熊果酸诱导HL-60细胞凋亡及抑制增殖与PTEN-Akt途径的相关性
齐墩果酸诱导Jurkat细胞凋亡及对PTEN表达的影响的开题报告
齐墩果酸诱导Jurkat细胞凋亡及对PTEN表达的影
响的开题报告
开题报告:
标题:齐墩果酸诱导Jurkat细胞凋亡及对PTEN表达的影响
研究背景和意义:
齐墩果酸(UA)是一种在天然界中存在的三萜类化合物,具有多种生物学活性。
UA对多种癌细胞有明显的抗增殖和凋亡诱导效应,可以通过多种途径调节细胞生长和死亡。
PTEN是一种重要的肿瘤抑制基因,在多种癌症中发生突变或失活,会导致PI3K/AKT信号通路的过度活化,加速肿瘤细胞增殖和凋亡抑制。
因此,研究UA对Jurkat细胞凋亡的影响及其与PTEN表达的关系,有助于深入探究UA作为潜在的抗肿瘤药物的作用机制和临床应用前景。
研究内容和方法:
本研究将采用Jurkat细胞作为实验模型,以MTT法和流式细胞术检测UA对Jurkat细胞活性和凋亡的作用。
同时,通过Western blot和实时荧光定量PCR技术检测UA对PTEN的表达及相关信号通路的影响,阐明UA促进Jurkat细胞凋亡的可能机制。
预期结果和意义:
本研究预计可以明确UA对Jurkat细胞凋亡的促进作用以及其对PTEN表达的调节作用。
通过探究UA的作用机制,有望为进一步研究UA 作为潜在的抗肿瘤药物提供有力的实验依据,也为其他涉及PTEN和
PI3K/AKT信号通路的肿瘤研究提供参考。
熊果酸对人乳腺癌细胞增殖、凋亡和细胞内游离Ca^(2+)的影响
熊果酸对人乳腺癌细胞增殖、凋亡和细胞内游离Ca^(2+)的影响吴其年;黄炜;黄敏珊;张志凌;罗惠玲;张东方;杨凤仪【期刊名称】《肿瘤学杂志》【年(卷),期】2004(10)3【摘要】[目的]探讨熊果酸对人乳腺癌细胞(MCF鄄7)增殖抑制和诱导凋亡的作用,以及凋亡发生与细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)变化的关系。
[方法]5~40μmol/L浓度梯度的熊果酸处理MCF鄄7细胞24小时,用MTT比色法测定细胞增殖能力。
10μmol/L,20μmol/L和30μmol/L熊果酸处理细胞24小时,用末端脱氧核苷转移酶介导dUTP末端标记法和AnnexinV流式细胞仪法检测凋亡细胞。
20μmol/L熊果酸处理细胞24小时,用Fura鄄2荧光负载方法测定[Ca2+]i的变化。
[结果]从20μmo l/L熊果酸浓度起对MCF鄄7细胞的增殖抑制率显著升高(P<0.01),呈剂量依赖性,半增殖抑制浓度(IC50)为36.18μmol/L。
20μmol/L和30μmol/L熊果酸使细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。
熊果酸处理组的[Ca2+]i明显高于对照组(P<0.05)。
[结论]熊果酸具有抑制MCF鄄7细胞增殖和诱导凋亡的作用;其诱导凋亡可能依赖于细胞内Ca2+水平上调。
【总页数】3页(P145-147)【关键词】乳腺肿瘤;细胞系;熊果酸;增殖;凋亡;Ca^2+【作者】吴其年;黄炜;黄敏珊;张志凌;罗惠玲;张东方;杨凤仪【作者单位】广州医学院临床医学2001级;广州医学院生物化学教研室;广州医学院化学教研室【正文语种】中文【中图分类】R73-36;R737.9【相关文献】1.消癖颗粒联合他莫昔芬对人乳腺癌细胞增殖、迁移、克隆、凋亡及细胞内DNA 损伤程度的影响 [J], 韦任雄;张玉柱;陈前军2.N-乙酰半胱氨酸对胃腺癌细胞株增殖凋亡及细胞内Ca^(2+)浓度的影响 [J], 李剑;李洁;戴育成3.细胞内游离Ca^(2+)和cAMP浓度在胃癌细胞凋亡过程中的变化特点 [J], 邢承忠;陈峻青4.甘草酸诱导人乳腺癌细胞凋亡和细胞内Ca^(2+)的关系 [J], 陈新美;黄炜;张志凌;张东方;杨凤仪5.纳秒级陡脉冲对人卵巢癌细胞SKOV3凋亡及细胞内Ca^(2+)浓度的影响 [J], 唐均英;吴晓娟;姚陈果;姚珍薇;孙才新因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究
熊果酸对HL60细胞作用机制的初步研究【摘要】目的探讨熊果酸在体外对急性早幼粒白血病HL60细胞增殖抑制和诱导凋亡作用。
方法采用体外细胞培养技术,荧光显微镜观察细胞结构变化、MTT法观察细胞生长抑制作用、流式细胞仪检测细胞凋亡及周期变化。
结果MTT法证实熊果酸对HL60细胞具有增殖抑制和杀伤效应,并呈浓度和时间依赖性。
显微镜下可见HL60细胞出现典型凋亡细胞形态学改变。
流式细胞仪检测细胞周期阻滞于G0/G1期。
结论熊果酸在体外可抑制急性早幼粒白血病HL60细胞增殖,诱导细胞凋亡。
