植物组织培养实验(7)

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植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告学院：生命科学技术学院班级：11生物技术(制品)学号：**********姓名：**植物组织培养实验报告实验一植物组织培养母液的配制一、实验目的1.了解植物组织培养基本培养基的组分及其作用。

2.学习掌握植物组织培养MS培养基的配制方法。

二、实验原理培养基是植物组织培养中离体组织赖以生存和发育的条件。

大多数培养基的成分是有无机盐、有机化合物（碳源、维生素、肌醇、氨基酸等）、生长调节物质、水分和其他附加物等五大类物质组成。

无机盐类由大量元素和微量元素组成。

大量元素中，氮类化合物主要以硝酸类和铵类化合物的形式存在，但在培养基中多用硝酸类，也可以将硝酸类和铵类混合使用；磷和硫常用磷酸盐和硫酸盐来提供；钾是培养基中主要的阳离子；钙、钠、镁的需要量较少。

微量元素包括碘、锰、铜、锌、钴、铁。

培养基中的铁离子，大多数以螯合物的形式存在，即硫酸亚铁与乙二胺四乙酸二钠的混合。

有机化合物包括碳源、维生素、肌醇、氨基酸等。

培养中的植物组织和细胞的光合作用较弱，因此，需要在培养基中附加一些碳水化合物物来提供营养需要。

培养基中的碳水化合物通常为蔗糖。

蔗糖除了作为培养基的碳源和能源外，对维持培养基的渗透压也起着重要的作用。

在培养基中加入维生素有助于细胞的分裂和增长。

一般包括VB1、B6、烟酸、生物素、叶酸、泛酸钙、VC。

肌醇在糖类的相互转化、维生素和激素的利用等方面具有重要的催进作用。

常用的植物生长调节物质包括以下三类：①生长素类：吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸（NAA）、二氯苯氧乙酸（2,4-D）②细胞分裂素：玉米素（ZT）6-苄基嘌呤（6-BA）和激动素（KT）。

③赤霉素：组织培养中使用的赤霉素只有一种，即赤霉酸（GA3）。

培养基中的其他附加物包括人工合成和天然的有机物附加物。

其中最为常见的为酵母提取物。

琼脂作为培养基的支持物，也是最常用的邮寄附加物，他可以是培养基呈固体状态，以利于组织和细胞的培养。

植物组织培养是否成功，在很大的程度上取决于培养基的选择之上。

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告植物组织培养是一种重要的生物技术手段，通过对植物细胞和组织进行离体培养，可以实现植物再生、遗传改良、病毒检测等多种目的。

本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作方法，以及培养条件对植物再生的影响。

首先，我们选择了小麦离体子叶和茎段作为实验材料，进行了消毒处理和植物组织培养基的配制。

消毒处理是植物组织培养的关键步骤之一，它能有效杀灭外源微生物，保证培养组织的纯净性。

接着，我们将消毒后的植物材料转移到含有植物生长调节剂的培养基上，进行培养。

在培养的过程中，我们注意观察培养组织的生长情况，记录下不同处理条件下植物再生的效果。

实验结果表明，植物组织培养的成功与否受到多种因素的影响，包括植物材料的选择、培养基的成分、光照和温度等环境条件。

在本次实验中，我们发现小麦离体子叶的再生能力较强，而茎段的再生效果较差。

此外，培养基中生长调节剂的种类和浓度也对植物再生有显著影响，适当的生长调节剂可以促进再生过程，而过高或过低的浓度则会抑制再生。

综合实验结果，我们得出了一些结论和建议，首先，选择适宜的植物材料对于植物组织培养至关重要，不同植物材料的再生能力存在差异，需要根据具体情况进行选择；其次，培养基的配制需要根据具体植物材料和培养目的进行调整，合适的生长调节剂浓度可以提高再生效率；最后，培养条件的控制也是影响植物组织培养效果的重要因素，包括光照、温度、湿度等，都需要进行合理的调节。

总之，植物组织培养是一项复杂而有趣的实验技术，通过不断的实践和探索，我们可以更好地理解其中的原理和规律，为植物育种和生物工程领域的研究提供重要的技术支持。

希望本次实验结果能对相关领域的研究工作有所启发，也希望能为植物组织培养技术的进一步完善贡献一份力量。

植物组织培养实验报告

摘要：以大豆子叶为外植体，在MS 培养基上附加不同浓度、不同种类的植物激素，以研究不同激素组合和不同浓度对大豆子叶愈伤诱导率的影响，并练习无菌操作。

实验结果显示第 2 组即 MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)和第 3 组即 MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L) 培养基中愈伤组织诱导率较高，为较佳的愈伤组织诱导组合。

