白介素1β(IL1b)检测试剂盒 SEA563Hu使用说明书
白介素8(IL8)检测试剂盒 SEA080Hu使用说明书
SEA080Hu96T
白介素8(IL8)检测试剂盒
(酶联免疫吸附试验法)
适用生物:人
使用说明书
仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
第12版(2016年05月修订)
[预期应用]
本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL8含量。
[试剂盒内容]
试剂名称数量试剂名称数量
96孔板(预包被)196孔板覆膜4
标准品2标准品稀释液1×20mL
检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL
检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mL
TMB底物1×9mL终止液1×6mL
洗涤液(30×)1×20mL使用说明书1
[需自备的设备及试剂]
1、450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、单道或多道微量移液器及吸头
3、稀释样品的EP管
4、蒸馏水或去离子水
5、吸水纸
6、盛放洗液的容器
7、0.01mol/L(或1×)磷酸缓冲盐(PBS),pH=7.0-7.2
[试剂盒的储存及有效期]
1、未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶
液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C,其余试剂请置于4o C保存备用。
2、使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,此外,请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝
箔袋装好,并拉紧密封铝箔袋,置于-20o C保存。
注意:
试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
人白介素1β (IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
2022年修订第一版
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)
产品货号:E-EL-H0149c
产品规格:96T/48T/24T/96T*5
Elabscience 人白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
Human IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit
使用前请仔细阅读说明书。如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:
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具体保质期请见试剂盒外包装标签。请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
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目录
用途 (3)
基本性能 (3)
检测原理 (3)
试剂盒组成及保存 (4)
试验所需自备物品 (5)
样品收集方法 (5)
注意事项 (6)
■ 试剂盒注意事项 (6)
■ 样品注意事项 (6)
样本稀释方案 (6)
检测前准备工作 (7)
操作步骤 (8)
结果判断 (10)
技术资源 (10)
典型数据 (10)
性能 (11)
■ 精密度 (11)
■ 回收率 (11)
■ 线性 (11)
声明 (12)
Intended use (13)
Character (13)
Test principle (13)
Kit components & Storage (14)
兔白细胞介素1(IL-1)定量检测试剂盒(ELISA) 使用说明书
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
兔白细胞介素1(IL-1)定量检测试剂盒(ELISA)
使用说明书
【试剂盒名称】
兔白细胞介素1(IL-1)定量检测试剂盒(ELISA)
【试剂盒用途】
定量检测兔血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1(IL-1)的含量。
【检测原理】
本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。将标准品、待测样本加入到预先包被兔白细胞介素1(IL-1)抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中兔白细胞介素1(IL-1)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中兔白细胞介素1(IL-1)含量。
【试剂盒组成】
1 酶标包被板12孔×8条7 显色剂B液6mL
2 标准品0.3mL*6管8 终止液6mL
3 20倍浓缩洗涤液25mL9 说明书1份
4 生物素1mL10 封板膜2张
5 酶标试剂10mL11 密封袋1个
6 显色剂A液6mL
备注:标准品(S0→S5)浓度依次为:320、160、80、40、20、0ng/L.
【需要而未提供的试剂和器材】
1、37℃恒温箱
2、标准规格酶标仪
3、精密移液器及一次性吸头
4、蒸馏水
5、一次性试管
6、吸水纸
【操作步骤】
1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
2、配液:用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。
白介素-1βELISA定量操作分享
白介素-1βELISA定量操作分享
ELISA常见的标本一般包括:液体类标本(包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等);培养细胞;组织标本。
那么是不是仅仅有了这些标本,就可以开始ELISA实验了呢?这些标本在收集的时间、方法以及保存条件都有一定的要求,划重点:
1.血清:全血样品于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原、无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA-2Na,样品采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。避免使用溶血,高血脂样品。
3.组织匀浆:用预冷的匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.细胞培养上清:取细胞培养上清于1000×g离心20分钟,除去杂质及细胞碎片。取上清检测。
5.其它生物样品:如固体生物代谢物,按组织样本处理方法操作,悬浮物应离心去除。
以上为样本的实验前处理方法,如果遇到急事不能立刻用这些新鲜的样本来进行实验的话,那么也无妨,接下来跟大家分享,样本处理后的储存方法,在短时间内是可以应急的,但是还是建议新鲜样本最佳:
ELISA方法类型对比
一般ELISA实验类型有四种,竞争法、间接法、双抗体夹心法、双抗原夹心法,这四种方法有哪些不同,以及各自的优缺点是什么?
