克百威降解菌株HQ_C_01的筛选及培养基优化
开菲尔粒中高产蛋白酶菌株的筛选及培养基优化
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｔｅ ｎ ｓ ￣ ａ ｉ ｒ ｌ ｓ ， ｗｈ ｉ ｃ ｈ ｃ ｏ ｕ ｌ ｄｐ ｒ ｏ ｄ ｕ ｃ ｅｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ａ ｓ ｅ ａ ｎ ｄｈ ａ ｄｏ ｂ ｖ ｉ ｏ ｕ ｓ ｈ ｙ ｄ ｒ ｏ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｃ ｉ ｒ ｃ ｌ ｅ ｓｏ ｎｄ ｅ ｆ ａ ｔ ｔ ｅ ｄｍｉ ｌ ｋｐ ｏ ｗｄ ｅ ｒ ｐ ｌ ａ ｔ ｅ ， ｗｅ ｒ ｅｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｄｆ ｉ ＇ ｏ ｍ
ｉｌ ｍ ｋ ｐ ｌ ａ ｔ ｅ ，ｗ ｅ ｒ ｅ ｕ ｓ ｅ ｄ ｔ ｏ ｂ ｅ ｉ ｓ ｏ ｌ ａ ｔ ｅ ｄ ａ ｇ ａ ｉ ｎ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｈ ｇ ｌ ｉ ｍｅ － ｅ ｎ ｚ ｙ ｉ Ｄ ＿ ｅ ａ ｃ ｔ ｉ ｖ ｉ ｔ ｙ ｃ ｕ ｒ ｖ ｅ ． Ｔ ｈ ｅ ｓ ｔ ｒ ａ ｉ ｎ Ｋ ｘ － ７ ｈ ａ ｄ ｈｅ ｔ ｓ ｔ ｒ ｏ ｎ ｇ ｅ ｓ ｔ ｐ ｒ ｏ ｔ ｅ ａ ｓ ｅ ｃｔ ａ ｉ ｖ ｉ ｙ（ ｔ ｒ ｅ ａ ｃ ｈ ｅ ｄ １ ４ ６ ． ４ ３ Ｕ Ｉ ｍＬ ） ｗ ｈ ｎｆ ｅ ｅ ｒ ｍｅ ｎｔ ｅ ｄｆ ｏ ｒ ３ ０ｈ ． Ｓ ｉ ｎ ｇ ｌ ｅ ｆ ａ ｃ ｏｒ ｔ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｍｅ ｎ ￣ｗｅ ｒ ｅ ｓｅ ｕ ｄｔ ｏｏ ｐ ｉ ｔ ｍｉ ｚ ｅ ｈｅ ｔ ｍｅ ｉ ｄ ｕ ｍａ ｔ ｉ ｆ ｒ ｓ ｔ ｆ ｏ ｌ ｌ ｏ ｗ ｅ ｄｗ ｉ ｈｔ ｔ ｈｅ ｍｏ ｓ ｔ ｉ ｍｐ ｏｒ ｔ ａ ｎ ｔ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓ ｓ ｅ ｌ ｅ ｃ ｉ ｔ ｏ ｎ ｉｔ ｗ ｈ Ｐ ｌ ａ ｃ ｋ ｅ ￣ － Ｂ ｕ ｍａ ｎ（ Ｐ Ｂ ） ｄ ｅ ｓ ｉ ｇ ｎ ． ｈｅ Ｔ ｅｓ ｒ ｕ ｌ ｔ ｓ ｅｖ ｒ ｅ ａ ｌ ｄ ｅ ｔ ｈ ａ ｔ ｔ ｈ ｒ ｅ ｅ ｍｐ ｉ ｏ ｒ ｔ ａ ｎ ｔ ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ ｓ （ ｆ ｒ ｕ ｃ ｔ ｏ ｓ ｅ ， ｃ ａ ｓ ｅ ｎ ｉ ｎｄ ａ Ｔ ｉ ｒ ｔ ｏ ｎ Ｘ－ １ ０ ０ ） ｈ ａ ｄ
气相色谱法测定大豆中克百威及其代谢物的残留量
表１ 克百威添加回收率实验结果
量：１ µL［ 。 ３－４］
３ 结果
３．１ 标准曲线与检测限 准确称取克百威和３ － 羟基克百威标准样品，用丙酮
作溶剂，分别配制成质量浓度为０．０５、０．１、０．２、０．５、１．０、
样品 添加质量分数／（ｍｇ·ｋｇ－１）
大豆
０．０５
０．２０
大豆植株
０．０５
０．２０
１ 材料与方法
１０ ｍＬ，加１０ ｍＬ×３石油醚，继续浓缩至约１０ ｍＬ。
１．１ 仪器设备 安捷伦７ ８ ９ ０ Ａ 气相色谱仪及氮磷检测器（ 美国
Ａ ｇ ｉ Ｌ ｅ ｎ ｔ 公司） 、往复式震荡器（ 中国深圳） 、旋转蒸发 器（日本Ｙａｍａｔｏ公司）、微型植物试样粉碎机（河北黄骅 中 兴 仪 器 有 限 公 司 ） 、锥 型 瓶 （ ５ ０ ｍ Ｌ 具 ２ ４ ／ ２ ９ 磨 口 玻 璃 盖） 、抽滤瓶（５００ ｍＬ）、布氏漏斗（１００ ｍＬ）、圆底烧瓶 （１００、２５０ ｍＬ） 。
土壤
０．０５
０．２０
回收率／ ％ ８７．２ ８４．８ ８７．７ ８５．９ ８８．６ ８７．１
变异系数／ ％ ４．０ ５．０ ４．２ ４．０ ３．８ ３．６
２．０、５．０ ｍｇ／Ｌ的标准梯度溶液，在上述条件下，克百威的 相对保留时间为５．５ ｍｉｎ，３－羟基克百威相对保留时间为 ６．１ ｍｉｎ，克百威和３－羟基克百威标准溶液色谱图见图１。 克百威和３－羟基克百威最低检测量均为５×１０－１１ ｇ。 标准曲 线的线性范围为０．０５￣５．０ ｎｇ，标准曲线见图２。
１．２ 主要试剂 二氯甲烷、正已烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮均为农
残级，氯化钠、无水硫酸钠，酸性氧化铝、硝酸银均为分 析纯。 克百威、３－羟基克百威标准样品纯度为９９．０％ 。
