天门冬多糖的分离纯化及其部分理化性质
多糖的分离纯化及性质表征
（3）超高压
超高压提取 也称超高冷等静压提取，是指在常温下用100～1000 MPa的流 体静压力作用于提取溶剂和原料的混合液上，并在预定压力 下保持一段时间，使原料细胞内外压力达到平衡后迅速卸压 ，由于细胞内外渗透压力忽然增大，其结构发生变化使得原 料内的有效成分能够穿过细胞的各种膜而转移到细胞外的提 取液中，达到提取多糖有效成分的目的。
（2） 酸提法
为了提高多糖的提取率，在水提醇沉法的基础上发展了酸提 取法。 如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH值下 难以溶解，可用乙酸或盐酸使提取液成酸性，再加乙醇使多 糖沉淀析出。 由于H＋的存在抑制了酸性杂质的溶出，稀酸提取法提取得到 的多糖产品纯度相对较高，但在酸性条件下可能引起多糖中 糖苷键的断裂，因此，只在一些特定的多糖提取中占有优势 。且酸会对容器造成腐蚀，除弱酸外，一般不宜采用。
5. 整个过程保持凝胶上方有水
原料 前处理 提取 滤渣 过滤或离心
滤液
醇沉 沉淀 脱蛋白 脱色 透析 柱层析
多糖
四、多糖的纯度鉴定
多糖纯度鉴定方法 超速离心法、电泳法、比旋光度法及凝胶色谱法。
比旋光度测定法
不同的多糖具有不同的比旋度，同时在不同的乙醇中 有不同的溶解度。在一定浓度的乙醇中，分子量大的 较分子量小的溶解度小。因此，不同浓度的醇中得到 的多糖沉淀的比旋度相同，则证明该多糖为均一组分。
（2）超声波辅助提取法
超声波提取是利用超声波的机械效应、空化效应及热效应。 机械效应可增大介质的运动速度及穿透力，能有效的破碎生 物细胞和组织，从而使提取的有效成分溶解于溶剂之中； 空化效应使整个生物体破裂，整个破裂过程在瞬间完成，有 利于有效成分的溶出； 热效应增大了有效成分的溶解速度，这种热效应是瞬间的， 可使被提取成分的生物活性尽量保持不变。
多糖的分离纯化及生理作用
多糖的分离纯化及生理作用多糖包括植物多糖、动物多糖和微生物多糖。
人们已发现多糖不仅是机体的能量来源和骨架成分，而月还具有多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用等多种生物活性。
多糖的提取和纯化1. 多糖的提取1.1 热水浸提法：其步骤为：原料→粉碎→脱脂→粗提（2－3次）→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。
原料经粉碎后加入甲醇、乙醚、乙醇、丙酮或1：1的乙醇乙醚混合液，水浴加热搅拌或回流1－3小时，脱脂后过滤得到的残渣一般用水作溶剂（也有用氢氧化钾碱性水液、氯化钠水液、1％醋酸和1％苯酚或0.1－1M氢氧化钠作为提取溶剂）提取多糖。
温度控制在90－100℃，搅拌4－6小时，反复提取2－3次。
得到的多糖提取液大多较粘稠，可进行吸滤。
也可用离心法将不溶性杂质除去，将滤液或上清液混合（得到的多糖若为碱性则需要中和）。
然后浓缩，再加入2－5倍低级醇（甲醇或乙醇）沉淀多糖；也可加入费林氏溶液或硫酸铵或溴化十六烷基三甲基铵等，与多糖物质结合生成不溶性络合物或盐类沉淀。
然后依次用乙醇、丙酮和乙醚洗涤。
将洗干后疏松的多糖迅速转入装有五氧化二磷和氢氧化钠的真空干燥器中减压干燥（若沉淀的多糖为胶状或具粘着性时，可直接冷冻干燥）,干燥后可得粉末状的粗多糖。
1.2 微波辅助提取法：其原理为利用不同极性的介质对微波能的不同吸收程度，使基体物质中的某些区域和萃取体系中的某些组分被选择性加热，从而使萃取物质从基体或体系中分离出来，进入到介电常数小，微波吸收能力较差的萃取剂中。
由于微波能极大加速细胞壁的破裂，因而应用于中草药中有效成分的提取能极大加快提取速度，增加提取产率。
而且由于其选择性好，提取后基体能保持良好的性状，提取液也较一般的提取方法澄清。
聂金源等在柴胡多糖和黄酮化合物的提取[18]中对微波辅助提取法、超声辅助法和索氏提取法进行比较，发现微波辅助提取法所需时间最短（10min），多糖的提取率最高（28.46％）。
多糖的分离和纯化
