DNA粗提取
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
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《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、引言DNA 作为生命的遗传物质,承载着生物体的遗传信息。
对 DNA 的研究有助于我们深入了解生命的奥秘、疾病的发生机制以及进行法医学鉴定等。
DNA 的粗提取及鉴定是分子生物学中的基础实验技术,下面我们就来详细了解一下。
二、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习 DNA 的鉴定方法。
三、实验原理1、 DNA 在不同浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同在014mol/L 的氯化钠溶液中,DNA 的溶解度最低。
利用这一特点,可以使 DNA 从细胞中析出。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精,从而可以将 DNA 与蛋白质进一步分离。
3、 DNA 遇二苯胺会呈现蓝色这一特性可用于鉴定 DNA。
四、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液(也可以使用菜花、洋葱等材料)2、用具研钵、烧杯、玻璃棒、漏斗、纱布、试管、量筒、体积分数为 95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、0015mol/L 的氯化钠溶液、二苯胺试剂等。
五、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂,离心或静置沉淀,除去上清液,得到鸡血细胞液。
2、破碎细胞,释放 DNA取 20mL 鸡血细胞液倒入烧杯中,加蒸馏水到 100mL,搅拌均匀。
然后向鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水,同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞破裂,释放出 DNA。
3、去除杂质(1)过滤用纱布过滤含 DNA 的溶液,取滤液。
(2)去除核蛋白向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液 40mL,搅拌 1min,使核蛋白充分溶解。
然后缓慢加入蒸馏水,同时轻轻搅拌,直至溶液中氯化钠浓度达到 014mol/L,此时 DNA 会析出,用多层纱布过滤,取纱布上的黏稠物。
4、 DNA 的进一步提纯将上述黏稠物放入 20mL 体积分数为 95%的酒精溶液中,搅拌,使DNA 沉淀。
然后用玻璃棒卷起沉淀,放入试管中。
5、 DNA 的鉴定(1)向两支试管中分别加入 2mol/L 的氯化钠溶液 5mL。
生物趣味实验——DNA的粗提取
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(二)从唾液中提取自己的DNA 1、取自己的唾液,置于烧杯中,加入几滴洗洁精; 2、倒入一些橙汁,同时往烧杯里撒入一些盐,摇晃 均匀; 3、向滤液中缓缓加入预冷的酒精,并观察现象。
实验步骤
(一)从水果中提取DNA 1、往烧杯中加入20ML清水和3ML洗洁精,少许食盐 (3g左右),将混合液搅拌均匀备用; 2、将香蕉剥皮,放置于封口塑料袋中,倒入配制的混合 液,用手轻轻挤压破坏细胞,使DNA释放出来; 3、倒出香蕉并过滤,取出滤液; 4、向滤液中缓缓加入预冷的酒精,并观察现象。
DNA的粗提取
实验原理
1、水果的细胞里含有DNA,香蕉更易碾碎、不必 削皮,使实验更加简化; 2、食盐里的钠离子和氯离子可以中和DNA上的电 荷,使DNA变形聚集,更易沉淀出来; 3、洗洁精里有表面活性剂,可以破坏细胞膜和核 膜,使DNA释放出来; 4、橙汁里含有蛋白酶,可把和DNA紧密结合的蛋 白质分解,使得到的DNA更纯; 5、DNA可以溶于水但不溶于酒精,在高浓度酒精 下相互吸附形成沉淀。
(完整版)DNA粗提取和鉴定实验
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DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA 析出。
③DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。
利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
⑷DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、实验材料和用具鸡血细胞液(5~10ml);体积分数为95%的冷酒精溶液(实验前置于冰箱内冷却24h);蒸馏水;质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液;质量的浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的氯化纳溶液(新教材不要求0、015的浓度了,都是用的2mol/L);二苯胺试剂;铁架台;镊子;水浴锅;玻璃棒;滤纸;滴管;量筒(100ml,一个);烧杯;(1000ml,一个,50ml、100 ml 、500ml各二个);试管(20ml,二个);漏斗;试管夹;纱布。
三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸纳溶液(抗凝剂)100ml,置于500ml烧杯中。
注入新鲜的鸡血(约180ml),同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血。
将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀。
(也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min(转每分)的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部。
实验时。
用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液。
