Removed_UCH-L1及其关联蛋白PTOV1对卵泡发育的影响
泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)和阿尔茨海默病(AD)的关系
论著·临床论坛CHINESE COMMUNITY DOCTORS 阿尔茨海默病典型病理学表现为淀粉样蛋白沉积、神经原纤维缠结、神经元减少、颗粒空泡变性等。
目前,其病因尚未完全明确。
泛素蛋白酶系统(UPS)是细胞内选择性降解蛋白的重要途径,能高效并高选择性降解细胞内大部分蛋白[1],对维持细胞的正常功能具有重要作用。
在神经细胞中,UPS 功能的降低造成多种病理状态出现。
UPS 发挥正常功能需要依靠去泛素酶(DUBs)的作用[2]。
而泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1),作为DUBs 一员[3],其水平的高低直接能影响UPS 的作用。
与此同时,UCHL1的含量在AD 患者的脑内被发现是降低的[4],这提示了UCHL1参与AD 的发病过程。
泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)蛋白水平下降和阿尔茨海默病(AD)在对AD 患者的研究中,异常堆积的蛋白引起了研究者们的重视:如β-淀粉样蛋白(A β)积聚形成老年斑;tau 蛋白过度磷酸化形成双螺旋丝和神经纤维缠结,并且他们发现神经纤维缠结的数目是与UCHL1含量成反比的。
Gong 等[5]的研究发现UCHL1蛋白水平在APP/PS1这种转基因阿尔茨海默病老鼠模型中是下降的。
如上所述,在阿尔茨海默病患者中和动物模型中,UCHL1蛋白水平都是下调的。
并且研究发现UCHL1水平的下调促进了tau 蛋白的磷酸化[6],而UCHL1蛋白的降解增加被发现能够使神经元遭受更多的损伤[7]。
泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)蛋白水平下降参与阿尔茨海默病(AD)的可能机制:①泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)的水解酶作用缺失:对帕金森病的研究显示,UCHL1水解酶功能的缺失与神经变性疾病的发生有关:Leroy 等发现I93M 突变增加了帕金森病患病的可能性,而这种突变导致UCHL1的水解功能部分缺失。
我们知道氧化应激是AD 的可能发病机制之一,在AD 患者的额叶皮质中,UCHL1是氧化损伤的主要蛋白,被氧化修饰的UCHL1丧失了20%~60%的水解酶活力。
mTOR与卵泡发育
mTOR与卵泡发育朱静;杨庆岭;孙莹璞【摘要】原始卵泡由单层扁平前颗粒细胞包围卵母细胞形成,是女性的基本生殖单位,其数目在胎儿期就已决定.随着年龄的增长,原始卵泡数量不断减少,其数目一定程度上代表了女性生育年限的长短.而哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)与细胞生长发育密切相关.在静止期卵母细胞与前颗粒细胞中,mTOR表达异常可导致细胞内蛋白合成增加,卵母细胞发育及颗粒细胞分裂、分化,使原始卵泡被激活,引发原始卵泡库过早耗竭,从而导致女性卵巢储备能力降低、生育年限缩短.近年来,mTOR及其介导的信号通路作为女性生育力保护的潜在靶点已成为生殖医学领域的研究热点.其对卵泡发育的调节作用,将为延缓女性卵巢衰老提供新思路.现从哺乳动物原始卵泡激活及其与mTOR信号网络的相关性等方面进行综述,并探讨其与女性不孕的关系.【期刊名称】《国际生殖健康/计划生育杂志》【年(卷),期】2019(038)002【总页数】4页(P150-153)【关键词】哺乳动物;西罗莫司;卵泡;卵巢;不育,女(雌)性【作者】朱静;杨庆岭;孙莹璞【作者单位】450000 郑州大学第一附属医院;450000 郑州大学第一附属医院;450000 郑州大学第一附属医院【正文语种】中文哺乳动物卵巢是由黄体及处于不同发育阶段的各级卵泡组成的异质性器官。
胎儿期卵巢内卵母细胞逐渐停止有丝分裂,进入第一次减数分裂并静止在双线期,双线期的卵母细胞被单层扁平前颗粒细胞(primordial follicle granulosa cells,pfGCs)包围形成原始卵泡[1],构成女性基本生殖单位,原始卵泡库的大小一定程度上决定了个体的生育年限[2]。
妊娠20周时胎儿原始卵泡的数目峰值可达六百万至七百万,此后逐渐下降,出生后卵巢中原始卵泡不到一百万[3]。
性成熟后,在下丘脑-垂体-卵巢轴的影响下,体内性激素水平发生改变,部分处在静止期的原始卵泡被募集,伴随着pfGCs的增殖分化卵母细胞进一步发育,最终形成卵丘细胞-卵母细胞复合体并完成排卵。
粘附分子在卵泡发育中的作用(一)
粘附分子在卵泡发育中的作用(一)关键词:粘附分子钙粘附素细胞外基质卵泡发育细胞粘附分子(celladhesionmolecules,CAMs)是一类细胞膜表面糖蛋白,介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质间的相互作用。
它们在胚胎发育和分化,正常组织结构的维持,炎症及免疫应答,伤口修复,凝血及肿瘤的进展和转移等多种生理和病理过程中均具有重要作用。
细胞粘附分子已逐渐成为各领域的研究热点之一。
近年来对细胞粘附分子在生殖中作用的研究已取得一定进展,本文就细胞粘附分子在卵泡发育及调控中的作用作一扼要综述。
的种类及生物学特性CAMs成员众多,已发现50多种,分属以下五大家族:一、钙粘附素(cadherin)家族全称为钙依赖性细胞粘附分子(calciumdependentcelladhesionmolecule),包括E-cadherin(见于成人上皮细胞),N-cadherin(见于成人神经和肌肉细胞)和P-cadherin(主要见于胎盘和上皮组织,亦可在发育阶段见于其他组织)。
钙粘附素主要参与介导同型细胞间的粘附作用,因此,它们在调节机体形态发生过程和维持成人组织的结构完整性与极性方面具有重要作用。
广泛分布于各种类型细胞表面,其粘附作用具有亲同源性,即表达同源性钙粘附素的细胞将发生粘附1]。
二、整合素(integrin)家族是一组细胞表面糖蛋白,其酸体为细胞外基质(extracellularmatix,ECM)成分,如纤连蛋白(fibronectin,FN)、纤维蛋白原(fibrinogen,FB)、胶原蛋白(collagen,CA)、体外粘连蛋白(vitronectin,FN)、层粘连蛋白(laminin,LN)。
整合素的主要功能为参与免疫细胞的粘附作用。
整合素均为α,β亚单位通过非共价健结合起来的异二聚体。
