淡黄花百合花粉活力及其测定方法比较
花粉活力测定的3种方法
试验16 花粉活气的测定在作物杂交育种.作物壮实机理和花粉心理的研讨中,常涉及花粉活气的判定.控制花粉活气快速测定的办法,是进行雄性不育株的选育.杂交技巧的改进以及揭示表里身分对花粉育性和壮实率影响的基本.一.花粉萌发测定法【道理】正常的成熟花粉粒具有较强的活气,在合适的造就前提下便能萌发和发展,在显微镜下可直接不雅察盘算其萌发率,以肯定其活气.【器材与器具】载玻片;显微镜;玻棒;恒温箱;造就皿;滤纸.【试剂】造就基:10%蔗糖,10mg/L硼酸,0.5%的琼脂.称10g蔗糖.1mg 硼酸.琼脂与90ml水放入烧杯中,在100℃水浴中融化,冷却后加水至100ml备用.【方法】1.将造就基融化后,用玻棒蘸少许,涂布在载玻片上,放入垫有潮湿试纸的造就皿中,保湿备用.2.收集丝瓜.南瓜或其他葫芦科植物刚凋谢或将要凋谢的成熟花朵,将花粉洒落在涂有造就基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的造就皿中,在25℃阁下的恒温箱(或室温20℃前提下)中孵育,5~10min后在显微镜下检讨5个视野,统计其萌发率.【留意事项】1.不合种类植物的花粉萌发所需温度.蔗糖和硼酸浓度不合,应依植物种类而转变造就前提.2.此法也可用于不雅察花粉管在造就基上的发展速度以及不合蔗糖浓度,离体时光,情况前提等身分对花粉活气的影响.3.不是所有植物的花粉都能在此造就基上萌发,本法实用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活气的测定.二.碘- 碘化钾染色测定法【道理】多半植物正常的成熟花粉粒呈球形,积聚较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色.发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积聚淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色.是以,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活气.【器材与器具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平.【试剂】I2-KI溶液:取2g KI溶于5~10ml蒸馏水中,参加1g I2,待完整消融后,再加蒸镏水300ml.贮于棕色瓶中备用.【办法】收集水稻.小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药,取一花药于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,在显微镜下不雅察.凡是被染成蓝色的为含有淀粉的活气较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒.不雅察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率暗示花粉的育性.【留意事项】此法不克不及精确暗示花粉的活气,也不实用于研讨某一处理对花粉活气的影响.因为三核期退化的花粉已有淀粉积聚,遇碘呈蓝色反响.别的,含有淀粉而被杀逝世的花粉粒遇I2-KI也呈蓝色.三.氯化三苯基四氮唑(TTC)法【道理】具有活气的花粉呼吸感化较强,其产生的NADH2或NADPH2可将无色的TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲)而使其本身着色,无活气的花粉呼吸感化较弱,TTC的色彩变更不显著,故可依据花粉接收TTC后的色彩变更断定花粉的生涯气.【器材与器具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平.【试剂】0.5%TTC溶液:称取0.5g TTC放入烧杯中,参加少许95%酒精使其消融,然后用蒸馏水稀释至100ml.溶液避光保管,若发红时,则不能再用.【办法】收集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活气强,淡红次之,无色者为没有活气或不育花粉.不雅察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率暗示花粉的活气百分率.。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法花粉是植物生殖过程中非常重要的一环,其生活力的测定对于植物繁殖和生长具有重要意义。
花粉生活力测定方法是通过一系列的实验和观察,来评估花粉的生长和发育能力,从而为植物的繁殖提供科学依据。
本文将介绍几种常见的花粉生活力测定方法,希望能够对相关领域的研究者和爱好者有所帮助。
首先,传统的花粉生活力测定方法是通过染色观察花粉管的生长情况。
首先,将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察花粉管在一定时间内的生长情况,通过显微镜观察花粉管的长度和形态,从而评估花粉的生活力。
这种方法简单直观,但需要显微镜等设备,且操作较为繁琐。
其次,现代的花粉生活力测定方法中,常用的是荧光显微镜观察法。
通过将花粉与特定的荧光染料结合,使花粉在荧光显微镜下呈现出特定的荧光信号,从而可以清晰地观察花粉管的生长情况。
这种方法操作简便,观察效果明显,对于大规模的花粉生活力测定具有很大的优势。
