鸡肿瘤坏死因子αELISA试剂盒性能
RD TNF-α ELISA试剂盒说明书
RD TNF-αELISA检测试剂盒说明书（MTA00B）技术提示1.当混合或冲悬蛋白质溶液时，避免产生气泡。
2.为了避免交叉污染，每个标准品，样品以及相关试剂加完后要更换枪头。
此外，每种试剂要有单独的储液槽。
3.为了达到最佳效果，将试剂和样品等滴加到每个孔的中心位置。
4.为了保证准确的结果，在孵育步骤中，有必要对酶标板进行适当地密封。
5.底物溶液在加入到酶标板之前应为无色。
要保持底物溶液避光。
底物溶液应由无色渐渐变为蓝色。
6.终止液应与底物溶液相同的加样顺序加到酶标板孔里。
加入终止液后，酶标孔中的颜色应由蓝色变为黄色。
其他配套物品1.酶标仪能够在450 nm处测量吸光度，校正波长设为540 nm或570 nm。
2.移液枪和移液器3.去离子水4.试剂瓶5.用于稀释标准品的EP管注意事项1.终止液为酸性溶液，注意防护。
2.本试剂盒中的某些成分含有防腐剂，可能会引起皮肤过敏反应。
避免吸入。
3.显色剂B可能引起皮肤、眼睛和呼吸道刺激。
避免吸入。
4.佩戴好口罩和手套，实验服。
实验完成后要仔细洗手。
5.关于样本，细胞培养上清收集后存放在-20℃以下。
避免反复冻融。
试剂准备：1.使用前将所有试剂放于室温。
2.小鼠TNF-αControl：使用1mL去离子水冲悬对照，充分混匀。
3.洗涤液：如果浓缩液中已形成晶体，加热至室温，轻轻搅拌，直到晶体完全溶解。
可配制满足一个酶标板的洗涤液。
如：将20毫升洗涤液浓缩液加到480毫升去离子水或蒸馏水中，配制500毫升洗涤液。
4.底物溶液：底物显色试剂A和B应在使用15分钟内按等体积混合。
避光放置。
每个酶标孔需要100 μL混匀后的AB混合物。
5.小鼠TNF-α标准品：参照瓶上的冲悬体积进行冲悬。
用去离子水或蒸馏水冲悬小鼠TNF-α标准。
原液浓度为7000 pg/mL。
轻轻混匀，室温放置至少5分钟，然后再进行稀释。
先在1号管中加入900ul Calibrator稀释液（RD5K），2-7号加入200ul Calibrator稀释液。
TNF-a说明书
人(human)肿瘤坏死因子a(TNF-a)说明书本试剂盒仅供研究使用标本：血清或者血浆一、试剂组成精密度微孔板96孔 (Microtitration Strips) 1块 2～8℃干燥保存酶标偶合液 (Conjugate ) 1瓶 12.0毫升 2～8℃冷藏保存标准品 (Standard) 5瓶各1.0毫升 2～8℃冷藏保存呈色剂A (Substrate A) 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存呈色剂B (Substrate B) 1瓶 6.0毫升 2～8℃避光冷藏保存终止液 (Stopping Solution) 1瓶 6.0毫升室温保存20倍浓缩洗涤液 (Rinsing Buffer x 20) 1瓶 60.0毫升 2～8℃冷藏保存5倍浓缩样品稀释液 (Diluent x 5) 1瓶 15.0ml 2～8℃冷藏保存英文说明书，中文说明书各一份室温保存二、注意事项1. 此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。
2．使用前应将盒内各试剂取出。
室温放置至少30分钟，3．浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。
4．浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟5．若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。
不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。
6．在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。
7．加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。
8．试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。
三、实验前准备1．使用前应将盒内各试剂取出，室温放置至少30分钟。
2．准备各种实验仪器及材料，如微量移液器，吸头，医用蒸馏水等3．浓缩洗液与医用蒸馏水1︰19倍稀释后成为应用洗涤液4．浓缩样品稀释液与医用蒸馏水1︰4倍稀释成应用样品稀释液5．用应用样品稀释液来稀释样品，按照1：100的体积比来稀释样品如10μl的样品加入到1ml的应用样品稀释液中，充分混匀待用。
肿瘤坏死因子TNFα
人肿瘤坏死因子α（TNF-α）酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，细胞上清及相关液体样本中肿瘤坏死因子α（TNF-α）的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平。
