高中生物第一部分微生物的利用实验1大肠杆菌的培养和分离学案浙科版选修1
2019-2020学年高中生物 第1部分 微生物的利用 第1课时 大肠杆菌的培养和分离学案 浙科版选修1
第1课时大肠杆菌的培养和分离[学习目标] 1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的基本条件1.微生物(1)概念：结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。
(2)用途：许多种抗生素来源于放线菌和霉菌；酒由酵母发酵产生；腐乳由红曲霉和毛霉发酵制成；微生物能用于治理环境污染，在新能源领域也将发挥巨大作用。
2.培养基(1)概念：培养基是微生物生存的环境和营养物质。
(2)分类：培养基按物理性质常可分为固体培养基和液体培养基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质，另外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
(3)酸碱性：细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长；因此，在制备培养基时需调节培养基的酸碱度。
特别提醒有关培养微生物所需营养的三点提醒(1)不同微生物对营养的需求不同，所以培养不同的微生物所需要的营养可能不同。
(2)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机物既是碳源又是氮源、能源。
(3)培养微生物时营养物质要协调。
营养物质过少不能满足微生物的营养需要，过多对微生物的生长有抑制作用。
3.灭菌操作(1)常见灭菌方法①对于培养皿、试管、三角瓶、镊子等常采用高压蒸汽灭菌法灭菌。
②对于不能加热灭菌的化合物，如尿素等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用纸包好灭菌。
③实验操作过程中，一般采用灼烧的方法对接种环进行灭菌。
(2)高压蒸汽灭菌操作的要求①灭菌前各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，在121℃下灭菌15min，实验过程中所需的棉花不能用脱脂棉，因为其易吸水，吸水后容易引起污染。
高中生物 第一部分 微生物的利用 1.1 大肠杆菌的培养和分离(2)素材 浙科版选修1
第1节大肠杆菌的培养和分离一、培养基的配置：我们用牛肉膏蛋白胨培养基来培养大肠杆菌。
配置1000ml的培养基（可由教师在实验前配置好，也可由学生分小组后在实验课上操作）。
1、配方：牛肉膏 5g蛋白胨 10gNacl 5g琼脂 20g2、称量：准确称取各成分。
3、溶化：加热熔化，用蒸馏水定容到1000mL。
整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
4、调pH：用1mol/L NaOH溶液调节pH至7.0——7.2。
5、灭菌：将配置好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞，包上牛皮纸，用皮筋勒紧，集中放入高压灭菌锅内，121摄氏度、100千帕压力下灭菌15min。
5——8套培养皿用旧报纸包作一包，于干热灭菌锅内160——170℃条件下灭菌2小时。
6、倒平板：灭菌后，待固体培养基冷却至50℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。
其过程是：①将灭过菌的培养皿放在火焰旁，右手拿装有培养基的三角瓶，左手拔出棉塞；②右手拿三角瓶，使三角瓶的瓶口迅速通过火焰；③用左手将培养皿打开一条稍大于三角瓶口的缝隙，右手将培养基倒入培养皿，立刻盖上皿盖；④待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置。
倒过来放置的目的是防止培养基冷却过程中形成的水滴落到培养基表面。
向培养皿中转移已灭菌的培养基时，也不要把培养基沾在皿壁上。
否则，空气中杂菌会在这些粘附培养基上繁殖，并污染皿内培养基。
二、大肠杆菌的接种、培养：1、接种常用的方法有平板划线法和稀释涂布平板法。
（1）平板划线法：①操作步骤：将培养皿底部用拇指和无名指固定成倾斜状态，在火焰旁将培养皿稍微打开。