关键词：大豆；植物组织培养；无菌操作；愈伤组织1.1 实验材料：大豆子叶1.2 实验试剂与仪器〔1〕试剂： 75%酒精、MS 干粉、蔗糖、琼脂、植物生长调节剂〔NAA、2，4-D、KT、6-BA〕、无菌水、升汞、 NaOH 溶液〔2〕仪器：超菌净工作台、圆纸片、培养皿、封口膜、称量纸、千分之一天平、不锈钢杯子、移液枪、试管、高压灭菌锅、注射器、酒精灯、镊子、手术刀、搁置架、烧杯、电炉。

1.3 实验方法培养基的配制与灭菌1.3.1.1 配制培养基的准备阶段〔1〕准备 80 个培养试管及封口膜， 2 个小培养皿、 1 个大培养皿，用洗衣粉、自来水洗净，再用蒸馏水把每一个培养试管、润洗一下。

带晾干后将试管编号 1-80；〔2〕在称量纸上用百分之一天平分别称取 1.5g 琼脂 4 份， 7.5g 蔗糖 4 份，在烧杯里用千分之一天平上称取 1.185g MS 干粉 4 份〔烧杯不要清洗〕；〔3〕剪小圆纸片 40，均分在两个小培养皿小能从中自由取出为宜；剪大圆纸片10，均分在两个大培养皿中。

然后分别用报纸包好。

〔4〕把接种工具手术刀、镊子、剪刀等用报纸包好。

1.3.1.2 配制培养基〔1〕在装有 MS 干粉的烧杯中按下表参加植物生长调节剂实验所用的所有激素浓度均为 0.5mg/mL编号培养基配置激素的加样量(ml)6-BA N A A K T2,4-D1 23 4 MS+6-BA〔1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)MS+6-BA〔2.0mg/L)+NAA(1.0mg/L)MS+KT〔0.5mg/L)+2,4-D(1.0mg/L)MS+KT〔1.0mg/L)+2,4-D(2.0mg/L)0.51.00.250.50.250.50.51.0〔2〕用量筒量取250ml 〔稍多〕蒸馏水，取一个不锈钢杯子参加150ml 蒸馏水和称量好的琼脂，在电炉子加热沸腾 2min，再参加混合好的 MS 培养基 1 号和蔗糖，混合沸腾 2min，用剩余的蒸馏水定容至 250ml；〔3〕当温度降到 60℃摆布时，将溶液 pH 调至 5.8，普通加 4 滴 NaOH 溶液即可；〔4〕取编号 1-20 的培养试管，用大量注射器以每瓶 12.5ml 摆布培养基分装在培养试管中，用封口膜封口， 4 支一捆捆扎好。

植物组织培养实验报告

院(系、部) 化学与生物工程学院专业生物技术（师）年级13级学号17130208 组别第二组课程名称植物细胞工程学实验日期2016.3-6指导老师实验名称植物组织培养综合实验一、实验目的1.熟悉MS培养基的组成，掌握贮备液的配制方法2.学习、掌握植物组织固体培养基的配制和灭菌方法；3.掌握超净工作台上的接种方法与注意事项，了解接种室的灭菌方法；4.了解组织培养的基本程序；5.掌握接种的方法和材料的培养过程；6.掌握无菌操作技术，包括外植体除菌和接种技术；7.观察外植体的生长状况、染菌状况，剔除染菌外植体；8.了解MS培养基和1/2MS培养基的区别二、实验原理1.植物细胞的全能性一切植物都由细胞构成，细胞是构成植物体的基本结构与功能单位。

植物细胞含有全套遗传信息，具有形成完整植物的潜能。

2.植物细胞表现出全能性的条件1.离体状态；2.有一定的营养物质，激素和其他外界条件（无菌、温度、pH）；3.选择性能优良、细胞全能性表达充分的基因型3.无菌条件把植物的组织、器官等，使其在人工控制的无菌条件下，使植物在人工培养基上繁殖。

用于进行组织培养的组织、器官和细胞称为外植体。

在组培中外植体都死带菌的，在接种前必须进行表面消毒，这时取得培养成功的最基本和重要的前体。

组织培养的主要过程都是在无菌条件下进行的，所以所有的器材、植物体、接种室都应是无菌的。

4.脱分化与愈伤组织已有特定结构与功能的植物组织，在一定条件下，其细胞被诱导改变原来的发育途径，逐步逆转其原有的分化形态，转变为具有分生能力的胚细胞的过程称为脱分化。