四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL~10mL,注入到50 mL烧杯中。
向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使血细胞加速破裂。
然后,用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL。
取其滤液。
②溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态。
dna粗提取和鉴定的原理
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dna粗提取和鉴定的原理
DNA粗提取和鉴定主要是通过以下原理进行的:
1. 粗提取:DNA粗提取是将DNA从生物样本(如血液、唾液、组织等)中分离出来的过程。
最常用的方法是细胞裂解,以释放DNA。
细胞裂解可以通过物理方法(如机械切割、超声波
处理)或化学方法(如蛋白酶消化、洗涤剂裂解)来实现。
裂解后,可进行离心等步骤以去除细胞残渣和其他杂质,得到含有DNA的提取液。
2. 鉴定:DNA鉴定是通过比较DNA序列的相似性或特征来确定个体的身份、亲缘关系等。
主要有以下鉴定方法:
- 聚合酶链式反应(PCR):PCR是通过复制特定DNA片段的方法,使得起始数量较少的DNA可以被扩增到足够数量以
进行分析。
PCR需要通过引物选择性扩增特定的DNA序列,
然后通过酶切、电泳等技术进行分析。
- DNA测序:DNA测序是确定DNA序列的方法。
常用的测
序技术有Sanger测序和下一代测序(如Illumina、Ion Torrent 等)。
测序后得到DNA的碱基序列,可以与数据库中的已知
序列进行比对,从而确定DNA的来源、身份等信息。
- DNA指纹技术:DNA指纹技术是根据DNA上的多态性位
点进行鉴定。
常用的方法是通过PCR扩增多个DNA位点,然后通过电泳等技术进行分析。
与其他个体相比较,每个个体的DNA指纹是独特的,可以用于身份鉴定、亲缘关系判定等。
这些原理在DNA粗提取和鉴定过程中相互作用,可以帮助科学家从生物样本中提取和鉴定DNA,为研究、法医学和医学诊断等领域提供有力的技术支持。
DNA的粗提取及鉴定实验教学设计
![DNA的粗提取及鉴定实验教学设计](https://img.taocdn.com/s3/m/716cce3c5bcfa1c7aa00b52acfc789eb172d9e37.png)
DNA的粗提取及鉴定实验教学设计实验目的:1.了解DNA的提取过程及原理。
2.学习DNA的鉴定方法。
3.掌握实验中的基本操作技巧。
实验原理:DNA的粗提取主要包括细胞破碎、DNA的溶解和纯化三个步骤。
实验中可以使用菌落PCR、血液等生物材料进行DNA的提取。
DNA的鉴定方法主要有电泳分离、PCR扩增及DNA测序等。
电泳分离可以通过DNA片段的大小差异来鉴定DNA的存在与否。
实验材料:1.细菌培养物或血液样品2.离心机3.恒温摇床4.DNA提取试剂盒5.TAE缓冲液6.紫外透射盒7.DNA分子量标记物8.PCR试剂盒实验步骤:1.细菌培养物的DNA提取b.弃去上清液,加入2mL的琼脂糖溶液并混匀。
f.取上清液,得到DNA提取物。
2.DNA的电泳分离a.准备0.8%的琼脂糖凝胶,加入适量的TAE缓冲液,加热溶解后待用。
b.取100μL的DNA提取物与10μL的DNA分子量标记物混合,并将混合液加入琼脂糖凝胶槽中。
c.在电泳槽中注入足够的TAE缓冲液,将琼脂糖凝胶槽完全覆盖。
d.连接电源,设置电压和时间,进行DNA的电泳分离。
e.使用紫外透射盒观察DNA带的迁移情况。
3.DNA的PCR扩增a.设置PCR反应条件,包括引物的浓度、模板DNA的浓度、反应体系的体积等。
b.将PCR反应体系按照设定的比例加入PCR试管中。
c.连接PCR仪,设置反应温度和时间,进行PCR扩增。
d.将PCR产物进行电泳分离,并观察PCR产物的扩增情况。
4.DNA的测序a.将PCR产物提取纯化。
b.将纯化后的PCR产物送往测序公司进行测序。
c.获取DNA序列结果,并进行测序结果的分析。
实验结果及讨论:1.细菌培养物的DNA提取可以通过观察DNA溶液的浑浊度来判断DNA提取效果的好坏。
溶液越浑浊,DNA提取效果越好。
2.DNA的电泳分离可以通过观察琼脂糖凝胶上DNA带的迁移情况来判断DNA的大小及纯度。
带迁移越远,DNA片段越小。
3.PCR扩增结果可以通过观察琼脂糖凝胶上PCR产物的带的扩增情况来判断PCR反应的效果。
dna粗提取知识点
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dna粗提取知识点
DNA粗提取是一种从生物样本中提取DNA的基本方法,它是分子生物学和遗传学研究中的重要步骤之一。
下面将从样本选择、DNA提取、DNA回收等方面分别介绍DNA粗提取的知识点。
首先,选择合适的样本是DNA粗提取的第一步。
通常情况下,样本可以是各种植物、动物组织,血液、唾液等体液,或者是环境中的微生物等。
在选择样本时需要根据研究目的和实验条件综合考虑,同时样本的保存和处理也需要注意,以保证提取的DNA质量和数量。
其次,DNA提取是DNA粗提取的核心步骤,其主要目的是从生物样本中分离出DNA。
基本的DNA提取方法包括:使用蛋白酶来分解细胞膜和细胞壁、使用盐酸和酚等化学试剂来破坏蛋白质和其他杂质、使用有机溶剂如乙醇和异丙醇来沉淀DNA等。
其中,酚氯仿法是一种经典的DNA提取方法,它可以有效地分离出高质量和高浓度的DNA。
最后,DNA回收是DNA粗提取的最后一步,其目的是将提取出的DNA进行纯化和浓缩。
DNA回收通常包括以下步骤:使用醋酸钠或其他缓冲液来沉淀DNA、使用酒精来洗涤和干燥DNA、使用TE缓冲液等来溶解DNA等。
在DNA回收过程中需要注意的是,应该避免使用过量的溶剂和过高的温度,以避免DNA降解和失活。
总之,DNA粗提取是一项基础的实验技术,它为后续的PCR、测序、基因克隆等实验提供了重要的DNA样本。
在实践中需要注意样本的选择、DNA提取的方法和DNA回收的步骤,以确保提取出高质量、高浓度的DNA。
dna的粗提取与鉴定
![dna的粗提取与鉴定](https://img.taocdn.com/s3/m/df040b0b0812a21614791711cc7931b765ce7bc4.png)
dna的粗提取与鉴定DNA的粗提取与鉴定一、粗提取粗提取的方法是通过物理和化学方法从一个或多个生物样品中提取DNA样品,通常是为了进行DNA分子生物学分析、基因组学以及其他科学研究。