用纯化的人肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α，再与HRP标记的肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人肿瘤坏死因子α呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人肿瘤坏死因子α（TNF-α）浓度。
试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：450pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒说明书
鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒说明书鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒说明书ELISA试剂盒规格：(1) 规格：96T 可以测90个样，5个标准孔，1个空白孔(2) 规格：48T 可以测42个样，5个标准孔，1个空白孔【ELISA试剂盒种属】人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA 试剂盒等。
【试剂盒检测目的】用于测定血清，血浆及相关液体等样本。
例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
【标本】血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
【用途】科研实验等领域科学研究，不得用于临床诊断。
鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本：全血试验原理：HLA- B27试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知HLA-B27浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒说明书先将HLA- B27和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中HLA-B27的浓度呈比例关系。
试剂盒组成：鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒说明书自备材料1．蒸馏水。
2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1．避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。
2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
鸡α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
碧云天Mouse TNF-α ELISA Kit (小鼠TNF-α酶联免疫吸附检测试剂盒)说明书
Mouse TNF-α ELISA Kit产品编号 产品名称包装 PT512Mouse TNF-α ELISA Kit96次产品简介：碧云天的Mouse TNF-α ELISA Kit (Mouse Tumor Necrosis Factor-α Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay Kit)，即小鼠肿瘤坏死因子-α酶联免疫吸附检测试剂盒，是一种用于特异性地高灵敏地定量检测小鼠血清、血浆、细胞或组织裂解液、或细胞培养上清液中的TNF-α的试剂盒。
本产品检测灵敏度高，特异性强，重复性好。
多次重复检测结果表明，最小检出量为30.8pg/ml ，与人TNF-α、sTNF RIs 、TNF RII 等均没有交叉反应，板内、板间变异系数均小于10%。
TNF-α，即TNF 、TNF α或TNFalpha ，也称cachectin 、cachexin 或TNFSF1A 。
TNF-α由巨噬细胞、上皮细胞等多种细胞在细菌感染、内毒素刺激、病毒或寄生虫感染时产生。
肿瘤坏死因子超家族(Tumor necrosis factor superfamily)共约19个成员，包含由巨噬细胞等产生的TNF-α和T 淋巴细胞产生的TNF-β(也称Lymphotoxin-alpha)，以及FASL 、TRAIL 、CD40L 、CD27L 、CD30L 等。
TNF-α与TNF-β在结构上有一定的相似性，并且在氨基酸水平有28%的同源性，它们拥有共同的受体TNFR1和TNFR2。
由于TNF-α的生物学活性占TNF 总活性的70%~95%，因此目前常说的TNF 多指TNF-α。
TNF (Tumor Necrosis Factor)因为能诱导细胞死亡而得名，实际上其很多时候诱导的细胞死亡为细胞凋亡。
人TNF-α有两种形式，一种是由233个氨基酸组成的跨膜蛋白同源三聚体(homotrimers)，另外一种是该跨膜蛋白在TNF-α转化酶TACE(TNF-α converting enzyme)的作用下切除信号肽，形成成熟的157个氨基酸的可溶性TNF-α单体(分子量为17KDa)的同源三聚体。
大鼠(Rat)肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA检测试剂盒说明书