Abbkine白介素-1β ELISA定量试剂盒特点如下:
1、高效、灵敏、特异的抗体;
2、定量准确稳定的重复性和可靠性;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
4、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒-高灵敏度标准OD值!
人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒,高灵敏度+标准OD值!
刚刚进入实验室的新手科研er一定会被ELISA试剂盒数以千计的种类、数以百家的品牌绕花眼,而实验老手们,可能也经常会被做实验时明明正常建模,标曲测定的数值和线性关系也正常,但就是结果出现各种问题所头疼,这个时候,大家就要思考一下,你所选择的ELISA试剂盒是不是最合适并且质量又可靠呢?
人白介素1β(IL-1β)是大家做实验中比较常见的一种细胞因子,而它也与我们的常见的类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮性关节炎等息息相关,并且最近有研究表明,IL-1β的表达,还与口腔、胃支气管等多种病症相关,可研究价值巨大。一般来说,OA患者滑液中IL-1β
的含量平均为(90.51±5.03)pg/ml。
在实验过程中,我们通常采用ELISA法测定血清IL-1β的含量,这个时候,选择一款高灵敏度+完美标曲的ELISA试剂盒,就显得尤为重要。
我们推荐——Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒,科研老手新手的“眼花头疼”问题统统解决!
Elabscience 人白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒原理
采用双抗体夹心ELISA法。用抗人IL-1β抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的人IL-1β会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人IL-1β抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人IL-1β抗体与结合在包被抗体上的人IL-1β结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD 值,IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中IL-1β的浓度。
人IL-1β ELISA kit说明书
钟。 7. 洗板4次。 8. 加入显色剂100ul/孔,避光37℃孵箱孵育10--15分钟。 9. 加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测量OD450值(5分钟内)。
结果判断: 1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。 2. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,以平滑线连接各标准品的坐标
简介:ห้องสมุดไป่ตู้
白细胞介素-1(IL-1) 又称淋巴细胞激活因子, 分为IL-1a, IL-1β两种,它们由不同的基因所表达. 分子量为15KDa, 但其PI分别为5和7, 两者的氨基酸序列只有20%的同源性, 但与同一种膜受体相结 合.IL-1主要由血液中的单核细胞和巨噬细胞所产生,T,B 淋巴细胞, 各种上皮细胞,内皮细胞和间质细 胞也能产生IL-1, 血液中的IL-1 主要为单核细胞和巨噬细胞所产生的IL-1β.
