实验八血型鉴定及交叉配血试验ppt课件
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血型交叉配血PPT课件
① 发现ABO血型鉴定的错误：如将O型受血者误定为A型，当与A型献 血者交叉配血时，病人血清与献血者红细胞即可出现凝集，从而避 免严重的溶血性输血反应。 ② 发现不规则凝集素：如含抗A1不规则凝集素的A2型血清，与A1型 献血者红细胞配血时，可出现凝集，这种不规则凝集素一般为冷凝 集素，如效价不高，影响不大。但若为免疫性抗体，37℃条件下效 价较高，就必须选用亚型相同的血液，否则可产生溶血性输血应。 ③ 发现ABO血型以外的其他抗体：如抗P1，抗H等天然抗体和抗D等 免疫性抗体，虽然输入的血液ABO血型相同，但ABO血型以外的其他 抗体存在时，同样可能引起严重的溶血性输血反应。特别是现在许 多化验室因为条件的限制不可能对ABO及RH（D）以外的血型全部进 行鉴定，全靠交叉配血发现血型的不同和ABO、RH（D）血型以外的 其他抗体的存在。
血型与交叉配血
主要内容：
红细胞血型概述 抗体检查和鉴定 交叉配血方法 日常工作中问题对策
血型的发现
红细胞 遇到 血清
凝集 不凝集
1900年，奥地 利科学家兰德 斯坦纳
红细胞抗原
血型系统（Blood group systems）29 245 血型集合（ Blood group collections）6 12 血型系列（series）：
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应 活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检 查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗 －IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
免疫血液学的传统方法
血型与交叉配血
主要内容：
红细胞血型概述 抗体检查和鉴定 交叉配血方法 日常工作中问题对策
血型的发现
红细胞 遇到 血清
凝集 不凝集
1900年，奥地 利科学家兰德 斯坦纳
红细胞抗原
血型系统（Blood group systems）29 245 血型集合（ Blood group collections）6 12 血型系列（series）：
抗体筛选技术要求
尽可能多的检测出有临床意义的抗体。 尽可能少的检测出无临床意义的抗体。 尽可能快的完成抗体检测
方法选择：每种方法都有自己的 特点，适应于不同范围及情况
盐水法：可以用于检测干扰ABO定型的盐水反应 活性抗体，如：MN、P血型抗体。但此方法会检 查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗－I及抗 －IH等，而且会漏检IgG性质的抗体。
免疫血液学的传统方法
血型鉴定及交叉配血 ppt课件
1min
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
二、ABO血型鉴定：
正定型 判定结果：
试管法：轻轻摇动（或捻动）试管，使沉于管底的RBC浮起， 观察有无凝集或溶血，
如上层清亮，管底有RBC凝块，轻弹管底，凝块无散开，为 凝集（＋）；
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
混匀，离心 1000r/min 观察结果（方法同正定型） 1min
二、ABO血型鉴定：
抗A
抗B
结果
结果判定：
＋
—
A
—
＋
B
正定型
＋
＋
AB
—
—
O
反定型
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
A(RBC) B(RBC) 结果
＋
—
B
—
＋
A
＋
＋
O
—
—
AB
二、ABO血型鉴定
凝集强度的判断见实验指导表格
室温条件下盐水介质中产生特异性反应，根据是否 出现凝集判断是否有D抗原的存在。
Rh（D）血型鉴定
加抗D血清1滴
加红细胞悬 液1滴（5%
）
轻轻摇动玻片混匀， 2min内判断结果， 有凝集（＋），无凝 集需按照说明书进一 步实验确认是否为阴 性
血型鉴定与交叉配血 ppt课件
抗球蛋白介质配血 经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法
聚凝胺介质配血
凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
只能检测IgM抗体，不能检测IgG抗体
凝聚胺(Polybrene)配血法
原理：凝聚胺分子是带高价阳离子多聚
季铵盐，溶解后带有很多正电荷可以中 和红细胞表面负电荷，有利于红细胞凝 聚，低离子强度溶液也能降低红细胞的 Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的 吸引力。
酶介质法
红细胞表面的唾液酸带负电荷，使用木 瓜酶或唾液酶破坏红细胞表面的唾液酸， 降低红细胞表面的负电荷，减少红细胞 表面的排斥力，促进Rh抗原与相应的抗 体结合而产生凝集。
低离子强度溶液实验
