电镜实验操作技术
实验三 电子显微镜技术的演示
实验三电子显微镜技术的演示背景知识：普通光学显微镜通过提高和改善透镜的性能，使放大率达到1000~1500倍左右，但一直未超过2000倍。
这是由于普通光学显微镜的放大能力受光的波长的限制。
为了从更高的层次上研究物质的结构，必须另辟蹊径，创造出功能更强的显微镜。
20世纪20年代法国科学家德布罗意发现电子流也具有波动性，其波长与能量有确定关系，能量越大波长越短，比如电子学1000伏特的电场加速后其波长是0.388埃，用10万伏电场加速后波长只有0.0387埃，于是科学家们就想到是否可以用电子束来代替光波，这是电子显微镜即将诞生的一个先兆。
用电子束来制造显微镜，关键是找到能使电子束聚焦的透镜，光学透镜是无法会聚电子束的。
1926年，德国科学家蒲许提出了关于电子在磁场中运动的理论。
他指出：“具有轴对称性的磁场对电子束来说起着透镜的作用。
”这样，蒲许就从理论上解决了电子显微镜的透镜问题，因为电子束来说，磁场显示出透镜的作用，所以称为“磁透镜”。
1931年，德国柏林工科大学的Knoll和Ruska制作成功第一台电子显微镜──它是一台经过改进的阴极射线示波器，成功地得到了铜网的放大像──第一次由电子束形成的图像，加速电压为7万，最初放大率仅为17倍。
尽管分辨率还不如光学显微镜高，但它却证实了使用电子束和电子透镜可形成与光学像相同的电子像。
经过不断地改进，1933年Ruska和Bodo Von Borries又制成了第二台两级短焦距的电子显微镜，获得了金属箔和纤维的放大1万倍的电子图像。
虽然放大率得到提高，但分辨率当时还刚刚达到光学显微镜的水平。
1937年应西门子公司的邀请，Ruska建立了超显微镜学实验室。
1939年西门子公司制造出分辨本领达到30埃的世界上最早的实用电子显微镜，并投入批量生产。
随后，透射电镜的商业产品由美国无线电公司于1941年开始制作生产。
电子显微镜的出现使人类的洞察能力提高了好几百倍，不仅看到了病毒，而且看见了一些大分子，即使经过特殊制备的某些类型材料样品里的原子，也能够被看到。
电子显微镜操作步骤说明书
电子显微镜操作步骤说明书简介：电子显微镜（Electron Microscope，简称EM）是一种利用电子束来观察和研究物质的高分辨率显微技术。
本文将详细介绍电子显微镜的操作步骤，以帮助读者正确操作并获得准确的实验结果。
操作步骤：1. 准备工作在使用电子显微镜之前，需要进行一些准备工作。
首先，确保实验室环境干净，无尘、无污物，以确保获得清晰的显微图像。
其次，将样本制备好，确保样本表面平整、无污染，并且大小适宜，方便放置于电子显微镜观察。
2. 开机与预热将电子显微镜接通电源，确保连接无误。
然后，打开电子显微镜主机的电源开关，待其启动完成后，进行预热。
预热时间根据具体仪器而有所不同，请根据仪器使用说明书确定预热时间。
在预热过程中，可以进行一些其他准备工作，如调整目镜和物镜的位置。
3. 调整仪器参数在预热完成后，进入仪器调整阶段。
首先，调整加速电压和透射电镜电压。
加速电压决定了电子束的能量，透射电镜电压决定了样本投射到屏幕上的亮度和对比度。
根据实验要求，选择合适的加速电压和透射电镜电压。
4. 样本装载将已经准备好的样本装入样本架，并通过样本架的旋转或移动机构将样本调整到适当的位置。
确保样本安装稳固，并注意不要触碰样本的表面。
5. 调整焦距与对焦通过调整物镜的焦距和目镜的焦距，可以实现对样本的清晰观察。
首先，通过移动物镜或调整物镜焦距的方式来对焦。
然后，通过调整目镜的焦距，使样本的图像清晰可见。
在对焦过程中，可以通过透射电镜和屏幕上的图像实时观察和调整。
6. 选择增大倍率与观察根据需要，选择合适的增大倍率。
电子显微镜具有较高的放大倍率，可以观察微小的物体和细节。
在观察过程中，可以通过样本架的调整，以及调节图像亮度和对比度，来获得最佳的观察效果。
7. 实时调整参数与记录结果在观察样本的过程中，可能需要对加速电压、透射电镜电压、焦距等参数进行实时调整，以获得更好的观察效果。
同时，将观察到的结果记录下来，以备后续分析和研究使用。
场发射扫描电镜的样品制备和操作步骤
场发射扫描电镜的样品制备和操作步骤场发射扫描电镜（Field Emission Scanning Electron Microscopy）是一种高分辨率的电子显微镜技术，可用于观察和分析各种材料的表面形貌和微观结构。
为了获得清晰的显微图像，样品制备和操作步骤非常重要。
一、样品制备1. 样品的选择：场发射扫描电镜适用于不同种类的材料，如金属、陶瓷、聚合物等。
选择合适的样品很关键，它应具备研究对象的特性，并且能够承受电子束的辐照。
2. 样品的固定：为了保持样品的形状和结构不变，通常需要将其进行固定。
对于固态材料，可以使用金属夹片或导电胶进行固定。
对于液态材料，可以将其冷冻或凝胶化，以保持其形状。
3. 样品的切割和打磨：有时候，需要将样品切割成适当的尺寸，以便放入样品架中。
这可以通过使用金刚石切割机、电解或机械研磨仪器等设备来完成。
4. 样品的真空处理：在将样品放入场发射扫描电镜前，通常需要将其进行真空处理。
