DNA的粗提取与鉴定_实验报告
实验九DNA的粗提取与鉴定
【实验九】DNA的粗提取与鉴定陈小珺（江西省赣州市第三中学341000）1 教学建议在本实验的教学中，教师应注意以下几点。
1.1 实验材料必须准备充足。
本实验所用的实验材料是鸡血细胞液,由活鸡的鲜血经沉淀后获得。
每组(2个学生)需用5 mL 鸡血细胞液,则每班(50人)至少需要130 mL,而鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390 mL 鸡血细胞液。
宰杀1只中等大小的活鸡,一般可得120 mL 左右的鲜血,因此,1个班实验需要买4只活鸡。
也可以到市场售活鸡处去索取鸡血,但所带烧杯中必须提前放入抗凝剂。
（每100ml鸡血加入3g柠檬酸钠）1.2 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。
因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量本来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的DNA就会更少。
1.3 获取较纯净的DNA的关键步骤。
1.3.1 充分搅拌鸡血细胞液：将鸡血细胞液与蒸馏水混合以后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
1.3.2沉淀DNA时必须用冷酒精：体积分数为95%的酒精在冰箱中至少存放24 h。
1.3.3正确搅拌含有悬浮物的溶液实验步骤3、5、7,都需要用玻璃棒搅拌。
教师应提醒学生注意,在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直插烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA 分子。
进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5 min。
2 实验原理的补充介绍2.1 DNA的释放本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为鸡血细胞核的DNA 含量丰富，材料易得；二是鸡血细胞极易吸水胀破。
DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。
为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。
蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。
dna的粗提取与鉴定
dna的粗提取与鉴定dna的粗提取与鉴定实验十一 DNA的粗提取与鉴定教学目的1、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法2、观察提取出来的DNA物质实验原理1、DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
注意事项1、步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。
2、实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。
实验用具鸡血细胞液(5～10mL);体积分数为95%的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液，二苯胺试剂;烧杯(100mL，1个， 50mL，500mL，各2个)，漏斗，试管(20mL，2个)，玻璃棒，滴管，量筒(100mL，1个)，纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。
课时安排一课时课前准备制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧怀中，注入新鲜的鸡血(约180mL)，用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。
静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。
也可以用离心机离心2 min(转速1000转/分)。
用吸管吸去上清液。
板书实验十一 DNA的粗提取与鉴定实验原理1、析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2、用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3、DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
方法步骤：1、提取鸡血细胞的细胞核物质：顺时针方向搅拌，稍快，稍重。
5 min2、溶解细胞核内的DNA3、析出含DNA的黏稠物：蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢4、过滤：取黏稠物5、再溶解：顺时针方向搅拌，较慢。
DNA的粗提取与鉴定
二、实验原理 2.DNA的分离和提纯
DNA溶于2mol /L的NaCl溶液,但 不溶于冷酒精，细胞中的其它杂 质溶于冷酒精。
二、实验原理 3.DNA的鉴定
DNA与二苯胺作用生成蓝色沉 淀用来鉴定 DNA（沸水浴）
实验步骤
一、取材：香蕉去皮、洗洁精、食盐溶液、95％酒精等
二、DNA的释放、溶解、获取
实验材料
研磨提取粗提取、提纯恒 温 水 浴 加 热实验现象一
实验现象二及比较
作业： 1.如果选用实验材料是鸡的血细 胞，请写出实验操作步骤； 2.你做的实验现象是怎样的？请 分析或推测原因，并拟定证明你 的推测的进一步实验方案。
1.往研钵香蕉加入10mlNaCl溶液和少量的洗洁进行研磨； 2.用漏斗一层纱布过滤，取滤液； 3.往滤液中加入等量的95%的酒精，静置2--3分钟； 4.用玻棒卷起白色絮状物，用吸水红吸去水分后放入试 管，加入4ml 2mol /L的NaCl溶液充分溶解。
三、DNA的鉴定：找实验老师加4ml二苯胺溶液，在 恒温水浴锅加热2--3分钟，观察现象并分析实验结果。
一、实验目标 1.用15分钟左右的时间尝试对
香蕉组织中的DNA进行粗提取； 2.学会用二苯胺对粗提取的DNA
进行鉴定； 3.能对实验结果进行分析评价。
二、实验原理 1.DNA的释放 洗涤剂等去污剂可以溶解香
蕉细胞的细胞壁，破坏细胞膜， 同时也能使蛋白质变性。 （教材P55)洗涤剂能够瓦解细胞 膜,但对DNA没有影响。
高中生物实验：DNA的粗提取与鉴定
高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定实验原理
粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。
扩展资料
纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的.某些蛋白质溶于酒精。
鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
(3)需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。
特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
实验 DNA的粗提取与鉴定
4.DNA遇二苯胺（沸水浴）会变成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的
试剂。
共二十一页
二、方法与过程
制鸡血细胞液(加抗凝剂)→获得鸡血细胞(离心或 静置)→获得鸡血细胞核物质(提核物质→溶解→析 出→溶解→析出)→鉴定 DNA(用二苯胺)
3.DNA的鉴定(jiàndìng)： 加入二苯胺试剂4mL，用玻棒搅拌使DNA溶解，沸水浴
5min，观察溶液是否出现浅蓝色。
三、实验小结
1.共有“三次过滤，两次析出，六次搅拌” 2.加入“两次蒸馏水，三次NaCl溶液，一次酒精”
共二十一页
共二十一页
四、实验(shíyàn)原理拓展介绍。
1.DNA的释放(shìfàng)。
剂 解析 菜花有细胞壁，加入蒸馏水不破裂，须经过 研磨。鉴定时要用二苯胺。
答案(dá àn) D
共二十一页
6、某生物兴趣小组开展 DNA 粗提取的相关探究活 动，具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各 2 份， 每份 10 g。剪碎后分成两组，一组置于 20℃、另 一组置于－20℃条件下保存 24 h。 DNA 粗提取： 第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入 15 mL 研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取 滤液备用。 第二步：先向 6 只小烧杯中分别注入 10 mL 滤液， 再加入 20 mL 体积分数为 95%的冷酒精溶液， 然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物 缠绕在玻璃棒上。
共二十一页
4.DNA的再溶解(róngjiě)。
用高浓度（2mol/L）的氯化钠溶液再溶解(róngjiě)DNA粘稠物。
DNA粗提取和鉴定实验
D N A粗提取和鉴定实验 Ting Bao was revised on January 6, 20021DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl 的物质的量浓度为 mol／L时,DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
③DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
⑷DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、实验材料和用具鸡血细胞液（5~10ml）；体积分数为95%的冷酒精溶液（实验前置于冰箱内冷却24h）；蒸馏水；质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸纳溶液；质量的浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的氯化纳溶液（新教材不要求0、015的浓度了，都是用的2mol/L）；二苯胺试剂；铁架台；镊子；水浴锅；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒（100ml，一个）；烧杯；（1000ml，一个，50ml、100 ml 、500ml 各二个）；试管（20ml，二个）；漏斗；试管夹；纱布。
三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝剂）100ml，置于500ml烧杯中。
注入新鲜的鸡血（约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血液与柠檬酸纳溶液充分混合，以免凝血。
将烧杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血细胞自行沉淀。
（也可以将血液倒入离心管内，用1000r/min（转每分）的离心机离心2min，血细胞沉淀于离心管底部。
实验时。
用吸管除去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞液。
四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到50 mL烧杯中。
向烧杯中加入蒸馏水20 mL，同时用玻璃棒充分搅拌5 min，使血细胞加速破裂。
然后，用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL。
dna的粗提取实验报告
dna的粗提取实验报告DNA的粗提取实验报告引言DNA（脱氧核糖核酸）是生物体中负责遗传信息传递的分子，它的提取是进行分子生物学实验的基础步骤之一。
本实验旨在通过简单的方法提取DNA，并观察提取效果。
材料与方法材料：- 植物组织（如洋葱、豆芽等）- 高渗盐溶液（含有盐分的溶液，如食盐溶液）- 咖啡过滤纸- 酒精（酒精浓度为70%）- 水方法：1. 将植物组织切碎，使细胞破裂，释放DNA。
2. 将切碎的植物组织放入一个容器中，加入高渗盐溶液，搅拌均匀。
3. 将搅拌后的溶液过滤，使细胞碎片和其他杂质被滤掉，得到澄清的液体。
4. 将澄清的液体倒入一个试管中，加入等量的酒精，并缓慢倾斜试管，使酒精与液体缓慢混合。
5. 观察酒精与液体的交界面，可以看到白色的DNA沉淀。
6. 使用酒精漂浮在DNA沉淀上方的方法，将DNA转移到另一个容器中。
7. 加入适量的水，溶解DNA。
结果与讨论通过上述方法，我们成功地从植物组织中提取到了DNA。
观察到的白色沉淀物就是DNA，其形状呈线状或颗粒状。
实验过程中，我们注意到以下几个现象：1. 细胞破裂：切碎植物组织的过程中，细胞膜被破坏，使DNA从细胞内释放出来。
这一步骤的重要性在于提供了DNA的来源。
2. 高渗盐溶液：高渗盐溶液的作用是破坏细胞膜和核膜，使DNA从细胞内释放出来。
高渗盐溶液中含有盐分，可以改变细胞内外的渗透压，进而破坏细胞膜和核膜。
3. 过滤：通过过滤，我们可以去除细胞碎片和其他杂质，得到澄清的液体。
这一步骤的目的是减少后续操作中DNA沉淀的杂质。