大鼠（Rat）肿瘤坏死因子α（TNF—α）ELISA检测试剂盒说明书大鼠（Rat）肿瘤坏死因子α（TNFα）ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采纳双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。
往预先包被肿瘤坏死因子α（TNFα）抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻di洗涤。
用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最后的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α（TNFα）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避开任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞快速当心地分别。
2.血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存：假如样本收集后不适时检测，请按一次用量分装，冻存于20℃，避开反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪（450nm）2.高精度加样器及枪头：0.510uL、220uL、20200uL、2001000uL3.37℃恒温箱操作注意事项试剂盒保存在28℃，使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶wan全溶解后再使用。
试验中不用的板条应立刻放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。
浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对比或者空白；依照说明书操作时样本已经稀释5倍，最结束果乘以5才是样本实际浓度。
严格依照说明书中标明的时间、加液量及次序进行温育操作。
全部液体组分使用前充分摇匀。
试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)生物学活性测定
响。因为 TNF-β 细胞毒生物学作用等很多生物学效应均与 TNF-α 相似。
肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是一种主要由单核-吞噬细胞产生的单核因子，不仅具有选择性 地杀伤某些肿瘤细胞，而且有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和免 疫学检测方法。其中细胞毒生物学检测方法敏感性较高，最为常用；免疫学检测方法包括酶 联免疫吸附试验(ELISA)和放射免疫测定法。
(一) 原理: TNF-α 受体广泛地分布于多种肿瘤细胞和血细胞，根据 TNF-α 与相应靶细胞结合后引 起不同的生物学效应，建立了多种检测 TNF-α 生物学活性方法。某些肿瘤细胞膜表面的 TNF-α 受体与 TNF-α 结合后，可导致这些肿瘤细胞的死亡，可通过检测对肿瘤细胞的杀伤 能力，来反映 TNF-α 的生物学活性。若这种肿瘤细胞先用 3H-TdR 标记，则被杀伤后３H-TdR 释放至细胞外，牽 I 通过测定肿瘤细胞释放３H-TdR 的量来反映 TNF-α 的杀伤活性。 (二) 操作步骤:
用 DYQ-Ⅱ型多头细胞收集器收集样品于 "9999"型玻璃纤维滤纸上
↓ 烤干后，进行 β 计数
结果判定:
1. TNF-α 作用 24h 后，在倒置显微镜下判定 50％L929 细胞杀伤的稀释度即为１个
TNF-α 活性单位。
2. 根据测得的 cpm 值按下列公式计数活性单位:
TNF-α 活性单位(U／ml)
对照组 cpm 值。
3. 胰蛋白酶和 DNA 酶浓度和消化时间要严格控制，犆?批酶均要摸索最适浓度和时间。
否则，消化时间过长或过短者会影响实验结果。
4. 为了增强检测系统的敏感性，在测定系统中加入放线菌素 D，但浓度不宜过大，一
般最终浓度为 0.5～1μg／ml。
肿瘤坏死因子α与白介素17在银屑病中的表达
肿瘤坏死因子α与白介素17在银屑病中的表达吴方毅;任妮丽【摘要】目的：：检测TNF-α与IL-17在银屑病皮损中的表达。
方法： ELISA检测68例银屑病患者与28例对照(非银屑病患者)血清TNF-α和IL-17的表达；免疫印迹法检测局部皮损、患者正常皮肤及对照者皮肤中TNF-α和IL-17的表达；qT-PCR检测TNF-α和IL-17的mRNA表达。
结果：银屑病患者血清TNF-α、IL-17的表达均高于对照组( P<0.05)；皮损组织中TNF-α、IL-17蛋白及mRNA 的表达均高于患者正常皮肤及对照组皮肤(均P<0.05)。
结论： TNF-α与IL-17在银屑病的发展中可能相互作用。