蔬菜、茶叶中克百威酶联免疫检测方法的建立
何方洋，冯才伟，杜美红，等.蔬菜、茶叶中克百威酶联免疫检测方法的建立[J ].江苏农业科学,017,45(20) =213 -216.doi ： 10.15889/j . issn . 1002 - 1302.2017. 20. 053蔬菜、茶叶中克百威酶联免疫检测方法的建立何方洋12,冯才伟12,杜美红3,王建霞12,桑旭升12,冯静12(1.北京勤邦生物技术有限公司，北京102206; 2.北京市食品安全免疫快速检测工程技术研究中心，北京102206;3.北京市理化分析测试中心，北京100094)摘要:为建立快速检测蔬菜、茶叶中克百威残留的酶联免疫方法，合成克百威半抗原,并与载体蛋白偶联合成人工抗原，然后免疫制备其单克隆抗体,在筛选克百威单克隆抗体的基础上，建立酶联免疫检测方法。
结果表明,L o g iL o g 拟合标准曲线为y =-2. 054*+0. 667 3,相关系数（）为0.998 5,半数抑制浓度（IC 5。
）为2. 3 pg /L ，对蔬菜、茶叶样本 的检测限分别为10、5 |xg /k g ，加标回收率为79.2% ~102.7%,样本重复检测的变异系数为5.5% ~11.5%。
结果表 明，建立的酶联免疫检测方法具有较好的特异性、准确性和重复稳定性，可用于蔬菜、茶叶中克百威残留的检测。
关键词:酶联免疫法;克百威;蔬菜;茶叶;载体蛋白;单克隆抗体;半数抑制浓度;加标回收率残留；检测 中图分类号：TS 207.5+3文献标志码：A文章编号：1002 - 1302(2017)20 -0213 -03克百威商品名呋喃丹，是一种广谱、高效、药效残留期长 的内吸性杀虫、杀螨、杀线虫剂，广泛应用于蔬菜、水果和粮食 作物等的害虫防治中[1]。
因克百威对人和动物有很高的毒 性，并且不易降解，容易造成环境污染，我国已规定食品中克 百威的最大残留限量，但违规使用现象仍然较多，因此加强对 克百威农药残留的检测十分必要[2_5]。
一株克百威降解菌的分离及其降解特性研究
一株克百威降解菌的分离及其降解特性研究余磊;秦宝福;冯贵颖;许炳云;赵宇蕾;李晓艳【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2009(018)003【摘要】从杨凌某农药厂排污口处的污泥中分离得到1株能有效降解克百威的细菌,命名为KBW-1.根据其生理生化特征,将该菌株初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas sp.).该菌株可以在108 h内完全降解200 mg/L的克百威.KBW-1降解克百威的最适pH为7.0,最适温度为30℃, 最适接种量为10%.克百威可作为KBW-1的唯一氮源和碳源,但当其作为氮源时,可以更好地被降解.【总页数】5页(P277-281)【作者】余磊;秦宝福;冯贵颖;许炳云;赵宇蕾;李晓艳【作者单位】西北农林科技大学,资源环境学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学,理学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学,生命科学学院,陕西杨凌,712100;西北农林科技大学,资源环境学院,陕西杨凌,712100【正文语种】中文【中图分类】X172【相关文献】1.一株丁草胺降解菌 BTC－3的分离鉴定及降解特性研究 [J], 马吉平;陈庆隆;王洪秀;姚健;陈柳萌2.一株苯酚降解菌分离及降解特性研究 [J], 杨世东;孔龙;廖路花;陶文鑫;姚丽强;张星楠3.一株溴氰菊酯降解菌的分离鉴定及降解特性研究 [J], 苏志俊;刘永涛;徐春娟;丁浩;余琳雪;艾晓辉4.一株耐盐石油烃降解菌的分离、鉴定及其降解特性研究 [J], 龚汉意;邓春萍;柯强;邱肃爽;杜国勇5.一株耐盐吡啶降解菌的分离及降解特性研究 [J], 周旭华;刘鹏程;王伟;丁静;苏悦因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
克百威丙硫克百威和丁硫克百威的残留与降解研究进展
克百威丙硫克百威和丁硫克百威的残留与降解研究进展
谢恩平;林亲铁;杨仁斌
【期刊名称】《农药科学与管理》
【年(卷),期】2002(23)3
【摘要】本文综述了近几年国内外对克百威、丙硫克百威、丁硫克百威的降解残留的重要进展，阐述了它们的降解和残留与其施用量、土壤类型、温湿度、降雨量等有关，它们的降解方式主要有水解、光解、微生物分解3种方式，指出了当前用于检测其残留量一些常用方法。
【总页数】4页(P18-20,28)
【作者】谢恩平;林亲铁;杨仁斌
