实验1_2 SPUFI and DCLGEN应用实验

合集下载

实验生理科学实验报告实验步骤流程图

实验生理科学实验报告实验步骤流程图In a scientific experiment for physiology, it is important to have a clear and concise experimental procedure. While maintaining uniqueness and avoiding the use of certain transition words, I will provide a written response to your question.A well-structured physiology experiment report typically includes several key components: materials and equipment used, methods employed, data collection techniques, analysis methods, and results interpretation.让我们来看一下实验的材料和设备。

在实验报告中，应列出所使用的所有物质和仪器设备。

这些可以包括试剂、样本、实验动物或人体组织等。

In the experimental report, it is essential to describe the materials and equipment utilized in the experiment. This can encompass various aspects such as reagents, samples, experimental animals, or human tissues.详细描述实验的方法。

这部分应该说明实验者是如何进行实验的。

例如，在生理学实验中，可能会有特定的步骤或程序需要遵循，以确保准确性和可重复性。

分子生物学实验报告

分子生物学实验报告分子生物学实验报告引言分子生物学是一门研究生物大分子结构、功能和相互作用的学科，通过实验手段揭示生命现象的分子机理。

本实验旨在探究DNA复制过程中的关键步骤，以及RNA转录和蛋白质翻译的基本原理。

实验一：DNA复制DNA复制是细胞分裂过程中必不可少的步骤，它保证了遗传信息的传递和维持。

本实验通过模拟DNA复制过程，研究DNA复制酶的作用和复制的准确性。

材料：- DNA模板- DNA聚合酶- 引物- dNTPs- 缓冲液方法：1. 准备反应体系，包括DNA模板、DNA聚合酶、引物、dNTPs和缓冲液。

2. 在适当的温度下，将反应体系放入PCR仪中进行反应。

3. 取样并进行凝胶电泳分析，观察DNA复制产物。

结果：通过凝胶电泳分析，我们观察到DNA复制产物的出现。

这表明DNA聚合酶能够在模板DNA上合成新的DNA链，并且复制的过程较为准确。

讨论：DNA复制的准确性是生命传递遗传信息的基础。

DNA聚合酶具有校正功能，能够识别和修复错误的碱基配对。

这种精确性保证了基因组的稳定性和可靠性。

实验二：RNA转录RNA转录是将DNA信息转录成RNA的过程，它是基因表达的第一步。

本实验旨在研究RNA转录的机制和调控。

材料：- DNA模板- RNA聚合酶- 引物- NTPs- 缓冲液方法：1. 准备反应体系，包括DNA模板、RNA聚合酶、引物、NTPs和缓冲液。

2. 在适当的温度下，将反应体系放入PCR仪中进行反应。

3. 取样并进行凝胶电泳分析，观察转录产物。

结果：凝胶电泳分析显示出RNA转录产物的出现。

这表明RNA聚合酶能够在DNA模板上合成RNA链。

讨论：RNA转录是基因表达的第一步，它决定了细胞内特定基因的表达水平。

RNA聚合酶通过与DNA模板的互作用，选择性地合成特定的RNA链。

这种选择性转录是基因调控的关键。

实验三：蛋白质翻译蛋白质翻译是将RNA信息翻译成蛋白质的过程，它是生物体内蛋白质合成的关键步骤。

分子生物学实验方法与步骤【可编辑全文】

可编辑修改精选全文完整版分子生物学实验方法与步骤表达蛋白的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析一、原理细菌体中含有大量蛋白质，具有不同的电荷和分子量。

强阴离子去污剂SDS与某一还原剂并用，通过加热使蛋白质解离，大量的SDS 结合蛋白质，使其带相同密度的负电荷，在聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）上，不同蛋白质的迁移率仅取决于分子量。

采用考马斯亮兰快速染色，可及时观察电泳分离效果。

因而根据预计表达蛋白的分子量，可筛选阳性表达的重组体。

二、试剂准备1、30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）29.0g，亚甲双丙烯酰胺（Bis）1.0g，混匀后加ddH2O，37O C溶解,定容至100ml, 棕色瓶存于室温。

2、1.5M Tris-HCl(pH 8.0：Tris 18.17g加ddH2O溶解, 浓盐酸调pH至8.0,定容至100ml。

3、1M Tris-HCl(pH 6.8：Tris 12.11 g加ddH2O溶解, 浓盐酸调pH至6.8,定容至100ml。

4、10% SDS：电泳级SDS 10.0 g加ddH2O 68℃助溶,浓盐酸调至pH 7.2,定容至100ml。

5、10电泳缓冲液(pH 8.3：Tris 3.02 g，甘氨酸18.8 g，10% SDS 10ml加ddH2O溶解, 定容至100ml。

6、10%过硫酸铵（AP）： 1gAP加ddH2O至10ml。

7、2SDS电泳上样缓冲液：1M Tris-HCl (pH 6.82.5ml，-巯基乙醇1.0ml，SDS 0.6 g，甘油2.0ml，0.1%溴酚兰1.0ml，ddH2O 3.5ml。