红细胞外围的阴离子是红细胞稳定因素 之一，降低反应介质的离子强度，可减 少外围阴离子，促进带正电荷的IgG性 Rh抗体与红细胞发生凝集反应，从而增 加凝集强度。
反定型是用已知A细胞和B细胞来测 定血清中有无相应的抗A或抗B。
ABO血型鉴定实验原理
抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红 细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗 体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗 体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→ 从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B 抗原→判断血型。
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
聚凝胺介质配血
凝胶方法配血
盐水介质配血方法
患
者
阳
主
性
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
只能检测IgM抗体，不能检测IgG抗体
凝聚胺(Polybrene)配血法
原理：凝聚胺分子是带高价阳离子多聚
季铵盐，溶解后带有很多正电荷可以中 和红细胞表面负电荷，有利于红细胞凝 聚，低离子强度溶液也能降低红细胞的 Zeta电位 ，可进一步增加抗原抗体间的 吸引力。
酶介质法
红细胞表面的唾液酸带负电荷，使用木 瓜酶或唾液酶破坏红细胞表面的唾液酸， 降低红细胞表面的负电荷，减少红细胞 表面的排斥力，促进Rh抗原与相应的抗 体结合而产生凝集。
低离子强度溶液实验
红细胞外围的阴离子是红细胞稳定因素 之一，降低反应介质的离子强度，可减 少外围阴离子，促进带正电荷的IgG性 Rh抗体与红细胞发生凝集反应，从而增 加凝集强度。
反定型是用已知A细胞和B细胞来测 定血清中有无相应的抗A或抗B。
ABO血型鉴定实验原理
抗原抗体反应——在ABO血型系统中，红 细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗 体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗 体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象→ 从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B 抗原→判断血型。
精品资料
• 你怎么称呼老师？
• 如果老师最后没有总结一节课的重点的难点，你 是否会认为老师的教学方法需要改进？
• 你所经历的课堂，是讲座式还是讨论式？ • 教师的教鞭
• “不怕太阳晒，也不怕那风雨狂，只怕先生骂我 笨，没有学问无颜见爹娘 ……”
血型鉴定和交叉配血试验培训课件
血型鉴定和交叉配血试验
21
（二）Rh血型系统
Rh血型系统的鉴定 仅用抗D血清进行鉴定，粗略地分为Rh阳性和阴
性两类。 鉴定方法
完全抗体：生理盐水凝集试验 不完全抗体：胶体介质法、木瓜酶法、抗人球蛋 白法等
血型鉴定和交叉配血试验
22
（二）Rh血型系统 Rh血型系统的临床意义 Rh血型系统所致的溶血性输血反应：第一次输血
最可能是那一种疾病？
A、新生儿Rh 溶血病 B、新生儿 ABO溶血病
C、新生儿自身免疫性溶血性贫血 D、遗传学球 形红细胞增多症 E、珠蛋白生成障碍性贫血
血型鉴定和交叉配血试验
30
最可能产生的是哪一种并发症：
A、胆红素脑病
B、休克
C、心功能不全 D、肾功能不全 E、 肝功能 不全
哪种诊断最有价值？
新生儿同种免疫溶血病：是指母亲与胎儿血型不 合引起血型抗原免疫所致的一种溶血疾病。ABO 血型系统和Rh系统引起的溶血病常见。
ABO血型与器官移植。
其他：亲缘鉴定、法医鉴定、疾病相关性调查。
血型鉴定和交叉配血试验
20
（二）Rh血型系统
Rh血型系统的抗原和抗体
抗原主要有5种。抗原性强弱依次为D、E、C、c、e，以 D抗原性最强。
不必考虑Rh血型，第二次输血需考虑Rh血型是否 相同。 新生儿Rh溶血病：Rh-的母亲 ①若输过血，怀孕 后其孕儿为Rh+者，孕妇的抗Rh的抗体，可通过 胎盘导致胎儿溶血。②第一次孕儿为Rh+，胎儿 的RBC因某种原因(如胎盘绒毛脱落)进入母体，或 分娩时进行胎盘剥离过程中血液挤入母体,孕妇体 内产生抗Rh的抗体。第二次妊娠时,孕妇体内的抗 Rh的抗体，通过胎盘导致胎儿溶血。
血型鉴定与交叉配血试验课件
(一) ABO血型系统
1. ABO血型系统的抗原和抗体:根据红细胞表面 是否具有A或B抗原(又称A或B凝集素,两者均由H 物质转变而来),血清中是否存在抗A或抗B抗体 (又称抗A或抗B凝集素),ABO血型系统可分为四 型.红细胞上具有A抗原,血清中有抗B抗体为A型; 红细胞上具有B抗原,血清中有抗A抗体为B型; 红 细胞上具有A和B抗原,血清中不含有抗A和抗B抗 体者为AB型; 红细胞上不具有A和B抗原,血清中 有抗A和抗B抗体者为O型.