【作者单位】湖南省植保植检站，湖南，长沙，410127;湖南农业大学资源环境学院，湖南，长沙，410128;湖南农业大学资源环境学院，湖南，长沙，410128【正文语种】中文
【中图分类】S481+．8;S482．3
【相关文献】
1.丁硫克百威、克百威在白菜中的降解 [J], 宋禹;王强;张昌朋;吴莉宇;何书苗
2.克百威、丁硫克百威和丙硫克百威登记现状及其潜在风险关注分析 [J], 朴秀英;吕宁;林荣华;宗伏霖;刘学
3.丁硫克百威原药和制剂对蚯蚓的毒性及其降解产物克百威的动态变化 [J], 潘波;方佳;林勇;姜蕾;楚小强;刘迎
4.丙硫克百威及其主要代谢物在棉田中的残留降解研究 [J], 龚道新;郭正元;周作明;
杨仁斌;樊德方
5.气相色谱-质谱法测定豇豆中丁硫克百威、克百威和3-羟基克百威的残留 [J], 方宗壮;谢艳丽;王萌;张宇;吉哲蓉;李慧;章程辉
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克百威快检试剂盒质量评价样品的分析
分析检测克百威快检试剂盒质量评价样品的分析叶雅真1，骆和东1,2*（1.厦门市食品药品质量检验研究院，福建厦门 361012；2.睿科集团（厦门）股份有限公司，福建厦门 361015）摘 要：为保证克百威胶体金快检试剂盒质量评价工作的顺利开展，本研究依据《食品快速检测方法评价技术规范》制定制样方案，对克百威制备样品进行均一性和稳定性考察。
考察结果显示，克百威制备样品的均匀性和稳定性均符合要求，在制备完成的10 d内可用于克百威快检试剂盒的质量评价。
关键词：克百威；胶体金免疫层析；质量评价；食品安全快速检测Analysis of Evaluation Samples for the Quality Assessment of Kits for Rapid Detection of CarbofuranYE Yazhen1, LUO Hedong1,2*(1.Xiamen Institute for Food and Drug Quality Control, Xiamen 361012, China; 2.RayKol Group (Xiamen)Co., Ltd., Xiamen 361015, China)Abstract: In order to ensure the smooth development of the quality evaluation of carbofuran colloidal gold rapid detection kit, the sample preparation scheme was formulated according to the Technical Specification on the Assessment of Food Rapid Detection, and the homogeneity and stability of carbofuran prepared samples were investigated. The investigation results showed that the stability and uniformity of the samples prepared by carbofuran were all meet the requirements, which could be used in 10 days after prepared.Keywords: carbofuran; colloidal gold immunochromatography; quality assessment; rapid detection for food safety克百威是一种氨基甲酸酯类农药，对人体具有胆碱神经毒性，中毒表现有流涎、流泪、瞳孔缩小及肌束震颤等，广泛用于果蔬中蚜虫、地老虎、线虫等病虫害的防治[1-2]。
克百威的微生物降解研究进展
关键 词 ：克 百成 ；微 生 物 降 解 ；降 解 途 径 ；发 展 方 向
中 图分 类 号 ：Ｓ ８ １２ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ：பைடு நூலகம் ０ ．６ １ （ ０ ０ ４０ ８ －３ ０ ８ １ ３ ２ １ ）０ －０ ５ ０
Ｒｅ ｅ ｒ ｈ Ｐｒ ｇ ｅ ｓ ｏ Ｏ ｇ ａ ａ ｉ ｎ ｏ ｒ ｆ ｒ ｎ ｓ ａ ｃ ｏ ｒ ｓ ｎ Ｂｉｄｅ ｒ ｄ ｔ０ ｆＣａ ｂｏ ｕ ａ
途 径 。
２ 克百威的降解途径
２ １ 水 解 ．
克 百 威 在 水 分 子 作 用 下 生成 氨 基 甲 酸 和 酚 ，氨 基 甲 酸 很 快 分 解 成 甲胺 和 二 氧 化碳 ，而 酚则 被 氧 化 成 多 羟 基