注意事项: 1. 试剂盒保存在2-8℃,除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。 2. 浓缩生物素化抗体(2a)、浓缩酶结合物(3a)装量极少,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾
到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或离心处理,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管 底。 3. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,这属于正常现象,加热使结晶完全溶解后再配制。 4. 若重复使用标准品应按照一次用量分装后,将其放在-20~-70℃贮存。一次性使用,避免反复 冻融。 5. 不同批号的试剂盒组份不能混用。 6. 充分混匀对反应结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率),如无微量振荡器,可在 反应过程中每10分钟手工混匀一次。 7. 在试验中标准品和样本检测时建议作双复孔或三复孔。
用ELISA试剂盒检测人白介素1β IL-1b 方法步骤
双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度
检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测样本中IL-1β的浓度。IL-1β捕获抗体已预包被于酶标板上,当加入标本或参考品时,其中的IL-1β会与捕获抗体结合,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。当加入生物素化的抗人IL-1β抗体后,抗人IL-1β抗体与IL-1β接合,形成夹心的免疫复合物,其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲合素。生物素与亲合素特异性结合,亲合素连接的酶就会与夹心的免疫复合物连接起来;其它游离的成分通过洗涤的过程被除去。最后加入显色剂,若样本中存在IL-1β将会形成免疫复合物,辣根过氧化物酶会催化无色的显色剂氧化成蓝色物质,在加入终止液后呈黄色。通过酶标仪检测,读其450nm处的OD值,
IL-1β浓度与OD450值之间呈正比,通过参考品绘制标准曲线,对照未知样本中OD值,即可算出标本中IL-1β浓度。标本收集:
1.标本的收集请按下列流程进行操作:
A.细胞上清标本离心去除悬浮物后即可;
B.血清标本应是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液;
C.血浆标本,推荐用EDTA的方法收集若待测样本不能及时检测;
D.标本收集后请分装,冻存于-20℃,避免反复冻融。
2.血清标本不应添加任何防腐剂或抗凝剂;
3.标本应清澈透明,检测前样本中如有悬浮物应通过离心去除;
4.请勿使用溶血,高血脂或污染的标本检测,否则结果将不准确。
注:正常人血清或血浆样本请用标本缓冲液做倍比稀释后再检测。
注意事项:
1.试剂盒请保存在2~8℃。
免疫组化il-1β实验步骤
免疫组化il-1β实验步骤
免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)是一种用来检测组织
中特定蛋白质表达的方法。IL-1β是一种重要的细胞因子,它在免
疫和炎症过程中发挥着重要作用。进行IL-1β的免疫组化实验需要
严格遵循一系列步骤,以确保实验结果的准确性和可靠性。
1. 样本处理,首先,需要准备组织样本,可以是组织切片或细
胞培养物。对于组织样本,需要进行固定、脱水和包埋等处理,以
保持样本的完整性和稳定性。
2. 抗体处理,选择合适的IL-1β抗体,确保其特异性和敏感性。将样本切片或细胞培养物与IL-1β抗体孵育,使抗体与目标蛋
白结合。
3. 洗涤,将样本进行洗涤,去除未结合的抗体和其他杂质。
4. 二抗处理,加入与IL-1β抗体结合的二抗,如辣根过氧化
物酶(HRP)标记的二抗,以增强IL-1β的检测信号。
5. 显色反应,加入适当的显色底物,使IL-1β呈色反应产生,
常用的底物包括DAB(二氧化苯胺)或VIP(维克罗尼亚紫)。
6. 停止反应,在IL-1β显色适当程度后,通过停止反应来终止显色过程,常用的方法是将样本浸入脱离液中。
7. 脱水和封片,对样本进行脱水、透明化处理,并最终封片,以便于显微镜观察和图像获取。
需要注意的是,在整个实验过程中,需要严格控制实验条件,包括温度、时间、试剂浓度等,以确保实验的重复性和可比性。此外,还需要进行负对照和阳性对照实验,以验证实验结果的准确性和特异性。
总之,IL-1β的免疫组化实验是一个复杂而精细的过程,需要熟练的操作和严谨的态度。通过严格遵循上述步骤,可以获得准确可靠的IL-1β表达情况,为相关研究提供重要的实验数据支持。
大鼠白介素1β (IL-1β)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