在此同时，用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液，迅速送入培养皿内，在平板培养基的一边，作第1次平行划线 3～5条，转动培养皿约70°角，用烧过冷却的接种针，通过第1次划线部分作第2次平行划线，然后再用同样方法，通过第二次平行划线部分作第三次平行划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。
高中生物 第一部分《实验一 大肠杆菌的培养和分离》学案1 浙科版选修1
高中生物第一部分《实验一大肠杆菌的培养和分离》学案1 浙科版选修1微生物的利用大肠杆菌的培养和分离学案一、课标内容：进行微生物的分离和培养二、教学要求：基本要求1，进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2，进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
发展要求说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
说明实验2和实验3不作要求。
三、知识要点：1、微生物是指结构、形体的细胞、细胞或细胞结构的生物，如。
绝大多数微生物与传染病无关，对人类，有多种用途。
2、细菌是单细胞的生物，从形态上分为菌、菌、菌（弧菌）。
细菌结构上，有，无，只有一环状。
有些细菌外有荚膜和鞭毛。
有些细菌在不良的环境条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做。
当环境适宜时，休眠体又可以萌发，形成一个细菌。
细菌繁殖方式: 繁殖，速度很快。
单个细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做。
他是的重要依据。
细菌在基因工程中应用广泛，可为其提供载体，也可作为细胞。
细菌用革兰氏染色法分为革兰氏菌和菌两大类，区别在的成分不同。
大肠杆菌是革兰氏、厌氧的肠道菌。
3、培养基按物理状态分：培养基、培养基、培养基。
其中液体培养基常用于，半固体培养基可观察微生物的，固体培养基用于。
细菌扩大培养要用培养基，细菌分离要用培养基。
细菌的分离方法有两种：和。
是消除的通用方法，也是用于高表达量菌株的最简便方法之一。
划线分离法，方法；涂布分离法，单菌落，但操作。
不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方，细菌，霉菌。
通常细菌培养基要用和提取物来配制，还要加入一定的，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用配制或豆芽汁即可。
尽管培养基的配方各不相同，但一般都含有、、和等营养物质。
另外还需要满足微生物生长对、、等的要求。
如细菌需要环境，霉菌需要环境；厌氧生物需要控制含量。
有的还需要在培养基中加入特殊营养物质。
4、在培养微生物时，必须进行。
2020学年高中生物 第一部分 微生物的利用 实验1 大肠杆菌的培养和分离知能演练轻巧夺冠 浙科版选修1
实验1 大肠杆菌的培养和分离一、选择题1.有关大肠杆菌营养物质的叙述中，正确的是( )A．是碳源的物质也可能同时是氮源B．凡碳源都提供能量C．除水以外的无机物只提供无机盐D．无机氮源也能提供能量解析：选A。
是碳源的物质也可能同时是氮源，如碳酸氢铵、氨基酸等，既能为微生物提供碳源，同时也能提供氮源；凡碳源未必能为大肠杆菌提供能量，如无机的碳源；除水以外的无机物可能同时具有提供无机盐、碳源和氮源等多重作用；无机氮源对硝化细菌可以提供能量，但是对大肠杆菌不能提供能量。
2.在光照下，将等细胞数量的衣藻和大肠杆菌分别接种到只含无机盐的培养液中培养，结果是(虚线和实线分别表示大肠杆菌和衣藻的生长曲线)( )解析：选C。
衣藻是低等植物，能利用无机盐进行光合作用自己合成有机物。
大肠杆菌是异养生物，不能自己制造有机物只能摄取现成有机物，在只含无机盐的培养基上几乎不能生长。
3.培养基配制需要运用灭菌和消毒技术，但两者消灭的微生物种类和数量是不同的，下列哪一项能正确表示消毒结果和灭菌结果之间的关系( )解析：选B。
消毒的目的是杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)，灭菌则是杀死物体内外所有的微生物，包括孢子和芽孢。
所以，一般来说，灭菌的结果应包含消毒的结果，故选B。