衍生物 ，再发 生环 断裂 ，最 终生 成 Ｃ 和 Ｈ ０等 Ｏ 、Ｎ ： 简单化合物 。
２ ２ 光解 ．
１ 克百威的使用情况
克 百 威 是 １ 常 用 的 高效 广 谱 氨 基 甲酸 酯类 杀 虫 剂 种
克 百 威 对 光 稳定 ，光 照下 克 百 威 只发 生轻 微 的 氧 化
反应 。
２ ３ 微 生 物 降解 ．
和杀螨剂 ，１６ ９ ７年 由美 国 Ｆ Ｃ公 司首次合 成 ，１６ Ｍ ９ ８年
从 目前 情 况来 看 ，克 百 威 的使 用 量 还 相 当 大 ，并 且 还 伴 随 着 一些 不 当 的使 用 方 法 ，导 致 其 在 土 壤 和农 产 品 中大 量 残 留 ，对人 体 和 动 物 已经 造 成 了 严 重 威 胁 … 。 因 此 ， 如 何 解 决 克 百威 在 自然 界 中 的残 留 和污 染 显 得 越 来 越 重 要 。利 用 微 生 物 降 解 农 药 残 留 是 １种 快 速 、 有 效 的
【CN110407943A】一种克百威农药的纳米抗体及其制备方法和应用【专利】
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910341232.6(22)申请日 2019.04.25(71)申请人 华南农业大学地址 510642 广东省广州市天河区五山路483号(72)发明人 王弘 张瑾如 杨金易 徐振林 孙远明 沈玉栋 肖治理 (74)专利代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 44102代理人 段卉(51)Int.Cl.C07K 16/44(2006.01)C12N 15/13(2006.01)C12N 15/70(2006.01)C12N 1/21(2006.01)G01N 33/53(2006.01)C12R 1/19(2006.01) (54)发明名称一种克百威农药的纳米抗体及其制备方法和应用(57)摘要本发明公开了一种克百威农药的纳米抗体及其制备方法和应用，该纳米抗体，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；编码其的基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
本发明得到一种针对克百威农药的纳米抗体，该纳米抗体能够检测克百威农药，且检测结果准确、效果好、稳定性好，在高温和有机溶剂的条件下还有很好的检测效果。
该抗体不仅可以广泛的应用于农产品中克百威农药残留的检测；还可以作为前体，通过随机或定点突变技术进行改造，能够获得性质(亲和性、特异性、稳定性等)更好的突变体，用来发展进一步用于食品、医药、农业等领域，有很大的应用推广价值。
权利要求书1页 说明书9页序列表2页 附图3页CN 110407943 A 2019.11.05C N 110407943A1.一种特异性识别克百威的纳米抗体，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种编码特异性识别克百威纳米抗体的基因，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种重组载体，其特征在于，为连接有权利要求2所述基因的载体。
丁硫克百威的作用,丁硫克百威的制备方法
丁硫克百威的作用，丁硫克百威的制备方法丁硫克百威又叫丁硫威、好年冬、安棉特，属于氨基甲酸酯类，其毒性机理是抑制昆虫乙酰胆碱酶（Ache）和羧酸酯酶的活性，造成乙酰胆碱（Ach）和羧酸酯的积累，影响昆虫正常的神经传导而致死，今天就为大家介绍一下丁硫克百威的作用，丁硫克百威的制备方法。
丁硫克百威的作用：对天敌和有益生物毒性较低，即克百威农药低毒化衍生物，属高效安全、使用方便的杀虫杀螨剂，是剧毒农药克百威较理想的替代品种之一。
其杀伤力强，见效快，具有胃毒及触杀作用。
特点是脂溶性、内吸性好、渗透力强、作用迅速、残留低、有较长的残效、使用安全等，对成虫及幼虫均有效，对作物无害。
可防治柑橘等水果及蔬菜、玉米、棉花、水稻、甘蔗等多种经济作物害虫，对蚜虫的防治效果尤为优异。
如：柑桔锈壁虱、蚜虫、潜叶娥、介壳虫，棉花蚜虫、棉铃虫、棉叶蝉，果树蚜虫，蔬菜蚜虫、蓟马，甘蔗蔗螟、玉米蚜虫、蝽蟓、茶树蚜虫、小绿叶蝉，水稻蓟马、螟虫、叶蝉、飞虱，麦类蚜虫等。
丁硫克百威的制备方法：二正丁氨基氯化硫的制备加入二正丁胺、石油醚（60～90℃），搅拌冷却至0℃，然后缓慢滴加二氯化二硫，维持0～10℃，加毕后保温反应2h，二正丁胺、二氯化二硫、硫酰氯的配比为1:0.6:0.55(mol)，收率88%。
丁硫克百威的合成二正丁氨基氯化硫与克百威反应，配比为1:1，反应过程加适量碱液，反应温度10～20℃。
