ｍ、 ０ｃ 上
仪器 厂 ； ＨＬ一２ Ｄ恒 流 泵 、 Ｆ—Ｉ型 三 用 紫外 分 析 Ｚ 仪 、 ＡＢ Ｏ Ｏ 真 空 冷 冻 干燥 系 统 、 ０ —２型 干 Ｌ Ｃ ＮＣ １１
其 对 油脂 的抗氧 化体 系中， 抗氧 化性和 维 生素 Ｃ相 当。 其
关 键 词 ： 瓜 ；抗 氧 化 活 性 ；分 离 ；纯 化 苦
中图分 类号 ： Ｓ ０ ． Ｔ ２２ ３
文献 标识码 ： Ｂ
文章编号 ：６ ２—５ ２ （０ ７ ０ —０ ３ —０ １７ ０ ６２ ０ ）４ ０ ０ ４
Ｉ ｅ ｔｇ ｔ ｏ ｎ ａ ｔｏ ｉ ａ ｃ ｉ ｉｙ ｔ ｓ ｓ ｏ ｒ ｆｃ ｔｏ ｏ ｐ ｎｅ ｔ ｎｖ ｓ ｉ ａ ｉ ｎ ｏ ｎ ｉ ｘ ｄ ｎｔａ ｔｖ ｔ ｅ ｔ ｆｐｕ ｉｉ ａ ｉ ｎ ｃ ｍ ｏ ｎ ｆ ｏ Ｍ ｏ ｏ ｄｉ ａ ｃ ｒ ｎｔａ Ｌ． ｒ ｍ ｍ ｒ ｃ ｈａ ａ ｉ
抗 氧化剂 的开发 与研究 一直受 到人们 的广 泛关
注 ， 别是 当科学 家 们 发 现人 体 的 疾病 与 衰 老是 人 特
原料 ： ０ Ｈ１ ３树脂 ， 极 性 ， 开 大学 化 工厂 ； 非 南 猪
油 ， 鲜猪板 油 ， 验室 熬制 。化学 试剂 ： 新 实 无水 乙醇 、
体 内 自由基 作用 的 结果 后 ， 氧 化 剂 的研 究 有 了更 抗
（ ｈ ｎ ｑｎ ４ １ ２ ） Ｃ ｏ ｇ ｉｇ ０ ０ １
苦瓜多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性
苦瓜多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性作者：马景蕃江烨等来源：《湖北农业科学》2012年第24期摘要：采用水提醇沉法提取苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）中的多糖，在单因素试验的基础上设计正交试验考察提取过程中提取温度、提取时间、料水质量比和Ｖ浸提液∶Ｖ乙醇对多糖提取率的影响，并对所提取苦瓜多糖的抗氧化活性进行了检测。
结果表明，最佳提取工艺为提取温度９０℃、提取时间２ｈ、料水质量比１∶３５、Ｖ浸提液∶Ｖ乙醇＝１∶４.0。
苦瓜多糖对1，1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基（ＤＰＰＨ·）和超氧阴离子自由基（Ｏ２－·）有较好的清除作用，在试验范围内清除率随苦瓜多糖用量的增加而升高。
关键词：苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）多糖；水提醇沉法；优化；抗氧化中图分类号：Ｓ６４２．５；Ｒ２８４．２；Ｏ６２９．１２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０12）24－5761-03苦瓜（ＭｏｍｏｒｄｉｃａｃｈａｒａｎｔｉａＬ．）属葫芦科植物，是一种常用蔬菜。
对于苦瓜属植物的药用价值人们早有认识，在民间被广为应用［１］。
现代医学研究证实苦瓜具有抗肿瘤、提高免疫功能、降血糖等作用。
多糖作为苦瓜的有效成分之一几乎无毒副作用，在治疗肿瘤、免疫力低下、高血糖、衰老、病毒性疾病等方面疗效独特［２］。
本试验采用水提醇沉法从苦瓜中提取粗多糖，考察乙醇添加量、提取温度、提取时间和料水质量比对其提取率的影响，优化提取工艺。
并对苦瓜多糖的抗氧化性能进行分析，为其开发利用提供参考依据。
１材料与方法１．１材料新鲜苦瓜购自当地市场，将鲜苦瓜洗净去内瓤，切成薄片。
置于电热恒温鼓风干燥箱中６０℃烘干至恒重，干燥的苦瓜经粉碎后过４０目筛，得到黄绿色苦瓜粉。
所用化学试剂均为分析纯。
ＦＺ１０２微型植物粉碎机，天津市泰斯特仪器有限公司；ＤＨＧ－９４１５Ａ电热恒温鼓风干燥箱，上海一恒科技有限公司；ＨＨ－４数显恒温水浴锅，金坛市科析仪器有限公司；ＳＨＢ－３循环水多用真空泵，郑州杜甫仪器厂；ＲＥ－３０００旋转蒸发仪、ＴＤ５Ａ台式低速离心机、ＡＬ２０４电子天平，海南凯达科学仪器有限公司。
两种多糖复配物的抗氧化性研究
由基的清除能力. 香菇多糖和苦瓜多糖复配比例为 １ ∶１、１ ∶２、１ ∶３、２ ∶１、２ ∶３、３ ∶１、３ ∶２. 实验结果表明ꎬ两种多糖及
其不同比例复配物对 ３ 种自由基均具有良好的清除能力ꎬ当复配比为 ２ ∶１ 时ꎬ复配物对羟基(ＯＨ) 、超氧阴离子
(Ｏ２－ ) 、ＤＰＰＨ ３ 种自由基的清除率的 ＩＣ５０ 值分别为 ３.４４７、２.００６、０.５００ ｍｇ / ｍＬꎬ其清除效果优于两种多糖单独使
用或其他比例复配时ꎬ此时其抗氧化能力最强.