三、免疫球蛋白超家族成员众多,作为整合素配体的主要有二类:1.细胞间粘附分子(intercellularadhesionmolecule,-ICAM)与淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)相互作用是免疫球蛋白超家族之间相互作用的一个典型例子。
UCH-L1在乳腺癌中的表达及其与转移关系的研究
(中国医科 大 学基 础 医学 院病 理教 研室 , 阳 I00 ; 北京 大 学人 民医院 内分 泌科 0 级 八 年制研 究 生 , 京 104 ; 沈 i0 1 4 北 004 。 国医科 大学 附属 第一 医院病 理科 , 阳 100 ; 沈 阳药 科大 学生 命 科学 与生 物制 药 学院 药理 系生 理 教研 室 , 阳 中 沈 101 沈 101 ; 中 国医科 大学 基 础 医学 院化 学教 研 室 , 阳 100 ) 106 沈 10 1
[ 要 ] 目的 研 究 泛 素 羧 基 末 端 水 解 酶 L ( H— 1 与 磷 酸 化 p 8 pp8 在乳 腺 癌 组 织 、 胞 系 中 的 表 达 情 况 、 种 摘 1 UC L ) 3 (-3 ) 细 两 蛋 白 的 表 达 与 临 床 病 理 特 征 的关 系 以及 UC I1 乳 腺 癌 侵 袭 转 移 的关 系 。 法 用 免 疫 组 织 化 学 方 法 检 测 乳 腺 癌 组 织 中 H— 与 方 UCH— 1与 pp 8 白的 表 达 情 况 , W etr lt 法 检 测 乳 腺 癌 组 织 以及 细 胞 系 中 UCH— 1与 pp 8蛋 白 的 表 达 情 况 。 L -3 蛋 用 senBo 方 I -3 应 用 UC L H— 1特 异 性 抑 制 剂 作 用 于乳 腺 癌 高 侵 袭 高 转 移 细 胞 系 MD MB 4 5 后 , Wetr lt 察 UC L A— -3 s 用 senBo 观 H— 1与 pp 8蛋 -3 白表 达 改 变 的 情 况 , Trn we 实 验 检 测 MDA MB4 5 细 胞 侵 袭 潜 能 的 改 变 。结 果 UC L 用 as 1 1 - -3 s H— 1和 pp 8蛋 白在 乳 腺 浸 润 -3 性 导 管 癌 中 的 表 达 高 于 其 在 癌 旁 正 常乳 腺 组 织 中的 表 达 ( P一0 0 2 . 1 ,P: 0 0 1 , 者 呈 正 相 关 ( : 0 3 7 P一 0 0 0 , 与 .0 )二 r . 9, .0)并 乳 腺癌 的 T NM 分 期 ( P:0 0 7 P一0 00 、 巴结 转 移 情 况 ( .1 , . 1 )淋 P一0 0 3 P一 0 0 1 相 关 。乳 腺 上 皮 细 胞 系 MC -0 乳 腺 .3 , .2) F 1 A、 癌 低 侵 袭 低 转 移 细 胞 系 MC - F 7和 乳 腺 癌 高 侵 袭 高 转 移 细 胞 系 MD — -3 s中 两 种 蛋 白 表 达 水 平 呈 递 增 趋 势 ( 均 < 0 A MB 4 5 P .
石斑鱼卵巢预处理技术及其对胚胎发育的影响
石斑鱼卵巢预处理技术及其对胚胎发育的影响石斑鱼(Epinephelus lanceolatus)是一种优质、高价值的海水养殖鱼类,其生殖受季节影响,繁殖期一般在每年7月至9月。
在实际繁殖过程中,卵巢预处理技术是一个非常重要的环节,可以影响石斑鱼的繁殖效率和胚胎发育。
本文将介绍石斑鱼卵巢预处理技术及其对胚胎发育的影响。
石斑鱼卵巢预处理技术卵巢预处理技术是指在石斑鱼产卵前,对雌鱼卵巢内的卵泡进行处理,以促进卵的发育和成熟。
常见的卵巢预处理技术包括人工授精、激素处理和低温处理等。
人工授精是指将雄鱼的精液通过人工方式注入到雌鱼体内,使雌鱼卵子受精。
这种技术适用于石斑鱼繁殖期间雄鱼数量不足的情况,但其成本较高,操作难度大。
激素处理是指在石斑鱼繁殖前,将雌鱼注射一定量的人工合成激素,以促进卵泡发育和成熟。
该技术可提高雌鱼产卵量,但可能会对其产生不良影响,如免疫抑制、肾功能受损等。
低温处理是指将雌鱼暴露在低温环境下,使其内分泌系统发生调整,加速卵泡生长和成熟。
该技术操作简单,成本低廉,但实验和实际应用中存在不同效果。
石斑鱼卵巢预处理技术影响胚胎发育卵巢预处理技术不仅可以影响石斑鱼的产量和储备,还可以对胚胎发育产生影响。
在激素处理中,可增加卵的产生和卵黄囊的质量,从而提高受精率和胚胎的成活率。
但高浓度激素可能抑制鱼种雌激素和孕激素的分泌,进而影响胚胎与母体的关系,导致生长和成活率下降。
在低温处理中,常见的方法是将雌鱼放置在10摄氏度左右的水体中,可促使卵泡发生细胞分裂和DNA修复,提高受精率和胚胎成活率。
但不同的低温加工时间、处理温度和处理方式会对胚胎发育产生不同的影响。
因此,为了获得最佳的卵巢预处理技术和胚胎发育效果,需要根据具体情况,采取不同的预处理技术和应用方式。
结语卵巢预处理技术在石斑鱼繁殖中起着至关重要的作用,不仅影响雌鱼产卵量和储备,还会对胚胎发育产生影响。
因此,在熟悉各项技术的优缺点、特点和应用范围的基础上,科学制定卵巢预处理计划,才能获得最佳的繁殖效果和经济效益。
更生霉素和依托泊苷对卵巢功能的影响及西曲瑞克的保护作用
结果: 1.给药结束后处死的各组小鼠卵泡数量比较:KSM组和VPl6组的 各级卵泡数和总卵泡数与对照组比较无差异;CTX组各级卵泡数和总卵 泡数明显少于对照组(P<0,05),其中,原始卵泡的数量减少了55%:西 曲瑞克组小鼠的窦前卵泡和窦卵泡数量(2.4±1.3,1.2±1.3)与对照组(5.8 ±1.9,4.0±1.6)相比明显减少(P<0.05),但是,原始、初级、次级和 总卵泡数未减少:与CTX组比较,CTX+西曲瑞克组的原始卵泡和总卵 泡数明显增加(P<0.05),分别增加了2.06倍和1.96倍,而与对照组比 较,卵泡数量无差异。 2.比较同一组两个不同时怕J点(给药后处死和哺乳期后处死)的卵 泡数量,KSM组和VPl6组均无差异:西曲瑞克组的窦卵泡数由1 2±1 3
killed after given medicine:there was no significant difference between KSM group,VPl6 group and control group.All levels follicular numbers and total follicular numbers in CTX group were significantly fewer than those in the control group(P<0.05),the primordial follicle reduced 55%.In cetrorelix group,preantral and antral follicular numbers were significantly