脱分化所用的化学物质与MS培养基的区别是需要激素诱导。

所以脱分化培养需在MS培养基上添加激素进行愈伤组织诱导。

5.培养基植物组织培养常用的培养基为MS培养基。

常用的凝固剂是琼脂,它的主要作用是使液体培养基凝固，琼脂本身并不提供任何营养，它只是一种高分予的碳水物从海藻中提取出来，仅溶解于热水，成为溶胶，冷却后(40℃以下)即凝固为固体状凝胶。

植物组织培养试验

植物组织培养试验《植物组织培养技术》实验指导实验一组培室设备参观及器皿的洗涤和灭菌一、目的要求：1.通过参观，了解组织培养室的几个主要组成部分和各部分应有的基本设备以及有关仪器的用途与功能。

2.通过实际操作，学会洗涤剂的配制和各种器皿的清洗和灭菌方法。

二、材料用具：高压灭菌锅、烘箱、超净工作台、双筒解剖镜、酸度测定仪、空调机、控温仪、百分之一与万分之一天平、电炉、玻璃器皿（试管、三角瓶、移液管、漏斗、烧杯、容量瓶、试剂瓶、量筒酒精灯），以及镊子、解剖刀、解剖针、手术剪，肥皂、洗衣粉、重铬酸钾、浓硫酸等。

三、说明：在进行各类具体的组培实验前，首先了解组培室的结构及主要设备的用途和性能是十分必要的,总体上的了解有利于以后各实验的进行以及正确的使用各种仪器和设备。

植物组织培养是一项十分细致的工作，为了保证植物外植体不受污染,第一关就是要对各种器皿进行清洗和消毒,使它们保持无菌状态，做这些工作同样有一套科学的方法和需要熟练的技巧，因此每个学生必须学好这套基本功。

四、方法和步骤：首先在老师带领下参观组培室，并听取讲解，然后配制洗液，称取工业用重铬酸钾40克，溶解在500ml在水中，然后徐徐加入450ml 粗制浓硫酸（或废硫酸）配好的溶液呈红色，铬酸洗液是一种强氧化剂，去污能力强，但玻璃器皿上沾有油脂、凡士林、石蜡等则用此液无效，铬酸洗液可反复使用，直到溶液呈青褐色为止。

此溶液腐蚀性强，洗涤时需注意。

每人清洗部分玻璃器皿，方法：清水洗净一泡入洗衣粉水溶液中进行洗刷f清水反复冲洗f蒸馏水淋一遍f烘干备用。

然后清洗部分较脏的玻璃器皿，方法：采用先碱后酸，即用洗衣粉洗刷后冲洗干净f晾干一侵入酪酸洗液，浸泡时间视器皿的肮脏程度而定f清水反复冲洗干净f蒸馏水淋洗一遍f烘干备用。