这可以通过将样品放入真空干燥器中、在低压下进行加热或冷冻干燥来完成。
真空处理有助于去除空气中的水分和气体，以减小背景干扰。
二、操作步骤1. 打开电镜系统：在开始操作前，需要将场发射扫描电镜系统打开并进行预热。
预热时间通常需要几十分钟，以保证系统内部达到稳定的工作温度。
2. 放置样品：将样品放置在样品架上，并确保其良好接触。
对于粉末状样品，可以使用导电胶将其固定在样品支架上。
对于固态样品，可以使用金属夹片固定在样品架上。
3. 调整显微镜参数：通过调整电子束能量、聚焦、工作距离等参数，来优化扫描电子显微镜的成像质量。
这些参数的选择取决于样品的特性和所需的分辨率。
4. 开始观察：一切准备就绪后，可以开始观察样品。
通过控制电子束的扫描和探测系统，可以获得样品的表面形貌和微观结构的信息。
在观察过程中，要注意避免样品表面的污染和损坏。
5. 数据分析：场发射扫描电镜获得的图像可以进一步进行数据分析。
可以通过对图像进行增强、测量尺寸和形状、进行结构分析等手段，来得到更详细的样品信息。
sem的实验方法
sem的实验方法
SEM（扫描电子显微镜）是一种常用的显微镜技术，用于观察和分析样品的表面形貌和微观结构。
下面是SEM实验的基本方法：
1. 样品制备：根据需要观察的物体或材料，选择合适的样品制备方法。
常见的方法包括金属蒸发覆盖、碳薄膜覆盖、冷冻断裂、超声清洗等。
2. 样品固定：将样品固定在SEM的样品台上。
通常可以使用导电胶或双面导电胶带将样品固定在样品台上，并确保样品与样品台之间有良好的电导性。
3. 真空处理：将样品放入SEM的真空室中，并进行真空处理，以确保在SEM观察过程中减少气体干扰。
4. 调节参数：在开始观察之前，需要根据样品的性质和要观察的目标，设置适当的加速电压、束流亮度、探针电流等参数。
5. 扫描观察：调整SEM的对焦和扫描参数，使电子束在样品表面扫描。
观察过程中可以通过调整探针电流和探针尺寸来获得所需的表面细节。
6. 图像获取：使用SEM中的二次电子或反射电子检测器，捕捉样品表面反射出的电子信号，并将其转换成图像。
可以通过调整对比度、亮度等参数来优化图像质量。
7. 数据分析：对获得的SEM图像进行分析和解读，可以使用图像处理软件进行形貌特征、颗粒分布、晶体结构等的测量和分析。
需要注意的是，SEM操作需要在专门的实验室环境下进行，并且
需要遵循安全操作规程，以确保操作人员和设备的安全。
此外，不同样品的性质和要求可能需要不同的处理方法和参数设置，因此在实验前应充分了解样品的特性和研究目标，以便选择合适的实验方法。
冷冻电镜实验方法
冷冻电镜实验方法引言：冷冻电镜（Cryo-EM）是一种先进的显微镜技术，可以用于观察生物分子的高分辨率结构。
与传统的电镜技术相比，冷冻电镜在样品制备过程中避免了化学固化和染色等步骤，因此能够保持生物分子的原始状态，提供更真实的结构信息。
本文将介绍冷冻电镜实验方法的基本步骤和关键技术。
一、样品制备1. 选择合适的样品：冷冻电镜适用于观察各种生物分子的结构，包括蛋白质、核酸、病毒等。
样品应具有较高的纯度和稳定性，以确保实验结果的准确性。
2. 冷冻固化：将样品溶液滴在金属网格上，然后迅速将其浸入液氮中，使样品迅速冷冻成无定形的冰层。
冷冻过程中，要尽量避免样品的晶化和结构变化。
3. 选择合适的冷冻介质：冷冻介质可以增强样品的稳定性并减少冷冻过程中的结构损伤。
常用的冷冻介质包括蔗糖、甘油等。
二、冷冻电镜图像获取1. 冷冻电镜仪器设置：调整冷冻电镜的操作参数，如加速电压、聚焦、对比度等，以获得清晰的图像。
2. 样品加载：将冷冻固化的样品网格安装到冷冻电镜仪器中，确保样品的位置准确，并避免震动和晶格偏移。
3. 图像获取：通过调整电子束的强度和聚焦，使电子束通过样品并与样品相互作用，产生散射。
通过捕捉和记录散射电子的位置和强度，得到样品的二维或三维图像。
4. 图像处理：对获得的图像进行去噪、对齐、投影重建等处理，以提高图像的质量和分辨率。
三、冷冻电镜实验注意事项1. 样品保持低温：在整个实验过程中，要保持样品的低温状态，以防止样品结构的热损伤和冰晶的熔化。
2. 避免辐射损伤：电子束的辐射可能会对样品产生破坏，因此在图像获取过程中要控制电子束的强度和曝光时间。
3. 样品纯度和稳定性：样品的纯度和稳定性对于获得高质量的冷冻电镜图像至关重要。
应该避免样品中的杂质和聚集现象。
结论：冷冻电镜实验方法是一种强大的工具，可以帮助科学家们研究生物分子的结构和功能。
通过合理的样品制备和仪器调整，冷冻电镜可以提供高分辨率和真实的结构信息，为生物科学研究提供有力的支持。
免疫电镜实验步骤
免疫电镜实验步骤免疫电镜（immuno-electron microscopy，IEM）是一种结合了免疫学和电镜技术的方法，能够直接在细胞或组织水平上观察和定位特定抗原。
它是一种有力的工具，可以帮助研究人员研究细胞和组织中的蛋白质相互作用，了解其在亚细胞水平的功能和定位。
免疫电镜实验步骤如下：1. 细胞或组织固定：首先，需要处理样品以使其具有电镜处理所需的高度稳定性。
通常，细胞或组织样本会使用交联剂如戊二醛进行固定。