[ 关键词] 香菇多糖ꎬ苦瓜多糖ꎬ抗氧化ꎬ复配比
[ 中图分类号] ＴＳ２０１.４ [ 文献标志码] Ａ [ 文章编号]１６７２－１２９２(２０１９)０２－００８７－０６
第 １９ 卷第 ２ 期
２０１９ 年 ６ 月
南京师范大学学报( 工程技术版)
ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＮＡＮＪＩＮＧ ＮＯＲＭＡＬ ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ(ＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧ ＡＮＤ ＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹ ＥＤＩＴＩＯＮ)
Ｖｏｌ １９ Ｎｏ ２
Ｊｕｎｅꎬ２０１９
ｃｏｍｐｌｅｘｅｓ ｈａｄ ｇｏｏｄ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｂｉｌｉｔｉｅｓ ｆｏｒ ａｌｌ ｔｈｒｅｅ ｋｉｎｄｓ ｏｆ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ. Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｃｏｍｐｏｕｎｄｉｎｇ ｒａｔｉｏ ｉｓ ２ ∶１ꎬｔｈｅ ＩＣ５０
ｖａｌｕｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｌｅａｒａｎｃｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｈｙｄｒｏｘｙ(ＯＨ) ꎬｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ ａｎｉｏｎ(Ｏ２－ ) ａｎｄ ＤＰＰＨ ｔｈｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ ａｒｅ ３. ４４７ ｍｇ / ｍＬꎬ
苦瓜抗氧化活性成分的分离纯化及抗氧化活性研究
酸 、亚 硝 酸 钠 、盐 酸 萘 乙 二 胺 、对 氨 基 苯 磺 酸 浓 盐 酸 、
ＤＰ Ｐ Ｈ・（ ｉ Ｓｇ ｍａ公 司 ） 。
１１３试 验 仪 器 及 设 备 ．．
１２． ． ２
加 入
ｏ Ｃ±１
上 海 泸 西 分 析 仪 器 厂 的 层 析 柱 内 径 ２５ｃ ． ｍ、长 ６ ０ ｃ ＨＬ一 Ｄ 恒 流 泵 ， Ｆ— 型 三 用 紫 外 分 析 仪 ， ｍ， ２ Ｚ Ｉ
１２ ３ ． ． １２３ ． ．
１ ．． 化样 品 的制备 ． １１纯 ２ ４ ％乙醇 浸 提 一定 量 苦 瓜 经 冷 冻 干 燥 后 得 到 的 粉 末 ０
状样品。
１ ．． 孔树 脂 Ｈ ０ ． １２大 ２ １ ３的预 处 理
由基
根 据静 态 与动 态 的结 果 ，称取 １０ｇＨ １３ 脂 ， ０ ０ 树 用
见 光 的 吸 收情 况 ，在 ２ ０ ７ ０ｎ 的波 长 范 围 内对 Ｈ， ， ０ ～ ０ ｍ ０， Ｆ 一 系 进 行 扫 描 ， 光 谱 图 如 图 １ ｅ体 其 。 图 １表 明 Ｈ， ／ｅ 体 系 在 ５ ０ ｎ 下 有 最 大 吸 收 ０， 一 Ｆ １ ｍ 峰 ，３ ｍ 下无 吸收 峰 。一 般情 况 下 ， 取最 大 吸 收峰 或 ５ ６ｎ 选 最 尖 锐而 突 出 的特定 吸收 峰 波 长 下进 行 测 定 可 以提 高 实 验 的灵 敏度 。故 在用 Ｈ Ｏ ／ｅ ， ， 一体 系测 定 色 素 清 除羟 自 由 Ｆ
苦瓜多糖的分离纯化及抗氧化性的研究
，
士 Ｌ Ｊ 体的植物 毋作为一种含有多种营养物质的药食一
进 行观 测。 这一 方法主 要是 采用０ ． ０ ２ ｍｏ ｌ ／ Ｌ 的