8、考马斯亮兰染色液：考马斯亮兰0.25 g，甲醇225ml，冰醋酸 46ml，ddH2O 225ml。

9、脱色液:甲醇、冰醋酸、ddH2O以3∶1∶6配制而成。

二、操作步骤采用垂直式电泳槽装置（一）聚丙烯酰胺凝胶的配制1、分离胶(10%的配制:ddH2O 4.0ml30%储备胶 3.3ml1.5M Tris-HCl2.5ml10% SDS 0.1ml10% AP 0.1ml取1ml上述混合液,加TEMED(N,N,N’,N’-四甲基乙二胺10μl 封底,余加TEMED4μl ,混匀后灌入玻璃板间，以水封顶，注意使液面平。

遗传学实验20种技术

一、DNA提取1、实验原理通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞，由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响，在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。

在液氮中研磨，材料易于破碎，并减少研磨过程中各种酶类的作用。

十二烷基肌酸钠、十六烷基三甲基溴化铵(简称为CTAB)、十二烷基硫酸钠(简称SDS)等离子型表面活性剂，能溶解细胞膜和核膜蛋白，使核蛋白解聚，从而使DNA得以游离出来。

再加入苯酚和氯仿等有机溶剂，能使蛋白质变性，并使抽提液分相，因核酸(DNA、RNA)水溶性很强，经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。

上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀，沉淀DNA溶于TE溶液中，即得植物总DNA溶液。

二、RNA提取1、实验原理Trizol试剂是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的单相的快速抽提总RNA的试剂,在匀浆和裂解过程中,能在破碎细胞、降解蛋白质和其它成分,使蛋白质与核酸分离,失活RNA酶,同时能保持RNA的完整性。

在氯仿抽提、离心分离后,RNA处于水相中,将水相转管后用异丙醇沉淀RNA2、操作步骤1、取植物嫩叶,液氮研磨,每1.5ml tube分装0.1克样品;2.每管加入0.5ml Trizol液,迅速混匀,注意样品总体积不能超过所用Trizol体积的10%。

3、室温下静置5~10分钟以利于核酸蛋白质复合体的解离4、加入O.5mI的氯仿,盖紧离心管,用手剧烈摇荡离心管15秒,室温静置5分钟5、10000r/min离心10分钟6、取上清液(水相)转入一新的离心管,加入等体积异丙醇,室温放置10分钟,10000r/min离心10分钟。

7、弃去上清液,加入至少1ml的70乙醇,涡旋混匀,4℃下7500r/min离心5分钟。

8、小心弃去上清液,然后室温或真空干燥5—10分钟,注意不要干燥过分,否则会降低RNA的溶解度。

然后将RNA溶于TE或DEPC处理过的水中,必要时可55℃—60℃水溶10分钟。

生物发光共振能量转移技术实验流程

生物发光共振能量转移技术实验流程英文回答：Luminescence resonance energy transfer (LRET) is a powerful technique used in biological research to study protein-protein interactions and molecular dynamics. It involves the transfer of energy from a donor molecule in an excited state to an acceptor molecule, resulting in a change in the acceptor's fluorescent properties. The experimental workflow for LRET typically involves several steps:1. Design and preparation of donor and acceptor molecules: The first step is to select suitable donor and acceptor molecules that can undergo energy transfer. These molecules should have compatible spectral properties, such as overlapping absorption and emission spectra. Additionally, they should be conjugated to biomolecules of interest, such as antibodies or proteins, using appropriate labeling techniques.2. Sample preparation: The next step is to prepare the biological sample for analysis. This may involve extracting proteins from cells or tissues, purifying them, andlabeling them with the donor and acceptor molecules. Care should be taken to ensure that the labeling does not interfere with the biological activity of the molecules.3. Spectroscopic measurements: Once the samples are prepared, spectroscopic measurements are performed to characterize the donor and acceptor molecules. This includes measuring the absorption and emission spectra of the molecules individually and in combination. These measurements provide important information about the energy transfer efficiency and the distance between the donor and acceptor molecules.4. Energy transfer measurements: After the spectroscopic measurements, energy transfer experiments are conducted. This typically involves exciting the donor molecule with a suitable light source and measuring the fluorescence emission of the acceptor molecule. By varyingthe donor-acceptor distance or the concentration of the molecules, the energy transfer efficiency can be determined. This information can then be used to infer the proximityand interaction between the molecules of interest.5. Data analysis and interpretation: The final step involves analyzing the data and interpreting the results. This may include fitting the experimental data to appropriate mathematical models to determine the energy transfer efficiency and the distance between the donor and acceptor molecules. Statistical analysis may also be performed to assess the significance of the results.In conclusion, the experimental workflow for luminescence resonance energy transfer involves the design and preparation of donor and acceptor molecules, sample preparation, spectroscopic measurements, energy transfer measurements, and data analysis. This technique provides valuable insights into protein-protein interactions and molecular dynamics in biological systems.中文回答：生物发光共振能量转移（LRET）是一种在生物研究中用于研究蛋白质相互作用和分子动力学的强大技术。

