SPE(固相萃取法)的介绍
固相萃取
3221 3201 3101 3111 3121 3131 3141 3151 3311 3321 3211 3241 3331 3301 3341
3223 33203 3103 3113 3123 3133 3143 3153 3313 3323 3213 3243 3333 3303 3343
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5228 5208 5108 5118 5128 5138 5148 5158 5318 5328 5218 5248 5338 5308 5348
Spe-ed 固相萃取柱—快速、可靠、高重现性的样品前处理产品
美国 Applied separations Inc.(ASI）生产的 Spe-ed 固相萃取小柱，通过高新技术严格控制每批填料的 颗粒大小、孔径、表面积、碳覆盖率、是否封尾和表面 PH 值，保证批次间极好的重现性，达到最大的回 收率。柱管采用高纯度医疗级别聚丙烯制成，每批柱管、筛板和填料均要经过高纯度试剂多次冲洗，保证 无污染。多种不同填料、多种规格和专用产品的固相萃取柱满足您不同的应用。
CNe 氰基 硅胶 FLO 中性氧化铝 酸性氧化铝 碱性氧化铝 二醇基 COOH SCX 氨基 PSA DEA N+ PBA
5223 5203 5103 5113 5123 5133 5143 5153 5313 5323 5213 5243 5333 5303 5343
固相萃取SPE
固相萃取SPE一、概念和原理固相萃取（Solid-Phase Extraction，简称SPE）是一项从八十年代中期开始发展起来的样品前处理技术。
主要用于液体中的半挥发性、难挥发性物质的检测基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程，利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物与干扰化合物分离，达到分离和富集目标化合物的目的。
SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。
其分离机理是利用杂质或目标化合物与样品技术基体溶剂和吸附剂之间亲和力的相对大小。
二、SPE的模式及原理1、正相SPE采用比样品本身更强极性的溶剂洗脱吸附的分析物质①吸附剂（固定相）：极性键合相和极性吸附剂，如硅胶键合－NH2、－CN，-Diol（二醇基）silica、florisil、(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等．②原理：分析物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间的相互作用。
③作用机理：极性-极性、偶极-偶极、偶极-诱导偶极、氢键，π-π键等。
④流动相：非极性、中等极性⑤固定相：极性。
⑥分析物质：极性、中等极性、非极性⑦应用：从非极性溶剂样品中萃取极性化合物。
⑧常用正相固相萃取柱极性官能团键合硅胶-CN，-NH2，-Diol极性吸附物质ProElut TM-Silica，ProElutTM-Florisi ProElutTM-Alumina2、反相SPE用非极性溶剂解吸吸附在固定相中的目标物质。
①吸附剂（固定相）：非极性或弱极性，如硅胶键合C18,C8, C4,C2,-苯基等。
②分析物中的CH键+ 硅胶表面官能团→吸附→极性溶液中的弱有机分析物→保留在SPE。
③作用机理：非极性-非极性相互作用，如范德华力或色散力。
④流动相：极性（水溶液）或中等极性⑤固定相：非极性⑥分离对象：中等到非极性物质⑦应用：强极性的溶剂中（如水样）萃取是非极性或弱极性的化合物。
固相萃取SPE技术
固相萃取SPE技术一、固相萃取概念及基本原理：固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。
由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。
主要通过固相填料对样品组分的择性吸咐及解吸过程，实现对样品的分离，纯化和富集。
主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度。