1. 用拆解液拆解细胞使用拆解液拆解细胞是最常用的粗提取DNA技术。
主要使用的拆解液有Tris-EDTA(TE buffer)、Cetyltrimethyl ammonium bromide (CTAB)、Sarkosyl(SDS)和NaOH溶液等。
各种拆解液的比例和温度可以根据每个实验的要求进行调整。
2. 用磁珠或磁性分选器抽提也可以使用磁珠或磁性分选器来抽提DNA样品。
这种方法可以从多种生物样品中提取DNA,如血清、血浆、细胞粗提物以及血液细胞等。
磁珠抽提的原理是利用磁性珠子来吸附DNA样品,而磁性分选器则是利用磁场将DNA分离出来。
磁珠抽提的优点是简单快捷,缺点是提取的DNA质量不够高。
3. 改良的拆解方式一些改良的拆解方式可以用来考察某一特定细胞类型。
这些方法包括冷冻破碎、湿热破裂、极限温度破裂和化学破裂等。
这些技术可以有效地提高蛋白质和DNA的提取效率,但缺点是需要较高的技术要求,而且操作步骤较多,比较耗时。
二、DNA的鉴定DNA的鉴定是指用特定的方法和技术,明确某个DNA样品的鉴定。
常见的DNA鉴定技术有定性分析、定量分析和活性检测等。
1. 定性分析定性分析是指对DNA样品进行定性鉴定,识别出它们是哪种DNA,以确定其基本性质。
常用的定性分析方法有紫外光检测和酶切检测等。
紫外光检测是将DNA浓度调整至1μg/ml,然后放置在紫外光228纳米的紫外灯管(UV lamp)下,通过分析紫外光吸收光谱来鉴定DNA 样品。
酶切检测是将DNA样品与特定的酶进行反应,用来分析DNA的特征。
常用的酶有限制性内切酶(restriction enzymes),例如EcoRI、BamHI、PstI和HindIII等。
2. 定量分析定量分析是指对某一DNA样品的浓度和数量进行测量,以了解其容量。
dna粗提取步骤
![dna粗提取步骤](https://img.taocdn.com/s3/m/ec5fa2ab0875f46527d3240c844769eae109a343.png)
DNA粗提取步骤一、目的要求本实验旨在使学生掌握DNA粗提取的基本原理和操作步骤,了解DNA的物理、化学性质以及其在生物科学研究中的应用。
通过实验,要求学生能够独立完成DNA的粗提取,并对实验结果进行分析和解释。
二、实验原理DNA粗提取的原理基于DNA在不同物理和化学环境中的稳定性。
在一定浓度的盐溶液和适当的温度条件下,DNA的溶解度会发生变化,从而实现DNA 的分离和提取。
本实验采用盐析法进行DNA粗提取,具体操作步骤如下:1.细胞破碎:通过物理或化学方法破碎细胞,释放出细胞内的DNA。
常用的破碎方法包括机械破碎(如研磨、匀浆等)、化学破碎(如用酸、碱或酶处理)和冷冻破碎等。
2.去除杂质:通过离心、过滤等方法去除细胞碎片、蛋白质和其他杂质,使DNA充分溶解在溶液中。
3.调节盐浓度:通过调节盐浓度,使DNA在盐溶液中的溶解度发生变化,从而实现DNA的分离和提取。
常用的盐溶液包括氯化钠、氯化钾、氯化钙等。
4.沉淀DNA:通过降低pH值、加入乙醇或异丙醇等方法,使DNA从溶液中沉淀析出。
5.洗涤与干燥:用70%乙醇或无水乙醇洗涤DNA沉淀,去除残留的盐分和杂质,然后干燥得到粗提取的DNA。
三、实验步骤1.准备实验材料与试剂(1)实验材料:鸡血细胞;(2)试剂:氯化钠、柠檬酸钠、蒸馏水、95%乙醇、70%乙醇;(3)仪器与器皿:离心管、离心机、滴管、玻璃棒、烧杯。
2.操作步骤(1)制备鸡血细胞溶液:取适量鸡血细胞,加入等体积的柠檬酸钠溶液,混合均匀后离心,去除上清液,得到鸡血细胞沉淀。
(2)破碎细胞:将鸡血细胞沉淀重新悬浮于适量蒸馏水中,加入适量的玻璃珠或石英砂,搅拌破碎细胞。
也可以采用匀浆、超声破碎等方法破碎细胞。
(3)去除杂质:将破碎后的溶液离心,去除上清液,得到的沉淀物为富含DNA的细胞碎片。
可以进一步用蒸馏水冲洗沉淀物,去除残留的蛋白质和其他杂质。
(4)调节盐浓度:向沉淀物中加入适量的氯化钠溶液,搅拌均匀,使DNA充分溶解在盐溶液中。
dna粗提取与鉴定
![dna粗提取与鉴定](https://img.taocdn.com/s3/m/42759f29640e52ea551810a6f524ccbff121ca3d.png)
dna粗提取与鉴定DNA粗提取与鉴定DNA是生命的基础,它携带了生物体的遗传信息。
在现代分子生物学中,DNA的提取和鉴定是非常重要的技术。
本文将介绍DNA粗提取和鉴定的方法。
一、DNA粗提取1.1 细胞破碎法细胞破碎法是一种常见的DNA粗提取方法。
它通过机械或化学手段破坏细胞膜和核膜,释放出细胞内的DNA。
机械方法包括高压均质和超声波破碎等,化学方法包括SDS、NaOH等。
这些方法都可以有效地破坏细胞结构,但同时也会对DNA造成一定程度的损伤。
1.2 酚/氯仿法酚/氯仿法是一种经典的DNA粗提取方法,它利用酚对蛋白质和核酸有不同的溶解度来分离DNA。
首先用盐水或缓冲液洗涤样品,然后加入酚/氯仿混合液,在离心后上层为水相(含RNA)、中间为界面层(含蛋白质)和下层为有机相(含DNA)。
通过抽取下层的有机相,可以得到粗提的DNA。
1.3 硅胶柱法硅胶柱法是一种高效的DNA粗提取方法,它基于DNA和硅胶之间的亲和力。
首先将样品加入硅胶柱中,然后用盐水或缓冲液洗涤硅胶柱,最后用低盐缓冲液洗脱DNA。
这种方法可以得到较纯的DNA,并且适用于大量样品处理。
二、DNA鉴定2.1 凝胶电泳凝胶电泳是一种常见的DNA鉴定方法,它利用电场将带电的DNA分子移动到凝胶上。
根据不同长度的DNA片段在凝胶中行进速度不同来分离不同大小的DNA片段。
通过比较样品中不同长度的DNA条带,可以确定样品中是否存在目标序列。
2.2 PCR扩增PCR扩增是一种高效、敏感、特异性强的鉴定方法。
它通过引物特异性识别目标序列,在体外进行大量扩增。
PCR扩增可以检测极少量的目标序列,并且能够对复杂混合物进行分析。
2.3 DNA测序DNA测序是一种直接读取DNA序列的方法。
它通过将PCR扩增的目标片段或提取的DNA样品,进行测序仪读取,得到目标序列的具体信息。
这种方法可以检测出极少量的变异或突变,并且可以对整个基因组进行分析。
三、总结DNA粗提取和鉴定是现代分子生物学中非常重要的技术。
dna的粗提取实验报告
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dna的粗提取实验报告DNA的粗提取实验报告引言DNA(脱氧核糖核酸)是生物体中负责遗传信息传递的分子,它的提取是进行分子生物学实验的基础步骤之一。
本实验旨在通过简单的方法提取DNA,并观察提取效果。