A型
3．ABO血型鉴定和交叉配血试验
（1）ABO血型鉴定：ABO血型抗体能在 生理盐水中，与相应红细胞抗原结合而发生凝 集反应。进行ABO血型鉴定时，采用标准的抗A 及抗B血清以鉴定被检者红细胞上的抗原（BethVincent直接试验），同时用标准的A型及B型红 细胞鉴定被检者血清中的抗体（Simonin反转试 验）。只有被检者红细胞上的抗原鉴定和血清 中的抗体鉴定所得结果完全相符时才能肯定其 血型类别。
问答题：
1、简述血型系统：
选择题：
1、根据红细胞表面的抗原和血清中的抗体判断血型， 正确的是（）
A、红细胞表面有A抗原，血清中有抗B抗体，为A型 B、红细胞表面有B抗原，血清中有抗A抗体，为A型 C、红细胞表面有A抗原，血清中有抗A和抗B抗体，为
A型 D、红细胞表面有B抗原，血清中有抗A和抗B抗体，为
3．Rh血型系统的临床意义
（1） Rh血型系统所致的溶血性输血反应：Rh系统一般不存 在天然抗体，故在第一次输血时，往往不会发现Rh血型不合。 Rh阴性的受血者接受了Rh阳性血液输入后便可产生免疫性抗 Rh抗体，如再次输受Rh阳性血液时，即出现溶血性输血反应。
（2） 新生儿Rh溶血病：母亲与胎儿的Rh血型不合，典型的 病 历 为 胎 儿 之 父 为 Rh 阳 性 （ DD 或 Dd ） ， 母 亲 为 Rh 阴 性 （Dd）。
《交叉配血试验》课件
3
交叉配血实验
将受血者血液与供血者血液混合，观察有无凝集现象，判断是否可进行输血。
交叉配血问题和风险
失误风险
实验需要非常谨慎，人为疏忽可能导致患者 受到损害。
抗体/抗原不完全
不同人的血型特点存在差异，可能会导致检 测结果的不准确。
过敏反应
输血可能会引起过敏反应，如发热、皮疹等， 重者可能会导致休克。
《交叉配血试验》PPT课 件
本PPT课件将为您介绍交叉配血试验的基础知识，包括血型系统的分类和特点， 样本采集与处理，交叉配血具体实验操作等内容，帮助您迅速掌握这一重要 的医学技术。
为什么需要进行交叉配血试验？
安全性
交叉配血能够确保输血无不良反应和并发症。
有效性
正确的交叉配血能够提高输出现恶心、呕吐、口渴等不适 症状，重者可能会导致输血反应、肺水肿等 并发症。
交叉配血实验中的误差对策
严格执行实验标准
操作过程中需仔细核对每一个步骤，确保实验 实施标准的一致性。
超前预判后续问题
对于实验中出现的问题需及时发现、及时处理， 避免问题扩大。
交叉配血血液制品的使用原则
交叉配血的血型系统分类和特点
ABO血型系统
四种血型：A型、B型、AB型和O型，分别对应 着不同的抗原和抗体。最常用的血型系统。
Rh血型系统
正和负，Rh阴性人群占全球人口的15%。
Kell血型系统
被称为“影响输血一等的Kell抗原”，属于较少见 的血型系统。
Jk血型系统
包括Jka、Jkb、Jk3等抗原。Jka是最常见的抗原。
外周血细胞的交叉配型检验方法
1 直接试验法
将检测细胞与交叉抗体混合，观察有无凝集现象。
2 间接试验法
血型鉴定与交叉配血【ppt】(初稿)
答:不规则抗体指ABO血型以外的所有红细胞血型抗体。与输血科工作 密切相关的还是溶血性输血风险的控制，临床出现溶血反应的主要原因是 患者血液中存在不规则抗体。因此输血前的不规则抗体筛查对于安全有效 输血具有重要意义。因此 2000年卫生部颁布的《临床输血技术规范》规定有输血史或妊娠史或 交叉配血不相合时，应进行不规则抗体筛查。建议：为确保临床安全，规 定对拟输血的患者统一在输血前进行不规则抗体筛查。
生凝集，无非特异性凝集， ABO
血 抗B血清效价在1:64以上。 型 鉴 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度 为3分钟时凝块>1mm。 定
②高效价，抗A血清效价在1:128以上，
④无冷凝集素。
⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。
1．生理盐水凝集法
原理
ABO ①ABO血型抗体一般是IgM，属于完全
血 抗体 型 ②IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表 鉴 面排斥力，同时分子量较大，它能与相 定 应抗原特异性结合，在生理盐水中发生
肉眼可见的凝集现象。
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM在盐水介质中产生凝集
①玻片法：
操作简单，不需要离心，适于大规
