RNA干扰技术

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RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默

RNA干扰与基因沉默RNA干扰(RNA interference, RNAi)是一种通过特定RNA分子介导的基因沉默机制,被广泛应用于生物学研究、基因治疗等领域。

本文将深入探讨RNA干扰的原理、应用及未来发展方向。

一、RNA干扰的原理RNA干扰是一种高度保守且广泛存在于真核生物中的生物学过程。

它主要通过三种类型的RNA分子实现基因沉默:microRNA (miRNA)、small interfering RNA(siRNA)和Piwi-interacting RNA (piRNA)。

其中,siRNA是最为常见和被广泛应用的一种。

在RNA干扰中,siRNA与RNA诱导酶复合物结合形成RNA诱导沉默复合物(RISC),RISC会通过碱基互补的方式与靶向RNA结合,并介导靶向RNA的降解,从而达到沉默该基因的效果。

这一过程使得基因的转录和翻译被有效地抑制,实现基因的沉默。

二、RNA干扰的应用1. 基因功能研究:RNA干扰技术被广泛应用于基因功能的研究中。

通过设计特定的siRNA,可以实现对目标基因的沉默,从而观察基因沉默对生物体的生理和生化过程产生的影响,揭示基因在细胞和生物体中的作用机制。

2. 疾病治疗:RNA干扰技术在基因治疗领域具有巨大潜力。

通过设计特异性的siRNA,可以实现对致病基因的沉默,从而治疗遗传性疾病、肿瘤和病毒感染等多种疾病。

此外,RNA干扰还可以用于研发新型药物和治疗手段。

3. 植物保护:在植物领域,RNA干扰技术也被广泛应用于植物保护。

通过设计特定的siRNA,可以实现对害虫和病原菌基因的沉默,从而提高作物的抗病虫性,减少对农药的依赖,实现绿色农业的发展。

三、RNA干扰的未来发展方向随着RNA干扰技术的不断发展,未来有望在以下几个方面取得重要进展:1. 靶向性增强:未来的RNA干扰技术将更加注重提高siRNA的靶向性,减少对非靶向基因的影响,从而提高沉黙效率和生物安全性。

2. 交叉学科应用:RNA干扰技术将与生物信息学、纳米技术等学科相结合,开拓全新的应用领域,如基因组编辑、精准医学等。

RNA干扰了解RNA干扰技术如何用于研究蛋白质表达

RNA干扰了解RNA干扰技术如何用于研究蛋白质表达

RNA干扰了解RNA干扰技术如何用于研究蛋白质表达在细胞和分子生物学研究中,RNA干扰(RNA interference,简称RNAi)技术被广泛应用于研究蛋白质表达以及基因功能的调控。

本文将介绍RNA干扰的原理、应用以及在蛋白质表达研究中的重要作用。

一、RNA干扰的原理RNA干扰是一种通过特定的双链RNA干扰子引起特定mRNA分子水平下降的现象。

这种现象主要是由两种类型的RNA干扰子介导的:小干扰RNA(siRNA)和小分子干扰RNA(miRNA)。

1. 小干扰RNA(siRNA)小干扰RNA是由外源的双链RNA或由基因内转录的长双链RNA 通过核酶Dicer酶切产生的,长度通常为21到23个核苷酸。

siRNA可直接与靶基因的mRNA互补结合,导致mRNA降解或抑制翻译过程,从而使靶基因的表达水平下降。

2. 小分子干扰RNA(miRNA)miRNA是一类内源性RNA干扰子,长度约为20到25个核苷酸。

miRNA通过与mRNA的3'非翻译区结合,介导RNA识别复合物(RISC)的形成,进而抑制靶基因的翻译或促使其mRNA分解,从而抑制或降低靶基因的表达。

二、RNA干扰的应用RNA干扰技术广泛应用于基因功能研究、药物开发以及疾病治疗等领域。

以下是RNA干扰技术的一些常见应用:1. 基因敲除通过设计目标基因的siRNA或miRNA,可以有效地抑制目标基因的表达,实现基因敲除的效果。

这对于研究特定靶基因的功能和调控机制非常重要。

2. 蛋白质功能研究RNA干扰技术可以帮助研究人员评估蛋白质的功能和相互作用。

通过靶向特定基因的RNAi,可以引起靶基因表达的改变,并进一步观察对其他蛋白质或生物过程的影响。

3. 药物开发RNA干扰技术为药物开发提供了新的思路和目标。

通过靶向特定病原体或基因的RNAi,可以研发出具有高效和特异性的药物,用于治疗各种疾病,如肿瘤、病毒感染等。

4. 疾病治疗RNA干扰技术在疾病治疗中也有广阔的应用前景。

新型药物——RNA干扰技术

新型药物——RNA干扰技术

新型药物——RNA干扰技术RNA干扰技术,是指利用RNA分子抑制靶标基因表达的技术,也被称为RNAi技术。

这种技术被认为是一种有效的基因靶向药物发展方法,近年来已经越来越受到关注。

本文将从基本原理、发展历程、现状和前景四个方面探讨RNA干扰技术的应用前景。

一、基本原理RNA干扰技术的基本原理是:在细胞内,RNA分子通过匹配比较与它们相互作用的靶标RNA来抑制特定的基因表达。

RNA干扰的反应主要是通过引入一种小RNA分子来实现的。

这种小RNA分子有两种类型:微小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和microRNA(miRNA)。

siRNA主要是为了阻断目标mRNA而设计的,可以被细胞内RNA酶制备出来,并且可以通过介导RNA介导的开放式染色质(RNA-induced open chromatin,RIOC)途径来导致靶mRNA的降解。

