洁净室沉降菌的测试方法
沉降菌检测操作规程
●1、目的
规范洁净区和洁净室沉降菌测试条件和测试方法。
●2、适用范围
适用于公司洁净区、洁净室或局部空气净化区域（如：洁净工作台）的沉降菌的测试和环境验证。
●3、引用文件
⏹化妆品卫生规范-2007
⏹GB/T 16294-2010 医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法
●4、定义
⏹ 4.1 沉降菌：用本测试规定的方法收集空气中的活微生物粒子，通过专门的培养基，在适宜的生长条件
下繁殖的可见菌落数。
⏹ 4.2 沉降菌菌落数：规定时间内每个平板培养皿收集到空气中沉降菌的数目，以（个/皿）表示
●5、仪器和设备
⏹ 5.1 灭菌培养皿90mm *15mm
⏹ 5.2 培养基。
⏹ 5.3 恒温培养箱。
⏹ 5.4 高压灭菌器。
⏹ 5.5 放大镜
●6、培养基和试剂
⏹ 6.1 生理盐水：
成份﹕氯化钠 8.5g
蒸馏水加至 1000ml
制法﹕溶解后﹐分装到加玻璃珠的三角瓶内﹐每瓶90ml﹐121℃（15 1b）2 0 mi n，高压灭菌。
⏹ 6.2 卵磷脂、吐温80—营养琼脂培养基
6.2.1 成分：蛋白胨20g
牛肉膏3g
氯化钠5g
琼脂15g
卵磷脂1g
吐温80 7g
蒸馏水1000mL
6.2.2制法：先将卵磷脂加到少量蒸馏水中，加热溶解，加入吐温80，将其他成分（除琼脂外）加到
其余的蒸馏水中，溶解。加入已溶解的卵磷脂、• 吐温80，混匀，调pH 值为7.1～7.4，加
入琼脂，103.43kPa（121℃15 lb）20min 高压灭菌，储存于冷暗处备用。
●7、操作步骤
⏹7.1 取样：
7.1.1 取样点的设置：
A) 最少取样点数：灌装间、制造间3个，其他洁净区2 个；
洁净室沉降菌的测试方法
洁净室沉降菌的测试方
法
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1.目的：
本文规定了洁净室沉降菌的测试方法，以达到对其空气洁净度的评定。
2. 适用范围：
适用于洁净区中沉降菌的监测和对洁净区等级的验证。
3. 检测仪器：高压消毒锅、恒温培养箱。
4. 检测依据：
GB/T 16294—2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法
5. 测试前准备：
洁净室的温度应控制在18℃～26℃，相对湿度应控制在45％～65％之间。风速或压差的测试应符合要求。
静态测试时，室内测试人员不得多于2人。
对单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。对非单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。采样点数目见下表
采样点的位置一般在离地面0.8m高度的水平面上均匀布置。
采样点的布置，见下图
洁净室(区)采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。下列采样点的图示可作参考。
洁净棚(层流罩)，洁净工作台等局部空气净化设施的采样点布置：
1. 水平单向流
2．垂直单向流
最少培养皿数：见表
洁净度级别所需90mm培养皿（以沉降计）
10014
100002
1000002
3000002
6. 测试要求：
将已制备好的培养皿按要求的位置放置足够的数量，打开培养皿盖，使培养皿表面暴露，再将培养皿盖盖上后倒置。
在30℃～35℃的培养箱中培养不少于48h。
每批培养基应选三只作对照培养，以鉴别培养基本身是否有污染。
沉降菌检测操作规程
沉降菌检测操作规程
沉降菌检测操作规程
一、实验材料和仪器设备准备
1. 培养基：选择适合于沉降菌生长的培养基，如营养琼脂、脑心提取物琼脂等。
2. 试管：清洁且干燥的试管，用于制备培养基和盖儿。
3. 平板培养皿：密封性好、无明显污损的平板培养皿。
4. 无菌纱布：用于对培养皿进行覆膜。
5. 显微镜：高倍显微镜，用于观察沉降菌。
6. 其他常规的无菌操作用具和试剂。
二、实验操作步骤
1. 准备培养基：根据所选的培养基配方，按照要求将培养基配制成液体状态，并进行无菌过滤。将液体培养基倒入试管中，每个试管约倒满的1/3，悬挂液体培养基放置在试管架上，待培养基凝固后，封闭试管盖儿。
2. 取样：将待检测的样品进行无菌采样，如空气、水、土壤、食品等，确保取样时避免污染和杂菌的进入。
3. 塑料膜覆盖：将待检测的培养基倒入平板培养皿中，约倒满1/2，然后用无菌纱布覆盖培养皿口，并用橡皮筋固定好。确保培养基表面整齐平坦，无明显凸起或凹陷。
4. 样品接种：将取样时采集的样品（空气、水、土壤等）用滴管或铁丝等工具，均匀地接种到培养基的表面上，每个培养皿大约接种2～3滴，然后迅速盖上试管上的盖子。
5. 培养条件：将培养皿置于恒温箱中，一般温度设定为30-35°C，培养时间为24小时至72小时不等，具体视沉降菌生长速度而定。
三、结果判读
1. 观察培养皿：取出培养皿，观察上面是否出现菌落。正常情况下，如果检测的样品中存在沉降菌，培养皿上会出现可见的菌落。