固相萃取的基本原理和方法：SPE 技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似的看作一种简单的色谱过程。
固相萃取(SPE)是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。
较常用的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。
二、固相萃取方法的优点相对于传统的液液萃取法和蛋白沉淀法，固相萃取具有无可比拟的优势：1.无需特殊装置和材料,操作简单2.集样品富集及净化与一身，提高检测灵敏度的最佳方法3.比液液萃取更快，节省溶剂4.可自动化批量处理5.重现性好三、固相萃取的分类固相萃取填料按保留机理分为：正相:Silica,NH2,CN,Diol,Florisil,Alumina反相：C18,C8,Ph,C4,NH2,CN,PEP,PS等离子交换：SCX,SAX,COOH,NH2等混合型：PCX,PAX,C8/SCX等按填料类型共分为4类：1．键合硅胶：C18(封端),C18-N(未端),C8,CN,NH2,PSA,SAX,COOH,PRS,SCX,Silica,Diol。
在SPE中最常用的吸附剂是硅胶或键合相的硅胶即在硅胶表面的硅醇基团上键合不同的官能团。
其pH适用范围2-8。
键合硅胶基质的填料种类较多，具有多选择性的优点。
SPE固相萃取简介
2、选择适当的保留方法：可能的方法有两种：第一，被分析物不保留与填充床，而干扰物保留，如此纯化了样品。第二，被分析物保留与填充床，而干扰物不保留，或者在样品洗脱前先从填充床上洗脱。当样品需要浓缩时，常用的方法为第二种方法。
离子交换填料——强阴离子(SAX)和强阳离子（SCX）交换基均有供应。样品中阴/阳离子分别和树脂上的阴/阳离子交换使得阴/阳离子保留于相关树脂上。洗脱采用高离子强度的缓冲液（0.1M—0.5M），或者通过改变淋洗液的pH使得样品中化合物不再带电荷。这些树脂的骨架通常为苯乙烯—二乙烯基苯共聚物，样品中有机溶剂含量的增加将会导致交换容量的降低。
强阴离子交换（SAX）：
强阴离子交换萃取，适合于阴离子，有机酸，核酸，核苷酸，表面活化剂。容量：0.2毫当量/克。
强阳离子交换（SCX）：
强阳离子交换萃取，适合于阳离子，抗菌素，药物，有机碱，氨基酸，儿茶酚胺，除草剂，核酸碱，核苷，表面活化剂。容量：0.2毫当量/克。
酸性氧化铝：
极性化合物离子交换和吸附萃取，如维生素。
碱性氧化铝：
吸附萃取和阳离子交换。
中性氧化铝：
极性化合物吸附萃取。调节pH，阳和阴离子交换，适合于维生素，抗菌素，芳香油，酶，糖苷，激素。
硅酸镁：
极性化合物的吸附萃取，如乙醇，醛，胺，药物，染料，除草剂，农药，PCBs，酣，含氮类化合物，有机酸，苯酚，类固醇。
常 用 固 相 萃 取 程 序
反相填料——此类填料中包括应用最为广泛的反相填料C18。另外，C8，C2环已基和苯基键合相也有供应，并提供不同的选择性。一般来说，非极性到中等极性化合物在极性基质中保留于反相填料上。此种填料要求在使用前以有机溶剂和随后的水溶液进行平衡调节。中等极性化合物的洗脱通常采用甲醇，对于非极性的化合物的洗脱则需要极性更低的溶剂。
固相萃取法
固相萃取法
固相萃取是一种分离技术，它能有效的将目标物质从混合液中分离出来，并分离混合
液中其他无关组分。
固相萃取法(SPE)即固相萃取技术，是一种微量样品处理技术，它可
在时间范围内、材料有效性强以及化学划分效果好的前提下实现样品的提取、滤除和纯化，浓缩或其他调节的加工功能。
固相萃取的原理是在新型可拆活性固态吸附剂中，通过交换、吸附和扩散等物理反应
加以提取杂质物质，而其他物质则不会受其影响。
在固相萃取的过程中，新型可拆活性固
态吸附剂具有高度的特异性，能够在较短的时间内实现杂质物质的极高提取效率。
固相萃取既可以使用少量样品，又可以实现高效、精确的分离效果。
它以极为精确的
反应动力学模型实现了简便、准确、可处理大容量样品的分离，通过改变可拆活性固态吸
附剂属性可以达到对不同物质的提取。
固相萃取在分离大量杂质中也十分有用，可使用具有高选择性的可拆活性固态吸附剂
来进行分离，其有效性和精确度远高于其他流动溶剂萃取方法。
作为一种快速、无污染的
分离方式，固相萃取可以实现大量样品的高效分离，大大降低了试验成本和时间消耗，对
环境保护也非常有利。
SPE
SPE定义SPE，固相萃取( Solid Phase Extraction,简称SPE)是1 种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。