4. 酒精沉淀：加入酒精后，DNA会从溶液中沉淀出来。
酒精与溶液的混合过程中，DNA会聚集在交界面上形成白色沉淀物。
这是因为DNA在酒精中不溶，而且比较重，所以会沉淀下来。
5. DNA的溶解：将DNA从酒精中转移到水中后，加入适量的水，使DNA溶解。
DNA在水中溶解后，呈现出透明的溶液。
本实验采用的是粗提取方法，所得到的DNA并不纯净。
实验 __DNA的粗提取与鉴定
教学目的1． 初步掌握DNA 粗提取和鉴定的方法。
2． 观察提取出来的DNA 物质。
实验原理1． DNA 在NaCl 溶液中的溶解度是随NaCl 的浓度变化而改变的。
DNA 在0．14mol/L 的NaCl溶液中的溶解度最低，据此可使DNA 充分溶解而使杂质沉淀或DNA 沉淀而杂质溶解。
2． DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中某些物质可以溶于酒精溶液，据此可提取杂质较少的DNA 。
3． DNA 对蛋白酶、高温和洗涤剂（可以溶解细胞的细胞膜，除去脂质和蛋白质，而对DNA 没有影响）都具有较好的耐性。
4． DNA ＋二苯胺−−→−沸水浴蓝色（用于DNA 的鉴定）实验材料：鸡血细胞液（5-10ml ），体积分数为95%的酒精溶液（冷却），蒸馏水，质量浓度为0.1g/ml 的柠檬酸钠溶液(抗凝剂)，物质的量浓度分别为2mol/l 和0.015mol/l 的氯化钠溶液，二苯胺试剂实验步骤1．材料制备0.1g/ml 柠檬酸钠100ml置于500ml 烧杯内→玻璃棒搅拌→1000r/min 离心2min →吸去上清液→即得鸡血细胞液（也可将上述烧杯置于冰箱中，静置一天使鸡血细胞自行沉淀）活鸡血180ml[思考]为什么要除去血液中的上清液？2．方法步骤取血细胞液5-10ml＋20ml蒸馏水，玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使血细胞加速破裂，纱布过滤，滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质（1）提取鸡血细胞的细胞核物质原理：血细胞吸水胀破，玻璃棒快速搅拌机械加速血细胞破裂（2）溶解核内DNA：滤液＋2mol/LNaCl溶液40ml，玻璃棒沿一个方向搅拌（3）析出含DNA的粘稠物：向上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并轻轻地沿一个方向搅拌，出现丝状物，当丝状物不再增加时，停止加水（此时NaCl溶液相当于稀释到0．14mol/L）（4）滤取含DNA的粘稠物：用多层纱布过滤，含DNA的粘稠物留在纱布上（5）DNA粘稠物再溶解：在50ml的烧杯中注入20ml 2mol/L的NaCl溶液，缓慢搅拌3 min使上述粘稠物尽量多的溶解在溶液中。
DNA的粗提取与鉴定_实验报告
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 1、提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理 或化学性质的生物大分子 2、提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化 学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分
3、DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的 盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀， 或者相反
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物
6、再次溶解DNA
纱布过滤
取滤物
2mol/LNaCl溶液
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
7、加冷酒精使DNA析出（纯化） 冷酒精
DNA的鉴定
总结：
实验原理
DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、动物细胞 动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中 加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌，过 滤后收集滤液即可 讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体， 水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再 加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂 (细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA
2、植物细胞 ①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解 细胞膜 讨论：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？
答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜， 有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl， 有利于DNA的溶解
课题1DNA的粗提取与鉴定
课题1 DNA 的粗提取与鉴定原理解析：1 . DNA 粗提取的实验原理： (1 )本实验用鸡血为实验材料的原因是：鸡血的红细胞有 ____________ ，细胞核中有 DNA 和 蛋白质组成的 _______ 。
因为哺乳动物(如兔子等)血液的红细胞中没有 _____________ ，因此不 能用哺乳动物的血液为本实验的材料。
(2 )提取DNA 的原理是：利用 DNA 在 ___________________ 的氯化钠溶液中溶解度最低，形成 沉淀析出；再利用 DNA 不溶于 ___________ ，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步 提取出含杂质较少的 DNA 。
(3 )制备鸡血细胞液的原理：用质量浓度为 0.1g /m L 的柠檬酸钠作抗凝剂。
用吸管吸去 上清液的目的是去掉血浆，留下 ________________ ，因为血浆中没有 DNA 。
向含有DNA 的浓度较高的氯化钠溶液中加入 ______________ ，稀释氯化钠溶液，使DNA 的溶 解度下降。
这时，加上不断的搅拌，溶解度下降的 DNA 逐渐呈 __________ 。
再通过过滤， 滤去蛋白质，就可获得DNA 的黏稠物了。