《EFEMP1与IZUMO1的相互作用及对受精的影响》范文
《EFEMP1与IZUMO1的相互作用及对受精的影响》篇一一、引言在生殖生物学领域,受精过程是一个复杂而精细的生理过程,涉及到多种蛋白质和分子的相互作用。
EFEMP1(EGF-like domain multiple containing protein 1)和IZUMO1(IZUMODULIN 1)是两种重要的生殖相关蛋白,它们在受精过程中起着关键作用。
本文将详细探讨EFEMP1与IZUMO1之间的相互作用及其对受精的影响。
二、EFEMP1与IZUMO1的概述EFEMP1是一种富含表皮生长因子(EGF)样结构域的蛋白,具有多种生物学功能,包括参与细胞增殖、迁移和分化等过程。
IZUMO1则是一种在精子中高度表达的蛋白,其功能主要与精子-卵子识别和融合有关。
三、EFEMP1与IZUMO1的相互作用研究表明,EFEMP1与IZUMO1之间存在相互作用。
在受精过程中,EFEMP1可能通过与IZUMO1结合,调节精子的运动和穿透能力,从而影响精子与卵子的结合。
此外,EFEMP1还可能通过其他途径影响IZUMO1的功能,如调节其表达水平或改变其空间分布等。
四、EFEMP1与IZUMO1对受精的影响1. 精子-卵子识别与融合:IZUMO1在精子-卵子识别和融合过程中发挥关键作用。
EFEMP1的参与可能加强了这一过程的效率,通过促进精子的运动和穿透能力,提高了精子与卵子的结合几率。
2. 卵子激活:在受精过程中,精子的进入会触发卵子的激活过程。
EFEMP1与IZUMO1的相互作用可能对卵子激活产生一定影响,如调节相关信号通路的活性或影响相关基因的表达等。
3. 胚胎发育:受精后,胚胎的发育受到多种因素的影响。
EFEMP1和IZUMO1的相互作用可能对胚胎发育产生一定影响,如影响胚胎细胞的增殖、迁移和分化等过程。
五、结论综上所述,EFEMP1与IZUMO1之间的相互作用在受精过程中具有重要影响。
它们不仅参与了精子-卵子的识别和融合过程,还可能对卵子激活和胚胎发育产生影响。
《DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》范文
《DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》篇一摘要:本研究旨在探讨DEHP(邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯)如何通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路影响早期卵泡发生。
通过实验观察DEHP对卵泡发育的影响,以及GDF9和Hedgehog信号分子在其中的作用,以期为环境污染对女性生殖健康的影响提供科学依据。
一、引言近年来,环境污染物对生物体特别是女性生殖系统的影响逐渐受到关注。
DEHP作为一种常见的环境污染物,其潜在的生殖毒性已引起广泛关注。
卵泡发育是女性生殖系统的重要过程,早期卵泡发生对于女性生育能力至关重要。
因此,研究DEHP对早期卵泡发生的影响及其作用机制具有重要意义。
二、材料与方法1. 实验材料:选用小鼠卵巢组织、卵泡细胞等。
2. 方法:(1)建立DEHP暴露模型,观察DEHP对小鼠卵巢组织及卵泡发育的影响;(2)检测GDF9和Hedgehog信号分子的表达变化;(3)通过基因敲除、药物干预等手段,探讨GDF9-Hedgehog信号通路在DEHP抑制早期卵泡发生中的作用;(4)运用生物信息学分析、统计学方法等对实验数据进行处理和分析。
三、实验结果1. DEHP暴露导致小鼠卵巢组织及卵泡发育受损,早期卵泡发生率降低;2. GDF9和Hedgehog信号分子的表达在DEHP暴露后发生改变;3. GDF9-Hedgehog信号通路在DEHP抑制早期卵泡发生中起重要作用;4. 通过基因敲除或药物干预抑制GDF9-Hedgehog信号通路,可加重DEHP对早期卵泡发生的抑制作用。
四、讨论本研究表明,DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生。
这一发现可能有助于解释环境中污染物对女性生殖系统的影响。
GDF9和Hedgehog信号分子在卵泡发育过程中起关键作用,其表达变化的机制值得进一步研究。
此外,环境污染对女性生殖健康的影响应引起高度重视,采取有效措施减少环境污染物对生殖系统的潜在危害。
《2024年DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》范文
《DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》篇一一、引言环境污染物邻苯二甲酸二(2)己酯(DEHP)已被广泛认为与人类生殖健康风险有关。
随着生殖医学研究的深入,越来越多的研究关注DEHP对早期卵泡发育的影响。
本篇论文旨在探讨DEHP如何通过抑制生长分化因子9(GDF9)与Hedgehog信号通路的相互作用,进而抑制早期卵泡的发生。
二、文献综述近年来,GDF9与Hedgehog信号通路在卵泡发育过程中的作用逐渐被揭示。
GDF9作为一种重要的生长因子,在促进卵泡生长发育中起到关键作用,而Hedgehog信号通路在调节卵巢功能方面也有重要作用。
DEHP的潜在生殖毒性与其干扰内分泌系统及干扰细胞信号传导的能力密切相关。
因此,探究DEHP如何影响GDF9-Hedgehog信号通路对于理解早期卵泡发育的调控机制具有重要意义。
三、方法本研究采用体外实验与体内实验相结合的方法,首先通过细胞培养实验观察DEHP对卵泡发育过程中相关基因表达的影响,随后利用动物模型进一步验证DEHP对早期卵泡发育的抑制作用,并探究其通过GDF9-Hedgehog信号通路的潜在机制。
四、结果1. 体外实验结果表明,DEHP处理后,GDF9与Hedgehog信号通路相关基因的表达显著下降,提示DEHP可能通过抑制这两个信号通路的相互作用来影响卵泡发育。
2. 体内实验进一步证实了DEHP对早期卵泡发育的抑制作用,表现为卵巢组织中卵泡数量减少,发育停滞等现象。
3. 通过分子生物学手段,我们发现DEHP可能通过干扰GDF9的受体表达或Hedgehog信号通路的下游效应分子,从而阻断这两个信号通路的正常传导。
五、讨论本研究表明,DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路,对早期卵泡发育产生不利影响。
这一发现有助于我们更好地理解DEHP的生殖毒性机制,为预防和治疗由环境污染物引起的生殖健康问题提供理论依据。