SPE 是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附, 与样品的基体和干扰化合物分离, 然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附, 达到分离和富集目标化合物的目的。
与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。
广泛的应用在医药、食品、环境、商检、化工等领域。
因其具有安全、回收率高, 重现性好、操作简便、快速、应用范围广、易实现自动化操作[等特点, 从而显示出良好的发展前景, 在相关领域的应用越来越多[。
从1978 年美国Waters 公司首先将一次性SPE 商品柱投放到市场以来,据不完全统计, SPE 商品柱一直以每年10%的增长速度。
SPE装置SPE 装置一般由柱管、烧结垫, 固定相3 部分组成,其中固定相是SPE 柱中最重要的部分。
最常见的固定相是键合的硅胶材料, 也有很多非硅胶基的固定相被广泛应用。
工作原理固相萃取是一个包括液相和固相的物理萃取过程,主要适用于水中组分的处理。
吸附剂是固相,而液相是萃取过程中的水样或解析过程的有机溶剂。
当水样通过装有合适吸附剂的SPE 柱时,其中某些痕量待测物质被保留在固定相当中,然后再用少量的选择性溶剂浏兑,因此, SpE 是同时进行萃取和浓缩的有效方法。
由于其工作原理、固定相、溶剂的选择等方面与高效液相色谱有许多相似之处，SPE也可以近似的看成是一个简单的柱色谱过程。
固相萃取(SPE) 技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似的看作一种简单的色谱过程。
SPE是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。
较常用的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
固相萃取基本原理与应用
固相萃取基本原理与应用固相萃取（Solid-Phase Extraction，SPE）是一种常用的样品前处理技术，用于分离和富集目标物质。
固相萃取基于样品中不同成分的物理化学性质的差异，通过选择或调整萃取剂和固相材料，实现对目标物质的选择性富集和净化。
固相萃取广泛应用于环境监测、食品安全、药物分析、生物医学等领域，其原理和应用如下：1.基本原理固相萃取的基本原理是通过液相萃取的方式将待分析样品中的目标化合物以固相吸附剂的形式富集在其表面，而非直接溶解在溶剂中。
固相吸附剂通常为固体颗粒，其表面具有一定的化学性质，使其可以选择性吸附目标物质。
固相吸附剂选择应根据目标物质的化学性质、样品基质的复杂性以及目标物质与基质之间的亲疏水性等因素进行合理选择。
固相萃取通常包括以下几个步骤：样品预处理、样品加载、洗脱和目标物质的Elution。
首先，在样品处理之前需要对样品进行预处理，如固体样品的研磨和溶液样品的过滤。
然后，将样品与固相吸附剂接触，目标物质由样品基质中被吸附在固相吸附剂上。
洗脱步骤是为了去除干扰物质，保留目标物质。
最后，目标物质以合适的溶剂进行洗脱，得到净化的目标物质。
2.应用领域固相萃取广泛应用于不同领域的样品前处理和分析中。
以下是一些常见的应用：2.1环境监测固相萃取在环境监测中扮演了重要角色。
它可以应用于水体、土壤、大气等样品中有机污染物的富集和分离。
比如，对于水样品，固相萃取通常用于分离和测定有机污染物如农药、药物残留、挥发性有机物等。
2.2食品安全固相萃取在食品安全领域中也有广泛应用。
食品中的农药残留、有害物质和食品添加剂等可通过固相萃取富集和分离。
固相萃取的优点在于其选择性、灵敏度和高效性，可以满足对食品安全的严格监测要求。
2.3药物分析固相萃取在药物分析领域也有重要应用。
药物在生物样品中的富集和分离可通过固相萃取实现。
例如，对于尿液样品，固相萃取被广泛应用于药物代谢产物、毒性物质和药物残留的分析。
国达SPE固相萃取原理
固相萃取介绍（Solid Phase Extraction 简称SPE）是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术。
大多数用来处理液体样品，萃取、浓缩和净化其中的半挥发性和不挥发性化合物；国达固相萃取SPE T-E-L：4001158566也可用于固体样品，但必须先把固体样品处理成液体。