材料与方法材料:- 植物组织(如洋葱、豆芽等)- 高渗盐溶液(含有盐分的溶液,如食盐溶液)- 咖啡过滤纸- 酒精(酒精浓度为70%)- 水方法:1. 将植物组织切碎,使细胞破裂,释放DNA。
2. 将切碎的植物组织放入一个容器中,加入高渗盐溶液,搅拌均匀。
3. 将搅拌后的溶液过滤,使细胞碎片和其他杂质被滤掉,得到澄清的液体。
4. 将澄清的液体倒入一个试管中,加入等量的酒精,并缓慢倾斜试管,使酒精与液体缓慢混合。
5. 观察酒精与液体的交界面,可以看到白色的DNA沉淀。
6. 使用酒精漂浮在DNA沉淀上方的方法,将DNA转移到另一个容器中。
7. 加入适量的水,溶解DNA。
结果与讨论通过上述方法,我们成功地从植物组织中提取到了DNA。
观察到的白色沉淀物就是DNA,其形状呈线状或颗粒状。
实验过程中,我们注意到以下几个现象:1. 细胞破裂:切碎植物组织的过程中,细胞膜被破坏,使DNA从细胞内释放出来。
这一步骤的重要性在于提供了DNA的来源。
2. 高渗盐溶液:高渗盐溶液的作用是破坏细胞膜和核膜,使DNA从细胞内释放出来。
高渗盐溶液中含有盐分,可以改变细胞内外的渗透压,进而破坏细胞膜和核膜。
3. 过滤:通过过滤,我们可以去除细胞碎片和其他杂质,得到澄清的液体。
这一步骤的目的是减少后续操作中DNA沉淀的杂质。
4. 酒精沉淀:加入酒精后,DNA会从溶液中沉淀出来。
酒精与溶液的混合过程中,DNA会聚集在交界面上形成白色沉淀物。
这是因为DNA在酒精中不溶,而且比较重,所以会沉淀下来。
5. DNA的溶解:将DNA从酒精中转移到水中后,加入适量的水,使DNA溶解。
DNA在水中溶解后,呈现出透明的溶液。
本实验采用的是粗提取方法,所得到的DNA并不纯净。
实验05DNA的粗提取与鉴定
![实验05DNA的粗提取与鉴定](https://img.taocdn.com/s3/m/450c3ba7e109581b6bd97f19227916888486b9c8.png)
专题05DNA 的粗提取与鉴定一、实验原理1.提取DNA的原理利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
如:(1)DNA在酒精溶液中的溶解性:DNA不溶于酒精,但某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性:DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同,它能溶于2 mol/L 的NaCl溶液。
2.鉴定DNA的原理在一定温度下,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
二、方法步骤1.称取约30 g洋葱,切碎,然后放入研钵中,倒入10 mL研磨液,充分研磨。
2.去除滤液中的杂质方案一在漏斗中垫上纱布,将洋葱研磨液过滤到烧杯中,在4 ℃冰箱中放置几分钟后,再取上清液方案二直接将研磨液倒入塑料离心管中,在1 500 r/min的转速下离心5 min,再取上清液3.DNA方案一在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%),静置2~3 min,溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA;用玻璃棒沿一个方向搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸去上面的水分方案二将溶液倒入塑料离心管中,在10 000 r/min的转速下离心5 min,弃上清液,将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干4.DNA取两支20 mL的试管,各加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL。
将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中,再向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后,将试管置于沸水中加热5 min,待试管冷却后,比较两支试管中溶液颜色的变化。
三、操作提示1.以血液为实验材料时,每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠,防止血液凝固。
2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨1.利用动物细胞提取DNA时,破碎细胞的方法:动物细胞无细胞壁,可直接使其吸水涨破。
2.不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料,原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
DNA分子粗步提取
![DNA分子粗步提取](https://img.taocdn.com/s3/m/ff3dea3acd1755270722192e453610661fd95a50.png)
DNA分子粗步提取首先,需要从待提取DNA的样本中选择合适的方法进行细胞破碎,以释放细胞核中的DNA。
通常,可以通过物理方法(例如机械切割或超声波)或化学方法(例如洗涤酶或洗涤液)破坏细胞膜和核膜,释放DNA。
一旦细胞破碎,就需要加入适量的缓冲液来溶解和稳定DNA。
常用的缓冲液包括盐水(如PBS)或特殊的提取缓冲液。
这些缓冲液中含有离子,有助于维持DNA的稳定性。
接下来,可以添加适当的酶来处理样本。
例如,用蛋白酶K来消化细胞膜蛋白质,或者用RNase来消化RNA。
这些酶能够识别和分解与DNA不相关的分子,从而净化DNA。
在酶处理之后,还需要进行蛋白质消化,以去除样本中的蛋白质。
蛋白质酶可将蛋白质降解为肽链,使其在接下来的步骤中易于去除。
快速离心可以分离DNA和蛋白质残渣。
最后一个步骤是DNA的沉淀。
一种常见的方法是将DNA和盐溶液混合,然后用等体积的冰冷酒精沉淀DNA。
酒精沉淀法利用酒精的高濃度使DNA形成沉淀,而其他杂质则悬浮在上清中。
沉淀的DNA可以用乙醇或异丙醇洗一次,以去除残留的盐或其他杂质。
此外,在DNA分子的粗步提取方法中,还需要注意以下几点。
首先,实验操作需要在无酶RNase、DNAase的环境下进行,以保持DNA完整性。
其次,所有操作都需要在无菌条件下进行,以避免外源DNA的污染。
最后,提取DNA的过程最好快速、有效,以防止DNA降解或丢失。