然而,本研究仍存在一定局限性,如未能深入探讨DEHP具体作用靶点及信号通路的具体调控机制等。
辅酶I制剂在生殖健康中的作用及机制研究进展
辅酶I制剂在生殖健康中的作用及机制研究进展前言:辅酶I(coenzyme I,CoI)是一种重要的生物活性物质,广泛存在于细胞内,对于细胞代谢过程中的能量产生和调节具有重要作用。
近年来,越来越多的研究表明辅酶I制剂在生殖健康中具有一定的作用,本文将介绍辅酶I制剂在生殖健康方面的作用及其可能的机制,并综述研究进展。
一、辅酶I制剂在男性生殖健康中的作用及机制1. 精子质量和数量的改善:辅酶I制剂通过调节细胞内能量代谢过程,促进精子质量和数量的提高。
研究发现,辅酶I能够增加精子的运动速度和存活率,提高精子的活力和精子发生率。
辅酶I还能够减少精子的异常形态和DNA损伤,改善精子质量,从而增加受孕率。
2. 抗氧化作用:辅酶I制剂具有一定的抗氧化作用,可减少细胞内自由基的产生,增强生殖细胞的抗氧化能力。
研究发现,辅酶I通过调节抗氧化相关的基因表达,提高抗氧化酶活性,降低氧化应激对生殖细胞的损伤,保护精子和卵子的健康。
3. 改善睾丸功能:辅酶I制剂对睾丸的功能有一定的改善作用,能够提高睾丸组织的抗氧化能力,减轻细胞凋亡和炎症反应,保护正常睾丸组织。
此外,辅酶I还能够调节睾丸激素的分泌,提高睾丸功能,促进精子的生成和发育。
二、辅酶I制剂在女性生殖健康中的作用及机制1. 促进卵巢功能:研究发现,辅酶I制剂对卵巢组织具有保护作用,能够调节卵巢激素分泌,提高卵巢功能;同时,辅酶I还能够抑制卵巢组织的氧化应激和炎症反应,减轻卵巢衰老过程,增加卵子数量和质量。
2. 减少卵子的氧化损伤:辅酶I制剂具有一定的抗氧化作用,可减少卵子中自由基的产生,提高卵子的抗氧化能力。
研究发现,辅酶I能够增加卵子的存活率和受精率,减少卵子的染色体异常和DNA损伤,降低胚胎发育的风险。
3. 提高子宫环境质量:辅酶I制剂对子宫内膜有一定的影响,能够促进子宫内膜的增厚和血供,改善子宫环境质量。
研究发现,辅酶I能够促进子宫内膜细胞的增殖和分化,提高子宫内膜的黏附性和着床率,增加妊娠的成功率。
《2024年DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》范文
《DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》篇一一、引言随着环境污染的日益严重,邻苯二甲酸二酯(DEHP)作为一种常见的环境污染物,其对人体及生物体的潜在危害逐渐受到关注。
卵泡是女性生殖系统的重要组成部分,早期卵泡发生过程是卵泡发育的关键阶段。
本研究关注的是DEHP如何通过影响GDF9-Hedgehog信号通路来抑制早期卵泡的发生,进而为环境保护和人类健康提供新的理论依据。
二、DEHP对早期卵泡发生的影响研究发现,DEHP暴露会显著抑制早期卵泡的发生。
在动物实验中,DEHP处理后的卵巢组织中,初级卵泡和次级卵泡的数量明显减少,表明DEHP对卵泡发育具有显著的抑制作用。
三、GDF9-Hedgehog信号通路在卵泡发生中的作用GDF9(Growth and differentiation factor 9)和Hedgehog信号通路在卵泡发生过程中起着至关重要的作用。
GDF9是一种生长分化因子,能够促进卵泡的发育和成熟;而Hedgehog信号通路则是一种重要的细胞信号传导途径,对卵泡的生长发育具有调控作用。
因此,GDF9-Hedgehog信号通路的正常运作对于维持卵泡的正常发育至关重要。
四、DEHP对GDF9-Hedgehog信号通路的抑制作用研究结果表明,DEHP能够通过多种途径抑制GDF9-Hedgehog信号通路的活性。
首先,DEHP能够干扰GDF9基因的表达,从而降低其促卵泡发育的作用。
其次,DEHP还能够影响Hedgehog信号通路的传导过程,阻断信号的传递,进而影响卵泡的正常发育。
五、机制探讨具体而言,DEHP可能通过与细胞内的受体结合,干扰基因表达和信号传导过程。
此外,DEHP还可能影响细胞的代谢过程,导致细胞内环境的变化,进而影响GDF9-Hedgehog信号通路的活性。
这些变化最终导致卵泡发育受阻,进而影响女性的生殖健康。
六、结论本研究表明,DEHP能够通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路来抑制早期卵泡的发生。
Ptov1和Uchl1参与胚胎着床过程的证据以及中药干预着床障碍的机制的开题报告
Ptov1和Uchl1参与胚胎着床过程的证据以及中药干预着床障碍的机制的开题报告
胚胎着床是胚胎发育过程中非常重要的一步,在此过程中,胚胎需
要与子宫内膜紧密结合,才能得到充足的营养和氧气,继续生长和发育。
然而,由于生殖道环境等因素的干扰,胚胎着床障碍成为影响妊娠成功
率的主要因素之一。
因此,研究胚胎着床过程以及干预着床障碍的机制
具有重要的临床意义。
研究表明,Ptov1和Uchl1是参与胚胎着床过程的关键基因。
Ptov1
主要参与早期粘附过程,与胚胎紧密结合;Uchl1则参与晚期植入过程,有助于胚胎准确地穿透子宫内膜。
多项研究证实,Ptov1和Uchl1蛋白在胚胎着床期间都有明显表达,而它们的缺失可能导致胚胎着床失败。
中药作为一种传统的治疗方法,在干预着床障碍方面也有独特的优势。
以“叶酸干预”的中药治疗为例,一项研究表明,一些中药如当归
或黄芪等中草药均可以提高子宫内膜中的叶酸含量,从而促进胚胎着床。
研究也表明,通过影响对胚胎着床相关基因的表达,中药还可以调节胚
胎着床信号通路,从而提高妊娠成功率。
在研究胚胎着床过程和着床障碍干预的机制方面,还存在一些问题
和争议。
需要进一步研究着床信号通路、表观遗传学等细胞机制,同时
通过临床试验验证中药治疗的有效性和安全性。
这样的研究将有助于提
高胚胎着床成功率,并推进中医药在生殖医学领域的应用。
卵泡液中细胞因子与卵泡发育及妊娠结局的相关性