反应时间2h。
反应毕加水搅拌10min，过滤，滤潭为未反应克百威，可回用。
滤液分层，油层减压脱溶，收率90%。
中间体羟基化合物的合成方法见克百威。
也有文献报道，由环己酮和异丁醛出发，经过叉醇醛缩合、氯化反应、芳环化反应、水解反应、闭环反应五步合成。
其特点是由非芳香族化合物合成，是一种选择性很高的合成路线。
丁硫克百威的作用，丁硫克百威的制备方法就介绍到这里，相信大家看后都有所了解，丁硫克百威低毒化品种之一，经口毒性中等，经皮毒性低，无累计毒性，无畸形，致癌和致突变。
克百威残留降解菌制剂研制及其应用的开题报告
克百威残留降解菌制剂研制及其应用的开题报告一、研究背景和意义克百威是一种广泛使用的草甘膦类除草剂，可在农田、草坪、公园等地使用。
然而，它的过度使用也会导致对环境和生态系统产生严重影响，比如导致土壤生态系统和微生物受损害。
在这种情况下，寻找一种有效的方法来减少草甘膦类除草剂在环境中的残留和对环境的影响就变得十分重要。
目前已经有相关研究表明，细菌可以降解草甘膦，但是由于环境因素的不同，菌群的降解效率也会有所不同，因此，寻找一种适用于不同环境的生成率稳定的降解菌制剂是十分必要的。
二、研究内容和方法1. 研究内容本次研究的主要内容是制备一种稳定的降解菌制剂来减少草甘膦在环境中的残留，同时，测定其在不同环境下的降解效率和影响因素。
2. 研究方法本次研究将从以下几个方面进行：（1）筛选合适的降解菌：通过微生物实验室实验，筛选出一种在不同环境下降解草甘膦效果较好的菌株。
（2）制备降解菌制剂：将筛选得到的菌株进行培养和提取，然后制备成能稳定保存、使用的菌制剂。
（3）测定降解效率：通过实验室实验，测定制剂在不同环境下的降解效率，比如土壤、水体等。
（4）影响因素分析：研究影响制剂降解效率的因素，如温度、pH、环境中其他微生物的影响等。
三、研究预期结果（1）制备出一种适用于不同环境的稳定降解菌制剂；（2）测定该制剂在不同环境下的降解效率和影响因素；（3）验证该制剂对减少草甘膦在环境中残留的有效性。
四、研究的意义和应用价值（1）减少草甘膦对环境和生态系统的损害，为生态环境的保护提供技术支持；（2）为农民提供一种环保的替代方法，减少人造化学物质对环境的污染；（3）可作为一种新型的环保制剂，为环保领域的其他研究提供参考和借鉴。
UPLC-MS-MS法测定水产品中克百威及其代谢物
UPLC-MS-MS法测定水产品中克百威及其代谢物何亚斌【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2012(028)004【摘要】采用超高效液相色谱-串联质谱技术建立同时测定水产品中克百威及其代谢物(3羟基克百威、3酮基克百威和呋喃酚)含量的方法.样品经乙腈提取,正己烷脱脂,HLB固相萃取柱净化,色谱柱分离,电喷雾串联四极杆质谱进行检测,采用多反应监测分析,并对液质分离条件及参数和样品前处理条件进行优化.结果显示,克百威及其代谢物在0.08～100 ng/mL范围内线性良好(0.998 3～0.999 7).在0.25～2.5 μg/kg时,平均加标回收率在87.9％～96.1％,RSD值在1.4％～9.5％.该方法测定克百威、3-羟基克百威、3-酮基克百威和呋喃酚的检出限均为0.25 μg/kg.该方法快速、准确、灵敏,可用于水产品中克百威及其代谢物残留量的测定.【总页数】4页(P89-92)【作者】何亚斌【作者单位】农业部食品质量监督检验测试中心,上海 200436【正文语种】中文【相关文献】1.液相色谱-串联质谱法测定合水粉葛中氟虫腈·甲拌磷和克百威及其代谢物残留量[J], 黄梅花2.UPLC-MS-MS法检测水产品中亮绿·孔雀石绿和结晶紫及其代谢物 [J], 宋凯;严忠雍;张小军;郭远明3.气相色谱串联质谱法测定蔬菜中甲拌磷和克百威及其代谢物的残留量 [J], 张慧丽;王建华;李馨;辛学谦;林洪4.超高效液相色谱-串联质谱法测定蜂花粉中克百威及其代谢物初探 [J], 戴春风;何亚斌;朱春燕5.UPLC-MS-MS法测定浓缩菠萝汁中的克百威及3-羟基克百威 [J], 侯翠丽;唐媛媛;马新华;龙阳;林欣;伍志强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
霜霉病高效生防菌株BCJB01发酵培养基的优化