总之,DNA分子的粗步提取是进行基因组学研究的重要步骤。
通过细胞破碎、溶解、酶处理、蛋白质消化和沉淀等步骤,可以从复杂的生物样本中获得纯化的DNA。
这项技术的实施为后续的DNA分析提供了前提和基础。
dna粗提取方法
![dna粗提取方法](https://img.taocdn.com/s3/m/8cf5a7c40342a8956bec0975f46527d3250ca647.png)
dna粗提取方法DNA粗提取方法DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物体的基因遗传物质,对于研究基因组学、进化学以及疾病诊断等方面具有重要意义。
DNA粗提取是从生物样本中提取出DNA的一种常用方法,本文将介绍DNA粗提取的步骤和相关注意事项。
一、实验前的准备工作在进行DNA粗提取前,需要准备以下实验材料:1. 细胞样本:可以是人体组织、细菌、植物组织等;2. 细胞裂解液:包括裂解液缓冲液和蛋白酶K等;3. 蛋白沉淀剂:如氯化钠、聚乙二醇等;4. 离心管、离心机、超声波仪等实验设备。
二、DNA粗提取步骤1. 细胞裂解:将细胞样本加入细胞裂解液中,通过机械或化学方法使细胞壁破裂,释放出细胞内的DNA。
2. 蛋白沉淀:加入蛋白沉淀剂,与DNA结合的蛋白质会沉淀到底部,形成蛋白质沉淀物。
3. DNA沉淀:将上述混合液离心,离心后,DNA会沉淀到离心管的底部形成DNA沉淀物。
4. 洗涤:将DNA沉淀物用乙醇洗涤,去除杂质。
5. 干燥:将洗涤后的DNA沉淀物在通风处晾干,使其变为干燥的DNA固体。
三、注意事项1. 实验操作过程中应注意无菌操作,避免外源性DNA的污染。
2. 细胞裂解液的选择应根据具体实验目的进行优化,以获得高质量的DNA。
3. 实验过程中应控制温度,避免DNA的降解。
4. 保存提取得到的DNA时,应避免阳光直射,存放在低温干燥的环境中,以防止其降解。
5. 实验操作中应注意个人安全,避免接触有毒物质和腐蚀性液体。
DNA粗提取方法是提取DNA的常用方法之一,它能够快速、高效地从生物样本中提取出DNA,为后续的分子生物学研究提供了重要的基础。
然而,需要注意的是,DNA粗提取方法提取得到的DNA质量较低,适用于一些对DNA纯度要求不高的实验,如PCR反应等。
对于一些对DNA质量要求较高的实验,如测序、限制性酶切等,需要使用更为精细的DNA提取方法。
DNA粗提取是一种常用的DNA提取方法,通过简单的步骤可以从生物样本中提取出DNA。
dna的粗提取与鉴定实验报告单
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dna的粗提取与鉴定实验报告单DNA的粗提取与鉴定实验报告单一、引言DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物体遗传信息的分子基础,对于生物学研究和法医学鉴定具有重要意义。
本实验旨在通过粗提取和鉴定DNA,了解DNA的提取方法和鉴定原理。
二、材料与方法2.1 材料- 实验室培养的细菌样本- 细菌培养基- 离心管、显微管、试管- 无水乙醇、高盐缓冲液、蛋白酶- 离心机、恒温水浴器2.2 方法2.2.1 细菌培养将细菌样本接种到细菌培养基中,经过适当时间的培养,使细菌繁殖到一定数量。
2.2.2 DNA粗提取a. 取适量培养好的细菌样本,加入显微管中。
b. 加入高盐缓冲液和蛋白酶,混匀后孵育。
c. 加入等体积的无水乙醇,混匀后离心。
d. 弃上清液,洗涤沉淀,使其纯化。
e. 加入适量的去离子水溶解沉淀,得到DNA样品。
2.2.3 DNA鉴定a. 取适量的DNA样品,加入琼脂糖凝胶。
b. 进行电泳分析,运行适当时间后,观察分离的DNA条带。
三、结果与分析经过DNA粗提取和鉴定实验,我们成功获得了DNA样品,并进行了琼脂糖凝胶电泳分析。
观察电泳图像,可以看到明显的DNA条带,表明DNA提取成功。
四、讨论与总结本实验通过对细菌样本的DNA进行粗提取和鉴定,成功获得了DNA样品,并进行了电泳分析。
DNA的粗提取是DNA鉴定的基础,通过合适的缓冲液和酶的作用,能够将DNA从细菌样本中提取出来。
而电泳分析则通过电场的作用,将DNA进行分离,显示出不同大小的DNA条带,能够判断DNA的完整性和纯度。
在实验中,我们使用了琼脂糖凝胶电泳来鉴定DNA样品。
通过观察电泳图像,我们可以确定DNA提取的成功与否,并初步判断DNA的质量。
然而,电泳分析只能展示DNA的大小和纯度,并不能提供DNA的具体信息。
在实际应用中,还需要进一步的分析和比对,才能得到更准确的结果。
总之,本实验通过DNA的粗提取和鉴定,使我们对DNA的提取方法和鉴定原理有了更深入的了解。
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
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《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、DNA 粗提取及鉴定的原理1、 DNA 在不同浓度氯化钠溶液中的溶解度不同在 014mol/L 的氯化钠溶液中,DNA 的溶解度最小;随着氯化钠溶液浓度的升高,DNA 的溶解度逐渐增大。
利用这一原理,可以将 DNA 与其他杂质分离。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精溶液。
利用这一特点,可以进一步提纯 DNA。
3、 DNA 遇二苯胺试剂会呈现蓝色这是鉴定 DNA 的常用方法。
二、实验材料的选择1、材料选取的原则应选取 DNA 含量相对较高的生物组织,以保证实验能够提取到足够量的 DNA。
同时,材料应新鲜,以避免 DNA 降解。
2、常见的实验材料鸡血细胞是进行本实验的常用材料之一。
鸡血细胞中 DNA 含量丰富,且取材方便。
三、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入柠檬酸钠溶液中,防止血液凝固。
然后离心或静置,使血细胞沉淀,去除上清液,留下鸡血细胞液。
2、破碎细胞,释放 DNA向鸡血细胞液中加入蒸馏水,使细胞吸水涨破,释放出细胞内的物质,包括 DNA。
3、去除杂质(1)过滤:用纱布过滤,去除较大的杂质。
(2)溶解:向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液,使 DNA 充分溶解。
(3)析出:缓慢加入蒸馏水,使氯化钠溶液浓度降低至014mol/L,此时 DNA 溶解度最小,析出白色丝状物。