【Abstract】Objective To investigate anti-proliferation and apoptosis effects of Ursolic Acid on HL60 cells. Methods By culturing in vitro and treated with UA,anti-proliferation effects were assessed with methyl thiazolyl tetrazolium(MTT) colorimetric assay and morphology of cells was observed under fluorescence microscope.The flow cytometry was used to detect apoptotic rates and cell cycle distribution. Results MTT showed that anti-proliferation effect of UA on HL60 Cells in a concentration and time dependent manner. Microscope showed that cell presented some morphologic features of apoptosis.The flow cytometry showed that after exposure to drugs cell-cycle was blocked at G0/G1 phase. Conclusion Ursolic Acid inhibits proliferation of HL60 cell and induces apoptosis.【Key words】Ursolic Acid;HL60 cell;Apoptosis熊果酸(ursolic acid, UA) 又名乌索酸、乌苏酸,是广泛存在于芦笋、白花蛇舌草、女贞子、乌梅等天然植物和草药中的五环三萜类化合物,具有抗癌、抗炎、护肝、降血脂、降糖、抗氧化和抗病毒等多种生物学活性。
齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响
齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响王迪迪;马微;葛堂栋;王明富;张鹏霞【期刊名称】《黑龙江医药科学》【年(卷),期】2013(036)006【摘要】目的:研究齐墩果酸(Oleanic add,OA)对人白血病HL-60细胞PDK、Akt、Cav-1表达的影响.方法:OA作用HL-60细胞后,采用透射电镜观察细胞形态,RT-PCR法检测HL-60细胞PDK、Akt、Cav-1的mRNA表达.结果:OA作用于HL-60细胞后,细胞形态改变明显,出现凋亡小体,且PI3K、Akt、Cav-1的mRNA表达下调(P<0.01).结论:OA可抑制肌-60细胞增殖,这可能与其下调HL-60细胞中PI3K、Akt、Cav-1的表达有关.【总页数】3页(P1-2,6)【作者】王迪迪;马微;葛堂栋;王明富;张鹏霞【作者单位】佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007;牡丹江医院,黑龙江牡丹江157011;佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007;佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007【正文语种】中文【中图分类】R285.5;R741.02【相关文献】1.汉黄芩素抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路影响急性白血病HL-60细胞增殖 [J], 高平章;韩旭花;白赛赛;谢晓兰2.齐墩果酸对白血病 HL-60细胞 PI3K、Akt表达的影响 [J], 王迪迪;朱贵明;张鹏霞3.亚硒酸钠抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导白血病细胞HL-60凋亡的机制研究 [J], 许京淑;朱晓健;李松4.齐墩果酸对白血病HL-60细胞cav-1表达的影响* [J], 王迪迪;李丽;张鹏霞5.香菇多糖在体外对白血病HL-60细胞凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响 [J], 马莉;荣芳;王建宾;张年萍;刘宏因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
熊果酸对人早幼粒白血病细胞的增殖抑制、周期阻滞及凋亡诱导作用
3 mo/ 置 于 培 养 箱 中 培 养.每 隔 1 5 lL, 2h取 0 0 台 盼蓝 染 液 与 0 4 . 5mL . 5mL细胞 悬 液充 分 混
印 册
匀 , 活细胞计 数 , 生长 曲线. 对 绘制
( )AO/ B复 染 检 测 HL 6 3 E -0细胞 的 凋 亡 将
的分 子机制 , 以期 为具 有 该类 结 构 的化 合物 细 胞毒
作用 机理提供 科学依 据.
浓度为 5 0 个/ ×1‘ mL的细胞接种 于 6孔板 中 , 培养
1 实 验 部 分
1 1 材 料 及 仪 器 .
‘
2 加药 物 , 于 培 养 箱 中分 别 培养 2 、 8h 4h后 置 4h 4
种类 型 的瘤 株 细 胞 的 生 长 阳, 制 癌 变 的启 动 以 。 抑
及抗 致癌 物诱 发 的基 因突变Ⅲ] 同时 还具 有 诱 导肿 ,
收 稿 日期 :0 1 0 — 7 2 1 — 12 基 金 项 目 : 北 师 范 大 学 知 识 与科 技 创新 工 程项 目( W NU— J X - 36 ) 西 N K C GC 0 — 5 *通 讯联 系人 . - i: iga @ ? I . d . r E ma dn l l n I U e u c WI t
a d a pt ss n po o i.