创新机能实验报告

一、实验背景随着科学技术的不断发展，机能实验在医学、生物学等领域的研究中扮演着越来越重要的角色。

为了进一步提高实验的趣味性和实用性，我们小组开展了创新机能实验，旨在通过设计新颖的实验方案，探索新的实验方法，以期为相关领域的研究提供新的思路。

二、实验目的1. 设计并实施一个具有创新性的机能实验方案。

2. 探索新的实验方法，提高实验结果的准确性和可靠性。

3. 通过实验验证创新性实验方案的有效性。

三、实验材料1. 实验动物：家兔2. 实验器材：BL-420生物机能实验系统、张力换能器、标本槽、哺乳动物手术器械、丝线、棉球、任氏液、乙酰胆碱液、肾上腺素、氢氧化钠等。

3. 实验试剂：生理盐水、肾上腺素、氢氧化钠等。

四、实验方法1. 实验分组：将实验动物随机分为实验组和对照组。

2. 实验操作：a. 对实验组动物进行麻醉，并暴露心脏。

b. 将心脏置于标本槽中，连接张力换能器。

c. 通过BL-420生物机能实验系统，观察心脏搏动情况。

d. 分别向实验组和对照组动物的心脏内注入不同浓度的肾上腺素和氢氧化钠溶液，观察心脏搏动情况的变化。

e. 对实验结果进行记录和分析。

五、实验结果与分析1. 实验结果显示，实验组动物在注入肾上腺素和氢氧化钠溶液后，心脏搏动情况发生明显变化。

2. 与对照组相比，实验组动物心脏搏动幅度增大，搏动频率加快，说明肾上腺素和氢氧化钠对心脏有明显的兴奋作用。

3. 在肾上腺素和氢氧化钠的作用下，实验组动物的心脏搏动幅度和频率的变化趋势与预期相符，验证了创新性实验方案的有效性。

六、讨论1. 本实验通过设计新颖的实验方案，成功探索了肾上腺素和氢氧化钠对心脏搏动的影响，为相关领域的研究提供了新的思路。

2. 实验结果表明，肾上腺素和氢氧化钠对心脏有明显的兴奋作用，可能与以下机制有关：a. 肾上腺素激动β受体，导致心脏搏动幅度增大，频率加快。

b. 氢氧化钠增加心肌细胞内钙离子浓度，从而增强心肌收缩力。

七、结论1. 本实验成功验证了创新性实验方案的有效性，为相关领域的研究提供了新的思路。

真核转染

分子生物学常用实验方法－步骤汇总实验室分子生物学实验方法汇总PCR (2)RT-PCR (4)琼脂糖核酸电泳 (6)胶回收纯化DNA (6)大肠杆菌质粒DNA 的提取（碱裂解法） (7)乙醇沉淀DNA (8)酶切 (8)连接 (8)感受态细胞的制备 (9)转化 (10)重组子的筛选和鉴定 (10)真核细胞的转染 (11)转染细胞的稳定筛选 (11)重组蛋白质的表达、纯化、复性和定量 (12)肿瘤细胞体外传代培养及保种 (13)肿瘤动物模型的建立 (14)小鼠尾静脉注射方法 (14)肿瘤蛋白疫苗预防性动物实验 (14)人脐静脉内皮细胞（HUVEC）培养 (14)实验动物免疫方案 (15)血清制备 (16)ELISA (16)血清学筛选克隆新抗原/新基因 (17)ELISPOT (20)藻酸盐包裹实验 (21)重组腺病毒构建，扩增及纯化基本技术操作 (21)（细菌内同源重组AdEasy System） (21)组织病理技术 (26)免疫组化染色 (27)流式细胞仪常用的几种检测方法 (29)Western Blot(免疫印迹法) (34)PVDF 膜上蛋白的可逆染色 (37)人肿瘤抗原的识别与鉴定 (39)－免疫沉淀实验流程 (39)蛋白质组实验流程 (41)SDS-PAGE 胶染色 (44)数据库搜索(Databases search) (45)主要的公共数据库及网址 (46)蛋白质的序列分析流程 (48)聚丙烯酰胺凝胶的配制 (49)双向电泳常用溶液配方 (51)分子生物学常用溶液配制 (53)生物秀论坛网上搜集，更多精彩内容请访问h2ttp:///bbs/index.php总RNA的提取（Trizol法提取）在收集到生物材料之后，最好能即刻进行RNA 制备工作。