%Objective:To detect the expression of TNF-αand IL-17 in the patients with psoriasis. Meth-ods:The serum levels of TNF-α and IL-17 were detected in 68 patients with psoriasis and 28 controls from cosmetic surgery department. The expression of protein TNF-αand IL-17 in the patients’ lesions and normal skin of the patients as well as the skin of normal controls was detected by ELISA and the mRNA of TNF-αand IL-17 was detected by qT-PCR. Results:The levels of serum TNF-αand IL-17 were higher in the patients than in controls. The levels of protein and mRNA expression of TNF-αand IL-17 were higher in the patients’ lesions than in the normal skin of the patients and controls. Conclusion:TNF-αand IL-17 may be interacted in the progress of psoriasis.【期刊名称】《中国麻风皮肤病杂志》【年(卷),期】2015(000)009【总页数】4页(P551-554)【关键词】TNF-α;IL-17;银屑病【作者】吴方毅;任妮丽【作者单位】湖北医药学院附属人民医院皮肤科，十堰，442000;湖北医药学院附属人民医院医务科，442000【正文语种】中文银屑病的发病率约1～5%，1，2银屑病的病因还不完全清楚，普遍认为是一种自身免疫性的炎性疾病。
种鸡场ELISA数据分析浅析
种鸡场ELISA数据分析浅析作者：薛晓阳来源：《当代畜禽养殖业》 2018年第4期ELISA检测已成为种鸡场评估鸡群健康状况的一种常用手段，主要用于垂直传播性疾病感染水平、疫苗免疫后效果的评价，以及雏鸡产品质量的评估等。
目前常用试剂为IDEXX产品，但在检测过程中会对数据产生质疑，故对此进行简单的分析，也希望与同行进行交流。
1 白血病检测简称ALV，属于肿瘤性疾病，可以垂直和水平传播，ALV-Ag检测采用双抗体捕获法检测抗原，也就是我们常说的P27抗原检测，为IDEXX家禽产品ELI检测唯一的抗原检测方法。
样本为蛋清、肛拭子等，该检测阳性不能区分是否为内源性白血病。
血清检测方面主要包括ALV-J亚型抗体及ALV-A/B亚型，目前通常日龄较大的鸡群会有抗体阳性检出，但ALV-Ag检测多为阴性，表明鸡群还在安全状态。
很多公司现在把血清学检测作为一个参考，重点是把P27抗原结果和抗凝全血病原分离结果作为最终判定。
目前常用的病原分离细胞为DF-1 细胞，病原分离也是公认的白血病检测标准。
2 网状内皮组织增生症抗体检测简称REV，与季节性有很大关系，和蚊虫传播相关。
现在国内报道会有抗体阳性检出的结论，但抗体阳性率普遍较低，维持在3%以内。
验证是否存在野毒感染，也常用到病毒分离的方法，一般会用到DF-1细胞，样品是抗凝全血，最终用PCR或免疫荧光手段进行鉴定。
阳性场区要加强种鸡管理，注意病毒性疾病的发生，同时也要关注种鸡下一代的抗体水平。
REV在大日龄鸡中会有检出，但鸡群不会有临床症状。
目前普遍认为10%以内为安全范围，但是小日龄阳性率较高可能会出现肿瘤疾病的发生，可以跟踪检测抗体阳性率及抗体滴度变化做动态观测。
3 滑液囊支原体抗体检测简称MS，为眼下困扰种鸡养殖的主要疾病之一。
IDEXX公司认为，无灭活苗免疫转阳前6周为感染日龄，而且在MS灭活苗免疫后抗体滴度超过6000，就存在野毒感染。
现在普遍认为抗体滴度高于6000，表明关节腔内已经感染，再用药物防控效果不会很好。
小鼠tnf-a ELISA kit说明书
钟。
3
7. 洗板4次。 8. 加入显色剂100ul/孔，避光37℃孵箱孵育10--20分钟。 9. 加入终止液100ul/孔,混匀后即刻测量OD450值(5分钟内)。
结果判断: 1. 每个标准品和标本的OD值应减去零孔的OD值。 2. 手工绘制标准曲线。以标准品浓度作横坐标，OD值作纵坐标，以平滑线连接各标准品的坐标
4℃ 4℃ 4℃ 4℃ 4℃(避光) 4℃ 4℃ 4℃(避光) 4℃ 4℃
*:[96/48 Tests]
所需物品(不提供，但可协助购买) : 1. 酶标仪(450nm) 2. 高精度加液器及吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000ul 3. 37℃温箱, 双蒸水或去离子水，坐标纸。
4
参考文献: Vet Immunol Immunopathol. 1995 Aug;47(3-4):187-201. Immunobiology. 1995 Jul;193(2-4):186-92. Annu Rev Med. 1994;45:491-503. Int J Cardiol. 1993 Dec 31;42(3):231-8. J Periodontol. 1993 May;64(5 Suppl):445-9.