目前国内主要应用于食品安全领域，如各类抗生素、抗菌药在各类食品中的残留分析；农产品中农药残留分析；各类食品中合法、非法添加剂分析等。
在药物研究领域，广泛应用于药物药代、药动分析和中药分析。
在环保领域，应用于环境中多环芳烃（PAHs）、多氯联苯（PCBs）、各类农药分析；饮用水、地下水和污水的有机物质分析。
依托在色谱填料生产研发方面拥有的核心技术和强大的新产品开发能力，国达固相萃取SPE，包括硅胶®基质、非硅胶基无机吸附剂、聚合物基质、混合型SPE 和真菌毒素免疫亲和柱等固相萃取产品，可以极大的满足您实验所需。
固相萃取原理固相萃取是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。
由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。
主要通过固相填料对样品组分的选择性吸咐及解吸过程，实现对样品的分离，纯化和富集。
主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度。
当复杂的样品溶液通过吸附剂时，吸附剂会通过极性相互作用、非极性相互作用或离子交换等作用力选择性地保留目标化合物和少量与目标化合物性质相近的干扰物，其他组分则透过吸附剂流出小柱，然后用另一种洗脱能力较强的溶剂体系选择性地把目标物洗脱下来，从而实现对复杂样品的分离、纯化和富集。
固相萃取的作用机制与液相色谱是相同的，然而由于前者对溶剂体系进行了特殊选择，使得两者在分离效果上出现了一些差异。
固相萃取(SPE) 是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。
较常用的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
体内药分固相萃取
高香草酸（HVA）
固相萃取条件：
吸附剂：乙二胺修饰的超高交联树脂微粒（HXLPP – WAX）
2、分子印迹吸附剂
带某一特异识别单体的聚合物，耐高温，p H 使用范围宽 ， 能从复杂的 生物基质 中选择性提取出微量分析 物
3、 免疫萃取吸附剂
利用抗体一抗原的相互作用， 特异性识别与 自身结构相 似的组分， 从而 与杂质分离。
四、SPE法的优缺点
优点：
引入杂质少；避免乳化的形成；萃取率高，重 现性较好；样 品用量少；柱子可弃，无污染； 溶剂大多可与水混合，易于自动化。
缀合物的水解
缀合物：药物或其代谢物与体内的内源性物质 结合生成的产物。 内源性物质：葡萄糖醛酸、硫酸、甘氨酸、谷
胱甘肽和醋酸等。 尿中药物多数呈缀合状态。缀合物较原型药物具有 较大的极性，不易被有机溶剂提取，为测定尿药总 量,需水解缀合物。
常用酸水解或酶水解
1. 酸水解法 2. 酶水解法 3.溶剂解法 溶剂萃取过 程中缀合物(尤 其硫酸酯)直接 分解 条件温和
分类：阴离子交换和阳离子交换
原理:离子交换及憎水吸附
•对于弱酸性药物，在中性或碱性条件下用阴离子交换方法萃取，用水及
有机溶剂（大多数用甲醇）清洗后，用酸性溶液洗脱。 •对于碱性药物，反之。
应用：适用于高极性，可电离的药物
特点：回收率好，选择性好，但是费时
（五）新型固相萃取剂
1、混合型吸附 剂
•极性、非极性基团、离子交换基团或高分子树脂混合使用 •使用范围更 广， 可用于各种化合物的萃取浓缩 •如以氯甲基化的高分子 树脂 P S—D Y B， 即能同时萃取离子型和非离 子型化合物 •如 Wa t e r s的 O a s i s H L B，不需活化，具有很宽的 p H( 1~12) 范围， 特别适用于血 浆、 尿液等生物样品。
固相萃取的概念、步骤和操作
固相萃取的概念、步骤和操作概念：利用固体吸附剂将样品中的目标分析物吸附，与样品的基质和干扰物分离，然后再用有机溶剂或加热解吸附，达到分离、纯化及浓缩目标物的目的。
固相萃取（SPE）是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附，与样品的基体和干扰化合物分离，然后再用洗脱液洗脱，达到分离和富集的目的。
先使液体样品通过一装有吸附剂（固相）小柱，保留其中某些组分，再选用适当的溶剂冲洗杂质，然后用少量溶剂迅速洗脱，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