4.下列所述环境条件下的微生物，能正常生长繁殖的是( )A．在缺乏生长素的无氮培养基中的圆褐固氮菌B．在人体表皮擦伤部位的破伤风杆菌C．在新配制的植物矿质营养液中的酵母菌D．在灭菌后的动物细胞培养液中的禽流感病毒解析：选A。
圆褐固氮菌是自生固氮菌，能合成生长素满足自身生长。
破伤风杆菌是严格厌氧生活的细菌，在表皮不能生长。
在新配制的植物矿质营养液中由于缺乏有机物，因此不能培养酵母菌。
禽流感病毒营严格的胞内寄生生活，在灭菌后的动物细胞培养液中不能培养禽流感病毒，通常在活的鸡胚细胞中进行培养。
5.有关涂布分离法的叙述，错误的是( )A．首先将菌液进行一系列的梯度稀释B．然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C．其核心是防止杂菌污染，保证培养液的纯度D．结果都是在培养基表面形成单个的菌落解析：选D。
高中生物第1部分微生物的利用实验1大肠杆菌的培养和分离学业达标测评浙科版选修
高中生物第1部分微生物的利用实验1大肠杆菌的培养和分离学业达标测评浙科版选修1、要从多种细菌中分离某种细菌，培养基要用()A、固体培养基B、液体培养基C、加青霉素的培养基D、加入高浓度食盐的培养基【解析】分离微生物应使用固体培养基。
【答案】A2、涂布平板操作需要用到()A、接种环、滴管、酒精灯B、接种环、移液管、酒精灯C、涂布器、移液管、酒精灯D、涂布器、接种环、酒精灯【解析】涂布平板操作过程中不需要接种环。
【答案】C3、采用干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射等几种方法，可分别杀死哪些部位的杂菌()A、接种环、吸管、培养基、接种室B、吸管、接种环、培养基、接种箱C、培养基、接种环、吸管、接种箱D、培养皿、吸管、培养基、双手【解析】干热灭菌主要对玻璃器皿进行灭菌，紫外线主要对接种室和接种箱进行空气和表面灭菌。
【答案】B4、下列操作错误的是()A、用酒精擦拭双手B、用氯气消毒水源C、实验室用紫外线进行消毒D、玻璃器皿(吸管、培养皿)用酒精直接擦拭即可达到彻底灭菌的目的【解析】玻璃器皿应用干热无菌箱在160～170 ℃加热1～2 h才能达到无菌目的。
【答案】D5、在涂布平板操作时错误的是()A、将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红B、取少量菌液滴加在培养基表面C、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10 s再用D、涂布时可转动培养皿，使涂布均匀【解析】涂布平板所用涂布器是玻璃器皿，不能在酒精灯火焰上灼烧，否则会变形，正确方法是沾取少量酒精，引燃。
【答案】A6、利用涂布分离法纯化的大肠杆菌，经培养后发现培养基上出现了多种菌落，不可能的原因是()A、培养基制备过程中被杂菌污染B、接种过程中，无菌操作不符合要求C、系列稀释时，无菌操作不符合要求D、由大肠杆菌的种类不同造成的【解析】大肠杆菌培养基中出现了多种菌落，说明污染了杂菌，杂菌可能来自培养基，也可能是因为操作过程中无菌操作不符合要求。
实验1大肠杆菌的培养和分离浙科版选修一PPT课件
总结词
培养基是培养和繁殖微生物的重要物质，制备培养基的过程需要精确控制各种成 分的比例和条件。
详细描述
在制备培养基时，需要选择适合大肠杆菌生长的营养物质，如碳源、氮源、水、 无机盐等，按照规定的比例混合，调节pH值，并进行灭菌处理，以确保培养基 的质量和安全性。
大肠杆菌的接种和培养
总结词
将纯化后的大肠杆菌接种到培养基中，控制适当的温度和湿 度等条件，促进其生长繁殖。
在实验过程中，应严格控制实 验条件，确保无菌操作，避免
污染。
对于菌种的来源和纯度，应进 行质量检查，确保实验结果的
准确性和可靠性。
在培养过程中，应定期观察并 记录菌落的生长情况，以便更 好地了解大肠杆菌的生长特性
。
可以尝试采用不同的培养基和 培养条件，以获得更优质的大
肠杆菌培养物。
对大肠杆菌培养和分离的实际应用思考
详细描述
在接种大肠杆菌时，需要将纯化后的大肠杆菌稀释并接种到 培养基中，然后将其放置在恒温摇床或恒温箱中进行培养。 在培养过程中，需要控制温度、湿度、气体浓度等条件，以 确保大肠杆菌的正常生长繁殖。
大肠杆菌的分离纯化
总结词
通过特定的分离纯化技术，将大肠杆菌从其他杂菌和杂质中分离出来，获得纯度较高的 菌株。
数据分析
对实验过程中记录的数据进行整 理和分析，得出大肠杆菌的生长
曲线、生长速率等参数。
结果对比
将实验结果与理论值进行比较， 分析实验误差产生的原因，提高
