猪传染性胃肠炎病毒M、sM基因重组杆状病毒的构建及病毒样颗粒的组装

猪传染性胃肠炎病毒M、sM基因重组杆状病毒的构建及病
毒样颗粒的组装
冷勇;宋振辉;卿家超;翟少华;买买提·艾孜子
【期刊名称】《畜牧兽医学报》
【年(卷),期】2013(044)009
【摘要】利用RT-PCR方法扩增猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)M和sM结构蛋白基因,将其分别克隆入载体pFastBacTM Dual,获得转移质粒pFastBacTM Dual-M 和pFastBacTMDual-M-sM,将重组质粒转化至DH10Bac感受态细胞,经抗性与蓝白斑筛选,获得杆状病毒重组质粒Bacmid-M和Bacmid-M-sM,在Cellfection作用下,将杆状病毒重组质粒转染昆虫细胞sf9,获得重组杆状病毒rBac-M和rBac-M-sM.通过Western Blot、间接免疫荧光试验(IFA)进行检测,结果显示:重组蛋白在杆状病毒感染的sf9昆虫细胞中获得正确表达.将重组杆状病毒rBac-M和rBac-M-sM分别感染sf9昆虫细胞,进行TGEV病毒样颗粒(VLPs)的体外组装试验.结果表明,M蛋白在sf9细胞内单独表达,M蛋白和sM在sf9细胞内共同表达,都可形成TGEV病毒样颗粒,而且病毒粒子大小不等,直径在61～101 nm.试验结果为进一步研究TGEV结构蛋白在病毒装配过程中的作用提供了理论依据.
【总页数】6页(P1432-1437)
【作者】冷勇;宋振辉;卿家超;翟少华;买买提·艾孜子
【作者单位】西南大学荣昌校区动物医学系,重庆402460;西南大学荣昌校区动物医学系,重庆402460;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐830052;西南大学荣昌
校区动物医学系,重庆402460;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐830052;新疆农业大学动物医学学院,乌鲁木齐830052
【正文语种】中文
【中图分类】S852.659.6
【相关文献】
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