氯化钠溶液的浓度与 DNA 溶解度之间的关系 可用图曲线表示： 2 . DNA 鉴定的原理：鉴定所用的试剂为二苯胺。
DNA 与二苯胺作用而显现 _________ 。
鉴定时溶液颜色的深浅 与溶液中DNA 含量的多少有关。
问题讨论： 1 .提取鸡血中的 DNA 时，为什么要除去血液中的上清液？ 因为上清液是 __________________________________________________ ，不含血细胞，而沉于试管底部的鸡血细胞的 _____________________________________________ 所以提取鸡血细胞中的 DNA 时，要除去血液中的上清液。
DNA粗提取与鉴定
6、与析出DNA粘稠物有关的叙述，不正确的是
A 操作时缓慢滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度 B 操作时用玻棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整 C 加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度
D 当丝状粘稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可 以认为是0.14mol/L 7、你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗？
（2）为什么反复地溶解与析出DNA，能够去 除杂质？ 答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高 盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出， 能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过 反复溶解与析出DNA，就能够除去与DNA溶解 度不同的多种杂质
当堂检测：
• 1、在制备鸡血细胞液的过程中，加入柠 檬酸钠的目的是（ ） • A .防止凝血 B. 加快 A DNA析出 • C .加快DNA溶解 D.加速凝血
答：血液分为两部分，一部分是血浆，一部分 是血细胞，离心后除去的上清液是血浆 5、方法步骤 ①提取鸡血细胞的细胞核物质 将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL，注入到 50 mL烧杯中。向烧杯中加入蒸馏水20 mL， 同时用玻璃棒充分搅拌5 min，使血细胞加速 破裂。然后，用放有纱布的漏斗将血细胞液过 滤至500mL。取其滤液。
4、课前准备鸡血细胞液
①过程 取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液（抗凝 剂）100ml，置于500ml烧杯中。注入新鲜的 鸡血（约180ml），同时用玻璃棒搅拌，使血 液与柠檬酸纳溶液充分混合，以免凝血。将烧 杯中的血液置于冰箱内，精置一天，使血细胞 自行沉淀。（也可以将血液倒入离心管内，用 1000r/min（转每分）的离心机离心2min， 血细胞沉淀于离心管底部。实验时。用吸管除 去离心管上部的澄清液，就可以得到鸡血细胞 液。）
小组合作讨论： （1）为什么要加入蒸馏水？加入蒸馏水后细胞 会有什么变化？
dna的粗提取与鉴定实验报告单
dna的粗提取与鉴定实验报告单DNA的粗提取与鉴定实验报告单一、引言DNA（脱氧核糖核酸）是构成生物体遗传信息的分子基础，对于生物学研究和法医学鉴定具有重要意义。
本实验旨在通过粗提取和鉴定DNA，了解DNA的提取方法和鉴定原理。
二、材料与方法2.1 材料- 实验室培养的细菌样本- 细菌培养基- 离心管、显微管、试管- 无水乙醇、高盐缓冲液、蛋白酶- 离心机、恒温水浴器2.2 方法2.2.1 细菌培养将细菌样本接种到细菌培养基中，经过适当时间的培养，使细菌繁殖到一定数量。
2.2.2 DNA粗提取a. 取适量培养好的细菌样本，加入显微管中。
b. 加入高盐缓冲液和蛋白酶，混匀后孵育。
c. 加入等体积的无水乙醇，混匀后离心。
d. 弃上清液，洗涤沉淀，使其纯化。
e. 加入适量的去离子水溶解沉淀，得到DNA样品。
2.2.3 DNA鉴定a. 取适量的DNA样品，加入琼脂糖凝胶。
b. 进行电泳分析，运行适当时间后，观察分离的DNA条带。
三、结果与分析经过DNA粗提取和鉴定实验，我们成功获得了DNA样品，并进行了琼脂糖凝胶电泳分析。
观察电泳图像，可以看到明显的DNA条带，表明DNA提取成功。
四、讨论与总结本实验通过对细菌样本的DNA进行粗提取和鉴定，成功获得了DNA样品，并进行了电泳分析。
DNA的粗提取是DNA鉴定的基础，通过合适的缓冲液和酶的作用，能够将DNA从细菌样本中提取出来。
而电泳分析则通过电场的作用，将DNA进行分离，显示出不同大小的DNA条带，能够判断DNA的完整性和纯度。
在实验中，我们使用了琼脂糖凝胶电泳来鉴定DNA样品。
通过观察电泳图像，我们可以确定DNA提取的成功与否，并初步判断DNA的质量。
然而，电泳分析只能展示DNA的大小和纯度，并不能提供DNA的具体信息。
在实际应用中，还需要进一步的分析和比对，才能得到更准确的结果。
总之，本实验通过DNA的粗提取和鉴定，使我们对DNA的提取方法和鉴定原理有了更深入的了解。
dna的粗提取与鉴定实验报告
dna的粗提取与鉴定实验报告DNA 的粗提取与鉴定实验报告一、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习并掌握 DNA 鉴定的基本技术。
二、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠浓度的变化而改变。
在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
2、 DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质（如蛋白质）则溶于酒精。
3、 DNA 与二苯胺试剂在沸水浴条件下会呈现蓝色反应，从而可以鉴定 DNA 的存在。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（抗凝剂处理）2、用具（1）烧杯、玻璃棒、滴管、量筒、离心机、纱布、漏斗、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴。
（2）体积分数为95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、蒸馏水、二苯胺试剂。
四、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，静置一段时间后，离心处理，去除上清液，留下鸡血细胞液。