实验的准确性和可靠性。
实验讨论
根据实验结果，讨论大肠杆菌的 培养和分离过程中可能存在的问 题和改进措施，为后续实验提供
参考。
05 结论与思考题
实验结论总结
培养基成分
浙科版高中生物选修一实验一-大肠杆菌的培养和分离(共25张PPT)
平板划线接种
灼烧接种环
冷却
蘸取菌液
灼烧接种环
冷却
灼烧接种环 灼烧接种环
冷却 冷却
划线 （第一区域）
划线 （第二区域）
划线 （第三区域）
划线 （第四区域）
灼烧接种环
冷却
平板倒置放置培养
划线 （第五区域）
灼烧接种环
第五区域 第四区域
第一区域 第二区域
第三区域
1.为什么在操作的第一步以及每次划线 之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时， 仍然需要灼烧接种环吗？为什么？
液体培养基 扩大培养，工业生产
凝固剂 琼脂
固体培养基 分离纯化，鉴定菌种，计数，保藏
选择培养基 鉴定培养基
天然培养基 合成培养基
培养基成分
成分
作用
碳源
主要作能源物质
氮源
合成含N类化合物
无机盐
调节渗透压等
水
生长因子
调节促生长
主要来源
无机碳(CO2) 或有机碳(糖类) N2，NH3，铵，硝酸盐 尿素，牛肉膏，蛋白胨
(2)常用灭菌的方法：
1、灼烧灭菌
2、干热灭菌：160170 ℃下加热1-2h。
3、高压蒸汽灭菌：100kPa、 121 ℃下维持15-30min.
步骤一：制备LB培养基(液)
称量-计算-溶化-灭菌-倒平板
灭菌：加上封口膜，用牛皮纸包好放在高压蒸汽灭 菌锅中灭菌，1Kg压力灭菌15Min
倒平板过程总结
步骤三：大肠杆菌的分离纯化
分离方法：平板划线分离法
原理：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表 面。在数次划线后，可以分离到由一个细胞繁殖而 来的肉眼可见的子细胞群体，这就是菌落。
实验1大肠杆菌的培养与分离(浙科版选修1)
灭菌
① 概念：使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的 微生物，包括芽孢和孢子。 ② 方法：a 灼烧灭菌 b 干热灭菌 c 高压蒸汽灭菌
a.灼烧灭菌
注意适用范围
微生物的接种工具 (接 种环、接种针)或其 他金属用具直接在火 焰的充分燃烧层灼烧
b.干热灭菌 160－170℃ ；1－2h
能耐高温的需要保持干 燥的物品( 玻璃器皿)
答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。
大肠杆菌的培养和分离
培养基的 配制 灭菌
超净工件台 倒平板
接种液体 培养
划线分离 培养
菌种保存
3.微生物实验室培养的基本操作程序 1、器具的灭菌 2、培养基的配制 3、培养基的灭菌 4、倒平板 5、微生物接种 6、恒温箱中培养 7、菌种的保存
• 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 • 2纯化大肠杆菌 • 3将接种后的培养基和一个未接种的培 养基放入37℃恒温箱中培养12h和24h 后，观察并记录
1-3 现代生物技术
• • • • • • 一般而言，現代生物技术可以分成以下五种： 一、细胞工程 二、发酵工程 三、蛋白质工程 四、酶工程 五、基因工程
现代生物技术与传统生物技术的本质区别是 现代生物技术中用到了基因工程。
一、细胞工程
按照人们的需要和科学设计改变细 胞的遗传基础，并通过细胞(组织)培 养，细胞杂交(融合)，核移植和胚胎 移植等技术，重组细胞的结构和内含 物，以改变生物的结构和功能，快速 繁殖和培养出人们所需要的新物种的 生物工程技术。
8．灭菌: 将50ml培养基用玻棒转移至三角锥瓶中， 塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌 锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌 15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干 热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 9．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附 近倒平板。2d后观察平板，无杂菌污染才可用 来接种.