若需暂时储存，则应以液氮将生物材料急速冷冻后，储存于-80℃冷冻柜。

在制备RNA 时，将储存于冷冻柜的材料取出，立即以加入液氮研磨的方式打破细胞，不可以先行解冻，以避免RNase 的作用。

大学生物教案：分子生物学实验的操作指南

大学生物教案：分子生物学实验的操作指南1. 引言本指南旨在提供大学生物专业的教师和学生们关于分子生物学实验的具体操作步骤与技巧。

分子生物学是现代生命科学研究中至关重要的一部分，通过实验操作可以加深对分子级别生命现象的理解。

在这个指南中，我们将介绍几个常见的分子生物学实验，并提供详细步骤以及相关注意事项。

2. 实验1：DNA提取2.1 实验原理在本节中，我们将介绍DNA提取实验的基本原理和背景知识。

这包括了DNA 提取方法、材料准备和实验目标等内容。

2.2 实验步骤•样品准备：选择适当来源（如水果、血液等）并根据实验要求进行预处理。

•细胞破碎：使用细胞裂解缓冲液和搅拌器将样品细胞破碎。

•DNA沉淀：添加盐和酒精使DNA沉淀出来，并用无菌水洗涤。

•DNA溶解：使用缓冲液溶解沉淀的DNA。

2.3 注意事项•材料应严格按照实验要求选用，确保实验结果的可重复性。

•使用无菌操作技巧以避免外源性DNA污染。

•注意个人安全，佩戴实验室所需的防护装备。

3. 实验2：PCR扩增反应3.1 实验原理在本节中，我们将介绍PCR（聚合酶链式反应）扩增反应的原理和背景知识。

这包括了PCR技术的基本原理、引物设计和酶选择等内容。

3.2 实验步骤•反应体系准备：根据实验目标计算并配置PCR反应所需的试剂和底物。

•DNA模板制备：提取样品中的DNA，并以适当浓度加入到PCR反应中。

•PCR反应设置：配置好PCR反应管，包括引物、酶和缓冲液等。

•PCR条件设定：根据要扩增的序列特点合理设定温度和时间参数。

3.3 注意事项•注意使用不同样本DNA之间相互污染的可能性，避免交叉污染。

•检查引物设计是否正确并符合预期扩增目标。

4. 实验3：凝胶电泳分析4.1 实验原理在本节中，我们将介绍凝胶电泳分析的原理和背景知识。

这包括了DNA迁移速度、凝胶类型选择和标记物设计等内容。

4.2 实验步骤•凝胶制备：根据实验需要配置适当浓度的琼脂糖凝胶。

分子生物学实验报告全解(有图有真相)

分子生物学实验报告慕蓝有志班梦想学院目录实验一细菌的培养 (2)实验二质粒DNA的提取 (4)实验三琼脂糖凝胶电泳法检测DNA (7)实验四质粒DNA酶切及琼脂糖电泳分析鉴定 (9)实验五聚合酶链反应（PCR）技术体外扩增DNA (11)实验六植物基因组DNA提取、酶切及电泳分析 (14)实验七RNA分离与纯化 (17)实验八RT-PCR扩增目的基因cDNA (19)实验九质粒载体和外源DNA的连接反应 (21)实验十感受态细胞的制备及转化 (23)实验十一克隆的筛选和快速鉴定 (25)实验十二地高辛标记的Southern杂交 (27)实验十三阿拉伯糖诱导绿色荧光蛋白的表达 (31)思考题 (32)分子实验心得总结 (33)实验一细菌的培养一、目的学习细菌的培养方法及培养基的配置。

二、原理在基因工程实验和分子生物学实验中，细菌是不可缺少的实验材料。

质粒的保存、增殖和转化；基因文库的建立等都离不开细菌。

特别是常用的大肠杆菌。

大肠杆菌是含有长约3000kb的环状染色体的棒状细胞。

它能在仅含碳水化合物和提供氮、磷和微量元素的无机盐的培养基上快速生长。

当大肠杆菌在培养基中培养时，其开始裂殖前，先进入一个滞后期。

然后进入对数生长期，以20~30min复制一代的速度增殖。

最后，当培养基中的营养成分和氧耗尽或当培养基中废物的含量达到抑制细菌的快速生长的浓度时，菌体密度就达到一个比较恒定的值，这一时期叫做细菌生长的饱和期。

此时菌体密度可达到1×109~2×109/mL。

培养基可以是固体的培养基，也可以是液体培养基。

实验室中最常用的是LB培养基。

三、实验材料、试剂与主要仪器（一）实验材料大肠杆菌（二）试剂1. 胰蛋白胨2. 酵母提取物3. 氯化钠4. 1mol/L NaOH5. 琼脂粉6. 抗生素（氨苄青霉素、卡那霉素等）（三）仪器1. 培养皿2. 带帽试管3. 涂布器4. 灭菌锅5. 无菌操作台（含酒精灯、接种环、灭菌牙签等）6. 恒温摇床四、操作步骤（一）LB培养基的配制配制每升培养基，应在950m1去离子水中加入：细菌培养用胰蛋白胨10g细菌培养用酵母提取物5gNaCl 10g摇动容器直至溶质完全溶解，用1mol/L NaOH调节pH位至7.0。