ABO 血 型 鉴 定
模血型普查。 反应时间长，易忽略较弱的凝集而 导致定型错误。不适于反定型。
（九）输血剂量
预计输血效果
一个成年人的全身总血量相当于体重的8%左右，即50公斤体重的人， 体内血液总量为4000毫升。一个单位的红细胞是通过200ml正常人的全 血中提取的。一个正常人血红蛋白是120g/l-160g/l。故200ml全血中血 红蛋白是24g，24g输入到4000ml血中，浓度为6g/l左右,故输血一个单 位可以提高血红蛋白6g/l,即我们通常说得半克血。 估算公式： 20公斤体重血容量：20x8%=1.6L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷1.6L=15g。 30公斤体重血容量：30x8%=2.4L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷2.4L=10g。 40公斤体重血容量：40x8%=3.2L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷3.2L=7.5g。 50公斤体重血容量：50x8%=4L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷4L=6g。 60公斤体重血容量：60x8%=4.8L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷4.8L=5g。 70公斤体重血容量：70x8%=5.6L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷5.6L≈4.3g。
生凝集，无非特异性凝集， ABO
血 抗B血清效价在1:64以上。 型 鉴 ③高亲和力，15秒内出现凝集，其强度 为3分钟时凝块>1mm。 定
②高效价，抗A血清效价在1:128以上，
④无冷凝集素。
⑤无菌。分离血清后56℃，30min灭活。
1．生理盐水凝集法
原理
ABO ①ABO血型抗体一般是IgM，属于完全
血 抗体 型 ②IgM抗体分子链较长，能克服红细胞表 鉴 面排斥力，同时分子量较大，它能与相 定 应抗原特异性结合，在生理盐水中发生
肉眼可见的凝集现象。
IgM抗体凝集红细胞示意图
IgM在盐水介质中产生凝集
①玻片法：
操作简单，不需要离心，适于大规
ABO 血 型 鉴 定
模血型普查。 反应时间长，易忽略较弱的凝集而 导致定型错误。不适于反定型。
（九）输血剂量
预计输血效果
一个成年人的全身总血量相当于体重的8%左右，即50公斤体重的人， 体内血液总量为4000毫升。一个单位的红细胞是通过200ml正常人的全 血中提取的。一个正常人血红蛋白是120g/l-160g/l。故200ml全血中血 红蛋白是24g，24g输入到4000ml血中，浓度为6g/l左右,故输血一个单 位可以提高血红蛋白6g/l,即我们通常说得半克血。 估算公式： 20公斤体重血容量：20x8%=1.6L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷1.6L=15g。 30公斤体重血容量：30x8%=2.4L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷2.4L=10g。 40公斤体重血容量：40x8%=3.2L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷3.2L=7.5g。 50公斤体重血容量：50x8%=4L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷4L=6g。 60公斤体重血容量：60x8%=4.8L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷4.8L=5g。 70公斤体重血容量：70x8%=5.6L,1个单位血红蛋白含量： 0.2LX120g/l=24g/l，所以输1个单位可提升24g/l÷5.6L≈4.3g。
血型交叉配血PPT课件
聚凝胺试验
原理：聚凝胺是一种高价阳离子季胺盐多聚物，
溶解后能产生很多正电荷，可以中和红细胞表 面的负电荷，使红细胞之间距离减小，能引起 正常红细胞可逆性的非特异性凝聚。如果是抗 体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集不可逆； 无抗体致敏的红细胞，加入中和液后，凝集解 散。