而miRNA则是通过结合不完美匹配的靶mRNA抑制其翻译。

二、RNA干扰技术的发展历程RNA干扰技术的发展历程始于1998年,当时发现C.elegans(秀丽隐杆线虫)中一群基因缺失后,引起其表型发生了特异性变化。

其中,在RNAi技术被广泛应用之前,关键的突破是首次发现siRNA。

通过缩短dsRNA(double-stranded RNA,双链RNA)来制作siRNA,能够高度特异性地抑制基因表达。

这一发现引起了科学家们的极大兴趣,RNAi技术逐渐成为一个热点领域。

在RNAi技术的发展过程中,广泛的研究证实RNAi具有广泛的应用范围,包括在基因学、细胞学、发育生物学和生物医学中的应用,以及在农业生产和生物医药领域中的应用。

三、现状在目前的生物医学领域中,RNAi技术已成为一种广泛使用的工具,被广泛应用于基因功能研究、病原体基因组学、基因治疗以及药物研发等方面。

现在RNAi技术已经成为基因治疗领域研究的重点。

目前,RNA干扰技术在临床中的应用主要集中在抗癌领域。

rna干扰的名词解释

rna干扰的名词解释

rna干扰的名词解释RNA干扰:探索基因调控的新领域近年来,一个名词在生物学领域频繁出现,它就是“RNA干扰”。

作为一种重要的基因调控机制,RNA干扰在生物学研究中扮演着重要的角色。

本文将带您深入了解RNA干扰的概念、机制和应用。

一、RNA干扰的概念RNA干扰,全称为RNA interference,是一种通过RNA分子调控基因表达的过程。

简而言之,它是一种通过降解或抑制特定基因产物的方式,来调节这些基因表达和功能的现象。

二、RNA干扰的机制1. 小干扰RNA(siRNA)的产生RNA干扰的开始是由于产生小干扰RNA(siRNA)。

当外源的双链RNA (dsRNA)或内源性的转录产物具备一定的结构特征,即能够被核酸内切酶识别并切割,从而形成长度约为20-24核苷酸的小干扰RNA。

2. siRNA的导入产生的siRNA会与RNA诱导复合物(RISC)结合,这个复合体能够识别和结合与siRNA序列互补的mRNA分子。

导入过程确保siRNA与目标mRNA结合,从而催化这些mRNA的降解或抑制翻译。

3. mRNA降解或抑制翻译一旦siRNA与特定mRNA结合,RISC会切割这些mRNA分子,导致它们在细胞内降解。

如果切割发生在编码区,会导致部分或完全的mRNA降解;如果切割发生在非编码区,会引起mRNA的转译抑制,从而阻止蛋白质的合成。

三、RNA干扰的应用1. 基因沉默研究RNA干扰为研究基因功能提供了强有力的工具。

通过选择性地抑制或沉默特定基因,在细胞和生物体中观察这些变化,可以揭示基因在发育、分化、疾病等方面的重要作用。

2. 药物研发RNA干扰技术为药物研发提供了新途径。

通过利用siRNA特异地靶向基因表达,可以高效地减少特定蛋白质的产生,从而对许多疾病进行治疗。

例如,肝癌、糖尿病和病毒感染等疾病的治疗已经取得了一定的成功。

3. 农业和食品安全RNA干扰不仅在医学领域应用广泛,也在农业和食品安全领域有着巨大潜力。

RNA干扰技术

RNA干扰技术

RNAi的分子作用机制
1、siRNA引起的基因沉默
miRNA诱导的基因沉默
miRNA是一种广泛存在于真核生物中内源性的、高度保守 的、非编码小的RNA。 miRNA主要是通过抑制翻译来实现基因的沉默,成熟的双 链miRNA会很快被整合到miRNA介导的沉默复合体(miRISC) 中。 成熟miRNA结合到与其序列互补的mRNA位点,通过2种依 赖于序列互补机制负性调控靶基因的表达。如果miRNA与靶 位点序列完全互补,miRNA的结合会引起mRNA的降解;如 果miRNA与mRNA不完全互补,则能抑制mRNA的翻译过程。

ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
第三步(倍增阶段)在 RISC 复合物中,以 siRNA 的单链 为引物,以 mRNA 为模板,在 RNA 指导的 RNA 聚合酶作 用下,合成 mRNA 的互补链,即形成 dsRNA 。 dsRNA 再 被Dicer酶裂解成新的siRNA(次级siRNA)。 因此,细胞内的siRNA数量大大增加,显著增强了对基因 表达的抑制作用。 siRNA 也可转运出细胞,使 RNAi 扩散 到整个机体。
获得siRNA产物方法

目前主要有5种方法用于siRNA的制备
(1)化学合成法;(2)体外转录法;
(3)长链dsRNA的RNaseIll体外消化法;
(4)siRNA表达载体法;(5)siRNA表达框架法。

前3种是在体外制备然后导入到细胞中;后两种则
是基于具有合适启动子的载体或转录元件在哺乳动
物或细胞中转录生成siRNA。
RNA干扰技术
张风娇
简介
RNA干扰(RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双
链RNA(dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解,

调控基因表达的RNA干扰技术

调控基因表达的RNA干扰技术

调控基因表达的RNA干扰技术RNA干扰技术是一种能够调控基因表达的方法,通过促进或抑制某些基因的表达,可以达到一系列的目的。

在这篇文章中,我们将探讨RNA干扰技术的原理、应用以及未来发展方向。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰技术是通过靶向基因转录产物(mRNA)来抑制或阻断其转录形成的特定蛋白质。