高中生物实验指南：分子生物学实验操作手册

高中生物实验指南：分子生物学实验操作手册1. 简介分子生物学是研究生物体内分子结构、组成、功能以及相互作用的科学。

在高中生物学课程中，通过进行一系列分子生物学实验，可以加深对基因、DNA、RNA等内容的理解，并培养学生动手实践和科学探究的能力。

本操作手册将介绍一些适合高中副标准课程的基本分子生物学实验，帮助教师和学生更好地开展这方面的实验教学。

2. 实验一：提取DNA2.1 实验目的了解DNA的结构和提取过程，并掌握提取DNA的基本方法。

2.2 材料与仪器•成熟香蕉或其他植物材料•盐水溶液（含氯化钠）•蛋白酶（如葡萄胺酸酶）•洗涤剂（如洗衣粉）•咖啡滤纸或滤纸漏斗•烧杯•酒精1.将香蕉剥皮后放入砧板上，用刀将香蕉捣碎成泥状。

2.在烧杯中加入适量的盐水溶液，并将捣碎的香蕉放入其中搅拌均匀。

3.加入少量蛋白酶和洗涤剂，再次搅拌均匀，让细胞破裂释放DNA。

4.将混合物过滤到另一个烧杯中，通过滤纸除去大颗粒的残渣。

5.将过滤后的溶液倒入试管中，并缓慢地倾斜试管，在溶液与酒精接触的界面处，会出现白色粘稠物质，即提取到的DNA。

2.4 实验结果及分析实验中提取到的DNA呈现为白色细丝状物质。

通过这个实验可以观察到DNA 在水相和酒精相之间的界面上凝聚堆积。

说明了DNA在酒精中不溶性，从而便于提取。

3. 实验二：PCR扩增3.1 实验目的了解聚合酶链式反应（PCR）的原理和基本步骤，并能够进行PCR扩增实验。

3.2 材料与仪器•PCR试剂盒（含模板DNA、引物、聚合酶等）•热循环仪•PCR试管或反应管1.准备PCR反应体系，按照试剂盒说明书的要求加入模板DNA、引物和聚合酶等。

2.将装有反应溶液的PCR管放入热循环仪中。

3.设置PCR的温度程序，包括变性、退火和延伸阶段。

4.启动热循环仪开始PCR扩增反应。

5.完成PCR后，可以通过凝胶电泳等方法检测扩增产物。

3.4 实验结果及分析通过PCR扩增，可以在较短的时间内大量复制并放大目标基因片段。

多序列比对的实验报告

一、实验目的1. 掌握多序列比对的基本原理和方法。

2. 熟悉使用BLAST、CLUSTAL W等工具进行多序列比对。

3. 分析比对结果，了解序列间的进化关系。

二、实验原理多序列比对是指将两个或多个生物序列进行排列，以揭示序列间的相似性和进化关系。

通过比对，可以识别保守区域、功能域和结构域，为生物信息学研究和进化生物学研究提供重要依据。

多序列比对的方法主要包括以下几种：1. 动态规划法：通过构建一个动态规划表，计算最优比对路径，实现序列的比对。

2. 人工比对法：通过分析序列结构、功能域等信息，人工进行比对。

3. 基于启发式算法的比对：通过寻找序列间的相似性，快速进行比对。

三、实验材料1. 仿刺参EGFR基因氨基酸序列（Fasta格式）。

2. 同源序列数据库（如NCBI）。

3. 多序列比对软件（如BLAST、CLUSTAL W）。

四、实验步骤1. 使用BLAST工具进行同源序列搜索。

（1）在NCBI网站上，选择“BLAST”功能。

（2）将仿刺参EGFR基因氨基酸序列粘贴到“Query Sequence”框中。

（3）选择合适的比对参数，如“MegaBLAST”。

（4）点击“BLAST”按钮，等待结果。

（5）在结果页面，找到相似度最高的几个序列，下载下来。

2. 使用CLUSTAL W进行多序列比对。

（1）将下载的同源序列整合到一个Fasta格式的文本文件中。

（2）在CLUSTAL W软件中，选择“Multiple Sequence Alignment”功能。

（3）上传Fasta格式的文本文件。

（4）选择合适的比对参数，如“Gap Penalty”和“Gap Reward”。

（5）点击“Align”按钮，等待结果。

3. 分析比对结果。

（1）观察比对结果，分析序列间的相似性和进化关系。

（2）绘制系统进化树，展示序列的进化历程。

五、实验结果与分析1. 使用BLAST工具，找到与仿刺参EGFR基因氨基酸序列相似度最高的几个序列，如Anopheles gambiae、Nasonia vitripennis等。

《分子生物学》实验指导书

《分子生物学》实验指导书实验学时：32学时适用专业：生物科学、生物技术实验目录实验一质粒DNA的提取、酶切与电泳鉴定 (1)实验二聚合酶链式反应扩增DNA片段 (3)实验三大肠杆菌感受态细胞的制备与质粒DNA分子转化 (4)实验四植物基因组DNA提取及电泳 (6)实验五植物基因组RNA提取及电泳 (7)实验一质粒DNA的提取、酶切与电泳鉴定实验项目类型：综合性一、实验目的1. 学习质粒的相关基本知识，掌握碱裂解法提取质粒DNA的原理和方法。