霜霉病高效生防菌株BCJB01发酵培养基的优化王贻莲;谢雪迎;扈进冬;陈凯;杨合同;李纪顺【摘要】为提高霜霉病高效生防菌株Bacillus cereus BCJB01的发酵水平,通过正交试验、综合优选及糖分流加试验,优化BCJB01的发酵培养基.优化出的培养基配方的质量分数为:玉米粉2.00％、豆粕粉1.00％、四水氯化锰0.003 0％、十二水磷酸氢二钠0.30％、二水磷酸二氢钠0.15％、七水硫酸镁0.035％、氯化钙0.10％和酵母提取物0.30％,接菌后6～12h流加质量分数0.2％糖.本研究优化的培养基配方在接种量为3％ (V/V),转速为180 r/min,温度为30℃的摇床振荡培养至66 h 时,芽孢率近90％,菌体数量达100×108cfu/mL以上.【期刊名称】《山东科学》【年(卷),期】2016(029)004【总页数】5页(P30-34)【关键词】蜡样芽孢杆菌;霜霉病;发酵培养基;正交设计;综合优选【作者】王贻莲;谢雪迎;扈进冬;陈凯;杨合同;李纪顺【作者单位】山东省科学院生物研究所,山东省应用微生物重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省应用微生物重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省应用微生物重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省应用微生物重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省应用微生物重点实验室,山东济南250014;山东省科学院生物研究所,山东省应用微生物重点实验室,山东济南250014【正文语种】中文【中图分类】Q939.95【农业微生物】霜霉病是作物上普遍发生的一种世界性病害，常见的有瓜类霜霉病和葡萄霜霉病。
瓜类霜霉病不仅侵染甜瓜和黄瓜，还对葫芦科的西瓜、南瓜、丝瓜及蛇瓜等12 种瓜类作物造成危害[1]。
葡萄霜霉病是葡萄的重要病害，严重影响葡萄生长及果实产量，给葡萄产业造成重大的经济损失[2-3]。
对克百威具高度特异性的免疫分析技术研究
对克百威具高度特异性的免疫分析技术研究刘曙照;冯大和;陈美娟;钱传范【期刊名称】《分析科学学报》【年(卷),期】2000(16)5【摘要】合成了保留氨基甲酸酯结构的克百威半抗原 ,并采用活性酯法与载体蛋白质共价连接制备突出克百威分子结构特征的合成抗原。
以合成抗原免疫新西兰白兔获得对克百威具高亲合力的抗血清 ,采用硫酸铵盐析和 DEAE纤维素反相吸附法分离和纯化抗体。
以辣根过氧化物酶采用改良的过碘酸钠法标记抗体、混合酸酐法标记半抗原。
在此基础上分别建立了对克百威具高度特异性的间接竞争 ,包被抗原、包被抗体直接竞争酶联免疫吸附测定 ( ELISA)法。
在优化条件下 ,克百威测定的线性浓度范围为 1 0 0 ～ 1 0 - 4 μg/m L,检测限≤ 0 .0 1 ng/m L,其他常用氨基甲酸酯类杀虫剂和呋喃酚不干扰克百威的测定。
【总页数】6页(P373-378)【关键词】克百威;半抗原;合成抗原;抗体;杀虫剂;免疫分析【作者】刘曙照;冯大和;陈美娟;钱传范【作者单位】扬州大学植物保护系;中国农业大学应化系【正文语种】中文【中图分类】S482.3【相关文献】1.克百威的免疫亲和色谱分析研究 [J], 刘曙照;韦林洪;徐维娜2.绿磺隆克百威三唑磷多抗体免疫亲和色谱技术研究 [J], 韦林洪;刘曙照;邵秀金;张军3.克百威残留放射免疫分析方法研究 [J], 胡秀卿;朱国念;徐步进4.直接竞争酶联免疫吸附分析法测定甘蔗中的克百威残留 [J], 刘腾飞;刘曙照5.基于双特异性单克隆抗体的克百威和三唑磷多残留ELISA分析方法研究及在环境样品中应用 [J], 金仁耀;朱国念因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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式 ;接菌到葡萄糖蛋白胨培养液 ,观察菌液特征. 1. 5 降解菌株 HQ2C 201培养基筛选
确定 C、N、P源化合物 :以蔗糖 、麦芽糖 、葡萄糖 和淀粉分别作为唯一 C 源 ,以蛋白胨 、硝酸钾 、硝酸 钠和硝酸铵分别作为唯一 N 源 ,以磷酸二氢钾 、磷酸 氢二钾 、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠分别作为唯一 P 源 ,接入 1 mL 为 D590 nm 012 的菌 悬液 , 4 d 后测 其 D590 nm ,以最高值为 C、N、P源化合物. 116 降解菌株 HQ2C 201培养基配方的优化和验证
涂布法 :将所收集土样用无菌水稀释 105 倍后 , ( - 0150, - 0125, 0, 0125, 0150 ) 、P ( - 01500 000,
涂布法接种于含 50 mg /L 克百威查氏固体培养基 - 01392 857, - 01214 286, 01142 857, 01500 000 ) ,