RNA干扰技术基于RNA的双链结构,使用小分子RNA或RNA类似物来靶向特定的mRNA,在细胞中调控该基因的表达。

RNA干扰技术由三部分组成:小分子RNA、蛋白质和RNA诱导的沉默复合物(RISC)。

在这个过程中,小分子RNA结合到RISC中,进而靶向特定mRNA的3'非翻译区域(也叫3'UTR) 。

绑定后,RISC可以通过水解的方式,将mRNA切断并阻止其翻译成蛋白质。

这个机制可以有效地调控特定的基因表达。

二、RNA干扰技术的应用RNA干扰技术作为一个新兴的基因调控技术,广泛应用于许多领域。

1、基因功能研究RNA干扰技术被广泛用于基因功能研究。

通过敲低或敲除某些基因,可以研究这些基因的作用,从而揭示新的细胞信号通路或生物学过程。

用RNA干扰技术进行基因敲除,可以避免扰乱复杂的基因调节网络,并且是一种经济高效的方法研究基因功能。

2、药物筛选RNA干扰技术能够高度选择性地抑制特定的基因,在药物筛选中也有广泛应用。

通过设计小分子RNA来抑制与某种疾病有关的基因表达,进而测试新药的功效。

这个过程也可以帮助我们发现新药物目标。

3、基因治疗RNA干扰技术在基因治疗中也有应用。

一个例子是使用RNA 干扰技术抑制患病基因的表达,治疗患有遗传疾病的患者。

通过敲低或敲除患病造成的基因表达,可能可以降低或缓解某些疾病的症状。

三、RNA干扰技术的未来发展RNA干扰技术作为一种新兴的基因调控技术,有着很多未来的发展方向。

1、靶向性RNA干扰技术的靶向性是非常重要的,因为小分子RNA对不同的基因具有不同的靶向性。

生物学中的RNA干扰技术及其应用

生物学中的RNA干扰技术及其应用

生物学中的RNA干扰技术及其应用RNA干扰技术是一种可以通过RNA干扰来靶向调节特定的基因表达的技术。

RNA干扰技术的研究不仅在基础研究中有着广泛的应用,同时在医学和农业等领域也有着重要的应用。

本文将从RNA干扰技术的基本原理、技术路线和应用等方面加以论述。

一、RNA干扰技术的基本原理RNA干扰技术是利用人工合成的双链小分子RNA干扰(siRNA)或小分子RNA(miRNA)与mRNA的序列互补配对,以靶向降解或抑制mRNA的翻译来实现靶向调节基因表达的技术。

在RNA干扰技术中,RNA干扰分子是由一个具有20个核苷酸的双链RNA组成,其中每个链都有10个核苷酸。

RNA干扰分子是通过RNA酶III转录基因组的方式制备的,以形成两个互补单链RNA。

其中一个链称为导向链,它与目标mRNA中具有与之序列互补的区域靶向结合。

另一个链称为剪切链,它通过在目标mRNA上催化切割进一步降低目标mRNA的表达水平。

RNA干扰技术的基本原理可以分为两种模式,即siRNA和miRNA。

siRNA是具有完全互补的双链RNA,并且它们由细胞内特定的酶切割而成。

siRNA定向呈现在RISC(RNA诱导靶向切割复合体)上,进而识别和直接切割这种相应的mRNA。

miRNA是由能够形成细长的发夹特征的内源性RNA转录产物。

这种RNA不是完全的互补,但它们也能定向呈现在RISC中,进而促进与相应的mRNA靶向结合,从而影响mRNA的翻译。

二、RNA干扰技术的技术路线RNA干扰技术的技术路线主要包括以下四个步骤:siRNA的合成、细胞内递送、靶向RNA的切割和RNA的翻译抑制。

首先,siRNA是通过合成来申请具有与目标序列互补的RNA双链。

接着,siRNA需要被递送到细胞中,并进入到受体细胞中。

这个过程可能需要把siRNA捆绑到物理或化学方法,例如高分子纳米颗粒、脂质体或某些物理转换。

接着,siRNA进入到细胞质中,并定向进入到RISC,靶向RNA的切割和RNA的翻译抑制即可完成。

生物工程知识:RNA干扰技术——分子生物学领域最前沿的新兴技术

生物工程知识:RNA干扰技术——分子生物学领域最前沿的新兴技术

生物工程知识:RNA干扰技术——分子生物学领域最前沿的新兴技术RNA干扰技术是一种基因沉默的技术,即通过稳定地、特异性地、可控地抑制靶基因的表达,从而实现对细胞生理学、病理学等多种生物过程的研究。

RNA干扰技术在过去十年中突飞猛进,尤其是在分子生物学领域得到广泛的应用。

本文将从RNA干扰技术的原理、应用及优缺点等方面进行探讨,并分析这一技术在生物医学和农业等领域的发展前景。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰技术是由细胞自身启动的基因调控机制演化而来,其基本原理是利用RNA分子对与其互补的mRNA分子交互作用,导致靶基因mRNA被降解或转录被沉默,从而降低其蛋白表达水平。

RNA干扰技术基本上是以dsRNA(double-stranded RNA)为媒介,形成RNAi(RNA interference,RNA干扰)复合物并将其导入到目标细胞中,从而介导靶基因的降解。

dsRNA通过酶切剪切产生长度为21-25个核苷酸的siRNA(small interfering RNA),siRNA与蛋白质组装成RISC (RNA-induced silencing complex),并绑定到靶mRNA上,引起mRNA降解或转录后阻遏,从而达到抑制特定基因表达的目的。

二、RNA干扰技术的应用RNA干扰技术在许多生物医学领域,如药物筛选、疾病诊断、基因治疗等方面得到了广泛的应用。

这种技术可以抑制癌症、病毒、细菌等对人体的威胁,不仅在化疗药物研发中具有潜在的应用价值,还可以用于开发新型的生物药物。

此外,RNA干扰技术已经应用于诊断临床病理生理状态,例如在癌症细胞中检测靶基因表达水平,可以提高癌细胞的灵敏性并使得早期癌症的诊断和治疗更加准确和有效。

RNA干扰技术也被应用于农业和畜牧业领域,其中一个应用是用于生物质能源生产中的生物致能催化剂生产。

三、RNA干扰技术的优缺点RNA干扰技术具有许多优点,例如技术简便、高效、具有多靶向的优势、易于定量化等。

rna干扰

rna干扰

rna干扰RNA干扰技术是一种利用RNA分子干扰靶标基因表达的方法,该技术的研究与应用已经广泛扩展到生物学、医学以及生物技术领域。

本文将介绍RNA干扰技术的原理、应用和未来发展前景。

RNA干扰(RNA interference,简称RNAi)是由RNA介导的靶向基因沉默的一种机制。

它最早在植物中被发现,后来也被发现在动物细胞中广泛存在。

RNA干扰通过靶向性介导的方法,降低或抑制特定基因的表达,从而实现对基因功能的研究和调控。

RNA干扰的基本原理是双链RNA(dsRNA)通过酶切分解为20-25个碱基对长的小干扰RNA(small interfering RNA,简称siRNA)。

siRNA与RNA诱导静默复合体(RNA-induced silencing complex,简称RISC)结合,将其中一条链引导到靶标mRNA上,并通过与该mRNA互补配对,发挥沉默作用。