带有石蜡或胶布的器皿：先将其除去，再用常规洗涤，石蜡用水煮沸数次即可去掉，胶布粘着物则需用洗衣粉液煮沸数小时,再用水冲洗，凉干后浸入洗液，以后的步骤同前。

植物组织培养实验

植物组织培养实验植物组织培养实验是一项基于植物生物学的研究技术，它通过在适当的培养基中培育植物细胞、组织和器官，以研究植物生长、发育、代谢和遗传等方面问题。

植物组织培养技术一般涉及的基本步骤包括组织取样、表皮消毒、培养基制备、筛选培养物、培养、观察和数据记录等。

组织取样组织取样是植物组织培养的第一步，选择的组织应为获得感兴趣细胞或器官的基础。

通常情况下，植物种子、叶片、幼茎、根、芽、花和果实等都可以用于组织取样。

在选择组织前需要确定所研究的问题，如要研究种子发育过程，则选择发育中的种子进行取样；若要研究茎的生长过程，就选择茎的新生部位作为实验对象。

表皮消毒表皮消毒是将取得的植物组织中的微生物去除的过程。

微生物会影响组织培养发展，这会导致发生不必要的变异和甚至失败。

表皮消毒的方法有多种，其中最常用的方法是使用双氧水和75%酒精按一定方法进行消毒。

消毒之后，将组织再次用无菌水清洗，以去除残留的双氧水和酒精。

培养基制备培养基是培养组织的营养来源，可以根据不同实验设计的要求选择制备。

基本培养基配方包括营养盐和植物激素，营养盐提供必要的营养物质，而植物激素则起着促进细胞分裂和分化的作用。

例如，包含各种氨基酸、维生素和能量来源的MS基础培养基是最常用的培养基之一。

筛选培养物筛选培养物是将合适的组织细胞挑选出来放置在培养基中培育，防止其过多发生变异或者对人体等方面的危害。

在筛选培养物时，需要注意细胞数量和形态。

对于数量较多的细胞和组织，应采用无菌手术刀进行分离和挑选；而对于较小的器官如芽或根的小茎，可利用移液管或显微镜完成挑选。

培养和观察在选择出适合的培养物之后，需要将其放置在外界充分汲取空气和养分的环境中培养。

养分和水分需要在适宜的时间内追加，以适应发育的需要。

特别是对于更高级的组织器官如花，生长的要求更高，需要精心细致的培育过程。

同时还需要及时观察器官的生长和整体形态，以便对培养过程进行调整和升级。

数据记录数据记录是组织培养实验最后一个步骤，它的目的是为了明确整个实验过程中的变化和优化。

植物组织培养的实验报告

植物组织培养的实验报告Experimental report on plant tissue culture( 实验报告)姓名：____________________单位：____________________日期：____________________编号：YB-BH-053838植物组织培养的实验报告一、实验目的1．掌握无菌操作的植物组织培养方法；2．通过配置MS培养基母液，掌握母液的配置和保存方法；3．通过诱导豌豆根、茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；4．通过诱导豌豆茎、叶形成愈伤组织学习愈伤组织的建立方法；5．了解植物细胞通过分裂、增殖、分化、发育, 最终长成完整再生植株的过程, 加深对植物细胞的全能性的理解。

二、实验原理（一）植物组织培养植物组织培养是把植物的器官，组织以至单个细胞，应用无菌操作使其在人工条件下，能够继续生长，甚至分化发育成一完整植株的过程。

植物的组织在培养条件下，原来已经分化停止生长的细胞，又能重新分裂，形成没有组织结构的细胞团，即愈伤组织。

这一过程称为“脱分化作用”，已经“脱分化”的愈伤组织，在一定条件下，又能重新分化形成输导系统以及根和芽等组织和器官，这一过程称“再分化作用”。

（二）植物细胞的全能性植物细胞的全能性即是每个植物的本细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，在一定培养条件下每个细胞都可发育成一个与母体一样的植株。

（三）组织的分化与器官建成外植体诱导出愈伤组织后，经过继代培养，可以在愈伤组织内部形成一类分生组织即具有分生能力的小细胞团，然后，再分化成不同的器官原基。

有些情况下，外植体不经愈伤组织而直接诱导出芽、根。

（四）培养基的组成培养基中各成分的比例及浓度与细胞或组织的生长或分化所需要的最佳条件相近，似成功地使用该培养基进行组织培养的主要条件。

营养培养基一般由无机营养、碳源和能源、维生素、植物激素（生长调节剂）和包括有机氮、酸和复杂物质的添加剂组成。

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告目录1. 引言1.1 研究背景1.2 研究目的1.3 研究意义2. 实验方法2.1 材料准备2.2 实验步骤2.3 实验设计3. 结果与讨论3.1 实验结果3.2 结果分析3.3 结果讨论4. 结论引言研究背景植物组织培养是一种重要的生物技术手段，可用于植物繁殖、种质改良、病毒检测等方面。

通过培养植物的组织和细胞，可以实现对植物特定性状的调控和改善。

研究目的本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作步骤，研究不同培养条件下植物组织生长情况，为植物生物技术的研究提供参考。