2. 菌落形态观察：使用高倍显微镜观察菌落的形态特征，确定是否为沉降菌。
沉降菌的测试方法国家标准
ISC 13.040.30 C 30
中华人民共和国国家标准
GB/T 16294—2010
代替GB/T 16294—1996
医药工业洁净室（区）
沉降菌的测试方法
Test method for settling microbe in clean
room (zone) of the pharmaceutical industry
前言
本标准参考了ISO 14698-1《洁净间以及相关环境控制第1部分：微生物控制》，ISO/TS 11133-1：2000（英文版）《食品和动物饲料的微生物学培养基制备和生产指南第1部分：实验室培养基制备的质量保证通用指南》。
本标准代替GB/T 16294-1996《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》。
本标准与GB/T 16294-1996的主要区别为：
—增加了确定最少采样点数目的方法；
—修改了原标准 4.8.3.2，改为“4.10.2 采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配制的培养皿经采样后，在30℃~35℃培养箱中培养，时间不少于2d，采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20℃~25℃培养箱中培养，时间不少于5d。”；
—本标准增加了5.8“日常监控”的内容，增加了洁净室（区）空气微生物浓度控制的纠偏限度和警戒限度的设立和如何确定取样频次的内容。
本标准的附录A、附录B是规范性附录。
本标准的附录C是资料性附录。
本标准由国家食品药品监督管理局提出并归口。
本标准起草单位：上海市食品药品包装材料测试所、中国食品药品检定研究院医疗器械检验中心。
本标准主要起草人：陆维怡、徐敏凤、冯晓明、王志敏。
沉降菌测试方法
沉降菌测试方法
1、把ф90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。
2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15m l。
3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。
4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。
5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。
6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。
7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10mi n后开始，对非单向流，100000级以上净化
洁净室(区)沉降菌的测规程
1 目的
确定医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法和标准。
2 范围
适用于不同洁净室（区）（包括洁净工作台）的沉降菌的测定和环境验证。
3 责任
QC微生物室负责洁净室（区）沉降菌的监测。
4 内容
4.1 参考标准
中华人民共和国国家标准GB/T16294-2010《医药工业洁净室（区）沉降菌的测试方法》。
中华人民共和国卫生部发布的《药品生产质量管理规范（2010年修订）》。
4.2 监测程序
4.2.1 设备
高压消毒锅
恒温培养箱
培养皿：一般采用Φ90mm×15mm的硼硅酸玻璃培养皿。
4.2.2 培养基及平皿制备
4.2.2.1 一般采用普通肉汤琼脂培养基或其他药典认可的培养基
4.2.2.2 制备过程如下：
◆将培养皿与用三角瓶装好的培养基在高压消毒锅内121℃湿热灭菌20 分钟或180℃干热灭菌2小时；
◆将培养基加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。
◆待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于30－35℃恒温培养箱中培养48 小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用。
◆制备好的培养基平皿倒置在2－8℃的环境中存放，注意避免污染。
4.2.3 采样点和监测频次
4.2.3.1 采样点的布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于集中，按照洁净区的面积大小，而制定最少采样点数目（附件），在满足最少采样点数的同时，还宜满足最少培养皿数和采样点布置（附件）。
4.2.3.2 工作区采样点的位置离地0.8米－1.5米左右（略高于工作面）。并在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。
4.2.3.3 监测频次：每月一次，特殊情况及时监测。
沉降菌测试方法