引导链与靶标mRNA形成稳定的双链结构,进而被RISC酶降解,从而阻断了该mRNA的翻译过程或引起其降解。

通过RNA干扰技术,可以特异性地沉默特定基因的表达。

RNA干扰技术的应用非常广泛。

首先,它被广泛应用于基因功能研究。

通过对单个基因进行沉默,可以直接观察到其对细胞及生物体的影响,从而揭示其在生物过程中的作用。

其次,RNA干扰技术也可以用于治疗疾病。

对于一些基因异常表达导致疾病的情况,通过RNA干扰技术恢复正常的基因表达,可以有望治疗相关疾病。

此外,RNA干扰技术还可以用于抗病毒研究、农业作物改良等领域。

在临床应用方面,RNA干扰技术已取得了一些重要的突破。

例如,目前已经有一些RNA干扰基因药物进入了临床试验阶段。

这些基因药物通过RNA干扰技术沉默与疾病相关的靶标基因,为患者治疗提供了新的选择。

此外,RNA干扰技术还可以用于个体化医学,根据患者基因的特点制定个体化的治疗方案,提高治疗的效果。

然而,RNA干扰技术仍然面临一些挑战和限制。

RNA干扰技术原理及应用

RNA干扰技术原理及应用

03 rna干扰的应用
在医学领域的应用
01
02
03
疾病诊断
利用rna干扰技术,可以 特异性地沉默致病基因的 表达,从而实现对疾病的 诊断。
药物研发
通过rna干扰技术,可以 筛选出对特定疾病具有治 疗作用的候选药物,加速 药物研发进程。
基因治疗
rna干扰技术可以用于基 因治疗,通过沉默致病基 因的表达,达到治疗遗传 性疾病的目的。
功能基因组学研究
rna干扰技术可以用于功能基因组 学研究,通过沉默基因的表达, 探究基因的功能和作用机制。
生物进化研究
利用rna干扰技术,可以探究生物 进化过程中基因表达的变化和演 化机制。
生物医学研究
rna干扰技术可以用于生物医学研 究,通过沉默特定基因的表达, 探究疾病的发生和发展机制。
04 rna干扰技术的挑战与前 景
药物研发
RNA干扰技术也可用于药物研发,帮助科学家快速筛选 出与特定疾病相关的基因,从而开发出新的药物。
农业应用
在农业领域,RNA干扰技术可用于培育抗病、抗虫的转 基因作物,提高农作物的产量和品质。
05 rna干扰技术的实验流程
设计siRNA
总结词
设计siRNA是RNA干扰技术的关键步 骤,需要选择与目标mRNA互补的特 定序列。
技术挑战
脱靶效应
RNA干扰过程中,有时会导致非目标基因的表达沉默,这被称 为脱靶效应。脱靶效应的产生可能与siRNA的序列、浓度以及
作用时间等因素有关。
细胞毒性
某些RNA干扰试剂可能对细胞产生毒性,影响实验结果。因此 ,在选择RNA干扰试剂时,需要考虑其对细胞的毒性。
体内应用限制
在体内应用RNA干扰技术时,如何将siRNA有效地传递到靶细 胞中是一个挑战。此外,如何维持siRNA的稳定性以及其在体

RNA干扰的基础和应用

RNA干扰的基础和应用

RNA干扰的基础和应用RNA干扰(RNA interference,简称RNAi)是一种通过介导mRNA分解的生物学现象。

RNAi从20世纪90年代开始被发现,而cosuppression和PTGS则是在植物和线虫中最早被发现的RNAi现象。

RNA干扰在细胞、动物和植物中普遍存在,广泛参与多种生物学过程,如基因表达调控、病毒防御等。

本文将系统阐述RNA干扰的基础、调控机制和应用。

一、RNA干扰基础RNA干扰主要是指由RNA介导的一种基因静默机制。

RNA干扰基本流程如下图所示:[图1]首先,在RNA干扰反应中,一类小RNA分子命名为siRNA(小干扰RNA)或miRNA(microRNA,微小RNA)是RNA干扰的关键介质。

小RNA是短链非编码RNA,在细胞内广泛存在。

他们通过一组复杂的蛋白质复合体,与同源mRNA发生序列互补匹配(完全互补或部分互补)并降解它们。

siRNA和miRNA的分子大小分别为21-22 nt和18-24 nt,且都能通过相同的介导机制阻断RNA表达或降解mRNA分子。

siRNA和miRNA的产生及介导机制有所不同。

siRNA是由异源RNA引发的RNA分子,通过切割二级RNA产生。

miRNA是由内含子和非编码RNA带产生的RNA分子。

预miRNA的长链RNA在细胞核内转录生成,由核内蛋白质Drosha切割生成50-70条的前体miRNA。

后续,前體miRNA分子被外泌小体进一步分裂成miRNA/diG或miRNA/miRd,它们可以通过Dicer蛋白复合物及ARGONAUTE含有RNA识别结构域的产物降解mRNA分子。