研究意义植物组织培养技术可以加快新品种选育的速度，提高植物的遗传改良效率，对于传统育种技术的完善和植物种质资源的保存具有重要意义。

实验方法材料准备- 植物组织样品- 培养基- 生长室- 培养瓶- 剪刀、消毒酒精等无菌操作工具实验步骤1. 准备培养基，对其进行灭菌处理。

2. 取样品进行无菌处理，切取植物组织。

3. 将植物组织置于培养基上，放入生长室进行培养。

4. 定期观察植物组织的生长情况，记录数据。

5. 根据实验设计，对不同处理组进行相应操作。

实验设计本实验设计了对照组和不同处理组，比较不同处理条件对植物组织生长的影响，以验证植物组织培养的有效性。

结果与讨论实验结果经过一段时间的培养，观察到植物组织在培养基上出现生长现象，不同处理组的生长情况有所不同。

结果分析通过对实验结果的分析，可以得出不同培养条件下植物组织生长的规律性，为进一步研究提供了重要依据。

结果讨论在讨论部分，对实验结果进行解释和归纳，总结出植物组织培养的特点和应用前景，为相关研究领域提供参考和启示。

结论植物组织培养是一种重要的生物技术手段，可以在植物繁殖、种质改良等领域发挥重要作用。

本实验结果表明，植物组织培养具有可行性和有效性，对于植物生物技术的发展和应用具有重要意义。

植物组织培养实验教案

一、实验背景植物组织培养技术是一种在无菌条件下，将植物的茎尖、茎段或叶片等切成小块，通过人工方法在特制的培养基上进行培养，使其逐渐发育成完整植物体的技术。

本实验旨在让学生了解植物组织培养的基本原理，掌握实验操作技能，培养学生的创新意识和实践能力。

二、实验目的1. 了解植物组织培养的基本原理及应用。

2. 掌握植物组织培养实验的操作步骤。

3. 培养学生的创新意识和实践能力。

三、实验材料与仪器1. 材料：植物茎段、叶片、茎尖等；培养基；植物激素；消毒剂等。

2. 仪器：无菌操作台、高压蒸汽灭菌锅、培养皿、移液器、解剖刀、镊子、滤纸等。

四、实验步骤1. 准备实验材料：选取健康的植物茎段、叶片或茎尖，去除杂质，清洗干净。

2. 消毒：将实验材料用70%酒精浸泡30秒，再用无菌水清洗，用消毒剂处理1-2分钟。

3. 切割材料：用解剖刀将消毒后的实验材料切割成适当大小的小块。

5. 培养：将接种后的培养皿放入培养箱中，控制温度、光照等条件，进行培养。

6. 观察与记录：定期观察植物组织的生长状况，记录实验现象。

五、实验注意事项1. 实验过程中需严格无菌操作，避免污染。

2. 切割材料时要注意刀片的消毒和更换。

3. 培养过程中要定期观察，调整培养条件。

4. 实验结果可能存在差异，要注重数据分析与讨论。

教案编写仅供参考，具体实验操作请根据实际情况进行调整。

祝实验成功！六、实验拓展1. 探索不同植物激素对植物组织培养的影响。

2. 尝试用植物组织培养技术繁殖难生根或珍贵植物。

3. 研究植物组织培养在基因工程中的应用。

七、实验报告要求1. 描述实验材料、仪器和实验步骤。

2. 记录实验现象和结果。

3. 分析实验结果，探讨可能的原因。

4. 提出实验中存在的问题及改进措施。

八、实验评价1. 评价学生对植物组织培养原理的理解。

2. 评价学生对实验操作的熟练程度。

3. 评价学生对实验现象的观察与分析能力。

4. 评价学生在实验过程中的团队合作精神。

植物组织培养实训指导书

植物组织培养实训指导书《植物组织培养技术》是生物技术及应用专业的工学结合核心课程之一。

本课程采取“项目引领，任务驱动”的教学模式，使学生掌握植物组织培养技术的职业知识和职业技能，能够在实际工作中具备实验方案设计能力、培养基制备能力、无菌操作能力、组培苗驯化移栽能力及组培苗工厂化生产能力。

实训一：实训室的灭菌与玻璃器皿的清洗一、目的要求1.通过实训，使学生了解各种洗涤液的特性；2.掌握酸液的配制方法和组织培养中常用器血的洗涤技术；3.通过实训，培养学生良好的卫生习惯，建立组织培养的无菌意识；4.会配制新杰尔灭溶液。

二、材料用具1.灭菌用具：2%新洁尔灭、高镒酸钾、甲醛、70%酒精、洗涤剂、各种培养血、工作服、口罩、手套、试管刷。

2.洗涤用具：肥皂液、洗衣粉、重铬酸钾粉末、1%HCL、70%酒精、瓶刷等。

三、方法步骤（一）培养室的灭菌1、地面、墙面和工作台的灭菌2、无菌室和培养室的灭菌（二）玻璃器皿的洗涤（酸洗）玻璃器血的洗涤一般要经过浸泡、刷洗、浸酸和清洗四个步骤。

重铬酸钾洗涤（三种）液配制：重铬酸钾508，加工蒸馏水，加热溶化，冷却后再缓缓加入工业浓硫酸90ml。

1、新玻璃器血的洗涤用1%HCL的溶液浸泡一昼夜，再用清水反复洗涤，最后用蒸馏水冲淋一遍，干燥后备用。

2、用过的玻璃器血先将器血中得残留物质除去，用清水冲洗，再用洗衣粉洗涤，最后用清水冲洗3—4遍，把字迹擦洗干净，干燥后使用。

3、污染的培养瓶的处理首先经高压蒸汽灭菌，再按（2）的步骤洗涤。

4、用过的吸管、滴管、容量瓶先放在重铬酸钾溶液浸泡2h以上，取出后经流水冲洗30min左右，干燥后使用。

四、实训报告①.植物组织培养室的灭菌方法步骤。

②.写出洗涤液的配置步骤。

③.记录各种培养瓶的洗涤方法。

实训二：组织培养工厂的设计一、目的要求通过实训，使同学们对现代组培苗生产模式有一个更为深刻的认识，能熟练的根据生产规模设计合理的厂房及工艺流程。

二、材料用具组培苗生产小工厂、绘图纸、绘图笔三、方法步骤（-）组培工厂的参观1.参观组培实验中心2.组培工厂的组成：准备室、灭菌室、缓冲室、无菌室、培养室、驯化室3.各室内仪器设备的种类及摆放（二）设计一 200m2组培工厂，要求给出大概的布局图。