(4)过滤:用多层纱布过滤,收集 DNA 黏稠物。
4、 DNA 的进一步提纯将 DNA 黏稠物放入 2mol/L 的氯化钠溶液中溶解,然后加入等体积冷却的酒精溶液,轻轻搅拌,DNA 会析出,而蛋白质等杂质则溶解在酒精溶液中。
再次过滤,得到较纯净的 DNA。
5、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管,分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mL 氯化钠溶液(0015mol/L),作为对照。
向 2 号试管中加入 2mL DNA 提取液。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂,混合均匀后,在沸水浴中加热 5 分钟。
dna的粗提取方法
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dna的粗提取方法DNA的粗提取方法DNA是生物体内最基本的遗传物质,对于研究生物学、医学等领域具有重要意义。
因此,DNA的提取方法也成为了科学研究中的一项重要技术。
下面将介绍一种简单易行的DNA粗提取方法。
材料准备1. 10% SDS溶液:称取10克SDS加入100毫升去离子水中,混合均匀后加热至70℃左右,搅拌至SDS完全溶解即可。
2. 0.5M EDTA溶液:称取186.1克EDTA加入500毫升去离子水中,调节pH至8.0。
3. 1M Tris-HCl缓冲液:称取121.14克Tris-HCl加入1000毫升去离子水中,调节pH至8.0。
4. NaCl溶液:称取58.44克NaCl加入1000毫升去离子水中,搅拌均匀后过滤灭菌。
5. 蛋白酶K:用去离子水将蛋白酶K稀释至10mg/ml浓度。
6. 高锰酸钾:用去离子水将高锰酸钾稀释至0.1%浓度。
7. 95%乙醇:用去离子水将95%乙醇稀释至70%浓度。
8. 细胞样品:可以是动物组织、细菌、真菌等样品。
步骤步骤一:制备细胞裂解液1. 取适量的细胞样品,用PBS缓冲液洗涤3次,去除细胞外的杂质。
2. 向含有10% SDS的裂解液中加入适量的蛋白酶K,搅拌均匀后在60℃水浴中孵育2小时。
3. 将孵育后的裂解液加入相同体积的高锰酸钾溶液中,搅拌均匀后再加入相同体积的4M NaCl溶液中,轻轻摇晃混合即可。
步骤二:沉淀DNA1. 将上述混合溶液离心10分钟,收集上清液至新离心管中。
2. 向上清液中滴加等体积的冷乙醇(70%),轻轻摇晃后放置于-20℃冷冻库中保存至少30分钟以上。
3. 将离心管取出,离心10分钟,倒掉上清液,将沉淀用无菌去离子水洗涤3次。
步骤三:纯化DNA1. 将沉淀加入含有0.5M EDTA的去离子水中,搅拌均匀后放置于60℃水浴中孵育30分钟。
2. 在孵育过程中,制备1M Tris-HCl缓冲液,并调节pH至8.0。
3. 孵育结束后,向上述溶液中加入相同体积的1M Tris-HCl缓冲液,轻轻摇晃混合均匀。
dna的粗提取与鉴定实验报告
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dna的粗提取与鉴定实验报告DNA 的粗提取与鉴定实验报告一、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习并掌握 DNA 鉴定的基本技术。
二、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠浓度的变化而改变。
在014mol/L 的氯化钠溶液中,DNA 的溶解度最低。
2、 DNA 不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质(如蛋白质)则溶于酒精。
3、 DNA 与二苯胺试剂在沸水浴条件下会呈现蓝色反应,从而可以鉴定 DNA 的存在。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液(抗凝剂处理)2、用具(1)烧杯、玻璃棒、滴管、量筒、离心机、纱布、漏斗、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴。
(2)体积分数为95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、蒸馏水、二苯胺试剂。
四、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂,静置一段时间后,离心处理,去除上清液,留下鸡血细胞液。
2、提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液,搅拌均匀,使血细胞破裂,释放出细胞核物质。
3、溶解 DNA沿烧杯壁缓缓加入蒸馏水,并不断搅拌,直到溶液中氯化钠浓度降至 014mol/L 时,DNA 溶解度最小,此时会有白色丝状物析出。
4、过滤含 DNA 的黏性物用多层纱布过滤上述溶液,滤去杂质,留下含 DNA 的黏性物。
5、进一步提纯 DNA将上述黏性物再溶解于 2mol/L 的氯化钠溶液中,然后过滤,除去不溶的杂质。
6、析出 DNA向滤液中缓缓加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液,并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现白色的丝状 DNA。
7、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管,分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mol/L的氯化钠溶液 2mL,向 2 号试管中加入 DNA 丝状物和 2mol/L 的氯化钠溶液 2mL。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂,混合均匀后,将试管置于沸水浴中加热 5 分钟,观察颜色变化。
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盐城中学高二生物2014-2015学年度教学案【课题】DNA的粗提取与鉴定【目标】1.尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取2.了解DNA的物理化学性质3.理解DNA粗提取以及DNA鉴定的原理【知识梳理】一、实验原理1、粗提取原理:在NaCl溶液浓度 0.14M时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14M时,DNA溶解度;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又。