固定的目的是保持样本的形态和结构，并防止其在后续处理过程中发生破坏。
2. 裁剪：将固定的细胞或组织样品切成适当的尺寸和形状以适应电镜的观察要求。
这通常需要非常小的块，以便于后续处理。
3. 过渡液处理：将样品经过一系列的过渡液处理，以去除残留的固定剂和使样品适应后续处理步骤。
这些过渡液通常是缓冲液，比如磷酸盐缓冲液。
4. 与抗原特异性的抗体结合：将样品与抗原特异性的抗体结合，以实现对特定抗原的检测。
这一步骤是免疫电镜实验的核心。
抗体可以直接标记电镜可见的标记物，如金颗粒，或作为未标记抗体来标记后续参与复合物的二级抗体。
5. 渗透处理：对样品进行渗透处理，旨在增强电镜对样品的可见度。
渗透剂的选择基于具体的研究问题，可以使用醋酸铀、酸酮铀等物质。
6. 样品固化：使用适当的聚合剂，如聚合酮树脂，对样品进行固化，以使其能够保持其形态和结构，并便于切片后的后续处理。
7. 切片：将固化的样品切成极薄的切片，通常在50-100 nm的范围内。
切片过程通常通过使用超微切片机或超声刀来完成。
8. 样品染色：对切片的样品进行染色以增强对抗原的可见度。
可以使用核苷酸染料如乌尔红，或金标记等染色剂。
9. 电镜观察：将样品放置在电子显微镜中，并使用适当的电压和放大倍数进行观察和记录。
通过观察电镜图像，可以获得关于抗原的位置、分布和亚细胞定位的信息。
总结：免疫电镜实验是一种强大的技术，可以帮助研究人员观察和定位特定抗原。
细胞电镜步骤
细胞电镜步骤一、引言细胞电镜（electron microscopy）是一种利用电子束代替光束进行显微观察的技术。
相比传统的光学显微镜，细胞电镜具有更高的分辨率和放大倍率，能够观察到更细微的细胞结构，为细胞学研究提供了重要的工具。
本文将介绍细胞电镜的主要步骤。
二、样品制备1. 固定要观察细胞的内部结构，首先需要将细胞固定在样品上。
常用的固定剂包括戊二醛、冰醋酸、乙醛等。
固定剂可以杀死细胞并保持其形态和结构。
2. 切片将固定的细胞组织进行切片，常用的切片工具有超薄切片机、刮刀等。
切片的厚度通常在50-100纳米之间。
3. 上膜将切片转移到铜或金网膜上，以便在电镜中观察。
上膜时需要小心操作，避免切片的损坏。
三、脱水和浸渍1. 脱水为了观察细胞的内部结构，需要将样品中的水分逐渐去除。
通常会使用一系列浓度递增的乙醇溶液进行脱水处理。
2. 浸渍脱水后，为了使样品能够在电镜中导电，并增加样品的稳定性，需要进行浸渍处理。
常用的浸渍剂有丙酮、环氧树脂等。
四、显微观察1. 扫描电镜（SEM）扫描电镜主要用于观察样品表面的形态结构。
在扫描电镜中，电子束通过扫描样品表面，与样品反射的二次电子或反射电子相互作用，形成图像。
通过调整电子束的扫描方式和参数，可以获得不同放大倍率和清晰度的图像。
2. 透射电镜（TEM）透射电镜主要用于观察样品的内部结构。
在透射电镜中，电子束穿过样品，与样品内部的结构相互作用，形成投影图像。
通过调整电子束的聚焦和对比度，可以获得高分辨率的细胞内部结构图像。
五、图像处理和分析1. 图像获取使用电镜观察样品后，需要将观察到的图像记录下来。
可以使用相机或数字图像采集系统将图像转换为数字信号，保存在计算机中。
2. 图像处理对于采集到的图像，可以使用图像处理软件进行处理和增强。
常见的处理方法包括去噪、增加对比度、调整亮度等。
3. 图像分析通过对处理后的图像进行分析，可以获取细胞内部结构的定量信息。
常见的分析方法包括测量细胞器的大小、计算细胞器的分布密度等。
扫描电镜操作注意事项
扫描电镜操作注意事项扫描电镜（Scanning Electron Microscope，SEM）是一种利用电子束显微镜技术对样品进行观察和分析的仪器。
它能够提供高分辨率的图像，揭示物质的微观结构和表面形貌。
在进行扫描电镜操作时，需要注意以下几个方面。
一、样品准备在进行扫描电镜操作之前，首先需要对样品进行准备。
样品应该具备一定的导电性，可以通过涂覆导电材料或金属蒸镀的方式来增加导电性。
同时，样品的表面应该光滑、干燥，并且尽量避免灰尘和杂质的污染。
二、仪器设置在使用扫描电镜之前，需要对仪器进行一系列的设置。
首先是选择合适的电子束加速电压和电流，以及扫描速度和扫描模式。
这些参数的选择应该根据样品的特性和需要观察的目标来确定。
同时，还需要调整样品与电子枪之间的距离和角度，以获得清晰的图像。
三、操作技巧在进行扫描电镜操作时，需要掌握一些操作技巧。
首先是对样品进行定位和对焦，确保样品位于电子束的焦点位置，并且图像清晰可见。
其次是控制扫描速度和图像放大倍数，以获得所需的分辨率和细节。
同时，还需要注意避免样品的漂移和电荷积累，可以通过调整扫描参数和样品的位置来解决。
四、图像处理与分析在获得扫描电镜图像后，可以进行一些图像处理和分析。
常用的图像处理方法包括对比度调整、边缘增强和噪声去除等。
同时，还可以利用图像分析软件对图像进行测量和粒径分布分析等操作。
这些操作可以帮助研究人员更好地理解样品的微观结构和特性。
五、安全注意事项在进行扫描电镜操作时，需要注意安全问题。
首先是要避免直接接触电子束，以免对人体造成伤害。