二、RNAi的调控机制RNA干扰的过程包括siRNA的产生、siRNA的运输以及siRNA对mRNA的介导。

RNA干扰是由许多与RNAi直接参与的蛋白质组成的,包括Drosha、DGCR8、Dicer等。

这些蛋白质的确切表达和活性调整RNA干扰的效率。

例如,在核糖核酸核酸1和DNA甲基转移酶1中,它们通过与miRNA蛋白复合物合作调整RNAi底层机制。

RNA干扰技术的研究和应用

RNA干扰技术的研究和应用

RNA干扰技术的研究和应用RNA干扰技术是一种利用RNA颗粒干扰基因表达的技术,近年来在基因学和生命科学领域得到了广泛的研究和应用。

本文将探讨RNA干扰技术的基础知识、其研究进展和应用前景。

一、RNA干扰技术的基础知识RNA干扰技术是利用RNA分子干扰基因表达的一种方法,可分为siRNA和miRNA两种类型。

siRNA(小干扰RNA)是由20~25个核苷酸组成的短RNA分子,与mRNA互补配对,从而导致靶基因的降解。

miRNA(微小RNA)是由22个核苷酸组成的短RNA分子,通过与mRNA部分匹配后,抑制靶基因的翻译过程。

这种RNA干扰过程被称为RNAi(RNA干扰)。

当siRNA或miRNA结合到靶基因mRNA时,RNAi复合物会切割靶基因mRNA分子,从而阻止蛋白质的合成,从而有效抑制基因表达。

此外,miRNA还能通过其他机制调节基因表达,如影响RNA稳定性和细胞内RNA转运等。

二、RNA干扰技术的研究进展RNA干扰技术自从1998年发现以来,受到了广泛的研究。

随着RNA干扰技术的发展,研究人员越来越能够研究和控制生物系统的表达和功能,开展了许多与调控基因表达相关的研究。

1. 基因治疗:RNAi技术可用于治疗各种疾病,如癌症和遗传疾病等。

例如,通过RNAi技术降低病毒蛋白的表达,可以延迟病毒的复制和扩散,从而达到治疗的效果。

2. 基因表达调控:RNAi技术可用于研究基因表达调控机制及新型基因治疗等。

研究团队可以通过设计不同的siRNA/miRNA靶向靶基因,来研究影响基因表达的因素和机制。

此外,RNAi技术还可用于设计新的靶向治疗模型,发现新的药物和治疗方法。

3. 基因组学研究:RNAi技术可应用于基因组学研究,例如针对遗传缺陷疾病,利用siRNA靶向特定基因进行修饰。

通过这种方法,研究人员可以探究靶向基因对生物发育、病理生理等方面的影响,为基因组学研究提供了较为便捷的工具。

三、RNA干扰技术的应用前景RNA干扰技术在许多领域都有着广泛的研究和应用前景。

RNA干扰技术

RNA干扰技术

RNA干扰技术RNA干扰技术是一种基因沉默技术,通过特异性地抑制基因的表达,成为生命科学研究领域中一项重要的实验工具。

本文将介绍RNA干扰技术的原理、应用以及未来发展前景。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰技术是指通过利用某些特定的RNA分子介导的过程来抑制基因表达。

它分为两种类型:siRNA(短干扰RNA)和miRNA(微干扰RNA)。

这两种RNA分子通过与靶基因的mRNA序列配对,从而导致靶基因的降解或抑制其翻译过程。

在siRNA干扰中,外源性合成的siRNA经由RISC(RNA诱导的靶向核酸酶复合物)的引导,与目标mRNA施加互补配对。

这一互补配对通常是通过siRNA中的21-23个碱基与目标mRNA中相应的区域形成稳定的双链结构。

这个双链结构被RISC中的核酸酶(Argonaute等)识别并降解,从而抑制靶基因的表达。

miRNA干扰是一种内源性的调控机制。

miRNA是一类长度约为21-25个碱基的内源性小RNA,在细胞中通过与mRNA的部分或完全互补配对,可以沉默靶基因的表达。

与siRNA不同,miRNA通常通过与mRNA的3'非翻译区(UTR)序列配对,从而发挥抑制作用。

二、RNA干扰技术的应用1. 功能基因研究RNA干扰技术被广泛应用于基因功能研究。

通过沉默特定基因的表达,人们可以揭示该基因在生物学过程中的功能和作用机制。

例如,科研人员可以利用RNA干扰技术研究某个候选基因在肿瘤形成中的作用,或者在干细胞分化中的功能。

2. 疾病治疗RNA干扰技术在疾病治疗方面具有巨大潜力。

通过沉默与疾病相关的基因,可以达到治疗疾病的目的。

例如,利用RNA干扰技术,科学家已经研发出多种治疗疾病的新药,如针对肝癌的siRNA药物和针对视网膜退化的miRNA药物。

3. 抗病毒研究在抗病毒研究中,RNA干扰技术也发挥着重要作用。

人们可以设计合成特定的siRNA或miRNA,以抑制病毒基因的表达,从而阻断病毒复制和传播。

RNA干扰名词解释

RNA干扰名词解释

RNA干扰名词解释RNA干扰(RNA interference, RNAi)是一种在基因表达调控过程中起关键作用的现象,也是一种常用的实验技术。

RNA干扰是指通过引入外源双链RNA(dsRNA),使其与特定的目标RNA序列产生互补配对,从而导致目标RNA降解或抑制其翻译的过程。

RNA干扰分为内源性RNA干扰和外源性RNA干扰。

内源性RNA干扰是生物体自身具备的一种防御机制,通过特定的酶(Dicer和Argonaute等)将dsRNA切割成长度约为21-25个核苷酸的小分子siRNA(小干扰RNA),然后与Argonaute蛋白结合形成RNA-诱导沉默复合物(RISC),通过互补配对特异性地降解目标mRNA或抑制其翻译。