加药培养液 ,加入 7 g氯化钠 ,溶解后 ,全部移入 250 mL 分液漏斗 ,二氯甲烷萃取 ,下层液加入 10 g无水 硫酸钠 ,吸水后转入圆底烧瓶 ,旋转蒸发仪 50 ℃恒 温浓缩蒸干 ,甲醇溶解 ,经 0145μm 有机过滤器过滤 后 ,采用高效液相色谱 (HPLC)测定克百威含量.
供试药 剂 在 降 解 菌 培 养 基 中 添 加 回 收 率 的 测 定 :取预培养 4 d的降解菌培养液 50 mL ,添加克百 威母液 ,使其添加终质量浓度分别为 10、25、50 mg/L, 按以上提取方法提取 , HPLC 法测定克百威含量 ,计 算回收率 :回收率 =处理后的质量浓度 /标准液质量
Q IAO Run2xiang, ZHONG Guo2hua, LUO J ian2jun, L IU Cheng2lan, HU M ei2ying
(Laboratory of Insect Toxicology, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China)
等地采集土样 ,编号 , 4 ℃冰箱保存备用. 本文筛选确 下振荡培养. 每处理 3个重复. 预培养 4 d后 ,培养菌液
认的高效降解菌株 HQ 2C201分离自贵州省贵阳市郊 中加入克百威母液 ,使其终质量浓度为 50 mg /L , 48 h
贫营养土样中.
后 ,按 112方法提取残留克百威 , HPLC测定含量 ,计
第 30卷
1 材料与方法
1. 1 供试菌种 、主要试剂和仪器
菌株对克百威的降解率测定 : 用无菌水将待测 菌株制成菌悬液 (D590 nm为 012 ) ,吸取 1 mL 菌悬液 加入含 50 mL 基础培养液的三角瓶中 ,以加 1 mL 无
分别从广东 、安徽 、贵州 、山东 、山西 、河北 、辽宁 菌水到等量培养液为对照 ,在 28 ℃、150 r/m in条件
第 30卷 第 3期
华南农业大学学报
Vol. 30, No. 3
2009年 7月
Journal of South China Agricultural University
Jul. 2009
克百威降解菌株 HQ2C201的筛选及培养基优化
乔润香 , 钟国华 , 罗建军 , 刘承兰 , 胡美英
将高效降解菌株 HQ 2C201 分别转接到含茚虫
9917%异丙威原药由广东省农科院提供 , 8610%茚 威 、甲萘威 、仲丁威 、异丙威 、灭多威 、速灭威和丁硫
虫威原药由美国杜邦公司提供. 其余药品 、试剂均为 克百威质量浓度为 50 mg /L 的固体培养基上 ,待长
市售分析纯.
出菌落后继续转接直到加药质量浓度为 500 mg /L ,
型 y = b0 + ∑bi xi + ∑bij xi xj + ∑bii xi2 , 其中 y 为函数 D590 nm , x为培养基 C、N、P含量 , b为变异系数 ,并进 行寻优 ,得到培养基优化配方 , 按此配方培养降解
mL ,加入克百威溶液使其终质量浓度为 200 mg /L , 菌 ,按 113方法测定该菌对 50 mg /L 克百威 48 h的
Abstract:A high effective stain named HQ 2C201 was screened, which the degrading rates for 50 mg /L carbofuran, carbaryl, indoxacarb and fenobucarb after treatm ent in 48 h were 9512% , 9910% , 8510% and 6715% respectively. It was found that the compounds for C, N and P were glucose, pep tone and po2 tassium phosphate dibasic. By using the central composite rotary design method, the results indicated that the op tim um of C, N and P were 32110 g /L for glucose, 3125 g /L for pep tone and 1150 g /L for potassium phosphate dibasic respectively. The measured value of D590 nm was 01786 5 sim ilarly to the expected value, and the degrading rate of 50 mg /L carbofuran was 9519% after 48 h by the strain incubation in medium op tim ization.