另外,还有一种常见的花粉生活力测定方法是通过花粉萌发率来评估花粉的生活力。
这种方法是将采集到的花粉悬浮在含有营养液的培养基中,然后观察一定时间内花粉的萌发情况,通过统计萌发的花粉数量来评估花粉的生活力。
这种方法简单易行,可以在较短的时间内获取较为准确的结果。
除了上述几种方法外,还有一些新兴的花粉生活力测定方法,如分子生物学技术的应用、电子显微镜的观察等,这些方法在花粉生活力测定领域也取得了一些重要的进展。
综上所述,花粉生活力测定是植物繁殖和生长研究中的重要内容,而花粉生活力的准确测定则需要科学、准确的方法。
不同的方法各有优劣,研究者可以根据具体的实验目的和条件选择适合的方法进行花粉生活力的测定,从而为植物繁殖和生长研究提供可靠的数据支持。
希望本文介绍的几种常见的花粉生活力测定方法对相关领域的研究者和爱好者有所帮助,也希望在未来的研究中能够有更多更准确的花粉生活力测定方法被发展和应用。
花粉生活力测定方法研究进展
花粉生活力测定方法研究进展摘要:总结了花粉活力测定的染色法、离体萌发法以及田间授粉法等的原理和应用并分析了各种方法的优缺点。
关键词:花粉花粉活力测定方法花粉是高等植物的雄性配子体,在有性繁殖过程中起到传递雄性亲本的遗传信息。
花粉不仅是植物遗传、育种、进化、生殖的重要研究对象,也是孢粉分析、蜂群培育、药物制造、医疗及生理实验的重要材料。
花粉活力是花粉具有生长、萌发、或发育的能力。
在农业生产及农业常规杂交育种的中,研究花粉的生活力和育性是不可缺少的基础性工作。
农业生产和育种工作通常会遇到花期不一致带来的困难,为解决这一难题,保存花粉的活力成为重要手段,而在贮藏花粉之前必须先检测花粉的活力。
不同种类植物花粉的自然寿命、适宜的贮藏方式及花粉活力适宜的测定方法不同。
因此,掌握花粉活力的检测方法对提高育种效率有较高的作用和意义。
综合前人的研究结果,花粉生活力的检测方法可以分为四大类:①染色法;②萌发测定法;③田间授粉检测法;④形态测定法、无机酸检测法。
1染色法1.1TTC染色法TTC即2,3,5-氯代三苯基四氮唑,它是一种氧化还原染料,水溶液无色。
基本原理是[1]:当TTC渗入细胞后,遇到活细胞里的脱氢酶接受氢离子,由无色的氧化型变成红色还原型不溶于水的化合物,由此来判断花粉的生活力。
具体操作步骤:①配制PH为7.17的磷酸缓冲液。
称取0.832克磷酸氢二钠和0.273克的磷酸二氢钾溶于100ml的蒸馏水中,调整pH为7.17。
②TTC溶液配制。
依据不同植物称取0.02~1.0g的TTC溶于100ml的磷酸缓冲液中,于棕色瓶中黑暗处保存。
③染色。
取少量花粉置于载玻片上,加上一滴TTC溶液,用镊子搅拌均匀,盖上盖玻片,然后放置于35℃的恒温箱中染色15~20min。
④镜检。
于10×10倍镜下观察,凡具有活力的花粉被染成红色,部分丧失活力的呈现粉红色,无色的是的或不育的花粉粒。
凌春英,肖恩等的研究[2]得出常温、黑暗条件下用TTC染色12h可达到较好的观察效果,并认为TTC法是大花蕙兰和墨兰花粉活力测定便捷、有效的方法。
花粉活力测定的3种办法
精心整理实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法【原理】水放???????1.用。
2.20℃条???????1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
二、碘-碘化钾染色测定法多数植物正常的成熟花粉粒呈球形,积累较多的淀粉,I2-KI溶液可将其染成蓝色。
发育不良的花粉常呈畸形,往往不含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。
因此,可用I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】???显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
???【试剂】-KI300ml。
???I2~3张片??基四氮唑)还原成红色的TTF(三苯基甲??)而使其本身着色,无活力的花粉呼吸作用较弱,TTC 的颜色变化不明显,故可根据花粉吸收TTC后的颜色变化判断花粉的生活力。
【器材与用具】显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;恒温箱;棕色试剂瓶;烧杯;量筒;天平。
【试剂】0.5%TTC溶液:称取0.5gTTC放入烧杯中,加入少许95%酒精使其溶解,然后用蒸馏水稀释至100ml。
溶液避光保存,若发红时,则不能再用。
采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的活力百分率。
几种百合花粉生活力测定及贮藏条件研究
几种百合花粉生活力测定及贮藏条件研究作者:郭思佳等来源:《江苏农业科学》2015年第09期摘要:以2种野生百合(山丹、有斑百合)、3种切花百合(西伯利亚、索邦、白天堂)和1种栽培百合(兰州百合)为材料,采用离体萌发法测定花粉生活力,研究花粉萌发最适的培养条件和保持花粉活力最适的贮藏条件。
结果表明,西伯利亚和索邦最适培养基配方为5%蔗糖+20 mg/L H3BO3,有斑百合和兰州百合为15%蔗糖+20 mg/L H3BO3,山丹为5%蔗糖+10 mg/L H3BO3,白天堂为10%蔗糖+80 mg/L H3BO3;除有斑百合外,其他百合均在室内散射光照射下花朵完全开放时萌发率最高;低温贮藏有利于保持花粉的活性,-20 ℃条件下贮藏1年,各百合花粉均有一定生命力。