外源性RNA干扰则是通过外源方法将dsRNA或人工合成的siRNA导入细胞内,引发类似的干扰效应。

RNA干扰在生物学研究中广泛应用。

通过选择合适的dsRNA序列,可以针对特定基因进行干扰,研究该基因的功能和调控机制。

通过抑制目标基因的表达,可以研究其对生物体或细胞的功能影响,验证其在生命过程中的重要性。

此外,RNA干扰还可以用于筛选基因库,寻找参与特定生理过程的新基因,或在疾病治疗中靶向抑制特定基因的表达。

RNA干扰技术的应用还包括在植物和动物遗传改良中。

通过选择性地抑制目标基因的表达,可以引起特定性状的变化,例如提高作物产量、增强抗病性等。

此外,RNA干扰还可以用于治疗疾病,例如通过沉默特定基因来治疗癌症、病毒感染等。

虽然RNA干扰技术有着广泛的应用前景,但也存在一些限制。

首先,由于dsRNA的特异性是通过互补配对实现的,因此如果引入的dsRNA序列与其他靶标RNA序列存在部分相似性,也可能对其产生干扰,导致误识别和副作用。

其次,外源性RNA干扰技术在某些细胞类型和生物体中的效率较低,对于特定的细胞类型和生物体,可能需要进行优化和改进。

综上所述,RNA干扰是一种重要的基因表达调控机制,并且具有广泛的应用潜力。

生物医药中的RNA干扰技术

生物医药中的RNA干扰技术

生物医药中的RNA干扰技术RNA干扰技术是一种在生物医药领域中被广泛使用的技术,其能够准确地靶向基因,从而控制细胞生物过程,达到治疗疾病的目的。

这项技术的突破,对医学界的发展和人类健康的保障具有重要意义。

RNA干扰技术的原理是通过转录RNA分子来剪切目标基因的mRNA,从而抑制该基因的表达。

RNA干扰技术有两种类型:小干扰RNA和长干扰RNA。

小干扰RNA通常包含21-23个碱基对,而长干扰RNA则通常由20-30个碱基对组成。

在医学上,RNA干扰技术被用于治疗许多疾病,如癌症、心脏病、糖尿病等。

举例来说,有的研究人员通过RNA干扰技术成功地抑制了乳腺癌细胞的生长,从而达到了治疗乳腺癌的目的。

此外,RNA干扰技术还可以用于病毒治疗。

一项研究表明,通过RNA干扰技术,可以控制艾滋病病毒的复制和感染,从而达到治疗艾滋病的目的。

RNA干扰技术还可以通过抑制基因表达,来引发细胞自杀。

这项技术被广泛应用于肝癌等恶性疾病的治疗中,其效果显著。

研究人员发现,借助RNA干扰技术,可以使癌症患者的生存期明显延长。

在药物开发方面,RNA干扰技术也被运用到了一些新的药物中。

例如,一种基于RNA干扰技术的新型药物已被研制出来,该药物可以有效地治疗一些眼疾,比如黄斑变性等。

总的来说,RNA干扰技术在生物医药领域中有着广泛的应用,是一项具有良好治疗效果和发展前景的技术。

但是相比于传统药物治疗,RNA干扰技术还存在一些问题,比如运输和稳定性等方面的问题,这些问题需要在未来的研究中得到解决。

虽然RNA干扰技术在现在的医疗领域中已经取得了很大的进展和成就,但是其研究也需要不断地推进和完善。

未来的研究应该继续探索该技术的不同应用场景和更加完善的技术工具,为医学界的发展和人类健康的保障做出更大的贡献。

RNA干扰技术

RNA干扰技术

RNA干扰技术RNA干扰(RNA interference, RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链RNA (double-stranded RNA,dsRNA)诱发的、同源mRNA高效特异性降解的现象。

它是生物进化过程中遗留下来的一种在转录后通过RNA调控基因表达的机制。

最早的RNA干扰研究是从植物和线虫开始,2001年Tuchl等首次应用长度约为19~23个碱基对的双链小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)在哺乳动物细胞中诱发基因沉默现象,证实这些细胞也普遍存在RNA干扰的机制,从而在世界范围内掀起了研究和应用RNA干扰技术的热潮。

RNA干扰之所以能引起生物医学界几乎所有研究领域的广泛性趣,是因为siRNA具有强大的抑制基因表达的效应和高度的序列特异性。

与抑制基因表达的传统工具,如反义寡核苷酸和核酶等比较,siRNA沉默基因的效率高达数十到数千倍,是逆基因工具的革命性改进。

此外与目标基因信使RNA相差一个碱基序列的siRNA的基因沉默效应大大受到削弱,从而保证了抑制目标基因的高度特异性。

因此,siRNA的发现具有划时代的意义,它不仅深入揭示了细胞内基因沉默的机制,而且它还是基因功能分析的有力工具,极大地促进了人类揭示生命奥秘密的进程。

siRNA本身还是一种极具前景的基因靶向药物,可广泛地用于诸如癌症等疾病的治疗。

鉴于siRNA技术的巨大意义与广阔应用前景,siRNA技术连续多年被美国《Science》杂志评选的“全球年度十大科学突破”。

由于使用RNAi技术可以特异性剔除或关闭特定基因的表达,所以该技术已被广泛用于探索基因功能和传染性疾病及恶性肿瘤的基因治疗等领域。

第一节RNA干扰的研究历程虽然RNA干扰是一种古老的机制,但是第一篇报道这种现象的论文是在1990年发表的。

1990年,Napoli和V an der Krol等在研究矮牵牛花查尔酮基因时发现了基因共抑制现象(cosuppression)。

rna干扰技术技术原理及应用

rna干扰技术技术原理及应用

rna干扰技术技术原理及应用
RNA干扰技术是一种基因沉默技术,可以通过特异性抑制特定基因的表达。

其技术原理是利用小分子RNA(small interfering RNA,siRNA)或表达载体介导的小分子RNA (short hairpin RNA,shRNA)与目标基因的mRNA亚对应序列结合,引发RNA降解或抑制翻译,从而达到靶向抑制目标基因表达的目的。

RNA干扰技术的应用非常广泛。

在基础研究中,可以通过RNA干扰技术研究特定基因的功能,了解其在生物体内的作用机制。

RNA干扰还可以用于筛选和鉴定基因功能,辅助确定疾病发病机制。

在生物制药领域,RNA干扰技术可以用来研发新型治疗方法,如靶向基因治疗、治疗性RNA疫苗等。

此外,RNA干扰技术还有潜力用于农业生物技术领域,通过靶向抑制病毒或害虫相关基因,实现农作物抗病、抗虫等性状的改良。

需要注意的是,虽然RNA干扰技术具有广泛的应用前景,但在实际应用中仍然存在一些挑战。

其中主要问题之一是传递效率和持续性问题,特别是当应用于体内治疗时。

此外,设计有效的siRNA或shRNA序列也是一个关键问题,以确保对目标基因的特异性抑制,同时避免对其他基因的副作用。

因此,未来需要进一步研究和改进RNA干扰技术,以克服这些挑战,实现更广泛且可靠的应用。

RNA干扰技术的应用

RNA干扰技术的应用

RNA干扰技术的应用随着生物学研究的不断深入,人们对基因调控机制的理解也日益加深。

RNA干扰技术(RNA interference,简称RNAi)作为一种革命性的生物技术,已经被广泛应用于基因功能的研究和治疗等领域。

本文将介绍RNA干扰技术的原理、应用以及未来的发展前景。

一、RNA干扰技术的原理RNA干扰技术是一种由双链RNA介导的基因沉默机制。

它起源于真核生物的天然防御机制,通过特定的酶体复合物将双链RNA分解成小片段,并进一步与靶向同源mRNA结合,导致mRNA的降解或翻译抑制。

RNA干扰技术主要依靠两种类型的RNA分子实现:小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)和microRNA(miRNA)。