脂、抗病毒 、抗肿瘤 以及调整 免疫能力 等多项 生理 功 能 ， 并 力 图对 其 作 用 成 分 进 行 分 析 ，但 并 未 取 得 明 显 的 成 效 。 多 糖 作 为 苦 瓜 中含 有 的 项重要活性 成分之 一 ，与苦瓜 的生理作 用势 必具 有 不 可 分 割 的 联 系 。 由此 对 苦 瓜 中 多糖 的 分 析 成 为 了科 学 界 炙 手 可 热 的研 究课 题 ，但 由 于 多 糖 结 构 复 杂 ， 因 此 相 关 研 究 仍 然 处 于 不 完 整 的 状 态 。 针 对 这 一 现状 ，本 文对 苦 瓜 多糖 的 分 离 纯 化 方 法 以 及 其 抗 氧 化 性 进 行 了 简 要 的研 究 ， 以期 对 苦 瓜 多 糖 的 相 关 研 究 起 到 一 定 的 参 考作 用。
蛎研 』 ｒ ＿ ｔ 抖＂ ｉ ｆ 义
苦瓜 多糖 粗产品 。苦瓜多糖粗 产品指 的是 采 用 改 良 的水 提 法 初 步 从 苦 瓜 中将 多糖 进 行 分 离 所 得 出 的苦 瓜 粗 多 糖 。 本 文 所 分 析 的 实 践 过
苦瓜抗氧化活性成分的研究
冰醋酸 ，碘化钾 ，硫代硫 酸钠 ，高锰酸钾 ，氯化铁 ，
可溶性淀粉 ， 碳酸钠 ， 福林． 丹尼斯试 剂等 ， ＡＲ级 。 均
芦丁 （ 上海 ，生化试 剂二厂 ） ；单宁酸 （ 上海 ， 生化试剂二厂 ）
１ 主要设备 ＿ ３
１ １ 型干燥箱 、Ｒ ．２ Ａ 型真 空旋转蒸发器 、 ０． ２ Ｅ５ Ａ Ｕ －６ １Ｃ 型紫外 分光光计 、电子天平 Ｖ １０ Ｐ １ 实验方 法 － ４ １ ． 提取苦瓜抗氧化成 分所 用溶剂 的选取 ．１ ４ １ ．． 最佳浸提 剂的选 择 ＿ １１ ４ 称取 ５ ０ ０ ｇ新鲜苦瓜 ５ ， 份 分别用 甲醇 、 无水 乙醇 、 正 已烷 、乙醚 、乙酸 乙酯作溶剂 ， 物料 比为 ２ 和 １ ：１ ： １ 常温下浸提 ２ ４小时 ，合并两次提取液 ，真空浓缩后
氧化 剂是今后 食 品工 业的重 点方 向， 即开发 实用 、高
效 、 毒或无 毒， 低 成本低廉 的天然抗氧化剂 。 而从苦瓜 所具有 的各种药用功效 都预 示着 苦瓜具有一定 的抗氧 化作用 ，但对其研 究报 道较 少 ，因此本文从化学角度
出发 ，利用传统 的烘箱 实验法，对苦 瓜果实 的抗氧化
苦瓜抗氧 化活性成分的研 究
刘苇 芬 ，文 良娟
（ 广西大学轻工与食品工程学院，广西南宁 ５００） ０４ ３
摘要 ：用不同溶剂抽提苦瓜 中抗氧化物质，按一定比例添加到食用油脂 （ 猪油 ）中，采用烘箱法高温诱导猪油发生过氧化反应 ，
测定其过氧化值作为评价抗氧化性能的依据 。实验结果表 明：４ ％乙醇提取物抗氧化效果显著 ，当在猪油中添加 ０１／０ ０ ． ５ｇ的 ４ ％乙醇 ｇ ０ 提取物时抗氧化作用最佳。 ％乙醇提取液经显 色的反应初步判断其抗氧化有效成分为酚类 、 ０ ４ 黄酮类物质 ， 且含量分别为 ０ ０ ５／０ ｇ ． １ｇ５ ０ ２
苦瓜抗氧化活性物质的初步鉴定
１１ 主 要试 剂 ．２ ．
氢氧化钠 ， 酸铝 ， 硝 亚硝酸钠 ， 和溴水 ，ｅ １ 高 饱 Ｆ Ｃ ， 锰酸钾 ， 硼氢化 钠 ， ａ Ｈ、 ２Ｏ ， １１ 锌粉 ， 酸 ， Ｎ Ｏ Ｈ Ｓ Ａ Ｃ， ， 盐 浓 硫酸 ， 均为分析纯 。 １ ． 仪器及设备 ．３ １ ’ Ｌ Ｂ Ｏ Ｃ ｒ Ｚ ｎ ． Ａ Ｃ Ｎ ＯＦｅ ｏｅ ５ ｅ ２ Ｌ型真空冷冻干燥 系统 ：