关键词:百合;花粉;生活力;贮藏中图分类号: S682.2+65.03文献标志码: A文章编号:1002-1302(2015)09-0205-03百合(Lilium brownii var. viridulum Baker)为百合科百合属常见本草类植物,扎根处有鳞有茎[1]。
百合赏心悦目,多为观赏用,多彩且花瓣较大,盛开时清新柔美,常被用作室内盆栽、插花,众多园林小榭、高校雅阁里也频现身姿;百合还是常见的食材和药材[2]。
百合品种众多,目前记载的有115种,一半以上在中国被发现和培育,而其中又包括18个变异品种[3]。
目前,市场存在三大百合杂种系列,即东方百合、麝香百合、亚洲百合,生产中均存在抗病性和抗热性差、花色单一等问题,需要通过杂交育种方法培育更为优良的百合新品种[4],这是获得百合新品种的主要途径[5]。
但是,由于很多百合品种杂合度较高、花粉活性较低且不宜贮藏,不宜作为父本使用[6]。
因此,对百合花粉生活力及其贮藏条件进行研究,对百合杂交育种工作的开展具有十分重要的意义。
对于百合花粉的萌发和贮藏,前人已做过不少研究。
张艺萍等对30个百合品种和2个野生百合的花粉生活力进行测定,结果表明,32个百合品种中,Casa Blanca的萌发率最高[7];李润根等对万载龙牙百合花粉的萌发进行研究,认为醋酸洋红法测定龙牙百合花粉生活力效果最好[8];孙晓光等研究亚洲百合精粹的开花习性及花粉特性,确定精粹百合花粉萌发的最适培养基为10%蔗糖+10 mg/L硼酸+10 mg/L氯化钙+0.5 g琼脂[9];张艺萍等对32个基因型的百合品种进行贮藏条件研究,得出在冷藏条件下花粉萌发率随贮藏时间的推移总体呈下降趋势但下降速度比室温贮藏明显缓慢的结论[10]。
2实验二、花粉生活力测定
前 言
花粉生活力测定在育种 力 2.雄性不育系的鉴定
实验目的:
学习并初步掌握作物花粉生 活力测定的常用方法
测定方法:
(一)I-KI染色鉴定
(二)TTC染色鉴定
(三)花粉粒发芽鉴定
实验方法 I-KI染色鉴定:
正常的成熟花粉粒体积较大, 并含有大量的淀粉粒,遇I-KI 呈紫黑色,不正常的花粉粒体 系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。
实验方法 TTC染色鉴定:
具有生活力的花粉中含有 脱氢酶,它能催化引物使脱下 的氢与TTC结合,生成红色化 合物甲替。凡有生活力的花粉 呈红色,生活力弱的呈浅红色, 无生活力的不显色或成黄色。
实验方法
花粉粒发芽鉴定:
在人工培养基上进 行发芽试验,可以比较 准确地判断花粉的生活 力。
实验步骤
I-KI染色鉴定:
2 .准备 TTC 染色和发芽试验的材料, 置培养箱保温; 3.调试显微镜,I-KI染色鉴定; 4.TTC染色鉴定、发芽率调查。
作业
实验三、作物花粉生活力测定 1.测定方法和原理: (一)I-KI染色鉴定:正常的成熟花粉粒体积较大,并含有大量的淀粉 粒,遇I-KI呈紫黑色,不正常的花粉粒体系较小、有时畸形、染色浅或 不染色。 (二)TTC染色鉴定:具有生活力的花粉中含有脱氢酶,它能催化底物 使脱下的氢与TTC(氯化三苯基四氮唑)结合,生成红色化合物甲替。 凡有生活力的花粉呈红色,生活力弱的呈浅红色,无生活力的不显色或 成黄色。 (三)花粉粒发芽鉴定:在人工培养基上进行发芽试验,可以比较准确 地判断花粉的生活力。 2.实验结果: 材料 I-IK染色率% TTC染色率% 发芽率%
用镊子夹一个花药于载玻片 上滴上一滴1%I-KI溶液 用镊子将花药夹碎并把碎片 去干净盖上盖玻片置显微 镜下观察。
花粉活力测定的3种方法
欢迎阅读实验16?花粉活力的测定在作物杂交育种、作物结实机理和花粉生理的研究中,常涉及花粉活力的鉴定。
掌握花粉活力快速测定的方法,是进行雄性不育株的选育、杂交技术的改良以及揭示内外因素对花粉育性和结实率影响的基础。
一、花粉萌发测定法90ml 水放???????1.用。
2.采集丝瓜、南瓜或其他葫芦科植物刚开放或将要开放的成熟花朵,将花粉洒落在涂有培养基的载玻片上,然后将载玻片放置于垫有湿滤纸的培养皿中,在25℃左右的恒温箱(或室温20℃条件下)中孵育,5~10min 后在显微镜下检查5个视野,统计其萌发率。
????【注意事项】???1.不同种类植物的花粉萌发所需温度、蔗糖和硼酸浓度不同,应依植物种类而改变培养条件。
???2.此法也可用于观察花粉管在培养基上的生长速度以及不同蔗糖浓度,离体时间,环境条件等因素对花粉活力的影响。
3.不是所有植物的花粉都能在此培养基上萌发,本法适用于易于萌发的葫芦科等植物花粉活力的测定。
-KI溶I2??????【试剂】-KI溶液:取300ml。
???I2贮于棕色瓶中备用。
【方法】采集水稻、小麦或玉米可育和不育植株的成熟花药,取一花药于载玻片上,加一滴蒸馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI溶液,盖上盖玻片,在显微镜下观察。
凡是被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐色的为发育不良的花粉粒。
观察2~3张片子,每片取5个视野,统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性。
??【注意事项】此法不能准确表示花粉的活力,也不适用于研究某一处理对花粉活力的影响。
因为三核期退化的花粉已有淀粉积累,遇碘呈蓝色反应。
另外,含有淀粉而被杀死的花粉粒遇I2-KI也呈蓝色。