Ke r s u s l cd; r w t n i iin; e l y l r e t a o t ss y wo d : r oi a i g o h ih bt c o c l c ce a r s ; p p o i
熊果 酸 为 乌 苏 烷 型 五 环 三 萜 类 化 合 物 , 许 多 是
2-α-羟基熊果酸对人白血病细胞HL-60的周期阻滞及凋亡作用
单体 化合 2一 一物 熊 果 酸 由本 课 题组 从 香 茶
菜 中分离 ] )I 60培养基 为 Gbo生产 ; 。 M 一14 i c 新生小牛血清购 自杭州 四季青生物技术有 限公 司;
吖啶橙 (ciieoag ,A 、 化 乙啶 ( tiim ar n r e O) 溴 d n e du h bo ie E ) 自美 国 S m rmd , B 购 i a公 司 ;A I4 6一d g D P(. i a dn 2一peyn o ,iyrelie 购 自德 国 mi o- i hnl dl dhdoho d ) i e r Bcma 司 。人早 幼粒 白血病 细 胞 H 6 ek n公 L~ 0引 自
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一
并广 泛分 布 于植 物 的次 生 代 谢 产 物 中u-J 目前 , 3。 仅对 熊果 酸的研 究 有较 多 的文 献 报 道 , 其 是 对 熊 尤 果酸 广泛 的药理学 效应 以及其 良好 的临 床试验 效果 的 肯 定 , 进 了 熊 果 酸及 其 衍 生 物 的 植 物 化 促 学 ∞ 、 学 合 成 及 结 构 修 饰 n ]提 取 纯 化 工 ]化 卜 、
生长 , 高浓度 (03 t o ・ ) 3 , z l l 对细胞有致死效应 , 5m 且呈现剂 量依赖和 时间依赖性 ; 双染分析 表明 , 药物能够诱导 细 胞凋亡 , 随着药物浓度增加和处理 时 间的延长 , 细胞凋 亡率上 升 , 且伴 有少 量细 胞坏死 ; 一步用 流式 细胞术检 并 进
的体外抗肿瘤研究已有较多的报道 , 2一 一 但 羟基 熊果 酸 的相关研 究在 国 内外还 未见 报 道 。本课 题组
从 甘肃产蓝萼香 茶 菜 和总 序香 茶菜 中均 同时分 离 得
细胞色素C诱导HL-60细胞凋亡及其与细胞周期关系分析
细胞色素C诱导HL-60细胞凋亡及其与细胞周期关系分析陈日玲;陈铭珍;蔡康荣;叶中绿;温泉【期刊名称】《实用肿瘤杂志》【年(卷),期】2004(19)6【摘要】目的分析细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡的时间效应及其与细胞周期的关系。
方法 (1)利用透射电镜观察细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡时凋亡小体的形成。
(2 )应用流式细胞仪技术检测细胞色素 C诱导 HL-6 0细胞的凋亡率并分析其凋亡的时 -效关系以及凋亡与细胞周期的关系。
结果 (1)细胞色素 C作用 HL- 6 0细胞2 4小时出现凋亡 ,形成凋亡小体。
(2 )细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡的作用体现一定的时间效应 ,8~ 2 4小时作用时间范围内 ,凋亡率随时间延长而明显增高。
(3)细胞色素 C诱导 HL- 6 0凋亡与细胞周期密切相关 ,随凋亡率升高 ,S期和 G2 期细胞比例随之下降 ,且 S期细胞比例与凋亡率二者呈显著负相关 (r=- 0 .718,P<0 .0 1)。
结论细胞色素 C诱导 HL- 6 0细胞凋亡与细胞周期密切相关 ,其周期特异性具有一定的实际意义。
【总页数】3页(P494-496)【关键词】细胞色素C/药理学;HL-60细胞;细胞周期;脱噬作用/药物作用【作者】陈日玲;陈铭珍;蔡康荣;叶中绿;温泉【作者单位】广东医学院附属医院儿科;广东医学院中心实验室【正文语种】中文【中图分类】Q2;Q26【相关文献】1.线粒体膜通透性转换孔及细胞色素C在去铁胺诱导HL-60细胞凋亡中的作用[J], 王叨;席微波;李白;刘玉峰;2.线粒体膜通透性转换孔及细胞色素C在去铁胺诱导HL-60细胞凋亡中的作用[J], 王叨;席微波;李白;刘玉峰3.细胞色素C诱导HL-60细胞凋亡及其周期特异性分析 [J], 陈日玲;陈铭珍;蔡康荣;叶中绿;温泉4.流式细胞术分析不同剂量X射线对HL-60细胞周期的影响及其诱导的细胞凋亡[J], 冷彦;陶德定;冯晓澜;陈元;龚建平因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
熊果酸的抗肿瘤作用
熊果酸的抗肿瘤作用【摘要】熊果酸是一种广泛存在于天然植物中的一种三萜类化合物,大量的研究发现,该物质具有抗癌、诱导癌细胞分化、抗血管生成的作用,它不仅能够有效抑制HL-60细胞增殖分化,诱导其凋亡,小鼠体内实验也表明熊果酸具有增强免疫的功能,因此,熊果酸的抗肿瘤作用是十分广泛的,极有可能成为一种新型低毒有效的抗癌药物推广使用。
【关键词】熊果酸;抗肿瘤;诱导凋亡;抑制增殖【中图分类号】R979.1 【文献标识码】B 【文章编号】1764-8999(2015)7-0554-01熊果酸是在抗炎性植物中提取出的一种三萜类化合物,广泛分布于自然界中,山楂中的熊果酸含量尤其高。
熊果酸不仅对多种致癌物有抵抗作用,而且还可以抑制恶性肿瘤细胞的生长繁殖,因此,熊果酸的抗肿瘤作用逐渐受到人们的重视并成为临床研究的热点话题[1]。
为进一步探讨熊果酸的抗肿瘤活性和作用效果,相关学者从山楂中提取熊果酸,以人体肝癌细胞和肉瘤细胞为作用对象,研究分析熊果酸对这恶性肿瘤细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用,实验结果表明熊果酸对抑制肿瘤细胞和诱导凋亡具有显著作用。