程序：按试剂盒说明书操作。
间接抗人球蛋白试验(IAT) 在体外抗体致敏红细胞,用于抗体筛选二醇）是一种水溶性的中性
多聚体，当含有抗原与相应抗体的溶液中加入 PEG时，由于空间排斥效应作用，使溶液中的抗 体饱和度提高，加速溶液中的抗原-抗体复合物 的形成。
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加4滴PEG
溶液后混匀，37℃孵育15分钟，生理盐水洗涤3 遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂， 离心后判读结果。
免疫血液学的传统方法
凝集实验和溶血实验 玻片法/试管法/微孔板法 抗人球实验
在抗原抗体反应中的去离子和低离子
盐水凝集法： 例如，ABO血型鉴定试验
包括玻片法、试管 法和微孔法
但灵敏度相对较低，只在 一些基层医院血库使用 低离子强度盐水法：
通过降低介质溶液离子 强度，减少红细胞膜外围的 离子云，促进红细胞凝集， 因而其灵敏度有所提高。
LISS-IAT
原理：通过降低红细胞周围的离子氛，使抗体易于接
近抗原，促进抗体在更短的时间内致敏红细胞，再使用 抗人球蛋白试剂，使被致敏的红细胞产生凝集
程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液后
混匀，37℃孵育15分钟，离心观察细胞的凝集情况，用 生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋 白试剂，离心后判读结果。
微柱凝胶技术(卡)
血型鉴定和交叉配血专题培训课件
如上层清亮，管底有RBC沉积，边缘整齐，轻弹管底，RBC浮 起或成为均匀的RBC悬液，则为不凝集（一）；
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
血型鉴定和交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
（二）聚凝胺介质法
原理：聚凝胺是一种高价阳离子多聚物，在液体
中可产生负电荷，中和红细胞表面的负电荷，减 轻细胞间排斥力，缩短红细胞距离，在离心力作 用下，可使红细胞发生发生可逆性、非特异性凝
血型鉴定和交叉配血
实验内容
一、红细胞悬液的制备 二、ABO血型鉴定（试管法）和Rh血型鉴定 三、交叉配血（盐水介质和聚凝胺介质）
临床中：
待测
制成红细 胞悬液，
待测
一、红细胞悬液制备
常用浓度：1%、2%、5%、10%。 方法：①抗凝血 3000r/min 移去上层血浆待测
5min
若不确定，可将反应物倒在载玻片上，显微镜下观察。
注意：若上层为清亮的樱红色，考虑是否溶血
二、ABO血型鉴定：
二、反定型： 原理：用标准红细胞检测被检血清（血浆）,在盐
水介质中发生肉眼可见的凝集，从而测定被检血 清（血浆）中有无与标准红细胞相对应的抗体， 进一步判定血型。
二、ABO血型鉴定：
二、反定型 方法： 1、试管法：
免出现漏加抗D试剂导致的假阴性结果 3、观察结果时，应轻轻捻动试管，若用力摇动，可
认为破坏弱凝集，误判为（一）性。
三、交叉配血
概念：供血者的血浆、红细胞与受血者的 红细胞、血浆混合，观察有无凝集反应。
方法：盐水介质法、聚凝胺介质法、微柱 凝胶法、抗人球蛋白法、酶介质法。
交叉配血：
主侧：受血者血浆+供血者红细胞
-A
-B
加待测血清2滴
加标准红细 胞悬液1滴
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实验八 血型鉴定及交叉配
血实验
（一）ABO血型鉴定
1．实验原理 红细胞膜上具有血型糖蛋白，作为抗原，也称为凝集原；
ABO血型就是根据红细胞表面抗原来确定的，根据红细 胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、 AB型及O型四种。 血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。 凝集原和相应的凝集素特异性结合，使红细胞凝集成团， 进而引起红细胞破裂，产生溶血。 ABO血型鉴定的原理是利用红细胞凝集试验，将待测血 液分别与已知含A抗体和B抗体的标准血清混合，观察 是否发生凝集现象，判断待测血液红细胞上有何种抗原， 由此确定待测血液的血型。
血型