植物组织培养(7)

8 植物离体繁殖
植物快繁是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的技术。也叫植物离体繁殖或微繁。
植物快繁的特点
1. 繁殖效率高。周年繁殖，生长速度快。 2. 培养条件可控性强。 3. 占用空间小。30m2 可培育数十万株苗木。 4. 管理方便，利于自动化控制。 5. 便于种质保存和交换。
8.2.4 阶段Ⅳ：小植株的移栽驯化
移栽前应进行高光强炼苗，使植株生长粗壮，并打开瓶口，降低湿度。移栽：洗去培养基，栽入人工培养基质（如蛭石、珍珠岩、粗沙、泥炭等按比例混合，保湿透气），几天后可形成新的功能根系。驯化管理：覆膜、喷雾，逐渐降低湿度、提高光强，防止菌类滋生。
Example: acclimatization of roses
axillary branching in a chimeral Dracaena
腋芽
不定芽发生型
概念：外植体脱分化形成愈伤组织，再分化产生不定芽，或不经愈伤组织直接形成不定芽，再将芽诱导生根成苗。特点：增殖率高于丛生芽发生型，但较易变异，并会导致嵌合性状发生分离。许多植物快繁的主要方式。
8.2.1 阶段Ⅰ：无菌培养的建立
1. 母株和外植体的选取 2. 无菌培养物的获得 3. 外植体的启动生长
母株和外植体的选取
母株标准：性状稳定、生长健壮、无病虫害。外植体：
① 木本、较大草本：带芽茎段、顶芽、腋芽等。 ② 易繁殖、矮小或具短茎的草本：叶片、叶柄、
花茎、花瓣等。
mother plants, drip-irrigated
滴灌母株
young shoots are cut off剪下幼嫩枝条
当植株的其他部位难以消毒时，可以选用种子，消毒后的种子在无菌条件下播种到含有水－琼脂培养基上或1/10 MS培养基上使其发芽。将经消毒的幼苗切成小片，作为外植体。

植物组织培养实验

植物组织培养实验室基本设备：超净工作台；培养室、；洗涤、消毒室，卧式高压消毒锅；温室（培养大棚）；常用仪器：1.蒸馏水器（学习操作），2.手提式高压消毒锅、卧式高压消毒锅（学习使用、操作），3.天平：⑴药物天平（工业天平）、粗天平、（精密度1/10）⑵分析天平（精密度1/10000），4.超净工作台（学习、使用、操作），5.电热干燥箱（烘箱），6.恒温光照培养箱（学习、操作），7.电冰箱，8.显微镜和解剖镜：①手提式解剖镜（学习、使用、操作）②立体解剖镜③普通显微镜，9.旋转培养机，10. 离心机（学习、使用、操作），11. 酸度测定仪：⑴精密PH4－7 试纸；⑵笔型袖珍酸度计。

必要的器皿：（一）玻璃器皿：1.培养器皿：①试管②三角烧瓶（锥形瓶）③圆形高形培养瓶（罐头瓶）④培养皿⑤扁身培养瓶⑥L 型和T 型管⑦凹面载玻片，2.盛装器皿：①试剂瓶②烧杯，3.计量器皿①量筒②容量瓶③吸管，4.其它器皿滴瓶、称量瓶、漏斗、玻璃管、注射器等实验室常用器皿。

（二）金属器械：1.镊子类：①20－25cm 长型镊子（接种或转移愈伤组织）②尖端弯曲“枪型”镊子（镊取较小的植物组织）③尖头钟表镊子和鸭嘴镊子（剥离表皮用）④尖端为小铲状镊子（挖取带琼脂培养基的培养物），2.解剖刀和刀类：①眼科用刀种牛痘疫苗的菱形刀（切割柔软组织中小细胞团）②解剖刀（手术刀）③双面刀片焊接在玻棒上（切取茎尖用）④锋利小刀、大刀和小铁锹，3.剪刀类：①解剖剪②眉剪③眼科剪④18－25cm 弯头剪⑤俢枝剪，4.接种针。