1 熊果酸抗肿瘤作用概述熊果酸别名乌苏酸,是一种弱碱性化合物,存在于多种天然产物中,纯品熊果酸为白色针状结晶物质,味略苦,基本化学骨架为五环母核,易溶于吡啶和醇类物质中。
熊果酸在自然界中分布广泛,山楂、熊果、枇杷叶、车前草、夏枯草、女贞子中都可见游离的熊果酸成分,其在上述天然植物中主要与糖结合,具有多种天然活性,日本已将其作为一种天然抗氧化物广泛应用于产品生产中。
长期以来,熊果酸起初之所以受到广泛的关注和研究,是因为人们发现其具有明显的抗炎和抗血脂药物,并在临床动物实验中证实了其显著的抗肿瘤作用。
熊果酸的抗肿瘤作用不仅体现在多种致肿瘤物的抵抗作用,更体现在恶性肿瘤细胞的抑制生长方面,因此,熊果酸的药理活性逐渐成为其研究重点。
2 相关实验研究肿瘤的形成受到多种因素的共同作用,已知多种成分均参与了肿瘤的诱发,因此,需要通过具体的实验才能更加全面的了解熊果酸的抗肿瘤活性作用。
熊果酸诱导人白血病HL60细胞凋亡作用
文章编号:1007-4287(2012)08-1383-03熊果酸诱导人白血病HL-60细胞凋亡作用赵洪昌1,王 莹2,赵文静2(1.长春急救中心,吉林长春130062;2.吉林省肝胆病医院) 熊果酸(Ursolic acid,UA),又名乌索酸,乌苏酸,是存在多种天然植物中的五环三萜类化合物,如白花蛇香草、山楂、女子贞、夏枯草等,熊果酸具有保护肝脏、降血脂、调节机体免疫、抗氧化和抗肿瘤等多种生物学活性[1,2],研究表明熊果酸可通过诱导细胞凋亡抑制多种肿瘤细胞的生长,如人乳腺癌、胃癌、肺癌、淋巴瘤等[3-6]。
关于熊果酸对人白血病HL-60细胞的增殖抑制作用、诱导凋亡作用及相关机制尚未见报道,本研究以HL-60细胞为研究对象,观察熊果酸对HL-60细胞的增殖抑制作用及诱导凋亡作用,并采用流式细胞术、Western blot技术研究熊果酸诱导HL-60细胞凋亡的分子机制,为熊果酸的开发利用提供实验基础和理论依据。
1 材料与方法1.1 试剂及仪器熊果酸为分析纯,纯度>99.9%,购自天津市医药科学研究所;AnnexinV-FITC/PI细胞凋亡检测试剂盒购自北京鼎国生物公司、Caspase-9/3蛋白活性检测试剂盒购自南京凯基生物公司;小鼠抗人Cyt-c、β-actin单克隆抗体美国Santa Cruz公司,O-lympus荧光显微镜(Olympus,Japan);Beckman-XL流式细胞仪(Beckman,USA)。
1.2 方法1.2.1 UA对HL-60细胞生长的抑制作用 参考文献[7],MTT法测定熊果酸作用48h对HL-60细胞的增殖抑制作用(熊果酸的终浓度为5、10、20、30、40、50μmol/L)。
抑制率(inhibition rate,IR)=(对照组A值-实验组A值)/阴性对照组A值×100%,并计算IC50值。
1.2.2 HL-60细胞丫啶橙(AO)荧光染色 参照文献[8]方法,不同浓度熊果酸作用48h后收集HL-60细胞,A O染色,荧光显微镜下观察HL-60细胞形态。
熊去氧胆酸选择性诱导人肝肿瘤细胞凋亡及抑制增殖的实验研究
熊去氧胆酸选择性诱导人肝肿瘤细胞凋亡及抑制增殖的实验研究刘慧;韩国庆;孟玫;秦成勇;许洪伟;赖宁【期刊名称】《山东医药》【年(卷),期】2004(044)034【摘要】目的探讨熊去氧胆酸(UDCA)诱导肝肿瘤细胞株凋亡并抑制其增殖的作用和机制.方法用噻唑蓝法、流式细胞术、TUNEL法、Wright-Giemsa染色法、电镜及免疫细胞化学等方法,观察UDCA对肝肿瘤细胞株HepG2、BEL7402和正常人肝细胞株L-02的生长活力、细胞凋亡、细胞周期及Bax/bcl-2基因表达的影响.结果 UDCA对HepG2、BEL7402细胞株具有显著的抑制生长、诱导凋亡、阻滞细胞周期于S期、降低bcl-2和提升Bax表达的作用.结论 UDCA对HepG2、BEL7402细胞株有显著的抑制增殖及诱导凋亡作用,该作用可能与UDCA阻滞细胞周期、降低bcl-2和提升Bax的表达有关.【总页数】3页(P10-12)【作者】刘慧;韩国庆;孟玫;秦成勇;许洪伟;赖宁【作者单位】山东大学山东省立医院,山东济南,250021;山东大学山东省立医院,山东济南,250021;山东大学山东省立医院,山东济南,250021;山东大学山东省立医院,山东济南,250021;山东大学山东省立医院,山东济南,250021;北京化工大学生命科学学院【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.柔红霉素诱导白血病细胞凋亡和抑制增殖的实验研究 [J], 梁雪;陈幸华;张曦;孔佩艳;彭贤贵;高蕾;曾东风;孙爱华;王庆余2.rhTNFα加rhIL-2诱导小鼠CNE3细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究 [J], 焦伟;刘时才;莫祥兰;黄振录3.熊去氧胆酸选择性诱导人肝肿瘤细胞凋亡及抑制增殖的实验研究 [J], 刘慧;刘琼;韩国庆;孟玫;秦成勇;许洪伟4.钼酸盐对人肝癌细胞抑制增殖和诱导凋亡作用的实验研究 [J], 吴银侠;陈新胜;宋少武;王淑媛5.阿霉素诱导小鼠MCF-7乳腺癌细胞凋亡和抑制增殖的体内实验研究 [J], 王文武;欧阳学农;姜浩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
2-α-羟基熊果酸对人白血病细胞HL-60的周期阻滞及凋亡作用