醋酸盐缓冲溶液：（PH=3.5）称取分析纯醋酸铵25g，加蒸馏水25ml溶解后，加盐酸液[7mol/L(称取0.0255g至100ml定溶至100ml)]38ml，再用盐酸液[2mol/L(称取0.0073g至100ml定溶)]准确调节PN值3.5（电位计指示）用水稀释至100ml，倒入试剂瓶待用。
硫代乙酰胺溶液：称取硫代乙酰胺4g，加水溶解成100ml，置冰箱中保存。临用前取混合液[由1mol/L氢氧化钠（氢氧化钠4克＋100ml蒸馏水）15ml，水5.0ml及甘油20ml组成]5.0ml加上述硫代乙酰胺溶液1.0ml置水浴上加热20秒钟，冷却，立即使用。
铅标准贮备液：称取110℃干燥恒重的硝酸铅0.1598g，置1000ml容量瓶中加硝酸5ml与水50ml溶解后用水稀释至刻度，摇匀，作标准贮备液，铅的浓度为100ug/ml。
2、硫乙醇酸盐流体培养基（细菌），根据试验实际用量取若干培养基和蒸馏水，煮沸，摇匀，分装至适宜的容器中，瓶塞封口，灭菌。硫乙醇酸盐流体培养基置33℃培养48小时，应无菌生长。
改良马丁培养基（真菌），根据试验实际用量取若干培养基和蒸馏水，煮沸，摇匀，分装，灭菌。改良马丁培养基置24℃培养72小时，应无菌生长。
人员进出洁净生产区的一般程序：
进
出
人员进出无菌操作洁净生产区程序：
进
出
无菌医疗器具洁净室环境要求及监测：
沉降菌检测
测试方法
3、采样点数目及其布置: （2）采样点的布置: 取样点一般在离地面0.8-1.0m之间或操作平台的高度。 取样设备会对气流产生干扰,取样时应避免可能对气流
组织的干扰。 尽量避免在回风口附近取样(距离lm以上),且测试人员
应在取样口的下风侧,并尽量少走动。
测试方法
4、测试步骤: （1）采样方法: 用无菌容器(如不锈钢储槽)将预先培养的培养皿(无菌
测试方法
5、注意事项: 测试状态有静态和动态两种,在空调系统验流时、长期
停产恢复生产前、设施设备大修复产前进行静态测试, 在日常监测时进行动态监测。 测试人员:测试人员必须穿戴符合环境级别的工作服。 静态测试时,室内测试人员不得多于2个人。
测试方法
6、结果计算: 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。 平均菌落数的汁算见下式:
测试方法
3、采样点数目及其布置: 在满足最少测点数的同时,不宜满足最少培养皿数,见表2
测试方法
3、采样点数目及其布置: （2）采样点的布置: 除受洁净区的设备限制外,取样点应在洁净区均匀布置。 在日常监控时,那些与产品相邻近的区域,以及可能与产
品直接接触的空气及设备附近应考虑增加取样点和取 样次数(与产品非接触区相比,这些区域应视为关键区): 人员活动频繁或人员较集中的区域也应视为关键区,需 加强监控。
每批选定三个培养皿做对照培养。
沉降菌测试方法
沉降菌测试方法
1、把ф90m m×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。
2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。
3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。
4、采样时，一般在100级层流罩中放置3个培养皿，在100000级，10000级按面积大小一般放2个培养皿。打开培养皿盖，使培养基表面暴露0.5小时，再将培养皿盖上后倒置于恒温培养箱33℃培养，时间不小于48小时，采样点位置离地0.8m—1.5m左右。
5、将培养皿举起用肉眼直接计数，用记号笔点记然后用5—10倍放大镜检查是否遗漏，若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，分辨时仍以2个或2个以上菌落计数，不要漏计培养皿边缘生长菌落，并注意细菌菌落与培养基沉淀物区别。
6、沉降菌测试前，被测洁净室已消毒。被测洁净室温湿度须达到规定要求，静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内，测试状态有静态和动态两种，测试状态选择须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。
7、测试人员必须穿戴符合环境洁净度级别工作服，静态测试时，室内测试人员不得多于2人。测试时间对单向流100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始，对非单向流，100000级以上净
化房间，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min 后开始。
沉降菌测试方法
沉降菌测试方法
1、把ф90mm×15mm硼硅酸玻璃培养皿包在报纸里，放入恒温烤箱中加热至180℃后，干烤2小时。
2、取X克培养基放入X克蒸馏水，放入高压消毒锅中加热溶化，冷至45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。