氯化三苯100ml【方法】?采集任何植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,加1~2滴0.5%TTC溶液,搅匀后盖上盖玻片,置35℃恒温箱中,10~15min后镜检,凡被染为红色的花粉活力强,淡红次之,无色者为没有活力或不育花粉。
花粉生活力测定方法
花粉生活力测定方法
花粉生活力是指花粉颗粒在一定条件下能够完成受精和发育的能力。
花粉生活力的测定对于植物的研究和育种具有重要意义。
下面将介绍几种常用的花粉生活力测定方法。
首先,最常用的方法是离体花粉萌发法。
这种方法是将收集到的花粉在一定的培养基上进行培养,观察花粉颗粒是否萌发。
通过观察花粉管的生长情况和数量,可以初步判断花粉的生活力。
这种方法简单易行,可以在实验室条件下进行。
其次,还有花粉染色法。
这种方法是将花粉颗粒染色后观察其形态和结构,从而判断花粉的生活力。
通过观察染色后的花粉颗粒的形态、颜色和内部结构,可以初步判断花粉的生活力。
这种方法需要借助显微镜进行观察,对实验条件要求较高。
另外,还有花粉活力染色法。
这种方法是利用活性染料对花粉颗粒进行染色,观察染色后的花粉颗粒的颜色和形态,从而判断其生活力。
这种方法对于花粉的活力有较高的敏感性,可以较准确地判断花粉的生活力。
最后,还有花粉酶活性法。
这种方法是通过检测花粉中的酶活性来判断其生活力。
通过测定花粉中的酶活性,可以间接地反映出花粉的生活力。
这种方法需要借助生化实验室进行,对实验条件和仪器设备要求较高。
综上所述,花粉生活力的测定方法有多种,每种方法都有其特点和适用范围。
在实际应用中,可以根据具体的研究目的和实验条件选择合适的方法进行花粉生活力的测定。
通过准确测定花粉的生活力,可以为植物的研究和育种提供重要的参考依据。
植物花粉生活力测定技术
1.测定花粉生活力的意义有哪些? 2.分析在实验中出现的问题,并找出原因所在。 3.将四种方法的结果分别记载于表中,并比较结果是否一致,如不一致,分析其原因。Fra bibliotek表 1-6
供试 花粉收集 测定 第一视野
品种 日期 日期
第二视野
具有生活力 第三视野
的花粉%
备注
直接鉴定法
TTC 染色法
发芽测定法 形态鉴定法
1.外地采集来的花粉或杂交时父本花期早于母本时都要将花粉进行短暂贮藏; 2.自交或远缘杂交时,为了分析结实率或不结实原因时; 3.为了鉴定雄性不育系时; 4.了解某些杂交技术时,如测定花粉的刺激等作用,测定受精选择性等。 因此,要根据各种植物花粉的特点,采取适当的保存方法。花粉生活力的测定方法很多, 其中发芽试验手续较复杂,设备要求较高,需时也较长。为了简易而迅速的测定花粉生活力, 也常采用化学染色的方法,但是此法也有缺点,就是染上色的花粉不一定都具有生活力,因 为染上色的花粉中也包括了那些生活力弱不能正常发芽的花粉,所以一般常用而且较为可靠 的方法仍然是采用花粉发芽实验。要是要求不严格对新采集的花粉还有一个较简便的鉴定方 法——形态鉴定法。 本实验目的是学习花粉生活力测定的方法,进而研究花粉寿命长短与环境条件的关系, 以探求保存花粉的合适方法。
(2)TTC 溶液:称取 0.02~0.05 克(不同植物所用的量是不同的)的 TTC 溶解在 10ml 的磷酸缓冲液中,溶液配好后装入棕色滴瓶内,置入暗处,因氯化三苯基四唑有毒,操作时 要注意安全。
2.操作步骤: (1)取少量花粉放在载玻片上,并在花粉上滴上 1~2 滴配制液,用玻璃棒混合后盖上 盖玻片。 (2)将载玻片置于恒温箱中(35~40℃)约 15~20min。 (3)在显微镜(10×10)下观察:凡具有生活力的花粉呈红色,部分丧失生活力的呈 淡红色,无色的是死的和不育的花粉粒。 3.观察和测定结果:每片观察 3 个视野,并统计具有生活力花粉的百分率,填入表 1 -6。 (三)发芽测定法(培养基培养法) 1.培养基的配制 常用的花粉发芽培养基有液体和固体两种。以前者最为简便。本实验选用前者。其有效 成分主要有:蔗糖、硼酸、柠檬酸、赤霉素等。不同的植物所用的蔗糖培养液的浓度是不同 的,配制 3~30%的蔗糖培养液:在 100ml 水中,加糖 3~30g,加热溶解后,再加 0.1%硼 酸数滴。 2.制片 取双凹载玻片,滴 2 滴培养液于槽中,用解剖针挑少许花粉均匀撒于培养液的表面(注 意不必搅拌,以防花粉混于液体中因缺少空气而影响发芽,又因花粉深浅不一而在显微镜检 查时因光线折射而不易观察。)处理好后,放于一下部添有少量蒸馏水、内有两根玻璃棒的 培养皿中(注意不要使水没过载玻片),放到恒温为 25℃左右的恒温箱中或室内 2h。 3.镜检 将放置 2h 后的载玻片取出,放在显微镜下观察三个视野,统计总花粉数与发芽的花粉 数,然后计算比例,填入下面的表格中。 (四)形态鉴定法 对于新采集的花粉来说,还有一个更为简便的鉴定方法——形态鉴定法。将花粉用解剖 针播于一般载玻片上,然后直接放到显微镜下观察,根据形态特征,判断花粉的生活力状况, 一般来说,畸形、皱缩、小形化等均为无生活力花粉,而有光泽、饱满、具有本品种花粉典 型特征等性状的均为有生活力花粉。将观察的结果统计一下填写下表格。
花粉活力测定实验报告
花粉活力测定实验报告
实验目的:
本实验旨在测定花粉活力,探究花粉活力与种子萌发率的相关性,并为进一步了解植物繁殖提供基础数据。
实验材料:
需要用到的材料有:钟形筛、山梨酸钠、花粉液、蒸馏水、苏木素、石蜡、显微镜、玻片、载玻片等。
实验步骤:
1.取50个种子,分别放置在两个装有10mL山梨酸钠液的钟形筛中,浸泡12小时,使其吸满山梨酸钠液,为后续实验做准备。