2-α-羟基熊果酸对人白血病细胞HL-60的周期阻滞及凋亡作用杨邵华;侯茜;张琼;刘国安;丁兰【摘要】利用台盼蓝法、吖啶橙/溴乙锭双染检测法和流式细胞术检测了2α-羟基熊果酸对人急性早幼粒白血病细胞株HL-60的增殖、凋亡和细胞周期的影响.结果表明,在低浓度(15~30μmol·l-1)时药物抑制HL-60细胞的生长,高浓度(30,35μmol·l-1)对细胞有致死效应,且呈现剂量依赖和时间依赖性;双染分析表明,药物能够诱导细胞凋亡,随着药物浓度增加和处理时间的延长,细胞凋亡率上升,并且伴有少量细胞坏死;进一步用流式细胞术检测,发现在20μmol·l-1时,2α-羟基熊果酸引起明显的G1期阻滞,随着药物浓度升高,周期阻滞作用明显加强.因此,细胞周期阻滞可能是药物抑制细胞增殖进而引起凋亡的原因.【期刊名称】《甘肃科技》【年(卷),期】2011(027)008【总页数】4页(P153-156)【关键词】2-α-羟基熊果酸;人早幼粒白血病细胞;生长抑制;周期阻滞;凋亡【作者】杨邵华;侯茜;张琼;刘国安;丁兰【作者单位】西北师范大学,生命科学学院,甘肃兰州730070;西北师范大学,生命科学学院,甘肃兰州730070;西北师范大学,生命科学学院,甘肃兰州730070;西北师范大学,生命科学学院,甘肃兰州730070;西北师范大学,生命科学学院,甘肃兰州730070【正文语种】中文【中图分类】Q946;Q2552-α-羟基熊果酸是乌苏烷型五环三萜类化合物,如图1所示,是许多中草药的主要有效成分,并广泛分布于植物的次生代谢产物中[1-3]。
目前,仅对熊果酸的研究有较多的文献报道,尤其是对熊果酸广泛的药理学效应以及其良好的临床试验效果的肯定[4-7],促进了熊果酸及其衍生物的植物化学[8-10]、化学合成及结构修饰[11-13]、提取纯化工艺[14-16]等方面的研究。
研究表明,熊果酸具有良好的抗肿瘤[17]、抗氧化[18]、保护肝损伤[19]等作用,而其抗肿瘤作用[20-22]和它的低毒性尤为受到广泛的关注。
熊果酸对HL—60细胞株凋亡及Bcl—2和bax表达的影响
熊果酸对HL—60细胞株凋亡及Bcl—2和bax表达的影响目的探讨熊果酸(UA)抑制人急性髓性白血病细胞系(HL-60)细胞增殖和诱导凋亡作用,并观察Bcl-2和bax基因表达的影响。
方法体外培养HL-60细胞。
MTT比色法检测增殖活性;流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡和细胞周期分布;Western Blot分析Bcl-2和bax基因表达。
结果UA显著抑制HL-60细胞增殖,呈浓度依赖性;UA呈浓度依赖性诱导HL-60细胞凋亡,明显阻滞于细胞周期G1期;UA以浓度依赖方式下调Bcl-2蛋白表达和上调bax蛋白表达。
结论UA抑制HL-60细胞增殖和诱导凋亡,其作用机制与下调Bcl-2上调bax 蛋白表达相关。
标签:人急性髓性白血病;熊果酸;凋亡;Bcl-2熊果酸(ursolic acid,UA)又名乌索酸、乌苏酸,广泛分布于白花蛇舌草、女贞子、乌梅、夏枯草等天然植物中。
长久以来,熊果酸作为待开发的抗炎和降血脂的药物,在临床前动物实验中表现突出。
近年来,熊果酸的抗肿瘤活性成为最受关注的研究方向。
据研究报道,熊果酸可引起多种肿瘤细胞如肺癌、乳腺癌、肝癌、前列腺癌等发生凋亡。
熊果酸也可以诱导人白血病细胞发生凋亡[1],但其诱导白血病细胞凋亡的作用机制还不十分清楚。
Bcl-2(B cell lymphoma/leukemia-2)是最重要的抑制肿瘤细胞凋亡基因,bax是第一个被确定的Bcl-2同源基因,可拮抗Bcl-2的保护效应而使细胞趋于凋亡。
本研究体外观察了熊果酸诱导人急性髓性白血病细胞系(HL-60)细胞增殖和诱导凋亡作用,并观察Bcl-2和bax基因表达的影响,进一步阐述细胞凋亡的分子机制。
1 材料与方法1.1 药品与试剂UA(Sigma 公司),小牛血清(杭州四季青生物有限公司);PVDF膜(Pall 公司);DMSO和MTT(均为Ameresco公司);1640培养基(GiBco公司);鼠抗人Bcl-2单抗、鼠抗人bax单抗、兔抗人Bcl-2多抗、兔抗人bax多抗(Santa Cruz公司);兔抗人β-actin(Sigmma 公司)。
熊果酸的抗肿瘤活性及作用机理研究进展
熊果酸的抗肿瘤活性及作用机理研究进展司福亭;李靖靖;曾超;司方博;周晓莉【摘要】熊果酸属五环三萜类化合物,来源丰富,具有广泛的生物活性.概述了熊果酸在医药领域的研究进展,着重论述了熊果酸的抗肿瘤活性及其抗肿瘤作用机理,并对熊果酸的研究开发前景进行了探讨.【期刊名称】《化学与生物工程》【年(卷),期】2010(027)001【总页数】4页(P9-12)【关键词】熊果酸;抗肿瘤;机理;高效低毒【作者】司福亭;李靖靖;曾超;司方博;周晓莉【作者单位】中州大学化工食品学院,河南,郑州,450044;中州大学化工食品学院,河南,郑州,450044;中州大学化工食品学院,河南,郑州,450044;中州大学化工食品学院,河南,郑州,450044;中州大学化工食品学院,河南,郑州,450044【正文语种】中文【中图分类】Q541;R979.1熊果酸(Ursolic acid, UA),又名乌索酸、乌苏酸、α-香树脂醇,是一种弱酸性五环三萜类化合物,是多种天然产物的功能成分。
熊果酸纯品为白色针状结晶(乙醇中结晶),味苦,其基本骨架是多氧蒎的五环母核。
化学名(3β)-3-Hydroxyurs-12-en-28-oic acid,分子式C30H48O3,相对分子质量456.68,熔点285~291℃,易溶于二氧六环、吡啶,可溶于甲醇、乙醇、丁醇、丁酮,略溶于丙酮,微溶于苯、氯仿、乙醚,不溶于水和石油醚[1,2]。
UA在自然界分布较广,如在陆英、枇杷叶、熊果、女贞子、山楂、车前草、夏枯草、白花蛇舌草等植物中以游离形式或与糖结合成甙存在。
熊果酸具有多种生物活性,日本等国已经将其作为天然抗氧化剂应用于食品中[3~14]。
长久以来,熊果酸作为待开发的抗炎和降血脂的药物,在临床前动物实验中表现突出。
近年来,熊果酸的抗肿瘤活性成为最受关注的研究方向。