ＵＶ ｃ ｎ ｔ ｅｒ ｓ ｌ ｈ ｗ ｈ ｔｔｅ ＡＡ ａ ｌ ｓｐ ｅ ｏｉ ｎ ａ ｏ ｏ ｄ ｓ ｂ ｔｎ ｅ ｏ ｔｉ ｉ ｇｈ ｄ ｏ ｙ ｒ ｕ ｓ ｓ ａ ， ｈ ｅ ｕｔ ｓ ｏ ｔ ａ ｈ ｓ ｓ ｍｐ ｅｉ ｈ ｎ ｌｃ ａ ｄ ｆ ｖ ｎ ｉ ｕ ｓａ ｃ ｓｃ ｎ ａｎ ｎ ｙ ｒ ｘ ｌｇ ｏ ｐ ｌ ｔ ａ，ｈ ｏ ｇ ｈ ｆａ ｅ ｐ ｃｒ ｓ ｏ ｙａ ａｙ ｉ ｈ ｗｅ ｈ ｔ ｔｅｓ ｍ ｐｅＡＡ ｏ ｓｂ ｙｈ ｄ ｔ ｅｂ ｎ ｙ，ｈ ｒ ｇ ａ ｔ ｈ ｔ ｔｒ ｕ ｈｔｅ ｉ ｒ ｒｄ ｓ ｅ ｔｏ ｃ ｐ ｎ ｌｓｓｓ ｏ ｄ ｔ ａ，ｈ ａ ｌ ｎ ｐ ｓ ｉｌ ａ ｈ ｅ ｚ ｌ ｔｅｆａ ｒ ｎ ｅｈ ｒｌｎ ａ ｅ ｔｅａ ｓ ｃａｉｎｈ ｄ ｏ ｅ ｏ ｄ － ｔ ｅ ｋ ｇ ，ｈ ｓｏ ｉｔｏ ｙ ｒｇ ｎ ｂ ｎ ， ＣＨ２ ，ｈ ｒｍａ ｙａｃ ｈ ｌ ｎ ｅｃ ｒ ｏ ｙ． ｉ 一 ｔｅｐ ｉ ｒ ｌｏ ｏ ｄｔ ａｂ ｎ １ ａ ｈ Ｋｅ ｏ ｄ ｙｗ ｒ ｓ：Ｍｏ ｒ ｉａｃ ａ ａ ｔ ；ｎ ｉｘｄ ｎ ｃｉｉｙ； ｍｏ ｄｃ ｈ ｒ ｎ ｉ Ｌ．ａ ｔｏ ｉａ ｔａ ｔｖｔ ＵＶ ｃ ｎ ｉ ｇ；ｎｒ ｒ ｄｓ ｅ ｔｕｍ ａ ｓ ａ ｎ ｎ ｉｆａｅ ｐ ｃｒ
苦瓜多糖的分离纯化及保肝活性研究
属于杂多糖，其组成成分为半乳糖、葡萄糖、阿 拉伯糖、鼠李糖、甘露糖 [3]等，近年来，有关苦 瓜多糖的研究方兴未艾。研究显示，苦瓜多糖具 有多种生物活性，如抗氧化、降血糖、抗病毒及 抑菌等 [4]。近期有关苦瓜多糖功能相关报道主要 集中于降血糖方面，如苦瓜多糖分离产物可激活 PPARγ受体[5]，对正常小鼠和2种糖尿病模型小鼠 有显著的降糖作用[6]，提示苦瓜多糖可能通过多种 途径发挥调节血糖代谢、增强免疫力[7]等作用，而 苦瓜多糖对肝损伤防护作用则鲜见报道。本研究 利用苦瓜多糖的纯化产物对此方面进行了探讨， 为开发保健食品提供依据。 1 材料与方法 1.1 材料与仪器 苦瓜：市售；昆明小白鼠：沈阳药科大学 实验室动物中心；纤维素酶：上海化学试剂公 司；DEAE-纤维素、Sephadex G-100：北京鼎国 昌盛生物技术公司；四氯化碳：北京太洋药业有 限公司；海王金樽：成大方圆公司；超氧化物歧 化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-PX)试剂盒：南京建成生物工程研究所；其 他试剂均为国产分析纯。 LGJ-10型冷冻干燥机：北京四环科学仪器 厂；RE-85Z旋转蒸发器、DBS-100电脑全自动部 分收集器：上海青浦沪西仪器厂；UNIC9100型紫 外可见分光光度计：尤尼柯(上海)仪器有限公司。 1.2 实验方法 1.2.1 苦瓜多糖的酶法制备[8] 取新鲜苦瓜果肉100 g匀浆，加0.02 mol/L柠檬酸缓冲液及纤维素酶(200 U/mL)至料液比为1:6，于40 ℃、pH6.0浸提6 h， 8000 r/min离心15 min，将上清液浓缩至100 mL， 透析48 h，于5倍无水乙醇、4 ℃静置12 h，8000 r/ min离心15 min，将沉淀冷冻干燥得粗多糖。 1.2.2 苦瓜多糖的纯化 1.2.2.1 DEAE-52柱层析 称取苦瓜粗多糖1 g，完 全溶解于10 mL蒸馏水中经DEAE-cellulose 52柱层 析(1.6 cm×25 cm)进行层析分离，先以蒸馏水、再 以0～1 mol/L NaCl梯度洗脱，流速1 mL/min，用部 分收集器收集，每2 min收集一管。用苯酚-硫酸 法跟踪检测多糖含量，直至无糖组分流出。以管 数为横坐标、吸光度为纵坐标绘制洗脱曲线。按 洗脱峰收集，合并洗脱液，蒸发浓缩，以自来水 和蒸馏水分别透析48 h，透析液以5倍体积的95%
苦瓜多糖抗氧化活性的研究
苦瓜多糖抗氧化活性的研究
单斌;张卫国;赵强;何顺英
【期刊名称】《安徽农业科学》
【年(卷),期】2009(037)001
【摘要】[目的]对苦瓜多糖的抗氧化作用进行研究.[方法] 制备苦瓜多糖,并对其清除DPPH自由基、对羟基自由基以及对超氧阴离子自由基的作用进行试验,根据试验数据评价其抗氧化活性.[结果]苦瓜多糖对自由基都有较好的清除作用.[结论] 苦瓜多糖具有一定的抗氧化能力.