2.将钟形筛里的山梨酸钠液倒出,并加入2mL的花粉液,然后用提供的细铁丝轻轻将花粉液和种子混合均匀,将盖在钟形筛口上的细网状皮纸去掉,取下筛分别晾干。
3.取约4g石蜡,烧入沸水,制成石蜡板。
4.取刚才的花粉和种子混合物,用丙酮水溶液进行固定处理,将处理后待测物制成薄层切片,厚度约为5µm,并在普通显微镜下以40倍目镜下进行测定。
5.在测定器上,取一端已蒸发完的种子粘贴于载玻上,于另一角上滴几滴蒸馏水,将另一玻片压上,以便能观察到花粉在萌发过程中对种子萌发的影响。
实验结果:
通过实验,我们发现在花粉液与山梨酸钠液比例为1:10时,花粉萌发的能力较高。
实验结果表明,萌发率与花粉活力呈正比关系。
同时,我们还观察到花粉对萌发过程产生了显著的影响,使种子萌发率提高了约20%。
结论:
通过本次实验,我们深入了解了花粉活力测定的方法和实验步骤,比较水平地掌握了实验操作技术,得到了可靠的实验结果。
我们还发现花粉具有显著的萌发促进作用,为深入探究植物繁殖乃至生物学领域提供了重要参考数据,对于加深我们对植物学的认识也具有一定意义。
不同园艺植物花粉离体培养生活力的测定分析
【方法】 采集植物的花粉,取少许放在干洁的载玻片上,
含淀粉或积累淀粉较少,I2-KI溶液染色呈黄褐色。因此,可用
I2-KI溶液染色来测定花粉活力。
【器材与用具】 显微镜;载玻片与盖玻片;镊子;棕色试剂瓶;烧 杯;量筒;天平。 【试剂】 I2-KI溶液
【步骤】 采集成熟花药,取一花药于载玻片上,加一滴蒸
馏水,用镊子将花药捣碎,使花粉粒释放,再加1~2滴I2-KI
力,但在极干燥的条件下,花粉失去水分,
也不利于保存。
亚达姆斯试验发现苹果花粉在干燥状态下, 可保存3个月;如放在2~8℃,湿度80%的条 件下,经过5个星期即失去生活力。维霍夫试 验中,丁香的花粉贮藏在干燥器中,15d以后 发芽率降到50%;至20d时,仅有个别花粉发 芽;到30d时,即全部死亡。
(1)采集花朵
选择正常的无病虫害的园艺植株上含苞待 放正常的花朵,采集后带回实验室剔除过大及 过小的以及一些叶子和杂质。
(2)收集花药及散粉
用镊子取出花药(每个园艺植物取20个花蕾的 花药)置于培养皿(纸盒-花粉量多)中,写上 标签,进行必要的加温处理(培养箱温度25℃ 使其散粉。
(3)花粉的储藏
实习三
不同园艺植物花粉 离体培养生活力的测定
一、实验目的
1.掌握园艺植物的花粉收集、并掌握利用不 同方法进行花粉生活力的测定。 2.观察花粉在离体条件下的萌发情况,认识花 粉萌发形成花粉管的外形和伸长过程以及萌 发的长度,为理解园艺植物的生殖过程及杂交 育种奠定基础。
二、实验原理
正常的成熟花粉粒具有较强的活力,在适宜 的培养条件下便能萌发和生长,在显微镜下可直 接观察计算其萌发率,以确定其活力。
溶液,盖上盖玻片,在显微镜下观察。 凡是被染成蓝色的为含有淀粉的活力较强的花粉粒,呈黄褐 色的为发育不良的花粉粒。观察2~3张片子,每片取5个视野, 统计花粉的染色率,以染色率表示花粉的育性。】 具有活力的花粉呼吸作用较强,其产生的NADH2或 NADPH2可将无色的TTC(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)还原成
百合不同品种间花粉萌发活力检测分析
收稿日期:2017-05-10基金项目:北京市科技计划项目(D161100001916003);北京市属高等学校创新团队建设与教师职业发展计划资助项目(IDHT20150503);林果业生态环境功能提升协同创新中心资助项目(PXM2017-014207-000043)第一作者:于金平(1990-),女,硕士研究生,从事园林植物与观赏园艺研究,E-mail :2285956482@ 通信作者:王文和(1964-),男,博士,教授,从事园林植物与育种研究,E-mail :wwhals@百合是一种从古至今都受人喜爱的世界名花。
世界上共发现百合属(Lilium )植物大约115种,多数来自北半球的温带及高山地区,尤其是在亚洲东部地区。
中国拥有丰富的百合种质资源,共分布有55种,其中35种为百合不同品种间花粉萌发活力检测分析于金平,王媛媛,张琪,王文和,冷平生,赵祥云(北京农学院园林学院/北京林果业生态环境功能提升协同创新中心,北京102206)摘要:以不同类型百合的花粉为研究对象,探讨不同品种百合花粉萌发的特点以及不同类型百合花粉的萌发是否具有一定的规律性,旨在为百合杂交育种中父本材料的选择以及授粉方法的改良提供依据。
以百合5个类型共43个品种的花粉为材料,利用离体萌发法,探讨不同品种百合花粉萌发活力,筛选适用于大部分品种的最佳培养基,结果表明,在蔗糖100g ·L -1、硼酸20mg ·L -1、琼脂10g ·L -1的固体培养基上可以较好地萌发。
大多数百合品种都能在12h 内达到最大萌发率,也有少数品种在24h 还处于萌发状态。
百合会因自身遗传特性导致萌发率不同,其中,TR 类百合总体萌发活力最强,平均萌发率80.98%;LA 类百合萌发率最低,平均为13.49%;OT 类、A 类和AT 类萌发率居中,分别为49.06%,46.05%和50.06%。
百合花粉管自身寿命也存在明显差异,在43个百合品种中,发现有18个品种在培养后期花粉萌发率明显下降,这主要是由于培养后期花粉管自身破裂所导致的。
淡黄花百合花粉活力及其测定方法比较
淡黄花百合花粉活力及其测定方法比较作者:刘伟丁长春沐建华来源:《江苏农业科学》2015年第04期摘要:用I-KI法、氯化三苯基四氮唑(TTC)法、离体萌发法连续7 d对淡黄花百合(Lilium sulphureum Baker)的花粉活力进行测定,结果表明,I-KI法、离体萌发法、TTC法测定的淡黄花百合花粉活力不完全相同。