点。通过标本的OD值可在标准曲线上查出其浓度。 3. 若标本OD值高于标准曲线上限，应适当稀释后重测，计算浓度时应乘以稀释倍数
OD
2.5 2
1.5 1
0.5 0
0
m TNF-a
500
1000
pg/ml
1500
注意：本图仅供参考，应以同次试验标准品所绘标准曲线计算标本含量。
ELISA法检测肿瘤坏死因子
ELISA法检测肿瘤坏死因子ELISA法检测肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子(TNF)是由激活的单核细胞巨噬细胞受内毒素刺激后产生的一种分子量为17 000的蛋白质。
其中，由巨噬细胞产生的称TNF-α，是巨噬细胞介导细胞毒效应的细胞因子；由淋巴细胞产生的称TNF-β。
TNF在体内具有广泛的生物学活性：可作为免疫应答中的一种中间介质，既有抗病效应，又有致病效应；可引起肿瘤的出血坏死；可刺激成纤维细胞增殖；可增加HLA-A、HLA-B、HLA-C抗原的表达；可激活中性粒细胞及杀伤细胞；可促进B细胞增殖及分化、增加IL-2受体表达。
肝脏是TNF的主要发源地，同时也是TNF清除的主要部位。
目前，以TNF-α在临床的意义较大，是内毒素引起肝损害的重要介质。
TNF-α只有通过与靶细胞表面的膜型受体(mTNF-aR)特异结合才能发挥毒性效应，这一结合过程又受血清中可溶性TNF-α受体(sTNF-aR)的调节和制约，而sTNF-aR可与mTNF-aR竞争结合TNF-。
临床上常以检测TNF-α为主。
[检测方法] ELISA法[方法学原理] 在微孔反应板上包被抗人TNF-α单克隆抗体，待测标本和标准品中的TNF-a会与单克隆抗体结合，游离的成分被洗去，同时加入生物素化的抗人TNF-α抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
生物素与亲和素特异结合，抗人TNF抗体与结合在单克隆抗体上的人TNF-α结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。
加入显色剂，若反应孔中有TNF-α，HRP会使无色的显色剂呈现蓝色，加终止液变黄色。
在波长450nm处测吸光度，TNF浓度与吸光度成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中的TNF-α浓度。
[标本准备] 静脉血2ml，不抗凝。
[试剂]1．预包被微孔反应板2．浓缩酶结合物3．酶结合物稀释液4．标准品和标本稀释液5．浓缩生物素化抗体6．IFN标准晶7．浓缩洗涤液8．显色剂A、B9．终止液[仪器] 酶标仪或全自动酶联免疫检测仪。
实验室中那些不同种类的常见ELISA试剂盒区别在哪
实验室中那些不同种类的常见ELISA试剂盒区别在哪【一】心肌梗塞检测elisa试剂盒：如肌钙蛋白、肌红蛋白、C-反应蛋白等。
【二】细胞因子检测试剂盒：如白介素、选择素、集落刺激因子，肿瘤坏死因子，干扰素，转化生长因子，趋化因子，细胞因子受体，粘附分子，生长因子，凋亡因子等。
【三】肝纤维化检测elisa试剂盒：如纤维连接蛋白，透明质酸，胶原，基质金属蛋白酶抑制因子，elisa试剂盒基质金属蛋白酶，层粘蛋白等。
【四】内分泌检测elisa试剂盒如甲状腺、胰腺、性激素、孕酮、睾酮、生长激素、生长抑素、内皮素、皮质醇、骨钙素、催乳素、促肾上腺皮质激素、促卵泡素、雌二醇、雌三醇、5-羟色胺，17-羟孕酮等。
【五】传染病检测elisa试剂盒如幽门螺杆菌,乙脑,乙肝,丙肝,丁肝,戊肝,庚肝,衣原体,性病,腺病毒,微小病毒B19,天疱疮,水痘-带状疱疹病毒,生殖支原体,伤寒,沙眼,腮腺炎,人型支原体,麻疹,轮状病毒,流行性出血热,淋球菌,莱姆病,柯萨奇,elisa试剂盒抗解尿支原体,军团菌,结核,胶原,尖锐湿疣,甲肝,脊髓灰质炎,急性胰腺炎尿胰蛋白酶,霍乱,呼吸道合胞病毒,肝吸虫,副流感,肺炎,带状疱疹,传染性单核细胞增多症,层粘蛋白,布鲁氏杆菌,百日咳,白喉,艾柯病毒,EB病毒,A 族链球菌等。
【六】自身免疫检测elisa试剂盒：如甲状腺,盐水可提取核抗原抗体（ENA）,抗核抗体,DNA,抗心磷脂抗体,类风湿因子,循环免疫复合物,抗胰岛细胞抗体,胰蛋白酶原,Sm,大疱性类疱疮,蛋白酶,抗组蛋白抗体,粒细胞弹性蛋白酶,皮肤抗体,肾上腺抗体,肾小球基底膜,肾小球基底膜抗体,髓过氧化物酶,条纹肌抗体,网硬蛋白抗体,胃壁细胞抗体,胃蛋白酶,系统性红斑狼疮,细菌性渗透性增强因子等。
【七】肿瘤标志物检测elisa试剂盒：如肿瘤标志物，组织多肽抗原，肿瘤相关因子，胰腺癌，直肠癌，细胞角蛋白片段，胃肠癌，铁蛋白，糖链抗原，神经特异性稀醇化酶，上皮膜抗原，elisa试剂盒乳腺癌，人抗小鼠抗体，前列腺，甲胎蛋白，肝癌，大肠癌，肺癌，大小便隐血检测，癌胚抗原，β-2微球蛋白等。
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)说明书
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清，血浆及相关液体样本中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。
用纯化的鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)，再与HRP标记的TNF-α抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
加入一定量的PBS，PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
鸡α干扰素(IFN-α)说明书