2. 学习和掌握限制性内切酶的特性、掌握对重组质粒进行限制性内切酶酶切的原理和方法，并理解限制性内切酶是DNA重组技术的关键工具。

二、实验原理碱裂解法提取质粒DNA的原理是根据共价闭合环状质粒DNA与线性染色体DNA的结构差异来实现分离的。

在pH12-12.5时，线性DNA被彻底变性，但共价闭环质粒DNA虽然氢键也发生断裂，但两条互补链仍会紧密缠绕结合在一起。

当在溶液体系中加入pH4.8的KAC时，溶液恢复中性，质粒DNA迅速复性，染色体DNA则由于变性而相互混乱缠绕，不能复性，从而离心即可以把变性的染色体DNA沉淀和蛋白-SDS复合物沉淀分离出来。

三、实验仪器与材料1. 材料：含pSV的E.coli JM109菌株、1.5ml塑料离心管、离心管架、EB、酚、氯仿、异丙醇、乙醇、琼脂糖、吸头等。

2. 溶液或试剂：LB培养基、溶液Ⅰ、溶液II（0.4mol/L NaOH、2%SDS用前等体积混合）、溶液Ⅲ、分离液：酚/氯仿/异戊醇＝25:24:1、无水乙醇、70%乙醇等。

3. 仪器或其他用具：微量移液器(20μl,200μl,1000μl)、恒温振荡摇床、高压蒸汽灭菌锅、涡旋振荡器、琼脂糖凝胶电泳系统、凝胶成像系统、恒温培养箱、制冰机等。

四、操作步骤质粒DNA的提取步骤：1. 用灭菌的牙签挑取白色单菌落接种于另外已制备好的LB琼脂平板上，保存菌种，并把牙签放入盛3 ml LB液体培养基的试管中，37℃振荡培养过夜。

细胞生物学实验

方法与步骤：方法与步骤：
1、相对分子质量大小对膜通透性的影响、 (1) 在编号的支试管中分别吸入在编号的3支试管中分别吸入支试管中分别吸入2ml 1mol/L乙二醇、乙二醇、乙二醇 1mol/L丙三醇、1mol/L葡萄糖高渗液。丙三醇、葡萄糖高渗液。丙三醇葡萄糖高渗液 (2) 先后分别用吸管滴加两滴血液，混匀。先后分别用吸管滴加两滴血液，混匀。 (3) 观察溶血时间，最长延至观察溶血时间，最长延至10min。。 (4) 将实验结果记入以下所示表格中。将实验结果记入以下所示表格中。溶液 1mol/L乙二醇 1mol/L丙三醇 1mol/L葡萄糖相对分子质量 62 92 180 溶血时间
实验仪器、材料和试剂：实验仪器、材料和试剂：
阿氏液（Alsever液）,配方如下：阿氏液（液配方如下：配方如下枸橼酸钠……………………………….0.80g 枸橼酸钠枸橼酸…………………………………0.325g 枸橼酸葡萄糖…………………………………2.05g 葡萄糖氯化钠…………………………………0.42g 氯化钠…………………………………0.42g H2O ……………加至加至…………… 100.00ml 加至混匀溶解后，备用。混匀溶解后，114.3℃高压灭菌，10min备用。阿氏液 ℃高压灭菌，备用即含有枸橼酸钠抗凝剂，又含有细胞生存的营养，即含有枸橼酸钠抗凝剂，又含有细胞生存的营养，所以它即可做细胞的抗凝剂，又可做细胞的保存液。即可做细胞的抗凝剂，又可做细胞的保存液。阿氏液和采血量为1：，一般在4℃下红细胞可保存2周其活性和特性血量为：1，一般在 ℃下红细胞可保存周其活性和特性不变。不变。
实验仪器、材料和试剂：实验仪器、材料和试剂：

孚尔根

课程名称：细胞生物学指导老师：成绩：__________________实验名称：孚尔根染色同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）二、实验内容和原理（必填）三、实验材料与试剂（必填）四、实验器材与仪器（必填）五、操作方法和实验步骤（必填）六、实验数据记录和处理七、实验结果与分析（必填）八、讨论、心得一、实验目的1.以Feulgen染色法为例学习细胞化学方法检测细胞核DNA的原理和方法；2.观察DNA在细胞内的分布。

二、实验原理孚尔根反应分为水解和显色两个步骤。

在水解过程中，细胞中DNA经1N60℃盐酸水解后，DNA双螺旋结构中的嘌呤与脱氧核糖之间的连接打开，使脱氧核糖的第一碳原子上形成游离的醛基，这些醛基与Schiff氏试剂作用，形成紫红色的三苯甲烷衍生物。

Schiff试剂是由碱性品红和偏重亚硫酸钠相作用，形成无色的品红液，当无色品红与醛基结合形成紫红色的化合物。

紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个发色基团，所以具有颜色。

因此凡有DNA的地方，都能显示紫红色。

但是，细胞中除了DNA酸解会产生醛基之外，多糖等物质也会产生醛基，此外细胞中可能还有自由醛基，但多糖的醛基不会再该反应条件下裸露，而且自由醛基可被盐酸消除；此外，细胞中的RNA也不被染色。