A B O AB
抗A试剂
+ +
抗B试剂
+ +
呈现均匀的淡红色时，表明不凝集，用“一”号表示。 在试剂里凝结成絮团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用“十”号表示。
（二）交叉配血试验
患 者
献 血 者
主侧配血
用患者血清与供
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患 者红细胞进行试验
交叉配血的要求
ABO血型分类
ABO血型正反定型结果
（一）ABO血型鉴定
2．血型鉴定方法 标记凹载玻片：左上角写A，右上角写B。 分别吸取标准A血清和标准B血清各1滴滴于双凹载玻片左端和右端。 采血针刺破左手无名指尖，待血液出来后，用2支毛细滴管吸取血
液，分别加入到玻片左、右两侧的血清内，并用牙签搅拌，使标 准血清与血液混匀。（切勿混用毛细滴管和牙签！） 手持玻片转动数次，转动时玻片应保持在一个水平面上，然后置 室温下5min后观察结果。 肉眼观察：如果外观略呈花边状或锯齿状，看上去有沉淀，则多 为凝集；如果血滴呈均匀状态，边缘整齐，则多为不凝集。 进一步在低倍镜下观察：在低倍镜下，如果观察到红细胞凝集成 团，或尚有少数游离细胞，则为凝集现象；如果红细胞均为游离 状态，则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。
பைடு நூலகம்
主侧配血要求：
– 绝对不可以有凝集或溶血 现象。
凝 集
次测配血要求：
– 供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有
凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血的目的
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受 血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要 目的是为了防止输血后产生溶血性反应。
阴 性
异性凝集
后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用
资料仅供参考，实际情况实际分析
主要经营：课件设计，文档制作，网络软件设计、 图文设计制作、发布广告等
秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满 意！
致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、 计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面， 打造全网一站式需求
尽可能确保对人和一个病人来说，输了供血者的血 不会引起有害反应，并且使红细胞在输注后能保持 最长的存活时间。
交叉配血试验方法
盐水介质配血 酶介质配血
– 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶
抗球蛋白介质配血
– 经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法
聚凝胺介质配血 凝胶方法配血
盐水介质配血方法
实验步骤
取干净载玻片
滴加定型剂
取血
消毒
取血
观察
记录结果
消毒 消毒
①
②
抗A
抗B
③用70－75％的酒精消毒取血部 位
消毒取血部位
④ 用针扎一下消毒部位，使血冒出 ，立即滴一滴血液在抗A或B上。
抗A
抗B
再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎
⑤ 的部位，然后再取一滴血液于抗B或A上
。
抗A
抗B
观察有无凝集，并按下表判定结果。
用LIM配制的红细胞悬液，可以代替 由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质 试剂中进行Rh定型，两者定型方法和效果 均相同。
聚凝胺(Polybrene)配血方法
患
者
主
侧
献
室温放置
次 侧
1 分钟
主次侧均 加聚凝胺
血
者
聚凝胺(Polybrene)配血方法
阳 性
离
主次侧均
心 聚凝胺引起 红细胞非特
加重悬液 看结果
患
者
阳
性
主
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