I-KI法、离体萌发法所得花粉活力无显著差异。
I-KI 法、离体萌发法所得花粉活力无显著差异,由于I-KI法较离体萌发法简单、成本低、所需时间短,因此是快速测定淡黄花百合花粉活力的最佳方法。
开花第2至第4天花粉活力最高且无显著差异,这几天都可以进行杂交授粉,但从发育的角度考虑,以开花第2天授粉最佳。
关键词:淡黄花百合;花粉活力;离体萌发法;TTC法;I-KI法中图分类号: S682.2+65.03 文献标志码: A文章编号:1002-1302(2015)04-0198-02收稿日期:2014-06-03基金项目:云南省教育厅自然科学研究项目(编号:2013Y582);文山学院重点学科资助项目(编号:09wsxk 02)。
作者简介:刘伟(1977—),男,湖南祁东人,硕士,讲师,从事植物学研究。
E-mail:liuwei00780@。
百合是世界五大切花之一,也是国内重要的高档花卉。
我国野生百合种质资源丰富,为培育百合新品种奠定了良好的种质资源基础[1]。
花粉是开展杂交育种最基本也是最重要的材料,花粉活力大小对育种效果影响很大,授粉前对花粉活力进行检测至关重要[2]。
许多学者对不同植物的花粉活力测定方法进行研究,常用的方法包括染色法、萌发法[3-7]。
郝瑞娟等比较了亚洲百合、东方百合、麝香百合的部分栽培品种花粉活力的测定方法,认为染色法简单,萌发法准确,育种时应将二者结合使用[8]。
赵兴华等对百合花粉生活力测定、贮藏方法进行了研究[9]。
张福平等研究了影响百合花粉活力的化学因素[10]。
花卉的花粉生活力与花粉质量分析
花卉的花粉生活力与花粉质量分析花粉是植物生殖的重要组成部分,对于花卉的繁殖和生长具有至关重要的作用。
花粉生活力和质量直接影响着花卉的结实率、品质和抗逆能力。
本文将探讨花粉的生活力和质量,并介绍一些分析方法。
一、花粉生活力花粉生活力指的是花粉颗粒在一定条件下的活力水平,是花粉能否成功受精和发育的关键。
花粉生活力的高低取决于多个因素,包括花粉颗粒的形态结构、膜完整性以及花粉粒内部的细胞物质等。
花粉颗粒的形态结构对其生活力有着重要影响。
形态结构良好的花粉颗粒通常具有光滑、饱满的外壁,并且表面覆盖着一层完整的蜡质物质,这有利于花粉在传粉过程中更好地保持活力。
花粉粒内膜的完整性也是衡量花粉生活力的重要指标之一。
膜完整的花粉颗粒能更好地保护花粉粒内的细胞物质,并具有较强的抗逆能力。
花粉颗粒内部的细胞物质对其生活力起着至关重要的作用。
其中,细胞质和细胞核是决定花粉活力的主要因素。
健康的细胞质和细胞核能够提供丰富的能量和营养物质,增强花粉的代谢活性和抗逆能力。
二、花粉质量分析花粉质量分析是评估花粉生活力和质量的一种方法。
常用的花粉质量分析方法包括活力染色法、活性碘溶液法和荧光染色法等。
活力染色法是一种常用的花粉质量分析方法。
该方法通过染色花粉颗粒,根据染色程度来评估花粉的生活力。
染色后仍然保持活力的花粉颗粒为活力高的花粉,而染色后丧失活力的花粉颗粒则为活力低的花粉。
活性碘溶液法是另一种常用的花粉质量分析方法。
该方法通过将花粉与活性碘溶液接触,观察花粉颗粒在溶液中的反应情况来评估花粉的质量。
活力高的花粉颗粒会迅速吸收溶液,而活力低的花粉颗粒则反应迟缓或不吸收。
荧光染色法是一种利用荧光染料来评估花粉质量的方法。
该方法通过将荧光染料与花粉接触,观察花粉颗粒在荧光显微镜下的荧光强度来评估花粉的生活力和质量。
活力高的花粉颗粒会显示出亮度较高的荧光信号,而活力低的花粉颗粒则荧光强度较低或无荧光信号。
三、结语花粉的生活力和质量是花卉繁殖和生长的重要指标,对于花卉的产量和品质具有重要影响。
花粉活力实验实习报告
一、实验背景花粉活力是植物繁殖过程中的重要因素,直接影响植物的授粉、受精和种子发育。
花粉活力的高低与植物种子的数量和质量密切相关。
为了深入了解花粉活力,本实验采用碘-碘化钾染色法和Alexander染色法对花粉活力进行测定。
二、实验目的1. 掌握植物花粉活力的检测方法。
2. 理解碘-碘化钾染色法和Alexander染色法分析花粉活力的实验原理。
3. 通过实验了解花粉的可育性,并掌握不育花粉的形态、生理特征。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜植物花粉、碘-碘化钾溶液、Alexander染色液、蒸馏水、显微镜等。
2. 实验仪器:显微镜、烧杯、滴管、镊子、培养皿等。
四、实验方法1. 碘-碘化钾染色法(1)将新鲜花粉置于载玻片上,滴加碘-碘化钾溶液。
(2)用镊子轻轻搅拌,使花粉充分染色。
(3)观察显微镜下的花粉,记录花粉的染色情况。
2. Alexander染色法(1)将新鲜花粉置于载玻片上,滴加Alexander染色液。
(2)用镊子轻轻搅拌,使花粉充分染色。
(3)观察显微镜下的花粉,记录花粉的染色情况。
五、实验结果与分析1. 碘-碘化钾染色法实验结果显示,正常花粉在碘-碘化钾溶液中染色后呈蓝色,而不育花粉则无染色反应。
这说明碘-碘化钾染色法可以有效地检测花粉的可育性。
2. Alexander染色法实验结果显示,正常花粉在Alexander染色液中染色后呈绿色,而不育花粉则无染色反应。
这说明Alexander染色法也可以有效地检测花粉的可育性。
通过对比两种染色方法,发现碘-碘化钾染色法操作简单、成本低廉,而Alexander染色法染色效果较好,但成本较高。
在实际应用中,可根据实验需求选择合适的染色方法。