其次是要注意样品的处理和清洁，避免对环境和人体造成污染。
同时，还需要注意仪器的正常运行和维护，及时清洁和更换零部件，以确保仪器的稳定性和可靠性。
扫描电镜操作是一项复杂而精细的工作。
在进行操作时，需要注意样品准备、仪器设置、操作技巧、图像处理与分析以及安全注意事项等方面。
只有掌握了这些注意事项，才能够获得高质量的扫描电镜图像，并且准确地观察和分析样品的微观结构和表面形貌。
电镜扫描报告
电镜扫描报告
报告名称：报告撰写人员：XXX
报告日期：XXX
报告内容
一、实验目的
通过电镜扫描技术对样品进行形貌和成分分析，了解样品的微观结构和微观组成。
二、实验原理
电镜扫描技术利用高度集中的电子束对样品进行扫描，然后通过接收的电子信号对样品的表面形貌和成分进行分析。
电镜扫描技术分为扫描电子显微镜(SEM)和透射电子显微镜(TEM)两种。
SEM主要用于对材料的表面进行分析，TEM则可用于对样品的内部结构进行分析。
三、实验过程
1. 样品制备：将样品制成并加工成一定形状和大小，然后将其切成适当厚度的薄片，再进行氧化处理。
2. 电镜扫描：将样品放入电镜里进行扫描，利用电子束对样品进行分析。
3. 数据分析：通过接收到的数据对样品的微观形貌和成分进行分析。
四、实验结果
通过SEM对样品进行扫描，得到以下结果：
1. 样品表面大量存在颗粒状物质，大小分布不均匀，直径集中在20-50 nm之间。
2. 样品的成分主要为氧化物和金属元素，其中氧化物的比例较高。
五、实验结论
通过电镜扫描技术对样品进行形貌和成分分析，了解到样品表面存在大量的颗粒状物质，大小分布不均匀。
另外，样品的成分主要为氧化物和金属元素，其中氧化物的比例较高。
六、实验中存在的问题和改进方案
1. 样品制备过程中存在一定的误差，需要改进制备工艺。
2. 电镜扫描时需要掌握好电镜的操作技巧，避免误操作和对仪器造成损伤。
七、参考文献
无。
以上即是对XXX样品进行电镜扫描的报告内容，希望能对大家有所帮助。
SEM扫描电镜操作规范和图像解读流程整合
SEM扫描电镜操作规范和图像解读流程整合SEM（扫描电子显微镜）是一种先进的显微镜技术，它利用高能电子束对样品进行扫描，产生高分辨率的图像。
SEM图像具有高放大倍率、高解析力和三维表面拓扑信息等特点，广泛应用于材料科学、生命科学、地球科学和工业领域。
然而，正确的SEM操作规范和图像解读流程对于获得可靠的结果和准确的分析至关重要。
本文将介绍SEM扫描电镜的操作规范和图像解读流程，以帮助用户正确操作和解读SEM图像。
一、SEM操作规范1. 样品制备：在进行SEM观察之前，必须对样品进行适当的制备。
样品应该是干燥的，并且必要时要进行表面处理，如金属镀膜或碳镀膜。
同时，样品应该固定在SEM样品台上，并保持平整和稳定。
2. 启动SEM：在启动SEM之前，必须进行一系列的准备工作。
首先，检查并确保SEM的真空系统正常工作，真空度在要求范围内。
然后，对SEM电子枪进行预热，通常需要10-15分钟。
最后，调整束流强度和对焦，以获得最佳的图像质量。
3. 设定参数：SEM操作期间，需要根据具体的样品和实验需求来设定不同的参数。
主要包括加速电压、电流、探针大小和扫描速度等。
这些参数的设定应该根据经验和实验要求来确定，以获得清晰的图像和准确的分析结果。
4. 扫描图像：在开始扫描之前，必须调整样品镜头和对焦。
然后，选择合适的扫描模式和区域，并开始扫描图像。
SEM图像的质量取决于扫描速度、像素大小和电子束与样品之间的距离等因素。
因此，在操作过程中应密切注意这些因素，并进行必要的调整和优化。
5. 图像保存：每次扫描完毕后，及时保存SEM图像。
可以选择将图像保存为原始格式（如TIFF格式），以便在需要时进行后续分析和处理。
此外，还可以对图像进行调整和标记，如亮度和对比度调整、边缘检测和像素统计等。
二、SEM图像解读流程1. 初步观察：首先，进行初步观察，浏览SEM图像的整体特征和形貌。
注意图像中的明暗对比、细节和粗糙度等特征。
扫描电镜检测的步骤及方法
扫描电镜检测的步骤及方法一、技术简介扫描电镜是1965年发明的较现代的细胞生物学研究工具，它具有制样简单、放大倍数可调范围宽、图像的分辨率高、景深大等特点。
近年来，扫描电镜已广泛地应用在生物学、医学、等学科的领域中。
主要是通过发射电子聚焦光束来扫描样品的表面形态.电子束与样品表面的样子发生作用，产生多种能够被检测的信号，这些信号就包含了样品的表面形态和组成染色。
二、实验流程1. 样品的初步处理a. 取材样品面积可达8mm×8mm，厚度可达5mm。
对于易卷曲的样品如血管、胃肠道粘膜等，可固定在滤纸或卡片纸上，以充分暴露待观察的组织表面。
b. 样品的清洗(1)用等渗的生理盐水或缓冲液清洗；(2)用5%的苏打水清洗；(3)用超声震荡或酶消化的方法进行处理。
c. 固定：固定所用的试剂和透射电镜样品制备相同，常用戊二醛及锇酸双固定。
由于样品体积较大，固定时间应适当延长。
也可用快速冷冻固定。
d. 脱水：样品经漂洗后用逐级增高浓度的酒精或丙酮脱水，然后进入中间液，一般用醋酸异戊酯作中间液。
