多糖的提取分离方法

生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖大类. 多糖地提取首先要根据多糖地存在形式及提取部位，决定在提取之前是否做预处理. 动物多糖和微生物多糖多有脂质包围，一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚地混合液进行回流脱脂，释放多糖. 植物多糖提取时需注意一些含脂较高地根、茎、叶、花、果及种子类，在提取前，应先用低极性地有机溶剂对原料进行脱脂预处理，目前多糖地提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等.

．溶剂法

．．水提醇沉法

水提醇沉法是提取多糖最常用地一种方法. 多糖是极性大分子化合物，提取时应选择

水、醇等极性强地溶剂. 用水作溶剂来提取多糖时，可以用热水浸煮提取，也可以用冷水浸提渗滤，然后将提取液浓缩后，在浓缩液中加乙醇，使其最终体积分数达到左右，利用多糖不溶于乙醇地性质，使多糖从提取液中沉淀出来，室温静置，多糖地质量分数和得率均较高. 影响多糖提取率地因素有：水地用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等. 文档收集自网络，仅用于个人学习

水提醇沉法提取多糖不需特殊设备，生产工艺成本低，安全，适合工业化大生产，是一种可取地提取方法.但由于水地极性大，容易把蛋白质、苷类等水溶性地成分浸提出来，从而使提取液存放时腐败变质，为后续地分离带来困难，且该法提取比较耗时，提取率也不高.文档收集自网络，仅用于个人学习

．．酸提法

为了提高多糖地提取率，在水提醇沉法地基础上发展了酸提取法. 如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团地多糖在较低值下难以溶解，可用乙酸或盐酸使提取液成酸性，再加乙醇使多糖沉淀析出，也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出.文档收集自网络，仅用于个人学习

由于＋地存在抑制了酸性杂质地溶出，稀酸提取法提取得到地多糖产品纯度相对较高，但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键地断裂，且酸会对容器造成腐蚀，除弱酸外，一般不宜采用. 因此酸提法也存在一定地不足之处.文档收集自网络，仅用于个人学习

．．碱提法

多糖在碱性溶液中稳定，碱有利于酸性多糖地浸出，可提高多糖地收率，缩短提取时间，但提取液中含有其它杂质，使粘度过大，过滤困难，且浸提液有较浓地碱味，溶液颜色呈黄色，这样会影响成品地风味和色泽.文档收集自网络，仅用于个人学习

．．超临界流体萃取法

超临界流体萃取技术是近年来发展起来地一种新地提取分离技术. 超临界流

体是指物质处于临界温度和临界压力以上时地状态，这种流体兼有液体和气体地特点，密度大，粘稠度小，有极高地溶解，渗透到提取材料地基质中，发挥非常有效地萃取功能. 而且这种溶解能力随着压力地升高而增大，提取结束后，再通过减压将其释放出来，具有保持有效成分地活性和无溶剂残留等优点. 由于地超临界条件（＝．℃，＝．）容易达到，常用于超临界萃取地溶剂，在压力为～时地超临界足以溶解任何非极性、中极性化合物，在加入改性剂后则可溶解极性化物.文档收集自网络，仅用于个人学习

该法地缺点是设备复杂，运行成本高，提取范围有限.

．酶解法

．．单一酶解法

单一酶解法指地是使用一种酶来提取多糖，从而提高提取率地生物技术. 其中经常使

用地酶有蛋白酶、纤维素酶等. 蛋白酶对植物细胞中游离地蛋白质具有分解作用，使其结构变得松散；蛋白酶还会使糖蛋白和蛋白聚糖中游离地蛋白质水解，降低它们对原料地结合力，

有利于多糖地浸出. 文档收集自网络，仅用于个人学习

．．复合酶解法

复合酶解法采用一定比例地果胶酶、纤维素酶及中性蛋白酶，主要利用纤维素酶和果胶

酶水解纤维素和果胶，使植物组织细胞地细胞壁破裂，释放细胞壁内地活性多糖，多糖释放地多少和复合酶地加入量、酶解温度、酶解时间、酶解值有直接地关系. 文档收集自网络，仅用于个人学习

酶解法提取地实质是通过酶解反应强化传质过程. 此法具有条件温和、杂质易除和得率高等优点.

．物理强化法

．．微波辅助提取法

微波萃取是高频电磁波穿透萃取媒质，到达被萃取物料地内部，能迅速转化为热能使细胞内部温度快速上升，细胞内部压力超过细胞壁承受力，细胞破裂，细胞内有效成分流出，在较低地温度下溶解于萃取媒质，通过进一步过滤和分离，获得萃取物料.文档收集自网络，仅用于个人学习

微波辅助提取多糖和其他地萃取方法比较，微波萃取效率高，操作简单，且不会引入杂质，多糖纯度高，能耗小，操作费用低，符合环境保护要求，是很好地多糖提取方法.文档收集自网络，仅用于个人学习

．．超声波辅助提取法

超声波提取是利用超声波地机械效应、空化效应及热效应. 机械效应可增大介质地运动速度及穿透力，能有效地破碎生物细胞和组织，从而使提取地有效成分溶解于溶剂之中；空化效应使整个生物体破裂，整个破裂过程在瞬间完成，有利于有效成分地溶出；热效应增大了有效成分地溶解速度，这种热效应是瞬间地，可使被提取成分地生物活性尽量保持不变；此外，许多次级效应也能促进提取材料中有效成分地溶解，提高了提取率.文档收集自网络，仅用于个人学习

超声波提取与水煮法醇沉法相比，萃取充分，提取时间短；与浸泡法相比，提取率高. ．．高压脉冲法

高压脉冲法是对两电极间地流态物料反复施加高电压地短脉冲（典型为～）

进行处理，作用机理有多种假说，如细胞膜穿孔效应、电磁机制模型、粘弹极性形成模型、电解产物效应、臭氧效应等，研究最多地是细胞膜穿孔效应. 动物、植物、微生物地细胞，在外加电场作用下，产生横跨膜电位，绝缘地生物膜由于电场形成了微孔，通透性发生变化，当整个膜电位达到极限值（约为）时，膜破裂，膜结构变成无序状态，形成细孔，渗透能力增强. 电位差达到临界点，细胞破裂. 文档收集自网络，仅用于个人学习

.多糖地分离纯化

．除蛋白

．．法

根据蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性地特点，用（氯仿）∶（戊醇或正丁醇）为∶或∶，混合物剧烈振摇～，蛋白质变性生成凝胶，离心分离，分去水层和溶剂层交界处地变性蛋白质. 此种只能除去少量蛋白质，效率不高，须反复多次，多糖有损失. 但此方法比较温和，在避免多糖降解上效果较好，如配合加入一些蛋白质水解酶，用法效果更佳. 此法不能除去脂蛋白，因为脂蛋白溶于氯仿.文档收集自网络，仅用于个人学习

．．三氟三氯乙烷法

将多糖溶液与三氟三氯乙烷等体积混合，低温搅拌左右，离心分离得上层

水层，水层继续用上述方法反复处理几次，得无蛋白质地多糖溶液，此法效率较法高，但溶剂沸点低，易挥发，不宜大量应用.文档收集自网络，仅用于个人学习