SPE可以用于所有类型样品的处理，但是液体样品是最容易处理的与液液萃取(LLE)相比，固相萃取具有如下优点：①回收率和富集倍数高；②有机溶剂消耗量低，减少对环境的污染；③更有效的将分析物与干扰组分分离；④无相分离操作过程，容易收集分析物；⑤能处理小体积试样；⑥操作简便、快速，费用低，易于实现自动化及与其他分析仪器联用。
固相萃取的基本原理：吸附剂上的活性部分对目标物和样品基质的分子作用力存在差异固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。
洗脱模式：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的洗脱。
通常采用前一种洗脱方式。
一、固相萃取的分离模式：反相固相萃取、正相固相萃取、离子交换萃取、免疫亲和1、反相固相萃取：吸附剂（固定相）是非极性或弱极性的，如硅胶键合C18, C8, C4，C2,-苯基等。
流动相为极性（水溶液）或中等极性样品基质。
吸附剂的极性小于洗脱液的极性。
应用：可以从强极性的溶剂中（如水样）萃取非极性或弱极性的化合物。
作用机理：非极性-非极性相互作用（疏水作用），如范德华力或色散力。
例如水中PAHs，利用C18柱，甲醇洗脱剂洗脱。
2、正相固相萃取：（1）吸附剂：极性键合相，如硅胶键合氨基－NH2、氰基－CN，-Diol（二醇基）；（2）极性吸附剂，如silica、Florisil、(A-,N-,B-)alumina、硅藻土等。
固相萃取概述范文
固相萃取概述范文固相萃取（Solid-Phase Extraction，简称SPE）是一种常用的样品净化和浓缩技术，广泛应用于化学、生物、环境、食品等领域的样品前处理中。
与传统的液液萃取相比，固相萃取具有操作简便、高效、快速、高选择性和灵敏度高等优点，成为现代分析化学的重要工具之一固相萃取的基本原理是利用特定的固定相材料，将目标物质从样品中吸附，然后通过洗脱的方式将目标物质从固定相材料上解吸出来，得到纯净的目标物质溶液。
固定相材料通常是具有一定亲疏水性的非极性或极性材料，如聚合物、硅胶、氧化铝、硅胶颗粒等。
固相萃取的主要步骤包括样品预处理、固相柱条件化、样品通入、洗脱和目标物质回收等。
首先，样品需要进行必要的预处理，如样品溶解、过滤、离心浓缩等，以提高固相萃取效果。
随后，固相柱条件化，即在柱中加入一定的溶剂，使固定相材料达到最佳吸附状态。
然后，将已经进行预处理的样品通入固相柱，待固定相材料吸附目标物质。
洗涤步骤是为了去除固相材料上的干扰物质，通常使用不同极性的溶剂进行洗涤。
最后，目标物质通过洗脱剂溶解，溶液经过一定的浓缩处理，得到纯净的目标物质。
固相萃取的选择性主要取决于固定相材料的性质和样品溶液的成分。
通常选择与目标物质具有一定亲疏水性的固定相材料，以增强目标物质与固定相的相互作用，提高吸附效果。
在样品溶液的选择上，关键是要将目标物质溶解在适当的有机溶剂中，以达到最佳的吸附效果。
固相萃取有许多不同的应用领域和方法。
常用的固相萃取方法包括吸附剂填充固相萃取柱、固相微萃取（Solid-Phase Microextraction，SPME）和固相微柱萃取（Solid-Phase Microcolumn Extraction，SPME）等。
吸附剂填充固相萃取柱适用于大样品量的分析，且具有较高的灵敏度和选择性。
SPME和SPME主要用于小样品量的分析，操作简便，不需要使用溶剂，适用于挥发性和半挥发性物质的萃取。
固相萃取简介
固相萃取基础知识固相萃取（Solid-Phase Extraction，简称SPE）是近年发展起来一种样品预处理技术，由液固萃取和柱液相色谱技术相结合发展而来，主要用于样品的分离、纯化和浓缩，与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。
广泛的应用在医药、食品、环境、商检、化工等领域。
原理：SPE是一个包括液相和固相的物理萃取过程。
在SPE过程中，固相对分析物的吸附力大于样品母液，当样品通过SPE柱时，分析物被吸附在固体表面，其他组分则随样品母液通过柱子，最后用适当的溶剂将分析物脱下来。
利用被测样品中的化合物与背景杂质在SEP柱不同填料中的分配系数差异，匹配相应的洗脱溶剂，将化合物和杂质分离。
固相萃取(SPE)是一种用途广泛而且越来越受欢迎的样品前处理技术,它建立在传统的液-液萃取(LLE) 基础之上,结合物质相互作用的相似相溶机理和目前广泛应用的HPLC、 GC中的固定相基本知识逐渐发展起来的。