【总页数】3页(P182-183,229)
【作者】单斌;张卫国;赵强;何顺英
【作者单位】韶关学院英东生物工程学院食品科学与工程系,广东韶关,512005;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌,330047;韶关学院英东生物工程学院食品科学与工程系,广东韶关,512005;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室,江西南昌,330047;韶关学院英东生物工程学院食品科学与工程系,广东韶
关,512005
【正文语种】中文
【中图分类】S642.5
【相关文献】
1.苦瓜抗氧化活性成分的分离纯化及抗氧化活性研究 [J], 刘苇芬;郭丽萍
2.苦瓜多糖提取工艺的优化及其抗氧化活性 [J], 马景蕃;江烨;龚小兰;陈仁良;林建
辉
3.苦瓜籽粗多糖的提取工艺及其体外抗氧化活性 [J], 李慧华;余江南;徐希明
4.不同苦瓜多糖的体外抗氧化活性研究 [J], 谢佳;张静
5.苦瓜多糖微波辅助提取工艺及其抗氧化活性 [J], 张伟丰;王亮
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苦瓜的活性成分的药理学研究进展
苦瓜的活性成分的药理学研究进展摘要】苦瓜的药用价值极高，其根、藤、叶、花、果实、及种子皆可入药。
现有研究显示苦瓜具有清热解毒、降血糖、抗肿瘤、抑菌、抗病毒、提高人体免疫力、抗氧化等多种功效。
本文通过查阅整理近些年国内关于苦瓜活性成分的研究，为其进一步研究及开发利用提供必要的依据。
【关键词】苦瓜；活性成分；药理作用【中图分类号】R961 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2018）35-0345-02苦瓜（Momordica charantia，MC）又名锦荔枝、凉瓜、癞葡萄、红羊、癞蛤蟆，为葫芦科一年攀援草本苦瓜属植物果实[1]。
苦瓜果味甘苦寒凉，但其含有丰富的营养，并含有苦瓜多糖、苦瓜皂苷和苦瓜蛋白等活性成分，素有“药用蔬菜”之称，具有极高的药用和食用价值。
属热带及亚热带气候品，全球栽培面积为218万公顷，产量为7500万[2]。
现已证实苦瓜具有清热解毒、养血益气、补肾健脾、滋肝明目、低血糖、抗肿瘤、抗生育、抑菌、免疫调节、减肥、美容养颜等多种生理功效。
1.活性成分1.1 苦瓜多糖多糖在自然界的分布较广，是维持动、植物体正常生命活动的能源物质之一。
植物多糖又称植物多聚糖，其主要的组成成分有半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖、果糖和葡萄糖等。
董英等[3]对苦瓜多糖进行提取、分离、纯化获得多糖MCP2、MCP4，其中苦瓜MCP2为半乳聚糖，而MCP4是由鼠李糖、木糖、半乳糖和阿拉伯糖的杂多糖。
而在对苦瓜多糖MCP2，MCP4的实验中得出二者为均一多糖组分。
1.2 苦瓜皂苷苦瓜皂苷是苦瓜中主要的生物活性成分之一，苦瓜皂苷主要包括甾体类皂苷和三萜类皂苷，后者主要是葫芦素烷型四环三萜和乌苏酸型五环二萜皂苷[4]。
李健等[5]研究表明苦瓜皂甙具有一般皂甙的性质，分子量较大，不易结晶，呈无色或者乳白色粉末，易溶于水、热甲醇和乙醇，难溶于丙酮、乙醚。
1.3 苦瓜蛋白和苦瓜降糖多肽-P苦瓜蛋白是从苦瓜果肉中分离出来的一种蛋白物质，这些蛋白物质具有较高的保健价值。
苦蘵多糖的提取及体外抗氧化活性的研究
苦蘵多糖的提取及体外抗氧化活性的研究【摘要】目的研究苦蘵多糖的醇沉条件及其体外抗氧化活性。
方式经超声提取，除脂，除蛋白等工艺取得苦蘵粗多糖，并考察了醇沉条件(醇沉比、温度、pH、时刻、浓缩比)对多糖沉淀的阻碍。
采纳体外实验研究了苦蘵多糖对·OH和DPPH的清除作用及对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制作用。
结果在最正确的醇沉条件(浓缩比4∶1,温度-20℃，醇沉时刻16 h，醇沉比为1∶4，pH为7)下，多糖提取率为%。
多糖对大鼠肝匀浆脂质过氧化的抑制率可达80%,对·OH和DPPH也都有专门好的清除作用。
结论苦蘵果实中多糖有良好的体外抗氧化活性。
【关键词】苦蘵多糖抗氧化Abstract:ObjectiveTo study the antioxidant activities of polysaccharide extracted from Physalis pubescens L..MethodsPolysaccharide was extracted from Physalis pubescens L. fruit by ultrasonic method, the content was determined by spectrophotometry, the in vitro scavenging activities of polysaccharide on hydroxyl radical and DPPH,and its protective effects on lipid peroxidation of liver homogenate