多糖的分离和纯化⼀、多糖的分离和纯化多糖是极性极⼤的⼤分⼦化合物，提取时⼀般先将原料脱脂、脱⾊，然后⽤⽔、盐或稀碱⽔在不同温度下提取。
提取物浓缩后加沉淀剂(⼄醇、丙酮等)离⼼沉淀，沉淀部分可反复多次离⼼沉淀，以除去部分⽔溶性⾊素等杂质。
1．除蛋⽩⽤⽔或稀碱提取的多糖常含有蛋⽩质，常⽤的除蛋⽩质的⽅法有Sevag 法、三氟三氯⼄烷法、三氯⼄酸法等。
前两种多⽤于微⽣物多糖，后者多⽤于植物多糖。
Sevag 法是经典的除蛋⽩质⽅法，复杂、费时，且样品损失较⼤。
冯建林等⽐较了Sevag 法、三氟三氯⼄烷法、三氯⼄酸法、硫酸铵法及⽊⽠蛋⽩酶复合酶法除蛋⽩的效果，从蛋⽩残留量和多糖的得率两⽅⾯评价．认为三氯⼄酸法最好，但三氯⼄酸仍不能完全除去蛋⽩，建议三氯⼄酸法和Sevag 法结合使⽤。
2．脱⾊多糖中常含有⼀些⾊素(游离⾊素或结合⾊素)，根据其不同性质采取不同的去除⽅法。
常⽤的脱⾊⽅法有离⼦交换法、氧化法、⾦属络合物法、吸附法(纤维素、硅藻⼟、⾼岭⼟、活性炭等)。
D EA E⼀纤维素是⽬前最常⽤的脱⾊⽅法，通过离⼦交换柱不仅达到脱⾊⽬的，⽽且可以进⾏多糖的分离。
H2 O2：是⼀种氧化脱⾊剂，浓度不宜过⾼，宜在低温下进⾏，否则引起多糖的降解。
对于同时含有游离蛋⽩质和⾊素的多糖，可通过⽣成⾦属络合物的⽅法同时除去蛋⽩和⾊素，即加⼊费林试剂⽣成不溶性络合物，经分离后⽤阴离⼦交换树脂分解络合物。
吸附脱⾊法也常⽤，如通过活性炭、⾼岭⼟、硅藻⼟柱达到脱⾊的⽬的。
3．多糖的分级采⽤⼀般⽅法提取的多糖，通常是多糖的混合物，即是多分散性的，其不均⼀性表现在化学组成、聚合度、分⼦形状等的不同。
分级可以达到纯化的⽬的，可按分⼦⼤⼩和形状分级(如分级沉淀、超滤、分⼦筛、层析等)，也可按分⼦所带基团的性质分级(如按电荷性质分级的电泳、离⼦交换层析等)。
(1)分级沉淀利⽤分⼦⼤⼩和溶解度不同进⾏分离，常⽤的有两种⽅法，即有机溶剂沉淀法和季铵盐或硫酸铵法。
植物多糖提取分离及药理作用的研究进展
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样 条 件 下 对 正 常 人 二 倍 体 成 纤 维 细 胞 无 影 响"掌 叶 大 黄 多 糖#$6& 提 取 方 法!搞 清 多 糖 的 构 效 关 系!进 一 步 探 讨 多 糖 的 药 理 作 用 机
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多糖分离纯化
多糖分离纯化一、概述多糖是一类高分子化合物，具有复杂的结构和多样的功能，广泛存在于生物体内。
多糖的分离纯化是研究其结构和性质、开发应用的前提和基础。
本文将介绍多糖分离纯化的方法及其优缺点。
二、多糖分离纯化方法1. 溶液沉淀法溶液沉淀法是一种常用的多糖分离纯化方法。
该方法基于不同多糖在不同浓度下溶解度不同的原理，通过控制溶液中某些成分（如盐类）浓度来使目标多糖沉淀。
该方法操作简单，但需要对目标多糖在不同条件下的溶解度有较为准确的了解，并且会受到其他成分影响。
2. 离子交换色谱法离子交换色谱法是一种利用固定在固相上带电基团与目标多糖间相互作用实现分离纯化的方法。
该方法适用于具有明显电荷差异或含有特定官能团（如硫酸基、羧基等）的多糖。
该方法分离效果好，但需要对固相的选择和操作条件进行优化。
3. 凝胶过滤色谱法凝胶过滤色谱法是一种利用多孔凝胶作为分离介质，目标多糖根据其大小在凝胶中进行分离的方法。
该方法适用于具有不同分子量的多糖，且操作简单、分离效果较好。
但由于凝胶孔径大小限制，对于较小或较大的多糖可能无法有效分离。
4. 亲和层析法亲和层析法是一种利用目标多糖与特定配体间相互作用实现分离纯化的方法。
该方法适用于具有特定结构或功能的多糖，如具有特异性结合蛋白质、抗原表位等。
该方法操作简单、分离效果较好，但需要对配体选择和操作条件进行优化。
5. 聚焦电泳法聚焦电泳法是一种利用电场作用将目标多糖在pH梯度中移动并实现分离纯化的方法。
该方法适用于具有不同等电点或带电性质的多糖。
该方法分离效果好、可同时实现高效分离和纯化，但需要对pH梯度的选择和操作条件进行优化。