六、实验结论1. 碘-碘化钾染色法和Alexander染色法均可有效地检测花粉的可育性。
2. 通过实验了解花粉的可育性,有助于提高植物繁殖效率。
七、实验心得1. 本实验使我掌握了植物花粉活力的检测方法,加深了对植物繁殖过程的理解。
百合花粉生活力测定
百合花粉生活力测定孙永田(齐齐哈尔大学生命科学与农林学院园艺101,齐齐哈尔 161006)摘要百合,球根花卉近年来在我国市场需求越来越大,培育新的百合品种是我国花卉科研工作者的工作之重。
通过染色观察发测定百合花粉生活力,本实验采用两种方法为碘-碘化钾法和α-奈酚法。
关键词百合生活力测定染色观察法碘-碘化钾法α-奈酚法引言我国球根花卉近年来生产面积不断扩大,特别是百合种球的用量不断增加,根据资料统计2004年国内种植百合的面积达2567hm2,生产切花4.7亿枝,但是每年生产中使用的种球一亿粒以上都是从荷兰进口的。
我国是百合属植物自然分布的中心,原产于中国的约47种,野生百合种质资源丰富,有很多独特的特性。
但是长期以来,我国百合的育种工作远远落后于荷兰、美国、日本等发达国家,充分利用我国丰富的野生百合资源和国外的优良品种资源,培育具有自主知识产权的百合新品种,打破垄断行为,加快百合产业的发展,是我国花卉科研工作者的当务之急。
当前育成的百合新品种中,大部分采用的是常规杂交育种方法,一部分为远缘杂交种。
进行杂交工作之前,熟悉掌握花粉的生活力是育种工作的必要准备。
从花粉生活力作为亲本选择的标准进行亲本筛选,提高杂交授粉成功率。
1 试验方法和试验方案1.1试验方法染色观察法1.1.1碘-碘化钾法(I-KI)碘-碘化钾溶液的配制:取2g碘化钾溶于5~10ML蒸馏水中,然后加入1g碘,待全部溶解后加入蒸馏水至300ML定容。
取适量新鲜花粉置于载玻片上,加1滴蒸馏水,再加1~2滴碘-碘化钾溶液,盖上盖玻片,置于低倍显微镜下观察。
凡花粉粒被染成蓝色的表示具有生活力,呈黄褐色为缺少生活力的花粉。
1.1.2α-奈酚法A.配置药液:①将0.20g联苯胺溶于100ml的50%的乙醇中,盛入棕色瓶中,放暗处备用。
②将0.15gα-奈酚溶于100ml的乙醇中,盛入棕色瓶中,放暗处备用。
③将0.25克碳酸钠溶于100ml蒸馏水中,盛入白色瓶中备用。
实验:园艺植物花粉生活力测定
三、说明:
父母本花期不一致时,花粉需要经过 一段时间的贮藏;从外地采集花粉做父本 时,花粉要经过运输、邮寄过程。
因此在杂交前应检验花粉的生活力, 以免应用无生活力的花粉而造成杂交工作 的失败。
四、实验原理:
1.碘-碘化钾染色法
正常的花粉积累淀粉较多,而不正常的花粉则
较少。正常花粉用I-KI染色后呈蓝色,而发育不良
勿忘草花粉在花瓣上的放大镜头
花粉生活力测定技术
一、目的和要求
学习花粉采集、干燥方法,掌握花粉贮藏和 花粉生活力测定的技术。
Leabharlann 二、材料和用具材料:果树、蔬菜或花卉的花粉。 用具:显微镜、天平、镊子、载玻片、盖玻片、 培养皿、干燥器、滴瓶、滤纸、纱布。 药品:联苯胺、α-萘酚、碳酸钠、过氧化氢、碘、 碘化钾、乙醇等。
取出花药放在纸上或培养皿中,放于干燥的室内, 花药裂开后将花粉倒入小玻璃瓶中,瓶口上塞以棉 花或橡皮塞,贴上写有品种名称的标签。 把花粉瓶放于干燥器内,使花粉在相对湿度较 低(一般0~40%)、低温(0~4℃)黑暗的条件 下贮藏。 用室温、正常空气湿度贮藏的花粉作对照。
五、方法步骤:
(二)药品配制
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
凤梨科植物的花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
银叶树花粉
瑞士摄影师马丁-奥格里利(Martin Oeggerli) 用扫描电子显微镜拍摄的花粉照片
百合属植物花粉形态性状及生活力的研究的开题报告
百合属植物花粉形态性状及生活力的研究的开题报
告
一、选题背景和目的
百合属植物是重要的观赏植物之一,其花朵美丽,色彩艳丽,极具
观赏价值,而花粉是这些植物进行繁殖的重要组成部分。
随着人们对植
物繁殖机理的深入探索,深度研究百合属植物花粉的形态性状和生活力
具有重要科学意义。
因此,本研究旨在通过对百合属植物花粉进行形态
性状和生活力的评估,探究其在植物繁殖方面的重要作用和生活属性。
二、研究内容和方法
1. 花粉形态性状评估
通过光学显微镜观测,对10种百合属植物的花粉形态、大小、形状、颜色等性状进行评估,并进行统计分析。
2. 花粉萌发率测定
采用体外萌发法,测定10种百合属植物的花粉在不同培养条件下的萌发率,并以此评估其生活力。
三、预期成果
通过本研究对百合属植物花粉形态性状和生活力的评估,得出相关
数据和结论,为百合属植物繁殖机理的深入探索和生态保护提供参考和
基础数据,并为观赏植物产业的升级发展提供科学支持。
四、研究意义
本研究的结果可以为今后更好地保护和利用百合属植物提供重要依据,并有助于了解植物多样性和生态环境变化对植物繁殖的影响。
同时,本研究还能够为观赏植物的栽培和种植提供科学依据。
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淡黄花百合花粉活力及其测定方 法 比较
刘 伟 ,丁长春 ,沐 建华
( 文 山学院环境与资源学院/ 云南省文 山州生物资源开发 与研究中心 , 云南文山 6 6 3 0 0 0 )
