动物细胞工程

50代细胞
遗传物 质改变 细胞系 无限传代
传代培养
2.动物细胞生长特性：
• 细胞贴壁：悬液中分散的细胞很 快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴 壁。 细胞的接触抑制： 当贴壁细胞分裂生长到表面相互接 触时，细胞就会停止分裂增殖， 这种现象称为细胞的接触抑制。
植物细胞和动物细胞培养的比较
比较项目 植物组织培养 动物细胞培养 原理
1.过程：
诱导方式
物理法
化学法 生物法： 灭活的病毒 丧失感染性 仙台 紫外线 （不感染细胞） 保留融合活性 病毒 （诱导细胞融合）
1.过程：
灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面
细胞膜被病毒颗粒穿通
细胞膜连接
细胞融合，形成杂种细胞
（细胞膜的流动性）
植物、动物细胞融合的比较
比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合
第二次筛选：选出产生所需抗 体的细胞
单克隆抗体的应用：
①在基础理论研究中具有重要意义
②在疾病诊断、治疗和预防方面， 具有特异性高、灵敏度高等优越性。 ③生物导弹
（ 4 ）培养液成分：水、葡萄糖、氨 基酸、无机盐、维生素和动物血清 与植物培养基的区别？ A。液态 B.含血清 C.葡萄糖 为什么使用葡萄糖而不是蔗糖？
动物细胞只能直接用葡萄糖 。
（ 5 ）细胞来源：动物胚胎或幼龄 动物的器官或组织。 为什么选用这种细胞材料？ 分裂旺盛，分化程度低，容易培养。
（3）工具酶 先把动物胚胎或幼龄动物的器官 或组织用胰蛋白酶分散成单个细胞， 说明细胞间的物质主要是 。 动物细胞培养适宜 PH为7.2—7.4， 蛋白质 可以用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？ 不能，胃蛋白酶的最适PH是2.0
过程：
动物细胞培养 动物胚胎或幼龄动物的 组织、器官 1、过程： 胰蛋白酶 细胞悬浮液 遗传物质 原代培养 未改变 10代细胞 细胞株
思考题
1.植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用 的方法有哪些？ 离心、电激等物理方法；PEG等化学方法 2.动物细胞融合能利用上述两类方法吗？ 还有其他方法吗？ 能 灭活的病毒进行诱导
3.植物体细胞杂交应先进行原生质体的融合
再进行组织培养形成完整的杂种个体，动 物细胞融合后能形成杂种动物个体吗？ 不能
细 植物组织培养 胞 植物细胞工程 工 植物体细胞杂交 程 动物细胞培养 常 用 动物细胞融合 的 技 单克隆抗体 术 动物细胞工程 手 胚胎移植 段 核移植
动物细胞培养
动物细胞培养条件：
1、无菌、无毒的环境 2、温度和PH 36.5+（-）0.5度 PH: 7.2--7.4 3、气体环境： O2和CO2（95% O2和5% CO2 ） O2维持细胞正常代谢， CO2维持PH
百度文库
血清（组织液、细胞外分泌液）
？
3.如何得到抗体？ 4.一种抗原侵入机体之后，产生的 抗体只有一种吗？
一种抗原上有不止一个抗原决定簇， 产生的抗体不止一种
特异性差、纯度低； 产量低、反应不灵敏
抗原 抗原不纯
刺激
动物体内
效应B
抗体 抗体不纯
筛选单一效应B细胞 数量少，不能产生大量抗体
-化学性质单一、特异性强的抗体 设计方案：
细胞膜的流动性、细胞膜的流动性 植物细胞全能性 去除细胞壁后诱 使细胞分散后诱 细胞融合方法 导原生质体融合 导细胞融合 物理（离心、振 物理、化学方法 诱导方法 荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 灭活的病毒
原理
用途
获得杂种植株
主要用于制备 单克隆抗体
提 问
1.抗体由何种细胞产生？
2.主要分布在哪里？
一个效应B细胞只分泌特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖 杂种细胞
单克隆抗体制备过程
注射 抗原
B细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选
杂交瘤细胞 细胞培养
筛选产生所需抗体的 细胞，继续培养
大量的能产生特定抗体的细胞群 单克隆抗体
体外培养 注射到小鼠腹腔
• 单克隆抗体制备过程中存在两次 筛选，分别筛选出什么样的细胞？ 第一次筛选：选出B细胞和骨髓 瘤细胞的杂合体
细胞的全能性
细胞增殖
培养基性质 固体培养基 液体培养基 蔗糖、植 葡萄糖、动 培养基特有 物激素 物血清 培养结果 细胞株（系） 植物体 快速繁殖培 获得细胞或 培养目的 育植株 细胞产物
动物细胞培养应用
• 大规模培养生产生物制品 • 作为基因工程中的受体细胞 • 培养的动物细胞可以用于检测有毒 物质，判断某种物质的毒性 • 为治疗和预防癌症及其他疾病提供 理论依据