大鼠白介素1β (IL-1β)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用检测范围:3.12 pg/ml - 200 pg/ml最低检测限:0.78 pg/ml特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠IL-1β,且与其他相关蛋白无交叉反应。有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-1β含量。说明1.试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。2.浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。3.中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。4.刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。概述白介素-1(IL-1)又称淋巴细胞刺激因子,分为IL-1α和IL-1β两种,它们由不同的基因所表达,分子量为15kDa,但其PI分别为5和7。两者分别由159和153个氨基酸组成,氨基酸顺序之间只有26%的同源性,但与同一种膜受体相结合。IL-1主要由血液中的单核细胞和巨噬细胞所产生。T淋巴细胞,B淋巴细胞,各种上皮细胞,内皮细胞和间质细胞也能产生IL-1。血液中的IL-1主要为单核细胞和巨噬细胞所产生的IL-1β。IL-1是急性期免疫反应的主要调节因子,它在T细胞激活,诱导IL-2产生起着基本的作用。这些调节作用的产生主要通过作用在神经系统,骨髓干细胞发生作用。这些调节作用大多数是IL-1β直接产生的,但有些是于其他细胞因子如IL-6、IFN、TNF协同作用下发挥效应的。正常人血液中不含IL-1β或者含量很底。IL-1含量升高表明机体内有组织损伤或者感染产生,如阶段性回肠炎败血症等。神经系统的炎症和损伤时,脑脊液中IL-1水平上升。在感染性胸膜,腹膜渗出液中,IL-1水平上升。实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-1β抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-1β抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的IL-1β呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)7. 辣根过氧化物酶
人白细胞介素1a(IL-1a)
人白细胞介素1a(IL-1a)酶联免疫检测
试剂盒使用说明书
使用前仔细阅读本说明书。本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人白细胞介素1a(IL-1a),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素1a(IL-1a)的测定。
工作原理
本试剂盒采用的是双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人白细胞介素1a (IL-1a)的水平。向预先包被了人白细胞介素1a(IL-1a)单克隆抗体的酶标孔中加入白细胞介素1a(IL-1a),温育;洗涤后,加入HRP标记过的白细胞介素1a(IL-1a)抗体。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中人白细胞介素1a(IL-1a)的浓度呈正相关。
试剂盒组成
需要而未提供的试剂和器材
1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头
4.蒸馏水,
5.一次性试管
6.吸水纸
注意事项
1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差
3.建议所有标准品、样本都做双份检测。如标本中待测物质含量过高,请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再按说明书操作进行测定,计算时请最后乘以总稀释倍数
(×n×5)。
4.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
5.为避免交叉污染,要避免重复使用手中的吸头和封板膜。
大鼠白介1β说明书
大鼠(Rat)白细胞介素1β(IL-1β)
本试剂盒仅供研究使用标本:血清或者血浆
一、试剂组成
精密度微孔板96孔 (Microtitration Strips) 1块 2~8℃干燥保存
酶标偶合液 (Conjugate ) 1瓶12.0毫升 2~8℃冷藏保存
标准品 (Standard) 5瓶各1.0毫升 2~8℃冷藏保存
呈色剂A (Substrate A) 1瓶6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存
呈色剂B (Substrate B) 1瓶6.0毫升 2~8℃避光冷藏保存
终止液 (Stopping Solution) 1瓶 6.0毫升室温保存
20倍浓缩洗涤液 (Rinsing Buffer x 20) 1瓶60.0毫升 2~8℃冷藏保存
5倍浓缩样品稀释液 (Diluent x 5) 1瓶15.0ml 2~8℃冷藏保存
英文说明书,中文说明书各一份室温保存
二、注意事项
1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。2.使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,
3.浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。
4.浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟
5.若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。
6.在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。
7.加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。
8.试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。
il-1β指标的单位
il-1β指标的单位
IL-1β(白细胞介素-1β)是一种细胞因子,它在炎症和免疫反应中起着重要的作用。IL-1β的浓度通常以pg/mL(皮克/毫升)为单位进行测量。