2、提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液，搅拌均匀，使血细胞破裂，释放出细胞核物质。
3、溶解 DNA沿烧杯壁缓缓加入蒸馏水，并不断搅拌，直到溶液中氯化钠浓度降至 014mol/L 时，DNA 溶解度最小，此时会有白色丝状物析出。
4、过滤含 DNA 的黏性物用多层纱布过滤上述溶液，滤去杂质，留下含 DNA 的黏性物。
5、进一步提纯 DNA将上述黏性物再溶解于 2mol/L 的氯化钠溶液中，然后过滤，除去不溶的杂质。
6、析出 DNA向滤液中缓缓加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液，并用玻璃棒搅拌，溶液中会出现白色的丝状 DNA。
7、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管，分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mol/L的氯化钠溶液 2mL，向 2 号试管中加入 DNA 丝状物和 2mol/L 的氯化钠溶液 2mL。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂，混合均匀后，将试管置于沸水浴中加热 5 分钟，观察颜色变化。
DNA粗提取和鉴定实验
DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的.当NaCl的物质的量浓度为 mol／L时,DNA的溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出.③DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.⑷DNA遇二苯胺沸水浴会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂.二、实验材料和用具鸡血细胞液5~10ml；体积分数为95%的冷酒精溶液实验前置于冰箱内冷却24h；蒸馏水；质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸纳溶液；质量的浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的氯化纳溶液新教材不要求0、015的浓度了,都是用的2mol/L；二苯胺试剂；铁架台；镊子；水浴锅；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒100ml,一个；烧杯；1000ml,一个,50ml、100 ml 、500ml 各二个；试管20ml,二个；漏斗；试管夹；纱布.三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液抗凝剂100ml,置于500ml烧杯中.注入新鲜的鸡血约180ml,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血.将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀.也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min转每分的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部.实验时.用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液.四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL,注入到50 mL烧杯中.向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使血细胞加速破裂.然后,用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL.取其滤液.②溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态 .③析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色.继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多.当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于 mol／L经验值：需加约570mL蒸馏水,且分多次加入.将溶液中的DNA与其他杂质分离,这一步骤是实验成败的关键.实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕.④滤取含DNA的粘稠物用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在纱布上,滤液丢弃.⑤将DNA的粘稠物再溶解取 1个 50 mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L的溶液 20mL.用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃棒不停地搅拌,约3分钟,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中.⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液取1个100 mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液.取其滤液,DNA溶于滤液中.⑦提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中,加入等体积的、冷却的、体积分数为 95％的酒精溶液使用冷却的酒精,对DNA的凝集效果较佳,并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的白色丝状物.用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分.这种丝状物的主要成分就是DNA.⑧ DNA的鉴定取两支20 mL的试管,各加入氯化钠的物质的量浓度为0．015 mol／L的溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解.然后,向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂.混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化.