作者简要介绍了熊果酸的生物活性及其应用前景,着重论述了熊果酸的抗肿瘤活性及其作用机理的研究进展,并探讨了其今后的发展方向。
熊果苷通过抑制巨噬细胞募集并调控Akt
由各种慢性肝病所引起的实质性损伤和炎症反应的持续激活会导致肝纤维化的发生。
肝纤维化是一个由多种细胞和分子共同参与的病理过程,在肝纤维化进程中,肝脏肌成纤维细胞被激活,导致细胞外基质降解失衡并逐渐沉积,最终形成肝纤维化[1]。
肝纤维化不仅会影响到肝病预后,甚至会成为肝细胞癌发生的关键因Arbutin ameliorates liver fibrosis in mice by inhibiting macrophage recruitment and regulating the Akt/NF-κB and Smad signaling pathwaysCAO Jiafan 1,SUN Yue 1,2,3,4,DING Xin 1,2,3,4,LI Shengwen 1,2,3,4,CHEN Bo 1,2,3,4,LAN Tian 1,2,3,41School of Pharmacy,2Institute of Chinese Medicine,3Key Laboratory of Glucolipid Metabolic Disorder of the Ministry of Education,4Guangdong Metabolic Diseases Research Center of Integrated Chinese and Western Medicine,Guangdong Pharmaceutical University,Guangzhou 510006,China摘要:目的探究熊果苷(Arb )对CCl 4诱导的小鼠肝纤维化的保护作用及其机制。
方法将24只C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、Arb 低剂量给药组(25mg/kg )和Arb 高剂量给药组(50mg/kg ),6只/组。
通过腹腔注射CCl 4建立肝纤维化小鼠模型,灌胃给药持续6周后取材。
取血清进行生化指标检测,取肝组织进行HE 染色、天狼猩红染色和免疫组化染色;q-PCR 检测肝组织纤维化相关指标a-SMA ,Pdgfb ,Col1α1,Timp-1基因以及炎症相关指标Ccl2和Tnf-a 基因的mRNA 水平;Western blot 法检测肝组织α-SMA 蛋白表达水平。
ROS在齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡中的作用
ROS在齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡中的作用杨玉;刘莉;商宇;张鹏霞【期刊名称】《中国老年学杂志》【年(卷),期】2011(031)011【摘要】目的观察ROS在齐墩果酸(OA)诱导HL-60细胞凋亡中的作用.方法分瓶培养细胞,实验设空白对照组和12、24、48 h的OA用药组.收集细胞,提取细胞总蛋白,制备去线粒体细胞浆蛋白,Western印迹法检测caspase-9表达.流式细胞术检测ROS水平.结果 OA处理HL-60细胞后,ROS含量增加,并引起caspase-9的激活.结论 OA使ROS量增加,通过线粒体凋亡信号通路诱导HL-60细胞凋亡.%Objective By detecting the levels of caspase-9 and ROS of HL-60 cells, to research the role of ROS in the apoptosis of HL-60 cells induced by oleanolic acid(OA). Methods The cells were divided into control and OA treatment groups, HL-60 cells were treated and cultured for 12, 24, 48 h, respectively. Then the cells were collected, total protein and cytoplasmic protein were extracted. The expression of caspase-9 was assayed by Western blot. The level of ROS was assayed by flow cytometer. Results OA increased the level of ROS in HL-60 cells cytoplasm, activated the level of caspase-9. Conclusions OA can increase the level of ROS, induce the apoptosis of HL-60 cells through mitochondrial signaling pathway.【总页数】3页(P1997-1999)【作者】杨玉;刘莉;商宇;张鹏霞【作者单位】佳木斯大学基础医学院,黑龙江,佳木斯,154007;佳木斯市疾病预防控制中心;佳木斯大学基础医学院,黑龙江,佳木斯,154007;佳木斯大学基础医学院,黑龙江,佳木斯,154007【正文语种】中文【中图分类】R733.7【相关文献】1.Bcl-2参与SCID小鼠体内齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡的调控作用 [J], 杨志明;王迪迪;李丽;张鹏霞2.Fas在云芝糖肽诱导HL-60细胞凋亡中的作用 [J], 李丽美;杨晓彤;糜可;杨庆尧3.生存素在VP16诱导HL-60白血病细胞凋亡中的作用 [J], 李中东;齐振华;刘巍;王光平;陈方平4.c-Myc和Fas在三氧化二砷体外诱导HL-60细胞凋亡中的变化与作用的研究[J], 杨晓梅;温培娥;乔高娟;赵海涛;范华;任霞;姜国胜;杨炜华5.p53和Bcl-2 mRNA表达在三七皂苷R1诱导HL-60细胞凋亡中的作用 [J], 郑文球;朱敏因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