三、多糖分离纯化方法的优缺点1. 溶液沉淀法优点：操作简单，无需昂贵设备。
缺点：需要对目标多糖在不同条件下的溶解度有较为准确的了解，并且会受到其他成分影响。
2. 离子交换色谱法优点：分离效果好，适用于具有明显电荷差异或含有特定官能团（如硫酸基、羧基等）的多糖。
多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定
多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定以多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定为题，本文将介绍多糖的分离纯化方法、纯度鉴别和分子量测定的原理和技术。
一、多糖的分离纯化方法多糖是一类由多个糖基组成的生物大分子，其结构复杂多样。
为了研究多糖的性质和功能，需要将多糖与其他杂质分离开来并纯化。
常用的多糖分离纯化方法包括离心沉淀、凝胶层析、离子交换层析、亲和层析等。
离心沉淀是一种简单有效的多糖分离纯化方法。
通过调节离心速度和时间，可以使多糖与其他杂质沉淀分离，然后将上清液取出，即可得到相对纯净的多糖溶液。
凝胶层析是一种常用的多糖分离纯化方法。
凝胶层析根据多糖分子的大小和形状，利用凝胶的孔隙大小选择性地分离多糖。
常用的凝胶材料有琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶等。
离子交换层析是一种利用多糖与离子交换树脂之间的电荷相互作用进行分离的方法。
树脂表面带有正负电荷，多糖分子根据其电荷性质与树脂发生吸附和解吸作用，从而实现分离纯化。
亲和层析是一种利用多糖与特定的亲和配体之间的特异性结合进行分离的方法。
常见的亲和配体有金属离子、抗体、受体等。
通过与亲和配体结合，多糖可以被选择性地吸附在亲和树脂上，其他杂质则被洗脱，从而实现纯化。
二、多糖的纯度鉴别多糖的纯度鉴别是判断多糖溶液中是否存在杂质的过程。
常用的纯度鉴别方法包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外-可见光谱、红外光谱等。
聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的多糖纯度鉴别方法。
通过在凝胶中施加电场，多糖分子根据其大小和电荷性质在凝胶中迁移，从而实现分离和鉴定。
紫外-可见光谱是一种常用的多糖纯度鉴别方法。
多糖溶液在紫外-可见光谱范围内有特征性的吸收峰，通过测量多糖溶液在不同波长下的吸光度，可以判断多糖溶液中是否存在杂质。
红外光谱是一种常用的多糖纯度鉴别方法。
不同多糖具有特征性的红外吸收峰，通过测量多糖溶液的红外光谱，可以判断多糖溶液中是否存在杂质。
三、多糖的分子量测定多糖的分子量是衡量多糖结构大小的重要指标。
多糖分离纯化
多糖分离纯化1. 概述多糖是由许多重复单元组成的生物大分子，具有广泛的生物功能和应用价值。
多糖的分离纯化是从混合物中分离出目标多糖并提高纯度的过程。
本文将介绍多糖分离纯化的常用方法和技术，以及其在食品、药品和生物工程等领域的应用。
2. 多糖的分离方法多糖的分离方法主要包括溶剂沉淀、离子交换、凝胶过滤、超滤、逆流层析、电泳和气相色谱等。
下面将分别介绍这些方法的原理和应用情况。
2.1 溶剂沉淀溶剂沉淀是利用溶剂的物理性质，如极性和温度等，使多糖在溶液中发生相分离的方法。
通常采用醇类溶剂，如乙醇或异丙醇。
溶剂沉淀适用于多糖与其他溶质的溶解度差异较大的情况，但纯度较低。
2.2 离子交换离子交换是利用离子交换树脂上的功能基团与多糖分子间发生离子交换反应的方法。
树脂的功能基团可以选择性吸附或释放多糖分子。
离子交换适用于多糖的分子量差异较大的情况，例如海藻酸和壳聚糖的分离。
2.3 凝胶过滤凝胶过滤是利用凝胶的孔隙结构将分子按大小分离的方法。
多糖分子较大，可以被凝胶孔隙排除，而小分子可以通过凝胶透过。
凝胶过滤常用于多糖与其他小分子的分离，如蛋白质和核酸。
2.4 超滤超滤是利用超滤膜的孔隙结构将溶液分离的方法。
超滤膜的孔径可以根据需要选择，通常是分子量截留范围在1 kDa至100 kDa之间。