五、讨论①两次使用蒸馏水第一次：细胞吸水胀破第一步第二次：使 DNA黏稠物析出第三步②三次过滤第一次： DNA存在于滤液里第一步第二次： DNA被留在纱布上第四步第三次： DNA存在于滤液里第六步过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1－2层③两次析出第一次：用 mol／L 的NaCI溶液含杂质多第三步第二次：用冷却的95％的酒精第七步④六次搅拌：第一、二、三、五、七、八步其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质答：用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质.因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质在NaCl溶液浓度低于 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在 mol/L 时,DNA溶解度最小；当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大.。
实验05DNA的粗提取与鉴定
专题05DNA的粗提取与鉴定一、实验原理1．提取DNA的原理利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2 mol/L 的NaCl溶液。
2．鉴定DNA的原理在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
二、方法步骤1．称取约30 g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨。
2．去除滤液中的杂质方案一在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液方案二直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1 500 r/min的转速下离心5 min，再取上清液3．DNA的析出方案一在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA；用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分方案二将溶液倒入塑料离心管中，在10 000 r/min的转速下离心5 min，弃上清液，将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干4.DNA的鉴定取两支20 mL的试管，各加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL。
将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中，再向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
三、操作提示1．以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止血液凝固。
2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨1．利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其吸水涨破。
2．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
DNA提取与鉴定实验报告
DNA粗提取与鉴定实验报告一、实验名称：DNA的粗提取与鉴定二、实验原理：1. DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mol／L时，DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
三、实验仪器及实验材料：研钵、天平、漏斗、纱布、烧杯、酒精灯、玻璃棒、试管、试管夹、95％无水乙醇、香蕉四、实验步骤（含操作过程照片）：1.材料准备：用天平秤取香蕉20g，将香蕉切成小块放入研钵中（如图①）。
2.制备滤液：取5ml洗涤剂，1/4勺食盐加入研钵中，与香蕉研磨充分。
研磨至半流体状态时，将研磨的香蕉糊用漏斗和一层纱布过滤到烧杯中（如图②）。
3.提取DNA：在上述香蕉提取液中，加入与滤液体积相等的4℃冷却的95％无水乙醇。
静置1-2min，用玻璃棒朝一个方向轻轻搅拌，就会看到大量白色纤维状粘稠物从溶液中析出，用玻璃棒轻轻卷起（如图③）。
4.鉴定DNA：取两支试管，各加入2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中1号试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。
然后向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，沸水浴10min，观察结果（如图④⑤）。
五、实验结果（实验结果照片）：实验结果如图：六、实验结果分析：在沸水浴的条件下，加丝状物的试管（含DNA）遇二苯胺被染成蓝色，而对照组无变色现象。
实验过程中，由于香蕉研磨液不易过滤，可加少量(45ml)蒸馏水，并挤压纱布。
DNA的粗提取和鉴定
1
DNA的粗提取与鉴定
复习：
蛋白质
染色体成分
DNA
RNA(少量)
提取DNA的基本思路：
利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的 差异，提取DNA，去除其他成分。
2
DNA的物理化学性质 DNA的溶解性 DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性 DNA的鉴定
3
15
鉴定
比较 加入物质
自变量
结果
溶液逐渐 变蓝 不变蓝
图示
均加入： 丝状 实验组 ①4 mL二苯胺 物 试剂 (DNA) ②2mol/LNaCl 溶液5 mL —— 对照组
鉴定时蓝色的深浅与溶液中DNA的含量多少有关。 你能采用其他方法对DNA进行鉴定吗？ 取少许丝状物，置玻片中央，加1滴 甲基绿溶液，丝状物变成绿色。 注意：鉴定所用的试剂是二苯胺或甲基绿。
1.DNA的粗提取实验原理
1）不同浓度NaCl中DNA溶解度不同。 2）DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同，DNA不溶于酒精，细 胞中某些蛋白质则溶于酒精。 3）DNA和蛋白质对酶耐受性不同：酶的专一性——蛋白酶水解蛋 白质。但是对DNA没有影响。 4）DNA和蛋白质对高温耐受性不同：蛋白质、DNA热稳定性不同。 大多数蛋白质不能忍受60～80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变 性。 5）DNA和蛋白质对洗涤剂耐受性不同：洗涤剂能够瓦解细胞膜， 但对DNA没有影响。