2. 样品的干燥a. 空气干燥法空气干燥法又称自然干燥法，就是将经过脱水的样品，让其暴露在空气中使脱水剂逐渐挥发干燥。
这种方法的最大优点是简便易行和节省时间；它的主要缺点是在干燥过程中，组织会由于脱水剂挥发时表面张力的作用而产生收缩变形。
因此，该方法一般只适用于表面较为坚硬的样品。
b. 冷冻干燥法(1)置于冷冻保护剂中：将样品置于冷冻保护剂中浸泡数小时。
常用的冷冻保护剂为10%～20%二甲基亚砜水溶液，或15%-40%甘油水溶液。
(2)骤冷：将经过保护剂处理的样品迅速投入用液氮预冷至(150℃的氟利昂冷冻剂中，使样品中的水分很快冻结。
(3)干燥：将已冻结的样品移到冷冻干燥器内已预冷的样品台上，抽真空，经几小时或数天后，样品即达到干燥。
本方法不需要脱水，避免了有机溶剂对样品成分的抽提作用，不会使样品收缩，也是较早使用的方法。
透射电镜操作说明书
透射电镜操作说明书一、操作简介透射电镜是一种高精度显微镜，能够实现对样品的高分辨率观察，广泛应用于材料科学、生物学、纳米技术等领域。
本操作说明书将介绍透射电镜的基本操作步骤，以帮助用户正确、高效地操作透射电镜。
二、准备工作1. 检查仪器和配件：确保透射电镜和相关附件都完好无损。
2. 检查样品：确保样品制备良好，无杂质或损坏。
3. 准备标本架：在标本架上放置干净的载玻片。
4. 打开透射电镜主机：按照指示打开透射电镜主机，等待仪器预热。
三、样品装载1. 清洁玻片：用去离子水和乙醇擦拭玻片，确保其表面干净。
2. 加样品：将待观察的样品放置在已清洁的玻片上，并轻轻加压以确保样品紧密贴附在玻片上。
3. 确保平整：用显微镊子将样品调整至水平，并确保其不移动。
四、仪器调试1. 调整电子束：通过调整电流和电压，使电子束合适并聚焦在样品上。
2. 调整对比度和亮度：根据需求调整透射电镜的对比度和亮度，以获得最佳观察效果。
3. 对准样品：使用光学或电子束的对准功能，确保样品位于透射电镜的中心位置。
五、观察样品1. 选择放大倍率：根据需要选择合适的放大倍率，开始观察样品。
2. 聚焦调整：通过微调焦距，将样品的细节聚焦并调整至最清晰的状态。
3. 观察和记录：使用透射电镜的观察视野以及相关附件，对样品进行观察，如有需要，可进行图像记录。
六、操作注意事项1. 避免触碰样品：在观察过程中，避免手指直接接触样品，以免污染或损坏样品。
2. 调整参数小心谨慎：调整透射电镜参数时，需小心谨慎，避免对仪器造成损坏。
3. 避光保护：在使用透射电镜时，避免直接照射光源，以免影响观察效果。
4. 清洁仪器：使用完毕后，记得关闭透射电镜主机，清理并保持仪器的清洁，防止灰尘等物质影响观察质量。
七、操作结束1. 关闭透射电镜主机：操作结束后，按照指示关闭透射电镜主机，等待其冷却。
2. 清理工作区域：清理操作区域，归还使用过的配件，并将样品妥善保存。
3. 整理操作记录：整理并保存观察过程中的记录资料以供后续使用。
电子显微镜操作规程
电子显微镜操作规程一、引言电子显微镜（Electron Microscope，简称EM）是一种利用电子束来进行高分辨率成像的仪器。
它在许多领域中都被广泛应用，如材料科学、生物学、纳米技术等。
为了正确高效地操作电子显微镜并获得准确的结果，本文将详细介绍电子显微镜的操作规程。
二、安全操作在使用电子显微镜之前，请务必确保安全操作。
以下是一些安全操作的基本原则：1. 在操作过程中要佩戴合适的个人防护设备，如手套、护目镜、防护服等。
2. 遵循仪器操作规程，按照制定的程序进行操作。
3. 确保工作区域清洁整洁，严禁堆放杂物和危险品。
4. 遵循仪器的启动和关闭顺序，确保所有操作都符合安全标准。
三、仪器准备在开始使用电子显微镜之前，需要进行以下准备工作：1. 检查电子显微镜的供电情况，确保仪器正常启动。
2. 检查显微镜各个部件的工作状态，如电子枪、对焦系统等。
3. 准备样本并确保在样本上没有灰尘和杂质。
4. 调整仪器的环境参数，如温度、湿度等，确保符合实验要求。
四、样本加载样本的加载是电子显微镜操作的重要一步。
请按照以下步骤进行操作：1. 将样本放置在样本架上，并确保样本架紧固且稳定。
2. 根据需要，选择合适的样本夹具或载玻片，并轻轻夹紧样本，确保其位置准确。
3. 将样本架或载玻片放入样本台中，并将样本台插入到显微镜中相应的位置。
4. 检查样本是否安装正确，确保没有松动或移位的情况。
五、对焦和调整在样本加载完毕后，需要进行对焦和调整，确保获得清晰的图像。
1. 打开对焦系统，并通过微调知道观察图像变得清晰。
2. 使用放大和缩小功能，调整适当的倍率，以获得所需的图像细节。
3. 针对样本的性质和实验目的，调整其他参数，如亮度、对比度等，以优化图像质量。
六、图像采集与分析获得清晰的图像后，可以进行图像采集和分析的工作。
1. 选择合适的图像采集模式，如扫描电镜模式或透射电镜模式。
2. 确定所需采集图像的区域，并设置相关参数，如曝光时间、扫描速度等。
场发射扫描电子显微镜实验操作
场发射扫描电子显微镜实验操作扫描电子显微镜（SEM）是一种能够获得高分辨率表面形貌信息的重要工具。
在实验室中，我们经常会使用场发射扫描电子显微镜来观察样品的微观结构和形貌。