鸡α干扰素(IFN-α)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T1pg/ml-60pg/ml使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中α干扰素(IFN-α)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡α干扰素(IFN-α)水平。
用纯化的鸡α干扰素(IFN-α)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入α干扰素(IFN-α)，再与HRP标记的α干扰素(IFN-α)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的α干扰素(IFN-α)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡α干扰素(IFN-α)浓度。
试剂盒组成标本要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7.温育：操作同3。
8.洗涤：操作同5。
9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
ELISA试剂盒项成品质量标准
ELISA残留酶联免疫检测试剂盒成品质量标准一、适用范围本标准规定了ELISA酶联免疫检测试剂盒的外观要求、技术要求、试验方法、检验规则、抽样和判定准则、保存和有效期。
本标准适用于茶叶、水果及蔬菜类样本中ELISA检测的农药酶联免疫检测试剂盒半成品。
二、外观要求要求：试剂盒外观完整，密封，无漏液，内装试剂齐全。
三、技术要求 1.灵敏度 1.1 IC 50IC 50范围在1.1-2.8μg/L 之间。
1.2 相关系数标准曲线的相关系数应在0.9930以上。
1.3 抑制率范围标准品1 OD 值/标准品2 OD 值的抑制率范围在69-85%之间。
1.4 曲线拐点数 应≤2个拐点。
1.5 0ppb 标准品的OD 值 应在1.5~2.1范围内。
2.精密度3.标准曲线标准品工作液浓度为0μg/L、0.6μg/L 和1.8μg/L 的变异系数小于6%；4.烟叶样本添加浓度为100μg/kg 、300μg/kg ，的变异系数应小于20%。
5.检测限对烟叶样品的检测限不大于100μg/kg 。
6.准确度对样本进行不同浓度的药物添加，各点添加回收率范围如下：5.稳定性将半成品进行老化试验，各周期测得参数满足以下要求：6.特异性对ELISA交叉反应率为100%。
四、试验方法1.试剂和材料1.1ELISA残留酶联免疫检测试剂盒1.2试剂：去离子水、乙醇2.溶液配制依据本试剂盒说明书中“七、溶液的配制”进行各溶液的配制。
3.样品前处理依据本试剂盒说明书中“八、样本前处理步骤”进行样本的前处理。
4.测定依据本试剂盒说明书中“九、检测步骤”进行样本的检测。
5 结果判定5.1百分吸光率的计算标准品或样本的百分吸光率等于标准品或样本的平均吸光度值（双孔）除以第一个标准品（0 标准）的平均吸光度值，再乘以100%，即：百分吸光率（%）＝B / B0×100%B—标准品或样本溶液的平均吸光度值B0—0μg/L标准溶液的平均吸光度值5.2标准曲线的绘制与计算以标准品百分吸光率为纵坐标，以标准品浓度（μg/L）的对数为横坐标，绘制标准曲线图。
鸡肿瘤坏死因子αTNFαELISA试剂盒使用说明书
鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒使用说明书南京森贝伽现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒首选森贝伽。
本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定鸡血清，血浆及相关液体样本中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。
用纯化的鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)，再与HRP标记的TNF-α抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度。
样本处理及要求：1. 血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。
3. 尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右（2000-3000转/分）。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
5. 组织标本：切割标本后，称取重量。
小鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA 实验说明书
小鼠肿瘤坏死因子α (TNF-α)酶联免疫试剂盒使用说明书【预期应用】ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养物上清、组织裂解液中TNF-α含量。
【产品性能指标】1、检测范围：15.6 pg/ml-1000 pg/ml2、灵敏度：3.9 pg/ml3、精密度：批内差CV%<8%，批间差CV%<10%4、特异性：本试剂盒特异性检测小鼠TNF-α，且与其他相关蛋白无交叉反应。