超滤适用于多糖与其他大分子的分离，如蛋白质和核酸。
2.5 逆流层析逆流层析是利用多糖与填料间的亲和作用进行分离的方法。
填料可以是具有特定亲和性的配体，如亲和树脂。
逆流层析适用于分子间相互作用较强的多糖分离。
2.6 电泳电泳是利用电场作用将分子按电荷和大小进行分离的方法。
多糖可根据电荷差异选择合适的电泳方法，如聚丙烯酰胺凝胶电泳和毛细管电泳。
电泳在多糖的分子量分析和负载量测定中广泛应用。
2.7 气相色谱气相色谱是利用样品在气相载体中的分配和迁移以实现分离的方法。
多糖需要经过甲硅烷衍生化处理后才可以进行气相色谱分析。
气相色谱适用于多糖的含量测定和结构分析。
多糖的分离纯化
多糖的提取和纯化多糖的提取和纯化摘要本文较详细地介绍了多糖的提取和纯化方法，为多糖的研究和生产提供参考依据。
关键词多糖；提取；纯化；活性炭多糖（polysacharides，PS），又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过苷键连接而成的，具有广泛生物活性的天然大分子化合物。
它广泛分布于自然界高等植物、藻类、微生物（细菌和真菌）与动物体内。
20世纪60年代以来，人们逐渐发现多糖具有复杂的、多方面的生物活性和功能[1]：(1)多糖可作为广谱免疫促进剂，具有免疫调节功能，能治疗风湿病、慢性病毒性肝炎、癌症等免疫系统疾病，甚至能抗AIDS病毒[2]。
如甘草多糖具有明显的抗病毒和抗肿瘤作用[10]，黑木耳多糖、银杏外种皮多糖和芦荟多糖可抗肿瘤和增强人体免疫功能[3-5]。
(2)多糖具有抗感染、抗放射、抗凝血、降血糖、降血脂、促进核酸与蛋白质的生物合成作用。
如柴胡多糖具有抗辐射，增强免疫功能等生物学作用[6]，麦冬多糖具有降血糖及免疫增强作用[7-8]，动物黏多糖具有抗凝血、降血脂等功能[9]。
(3)多糖能控制细胞分裂和分化，调节细胞的生长与衰老。
如爬山虎多糖具有抗病毒和抗衰老作用[10]，银杏外种皮粗多糖具有抗衰老、抗过敏、降血脂、止咳祛痰、减肥等功能[11]。
另外，多糖作为药物，其毒性极小，因而多糖的研究已引起人们极大的兴趣。
由于多糖具有的生物活性与其结构紧密相关，而多糖的结构又是相当复杂的，所以在这一领域的研究相对缓慢。
但人们在多糖的分离提取与纯化方面已做出了不少工作。
1. 多糖的提取[12]1.1 热水浸提法：1.1.1多糖提取条件的优选根据文献报道[13]：影响热水浸提多糖的因素主要有提取时间、提取次数、溶剂体积、浸提温度、pH值、醇析浓度和植物颗粒大小等。
在试验前对上述多种因素利用正交实验法做出优选，才能选出最佳提取方案。
1.1.2其步骤为：原料→粉碎→脱脂→粗提（2－3次）→吸滤或离心→沉淀→洗涤→干燥首先除去表面脂肪。
08多糖的提取、分离纯化和结构分析
结构分析
一、前言
多糖和蛋白质、基因是生命科学的三大领域，是自 然界含量丰富的物质，也是与人类生活紧密相关的一类 生物高分子。大量研究表明，多糖具有其独特的生物活 性，是许多天然产物的主要活性成分，具有抗菌、抗病 毒、抗肿瘤、抗辐射、抗衰老等功效。多糖的提取、分 离和纯化是研究多糖结构和活性的基础，只有得到相对
多糖的结构分析
3、糖链中糖残基间的连接位置分析
（1）甲基化分析方法：确定糖链中糖基间的连接位置常用 方法。该法首先将多糖链全甲基化，使所有的游离羟基变为
甲氧基。目前最常用的甲基化方法是改良Hakomori法。
Hakomori法先将样品溶于无水二甲基亚砜中，然后与 甲基亚磺酰甲基钠SMSM反应，使得多糖上游离羟基离子化 ，多糖成为阴离子后，易于CH3I反应，该法通常需重复数次 。以α-(1-4)葡聚糖为例说明甲基化过程。
包括离子交换色谱柱和凝胶柱色谱。
特点：分离效率高、设备简单、操作方便、条件温和 、不易造成物质变性等优点。 应用：物质分离纯化、分析鉴定最重要的方法之一； 分离/有机化合物及生物大分子不可缺少的手段。
多糖的结构分析
多糖的结构：
多糖的结构是其生物活性的基础，多糖的结构分析 在多糖的研究中具有非常重要的地位，是糖化学的核心 所在。 与蛋白质、核酸大分子相比，糖链的结构也包括一