本文将介绍场发射扫描电子显微镜的实验操作步骤。
实验准备在进行场发射扫描电子显微镜实验之前，我们需要进行一些准备工作。
首先，确保实验室环境干净整洁，以避免样品受到污染。
其次，检查扫描电子显微镜设备，确保设备正常工作。
最后，准备好待观察的样品，并确保样品表面平整干净。
样品处理与加载处理样品是进行场发射扫描电子显微镜实验的关键步骤。
首先，将待观察的样品切割成适当大小，并利用相关方法处理表面以去除可能的杂质。
然后，将样品加载到扫描电子显微镜样品台上，并使用夹具固定样品。
参数设置在进行扫描电子显微镜实验前，需要设置合适的参数以获得清晰的显微结构图像。
首先，调整加速电压和工作距离，以适应待观察样品的性质和尺寸。
其次，设置扫描速度和倍率，以获得所需的图像分辨率。
最后，根据需要选择不同的检测模式和滤波器。
图像获取与分析当参数设置完成后，可以开始进行样品的图像获取。
通过扫描电子束对样品进行成像，获得样品表面的细微结构信息。
在获取图像后，可以利用相应软件对图像进行分析，包括测量尺寸、分析形貌等。
同时，可以记录图像和相应数据以备后续分析。
结束实验与维护实验结束后，及时关闭扫描电子显微镜设备，并对设备进行清洁和维护。
将样品从样品台取下，妥善保存或处理。
同时，整理实验记录和数据，保留有关信息以备后续参考。
通过以上步骤，我们可以完成一次成功的场发射扫描电子显微镜实验操作。
这不仅可以帮助我们深入了解材料的微观结构和形貌，还可以为科学研究和工程应用提供重要参考。
希望本文对您进行场发射扫描电子显微镜实验操作有所帮助。
透射电镜的使用流程
透射电镜的使用流程简介透射电镜（Transmission Electron Microscope，简称TEM）是一种能够使用电子束来观察物质的高分辨率显微镜。
它可以提供比光学显微镜更高的放大倍数和更高的分辨率，因此被广泛应用于材料科学、生物学和纳米技术等领域。
本文将介绍透射电镜的使用流程。
使用流程1.准备工作–关掉手机等干扰设备，确保安静的实验环境。
–戴上护目镜和手套，确保实验操作的安全。
–确保透射电镜和相关设备处于正常工作状态，并联网（如果需要）。
2.打开透射电镜–打开透射电镜的主机，并等待系统启动。
–检查电子束的亮度和对比度，根据需要进行调整。
3.样品制备–准备样品，并将其切割成薄片，确保透射电镜的电子束可以穿透样品。
–使用显微镜或其他相关设备，将样品转移到透射电镜的样品台上。
4.调整透射电镜参数–使用透射电镜的控制台，调整电子束的聚焦和对准，以确保获得最佳的图像质量。
–根据样品的特点和需要，选择适当的电子束诸如干涉仪或投影仪。
5.开始观察–将透射电镜设置为所需的放大倍数，并将样品移动到电子束的路径上。
–通过电子感应器或激光系统，记录所观察到的图像，可以通过照相机或视频设备进行记录。
6.数据分析和保存–对所得到的图像进行分析和解释，可以使用透射电镜软件进行图像处理和测量。
–根据需要，将数据保存到计算机或其他存储设备中，以备后续分析和研究。
7.关闭透射电镜–使用透射电镜的控制台，将电子束设置为关机状态。
–关闭透射电镜的主机，并确保所有相关设备也被关闭。
注意事项•在操作透射电镜时，注意避免触摸样品或其中的部分，以免造成污染或损坏。
•当使用透射电镜时，要避免使用过高的电子束能量，以防止样品的热损伤。
•在整个使用流程中，保持实验环境干净和整洁，以确保获得高质量的图像结果。
•在存储和处理数据时，注意合理规划数据的文件结构和命名，以方便后续的管理和使用。
透射电镜是一项复杂而强大的工具，在使用过程中需要谨慎操作，并了解每个步骤的目的和要求。
免疫电镜技术步骤
免疫电镜技术步骤免疫电镜技术作为一种重要的生物学研究手段，在细胞学、病理学等领域发挥着重要作用。
通过结合免疫学的原理和电镜技术的高分辨率特点，可以实现对生物样本中特定蛋白质的定位和分析。
免疫电镜技术步骤的研究与优化对于提高实验效率、保证结果准确性具有重要意义。
首先，对于样本的制备是进行免疫电镜实验的第一步。
良好的样本制备是确保实验结果准确性的基础。
在免疫电镜实验中，通常需要对细胞、组织等生物样本进行固定和切片处理。
固定的目的是保持样本的形态结构和蛋白质位置，避免其在后续处理过程中发生变化。
常用的固定剂包括乙醛、戊二醛等，选择适合的固定剂可以保证样本的形态结构得到有效保留。
切片处理是指将固定后的样本切割成适合电镜观察的薄片，通常使用超薄切片机进行制备。
在样本制备过程中，需要注意操作规范，避免对样本造成损伤。
其次，抗体的选择与检测试剂的准备是免疫电镜实验中非常重要的环节。
抗体的选择需要考虑到其特异性和亲和力，以确保对目标蛋白的识别和结合。
在实验中，通常会使用一抗和二抗的结合方式，通过不同抗体的配对来实现对目标蛋白的检测。
抗体的制备和标记在实验中也起到关键作用，常见的标记方式包括金粒标记和荧光标记。
通过合适的抗体选择和标记方式，可以实现对目标蛋白的定位和分析。
接着，在免疫电镜实验中，样品的处理和显微观察是实现对目标蛋白定位和分析的关键步骤。
在实验中，通常会对样本进行脱水、透明化和浸渍等处理，以便样本的观察和成像。