目前认为，RNA的N-糖苷键较为稳定，在孚尔根反应的酸解条件下，其嘌呤碱基不会易被脱去。

故只有DNA不完全水解出来的醛基才能与Schiff试剂反应生成紫红色产物；由于线粒体，叶绿体的结构原因，内部的DNA也不被染色。

从而，孚尔根反应时对细胞中核DNA高度专一的一种检测手段。

材料不经过水解或预先用热的三氯醋酸或DNA酶处理，得到的反应是阴性的，从而证明了Feulgen反应的专一性。

三、实验材料与试剂器材：显微镜、盖玻片、染色缸、眼科剪、解剖刀、镊子、水浴锅试剂：Schiff试剂，亚硫酸水溶液，1mol/L HCl，5%三氯醋酸材料：洋葱鳞茎四、实验步骤1.撕取小块洋葱内表皮，放入10mL预热的60°C的1mol/L HCl中温育水解8-10分钟。

高中英语学中科学家经典实验总结

高中英语学中科学家经典实验总结
实验一：托马斯·托马斯实验
实验目的：
通过托马斯·托马斯实验，展示电的流动以及电源的工作原理。

实验材料：
- 电池
- 电线
- 小灯泡
实验步骤：
1. 将电池的正极与小灯泡的一端用电线连接。

2. 将电池的负极与小灯泡另一端用电线连接。

3. 确保电路连接完好。

实验结果：
小灯泡亮起，表明电流通过电线流入小灯泡，使其发光。

实验二：安德孙·安德孙实验
实验目的：
通过安德孙·安德孙实验，观察和验证气体的扩散现象。

实验材料：
- 氢气气体瓶
- 氧气气体瓶
- 玻璃管
- 蓄电池
- 电线
实验步骤：
1. 将氢气气体瓶的瓶口与玻璃管的一端连接。

2. 将氧气气体瓶的瓶口与玻璃管的另一端连接。

3. 将蓄电池与电线连接，接通电流。

实验结果：
氢气和氧气在玻璃管中扩散，形成水分子。

实验三：牛顿·牛顿实验
实验目的：
通过牛顿·牛顿实验，探究力的作用和力学定律。

实验材料：
- 弹性绳
- 物体
实验步骤：
1. 将一个物体悬挂于弹性绳上。

2. 给物体一个初速度，使其进行摆动。

3. 观察物体的摆动情况。

实验结果：
物体在弹性绳的作用下进行周期性摆动，并遵循牛顿的运动定律。

以上是高中英语学中科学家经典实验的总结，通过这些实验可以帮助学生理解一些科学原理和概念，并培养他们的实验能力和观察能力。

物理实验哈佛实验报告

一、实验模块1. 实验名称：光晶格超冷原子实验2. 实验目的：通过光晶格超冷原子实验，研究三角晶格中的费米-哈伯德模型，探索哈伯德模型在高温超导现象中的应用。

3. 实验原理：利用光晶格超冷原子技术，实现三角晶格中的费米-哈伯德模型，研究量子自旋液体的性质，为发现量子自旋液体或更复杂的哈伯德模型奠定基石。

二、实验内容1. 实验背景在凝聚态物理中，量子自旋液体是一种具有量子纠缠、长程关联和拓扑序的新型量子态。

近年来，随着超冷原子技术的发展，光晶格超冷原子实验成为研究量子自旋液体的重要手段。

费米-哈伯德模型是描述高温超导现象的核心物理模型，但在经典数值计算中难以解决。

本研究利用光晶格超冷原子实验，实现三角晶格中的费米-哈伯德模型，为研究高温超导现象提供新的思路。

2. 实验方法（1）实验装置：采用光晶格超冷原子实验装置，包括激光器、光栅、冷原子源、探测器和数据处理系统等。

（2）实验步骤：①制备超冷原子：将原子气冷却至超低温，使其处于玻色-爱因斯坦凝聚态。

②构建光晶格：通过光栅将激光束分割成多个光束，形成周期性势阱，实现原子在光晶格中的排列。

③调整参数：调节次紧邻对角的隧穿强度，实现从正方晶格到三角晶格的连续转变。

④测量数据：利用探测器记录原子在光晶格中的运动状态，并通过数据处理系统分析数据。

3. 实验结果（1）成功实现三角晶格中的费米-哈伯德模型，为研究高温超导现象提供新的思路。

（2）发现由于电子掺杂产生的铁磁关联，有助于深入了解三角晶格中量子自旋液体的性质。

（3）通过引入巡游电子和掺杂，发现铁磁现象并非仅在极端条件下出现，而是在一定条件下可能成为主导物理现象。

三、实验结论1. 利用光晶格超冷原子实验，成功实现三角晶格中的费米-哈伯德模型，为研究高温超导现象提供了新的思路。

2. 通过实验发现，电子掺杂产生的铁磁关联有助于深入了解三角晶格中量子自旋液体的性质。

3. 本实验为发现量子自旋液体或更复杂的哈伯德模型奠定了基石，对理解凝聚态物理中的复杂量子现象具有重要意义。