端基法、HPLC、黏度法、凝胶色谱法和超滤法等，其中目
前公认较好的方法是高效凝胶渗透色谱（HPGPC）。 高效凝胶渗透色谱又称高效尺寸排阻色谱（ HPSEC） 、高效凝胶色谱，是一种高分子领域的高效分离分析技术， 是研究高分子的分子量及合成高分子分子量分布及与分子线 团尺寸相关的结构、反应、物性的最有效的手段之一。常用 的商品柱有Bondagel和TSK柱系。
多糖的分离纯化及分析
多糖的分离纯化及分析一、多糖的提取方法（一）溶剂提取法1、水提法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法.多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂.用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70%左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置5h，多糖的质量分数和得率均较高.2、酸碱提法有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。
有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。
与酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术.（二）生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。
此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。
（三）超声提取法超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。
超声波提取与传统的提取方法相比，有提取效率高、时间短、耗能低等优点。
（四）微波提取微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波，微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。
二、多糖的分离纯化（一）多糖的分离采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物，分级的方法可达到纯化的目的．可按溶解性不同进行分级、按分子大小和形状分级(如分级沉淀、超滤、分子筛、层析等)，也可按分子所带基团的性质分级．1、按溶解性不同分离（1）分步沉淀法分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质，从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀．（2）盐析法盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。
天麻多糖的提取分离纯化及抗氧化糖化研究
天麻多糖的提取分离纯化及抗氧化糖化研究摘要天麻（G.elata，兰科），是一种多年生的寄生植物，具有极高的营养和药用价植。
多糖是天麻的的一个主要活性成分，目前天麻多糖的研究有限，从而限制了天麻资源的深度开发和应用。
本文以天麻为原料，研究传统水提醇沉法和超声辅助水提醇沉法提取天麻多糖的动力学模型，通过离子交换柱层析法得到3种天麻多糖组分，分析比较了其理化性质、分子特性和生物活性，进一步对天麻活性多糖进行凝胶柱层析法纯化，解析其化学结构，为天麻多糖的深加工提供理论依据。
研究所取得的结果如下：以Fick扩散第二定律为基础，分别建立了传统水提醇沉法和超声辅助水提醇沉法提取天麻多糖的动力学模型，所建立的模型均能够很好的体现天麻颗粒半径R、提取时间t、提取温度T、超声功率P与提取液中多糖浓度C之间的关系，并对动力学中提取速率k、有效扩散系数、活化能Ea、半衰期t1/2等参数进行了求解。