卵泡液中细胞因子与卵泡发育及妊娠结局的相关性宝鲁日;陈秀娟;王丽岩【期刊名称】《国际生殖健康/计划生育杂志》【年(卷),期】2016(035)001【摘要】随着体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)技术水平的日益提高,卵巢微环境中调节卵母细胞发育的细胞因子的作用受到广泛关注.细胞因子作为一类具有广泛生物学活性的激素样多肽调控生殖过程,它们通过调节卵巢内分泌或旁分泌,进而影响卵泡成熟、胚胎发育及胚泡着床等环节来参与生殖调节.研究表明不孕可能与卵泡液中某些细胞因子(如血管内皮生长因子、粒细胞集落刺激因子、活性氧簇、胰岛素样生长因子、白细胞介素、白血病抑制因子等)的异常表达引发的卵泡成熟障碍有关.因而,加强卵泡液中细胞因子的研究将有助于提高IVF-ET的临床妊娠率.【总页数】4页(P47-50)【作者】宝鲁日;陈秀娟;王丽岩【作者单位】010010 呼和浩特,内蒙古医科大学病理教研室;内蒙古医科大学附属医院生殖中心;内蒙古医科大学附属医院生殖中心【正文语种】中文【相关文献】1.卵泡液微环境与体外受精-胚胎移植妊娠结局相关性研究进展 [J], 叶朝阳;金志春;彭文苗;刘敏;吴艳婷2.卵泡液细胞因子与IVF-ET妊娠结局相关性研究 [J], 吴艳婷;刘敏;金志春3.卵泡液中白细胞介素2、白细胞介素12、白细胞介素18与体外受精-胚胎移植妊娠结局的相关性 [J], 王秀霞;王天任;何丽霞;孔琳;徐小延;杨大磊4.人卵泡液中干细胞因子水平及其对卵泡发育的影响 [J], 王桂红;赵海波;辛晓燕5.血清及卵泡液中25-羟维生素D与体外受精-胚胎移植妊娠结局的相关性 [J], 路红琴;何玉洁因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
UCH-L1在乳腺癌中的表达及其与转移关系的研究
UCH-L1在乳腺癌中的表达及其与转移关系的研究陈晓玲;李照青;宋敏;崔巍;李柘林【摘要】Objective To investigate the expression of Ubiquitin carboxy terminal hydrolase L1 (UCH-L1) protein and Phospho-p38 (p-p38) protein in breast cancer tissue and cell lines, and to explore their correlation with clinicopathological characteristics and with metastatic ability of breast cancer. Methods Immunohistochemical method (S-P method) was applied to detect the expression of UCH-L1 and p-p38 proteins in breast cancer tissues, and Western blot was applied to detect their expression in breast cancer tissues and cell lines. We investigated their expression in MDA-MB-435s cells treated with the specific inhibitor of UCH-L1, and the alleration in invasive and migratory potentials was assessed by malrigel invasion assay. Results The expression of UCH-L1 and p-p38 proteins in breast cancer samples was significantly higher than that in normal breast tissue beside the tumor(P = 0. 012, P = 0. 001), while these changes were correlated with clinical TNM staging(P = 0. 017,P = 0. 010,) and lymphatic metastasis (P = 0. 033,P = 0. 021)in breast cancer. The expression of p-p38 and UCH-L1 proteins showed a gradual increase in breast epithelial cell line MCF-10A, breast cancer cell lines MCF-7 and MDA-MB-435s. The decreased UCH-L1 expression resulted in the decreased expression of the p-p38 protein and the decreased invasive and migratory potentials of MDA-MB-435s cells in a dose-dependent manner (P<0. 05). Conclusion The over-expression of UCH-L1 and p-p38 is correlated with clinical TNMstaging and lymphatic metastasis in breast cancer. UCH-L1 may mediate breast cancer metastasis by up-regulating p-p38.%目的研究泛素羧基末端水解酶LI(UCH-L1)与磷酸化p38(p-p38)在乳腺癌组织、细胞系中的表达情况、两种蛋白的表达与临床病理特征的关系以及UCH-L1与乳腺癌侵袭转移的关系.方法用免疫组织化学方法检测乳腺癌组织中UCH-L1与p-p38蛋白的表达情况.用Western Blot方法检测乳腺癌组织以及细胞系中UCH-L1与p-p38蛋白的表达情况.应用UCH-L1特异性抑制剂作用于乳腺癌高侵袭高转移细胞系MDA-MB-435s后,用Western Blot观察UCH L1与p-p38蛋白表达改变的情况,用Transwell实验检测MDA-MB-435s细胞侵袭潜能的改变.结果 UCH-L1和p-p38蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达高于其在癌旁正常乳腺组织中的表达(P=0.012,P=0.001),二者呈正相关(r=0.397,P=0.000),并与乳腺癌的TNM分期(P=0.017,P=0.010)、淋巴结转移情况(P=0.033,P=0.021)相关.乳腺七皮细胞系MCF-10A.乳腺癌低侵袭低转移细胞系MCF-7和乳腺癌高侵袭高转移细胞系MDA-MB-435s中两种蛋白表达水平呈递增趋势(P均<0.05).UCH-L1特异性抑制剂可以浓度依赖性地下调MDA-MB-435s细胞系中p-p38蛋白的表达水平(P 均<0.05),并能抑制乳腺癌细胞的侵袭转移潜能.结论 UCH-L1、p-p38过表达与乳腺癌的TMN分期、淋巴结转移有关.UCH-L1可能通过上调p-p38介导乳腺癌转移.【期刊名称】《中国组织化学与细胞化学杂志》【年(卷),期】2012(021)002【总页数】7页(P171-177)【关键词】UCH-L1;p38;乳腺癌;转移【作者】陈晓玲;李照青;宋敏;崔巍;李柘林【作者单位】中国医科大学基础医学院病理教研室,沈阳110001;北京大学人民医院内分泌科,北京100044;中国医科大学基础医学院病理教研室,沈阳110001;中国医科大学附属第一医院病理科,沈阳110001;沈阳药科大学生命科学与生物制药学院药理系生理教研室,沈阳110016;中国医科大学基础医学院化学教研室,沈阳110001【正文语种】中文【中图分类】R737.9乳腺癌是女性一种常见的恶性肿瘤,在我国其发病率呈逐年上升趋势,淋巴结转移是乳腺癌早期和最常见的转移途径,也是影响乳腺癌患者预后的主要因素之一。