脱水的目的是去除样本中的水分，提高电子镜的分辨率；透明化是指将样本透明化，使其更易观察；浸渍是指将样本浸入电子显微镜中以获取高分辨率图像。
通过精心的样品处理和显微观察，可以实现对蛋白质的定位和分析，揭示其在细胞或组织中的分布情况。
最后，在免疫电镜实验中，数据的采集与分析是实验结果验证和解释的关键环节。
通过对显微图像的拍摄和分析，可以获取到目标蛋白的位置和分布情况。
在数据分析过程中，需要对图像进行处理和量化，以便对实验结果进行正确解读。
免疫电镜技术步骤
免疫电镜技术步骤下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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飞钠电镜操作规程
飞钠电镜操作规程飞钠电镜（FIB-SEM）是一种结合了离子束刻蚀和扫描电子显微镜技术的先进仪器。
它可以在纳米尺度下观察和加工样品，因此在材料科学、纳米科学和生命科学等领域广泛应用。
为了保证操作的安全和正常进行，下面是飞钠电镜的操作规程。
1. 飞钠电镜的安全注意事项：- 飞钠电镜是一台复杂的设备，请严格按照操作规程进行操作，操作前应进行相关培训和指导。
- 在操作过程中，要避免对人身造成伤害。
戴上个人防护装备，如实验室白大褂、手套、护目镜等。
- 确保实验室有良好的通风系统，并在操作过程中注意防尘和防化学品溅出。
遵守实验室安全操作规范和化学品安全操作规程。
- 注意保持工作区域整洁，放置有序，避免拥挤和混乱。
- 不允许任何不必要的进口和出口，以保持操作环境的干净和安全。
2. 飞钠电镜的操作流程：- 准备样品：将待观察的样品固定在样品台上，并保证样品平整。
根据分析目的选择合适的显微镜参数和样品导航方式。
- 真空系统：启动飞钠电镜前，先启动真空系统，并排除任何漏气问题。
确保真空度达到规定的要求。
- 离子束操作：根据需要，选择合适的离子束参数进行离子束刻蚀或刻蚀修整。
可以使用离子束抛光等技术来精确制备样品表面。
- 扫描电子显微镜操作：切换到扫描电子显微镜模式，调整电子束参数（如电流、放大倍数等），使得样品表面能够清晰地被观察到。
- 数据收集和分析：使用扫描电子显微镜记录图像和数据，可以采用断层扫描和三维重建等技术来获取更详细的信息。
- 结束操作：实验结束后，要关闭所有设备，并进行必要的清洁和保养。
3. 飞钠电镜的日常维护：- 每次使用结束后，要清理仪器，包括离子束和电子显微镜部分。
使用吹风机或无尘布轻轻清理，避免损坏仪器。
- 定期检查仪器的真空系统，确保其正常工作。
如果出现问题，及时联系维修人员进行维护。
- 注意保持仪器的稳定温度和湿度，避免在潮湿或过热的环境中使用。
以上是针对飞钠电镜的操作规程。
在操作飞钠电镜时，严格遵守安全规程，按照操作流程进行操作，做好日常维护工作，可以保证飞钠电镜的正常运行和样品的准确观察与加工，同时也能保证操作人员的安全。
冷冻透射电镜冷冻安全操作及保养规程
冷冻透射电镜冷冻安全操作及保养规程冷冻透射电镜（Cryo-TEM）是一种常见的生物学技术，用于对生物大分子进行高分辨率成像。
在进行Cryo-TEM实验时，需要进行冷冻操作，将样品冻结在非常低的温度下，以保证样品结构的稳定性和高分辨率成像的质量。
本文将阐述Cryo-TEM实验中的冷冻安全操作及保养规程。
冷冻操作安全流程操作前准备在进行冷冻透射电镜实验时，操作前需要进行以下准备工作：1.准备样品：样品需要满足Cryo-TEM的要求，通常为尺寸小于200纳米的生物大分子样品。
将样品在合适的条件下制备好。
2.准备透射电镜：打开透射电镜电源，保证透射电镜内部温度稳定在适宜的范围内。
3.准备冷冻设备：在离开自己工作空间前，需要确保冷冻设备在正常的工作状态下。
检查制冷液和氦气气瓶的压力是否足够，并确保制冷流量器和氮气枪连接良好。
4.准备操作区域：在操作区域内除了需要的仪器外，应保持一定的整洁和空气流通，防止发生意外。
样品冷冻操作冷冻样品是Cryo-TEM实验的重要环节。
在进行样品冷冻操作时，需要注意以下事项：1.样品浸泡：将样品嵌入用量极小的纯状乳剂或聚苯乙烯中，并尽量保证样品的均匀性。
在液氮中将样品浸泡一段时间，以使样品充分吸收液氮。
接下来，立即将样品移入制冷液中，以避免液氮残留在样品表面。
2.制冷液：制冷液的温度应该始终保持在适宜的范围内，最好在制备样品前进行制冷液的预先制备和检查。
3.操作禁区：在进行制冷操作与样品收起之后，松开架子并关闭设备。
并在使用前进行设备开启与关闭的维护保养。
4.安全操作：在使用液氮时，必须避免接触其皮肤，可以穿着防护服和手套。
氮气是一种易燃气体，所以在使用氮气增强器时必须避免其直接接触到空气中的电器和设备等。
设备保养Cryo-TEM设备需要定期保养，以确保其长期稳定运行。
设备保养包括以下方面：1.冷冻架的清理：设备工作时间后，冷冻架需要拆卸并清洗，以确保其表面干净，从而保证样品粘附的均匀性。
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1.2 粉末样品的制备