熊果酸对人肝癌HepG2细胞凋亡及PI3KAkt信号通路的影响
基金项目:河北省卫生厅青年科研基金资助项目(20170297,20190017)作者单位:050051 石家庄,河北省人民医院通讯作者:宗彦红,电子信箱:shrmzyh@163.com熊果酸对人肝癌HepG2细胞凋亡及PI3K/Akt信号通路的影响宗彦红 霍丽静 常 胜摘 要 目的 探讨熊果酸(ursolicacid,UA)对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响及可能的分子机制。
方法 以DMSO(空白对照组)、UA(10、20、40μmol/L)和LY294002(PI3K特异性抑制剂)10nmol/L干预对数生长期HepG2细胞。
48h后,MTT法检测HepG2细胞增殖抑制率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染色法分析细胞凋亡并计算凋亡率,Westernblot法检测PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、caspase-9、cleavedcaspase-3、Bcl-2、Bax、p-JNK、CHOP表达。
结果 与空白对照组比较,经UA10、20、40μmol/L或LY29400210nmol/L干预能够显著提高HepG2细胞增值抑制率和凋亡率(P<0.01);经UA20、40μmol/L或LY29400210nmol/L干预能够明显下调p-PI3K、p-Akt、Bcl-2表达并上调caspase-9、cleavedcaspase-3、Bax、p-JNK、CHOP表达(P<0.05),提高Bax/Bcl-2比值(P<0.01)。
与LY29400210nmol/L组比较,经UA40μmol/L干预能够显著提高HepG2细胞增值抑制率和凋亡率(P<0.01),下调p-PI3K、p-Akt表达并上调cleavedcaspase-3、Bax、p-JNK、CHOP表达(P<0.05),提高Bax/Bcl-2比值(P<0.01)。
结论 UA能够促进人肝癌HepG2细胞凋亡,抑制PI3K/Akt信号通路而导致其下游促凋亡蛋白表达上调、内质网应激通路活化可能是其重要的分子机制。
熊果酸的研究进展
作者:肖坤福郑云法刘成左张春牛【关键词】熊果酸;,,,检测方法;,,,提取方法;,,,动物实验;,,,临床研究熊果酸是广泛存在于白花蛇舌草、女贞子、乌梅、夏枯草等天然植物中的一种五环三萜类化合物,有研究表明熊果酸具有镇静、抗炎、抗菌、抗糖尿病、降血糖等多种生物学效应,早在1996年,日本学者神藏美枝子等人从杜鹃花科越桔属植物越桔叶中提取了具有较高熊果酸浓度的熊果酸产品,产品中除含有25%的熊果酸外,尚含有大量的熊果酸衍生物、熊果苷和其它三萜类化合物等,具有多种活性成分,用于增强机体免疫力、预防心血管系统疾病、稳定肝功能等。
现在人们对其研究越来越多,并在很多方面取得了可喜的研究进展。
1 提取方法对三萜类化合物的分离提纯是其研究起点,没有较好的提取工艺,就更谈不上对其进一步研究。
近年来,许多科研工作者在这方面做出了突出的贡献。
有些科研工作者[1~5],通过正交实验确定85%~95%的乙醇提取熊果酸效果最佳。
崔星明等[6]采用超临界流体萃取得到的芦笋提取物,用甲醇溶解,采用液相色谱-质谱联用仪检测,得到了56个组分。
发现有保留时间和熊果酸基本一致的峰。
其质谱分子离子峰和特征碎片峰都与熊果酸的一致,确定该化合物为熊果酸。
2 检测方法在检测方法方面,有不少科研工作者对其进行了较深入的研究。
熊慧敏[7]全面地论证了薄层层析-双波长扫描法测定大山楂咀嚼片中熊果酸含量的检测限的线性范围可行性,并考查了此方法的测定熊果酸的稳定性和重复性,从而证明薄层层析-双波长扫描法测定熊果酸精密度、稳定性、重现性、回收率均都达有关规定的要求,本方法操作简单方便,结果可靠,可作为检验产品质量的一个快速而实用的定量方法。
朱玉琴等[8]在采用薄层扫描检测保驾胶囊中熊果酸的含量时首次对显色剂进行了改进,并验证了醋酸-浓硫酸 (9∶1)比10%硫酸乙醇显色要好,检测限低等优点。
与此同时,杨云等[9]在采用薄层层析检测牙周康泰胶囊熊果酸的含量验证了10%磷钼酸乙醇液比10%硫酸乙醇显色要好。
熊果酸诱导人白血病HL-60细胞凋亡作用
亡
参 照文 献 [ ] 法 , 同浓 度 熊 果 酸 作 用 4 9方 不 8h
后 收集 HL 6 一0细 胞 , 格 按 照 说 明 书进 行 操 作 , 严 采
中 国 实验 诊 断学
21 0 2年 8月 第 1 6卷
第 8期
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细 胞株 凋 亡 , 究还 表 明熊 果 酸 对 正 常 细胞 毒 性 作 研 用 较小 , 有高 效低度 的生物 学特 点 , 具 近年来 熊果 酸
l a e fPe i a { u e c n n h i n ii l mma o y a d a t— e v s o rl "r t s e s a d t e r a t nfa l t r n n i
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用 机制 , 过诱 导凋 亡 消 除 肿 瘤 或抑 制肿 瘤 生 长 已 通