siRNA由21-23个核苷酸组成,与特定的靶向mRNA序列互补结合,从而引发RNA酶酶体复合物的活化,使得目标mRNA降解。

miRNA则是一类由60-100个核苷酸组成的非编码RNA分子,能与多个mRNA序列互补结合,并抑制目标基因的翻译或促使目标mRNA的降解。

二、1. 基因功能研究RNA干扰技术已成为研究基因功能的重要工具。

通过设计合成特异性的siRNA或使用miRNA模拟物,可以有效地沉默特定的基因,进而研究该基因在生物体内的作用机制。

这种基因沉默技术广泛应用于植物、动物和微生物等各种生物模型中。

2. 肿瘤治疗RNA干扰技术在肿瘤治疗中具有巨大的潜力。

通过选择性地沉默特定的癌基因,可以抑制肿瘤细胞的生长和浸润能力。

此外,将靶向特定肿瘤的siRNA或miRNA载体引入肿瘤细胞中,可以促使癌细胞自我灭亡,实现肿瘤的治疗。

3. 病毒性疾病治疗RNA干扰技术也被用于治疗病毒性疾病,如艾滋病、乙肝和流感等。

将特异性的siRNA导入感染病毒的细胞中,可抑制病毒基因的表达和复制,从而阻断病毒在机体内的传播和扩散。

4. 农业和生物工程RNA干扰技术不仅在医学领域有着广泛应用,还在农业和生物工程领域发挥着重要作用。

RNA干扰技术及其在基因编辑中的应用

RNA干扰技术及其在基因编辑中的应用

RNA干扰技术及其在基因编辑中的应用一、绪论二、RNA干扰技术的原理与分类RNA干扰技术原理RNA干扰技术分类三、RNA干扰技术的应用RNA干扰技术在基因编辑中的应用RNA干扰技术在基因治疗中的应用四、RNA干扰技术的优缺点RNA干扰技术的优点RNA干扰技术的缺点五、结论一、绪论随着生物学和医学研究的不断深入,研究者们开始关注基因的作用和调控机制,这为人们治疗和预防各种疾病提供了新思路。

其中,基因编辑技术,可以帮助人们理解基因和DNA的作用,使得基因编辑成为一个热门话题。

而RNA干扰技术,作为一种常见的技术手段,也被广泛应用于基因编辑领域。

二、RNA干扰技术的原理与分类1、RNA干扰技术原理RNA干扰技术原理是利用RNA分子在某些情况下对特定基因的表达进行调节的方法。

RNA干扰技术利用特定的RNA分子来靶向特定的基因,从而阻止该基因产生所对应的蛋白质,从而达到调控基因表达的目的。

RNAs通过特定的机制进行结合和调控,该机制利用RNA-引物互补的特性来选择性地清除蛋白质编码mRNA,或者抑制其翻译的功能。

2、RNA干扰技术分类RNA干扰技术的分类主要有两大类:siRNA技术:siRNA是RNA干扰技术中最常用的一种技术,它是小的RNA片段(21-23 nt)入侵到复制基因,从而降低该基因的表达水平。

siRNA技术使用人工合成的RNA来反复实验和调试,并针对特定基因插入DNA构建siRNA表达向量。

shRNA技术:shRNA是RNA干扰技术中最常用的另一种技术,它是小的RNA片段(21-22 nt),通过抑制mRNA的转录来抑制基因表达。

三、RNA干扰技术的应用1、RNA干扰技术在基因编辑中的应用基因编辑是指通过识别和修改DNA序列来定向改变有特定功能基因的功能。

基因编辑可通过利用RNA干扰技术更精准的实现。

因为,RNA干扰技术可以更加准确地靶向基因,明确目标,并且可以在大规模的基因组中同时进行编辑。

rna干扰技术方法

rna干扰技术方法

rna干扰技术方法RNA干扰技术方法RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种通过靶向降低特定基因表达的技术。

它可以通过引入外源双链RNA(dsRNA)或小干扰RNA(siRNA)来靶向特定基因的mRNA,从而抑制该基因的表达。

RNA干扰技术已经被广泛应用于基因功能研究、药物研发、疾病治疗等领域。

RNA干扰技术的方法主要包括合成siRNA、合成shRNA、合成miRNA以及转染siRNA等。

下面将详细介绍这些方法。

1. 合成siRNAsiRNA是由两股RNA链组成的双链RNA分子,每股链长为21-23个核苷酸。

合成siRNA的方法主要有化学合成和转录合成两种。

化学合成是通过合成核苷酸单元,然后通过化学方法将这些单元逐个连接在一起,最终合成完整的siRNA分子。

这种方法可以合成大量的siRNA,适用于大规模研究和应用。

转录合成是利用体外转录系统,通过DNA模板的转录来合成siRNA。

这种方法可以合成定制的siRNA,并且可以在合成过程中加入化学修饰物,增强siRNA的稳定性和特异性。

2. 合成shRNAshRNA是一种基于RNA干扰的工具,与siRNA类似,可以通过靶向特定基因的mRNA来抑制其表达。

合成shRNA的方法主要是将shRNA序列插入质粒中,然后通过质粒转染到细胞中。

在细胞内,shRNA会被Dicer酶切割成小片段,形成siRNA,从而实现基因的沉默。

3. 合成miRNAmiRNA是一类内源性的短RNA分子,与siRNA类似,可以通过靶向特定基因的mRNA来抑制其表达。

合成miRNA的方法主要是合成miRNA前体序列,然后通过转染到细胞中,经过一系列的加工和修饰,最终形成成熟的miRNA。

4. 转染siRNA转染siRNA是将合成好的siRNA引入到细胞中,通过细胞内的RNA干扰机制来抑制目标基因的表达。

转染siRNA的方法主要有化学转染、电穿孔转染和病毒载体转染等。

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研究认为在3′ 端带有2个碱基突出的黏性末端, 5′ 为磷酸基
团的siRNA诱导的RNAi效应最强。
2)效应阶段
•RNA诱导 沉默复合物形成
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RNA干扰(RNA interference , RNAi ) 是通过小干 扰 RNA(small interference RNA , siRNA)造成目的 mRNA特异性降解, 从而使基因转录后 沉默的一种现象.