粉末试样：标准化验用玻片→ 清洗 置微量粉末于一玻片 上 →滴上一滴1％～0.3％的火棉胶→ 醋酸正戊酯溶液 →于上再盖一片玻片→ 使两玻片反复压磨→ 最后迅 速拖离开并在电炉上烤干→ 喷C →划3×3mm2的方格 →浸入蒸馏水中脱膜→ 标准铜网捞膜→ 干燥后备用
TEM的常规操作
2.1调机：总电源ON →稳压器ON→ 循环水开关ON→ 抽真 空： ～20分钟，由真空指示灯确定 面板电源ON→ 复位 →高压（每加一级之前必须先按一下“预备”按钮）→ 过负荷加压处理→ 灯丝电流（缓慢地加到饱和值）→ 调节偏压电阻Bas以使束流值＜20微安（由高压表上指 针转动的格数可知：以未加束流时高压表位置为0，之 后每转一小格束流为10微安）→ 照明系统对中： 5000×→ 调出最小光斑→ 减弱灯丝电流（极慢减弱） 直至出现欠饱和灯丝像→ 调节TilT旋钮使欠饱和灯丝像 成对称形→ 调节Horizontal旋钮是灯丝移至屏中心
成像系统对中：加入试样→ 调出30000×的明场像 →选 定一标志点并移至屏中心 →按亮“HV”按钮（电压中 心法对中按钮）→ 观察标志点的运动：通过调节 Beam Tilt旋钮直至标志点不动为止→ 按一下HV使其 灯熄 → 物镜消像散：加上10倍放大镜 → 在3万～4万倍的视场中 找一个0 ～2mm ×10(在放大镜下观察）的孔洞 →C2.L强散焦→ O.L过焦（调节focus按钮）直至孔洞 边沿出现一条平行于洞边的黑条纹 →细调focus使黑 条纹变到最窄，仔细观察条纹宽度是否均匀，若否， 则调节消像散旋钮直至均匀为止。
CB
A
O.L
从c’点发出的任何电子波,因为 必须聚焦在c点(像) 所以不能通过SAA孔从而保证 了全部衍射谱均来自于AB选区.
A’
B’
C’
SAA平面,I.L物面,O.L的像面 都同在A’B’平面上.
1选区成像
B
a
c b d
A
2 0 1
试样 物镜 I,L物面的 三种位置
SAA与AB共轭
I.L的物面处在0位置屏上衍射斑变小，亮，也锐 1 2
2.2选区衍射像观察
试样→调出明场相 →将合适的选区调至屏中央→ 旋进适 当的（2#）选区光栏 →微调中间镜电流使选区光栏 （I.L的“物”聚焦 →微调物镜电流（focus) 使选区聚 焦，上述两个聚焦操作目的为：使试样（C.L物面）与 SAA平面共轭，为达此目的必须使O.L的像面、选区光 栏平面、中间镜物面①三者重合，以确保衍射花样与选 区物相的严格对应性。否则将可能有部分或大部分衍射 斑束来自选区以外的物相→ ②减弱I.L电流以使I.L物面 上升至O.L的下焦面上以便在屏上出现SEDP→ ③微调 I.L电流以使I.L物面与O.L下焦面严格重合，而衍射斑 变到最小→ ④微调第二聚光镜电流→ ⑤以减小照明孔 径角γ以使衍射斑尺寸进一步减小。
•
0]* O1*
[200]* [200]* O* O2*
a2 a1 a a2
当a=0时，[200]*为：• 当a>0时，[200]*为：
a a1
3.明场相观察： 选取一合适的晶粒→调出其SEDP→调到双束条件状态（位向）→ 加O.L.A（一般用3#即可）→按下S.A按纽即I.L物面下调到O.L像面上 →O.L微调焦（focus按纽）使O.L像面与I.L物面严格重合（像最清晰） 即可观测。 另一方法为：选好一晶粒→低速倾动试样使其缓慢变暗，同时显 现出很多精细组织结构进行观测，此时也大致满足近似双束条件，但 工作晶面不知。 4.中心暗场像观察： 将“Beam Tilt”旋纽复位回到0状态（此时依次按下Bright及Dark 按纽，不论是显微像还是SEDP都不会变化→ 在明场像中选定合适的晶 粒→ 调出其SEDP→ 倾动试样使一最靠近（000）的衍射斑（hkl）处 于满足Bragg方程 = 状态→ 按下Dark按纽 →调节Beam Tilt按纽使整 个衍射谱平移直至 hk l 弱斑点移至屏中心取代(000)斑→ 加物镜光阑 套住屏中心的 hk l → 按下S.A模式按纽即得该晶粒的中心暗场像 （对其它晶粒不适用）
<001>G//<001>
<111>G//<111>
从下图可知，只要 SAA 、 I.L 的物面及 O.L 的像处于同一个平面 A’B’上，则所有衍射斑都是由AB选区中的物质所产生。而AB之 外的物质所发出的任何衍射线均不能穿过A’B’选区光栏孔，因此 在荧光屏上不会出现其衍射斑（在后焦面上当然有）。
二、 步骤 双喷（纯Al,18-8不锈钢使用通用双喷液：4％高氯酸酒精溶液，20℃） 操作过程：试料→ 线切割（～0.5mm厚）→ 机械减薄至～ 0.3mm左右→ 化学减薄至～0.2mm→ 冲样φ30mm →抛磨边沿毛 刺→ 丙酮浸洗→ 双喷电解抛光：本试样条件：75V、-20℃ →穿 孔即停电→ 无水酒精浸洗4次→ 丙酮中清洗一次→ 干燥后（滤 纸吸干）备用。 C萃取复型：制作腐蚀前的金相试样 →选用能保留萃取相的腐蚀 剂作略深于金相样的腐蚀 →在无水酒精中反复清洗 →喷碳→ 在 喷C面划成3×3mm2的方格→ 用原腐蚀液电解脱C膜→ 在无水酒 精中先后清洗3次以上→用标准C网捞取C膜置于滤纸上干燥备用。