并指实验报告

一、实验目的1. 了解并指实验的基本原理和操作步骤。

2. 通过实验观察并指的形成过程，加深对并指现象的理解。

3. 掌握并指实验在生物学研究中的应用。

二、实验原理并指实验是生物学研究中常用的一种实验方法，主要用于观察和比较不同生物体在生长发育过程中的形态变化。

实验原理基于细胞分裂、细胞增殖和细胞分化等生物学过程。

通过人为干预，使生物体的某一部位发生形态变化，从而观察并指的形成过程。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：小鼠胚胎组织、小鼠胚胎培养皿、培养液、显微镜等。

2. 实验仪器：显微镜、手术显微镜、剪刀、镊子、培养箱等。

四、实验步骤1. 准备实验材料：将小鼠胚胎组织取出，置于培养皿中，加入适量培养液。

2. 观察胚胎组织形态：在显微镜下观察胚胎组织的形态，记录原始形态。

3. 进行并指实验：用手术显微镜和剪刀将胚胎组织某一部位进行切割，使其形成并指形态。

4. 观察并指形成过程：在显微镜下观察并指形成过程，记录形态变化。

5. 比较并指前后形态差异：将并指前后的胚胎组织进行对比，分析并指实验对胚胎组织形态的影响。

6. 实验结果记录：将实验观察结果进行记录，整理实验数据。

五、实验结果与分析1. 实验结果显示，并指实验后，胚胎组织的形态发生了明显变化，形成了并指形态。

2. 在并指形成过程中，细胞分裂、细胞增殖和细胞分化等生物学过程得到了充分体现。

3. 并指实验结果表明，并指现象与细胞分裂、细胞增殖和细胞分化等生物学过程密切相关。

六、实验结论1. 并指实验成功观察到并指的形成过程，为研究并指现象提供了有力依据。

2. 并指实验结果表明，并指现象与细胞分裂、细胞增殖和细胞分化等生物学过程密切相关。

3. 并指实验为生物学研究提供了新的思路和方法，有助于进一步研究生物生长发育过程中的形态变化。

七、实验讨论1. 实验过程中，由于操作不当或设备原因，可能影响实验结果。

2. 在实验过程中，应严格控制实验条件，确保实验结果的准确性。

超导核磁共振谱仪的原理及应用实验指导书

超导核磁共振谱仪原理及应用试验指导书贵州大学精细化工研究开发中心（绿色农药与生物工程关键试验室）1、试验类型及课时数a)试验类型: 设计性试验(研究性试验）b)课时数: 10课时2、试验目和意义核磁共振是1946年由美国斯坦福大学布洛赫(F.Block)和哈佛大学珀赛尔(E.M.Purcell)各自独立发觉, 两人所以取得1952年诺贝尔物理学奖。

50多年来, 核磁共振已形成为一门有完整理论新学科。

在多种多样化学分析仪器中, 核磁共振谱仪被公认为是一个非常关键研究和测试工具, 它很多功效是其它手段无法替换。

核磁共振谱仪能够给出小到原子核在分子中正确位置及其周围环境微小改变, 大到整个人体断层成像等含有丰富内涵信息。

被广泛用于工业、农业、化学、生物、医药、地球科学和环境科学等领域。

经过学习核磁共振波谱仪组成、使用方法及其在定性、定量分析中应用, 培养学生严谨科学态度、细致工作作风、实事求是数据汇报和良好试验习惯（准备充足、操作规范, 统计简明, 台面整齐、试验有序, 良好环境保护和公德意识）; 培养学生动手能力、理论联络实际能力、统筹思维能力、创新能力、独立分析处理实际问题能力、查阅手册资料并利用其数据资料能力以及归纳总结能力等。

3、试验原理（1）基础原理自旋不为零粒子, 如电子和质子, 含有自旋磁矩。

假如我们把这么粒子放入稳恒外磁场中, 粒子磁矩就会和外磁场相互作用使粒子能级产生分裂, 分裂后两能级间能量差为ΔE = γhB0 （1）其中: γ为旋磁比, h为约化普朗可常数, B0为稳恒外磁场。

假如此时再在稳恒外磁场垂直方向加上一个交变电磁场, 该电磁场能量为hν（2）其中: ν为交变电磁场频率。

当该能量等于粒子分裂后两能级间能量差时, 即:hν = γh B0 （3）2πν = γ B0 （4）低能极上粒子就要吸收交变电磁场能量产生跃迁, 即所谓磁共振。

简单地说, 核磁共振波谱法就是将自旋核放入磁场中, 用适宜频率电磁波照射, 它们会吸收能量, 发生原子核能级跃迁, 同时产生核磁共振信号, 得到核磁共振谱试验方法。