SPE具有有机溶剂用量少、便捷、安全、高效等特点。
SPE根据其相似相溶机理可分为四种:反相SPE、正相SPE、离子交换SPE、吸附SPE。
SPE大多数用来处理液体样品,萃取、浓缩和净化其中的半挥发性和不挥发性化合物,也可用于固体样品,但必须先处理成液体。
用途：1、被测样品的富集2、除去干扰的杂质3、改变被测样品的基体，使其适合分析时的需要。
目前国内主要应用在水中多环芳烃(PAHs) 和多氯联苯(PCBs)等有机物质分析,水果、蔬菜及食品中农药和除草剂残留分析,抗生素分析,临床药物分析等方面。
SPE装置由SPE小柱和辅件构成。
SPE小柱由三部分组成, 医用聚丙烯柱管、烧结垫（多孔聚丙烯筛板）和填料（多为40-60μm，80-100μm）。
常见规格：实际中常用的是100mg/1ml,200mg/3ml,500mg/3ml,1g/6ml等。
固相萃取(SPE)原理及应用
固相萃取(SPE)原理及应用固相萃取(SPE)是一种用在色谱分析（如 HPLC、GC、TLC 色谱）前快速、选择性制备和纯化样品的技术，通过萃取、分配和/或吸附到固体固定相上，将一种或多种分析物从液体样品之中分离。
固相萃取样品制备可让样品从原始的基质环境转换为更简单的基质环境，由此使样品更适于后续色谱分析，往往可以简化并改善最终的定性和定量分析。
此外，更简单的样品基质也更容易满足分析系统要求，更有益于延长系统使用寿命。
通过理想的固相萃取处理步骤，您可以：•让样品基质变得与目标色谱方法更兼容。
•浓缩分析物（痕量富集）以提高灵敏度。
•去除可能在色谱分析过程中引起高背景、误导性峰和/或灵敏度下降的干扰成分。
•保护分析柱免受污染。
•实现萃取工艺自动化。
SPE原理在SPE过程中，固定相（吸附剂或树脂）通过强效但可逆的相互作用与分析物或杂质结合，从复杂样品中可靠、快速地萃取目标分析物。
由于不同的分析物和基质有多种吸附剂和洗脱条件可选，故SPE兼具选择性和通用性。
常见的SPE吸附剂包括：•硅基o反相（C18、C8、氰基、苯基）o正相（二氧化硅、二醇基、NH2）o离子交换（SAX，WCX，SCX）•碳基•基于聚合物（各种组分、不同功能）•其他吸附剂，例如Florisil®（硅酸镁）或氧化铝•混合床：连续层形式的上述任意吸附剂组合SPE策略默克Supelco® 温馨提示“吸附-洗脱SPE”：通过吸附剂捕获目标分析物，让基质干扰成分通过小柱。
“干扰物去除SPE”：通过吸附剂捕获基质干扰成分，让目标分析物通过。
HybridSPE和QuEChERS SPE方法均采用干扰物去除工作原理。
最适宜的SPE方法取决于分析物结构、溶解度、极性和亲脂性（分散系数）。
默克为此提供了选择指南，可帮助根据自身目标应用选择最适宜的固定相和溶剂。
常见SPE应用广泛用于制药、临床和高通量诊断检测、法医学、环境和食品/农业化学行业，适用于以下成分分析：•生物体液中的药物化合物和代谢产物•生物体液中的违禁药物•饮用水和污水中的环境污染物•食品/农业基质中的农药、抗生素或霉菌毒素•蛋白质和多肽脱盐•脂质组分分离•水溶和脂溶性维生素。
固相萃取SPE技术
固相萃取SPE技术一、固相萃取概念及基本原理：固相萃取(Solid Phase Extraction,简称SPE)是从八十年代中期开始发展起来的一项样品前处理技术。
由液固萃取和液相色谱技术相结合发展而来。
主要通过固相填料对样品组分的择性吸咐及解吸过程，实现对样品的分离，纯化和富集。
主要目的在于降低样品基质干扰，提高检测灵敏度。
固相萃取的基本原理和方法：SPE 技术基于液-固相色谱理论，采用选择性吸附、选择性洗脱的方式对样品进行富集、分离、纯化，是一种包括液相和固相的物理萃取过程；也可以将其近似的看作一种简单的色谱过程。
固相萃取(SPE)是利用选择性吸附与选择性洗脱的液相色谱法分离原理。
较常用的方法是使液体样品通过一吸附剂，保留其中被测物质，再选用适当强度溶剂冲去杂质，然后用少量良溶剂洗脱被测物质，从而达到快速分离净化与浓缩的目的。
也可选择性吸附干扰杂质，而让被测物质流出；或同时吸附杂质和被测物质，再使用合适的溶剂选择性洗脱被测物质。