2.效应阶段 3.级联放大阶段
1)起始阶段
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RNA病毒入侵

转座子转录
外源基因导入
基因组中反向重复序列
(inverted repeats)转录
RNA干扰技术的作用机制
PART 02
RNA干扰技术(RNAi)
RNAi的作用机制 1.起始阶段
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•秀 •丽 •隐 •杆 •线 •虫
RNA干扰的发现
1998年,华盛顿卡耐基研究院的Fire等首次在秀丽新小杆线虫中证明上述现象属于
转录后水平的基因沉默。他们发现Su Guo博士遇到的正义与反义RNA均可阻断基因
表达的现象,都是由于体外转录所得的RNA中污染了微量双链RNA而引起。
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RNA
干扰技术
前言
真核细胞中存在着许多非编码RNA(non-coding RNA , ncRNA).这是一类不编码蛋白质但具有重要生物学 功能的RNA分子。
长链非编码RNA:复杂的生物学功能 非编码RNA 核内小RNA(snRNA) 核仁小RNA(snoRNA) 胞质小RNA(scRNA) 催化性小RNA(核酶) 小干扰RNA(siRNA) 微RNA(miRNAs)

3)级联放大阶段
此阶段以siRNA中的一条链为引物, 以靶mRNA为模板,在RNA依赖性RNA聚 合酶(RNA-dependent RNA polymerase, RDRP)的作用下,扩增产生足 够数量的新的二级dsRNA作为底物提供给 Dicer酶,产生更多的siRNA,从而使效应阶 段反复发生,一个完整的mRNA被降解成多 个21~23nt的小片段,从而导致相应的基因 表达沉默。


dsRNA

RNA诱导沉 默复合体 RISC
效应
反义链互补结合 核酸酶切断mRNA

RDRP扩增dsRNA 效应阶段反复
siRNA
RNA干扰技术的特点
PART 03
RNAi特点
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RNAi特点
01

02
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03
可传播性
浓度时间依赖性
高稳定性
04
可遗传性
05
靶基因位点的高选择性
RNA干扰技术的应用

高特异性
RNAi是转录后水平的基因沉 默机制,有高度的序列特异性,19nt 的dsRNA几乎可以完全抑制基因的 表达,而其中的1nt突变后,它对基因 的抑制作用就消失了,这种高度的序 列特异性能够使dsRNA非常特异地 诱导与之序列同源的mRNA降解,避 免降解与目的mRNA同家族的其他 mRNA从而实现对目的基因的精确 沉默。
RNAi特点
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高效性
RNA存在级联放大效应,效应阶段可以 循环发生,使相对很少量的dsRNA分子(数量 远远少于内源mRNA的数量)就能产生强烈 的RNAi效应(每个细胞仅需几分子siRNA就 可产生RNAi效应),并可达到缺失突变体表 型的程度。相比普通的siRNA,具有短发卡 结构的双链RNA产生的RNAi效应更强。
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正义RNA
携带了遗传信息, 可以直接翻译成 蛋白质的RNA。 Eg: mRNA
反义RNA
与正义RNA互补配 对的RNA分子,不 能直接用来翻译 成蛋白质的RNA。
•文献查阅网址
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file:///C:/Users/xindi/Desktop/RNA干扰技术/RNA干扰技术 的原理与应用_孙平.pdf https:///view/63ed4d55cc17552707220867 .html?from=search file:///C:/Users/xindi/Desktop/RNA干扰技术/RNA干扰技术 在几项研究领域的应用_燕飞.pdf https:///view/7daf6bfca1c7aa00b42acb06. html
感谢聆听

纯化单链RNA:基因抑制效应十分微弱
体外转录所得RNA
纯化双链RNA:高效特异性阻断相应基因的表达
RNA干扰 (RNAi)
dsRNA及其产生方法 双链RNA(Double-stranded RNA, dsRNA),双链核糖核酸。
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生成的siRNA和RNAi特异性酶,如AGO-2、RED-1、DNA-RNA螺旋酶等 结合形成RNA诱导沉默复合体RISC。(RNA-inducing silence complex, RISC)
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2)效应阶段
•效应阶段
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PART 04
RNAi的应用
•在基因功能研究中的应用
针对某已知基因,设计可诱导其

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沉默的dsRNA,通过合适的手段导入 细胞或机体,使该基因表达水平下降 或完全沉默,从而了解该基因的功能。
RNAi的应用
在植物抗病毒研究中的应用
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利用RNA干扰赋予植物病毒抗性, 人为将与病毒同源的dsRNA导入植物体, 基于植物体的RNA干扰机制对病毒基因 组进行特异性切割降解, 阻止病毒的复 制扩散,从而保护植物体不受病毒危害。
短链非编码RNA
一、相关试验
目录
CONTENTS
二、RNA干扰技术的作用机制
三、RNA干扰技术的特点
四、RNA干扰技术的应用
相关试验
PART 01
RNA干扰的发现
1995年,康奈尔大学的Su Guo博士在试图阻断
秀丽新小杆线虫的par-1基因时,发现了反义RNA和正
义RNA都能切断par-1基因的表达途径。这与传统上对 反义RNA技术的解释正好相反。
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RNAi作用机制总结
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RNAi的应用
在疾病治疗研究中的应用
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利用RNA干扰技术可以特异地沉默 与疾病有关的内源或外源基因,或者沉默 致病过程中与一些中间代谢产物的合成、 分解有关的蛋白基因,而不会对个体的生 长发育产生影响, 这一特性为 RNA 干扰 在疾病治疗上的应用开创了广阔的前景。

siRNA引导RISC识别靶mRNA,其中的反义链与靶mRNA互补结合,正义链则 被置换出来。继而,RISC复合物中的核酸酶在靶mRNA与siRNA结合所形成 的双链区的5’起始端下游7~ 10nt处切断mRNA。
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