几种常用药剂的配制：（一）用95%尝试酒精配比不同浓度的酒精的配制。

学习配制70%和75%酒精。

（二）消毒剂:1. 20%次氯酸钠溶液：称取20g 次氯酸钠用少许水溶解，100ml 水定容。

2. 0.1%升汞（HgCl2）溶液：称取0.1g HgCl2少许水溶解，100ml水定容。

（三）洗涤剂:1. 2HCl酒精：95%酒精100ml 加入2mlHCl，2.硫酸－重铬酸钾洗液：取10g 重铬酸钾加入蒸馏水90ml，加热溶解冷却后，逐渐加入浓硫酸175ml，放入棕色玻璃瓶备用，（注意：切记不可将盛过洒精，甲醛等原剂的药品玻璃器皿直接泡入洗液在，因为重铬酸钾是一种强的氧化剂，一旦被还原氧化，洗液变绿，失去洗涤作用）。

植物组织培养实验

植物组织培养实验植物组织培养是指将植物的一些组织细胞分离出来，在特殊的培养基中进行培养和生长，目的是繁殖和获取大量的纯种植物。

本次实验通过试验实现相应的目标。

实验材料及器械：1. 培养基：MS培养基（Murashige和Skoog培养基）、B5培养基（Gamborg培养基）、N6培养基（Chu培养基）、KN培养基（Knudson培养基）等；2. 植物组织：初代愈伤组织，生长点、芽，小叶片；3. 水平台，无菌工作台，培养箱，显微镜，中性纸，平板培养瓶，筛网，剪刀，酒精灯，卷尺，移液枪，枪头等。

实验步骤：1. 资料准备：对不同材料的特点、培养基的制备方法及组成、实验的目的等进行归纳、总结和分析。

2. 组织处理：先将绿色植物的各种组织根据类型进行分离，选取具有分化能力的愈伤组织或生长点进行培养。

去除杂质后，取少量组织接种到平板培养瓶中，有的需要进行酶解，提高细胞分裂能力。

3. 培养基准备：按照MS、B5、N6、KN等培养基制备方法，称取培养基粉末，加入适量的蔗糖、植物激素等，将pH调整到5.8-6.2。

接种前对制备的培养基冷藏保存。

4. 组织接种：取出平板培养瓶，用无菌水加热消毒后，将组织以均匀的分布覆盖于培养基表面。

将试管装入培养箱中，控制温度、湿度、光照等条件进行培养。

5. 观察记录：每隔一段时间拿出培养样本，进行显微镜观察。

观察组织细胞的形态、颜色、大小、分化程度、生长情况等。

根据实验进程记录主要观察的实验数据。

实验结果及分析：1. 愈伤组织培养：初始培养时，愈伤组织的生长状况不同，在不同的培养条件下，细胞分化能力、再生器官的形成也有所不同。

初步培养的愈伤组织有不同的再生能力和生长状态：生长状况下降、枯死、增殖等。

愈伤组织需要在适宜温度、适宜光照的情况下进行培养，严格执行无菌操作，才能获得大量高质量的细胞。

在不同的培养环境下，诱导他们进行特定细胞分化，从而提高愈伤组织再生的成功率。

2. 生长点培养：生长点培养时，需要先将其消毒，以免污染飞溅到培养基上。

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告
植物组织培养是一种重要的生物技术手段，它可以用来繁殖植物、改良植物品种、研究植物生长发育规律等。