in rats were investigated in this had strong scavenging effect on hydroxyl radical and DPPH,its effect on superoxide radical was week,and it showed significant protective effect on lipid peroxidationof liver homogenate in results suggest that the polysaccharide extracted from Physalis pubescens L. has good antioxidant activities in vitro.Key words:Physalis pubescens L.; Polysaccharide; Antioxidation property苦蘵,别名：蘵、黄蒢(《尔雅》)，小苦耽(《本草拾遗》)，灯笼泡草(《广东医学》祖国医学版(2)：，响铃草、响泡子(《湖南药物志》)，绿灯、野绿灯(《上海经常使用中草药》)。
苦瓜功能产品的研究进展
苦瓜功能产品的研究进展摘要：苦瓜作为一种药食两用的植物，其具有降血糖、降血脂、抗氧化、增强免疫力及预防肥胖等保健功能。
本文对苦瓜的药用功效、食疗功效、部分功能产品以及前景展望作一综述。
关键词：苦瓜；功能；产品；展望Research progress of functional products balsam pear Abstract:Balsam pear is a medicinal and edible plant, and it has sonme abilities that to reduce blood sugar, blood fat, anti-oxidation,to enhance immunity and prevention of obesity and other health functions.In this paper, Balsam pear medicinal properties, therapeutic efficacy, and some functional products and prospects are reviewed.Keyword:Bitter gourd; Function; Product; Prospects1.前言苦瓜又名锦荔枝、癞葡萄、凉瓜、红羊,为葫芦科苦瓜属1年生草本蔓生植物,喜温怕寒。
果实长椭圆形，表面具有多数不整齐瘤状突起。
种子藏于肉质果实之中，成熟时有红色的囊裹着。
苦瓜是人们喜爱的一种蔬菜，原产地不清楚，但一般认为是原产于热带地区。
在南亚、东南亚、中国、和加勒比海群岛均有广泛的种植。
现对苦瓜的药用功效、食疗功效、部分功能产品以及前景展望作一综述。
2.苦瓜的功能2.1降血糖作用苦瓜含有多种生物活性成分,包括苷类、生物碱类、非挥发油、三萜类、蛋白质和类固醇,其中有降血糖活性的成分主要有三萜类、苷类和肽类等[1]。
苦瓜降血糖作用机理有刺激活性B细胞分泌胰岛素；类胰岛素作用；抑制葡萄糖的肠道吸收抗细胞凋亡、促进细胞更新或受损B细胞恢复的作用[2]。
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科学实验不同苦瓜多糖的体外抗氧化活性研究谢 佳,张 静(陕西师范大学食品工程与营养科学学院,陕西 西安 710062)摘 要:从总还原能力、体外清除羟自由基能力、体外清除超氧阴离子自由基能力、体外清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPP H )能力、对F e 2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用这五个方面对6种苦瓜多糖(即:苦瓜粗多糖、0 1mo l/L N aC l 溶液洗脱苦瓜多糖、0 3mo l/L N aC l 溶液洗脱苦瓜多糖、硫酸化的苦瓜多糖)的体外抗氧化活性。
结果表明,6种苦瓜多糖均有一定的抗氧化活性,并随着浓度的增加,抗氧化活性增强。
其中苦瓜粗多糖M CP 的总还原能力、对1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPPH )的清除作用、F e 2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用强于其它五种苦瓜多糖。
硫酸化后的苦瓜多糖对羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用较硫酸化前有所提高,并呈量效关系。
试验结果表明,苦瓜粗多糖、经分离纯化得到的组分、硫酸化苦瓜多糖均有抗氧化活性。