经 成 为癌 症 治 疗 的 一 种 策 略口 。本 研 究 结果 表 明
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熊 果 酸对 HL 6 一 0细胞 的增殖 有 较强 的抑 制作 用 , 熊
果 酸体 外 可诱 导 HL 6 一0细 胞 凋亡 。研 究表 明 , 胞 细
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齐墩果酸对白血病HL-60细胞PI3K、Akt、Cav-1表达的影响
s i g n a l i n g i s e s s e n ia t l f o rABL o n e o g e n e me d i a t e dt r a n s f o r ma t i o no fB —
白血病是 一 种严 重 危 害 人类 健 康 的 造 血 系统 恶 性 肿 瘤 , 其病 因和发病机制与多种遗传学改变密切 相关。细胞 增殖或凋亡信号转导通路 中的某一环节异常 , 可使 细胞增殖 调节失控和/ 或对 凋亡 发生抵抗 而引起 细胞 生长失 控 , 最 终 导致肿瘤形成 。P I 3 K / A K T信号通路激活可抑制多种刺激 引发 的细胞凋亡 、 促 进细胞周期进 展、 促进 细胞生存和 增殖 、 参 与血管形成和肿瘤 的转移 , 在恶性肿 瘤演变过程 中扮演着 重要角 色。在细胞静 息状态下 , P DK普遍存 在胞浆 中 , 具有 酪氨酸蛋 白活性 的膜 受体 ( 如E G m) 和非受 体 型蛋 白激酶 ( 如S r c ) 可激 活 I型 P I 3 K。生长 因子与相 应 的酪氨 酸激酶
2 . 2 . 2 O A对 H L一6 0细胞 A k t 基因表达 的影响 O A处 理组 A k t m R N A表 达 的相 对 强 度 为 ( 0 . 6 7 8 9 - 4 0 . 0 2 8 2 ) , 显著低 于阴性对照组( O . 8 8 3 2 -0 4 . 0 1 3 5 ) , 有统计 学 意义 ( P <0 . 0 5 ) , 见表 I 。
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与P T E N — A k t 信号 传导途 径相关 。 方法 体外 培养 H L 一 6 0细胞 。琼 脂糖凝 胶 电泳观察 D N A梯形 条带 。
We s t e r n B l o t 探讨 U A对 H L 一 6 0 细胞 P T E N、 P — A k t 蛋 白表 达 的影 响 。 结 果 u A可 上 调 H L 一 6 0 细胞 P T E N 蛋 白表 达 和抑 制 P — A k t 蛋 白表达 并 呈时 间依 赖 方式 , P P A R 特 异性 阻 断剂 G W9 6 6 2 预孵 育可 拮抗 此 作用 。
结论 熊果酸抑制 H L 一 6 0细胞增殖及诱导凋亡与其上调 P T E N蛋白表达 , 抑制抑制 A k t 磷酸化相关 。
【 关键 词 】 人 急性 髓 性 白血病 ; 熊果 酸 ; 增殖; A k t
[ 中图分类号 】 R 7 3 3 . 7 1 0 ; R 7 3 5 . 2 0 5
【 文献标识码 】 A
[ 文章编号 】 2 0 9 5 — 0 6 1 6( 2 0 1 5) 1 7 _ 3 1 — 0 4
Re l a t i 0 ns hi p be t wee n PTEN— Akt pa t h wa y a nd ur s o l i c a c i d o n a po p t os i s a n d i n i n hi b i t i ng t he pr o l i f e r a t i o n o f HL- 6 0 c e l l s
十 田 医 药 斜 学2 0 1 5 年 9 月 第 5 卷 第 1 7 期
・ 基础 医学 ・
熊果酸诱 导HL - 6 0 细胞 凋亡及抑制增殖 与P T E N- Ak t 途 径 的相 关 性
岳 军
湖南省邵阳市疾病预防控制中心, 湖南邵阳 4 2 2 0 0 0
[ 摘 要 】目 的 探 讨 熊 果 酸 诱 导 人 急 性 髓 性 白血 病 细 胞 系 ( H L 一 6 0) 细 胞 凋 亡 及 抑 制 增 殖 作 用 机 制 是 否
i n h i bt o s i s t o b e i n d u c t e d b y Ur s o l i c a c i d wi t h r e l a t e d b y r a i s i n g t h e P TEN a n d i n h i b i t i n g t h e p - AKt
ma n n e r .t hi s e fe e t t o b e b l o c k e d b y GW 9 6 6 2 o f P PAR
p r e — i n c u b a t e d .Conc l us i o n Th e p r o l i f e r a t i o n t o b e
姗 J u n
S h a o y a n g Ce n t e r f o r Di s e a s C o n t r o l a n d P r e v e n t i o n , S h a o y a n g 4 2 2 0 0 0 , Ch i n a
[ Ab s t r a c t ]Ob j e c t i v e T o i n v e s t i g a t t h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n P T E N — Ak t p a t h wa y a n d u r s o l i c a c i d i n i n d u c t i o n