本实验旨在探究植物组织培养的基本原理和操作技巧，为进一步的研究和应用提供参考。

首先，我们准备了所需的材料和试剂，包括植物组织培养基、植物激素、无菌
器皿、无菌操作工具等。

然后，我们选择了适合组织培养的植物茎段作为实验材料，进行无菌处理并切割成小段。

接着，将这些茎段置于含有植物激素的培养基中，利用无菌技术将其保存在无菌条件下。

在培养过程中，我们需要注意控制培养基的pH值、温度和光照条件，以及定
期更换培养基，促进植物组织的生长和增殖。

同时，还需要注意观察培养过程中是否有细菌或真菌的污染，及时采取措施消除污染源。

经过一段时间的培养，我们观察到茎段逐渐产生了新的组织，包括愈伤组织、
根系和茎芽等。

这些新生组织可以用来进行植物再生、基因转化等研究，具有重要的应用价值。

通过本次实验，我们初步掌握了植物组织培养的基本原理和操作技巧，对植物
生长发育规律有了更深入的了解。

在今后的研究和实践中，我们将进一步探索植物组织培养的应用前景，为农业生产和生物技术的发展做出贡献。

总之，植物组织培养是一项重要的生物技术，它为植物繁殖、品种改良、基因
转化等研究提供了重要手段。

通过本次实验，我们对植物组织培养有了更深入的认识，相信在未来的研究中能够发挥重要作用。

植物组织培养实验报告

植物组织培养实验报告实验报告：植物组织培养一、实验目的掌握植物组织培养的实验技术，培养植物组织，研究其生长过程和生理生化特性。

二、实验原理三、实验步骤1.提取组织：从植物器官中提取叶片、茎段等组织。

2.消毒处理：将提取出的组织进行消毒处理，浸泡在含有消毒剂的溶液中，达到杀灭外界微生物的目的。

3.培养基准备：配置适合植物组织培养的培养基，包括基础培养基和添加剂。

4.培养条件：将消毒处理后的组织置于培养基中，放置在恒温恒湿的培养箱中，设置适宜的光照和温度条件。

5.观察记录：观察组织在培养基上的生长情况，记录其形态变化、增殖情况等。

6.提取代表性样本：根据需要，提取生长良好、代表性的样本进行下一步的分析。

四、实验结果经过数天的培养，观察到了组织的形态发生了变化。

最初的组织经过消毒处理后放置在培养基上，经过一段时间的培养，发现组织逐渐增殖。

最初的组织形态变得模糊，开始出现小芽的形成。

随着时间的推移，这些小芽逐渐长大，发展成幼苗，并开始生长根系。

同时，观察到培养基的颜色也发生了变化，由最初的无色逐渐变为淡黄色。

五、实验分析由实验结果可知，植物组织培养可以通过一系列的人工控制，使植物细胞和组织在无菌条件下繁殖和发育。

通过调节培养基的配方、光照和温度等条件，可以控制生长的速度和分化程度。

实验中观察到的小芽和根系的形成表明植物组织在培养基上能够继续分化和增殖，这为后续的植物繁殖和基因改造提供了基础。

六、实验总结本次实验通过植物组织培养的方法，成功地培养出了植物幼苗，并观察到了其生长过程。

通过实验我们了解到了植物组织培养的基本原理和操作技术，并对植物的细胞分化和增殖有了更深入的了解。

植物组织培养作为一种重要的生物技术手段，不仅可以用于植物繁殖和育种，还可以应用于植物基因工程和药物研究等方面。

1.张三，李四，王五.植物组织培养技术的应用[A].植物生长与发育研究进展[C].北京：科学出版社。

2. Liu K，Liu G F.植物组织培养与应用研究进展[J]. 中国园艺科技.八、附录实验操作记录：日期操作内容观察结果XX月XX日提取叶片叶片消毒漂白后变白XX月XX日放置培养基出现小芽的形成.........注意事项：实验过程中需要严格遵守无菌操作规范，保持培养箱的洁净，避免外界微生物的污染。

植物组织培养(实验报告—)

名词解释1.细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。

2.分化：指细胞、组织、器官或整株植物从分生组织或幼小状态发育为成熟状态的过程，并在生理、形态上发生的变化。

其最大的特征是失去分裂能力。

3.脱分化：植物离休的器官、组织、细胞在人工培养基上，经过多次细胞分裂而失去原来的分化状态，形成无结构的愈伤组织或细胞团的过程，使其回复到胚性细胞的状态。

其特征是已失去分裂能力的细胞重新获得了分裂能力。

4.再分化：指由脱分化的细胞再度分化成另一种或几种类型的细胞、组织、器官，甚至最终再生成完整的植株的过程。

5.试管苗：指在无菌离体条件下，对植物组织、细胞、器官进行组培所获得的的再生植株。

6.根芽激素理论：根和芽的分化由生长素和细胞分裂素的比率所决定，这一比率高时促进生根，比率低时促进茎芽的分化，比率适中时，组织则倾向于以一种无结构的方式生长。

通过改变培养基中这两类生长调节物质的相对浓度可以控制器官的分化。

7.污染：批在组培过程中，由于真菌、幼苗等微生物的侵染，在培养容器内滋生大量的菌斑，使试管苗不能生长和发育的现象。

8.褐变：指在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之慢慢变褐而死亡的现象。

9.玻璃化现象：指试管苗因生理失调而引起的嫩茎、叶片出现半透明状和水渍状的现象。

10.无菌操作：亦称接种。

指将经过表面灭菌后的植物材料在无菌环境中切碎或分离出器官、组织或细胞转移到无菌培养基上的过程。

由于整个过程均在无菌条件下进行，所以将这个过程称为无菌操作。

11.植物组织培养：指在无菌条件下，将离体的植物器官(如叶、花、未成熟的果实、种子)、组织(如形成层、花药组织、胚乳)、胚胎(如成熟和未成熟的胚)、细胞或原生质体，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，使其长成完整的植株或生产具有经济价值的其他产品。

这是广义的植物组织培养概念，而狭义的植物组织培养是指以植物各部分离体组织或愈伤组织为外植体的离体无菌培养。