二、固相萃取方法的优点相对于传统的液液萃取法和蛋白沉淀法，固相萃取具有无可比拟的优势：1.无需特殊装置和材料,操作简单2.集样品富集及净化与一身，提高检测灵敏度的最佳方法3.比液液萃取更快，节省溶剂4.可自动化批量处理5.重现性好三、固相萃取的分类固相萃取填料按保留机理分为：正相:Silica,NH2,CN,Diol,Florisil,Alumina反相：C18,C8,Ph,C4,NH2,CN,PEP,PS等离子交换：SCX,SAX,COOH,NH2等混合型：PCX,PAX,C8/SCX等按填料类型共分为4类：1．键合硅胶：C18(封端),C18-N(未端),C8,CN,NH2,PSA,SAX,COOH,PRS,SCX,Silica,Diol。
在SPE中最常用的吸附剂是硅胶或键合相的硅胶即在硅胶表面的硅醇基团上键合不同的官能团。
其pH适用范围2-8。
键合硅胶基质的填料种类较多，具有多选择性的优点。
固相萃取技术
SO3CO2H
N+Me3 NHCH2CH2NH2
NH2
固相萃取技术
0.7meq/g 0.3meq/g pH-sensitive 0.8meq/g pH-sensitive pH-sensitive
五、SPE的类型
Silica base
分析物与离子交换剂的作用力 OH
SO3+N
NH3+
CO2-
OCON(CH3)2
Polar Ion exchange
固相萃取技术
五、 SPE的类型
混合模式固定相
固相萃取技术
固相萃取技术
六、 SPE方法的建立
SPE操作步骤包括有柱子类型的选择、柱预 处理、加样、洗去干扰物和回收分析物四个步 骤。
在加样和洗去干扰物步骤中，部分分析物有 可能穿透SPE柱造成损失，而在回收分析物步 骤中，分析物可能不被完全洗脱，仍有部分残 留在柱上。最理想的情况是分析物100%地回收 到收集的组分中，但这并不是总能达到的。
4、Amino (NH2) and diol sorbents interact with analytes by hydrogen bonding.
5、Hexane-soluble analytes are best retained by normalphase sorbents such as silica or Florisil or polar functionally substituted bonded phases such as amino or diol.
二、SPE基本原理
SPE是一种吸附剂萃取，样品通过填充吸附 剂的一次性萃取柱，分析物和杂质被保留在柱 上，然后分别用选择性溶剂去除杂质，洗脱出 分析物，从而达到分离的目的。
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硅酸镁 75-150u m 氧化铝 130u m
100 A 0
离子交换及其他类型SPE填料
离子交换 基质 交换容量 保留化合物 强阴离子S A X 8% 交联聚苯乙烯- 0. 200m g 带负电荷化合物 30/ 二乙烯基苯 强阳离子S C X 8% 交联聚苯乙烯- 0. 200m g 带正电荷化合物 48/ 二乙烯基苯 其他类型填料 D VB 100% 二乙烯基苯 40u m 环境污染物如酚 、酸性农药；极 性药物代谢物、 核酸等 水中极性有机物 ，尤其是分离开 酸性及中性/ 碱性 农药
分子量少于2000
可溶于水样品 离子性样品 阳离子型 阴离子型 反相 (压 抑 离 子 化 ) C2,C8,C18, 苯基、环己基 非离子性样品 反相萃取
强阳离子交换 SCX
强阴离子交换 SAX
C2,C8,C18, 苯基、环己基
溶剂极性图
反相溶剂洗脱强度
己烷 异辛烷 四氯化碳 氯仿 二氯甲烷 四氢呋喃 乙醚 乙酸乙酯 丙酮 乙腈 异丙醇 甲醇 水
正相溶剂洗脱强度
萃取小柱填料规格(反相)
官能团 C 18 高流速C 18 高容量C 18 C8 高容量C 8 乙基C 2 苯基 环己基 基质 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 平均颗粒度 孔径 50u m 100u m 50u m 50u m 50u m 50u m 50u m 50u m 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 碳覆盖率 6. 0% 8. 0% 17. 0% 4. 5% 8. 5% 5. 5% 3. 8% 3. 5% 封尾 有 有 有 有 有 有 有 有
萃取小柱填料规格(正相)
官能团 硅胶 氨丙基 氰丙基 二醇基 弗罗里土 氧化铝 (酸性、中性 、碱性) 基质 硅胶 硅胶 硅胶 硅胶 平均颗粒度 孔径 50u m 50u m 50u m 50u m 60 A 60 A 60 A 60 A 60 A 碳覆盖率 0 5. 0% 6. 0% 4. 0% 0 封尾 没有 没有 有 没有 没有 没有