利用上述原理,可以将DNA溶于高浓度的NaCl溶液中,使其与其他物质分开。
2、纯化的原理:DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
3、二苯胺法鉴定DNA的方法和原理。
(1)方法:在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺会被染成。
(2)原理:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成ω-羟基-γ酮基戊醛,它再和二苯胺作用而呈现蓝色(溶液呈浅蓝色)。
鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。
二、实验设计1、实验材料的选取:凡是含有的生物材料都可以考虑,但是选用的生物组织,成功的可能性更大。
在下面的生物材料中选取适合的实验材料:鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培养基的大肠杆菌【思考】哺乳动物的红细胞的特点?2、破碎细胞,获取含DNA的滤液:动物细胞的破碎比较容易,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入一定量的,同时用搅拌,过滤后收集滤液即可。
如果实验材料是植物细胞,需要先用溶解细胞膜。
例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的和,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。
【思考】①为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?②加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?③如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响?④此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?3、实验操作制备细胞液↓破碎细胞,释放DNA↓→过滤,除去细胞壁、细胞膜等溶解核内DNA↓DNA析出↓→除去细胞质中的大部分物质。
DNA初步纯化↓→除去核蛋白、RNA、多糖等。
DNA鉴定三、以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取(一)制备鸡血细胞液(课前准备)本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因:一是因为鸡血细胞核的DNA含量高,材料易得;二是鸡血细胞极易制备。
提前放入,注入新鲜的鸡血,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸钠溶液充分混合,以免。
将烧杯中的血液置于冰箱内,静置1 d,使血细胞自行沉淀。
也可以将血液倒入离心管内进行离心,使血细胞沉淀于离心管底部,这样可以使血细胞沉淀更完全。
用吸管除去上部的血浆,就可以得到鸡血细胞液。
(哺乳动物的血细胞不能作为提取材料,因为)。
(二)提取DNA的具体步骤1.破碎细胞,释放DNA:鸡血细胞中的DNA与核蛋白结合,位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下是不会释放出来的。
为了使DNA从细胞核中释放出来,需要向鸡血细胞液中加入蒸馏水,并且搅拌,从而使血细胞膜和核膜胀破。
用玻璃棒搅拌可以加速细胞的破裂。
注意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太猛,防止打碎DNA。
释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起,应用3~4层纱布进行过滤,除去一些颗粒较大的杂质。
2.溶解细胞核内的DNA:在浓度较高的NaCl溶液中核蛋白容易解聚,游离出的DNA溶解在溶液中。
在溶液中加入两倍体积的浓度为2 mol/L的NaCl溶液,搅拌1 min。
注意应沿一个方向搅拌,使DNA 充分溶解。
3.DNA的析出:加蒸馏水降低NaCl溶液浓度,使DNA析出。
实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕。
同时应注意控制加水量,使NaCl 溶液的终浓度为0.1~0.2 mol/L。
加水过程一般分三次进行,当总加水量为300 mL左右时,DNA已基本析出。
加水太多、溶液过稀,会使DNA分子又重新溶解。
用3~4层纱布对DNA稀释液进行过滤,滤去蛋白质,收集DNA的黏稠物。
如果采用离心法,效果更好。
用4 000 r/min转速的离心机,离心15 min,除去上清液(含有蛋白质),留下的沉淀物中含有DNA。
此时注意观察DNA黏稠物的颜色。
4.DNA的初步纯化:将DNA黏稠物再溶解,继续用2 mol/L的NaCl溶液20 mL溶解DNA黏稠物,仍旧沿一个方向不停搅拌3 min,使DNA充分溶解,以免损失。
用3~4层纱布进行过滤(或离心),滤去杂质,收集含有DNA的滤液。
向滤液中贴壁缓慢加入50 mL预冷的体积分数为95%的乙醇,并用玻璃棒朝一个方向缓慢、均匀地搅拌,溶液中会出现DNA丝状物。
5.DNA的鉴定:取两支试管,分别标记1、2号,各加入2mol/L NaCl5 ml,将所得的白色絮状物取出一部分放入1号试管,搅拌使其溶解,然后,向两试管中分别加入4ml二苯胺试剂混合均匀后在沸水浴中加热5min,观察颜色变化。
【操作提示】以血液为实验材料时,每100ml血液中需要加入3g ,防止。
加入洗涤剂后,动作要、,否则容易产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。
加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
二苯胺试剂要,否则会影响鉴定的效果。
【随堂练习】一、选择题1.在研究DNA的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质。