3、待琼脂凝固后，将培养基平皿倒置于33℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可采样用。制备好培养皿宜在2—8℃环境中保存。
用移液管从第3管中取0.5ml混合液和0.5ml供试液在旋涡混匀器上混匀30秒钟。（供试品阳性对照溶液）
3、把8支鲎试剂外表擦净全部打开放进试管架中，每支各加入0.1ml细菌内毒素检查水，在旋涡器上混匀，其中2支作供试品管，2支作阴性对照管，2支作阳性对照管，2支作供试品阳性对照管。
每支供试品管加入0.1ml供试液；阴性对照管加入0.1ml检查用水；阴性对照管加入0.1ml阳性对照溶液；供试品阳性对照管加入0.1ml供试品阳性对照溶液。封闭管口，轻轻摇匀，垂直放入37±1℃恒温器中孵育60±2分钟，然后取出观察结果，试管在孵育期间应避免任何振动。
沉降菌测试方法范文
沉降菌测试方法范文
沉降菌测试方法，也称为沉降法菌落计数法或霉菌菌落计数法，是一种用于测定液体或固体样品中微生物总数的方法。它是通过将待测样品稀释后，将其均匀涂布在富营养培养基上，然后在适宜的条件下培养并计数菌落数量来进行的。以下是沉降菌测试方法的详细步骤：
材料准备：
1.培养基：选择适合菌落生长和明显可见的适宜富营养培养基，如琼脂培养基。
2.空气采样器：使用空气采样器采集空气中的微生物样本。
3.灭菌工具：包括火焰灭菌器、灭菌锅等。
4.精密量筒：用于稀释待测样品。
步骤：
1.预处理样品：
a.若待测样品为液体，则需要首先将其充分混匀。
b.若待测样品为固体，则需要将其用适宜的方法制备成液体悬浮液，以保证样品中微生物的均匀分布。
2.稀释样品：
a.确定合适的稀释倍数，选择合适的容器，并在其中加入适量的培养基。
b.使用精密量筒将待测样品稀释至合适的浓度。通常情况下，稀释倍数应为10的指数倍数，如10^-1、10^-2等。
3.涂布样品：
a.取一支已灭菌的玻璃棒或镊子，沾取一定量的稀释后的样品。
b.将沾有样品的玻璃棒或镊子均匀涂布在琼脂培养基的表面，确保涂布均匀、无气泡和交叉污染。
4.培养样品：
a.将琼脂培养基培养皿倒置，放入已灭菌的培养皿，并将其封闭。
b.将培养皿置于适当的温度和湿度条件下，一般为28-37摄氏度。
c.培养时间一般为24-48小时，根据不同微生物种类和培养基的要求可进行相应调整。
5.菌落计数：
a.取出培养好的琼脂培养基培养皿，记录上面出现的菌落数量。
b.对于数目较多的菌落，可以进行随机选择部分区域进行计数，然后乘以相应倍数估算总菌落数量。
洁净室沉降菌测试方法
洁净室沉降菌测试方法
洁净室沉降菌测试是对洁净室环境中空气中悬浮微粒的数量和种类进行评估的方法之一。沉降菌测试是通过将培养基暴露在空气中，使空气中的微生物落到培养基上生长，然后计数和鉴定这些微生物来评估洁净室的微生物污染。
以下是一般的洁净室沉降菌测试方法：
1. 准备培养基：选择适用于微生物生长的培养基，如营养琼脂培养基。按照培养基说明制备培养基。
2. 制备沉降皿：将培养基倒入锅中，加热至液态，然后倒入含有适量培养基的沉降皿中。
3. 安置沉降皿：在洁净室中的代表性位置放置沉降皿，如工作台面、天花板等。
4. 收集样品：根据需要和测试目的，选择适当时间段收集样品。可以采用定期采样或连续采样的方式。
5. 培养：将采集的样品放置在培养箱中，以合适的温度和湿度条件孵育。通常情况下，温度为30-37摄氏度，孵育时间为24-48小时。
6. 计数和鉴定：在孵育结束后，观察培养皿中的菌落形成情况，并进行计数。可以根据菌落的形态和特征，使用显微镜和生化试剂等进行鉴定。
7. 报告结果：根据实验结果，记录沉降菌的数量和种类，并参考相关标准，如ISO 14698等，评估洁净室的微生物污染级别。
需要注意的是，洁净室沉降菌测试方法可能因测试目的、要求和标准的不同而有所差异。在进行实际测试之前，最好参考相关的测试标准和指南，并根据具体情况进行适当的调整和验证。
沉降菌检测方法
沉降菌检测方法：
沉降菌检测包括动态检测和静态检测，动态即有人操作及走动，静态即无人操作走动。
做沉降菌检测时，洁净室风机打开，超净台风机打开状态。
大超净台间隔放14个琼脂平皿，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
小超净台间隔放8个琼脂平皿，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
洁净室、培养箱室高效过滤进风口下方各放一个琼脂平皿，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
培养箱最上层、最下层各放一个琼脂平皿，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
血常规室手术台对角各放一个，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
走廊高效过滤风口下各放一个，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
风淋室对角各放一个，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