在实验室中,常用的方法是使用酶联免疫吸附测定(ELISA)来测量IL-1β的浓度。ELISA的结果通常以pg/mL为单位报告。
需要注意的是,IL-1β的浓度可以根据不同的实验方法和实验室而有所不同。因此,在研究和临床实践中,最好参考特定实验室或研究文献中报告的单位和参考范围。
小鼠白细胞介素1β(IL-1β ) 酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
仅供科研使用,不得用于临床检验。
小鼠白细胞介素1β(IL-1β)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
说明书
黄石市艾恩斯生物科技有限公司
【产品名称】
通用名称:小鼠白细胞介素1β(IL-1β)酶联免疫试剂盒(ELISA试剂盒)
英文名称:Mouse Interleukin 1β(IL-1β)ELISA KIT
【包装规格】
48人份/盒,96人份/盒
【预期用途】
仅供科研使用,定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中小鼠白细胞介素1β(IL-1β)的浓度。
【检验原理】
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗小鼠白细胞介素1β(IL-1β)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入小鼠白细胞介素1β(IL-1β)校准品和待测样本,再加入另一株HRP标记的抗小鼠白细胞介素1β(IL-1β)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B,底物在HRP催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪上测定吸光度(OD值),吸光度(OD值)与待测样品中小鼠白细胞介素1β(IL-1β)的浓度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中小鼠白细胞介素1β(IL-1β)的浓度。
【主要组成成分】
主要成分
校准品检测范围:12.5-800pg/ml。校准品已经通过测试,结果表明HBs抗原阴性,HIV1、HIV2和HCV抗体阴性,由于不存在一种试验方法能够完全保证没有这些物质,本品必须按照具有潜在的感染性进行处理,处理过程应当遵循通用的安全措施。
il-1β 是什么
英文名字Human IL-1 beta protein
中文名称【IL-1 beta】重组人白细胞介素-1β
货号 PRP1019
背景资料:
白细胞介素-1β(IL-1β或IL-1B)又称分解代谢素,是白细胞介素-1细胞因子家族的成员。IL-1β是由活化的巨噬细胞以前蛋白的形式产生的,并由半胱天冬酶-1 (CASP1/ICE)蛋白水解加工成活性形式。IL-1β是炎症反应的重要介质,参与多种细胞活动,包括细胞增殖、分化和凋亡。此外,IL-1β在中枢神经系统(CNS)中能够诱导环氧合酶-2(PTGS2 / COX2)。IL-1β基因和其他8个白细胞介素-1家族基因在2号染色体上形成细胞因子基因簇。
产品形式冻干粉,冻干缓冲液为无菌的PBS溶液, pH 7.4。
特点&优势通过LAL法测定,每微克蛋白里内毒素含量< 0.01 EU。分子量17 Kda
使用中注意事项开盖使用前,请先离心。本产品为冻干粉,推荐用该产品配套的Reconstitution Buffer进行复溶,且浓度不低于100
µg/ml。客户可根据后续的实验需求,进行进一步的稀释。
保存建议本产品为冻干粉形式,建议:将冻干粉的【IL-1 beta】重组人白细胞介素-1β产品保存于-20℃以下的干燥环境中。本产品溶解之后,可在4℃保存2-7天,长期使用请置于-20℃以下。为长期保存,推荐添加载体蛋白(0.3%HSA或者BSA),并酌情分装保存,避免反复冻融。
运输条件冰袋运输(蓝冰)
白介素1β_人白介素1β_Human IL-1β使用说明书
GMP级重组人白介素1β(冻干粉)
Recombinant Human IL-1β(interleukin-1β)
作用机理:
IL-1β是一种在多种细胞中产生的促炎细胞因子,包括单核细胞、组织巨噬细胞、角质形成细胞和其他上
皮细胞。IL-1α和 IL-1β与同一受体结合,具有相似的生物学特性。这些细胞因子具有广泛的活性,包括通过诱导 IL-2 释放促进胸腺细胞增殖、B 细胞成熟和增殖、成纤维细胞生长因子样活性、滑膜细胞释放前列腺素和胶原酶等。然而,IL-1β是一种分泌型细胞因子,而 IL-1α主要是一种细胞相关的细胞因子。
规格参数:
货号:TL-513 规格:100ug
产品信息:
表达宿主:人 HEK293 细胞
同源名称:Catabolin, Lymphocyte-activating factor (LAF), Endogenous Pyrogen (EP), Leukocyte Endogenous Mediator (LEM), Mononuclear Cell Factor (MCF), IL1B,IL-1BETA,IL1F2,IL-1β
蛋白序列:DNA 序列编码人 IL-1β(GenBank: AAA72849.1)表达带有 His 标签在 C 末端
分子量:重组人 IL-1β包含 159 个氨基酸,预测理论分子量为 18.2kd
纯度:≥95%采用 SDS-PAGE 凝胶和高效液相色谱分析
内毒素:≤0.01EU/ug(凝胶法)
纯化方式:层析纯化
性状:白色疏松体
保存温度:2-8℃
有效期:24 个月
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SEA563Hu96T
白介素1β(IL1b)检测试剂盒
(酶联免疫吸附试验法)
适用生物:人
使用说明书
仅供体外研究使用,不用于临床诊断!