用蛋白水解酶处理血样的目的是()A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质,使DNA释放,便于进一步提纯2.洗涤剂能够瓦解(),但对DNA没有影响。
A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质3.在沸水浴的条件下,DNA遇()会被染成蓝色。
A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺4.在DNA提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易洗刷5.下列操作中,对DNA的提取量影响最小的是()A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA等核物质B.搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C.在“析出DNA粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却E在DNA的溶解和再溶解时,要充分搅拌6.DNA的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的(),静置2—3min,溶液中会出现白色丝状物。
A.0.9%的NaClB.0.14mol/L的NaCl溶液C.质量分数15%的HClD.体积分数为95%的酒精溶液7.以血液为实验材料时,需要向血液中加入(),防止血液凝固。
A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红8.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是()A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度,加快DNA析出D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出9.去除滤液中的杂质时,直接在滤液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的()分解蛋白质。
A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.肠肽酶10.本实验中有三次过滤:⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液。
以上三次过滤分别为了获得()A含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液B含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、含DNA的滤液C含核物质的滤液、滤液中DNA粘稠物、纱布上的DNAD含较纯的DNA滤液、纱布上的粘稠物、含DNA的滤液11.在“DNA粗提取”中,有两次DNA的沉淀析出,其依据的原理是①DNA在氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时溶解度最低②DNA在冷却动物体积分数为95%的酒精中能沉淀析出A.两次都是① B.两次都是②C.第一次是①,第二次是② D.第一次是②,第二次是①12.在DNA的粗提取和鉴定试验中,有两次加入蒸馏水的操作,其作用分别是A.防止鸡血细胞失水皱缩和稀释氯化钠溶液至0.14mol/LB.防止鸡血细胞失水皱缩和溶解DNAC.使鸡血细胞吸水涨破和稀释氯化钠溶液至0.14mol/LD.使鸡血细胞吸水涨破和溶解DNA13.在做“提取DNA实验”时,某学生试图用人血代替鸡血,没有成功,原因是A.操作方法不对B.人血含DNA太少C.NaCl溶液浓度太高 D.加二苯胺太少14.在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,将提取获得的含DNA黏稠物(还含有较多杂质)分别处理如下,其中含DNA少的是第一,放入0.14 mol/L的氯化钠溶液中,搅拌后过滤,得滤液①和黏稠物②;第二,放入2 mol/L的氯化钠溶液中,搅拌后过滤,得滤液③和黏稠物④;第三,放入冷却的95 %的酒精溶液中,搅拌后过滤,得滤液⑤和黏稠物⑥。
A.①③⑤B.①④⑤C.②④⑥D.②③⑤15.(多选)下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验原理的叙述错误的是A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应16.(多选)下列关于DNA粗提取与鉴定的实验,叙述正确的是A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随 NaCl的浓度变化而变化B.DNA的鉴定实验需要沸水浴C.几次加水的目的都是调节NaCl溶液的浓度D.鉴定DNA的试剂是二苯胺试剂17.(多选)与析出DNA粘稠物有关的叙述,正确的是()A.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度B.在操作A时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出D.当丝状粘稠物不再增加时,此时NaCl的浓度相当于2mol/L18.(多选)在“DNA粗提取”中,对三次过滤的叙述中,正确的是A.第一次过滤后,核物质存在于滤出的固体物中B.第二次过滤时,实用多层纱布,DNA存在于纱布上的黏稠物中C.第三次过滤后,DNA存在于滤液中,可进一步除去非DNA物质D.三次过滤均使用多层纱布二、非选择题1.提取鸡血中DNA时,要除去血液中的上清液,这是因为什么?2.填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。
⑴提取鸡血细胞中核物质⑵溶解核内DNA⑶析出2mol/LNaCl溶液中的DNA ⑷DNA粘稠物的再溶解⑸提取杂质较少的DNA白色乳状丝状物⑹DNA的鉴定3.关于DNA粗提取的实验材料的选择,也经过了多次实验效果的比较,最终选择鸡血做实验材料的原因是什么?请回答下列问题:⑴鸡血细胞中红细胞,家鸡属于鸟类,新陈代谢旺盛,因而血液中细胞数目较多,可以提供丰富的。
⑵实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料,而不用鸡全血,主要原因是。