高中生物 第一部分《实验一 大肠杆菌的培养和分离》课件11 浙科选修1
平板划线接种
灼烧接种环
冷却
蘸取菌液
灼烧接种环冷却来自灼烧接种环 灼烧接种环
冷却 冷却
划线 （第一区域）
划线 （第二区域）
划线 （第三区域）
划线 （第四区域）
灼烧接种环
冷却
平板倒置放置培养
划线 （第五区域）
灼烧接种环
(1)常用消毒的方法：
1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min（牛奶） 3、化学药剂消毒法:用70%酒精进行皮肤消毒;氯 气消毒水源 4、紫外线消毒（空气）
(2)常用灭菌的方法：
1、灼烧灭菌
2、干热灭菌：160170 ℃下加热1-2h。
作用
主要作能源物质 合成含N类化合物
调节渗透压等
主要来源
无机碳(CO2) 或有机碳(糖类)
N2，NH3，铵，硝酸 盐
尿素，牛肉膏，蛋白 胨
水 生长因子
调节促生长
维生素，AA，碱基等
无菌技术
• 消毒：较为温和的方法，如酒精 注：消毒不能杀死芽孢
• 灭菌：强烈，所有，完全无菌
• 灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通 也是最重要的技术。
步骤一：制备LB培养基(液)
• 称量-计算-溶化-灭菌-倒平板
• 灭菌：加上封口膜，用牛皮纸包好放在高 压蒸汽灭菌锅中灭菌，1Kg压力灭菌15Min
步骤一：制备LB培养基(液)
• 倒平板
倒平板过程总结
• 紫外灯，过滤风，酒精灯，酒精棉球 • 在火焰旁右手3指拿锥形瓶，2指拿封口膜 • 使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰 • 左手将培养皿打开一条缝隙，右手将培养
高中生物第1部分微生物的利用实验1大肠杆菌的培养和分离教案浙科版选修1
实验1 大肠杆菌的培养和分离一、大肠杆菌1．大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。
2．在肠道中，大肠杆菌一般对人无害，但也有一些菌株可以侵袭肠黏膜并产生毒素，任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。
3．大肠杆菌是基因工程技术中被广泛采用的工具。
二、实验内容1．本实验的内容是将大肠杆菌扩大培养和划线分离。
分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。
2．本实验用LB液体培养基(通用的细菌培养基)扩大培养大肠杆菌。
培养后再在LB固体平面培养基上划线进行分离，随后培养基上便会形成一个个单独的菌落。
三、细菌的培养和分离1．细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20分钟分裂一次。
人们在培养细菌时，一般用接种环转移带菌的培养物。
接种时，先将接种环在明火上烧红后冷却，再操作。
2．细菌的分离(1)划线分离法：在液体培养基中，只要接种后培养8 h，每毫升培养基中就有几亿个细菌。
可用接种环蘸菌液在含有固体培养基的培养皿平板上划线，在划线过程中接种环上的菌液逐渐减少，因此，划线到最后，可使细菌间的距离加大。
在固体培养基培养10～20 h后，可由一个细菌产生单菌落，菌落不会重叠。
如果再将每个菌落分别接种至含有固体培养基的试管斜面上，在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个细菌产生的后代。
这种方法也可用于分离细菌，将污染的杂菌除去。
接种环在取菌种前和划线前都要灼烧、而后都要冷却、操作完毕后又要灼烧的原因是什么？【提示】取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。
(2)涂布分离法：先将培养的菌液稀释，通常稀释10－5～10－7倍，然后取0.1 mL不同稀释度的稀释菌液加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。
浙科版高中生物选修1 第一部分 实验1 大肠杆菌的培养和分离_教案设计
大肠杆菌的分离与培养【教学目标】（一）知识目标1．描述大肠杆菌的特征；2．说出细菌培养和分离的方法及灭菌的过程；3．说明大肠杆菌分离和培养的条件和操作要求的原理。
（二）能力目标1．通过大肠杆菌分离培养，学会划线分离的原理和方法；2．通过描述大肠杆菌的扩大培养的实验过程，分析实验结果，初步体验实验设计；3．通过实际操作实验过程，解决遇到的实际问题，提升问题分析能力。
（三）情感态度与价值观目标1．在实验操作的过程中，初步形成严谨的实验精神；2．在分析实验结果的过程中，体会生物体的奥妙；3．在小组合作讨论的过程中，体验团队合作精神。
【教学重点】1．大肠杆菌的划线分离；2．大肠杆菌的无菌操作和灭菌技术；3．大肠杆菌的特点及实验室应注意的安全事项。
【教学难点】1．大肠杆菌实验的无菌操作技术及实验室安全事项的解读；2．大肠杆菌的划线分离。