血清IL-1β、HIF-1α、UCH-L1在早产儿WMD诊断及预后评估中的价值
血清IL-1β、HIF-1α、UCH-L1在早产儿WMD诊断及预后评估中的价值沈小蕊;梅娥;程瑞琳;王懿【期刊名称】《中国妇幼健康研究》【年(卷),期】2022(33)4【摘要】目的探讨血清白细胞介素-1β(IL-1β)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、泛素羧基末端水解酶-L1(UCH-L1)在早产儿脑白质损伤(WMD)诊断及预后评估中的价值。
方法选取2017年3月至2019年3月于我院诊断的64例WMD早产儿(病例组)和同期64例无WMD早产儿(对照组)作为研究对象。
检测两组患儿出生后1天、3天的血清IL-1β、HIF-1α、UCH-L1水平,分析早产儿发生WMD的影响因素,评价上述血清指标对早产儿WMD的诊断价值;随访至纠正胎龄6个月,分析各血清指标与患儿预后的相关性及预测价值。
结果病例组患儿出生后1d、3d血清IL-1β、HIF-1α、UCH-L1水平显著高于对照组(t_(1d)值分别是6.387、7.950、3.329,t_(3d)值分别是7.769、6.741、5.062,P<0.05);病例组中,重度患儿出生后1d、3d的上述各项血清指标也均明显高于轻度患儿(t_(1d)值分别是2.582、2.028、2.570,t_(3d)值分别是3.653、2.338、2.765,P<0.05)。
出生后1d和3d的血清IL-1β、HIF-1α、UCH-L1均为早产儿发生WMD的独立危险因素(OR_(1d)值分别为2.786、2.809、2.789,OR_(3d)值分别为2.831、2.807、2.756,P<0.05)。
出生后3d血清HIF-1α对早产儿WMD有最佳诊断价值(AUC=0.817)。
随访至纠正胎龄6个月发现,CDCC评分异常者出生后1 d、3 d的血清IL-1β、HIF-1α、UCH-L1水平显著高于正常患儿(t_(1d)值分别是2.977、2.278、4.393,t_(3d)值分别是2.728、2.217、3.673,P<0.05);上述各血清指标与早产儿预后呈负相关(r_(2d)值分别是-0.345、-0.427、-0.631,r_(2d)值分别是-0.436、-0.441、-0.454,P<0.05);出生后3d血清UCH-L1对患儿预后不良的预测价值最大(AUC=0.727)。
mTOR通路参与卵泡生长发育相关机制的研究进展
mTOR通路参与卵泡生长发育相关机制的研究进展
曹婉宁;董晓英
【期刊名称】《生殖医学杂志》
【年(卷),期】2016(25)5
【摘要】哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路负责调控细胞生长发育,对卵泡的调节起关键作用.mTOR通路上下游的相关基因和蛋白具有不同的作用,各种因素激活相关通路后,对卵泡的发育生长起到反馈或级联放大的作用,最终都可能引起卵泡的过度增殖或抑制,从而导致卵巢早衰.在中西医治疗卵巢早衰和调节卵泡发育过程中,其治病机制与mTOR通路关系密切.本文探讨mTOR通路参与卵泡生长发育的作用机制,并从调节信号通路的视角,对未来卵巢早衰的治疗进行展望.
【总页数】4页(P469-472)
【作者】曹婉宁;董晓英
【作者单位】首都医科大学基础医学院,北京100069;首都医科大学中医药学院,北京100069
【正文语种】中文
【相关文献】
1.PI3K/Akt/mTOR通路在炎症相关疾病中分子机制研究进展 [J], 嵇莹莹;龚国清
2.CA916798基因通过PI3K/AKT/mTOR通路参与顺铂耐药的机制分析 [J], 亓占中;王宇亮;周向东
3.哺乳动物卵泡生长发育相关分子通路研究进展 [J], 宋嘉哲;李文哲;薛恺
4.PI3K/Akt/mTOR通路在炎症相关疾病中分子机制研究进展 [J], 嵇莹莹;龚国清;
5.PI3K/AKT/mTOR通路及免疫球蛋白参与的肉芽肿性小叶乳腺炎发病机制研究[J], 赵阳;王西京;张淑群;康华峰;管海涛;靳耀锋;单昌友;刁岩
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《DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》范文
《DEHP通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路抑制早期卵泡发生》篇一一、引言近年来,随着环境污染物对生物体健康的影响逐渐受到关注,邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)作为一种常见的环境污染物,其对人体及生物体生殖系统的影响已成为研究的热点。
卵泡是女性生殖系统的重要组成部分,其发育过程受到多种信号通路的调控。
本研究旨在探讨DEHP如何通过抑制GDF9-Hedgehog 信号通路来抑制早期卵泡发生的机制。
二、DEHP与早期卵泡发生早期卵泡发生是指原始卵泡向初级卵泡发育的过程,是女性生殖系统发育的重要阶段。
研究显示,DEHP可对卵泡发育产生不利影响,导致卵泡数量减少、质量下降等问题。
然而,DEHP 影响卵泡发育的具体机制尚不明确。
三、GDF9-Hedgehog信号通路与卵泡发育GDF9(Growth and differentiation factor 9)和Hedgehog信号通路在卵泡发育过程中起着重要作用。
GDF9是一种生长分化因子,参与调控卵泡的生长发育;Hedgehog信号通路则是一种重要的细胞信号传导途径,对卵泡的发育和功能维持具有重要作用。
因此,我们假设DEHP可能通过抑制GDF9-Hedgehog信号通路来影响卵泡发育。
四、DEHP对GDF9-Hedgehog信号通路的抑制作用研究表明,DEHP可以抑制GDF9的表达,进而影响Hedgehog信号通路的活性。