SPE萃取小柱配件
•串联/针筒连接器、盖、出口堵头、筛板 •不锈钢针、聚丙烯针、Teflon针
Extract-Clean使用方法1
Extract-Clean使用方法2
真空多头富集器的使用
•12、16及24头3种 •可配套气体吹扫干燥附件
通用SPE萃取程序
反相填料
A。老化 1。用3-5ml甲醇冲洗填料 2。用3-5ml水或缓冲液冲洗，上样前勿让填料流干。 B。上样 3。样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若 所需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。 C。冲洗 4。如果样品被保留，使用约5ml极性溶剂(如水、缓冲液或 有机溶剂/水混合液)将弱保留干扰物洗出。 D。用1-2ml非极性溶剂将所需物质洗脱，收集用于分析。
Extract-Clean RC萃取小柱
•用于Zymark型自动化萃取工作站 •配20ml溶剂槽 •柱床有100mg,200mg, 500mg及1g四种 •填料与Extact-Clean相 同
Maxi-Clean萃取小柱
•精密注塑聚丙烯管体 •Luer式阴进口及阳出口 方便接上注射器和针头 •填料于Extract-Clean 相同 •柱床有300mg,600mg 900mg •可代替Waters SepPak小柱
通用SPE萃取程序
正相填料
A。老化 1。用3-5ml非极性溶剂冲洗填料 B。上样 2。样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若 所需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。 C。冲洗 4。如果样品被保留，使用约5ml非极性溶剂将弱保留干扰 物洗出。 D。用1-2ml极性溶剂将所需物质洗脱，收集用于分析。
C arb o g rap h
石墨化碳黑
38-125u m
Extract-Clean萃取小柱
•聚丙烯管体 •20um多孔聚乙烯筛板 •多种柱床填料 -50mg,100mg,200mg, 500mg,1g,2g,5g,10g •多种容量 -1ml,2.8ml,3ml,6ml, 10ml,20ml,60ml
SPE产品选择指导
可溶解样品
真空萃取 E xtra ct-C l a n 柱 e 非极性样品 反相 a xi l a n 柱 -C e
极性样品 正相填料
离子性样品 离子交换填料
分子量少于2000
可溶于有机溶剂样品 溶 于 甲 醇 或 甲 醇 /水 反相萃取 C 2 ,C 8 ,C 1 8 , 苯基、环己基 正相萃取 (分 配 ) 氨基、氰丙基、 二醇基 溶于己烷 正相萃取 (吸 附 ) 硅胶、弗罗里土、 氧化铝
固相萃取法(SPE) 作为样品前处理使用介绍
什么是SPE？
•固体Solid(S)，状态或相Phase(P)，萃 取Extraction(E) •样品在分析前的预处理 •基于液相色谱原理 •将被分析物与杂质分开 •浓缩样品
HPLC与SPE比较
硬件 颗粒度(um ) 颗粒形状 塔板数/柱 分离机理 操作成本 设备成本 分离模式 操作 H P LC 不锈钢柱 5 球型 20-25, 000 连续洗脱 中至高 高 多种 可重复使用 SPE 塑料柱 40 无定型 <100 “数字式” 开关洗脱 低 低 多种 一次性
为什么用SPE？
•从基质中消除干扰物 •保护色谱柱 •减少样品与溶剂使用量 •缩短处理时间 •提高回收率
固相萃取使用要点
1。准确了解样品物理及化学特性 2。选择合适的样品净化机理
-保留被分析物，洗脱污染物 -保留污染物，洗脱被分析物
3。选择适当的SPE产品
-填料类型、柱容量、配套附件
4。选择老化及洗脱溶剂
通用SPE萃取程序
离子交换填料
A。老化 1。用5ml去离子水或低离子强度缓冲液(0.001M-0.01M) 冲洗填料 B。上样 2。样品加到柱床上，以1-5ml/min.低流速通过填料。若 所需样品不会被保留，此时应收集样品作分析。 C。冲洗 3。如果样品被保留，使用约5ml去离子水或低离子强度缓 冲液将弱保留干扰物洗出。 D。用1-5ml高浓度缓冲液(0.1-0.5M) ，或以缓冲液改变pH，使 得样品不再离子化，将所需物质洗脱，收集用于分析。