关键词:苦瓜多糖;硫酸化;抗氧化活性Study on Antioxidant A ctivity i n V itro of D ifferentPol ysacchari des fro m M o mordica charanti aX I E J ia,Z HANG J ing(Co llege o f Food Eng i n eeri n g and Nutriti o na l Science ,Shaanx iNor m alUn i v ersity ,Shaanx iX i an 710062,Ch i n a)Abst ract :Anti o x i d ant acti v ity i n vitro of different polysaccharides fr om M o m ordica charantia w ere stud ied by testingreduc i n g po w er and the scaveng i n g effects o f OH,O 2-,DPP H and li p i d perox i d anti o n.The resu lts sho w ed that thepo l y sacchari d es can effective ly re m ove OH,O 2-,DPP H ,li p i d perox i d antion,w ith the concentration i n creasi n g re -m ova ls o f po l y sacchari d e greater ,and the reducing po w er and the scaveng i n g o f crude po l y sacchari d e fr o m M o mo r d ica cha -ran tia on DPP H ,lipid perox idanti o n w ere sign ifi c antly h i g her than t h e o ther po lysacchari d es .Su lfated polysacchar i d escan effecti v e l y re m ove the OH,O 2-,DPP H ,li p i d perox idanti o n ,and was dose-effect re lati o nship .The resu lts sug -gested the 6M o m ordica charantia po l y sacchari d es exhibited antiox i d ative acti v ity .K ey w ords :M o m or d ica charan tia po l y sacchari d es ;sulfated polysaccharides ;antiox idan t acti v ity*基金项目:国家自然科学基金(批准号:10874108)、陕西省自然科学基础研究计划(批准号:S J 08A16)资助。
作者简介:谢佳,女,硕士研究生,主要从事天然产物有效成份的结构和功能研究。
通讯作者:张静,女,副教授,硕士研究生导师.E -ma i :l zhangji n@s nnu 人体内过剩的自由基会干扰人体代谢的生理活动,使免疫力下降,引起衰老和各种疾病[1],如:关节炎、心血管病、肺病、肾病、肝脏疾病、血液疾病(贫血、败血症)、糖尿病、发炎性疾病、癌症、神经系统疾病、皮肤及眼睛疾病(白内障)、脑部疾病(老年痴呆、帕金森氏病)[2]等。
现在人们越来越认识到清除体内过剩自由基的重要性,因此寻找能够清除活性氧自由基并对人体副作用小的抗氧化剂具有十分重要的生物学意义。
苦瓜全株,特别是种子和果实具有很强的生理活性,具有降血糖、抗肿瘤、抗病毒、改善免疫功能、杀精和堕胎等药理作用[3]。
苦瓜已被用来治疗糖尿病[4],其中的苦瓜多糖是预防糖尿病的活性成分,它直接参与了降血糖、调血脂等有关活动[5],是苦瓜的有效成分之一。
目前对苦瓜的研究多集中于其皂甙、蛋白质、多肽、三萜、甾类、生物碱、蛋白、有机酸和生物活性方面,尤其是降血糖活性已经有了较详尽的阐述,但对于苦瓜多糖的体外抗氧化活性,尚未见详细报道。
本文通过测定6种苦瓜多糖:即苦瓜粗多糖M CP 、0 1m o l/L N aC l 溶液洗脱苦瓜多糖M CP1、0 3m o l/L N aC l 溶液洗脱苦瓜多糖M CP2、取代度分别为0 27、0 93、1 65的硫酸化苦瓜多糖S M CP1、S M CP 2、S M CP3的总还原能力、体外清除羟自由基能力、体外清除超氧阴离子自由基能力、体外清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(D PP H )能力、对F e 2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用来评价苦瓜多糖的体外抗氧化活性,以期待为苦瓜的科学研究和开发利用提供科学依据。
1 材料与方法1 1 材料与试剂苦瓜粗多糖、0 1m o l/L N aC l 溶液洗脱苦瓜多糖、0 3m ol/L N aC l 溶液洗脱苦瓜多糖、硫酸化的苦瓜多糖(S M CP1、S M CP2、S M CP3)由本实验室制备。
邻苯三酚、邻二氮菲、硫酸亚铁、双氧水、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、氢氧化钠等试剂均为分析纯。