具体而言,DEHP可能通过干扰GDF9与下游分子的相互作用,抑制Hedgehog信号通路的传导,从而影响卵泡的正常发育。
此外,DEHP还可能通过影响Hedgehog配体的表达和分布,进一步加剧对卵泡发育的抑制作用。
五、实验验证与结果分析为了验证上述假设,我们进行了相关实验。
结果显示,在暴露于DEHP的环境中,GDF9的表达水平显著降低,Hedgehog信号通路的活性受到抑制。
同时,早期卵泡的发生率也显著降低。
进一步分析表明,DEHP对GDF9-Hedgehog信号通路的抑制作用与剂量和时间呈正相关关系。
《2024年EFEMP1与IZUMO1的相互作用及对受精的影响》范文
《EFEMP1与IZUMO1的相互作用及对受精的影响》篇一一、引言在生殖生物学领域,受精过程是一个复杂而精细的生理过程,涉及到多种蛋白质和分子的相互作用。
EFEMP1(Elastin Fibril Interacting Protein 1)和IZUMO1(一种膜相关蛋白)作为关键分子参与这一过程,它们的相互作用对于成功受精具有重要影响。
本文将详细探讨EFEMP1与IZUMO1之间的相互作用及其对受精的影响。
二、EFEMP1与IZUMO1的结构与功能EFEMP1是一种弹力纤维相互作用的蛋白,它在弹力蛋白介导的细胞间连接和细胞外基质(ECM)的组装中发挥重要作用。
而IZUMO1则是一种在精子细胞中表达的膜相关蛋白,它对于精子的成熟和受精过程至关重要。
三、EFEMP1与IZUMO1的相互作用EFEMP1与IZUMO1之间的相互作用主要通过以下两种方式进行:首先,EFEMP1可能通过与精子表面的IZUMO1蛋白结合,参与精子与卵子膜之间的融合过程。
这一过程是受精过程中至关重要的一步,涉及细胞的识别、附着和穿透等关键环节。
其次,二者可能共同调控精子和卵子之间的信号传导,影响受精卵的发育潜能。
四、EFEMP1与IZUMO1相互作用对受精的影响EFEMP1与IZUMO1之间的相互作用对受精过程具有重要影响。
首先,这种相互作用有助于提高精子的穿透能力,使精子能够更有效地穿透卵子膜并与之结合。
其次,二者共同参与的信号传导过程有助于优化胚胎的发育潜能,提高受孕成功率。
此外,当EFEMP1或IZUMO1表达异常时,可能导致受精过程受阻,影响胚胎的发育和成功受孕。
五、结论综上所述,EFEMP1与IZUMO1之间的相互作用在受精过程中发挥着重要作用。
这种相互作用有助于提高精子的穿透能力和胚胎的发育潜能,从而对成功受孕具有重要意义。
然而,目前关于EFEMP1与IZUMO1的研究尚处于初步阶段,其具体机制和影响因素仍需进一步探讨。
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旦大学硕士学位论文U C H一L I及其关联蛋白P T O V I对卵泡发育的影响500火g离心3m i n,取沉淀物,用500林1E B洗涤6次。
加入1xs D s l oadi ng bufl笼l,15川,煮沸sm in以洗脱特异吸附的蛋白。
2)对于tu c H一L l的检测,经封闭的印迹膜在15林留m l终浓度的抗tU C H一Ll单克隆抗体3的封闭液中,室温下温和振荡1h。
T B s T洗膜2次,每次1sm in。
用碱性磷酸酶标一记山羊抗鼠IgG作为孵育的二抗,然后用B CI P汹B T kit(Z卿ed L ab.In c.)显色。
3)对于M P F组分的检测,利用兔抗人cy cl i n B l多克隆抗体和兔抗人p34c dc Z多克隆抗体,室温孵育1.sh:T B sT洗膜3次,每次lom i n,加入碱性磷酸酶标记的山羊抗兔I gG二抗,室温振荡孵育1h;T B sT洗膜3次,每次15m i n,然后用B C I P/N B T k i t显色。
三、实验结果.t U C H一L l在自然生长的未冬眠蟾蛛各种组织中的表达水平按B rad ford法测定后得出的卵母细胞总蛋白浓度,分别取20林g蟾蛛组织蛋白进行免疫印迹反应。
结果表明,tU C H一Ll被显示为大约28k D a的单一条带。
t U C H一L l在大脑、精巢和卵巢蛋白含量丰富,在皮肤、肾、肺、和心脏呈现弱表达;在肝和肌肉未检测到。
tU C H一Ll在蟾蛛的不同组织分布特点,和高等脊椎动物,如哺乳类的情况类似。
在脑和生殖腺特异性高表达,而在其它的组织表达水平较低。
夔黔缈黔28K D a 罐蘸疆黔i~颧才1234567S M了28K D a娜瞬蜘爵~耀耀黔91011121314M图 1.1显示tU C H一L1在蟾蛛不同组织的分布特异性。
蟾蛛的不同组织可溶性蛋白提取物,利用t U C H一L1鼠单克隆抗体进行免疫印迹分析,D A B显色。
各泳道的上样量分别为各组织的20林g可溶性蛋白提取物。
泳道1:脑;2:皮肤;3:精巢;4:胃;5:月十;6:小肠;7:重组表达的tU C H一Ll;8:卵母细胞;9:’肾;10:骨骼肌;11:肺;12:心脏;13:卵巢;14:重组表达的tU C H一Ll;M:蛋自m ar ker。
箭头所指为tu e H一L I的杂交条带。
2.冬眠阻断对t U C H一L l在卵母细胞内定位的影响在未长足卵母细胞,t U C H一Ll均一性地分布于细胞质;在长足的卵母细胞,仍然广泛分布于细胞质,但在近质膜的外围胞质密度较高。
在I期和H期卵,主要在细胞质中均匀分布,而在IV期卵,则表现出卵母细胞核与近质膜处的集中分布。
免疫荧光结果显示(图1.2F一H)高温卵母细胞核中tu C H一Ll密度较低温卵母细胞高;而低温卵母细胞质及质膜上t U C H一L1含量较高。
卜巴巴二、、~~一__一一八萝图1.2tU C H在卵母细胞中的免疫组织化学定位。
(A)为B图的去一抗阴性对照;(B)t UC H一L l在低温未长足卵母细胞的分布;(C)为D与E图的去一抗阴性对照。
(D)t UC H一L l在低温长足卵母细胞的分布;(E)t UC H一L l在低温长足卵母细胞的分布。
箭头所指之处为低温卵中的t UC H一L l。
(G)t uC H一L l在高温长足卵母细胞的分布:箭头所指之处为高温卵中的t UC H一L l。
(H)tUC H一Ll衣低温长足卵母细胞的分布;箭头所指之处为低温卵母细胞质中的tUC H一Ll。
(F)为去一抗的阴性对照,为呈现荧光背景,增强了曝光强度(40x)。
3.冬眠阻断后卵母细胞中t一U C H一L l蛋白和M P F含量水平的差异M PF催化亚单位p34ed cZ在高温卵和低温卵之间存在明显差异,低温卵中p34cd c Z含量较高温卵中高,且孕酮处理后较未处理的卵母细胞中p34cd c Z表达量高;而cyd in B l的差异表现不显著。