用二苯胺须加热。用甲基绿不用水浴加热。
洋葱的鳞片叶表皮细胞 16
6
二、目的要求
初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质
三、材料用具
用什么做实验材料？ 动物：鸡血 、猪肝等 植物：洋葱、菠菜等
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
二、方法与过程
1.制鸡血细胞液（活鸡鲜血经分离或沉淀获得）
0.1g/mL柠檬酸钠100mL 500mL烧杯中，玻棒搅拌， 离心、分离或静置沉淀。 活鸡鲜血180mL 2.提取DNA ⑴.提取血细胞核物质： ①取血细胞5-10mL＋20mL蒸馏水，用玻棒沿一个方向 快速搅拌。 ②纱布过滤：滤液中含DNA和其他核物质，如蛋白质。 ③原理：血细胞的细胞膜、核摸吸水胀破，玻璃棒快速 搅拌，机械加速血细胞破裂。 ⑵.溶解核内的DNA： 滤液＋2mol/L的NaCl溶液40mL，玻棒沿一个方向 轻缓搅拌。
2、你认为从细胞中提取某种特定的蛋白质 与提取DNA一样容易吗？
答：提取蛋白质比提取DNA的难度大。这 是因为，与DNA相比，蛋白质对温度、盐 浓度、pH等条件要敏感得多，很容易失活； 并且蛋白质的空间结构多种多样，理化性 质各不相同，使得蛋白质的提取没有一种 统一的方法，只能根据特定蛋白质的特性 摸索提取的条件，设计特定的方法。
6、DNA的鉴定
DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此， 二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂
二、实验设计
（一）实验材料的选取
1、材料：鱼卵、猪肝、菜花、香蕉、鸡血、 哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、 在液体培养基中培养的大肠杆菌。（从中选取 2～3种实验材料）
2、原则：凡是含有DNA的生物材料都可以考 虑，但选用DNA含量相对较高的生物组织，成功 的可能性更大
当氯化钠的物质的量浓 在 2 mol／L时，DNA 度为 NaCl 溶 液 浓 度 低 于 0.14 mol/L时，DNA的溶 的溶解度最大 ，浓度为 ①根据DNA在NaCl溶 解度随NaCl溶液浓度的 0．14 mol／L时，DNA的 液中的溶； 增 加 而 逐 渐 降 低 解度 溶解度最低。利用这一在曲 线 0.14 mol/L时，DNA溶解 原理，可以使DNA在盐溶 么 浓 图，思考在什 ②如何通过控制NaCl溶液 度最小；当NaCl溶液浓 液中溶解或析出。 度下，DNA的溶解度 度继续增加时，DNA的溶 的浓度使DNA在盐溶液中 解度又逐渐增大。 最 小 ？ DNA 溶解或析出？ 在 NaCl 溶液中的溶解度是
DNA的粗提取与鉴定
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 1、提取生物大分子的基本思路 选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理 或化学性质的生物大分子 2、提取DNA的基本思路 利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化 学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分
3、DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶 液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的 盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀， 或者相反
3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成( D ) A.砖红色 B.橘黄色 C.紫色 D.蓝色 4.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液? 答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
2、 DNA的鉴定 鉴定DNA时在试管中先加入物质的量的浓度为 2mol/L 的NaCl溶液5ml于两只试管中，其中一 只加入DNA丝状物，各加入二苯胺4ml 试剂。 混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min,待试 管冷却后，比较两只试管中溶液颜色的变化，看 看溶解有DNA的溶液是否有蓝色
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
2mol/L
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
5、过滤→取纱布上的滤物
6、再次溶解DNA
纱布过滤
取滤物
2mol/LNaCl溶液
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
7、加冷酒精使DNA析出（纯化） 冷酒精
DNA的鉴定
总结：
实验原理
DNA
DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同 DNA与其他细胞成分在酒精中溶解度不同 DNA和蛋白质对酶、高温和洗涤剂耐受性不同 DNA与二苯胺呈现蓝色反应
的 粗 提 取 与 鉴 定
DNA粗提取
选择适宜材料
破碎细胞
DNA的溶解和析出
DNA的纯化
鉴定DNA
与二苯胺混合，沸水浴，呈现蓝色反应
方法步骤 1.制备鸡血细胞液 柠檬酸钠溶液
加入物质
目的 ① ② ③ ④ ⑤
2.提取鸡血细胞细胞核物质 20 m1 蒸馏水 3.溶解细胞核内的DNA 4.析出含DNA 的黏稠物 5.滤取含DNA 的黏稠物 2 mo1／L 的 NaCl 溶液 40 mL 蒸馏水
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、动物细胞 动物细胞的破碎较易，例如，在鸡血细胞液中 加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌，过 滤后收集滤液即可 讨论：为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体， 水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再 加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂 (细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA
如何变化的？
DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图
4、DNA在酒精溶液中的溶解性 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质 则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA 与蛋白质进一步分离 5、DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
①蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响
②大多数蛋白质不能忍受60－80℃的高温，而 DNA在80℃以上才会变性 ③洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和 蛋白质,但对DNA没有影响
⑨
①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固
②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA 最大限度地释出 ⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上
⑥使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中
⑦除去含DNA的滤液中的杂质
⑧提取DNA
⑨ A出现蓝色 B无变化
DNA的粗提取与鉴定
⑺.提取含有杂质较少的DNA： 步骤⑹所得的滤液＋体积分数为95%的冷却酒精 50mL，用玻棒沿一个方向轻缓搅拌，溶液中（析出） 出现乳白色丝状物，用玻棒将丝状物卷起，并用滤纸 吸取上面的水分。
3.DNA的鉴定：
加入二苯胺试剂4mL，用玻棒搅拌使DNA溶解， 沸水浴5min，观察溶液是否出现蓝色。
6.将 DNA 的黏稠物再溶解
7.过滤含DNA 的 NaCl 溶液 8.提取含有杂质较少的 DNA
2 mol／L 的 NaCl 溶液 20 mL
⑥
⑦
冷却的95％的酒精50 mL A:(1)向试管中加入 2mol (2)加入 DNA ／L 的 NaCl 溶液 5mL
⑧
9.DNA 的鉴定
(3)4 mL二苯胺试剂 B:(1)向试管中加入 (2)4 mL 二苯胺试剂 2mol ／L 的 NaCl 溶液 5mL
讨论：如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样 的影响？
答：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全， 提取的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到 丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
（三）去除滤液中的杂质
为了纯化提取的DNA需要将滤液作进一步处理 讨论：此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞 成分？
答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质
三、实验小结
1.共有“三次过滤，两次析出，七次搅拌” 2.加入“两次蒸馏水， 三次NaCl溶液 ，一次酒精”
练习
1、请解释提取DNA的实验操作中主要的步骤的目的。 ．答：提取DNA的第一步是材料的选取，其目的 是一定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会 由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难； 第二步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功 与否的关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解； 第三步是DNA的纯化，即根据DNA的溶解特性、 对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将 DNA与杂质分开；最后一步是对DNA进行鉴定， 这是对整个实验的结果的检测。
2、植物细胞 ①植物细胞需要先用一定的洗涤剂和食盐溶解 细胞膜 讨论：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？
答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜， 有利于DNA的释放；食盐的主要成分是NaCl， 有利于DNA的溶解
②实例：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加 入一定的洗涤剂和食盐，进行从分的搅拌和研 磨，过滤后收集研磨液
1.在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯 中加入蒸馏水的作用是( B )。 A.稀释血液、冲洗样品 B.使血细胞破裂、降低ND.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA
2.实验中NaCl的物质的量浓度为2 mol／L和 0.14 mol／L对DNA有何影响? 答：前者是溶解DNA，后者是使DNA析出
讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？
答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而 使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是 DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋 白质变性，与DNA分离
（四） DNA的析出与鉴定 1、DNA的析出 DNA的析出用的是与滤液体积相等的冷却的酒精 溶液（体积分数为95 ％） ，静置2－3min，溶 液中会出现白色丝状物，这就是粗提取DNA。用 玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸 吸取上面的水
⑶.析出含DNA的粘稠物： 在上述溶液中缓缓加入蒸馏水，并沿一个方向轻 轻搅拌，出现丝状物；当丝状物不在增加时，停止加 水（此时NaCl溶液的浓度相当于0.14mol/L）。