利用DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析对天麻多糖进行分离分级，获得PS-D1（蒸馏水）、PS-D2（0.1MNaCl）和PS-D3（0.2MNaCl）三种多糖组分。
基本化学组成表明，三种多糖组分主要由果糖和葡萄糖组成，且它们的纯度均在85%以上，PS-D2和PS-D3含有一定的糖醛酸（≥10.0%）。
多角度光散射试验表明，三种多糖组分具有不同的分子量（Mw为62、159和385kDa）及其分布。
刚果红试验表明三种多糖组分都不具有三螺旋结构，在水溶液中均表现为无规线团或聚集体链构象。
扫描电镜结果揭示了天麻多糖的基本外貌形态，PS-D1和PS-D2呈纤维树枝状，PS-D3形貌较光滑，表现为片状和碎屑状堆积。
体外抗氧化研究发现，天麻多糖PS-D1、PS-D2和PS-D3均具有较好的等价抗氧化能力（41.23、44.97和53.83μmolTrolox/g样品）、三价铁离子的还原能力（45.01、45.80和53.87μmolFe2+/g）以及清除∙OH（IC50值为1.56、1.03和0.99mg/mL）、O2-∙（IC50值为2.45、1.94和1.46mg/mL）和DPPH（IC50值3.14、2.85和2.31mg/mL）自由基的能力且呈剂量依赖关系，体外抗糖基化表明，PS-D2和PS-D3都有较好的抑制糖基化末端终产物（AGEs）的能力（45.1和47.5%）。
天门冬的化学成分研究的开题报告
天门冬的化学成分研究的开题报告标题：天门冬的化学成分研究摘要：天门冬是一种传统的中草药，长期被用于治疗多种疾病。
本文将对天门冬的化学成分进行研究，通过对其主要成分的分离、纯化和鉴定，探究其药理活性和治疗作用。
关键词：天门冬，化学成分，分离纯化，药理活性，治疗作用一、研究背景天门冬是一种经典的中药，可以清热解毒、抗菌消炎、抑制肿瘤等多种功效。
虽然其功效已经在传统医学中得到了广泛运用，但是对其化学成分及其药理活性和治疗作用的研究还存在不足。
因此，本研究旨在分离纯化天门冬的主要化学成分，并探究其药理活性和治疗作用，为天门冬的进一步临床应用提供理论依据。
二、研究内容1. 天门冬的化学成分分析通过对天门冬的水提取物进行色谱分离、纯化和鉴定，确定其主要的化学成分。
2. 药理活性研究对天门冬的化学成分进行药理实验，评估其对人体的生物活性和药效。
3. 治疗作用研究通过体内和体外实验，评价天门冬及其化学成分在治疗特定疾病方面的作用，比如消炎、免疫调节和肿瘤治疗等方面。
三、研究意义1. 确定天门冬的主要化学成分，从而深入了解其药理活性和治疗作用，推动其临床应用。
2. 为人们对天门冬作为传统中药的认识提供科学依据，有助于提高传统中药的诊疗效果和安全性。
3. 为进一步开发和应用天门冬的化学成分提供理论依据。
四、研究方法和步骤1. 提取和分离：将天门冬的水提取物进行溶剂分离，使用色谱技术进行分离纯化。
2. 鉴定：使用质谱和核磁共振等现代技术，鉴定分离出的化合物的结构和成分。
3. 药理实验：对天门冬的化学成分进行体外和体内药理实验，探究其药理活性和治疗作用。
4. 数据分析：通过统计学分析，比较不同实验条件下的药理实验数据，分析不同化学成分的药理活性。
五、预期结果1. 分离出天门冬的主要化学成分，并鉴定其结构和成分。
2. 确定天门冬的药理活性和治疗作用，探究其内部作用机制和药效。
3. 为天门冬的临床应用提供更多科学的理论依据和实验数据。
天冬多糖的提取与单糖组成分析
天冬多糖的提取与单糖组成分析
罗德啟
【期刊名称】《医药导报》
【年(卷),期】2011(30)4
【摘要】目的从常用中药天冬中提取多糖,并建立柱前衍生化高效液相色谱法分析天冬多糖的单糖组成.方法采用水提醇沉法提取天冬多糖.用2 mol·L-1 硫酸溶液将多糖水解成单糖,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)与水解后的单糖进行生化反应;衍生产物采用反相高效液相色谱法分离,并在250 nm波长处检测,研究天冬多糖的单糖组成.结果水提醇沉法提取的多糖经过精制后,所得多糖的平均含量可达95.84%.用高效液相色谱法检测天冬多糖中单糖组成比例为甘露糖:鼠李糖:葡萄糖醛酸:葡萄糖:半乳糖:阿拉伯糖(2.18:0.95:1.00:1.62:2.06).结论该多糖提取及精制方法可得到含量较高的天冬多糖.柱前衍生的高效液相色谱法可用于天冬多糖的单糖组分分析,该法操作简便,结果准确,适用于多糖中的单糖组成分析.