【教学过程】一、创设情境，导入新知【教师活动】教师展示饮用水净化、消毒灭菌、检测、出品的简略过程，抛出在检测这一过程中主要是以某一微生物作为指标来进行检测，从而引出本次实验的材料—大肠杆菌（展示图片）。
饮用水这一素材与我们的实际生活相联系，有利于吸引学生的兴趣。
【学生活动】观看PPT，听讲二、师生对话，构建新知【教师活动】抛出“为什么大肠杆菌能够作为饮用水是否合格的指标呢？”“大肠杆菌是如何被分离的呢？”三个问题，请学生就此三个问题进行思考讨论。
本环节有利于学生明确本实验材料的特点，明确实验目的【学生活动】思考，并查看书本，回答：大肠杆菌是革兰氏阴性菌，兼性厌氧【教师活动】总结学生的答案，并对学生的表现做出形成性评价，随后结和PPT上呈现大肠杆菌的有关信息，进行讲解。
大肠杆菌是革兰氏阴性菌，兼性厌氧。
是人和动物肠道中的正常栖居菌，与人终身相伴。
其代谢活动能抑制肠道内分解蛋白质的微生物生长，减少蛋白质分解产物对人体的危害，还能合成维生素B和K，以及有杀菌作用的大肠杆菌素。
正常栖居条件下不致病，但若进入胆囊、膀胱等处可引起炎症。
高中生物第一章实验一大肠杆菌的培养和分离教学案浙科版选修1(最新整理)
实验一大肠杆菌的培养和分离1。
培养基中需含有碳源、氮源、水和无机盐等营养物质.2..本实验用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌,用LB固体培养基分离大肠杆菌。
3。
消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物;而灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。
4.。
实验室常用煮沸消毒法、紫外线或化学药剂进行消毒；常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高一、微生物1．概念：微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物。
2．利用：生产抗生素，制作发酵食品，治理环境污染等。
二、培养基1．概念人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质.2．营养构成各种培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐及生长因子，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。
3．培养基的类型(1)按物理性质分：固体培养基、半固体培养基、液体培养基。
(2）按目的用途分:鉴别培养基、选择培养基。
4．微生物生长对特殊营养物质的要求（1)细菌培养基要用蛋白胨和酵母菌提取物来配置,细菌喜荤.（2)霉菌培养基一般用无机物配制或加蔗糖的豆芽汁即可,霉菌喜素。
5．微生物生长对pH的要求细菌要求在中性偏碱（6.5~7。
5)的环境中生长；真菌要求在中性偏酸（5。
0～6.0）的环境中生长。
三、无菌技术1．获取纯净培养物的方法获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，具体操作如下：(1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。
（2)将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。
(3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。
（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触. 2．消毒和灭菌(1）概念：[填表］项目方法结果常用的方法消毒较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分微生物（不包括芽孢和孢子）煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、过滤灭菌（2）常用方法：[连线]四、分离细菌的两种方法比较项目划线分离法涂布分离法五、大肠杆菌的培养与分离1．大肠杆菌（1)特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌.（2)繁殖:以分裂的方式繁殖,分裂速度很快。
2018-2019学年浙科版选修1 第一部分 第1课时 大肠杆菌的培养和分离 学案
探究 2——归纳概括
2018-2019 学年
1．培养基的成分
营养物质
定义
作用
主要来源
碳源
能提供碳元素的物质
构成生物体的细胞物质和 一些代谢产物，有些也是 异养生物的能源物质
无机碳源：CO2、 NaHCO3 等；有机碳 源：糖类、脂肪酸、 石油等
氮源
能提供氮元素的物质
合成蛋白质、核酸及含氮 的代谢产物
常用方法
消灭微生物的数量 芽孢和孢子能否被消灭
消毒
灭菌
较为温和
强烈
煮沸消毒、化学药剂消 灼烧灭菌、干热灭菌、