摘要 : 用I — K I 法、 氯化三苯基 四氮唑 ( T T c ) 法、 离体萌发法连续 7 d对淡黄花百合( L i l i u m s u l p h u r e u m B a k e r ) 的花 粉活力进行测定 , 结果表 明, I —K I 法、 离体萌发法 、 T F C法测定 的淡黄花 百合花粉 活力不完全相 同。I —K I 法、 离 体萌 发法所得 花粉活力无显著差异。I —K I 法、 体萌发法所得花粉活力无显著差异 , 由于 I —K I 法较离体萌 发法简单 、 成 本低 、 所需 时间短 , 因此是快速测定淡黄花百 合花粉 活力 的最佳方法 。开花第 2至第 4天 花粉活力 最高且 无显 著差 异, 这几天都可 以进行杂交授粉 , 但从发育的角度考虑 , 以开花第 2天授粉最佳 。 关键词 : 淡 黄花百合 ; 花粉活力 ; 离体萌发法 ; T I ' C法 ; I — 。用 解剖针挑取 少量花粉置 于 载玻片上 , 加 入 1~ 2滴 I 一K I 溶液 , 轻轻 盖上 盖玻 片放 置 1~ 2 m i n , 置于低倍显微 镜下观察 。凡 染成蓝 紫色 的为发 育 好、 活力强 的花粉 , 呈黄褐色 的为发育不 良的花粉。每处理 3 个玻片 , 每个玻片观察 5个视野 , 计算 平均值 。花粉活力计算
1 9 8
江苏农业科学
2 0 1 5年第 4 3卷第 4期
刘 伟 , 丁长春 , 沐建华.淡黄花 百合花粉活力及其测定方法比较[ J ] .江苏农业科学, 2 0 1 5, 4 3 ( 4) : 1 9 8—1 9 9
d o i : 1 0 . 1 5 8 8 9 / j . i s s n . 1 0 0 2—1 3 0 2 . 2 0 1 5 . 0 4 . 0 7 2
公式麴糈活力 = ( 蓝 色 花 粉 粒数 / 总 花 粉粒 数 )×1 0 0 %。
养基及最佳贮藏条件 , 认 为蔗糖浓度 、 硼 酸浓度等对花粉萌发
均有较大影响 。本研究以淡黄花百合 花粉作为材料 , 用萌 发法 、 染 色法对淡黄花百合 的花粉活力进行测定 , 目的在于获 取快速测定花粉活力 的最佳 方法 , 明确淡黄 花百合花 粉活力
最高时期 , 在 此 基 础 上 确 定 杂 交 育种 最 佳 授 粉 时 间 , 旨在 为 提
1 . 2 . 2 . 2 氯化三苯基四氮唑 ( ' I TC ) 染色测定法 ”
用解剖
针取少量花粉置于载玻片 上 , 加 1 ~2滴 0 . 5 % T r c溶液 , 盖 上 盖玻 片。将装片置于 3 5℃恒温箱 中 , 1 5 m i n后置于低倍显 微镜下 观察 , 染成 红色的为生活力强 的花 粉 , 淡红色 的次之 , 无 色者 为没有活力或不育 的花粉 。每处理 3个玻片 , 每个玻 片观察 5个视 野 , 计算 平均值 。花粉活 力计算 公式 : 花 粉活 力 =( 被染色的花粉粒数/ 总花粉粒数 )×1 0 0 %。 1 . 2 . 2 . 3 离体萌发法” 配制0 . 0 1 %硼酸 、 0 . 0 3 % C a C 1 : 、 0 . 3 5 mo L / L蔗糖 、 0 . 7 %琼脂 的固体培养基 , 将配好 的培养 基 置于锥形瓶 灭菌 , 灭 菌完成后 待其凝 固前用移 液枪取 1 0 0~ 1 5 0 t x L滴于双孔凹玻 片处 , 用 解剖针取 花粉 置于培养 基 中, 将其放入培养皿 中( 培养皿 中事先放有湿滤 纸) , 置于 2 5℃光 照培养箱 中培养 3 h 。在光学显微镜下 , 观察 3个玻片 6个 凹 孔, 每个凹孔观察 5个视野 , 离体 培养后花粉管 明显伸长的为 有生活力的花粉 , 未伸长的为没有活力的花粉 。萌发率计算公 式: 萌发率 =( 已萌发的花粉粒数/ 总花粉粒数 ) ×1 0 0 %。 1 . 2 . 3 数据统计分析 所有试验均重复 3次 , 每次统计 5个 视野 , 采用 E x c e l 2 0 0 3 、 S P S S 1 3 . 0软件处理数据 。
水, 确 保 水 分充 足 。
1 . 2 . 2 花 粉活 力 测 定
我国野生百合种质资源 丰富 , 为 培育百合新 品种奠定 了 良好
的种质资源基 础…。花粉 是开展 杂交 育种最 基本 也是最 重
要的材料 , 花 粉 活 力 大 小 对 育种 效 果 影 响 很 大 , 授 粉 前 对 花 粉 活 力 进 行 检 测 至 关 重 要 。许 多 学 者 对 不 同 植 物 的 花 粉 活 力测定方法进行研究 , 常用 的方法包括 染色 法、 萌 发 法 。
中 图分 类 号 :¥ 6 8 2 . 2 6 5 . 0 3 文献 标 志码 : A 文章编号 : 1 0 0 2—1 3 0 2 { 2 0 1 5 ) 0 4— 0 1 9 8— 0 2
百 合是世 界五大切 花之一 , 也 是 国 内重 要 的高 档 花 卉 。
进行试验 。每天在同一时间采集花粉并进行试验 。所采集的 花粉均来 自生长健壮 、 无病虫害的同一植株 , 测量期 间按时浇
1 . 2 . 2 . 1 I — K I 染色测定法 ” 取2 g K I 溶于 1 0 mL蒸馏
水 中, 加入 1 g I : 待其全部溶解后 , 再加蒸 馏水至 2 0 0 m L , 配
郝瑞娟等 比较 了亚洲百合 、 东方百合 、 麝香百合的部分栽培 品 种花粉 活力的测定方法 , 认为染色法简单 , 萌发法准 确 , 育种 时应将二者结合使用 。赵兴华 等对百合 花粉生活 力测定 、 贮藏方法进 行 了研 究 J 。张 福平等 研究 了影 响百合 花粉 活 力的化学 因素 。车代弟 等对东方 百合 花粉萌发 培养基组 分进行了优化 。尹恒等 研究 了麝 香百合 花粉发 芽适宜 培