高温卵和低温卵比较,低温卵中tU C H一Ll的蛋白含量出现一定程度的增加,且孕酮处理后较未处理的卵母细胞中p34ed cZ表达量低。
y C,,月B,黔黝翼翼嘿藻薰蘸瓢C d C Z~H一L‘毅黝馨馨蘸黝}馨翼馨p一a c tinL p L n p H p H n p图 1.3卵母细胞蛋白提取物中eye一i n B i,p34c dc Z和tt j e H一L i的免疫印迹分析。
利用鼠源tuc H一L I单克隆抗体,兔源抗p34c dc Z多克隆抗体和兔源抗cycli n BI多克隆抗体进行免疫印迹分析。
L p为经孕酮处理低温卵母细胞;L n p为未经孕酮处理低温卵母细胞;H p为经孕酮处理高温卵母细胞;H叩为未经孕酮处理高温卵母细胞。
通过p一a c t i n调定各泳道的上样量。
4.冬眠阻断对t U C H一L l与M P F成分结合的影响H p,H nP,切和Ln p四个实验组卵母细胞的可溶性蛋白提取物中均有两条cy cl i n B l特异带。
然而,只有经过孕酮处理的卵母细胞的蛋白提取物可以被tu c H一Ll吸附出cy cl i n B l的相应条带,只不过在同样总蛋白量的L p组和H p组之间,H p组被吸附出的cy cl i n B l含量较少。
但是,只有L p和L nP两组卵母细胞的可溶性蛋白提取物中有p34cdc Z特异条带。
在同样总蛋白量的L p组和Ln p 组之间,Lm组被吸附出的p34cd cZ含量较多且呈现磷酸化状态。
pul l一downG S TL p L n P H P H n PG S T-t UC H一L lL P L n P H P H n PI nputC onL P L n P H P H n Pcd cZcy el i n B I图1.4tu e H一L i与M P F间的关联性。
在H p,H np,L p和L np四个实验组亘扫母乡{】胞的可溶性蛋白提取物中,只有经过孕酮处理的卵母细胞蛋白提取物可以被t UC H一L l吸附出c yc l i n B I的相应条带;只有低温卵母细胞蛋白提取物出现p34c d c Z的t uc H特异吸附条带。
H p,H n p,L p和L np分别表示经孕酮处理的高温卵(p rog est eron e i n d u eed h i gh tem p erature o o ey t e;H p);未经孕酮处理的高温卵(no n一pro g esteron e i n du eed h i gh tem p erat u re o o ey te: H np):经孕酮处理的低温卵(p rog est erone i n dueed l ow t em perat u re oo eyt e;L p);末经孕配,J 处理的低温卵(non一progest eron e i n dueed l ow t em perature ooeyt e二L np )·U C H一L I P T O V I M e rg eP u ll一d o w n In P u tG S T G S T-U C H一L I C o nP T O V I图2P T O V I与U C H一L l蛋白关联性分析结果。
I:A一I:小鼠卵巢石蜡切片U C H一L l和P O T V I 蛋白免疫荧光共定位。
A一C显示3周龄小鼠卵巢,D一F破示4周龄小鼠卵巢,G一I猛小8周龄小鼠卵巢。
J一L:对应的去一抗对照,为呈现荧光背景,增强了曝光强度,显微镜放大倍数4O0x。
U C H-L1(红色荧光),P T O v l(绿色荧光)。
箭头所指为P T0v l与U C H一L l在卵母细胞核与细胞质共定位情况。
械微镜放大倍数4。
小。
n:U C H一L l特异吸附1m g小鼠卵巢蛋白提取物中的P O T V I。
G s T:原核重组表达的G ST蛋白亲和吸附成年小鼠卵巢组织蛋白提取物的免疫印迹检测;G S T一U C H一Ll:重组表达的U C H一L1的G S T融合蛋白的亲和吸附lm g成年小鼠卵巢组织蛋白提取物免疫印迹检测;c o n:未经吸附的成年小鼠卵巢组织蛋白提取物(!60林g)。
取12川P C R产物,进行2%琼脂糖凝胶电泳分析,并用生物图像仪拍照记录。
并将U C去吞L l和p TO V]P C R产物送上海hivitr o gen公司测序,经核实扩增产物序列正确。
三、实验结果(一)P T O V I在小鼠不同组织的分布1.P T O V I在不同发育时期小鼠卵巢组织的分布变化在第7至第28日龄的小鼠各级卵泡中,P T O V I在卵母细胞核中高表达;卵母细胞膜上呈现弱阳性或没有阳性信号;卵母细胞质中弱表达;P T O V I在卵母细胞核中的表达水平随日龄的增加而增强。
在第8周(第56天)卵母细胞核中阳性信号最强。
卵母细胞膜上亦高表达。
与青春期小鼠卵母细胞质中表达方式相似,第56天的卵母细胞质中P T O V I蛋白检测信号维持很低水平。
在卵泡发育的各个时期,P T O V I仅在颗粒细胞的胞质和质膜上表达,细胞核中不表达。
鞘膜细胞中始终不表达P T O V I蛋白。
在同一周龄的不同卵泡阶段,未见P T O V I分布方式发生明显变化。
图3.1P T O V I蛋白在小鼠不同发育时期的卵巢中的定位情况。
利用兔抗P T O V I多克隆抗体分析,A E C显色。
A,C,E和G分别第l,2,3和4周卵巢。
B,D,F和H分别为相应去一抗的阴性对照。
l,K,M为第8周小鼠卵巢。
J,L,N为相应去一抗的阴性对照。
青春期小鼠卵泡的卵母细胞核中强阳性;性成熟期小鼠卵母细胞膜及细胞核中强阳性。
箭头所指为卵母细胞膜PT O V I阳性信号。
显微镜放大倍数40x。
2.雌激素处理对P T O V I在卵泡内的细胞学定位的影响经雌激素处理的卵泡中,P T O V I均一性地分布于卵母细胞膜。
在卵母细胞核中可见强阳性信号,细胞质中呈现弱阳性;而未经雌激素处理的卵母细胞膜上仅有较弱或无PT O V I阳性信号。
P T O V I在卵母细胞质和颗粒细胞质中的分布未发生变化。
图 3.2.P T O v l在实验组和对照组小鼠卵巢中的分布。
A:雌激素处理后的卵巢,C:未经雌激素处理的卵巢,B和D分别为A和C的去一抗的阴性对照。
实验组卵母细胞膜呈现P O T V I强阳性:未经雌激素处理的卵母细胞膜上几乎无P T O V I阳性信号。
箭头所示为卵母细胞膜_上的P O T V I阳性染色,显微镜放大倍数40大。
3.异常的卵母细胞中P T O V I分布情况参考文献的卵泡分级方法’7,在第21天、第28天与第56天和未经雌激素处理的卵泡中,存在几种形态异常的卵母细胞:l)核碎裂的异常卵母细胞;2)与颗粒细胞细胞分离的卵母细胞。