【总页数】3页(P451-453)
【作者】罗德啟
【作者单位】湖北省新华医院药学部,武汉,430015
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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多糖的分离纯化及分析
多糖的分离纯化及分析一、多糖的提取方法（一）溶剂提取法1、水提法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法.多糖是极性大分子化合物，提取时应选择水、醇等极性强的溶剂.用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到70%左右，利用多糖不溶于乙醇的性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置5h，多糖的质量分数和得率均较高.2、酸碱提法有些多糖适合用稀酸提取，并且能得到更高的提取率。
有些多糖在碱液中有更高的提取率，尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。
与酸提类似，碱提中碱的浓度也应得到有效控制，因为有些多糖在碱性较强时会水解。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术.（二）生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术，在多糖的提取过程中，使用酶可降低提取条件，在比较温和的条件中分解植物组织，加速多糖的释放或提取。
此外，使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物，常用的酶有蛋白酶，纤维素酶，果胶酶等。
（三）超声提取法超声波是一种高频率的机械波，其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏，有利用植物有效成分的释放，而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流，有效地减小、消除与水相之间的阻滞层，加大了传质效率，有助于溶质的扩散。
超声波提取与传统的提取方法相比，有提取效率高、时间短、耗能低等优点。
（四）微波提取微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波，微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部，由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高，压力增大，当压力超过细胞壁的承受能力时，细胞壁破裂，位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来，传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。
二、多糖的分离纯化（一）多糖的分离采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物，分级的方法可达到纯化的目的．可按溶解性不同进行分级、按分子大小和形状分级(如分级沉淀、超滤、分子筛、层析等)，也可按分子所带基团的性质分级．1、按溶解性不同分离（1）分步沉淀法分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质，从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀．（2）盐析法盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。