第12版(2016年05月修订)
[预期应用]
本试剂盒运用双抗体夹心ELISA法定量测定人血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL1b含量。
[试剂盒内容]
试剂名称数量试剂名称数量
96孔板(预包被)196孔板覆膜4
标准品2标准品稀释液1×20mL
检测溶液A1×120μL检测溶液A稀释液1×12mL
检测溶液B1×120μL检测溶液B稀释液1×12mL
TMB底物1×9mL终止液1×6mL
洗涤液(30×)1×20mL使用说明书1
[需自备的设备及试剂]
1、450±10nm滤光片的酶标仪(建议仪器使用前提前预热)
2、单道或多道微量移液器及吸头
3、稀释样品的EP管
4、蒸馏水或去离子水
5、吸水纸
6、盛放洗液的容器
7、0.01mol/L(或1×)磷酸缓冲盐(PBS),pH=7.0-7.2
[试剂盒的储存及有效期]
1、未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将标准品、检测溶
液A、检测溶液B以及96孔板保存于-20o C,其余试剂请置于4o C保存备用。
2、使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,此外,请将未使用酶标条用包含干燥剂的铝
箔袋装好,并拉紧密封铝箔袋,置于-20o C保存。
注意:
试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在首次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。
[标本的采集与保存]
1、血清:将收集于血清分离管中的全血标本在室温放置2小时或4o C过夜,然后1,000×g离心20分钟,取上
清即可,将上清置于-20o C或-80o C保存,避免反复冻融。
2、血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8o C1,000×g离心15分钟,
取上清即可检测,或将上清置于-20o C或-80o C保存,避免反复冻融。
3、组织匀浆:不同类型的组织制备匀浆的方法会有所不同
1)取适量组织块,在预冷PBS(0.01mol/L,pH=7.0-7.2)中清洗去除血液,匀浆前先称重。
2)将组织切成小块,均匀的放入放置在冰上的装有新鲜裂解缓冲液1的玻璃均质器中(微小的组织也要如此)。
(质量体积比=1:20-1:50,例如:1mL裂解缓冲液中加入20-50mg组织样本。)
3)将得到的悬浊液经过超声处理至澄清。
4)将制备好的匀浆液10,000×g离心5分钟,弃沉淀,上清即可用于检测或置于-20o C下保存。
4、细胞裂解液:在分析试验之前,细胞需利用以下方法处理:
1)贴壁细胞应该用冷PBS轻轻清洗,然后用胰蛋白酶消化,于1,000×g离心5分钟后收集。(悬浮细胞可通过离心直接收集)。
2)将收集到的细胞用冷PBS洗3次;
3)将浓度为107个细胞/毫升的悬浮细胞加入新鲜裂解缓冲液中,如果需要,细胞可以进行超声波处理至溶液澄
清。
4)将标本于2-8o C1,500×g离心10分钟,弃沉淀,上清即可用于检测或置于-20o C下保存。
5、细胞培养上清或其它生物标本:请1,000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20o C或-80o C保
存,避免反复冻融。
一般来说,常规样本的IL1b含量很低,但是其含量会在炎症或者其他刺激下升高。下面提供一种细胞刺激方法的示例:
THP1细胞(1×106/mL)用含10%胎牛血清,100U/mL青霉素,和100µg/mL硫酸链霉素的1640培养基培养。此后用10µg/mL的LPS和10µg/mL的ConA共同刺激,24h后收集细胞上清,离心后取上清留用。
注意:
1、以上标本均需密封保存,4o C保存小于1周,-20o C不超过1个月,-80o C不超过2个月。
2、标本出现溶血会影响最后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