毒、紫外线消毒
高压蒸汽灭菌
部分生活状态的微生物
全部微生物
不能
能
2．几种消毒和灭菌方法及其适用范围
类型
适用范围
操作方法
煮沸 消毒法
日常生活
100 ℃煮沸 5～6 min
消毒 方法
巴氏 消毒法
化学 药剂
分，就不能用此方法，A 项错误；超净工作台或接种箱用紫外灯灭菌 30 min，同时还需打开
过滤风，C 项错误；灭菌后的培养基、器具不一定达到了完全无菌，而且要防止二次污染，
D 项错误。
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第一部分微生物的利用实验1 大肠杆菌的培养和分离
一、大肠杆菌
1．大肠杆菌属于革兰氏________性菌，为________型的肠道杆菌。
2．结构：属于________生物。
3．用途：是在________技术中被广泛采用的工具。
4．与人类的关系：它生活在人类的________中，一般对人________(“有”还是“无”)
害。
有一些菌株对人体能产生危害，因为它们可以侵蚀________并产生________。
任何
．．大肠杆菌如果进入人的________系统，都．会对人体产生危害。
答案：1.阴兼性厌氧
2．原核
3．基因工程
4．肠道无肠黏膜毒素泌尿
二、细菌的培养和分离
1．细菌的培养：
(1)细菌的繁殖：细菌以________的方式繁殖，分裂速度很快，约________分裂一次。
(2)培养细菌的方法：培养细菌，需要将________________________________________________________________________ 转移到________中，一般用________来转移带菌的培养物。
(3)用不同培养基培养细菌的差别：
(1)分离的方法与特点：分离细菌有________和________2种。
前者方法简单，后者操作复杂，但是______________________________________________________________更易分开。
(2)本实验进行大肠杆菌分离，是用________法，就是在________培养基上进行细菌的________。
答案：1.(1)分裂20 min (2)已有细菌的培养物新的培养基接种环(3)几亿划线分离细菌紧紧聚集在一起
菌落
2.(1)划线分离法涂布分离法单菌落(2)划线分离
固体平面划线培养
三、灭菌操作
1．灭菌操作的原因：为了获得________的培养物，其关键是防止外来________的入侵污染。
因此，在培养微生物时必须进行________操作。
2．无菌操作的条件：
(1)首要条件是________必须是无菌的；
(2)________必须是无菌的；
(3)________的过程必须是无菌的等。
答案：1.纯净杂菌无菌
2．(1)各种器皿(2)各种培养基(3)菌转移操作
四、大肠杆菌的培养和分离实验
1．实验目的：
(1)进行大肠杆菌的________，利用________培养基进行细菌培养的操作；
(2)进行大肠杆菌的________，用________培养基进行细菌的________培养；
(3)说明大肠杆菌培养的条件和操作要求的原理。
2．实验步骤
(1)灭菌：用________在________压力下对LB液体培养基、LB固体培养基和培养皿进行灭菌________min。
(2)自________向________中转移并分装固体培养基：
待冷却至______左右，将三角锥形瓶中的______培养基，在______上分装至几个______中，制成______培养基。
(3)将大肠杆菌自________转移到________中的________培养基中培养：
将大肠杆菌用________在无菌操作下接种至三角锥形瓶中的________培养基中，在________摇床振荡培养________，完成大肠杆菌的培养。
(4)将菌液在________培养基上进行________分离：
从前一步培养得到的菌液中获取菌种，用________以__________法接种至第二步所制得的__________培养基中，在________℃恒温箱中培养________h后观察菌落。
(5)菌种保存：
在无菌操作下将________用________取出，再用________法接种在________上，________培养________后，________冰箱保存。
3．分离实验的结果及相应结论：
观察中若看到在________的末端出现________，则表明菌已被分离了。
4．大肠杆菌分离的用途：________的通用方法，也是用于________的最简便方法之一。
答案：1.(1)扩增液体(2)分离固体平面划线
2．(1)高压锅 1 kg 15 (2)三角瓶培养皿60 ℃
固体超净台培养皿固体平面(3)斜面三角瓶液体
接种环液体37 ℃12 h (4)固体平面划线接种环
划线固体平面37 12～24 (5)单菌落接种环划线斜面37 ℃24 h 4 ℃3．划线不连续的单个菌落
4．消除污染杂菌筛选高表达量菌株。