【实验原理】用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗TNF-α抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗TNF-α抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样本中的TNF-α呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样本浓度。
【试剂盒组成成分】组份96T酶标板(Assay plate) 12条×8孔标准品(Standard) 2瓶(冻干品)生物素标记抗体(Biotin-antibody) 1 x 120 μl/瓶(100×)辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin) 1 x 120 μl/瓶(100×)生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent) 1 x 15 ml/瓶辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent) 1 x 15 ml/瓶样本稀释液(Sample Diluent) 1 x 50 ml/瓶浓洗涤液(Wash Buffer) 1 x 20 ml/瓶(25×)底物溶液(TMB Substrate) 1 x 10 ml/瓶终止液(Stop Solution) 1 x 10 ml/瓶板贴 4【存储条件及有效期】未开封试剂盒试剂盒避光保存于2-8℃。
有效期为六个月。
请在试剂盒标注的有效日期内使用。
鸡肿瘤坏死因子-α原核表达及生物活性鉴定
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ｍｇ 在 ５ 稀 释 度 下 能 显 著 促 进 淋 巴细 胞 增 殖 。 ，
关 键 词 ： 瘤 坏 死 因 子一 ； 核 表 达 ； 物 活性 肿 ａ原 生
中 图分 类 号 ： ９ Ｑ２ １
文献标识码 ： Ａ
文 章 编 号 ：５ ９６０ （０ １１ －０ ６０ ０ ２—０ ５ ２ １ ） １０ ０ ４
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elisa 评估 标准
elisa 评估标准
ELISA试剂盒评估标准如下：
1.稳定性：指在规定条件下经过一段时间的保存，仍能达到相应的性能指标。
2.反应灵敏度：指单位浓度的测定物反应所产生的反应度，反应度越高，灵敏度越大。
3.精密度：指结果间相互符合的一致程度。
4.准确度：指与参考测度程序结果的一致性。
5.线性范围：指在规定的重复性和线性偏差下，测得浓度或活性值之间比例的关系。
6.基质效应：指样品中被分析物以外的组分，常常对分析物的测定过程有显著干扰，还会影响分析结果的
准确性。
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鸡肿瘤坏死因子αELISA试剂盒性能
鸡肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒
编号：JM23061E
保存条件：2-8℃
英文名称：Chicken Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA KIT
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性
鸡肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒用于检测未知抗原的双抗体夹心法: 1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。
在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。
次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。
(简称洗涤，下同)。
2.加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。
然后洗涤。
(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3.加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。
37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4.加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5.终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
6.结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。
也可测OD值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔OD值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
鸡肿瘤坏死因子α ELISA试剂盒性能
1．灵敏度：最小的检测浓度小于1号标准品。
稀释度的线性。
样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2．特异性：不与人其它细胞因子反应。
3．重复性：板内、板间变异系数均小于10%。
公司提供免费代测服务，一周内出结果，保证质量。
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