抗球蛋白配血方法
患
者
37 ℃
主
侧
献
次 侧
37℃ 水浴30分钟
三洗
血
者
抗球蛋白方法配血方法
阳
加
性
抗 球 蛋
离心 看结果
白
阴 性
酶介质配血方法
患 者
主 侧
次
献
侧
血
者
主次侧 均加酶
酶介质配血方法
37 ℃
阳
性
37℃
离心
水浴30分钟
看结果
阴
性
二、Rh定型 1、使用盐水介质试剂
血实验
（一）ABO血型鉴定
1．实验原理 红细胞膜上具有血型糖蛋白，作为抗原，也称为凝集原；
ABO血型就是根据红细胞表面抗原来确定的，根据红细 胞上有或无A抗原或/和B抗原，将血型分为A型、B型、 AB型及O型四种。 血清中含有相应的特异性抗体称为凝集素。 凝集原和相应的凝集素特异性结合，使红细胞凝集成团， 进而引起红细胞破裂，产生溶血。 ABO血型鉴定的原理是利用红细胞凝集试验，将待测血 液分别与已知含A抗体和B抗体的标准血清混合，观察 是否发生凝集现象，判断待测血液红细胞上有何种抗原， 由此确定待测血液的血型。
血型
A B O AB
抗A试剂
+ +
抗B试剂
+ +
呈现均匀的淡红色时，表明不凝集，用“一”号表示。 在试剂里凝结成絮团状，形成鲜明的对比，表明凝集，用“十”号表示。
（二）交叉配血试验
患 者
献 血 者
主侧配血
用患者血清与供
主
者红细胞进行试验
侧
次
次测配血
侧
供血者血清与患 者红细胞进行试验
交叉配血的要求
ABO血型分类
ABO血型正反定型结果
（一）ABO血型鉴定
2．血型鉴定方法 标记凹载玻片：左上角写A，右上角写B。 分别吸取标准A血清和标准B血清各1滴滴于双凹载玻片左端和右端。 采血针刺破左手无名指尖，待血液出来后，用2支毛细滴管吸取血
液，分别加入到玻片左、右两侧的血清内，并用牙签搅拌，使标 准血清与血液混匀。（切勿混用毛细滴管和牙签！） 手持玻片转动数次，转动时玻片应保持在一个水平面上，然后置 室温下5min后观察结果。 肉眼观察：如果外观略呈花边状或锯齿状，看上去有沉淀，则多 为凝集；如果血滴呈均匀状态，边缘整齐，则多为不凝集。 进一步在低倍镜下观察：在低倍镜下，如果观察到红细胞凝集成 团，或尚有少数游离细胞，则为凝集现象；如果红细胞均为游离 状态，则为不凝集。根据镜下所见有无凝集现象判定血型。
பைடு நூலகம்
主侧配血要求：
– 绝对不可以有凝集或溶血 现象。
凝 集
次测配血要求：
– 供血者血清加受血者红细
胞在允许范围内，可以有
凝集现象，但不可以有溶
不
血。
凝
集
交叉配血的目的
交叉配血试验是输血前必要的步骤，主要是检查受 血者血清中有无能破坏供血者红细胞的抗体。主要 目的是为了防止输血后产生溶血性反应。
阴 性
异性凝集
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资料仅供参考，实际情况实际分析
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交叉配血试验方法
盐水介质配血 酶介质配血
– 菠萝酶，无花果酶，木瓜酶
抗球蛋白介质配血
– 经典方法，加LISS（低离子介质溶液）的方法
聚凝胺介质配血 凝胶方法配血
盐水介质配血方法
实验步骤
取干净载玻片
滴加定型剂
取血
消毒
取血
观察
记录结果
消毒 消毒
①
②
抗A
抗B
③用70－75％的酒精消毒取血部 位
消毒取血部位
④ 用针扎一下消毒部位，使血冒出 ，立即滴一滴血液在抗A或B上。
抗A
抗B
再用70－75％的酒精擦洗消毒刚用针扎
⑤ 的部位，然后再取一滴血液于抗B或A上
。
抗A
抗B
观察有无凝集，并按下表判定结果。
用LIM配制的红细胞悬液，可以代替 由生理盐水配制的红细胞悬液在盐水介质 试剂中进行Rh定型，两者定型方法和效果 均相同。
聚凝胺(Polybrene)配血方法
患
者
主
侧
献
室温放置
次 侧
1 分钟
主次侧均 加聚凝胺
血
者
聚凝胺(Polybrene)配血方法
阳 性
离
主次侧均
心 聚凝胺引起 红细胞非特
加重悬液 看结果
患
者
阳
性
主
侧 离心
次 看结果
献
侧
阴
血
性
者
抗球蛋白配血方法
患
者
37 ℃
主
侧
献
次 侧
37℃ 水浴30分钟
三洗
血
者
抗球蛋白方法配血方法
阳
加
性
抗 球 蛋
离心 看结果
白
阴 性
酶介质配血方法
患 者
主 侧
次
献
侧
血
者
主次侧 均加酶
酶介质配血方法
37 ℃
阳
性
37℃
离心
水浴30分钟
看结果
阴
性
二、Rh定型 1、使用盐水介质试剂