二更台子上、衣柜前、门口各放一个，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；一更柜子上放三个琼脂平皿，平皿摆好后，依次轻轻打开盖子，盖子斜立于旁边；
留两个平皿做阳性（手指摁）对照，两个阴性平皿（不做处理）；
沉降30min后收平皿，标记不同位置的所有平皿后，37℃培养，3天后观察。
沉降菌一个月检测两次，实验室打扫完卫生后1-2天进行检测，每次用琼脂平皿约50-60个。超净台检测无菌落生长为合格；培养箱检测菌落1个为合格；洁净室菌落小于等于1个为合格；风淋室小于三个菌落合格；二更小于三个合格；一更小于5个合格；阴性0个为合格。
沉降菌的测试方法
沉降菌：用标准提及的方法收集到的活微生物粒子，通过专用的培养基，在适宜的生长条件下繁殖到可见的菌落数。
测试方法：本测试方法采用沉降法，即通过自然沉降原理收集在空气中的生物粒子于培养基平皿（一般多采用90mm直径硼硅酸玻璃培养皿，俗称沉降碟），经若干时间，在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落进行计数，以平板培养皿中的菌落数来判定洁净环境内的活微生物数，并以此来评定洁净室（区）的洁净度。
人员职责：洁净室的测试人员应选择与生产操作的空气洁净度级别要求相适应的穿戴方式，外面的衣服不能带进100000以上的区域。
测试步骤：1、测试前培养皿表面必须严格消毒。
2、将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿，使培养基表面暴露在空气中。
3、静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿暴露时间不大于4h。
4、全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
5、采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配置的培养皿经采样后，在30℃~35℃培养箱中培养，时间不少于2d。
6、每批培养基应有对照试验，试验培养基本身是否污染。可每批选定三只培养皿作对照培养。
注意事项：1、测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。
2、采取一切措施防止人为对样本的污染。
3、对培养基、培养条件及其他参数作详细的记录。
4、由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并注意细菌菌落和培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。
5、采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的应剔除。
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1.目的：
本文规定了洁净室沉降菌的测试方法，以达到对其空气洁净度的评定。2. 适用范围：
适用于洁净区中沉降菌的监测和对洁净区等级的验证。
3. 检测仪器：高压消毒锅、恒温培养箱。
4. 检测依据：
GB/T 16294—2010医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法
5. 测试前准备：
5.1洁净室的温度应控制在18℃～26℃，相对湿度应控制在45％～65％之间。
5.2风速或压差的测试应符合要求。
5.3静态测试时，室内测试人员不得多于2人。
5.4 对单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。
5.5对非单向流测试应在洁净空气调节系统正常运行时间不少于30min后开始。
5.6 采样点数目见下表
5.7 采样点的位置一般在离地面0.8m高度的水平面上均匀布置。
5.8 采样点的布置，见下图
洁净室(区)采样点布置力求均匀，避免采样点在某局部区域过于稀疏。下列采样点的图示可作参考。
洁净棚(层流罩)，洁净工作台等局部空气净化设施的采样点布置：
1. 水平单向流
2．垂直单向流
5.9 最少培养皿数：见表
6. 测试要求：
6.1 将已制备好的培养皿按要求的位置放置足够的数量，打开培养皿盖，使培养皿表面暴露0.5h，再将培养皿盖盖上后倒置。
6.2 在30℃～35℃的培养箱中培养不少于48h。
6.3每批培养基应选三只作对照培养，以鉴别培养基本身是否有污染。
6.4菌落计数，严防遗漏。
7. 结果计算和判断：
M1+M2+……Mn
平均菌落数＝——————————
n
Mn—n号培养皿菌落数
n—培养皿的总数
8. 结果评定：
8.1每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定的评定标准中的界限。
8.2 在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。