1 2 仪器与设备TU -1810紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司;LX J- B型低速大容量多管离心机,上海安亭科学仪器厂;ALPHA1-4型真空冷冻干燥机,德国C HR IS T公司;HH-S4型电热恒温水浴锅,北京科伟永型仪器有限公司;CQ-600超声波发生器(19 5k H z),陕西翔达超声技术工程部;PH S-3C型p H计,上海精密科学仪器有限公司。
2 试验方法2 1 总还原能力的测定[6-7]在10mL试管中分别加入不同浓度(1m g/mL、2mg/mL、4m g/mL、6m g/mL、8m g/mL)的样品溶液1mL,磷酸盐缓冲溶液(0 2m o l/L,p H=6 6)0 5mL和0 3%铁氰化钾1 5mL,置于50 水浴中反应20m i n,然后加入10%的三氯乙酸(TCA)1mL,混匀后以3000r/m i n离心10m i n,吸取上清液2mL,加入0 3%三氯化铁溶液0 5mL,摇匀后在700n m处测定吸光值,每个浓度平行做三管,取其平均值。
2 2 体外清除羟自由基的作用采用邻二氮菲 金属铁离子 H2O2体系[8],通过F enton反应生成羟自由基,促使邻二氮菲-F e2+被氧化为邻二氮菲-Fe3+,造成其水溶液在波长510n m处最大吸收消失,来测算其清除率。
具体步骤是: 取p H7 4,0 2m ol/L的磷酸缓冲液2 0mL和8 0mL蒸馏水于试管中,混匀作空白管; 取2 0mL 的磷酸缓冲液,1 5mL邻二氮菲(5 0mmo l/L,以蒸馏水将50mmo l/L邻二氮菲无水乙醇溶液稀释)、1 0mL FeS O4(7 5mmo l/L 和5 5mL蒸馏水于试管中,混匀作未损伤管(A未损); 取2 0mL的磷酸缓冲液,1 5mL邻二氮菲,1 0mL FeS O4,4 5mL蒸馏水和1 0mL H2O2(0 1%)于试管中,混匀作损伤管(A损伤);取2 0mL的磷酸缓冲液、1 5mL邻二氮菲,1 0mL F eSO4,1 0mL南瓜多糖样品液,1 0mL H2O2和3 5mL蒸馏水,加入试管中,混匀作样品管(A样品)。
注意加样时每加一种试剂后要立即摇匀,否则会使局部颜色过深,影响重复性,并且H2O2要最后加。
将上述各组加样摇匀后置于恒温水槽中,37 保温60m i n,置于波长510n m处,测吸光度(A)值,本文数据均为三管平均值,按下式计算羟自由基清除率。
羟自由基清除率=[(A样品-A损伤)/(A未损-A损伤)] 100%2 3 体外清除超氧阴离子自由基的作用采用邻苯三酚自氧化法[9-10]。
具体步骤是:自氧化速率的测定按表6-1加入T r is-H cl缓冲液4 5mL,在25 ,恒温水域中保温20m i n,加入邻苯三酚,快速振荡混匀,以空白作对照在325n m波长下,每隔0 5m i n记录一次值,连续记录3m i n。
样品在同样条件下测定吸光值。
清除率(E%)=(对照的自氧化速率-样品的自氧化速率) 100/对照的自氧化速率。
表1 325n m法加样表T able1 Protoco l o f t he325n m operation试剂空白/mL自氧化/m L样品管/mLT ri s-H cl4 504 504 50蒸馏水0 500 40-邻苯三酚-0 100 10多糖--0 40总体积5 005 005 002 4 体外清除1,1-二苯基-2-苦苯肼自由基(DPP H )能力测定[11]参照文献方法,称取一定量的DPPH,用少量无水乙醇溶解,然后用50%乙醇配成30 m o l/L的溶液,取2mL DPP H溶液,分别加入0 2mL不同浓度(1m g/mL、2m g/mL、4m g/mL、6mg/mL、8mg/mL)的样品溶液,摇匀,放入25 水浴中反应15m i n后取出,测定525n m波长下的吸光值Ai,以0 2mL50%乙醇代替样品作为空白对照管,以2mL50%乙醇代替DPPH溶液作为样品参比管,并以等体积蒸馏水和50%乙醇混合溶液空白调零,按同样方法测定在525n m波长下的吸光值Aj,样品对DPPH 自由基的清除作用按下列公式计算:清除率=[1-(Ai-Aj)]/Ac100%2 5 对F e2+诱发的脂质过氧化反应的抑制作用[12]用0 1m ol/L p H7 45的磷酸盐缓冲液(PBS)配制卵黄悬液[V(卵黄) V(PBS)=1 25],吸取卵黄悬液0 2mL,分别加入0 1mL不同浓度(1mg/mL、2m g/mL、4mg/mL、6m g/mL、8m g/mL)的样品溶液,加入25mmo l/L F eSO4溶液0 2mL,然后加入1 5mL 0 1mo l/L p H7 45的磷酸盐缓冲液,37 恒温震荡15m i n,取出后加入0 5mL200g/L的三氯乙酸(TCA),3500r/m i n离心10m i n,吸取2mL上清液加入8g/L的硫代巴比妥酸(T B A),加塞,放入沸水浴中15m i n,冷却后以空白管(3mLPBS代替)调零,于532n m处比色测定吸光度值,以0 1mL蒸馏水代替样品作为空白对照管,按同样处理方法测定532nm波长下的吸光值样品抗氧化活性(AOA)用对卵黄脂蛋白脂质过氧化的抑制率表示。