3、标本使用前应缓慢均衡至室温,不应加热使之融解。
4、基于大量检测数据,我们推荐使用血清而不是血浆作为样本进行检测。
[试剂准备]
1、使用前将所有的试剂和标本缓慢均衡至室温(18-25o C),如果该试剂盒在一段时间内不能使用,请仅取出本
次试验所需的酶标条和试剂,并将剩余的酶标条及试剂按指定条件保存。
2、标准品(冻干品):每瓶标准品加入标准品稀释液1mL,盖好后室温静置大约10分钟,同时轻轻摇动(避免
起泡),其浓度为2,000pg/mL(贮液)。先将其稀释为1,000pg/mL(标准曲线最高浓度)后,再准备7个稀释标准品的EP管,每个EP管中加入500μL的标准品稀释液,如图所示依次倍比稀释成1,000pg/mL,500pg/mL, 250pg/mL,125pg/mL,62.5pg/mL,31.2pg/mL,15.6pg/mL,标准品稀释液(0pg/mL)直接作为空白孔。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
Tube123456789 pg/mL2,0001,00050025012562.531.215.60
3、检测溶液A及检测溶液B:Detection A及Detection B在使用前请用手甩几下或短暂离心处理,以使黏附
在管壁或瓶盖的液体沉积到管底。临用前分别以检测稀释液A或B1:100稀释(如:10μL检测溶液A/990μL 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100μL/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2mL。
4、浓洗涤液:580mL蒸馏水或去离子水加入20mL洗涤液(30×)稀释至600mL至工作液浓度。
5、底物溶液:请用灭菌的移液器和吸头吸取所需体积的TMB至另一干净容器中使用,容器中剩余的底物应予丢
弃,不要倒回TMB瓶中。
注意:
1、标准品的稀释不能直接在板中进行。
2、标准品请于临用前15分钟内配制。该标准品只能使用一次。
3、标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请使用相应的稀释液配制,稀释液不能混用。用移液枪轻轻
吹打充分混匀,避免起泡。为保证实验结果的准确性请使用微量吸管,并校准微量移液器。请依据所需的量精确配制,尽量不要使用微量配制的方法(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10μL),以避免造成浓度误差。
4、请勿重复使用已经稀释过的标准品、检测溶液A工作液和检测溶液B工作液。
5、洗涤液(30x)中如有结晶析出,请先温育至室温,轻轻混匀,至到结晶完全溶解再进行配制。
6、试剂盒中部分试剂为储存液,客户需配置成工作液后使用,在配置过程中可能因为纯净水质量差或水质污染,
以及实验中所用耗材洁净度差,造成实验结果不准确,甚至完全错误。请使用双蒸水配置。
[标本处理]
1、本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本
的可能使用量,预留充足的样本。
2、实验前应先预测样本中待测物浓度。当浓度不在标准曲线的范围内时,用户必须确定其特定实验的最佳样品
稀释倍数。如果样品中待测物浓度过高或过低,请对样本做适当的稀释或浓缩。样本稀释需用PBS。
3、若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
4、使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
5、若样本为细胞培养上清,因为该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存
在检测不出的情况。
6、某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹
配,而不被检测出。
7、建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会因蛋白降解或变性而导致实验结果偏差。