多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定
多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定以多糖的分离纯化及其纯度鉴别与分子量测定为题，本文将介绍多糖的分离纯化方法、纯度鉴别及分子量测定的原理和常用技术。
一、多糖的分离纯化方法多糖是指由多个单糖分子通过糖苷键连接而成的聚合物，常见的多糖有淀粉、纤维素、壳聚糖等。
多糖的分离纯化是指将多糖与其他杂质分离开来，得到纯净的多糖样品。
常用的多糖分离纯化方法包括溶剂沉淀法、离子交换色谱法和凝胶过滤法等。
溶剂沉淀法是通过在特定溶剂条件下，使多糖在溶液中沉淀，然后通过离心等方式分离沉淀物和上清液。
离子交换色谱法是利用多糖与离子交换树脂之间的电荷相互作用，通过调节溶液pH 值和离子强度等条件，实现多糖与其他组分的分离。
凝胶过滤法则是利用多糖分子的大小和形状差异，在凝胶柱中进行分离，大分子多糖难以进入凝胶颗粒内部，从而被留在柱上，小分子杂质则能够顺利通过。
二、多糖纯度的鉴别方法多糖的纯度鉴别是指确定多糖样品中多糖的含量以及杂质的种类和含量。
常用的多糖纯度鉴别方法包括光谱法、色谱法和凝胶电泳法等。
光谱法是通过多糖在特定波长下吸光度的变化来确定多糖的含量，如紫外吸收光谱法和红外光谱法。
色谱法是利用多糖与其他组分在色谱柱中的分离行为，通过检测样品中多糖峰的峰面积或峰高来确定多糖的含量。
凝胶电泳法是利用多糖在电场中的迁移行为，通过在凝胶上观察多糖的迁移距离和带电量来确定多糖的含量和电荷性质。
三、多糖分子量测定方法多糖的分子量是指多糖分子中单糖个数的总和，是评价多糖结构和性质的重要指标。
常用的多糖分子量测定方法包括凝胶渗透色谱法、粘度法和质谱法等。
凝胶渗透色谱法是通过多糖在凝胶柱中的分离行为，利用不同分子量的多糖在凝胶柱上的停留时间来确定多糖的分子量。
粘度法是通过测量多糖溶液的粘度和浓度，利用Mark-Houwink公式计算多糖的分子量。
质谱法是通过测量多糖分子在质谱仪中的离子质量来确定多糖的分子量。
多糖的分离纯化、纯度鉴别和分子量测定是研究多糖性质和功能的重要步骤。
多糖的分离纯化及性质表征
2.2多糖的提取方法
酶法
酶解反应较温和将组织分解，增加多糖的溶出，可较 大幅度提高产率。
常用于除去各种与多糖结合的结合蛋白质。
2.3多糖提取液浓缩
多糖提取液浓缩应尽量在低温下进行，并防止提取物 与氧气接触，防止多糖被氧化，保持原有结构及生物 活性。 吸附法
干葡聚糖凝胶加入提取液中，两者比例为1:5.由于凝 胶吸水，提取液的体积可缩小三倍左右，多糖回收率 达80%。
多糖的分离纯化及结构表征
员工培训 2012-7-31
1、多糖的基本概述 多糖，又称多聚糖，是由10个以上的单糖通过 苷键连接而成的链状聚合物。 (C6H10O5)n， n>10
1、多糖的基本概述
组成分类
同多糖：由一种单糖组成（淀粉、半纤维素、几丁质等） 杂多糖：由两种或两种以上单糖组成（透明质酸、硫 酸软骨素、硫酸皮肤素等）
多糖的结构表征
组成单糖种类与数目不相同，多糖的结构非常复杂多糖 结构复杂，其研究主要包括以下内容： 1.相对分子质量 2.单糖的种类与物质的量比 3.各糖环的构象( 呋喃型或吡喃型)与异头碳构型
4.糖残基间的连接方式
5.二级结构及空间构象
多糖的结构表征
1.多糖相对分子质量测定 常用的方法有凝胶色谱法、蒸汽压渗透计法、端基法、 粘度法、光散射法、渗透压法和超滤法等。 凝胶色谱法是比较常用的方法，用已知分子量样品作标 准，建立标准曲线，求得待测多糖的相对分子质量。 多糖相对分子质量只代表相似链长的平均而不是确切的 分子大小。往往用不同的方法会得到不同的相对分子质 量。
2多糖的提取分离
多糖存在形式： 细胞壁外-胞外多糖 细胞壁内-胞内多糖（大多数多糖） 细胞壁多糖 动植物的细胞大多由脂质包围，用机械粉碎后还必须 脱脂（沙氏提取器，乙醇回流）。 对于含有较多单糖和低聚糖的样品可用热的80%乙醇 处理。