收稿日期 : 2008211204 作者简介 :乔润香 (1982—) ,女 ,硕士研究生 ;通讯作者 :胡美英 (1954—) ,女 ,教授 , E2mail: humy@ scau. edu. cn 基金项目 :国家自然科学基金 (30871660)
28
华 南 农 业 大 学 学 报
加入 5 g土样 , 28 ℃, 150 r/m in摇床培养 ,每隔 7 d 降解率 ,理论预测值与实测值比较验证优化配方.
按照 5%的接种量转接 1次 ,逐步增加克百威终质量 浓度至 400、600、800、1 000 mg /L. 1 000 mg /L 培养
2 结果与分析
后 ,移取 1 mL菌液接到平板培养基 ,生长菌落后 ,分 2. 1 克百威 HPLC 2UV测定条件
关键词 :克百威 ; 高效降解菌 ; 筛选 ; 培养基优化 中图分类号 : S154. 39; X509 文献标识码 : A 文章编号 : 10012411X (2009) 0320027205
Screen ing of Carbofuran D egrad ing Fung i Sta in HQ2C 201 and Its M ed ium O ptim iza tion
UV m ini1240紫外分光光度计 、HP21100 型高效液相
以 YPD 培养基培养单菌落 ,观察菌落颜色 、边缘
色谱仪等.
形状 、透明度等 ;用接种环以无菌操作法挑取菌苔少
1. 2 残留克百威提取方法
许 ,制成水浸片 ,置显微镜下观察细胞的形态 ;生殖
根据文献 [ 12213 ] ,取 50 mL 经降解菌处理过的 培养基培养菌株 ,细胞染色后 , 显微镜观察生殖方
上 ,待长出单个菌落后 ,挑取单菌落转接到克百威质 取 20个点 ,利用 DPS统计软件进行试验设计和数据
量浓度为 200 mg /L 的培养基上 ,相同方法继续转接 分析 ,采用二次多项式逐步回归分析方法 ,得出回归模
驯化直到加药质量浓度为 500 mg /L ,纯化 3次后 ,保 存菌种.
富集培养法 : 250 mL三角瓶中装基础培养液 50
主要仪器包括常规立式压力蒸汽灭菌锅 ( YXQ 2 测定 HQ 2C201 对各农药的降解率 ,初步评估菌株对
LS23OS) 、超净工作台 、生化培养箱 、冷冻恒温振荡 其他氨基甲酸酯类农药的降解效果.
器 、超声波清洁器 、旋转蒸发仪 (LABORTA 24001 ) 、 1. 4 对高效降解菌株 HQ2C 201的初步鉴定
供试 9810%克百威 、9012%丁硫克百威 、9615% 算降解率 :降解率 = (对照的克百威含量 - 处理的克
仲丁威原药 由河 北威 远生 物化 工 有 限 公 司 提 供 , 百威含量 ) /对照的克百威含量 ×100%.
9615% 灭 多 威 、9810% 甲 萘 威 、9010% 速 灭 威 、
Key words: carbofuran; high degrading ability strain; screening; medium op tim ization
氨基甲酸酯类农药具有高效 、广谱的特点 ,是目 前应用于粮食 、蔬菜 、水果及经济作物害虫防治中最
重要的农药种类之一. 随着此类农药使用范围的不 断扩大 ,不科学使用的情况时有出现 ,对食品 、土壤 及环境水造成了不同程度的污染 [ 124 ]. 国际上规定单 种氨基甲酸酯农药在谷物中的最高残留量 (MRL )为 0102～7100 mg / kg,饮用水中的 MRL 是 011 μg /L[5 ]. 克百威 ( Carbofuran)作为氨基甲酸酯类的代表性农 药 ,应用量大 ,但其毒性较高 ,原药大鼠经口 LD50为 8～14 mg / kg,属高毒杀虫剂 ,易被淋溶而直接进入
(华南农业大学 昆虫毒理研究室 ,广东 广州 510642)
摘要 :以涂布法和富集培养法筛选得到降解菌株 HQ 2C201,该菌株在 48 h时对 50 mg /L 克百威 、甲萘威 、茚虫威和 仲丁威的降解率分别可达 9512%、9910%、8510%和 6715%. 确定菌株 HQ 2C201的 C、N、P源化合物为葡萄糖 、蛋白 胨和磷酸氢二钾 ,采用中心组分设计法确定了菌株 HQ 2C201的培养基最适 C、N、P源配比为葡萄糖 32110 g /L、蛋白 胨 3125 g /L、磷酸氢二钾 1150 g/L;在最佳培养基条件下 , D590 nm实测值为 01786 5,与期望值 01805 4接近 , 48 h时 对 50 mg/L克百威降解率为 9519%.