造血干细胞移植中人巨细胞病毒检测：荧光定量聚合酶链反应的早期诊断价值
应用荧光定量聚合酶链反应(FQ—PCR)检测孕妇巨细胞病毒感染
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３ ０・
中国优 生与遗传 杂志 ２ ０ ０ ７年第 ｌ ５卷第 ３期
应用 荧光 定量 聚合 酶链 反应 （ Ｑ —Ｐ Ｒ） Ｆ Ｃ 检 测 孕妇 巨细胞 病毒 感染
李 岩 ．张秀玲 ．张 颖 ．刘殿芹 （ 天津医科 大学总医院妇产科 ，３０ ５ ） ０ ０２
，
ｗ ｓ ２８ ％ （４／ ０６ ．１ｌ ｐｓｉ ｔ ｒｌ Ｃ Ｖ—ＩＭ ｗ ｓ ．５ （２ １１ ） １ ｅａｉ ｔ ｏ ｒｍ Ｃ ａ ．３ ７ ７ １ １ ） １ ｏｉｖ ｒ ｅｏ ｓ ｌ Ｍ ０ ｅ ｔ ｅ ａ ｆ ｅｌ ｎ ｇ ａ １％ ３／０ ６ ．１ｌ ｎｇｔ ｅｒ ｅ ｓ ｕ ＭＶ— ｓ ａ ３ ｅ ｖ ａ ｅ ｆ ｌＧＷ ｓ ４ ０ ２ ． ％ （４ ／０６ ．Ｃ ｔ ｕ ｒ ｅｉ ｅｔ ｎｗｒ ｏｓ ｅ ｄｉ ４ｃ．８ ｏｃ ｓ ｎ Ｆ ２ ２４ １１ ） ＭＶｉ ｒ ｔ ｉ ｆｃｏ ｅ ｃｎｉ ｒ ａｅ．Ｃ ｎｌ ｉ ： Ｑ—Ｐ Ｒ ｉ ａｓ ｕｅ ｅｅｓｒ ｍ ｔ ｓ ｎａ ｅ ｎ ｎ ｉ ｅ ｄｅ ｎ ｑ ｕｏ Ｃ ｂｏ ｔ ｙｎ ｓ ａｙｅ ｈ ｓ ｌ ｌ ｃ ｏ ｄ
Ｄａ ｑ ． （ ｅａｔｅｔｆＯ ｓ ｔｃａ ｄＧ ｎｃｌ ｙｏ ａｊ ｄ ａ ｎ ｅ Ｇｎｒｌ ｏ ｉ Ｔ ｎｎ ００ ２） ｉｎ— ｉ Ｄｐ ｒ ｎ ｏ ｂｅ ｉ ｎ ｙｅｏ ｇ Ｔ ｎｎＭｅｉ ｌＵ ｉ ｒ ｎ ｍ ｔｒ ｏ ｆ ｉ ｉ ｃ ｖ ｓ ｅｅａ Ｈ ｓ ｔ ｐ ｄ， ｉ ｊ ，３０ ５ ａｉ
１１ ） Ｃ Ｖ—Ｉ 阴性率 ２．２ （４／ ０６ 。２ ０６ ， Ｍ ｇ ￣ ４０ ％ ２４ １ １ ） ０例产前诊 断者有 ４例发生 了宫内传播 。结论 Ｆ Ｑ—Ｐ Ｒ对 Ｃ Ｃ ＭＶ感 染的诊
PCR技术在医学诊断中的应用
PCR技术在医学诊断中的应用PCR（聚合酶链反应）是一种常用的分子生物学技术，已经广泛应用于医学诊断中。
它能够通过扩增、检测和分析DNA序列，从而提供对疾病的早期诊断、个体化治疗和预后判断等方面的支持。
本文将重点介绍PCR技术在医学诊断中的应用。
首先，PCR技术在传染病的早期诊断中发挥着重要作用。
在传染病的早期诊断过程中，PCR技术能够通过扩增病原体的DNA片段并进行检测，从而快速确定感染病原体是否存在。
例如，PCR可以用于检测结核分枝杆菌、流感病毒和艾滋病病毒等病原体的存在。
与传统的培养方法相比，PCR技术可以提供更快速和准确的结果，有助于早期干预和控制传染病的传播。
其次，PCR技术在遗传病的诊断中具有重要意义。
遗传病是由基因突变引起的疾病，PCR技术可以用于检测基因突变的存在和类型。
通过PCR技术，研究人员可以扩增特定基因的DNA序列，并对扩增产物进行测序和分析。
这对于确诊遗传病、筛查携带者和进行家庭遗传咨询非常有价值。
例如，PCR技术已被成功应用于囊性纤维化、遗传性乳糜泻和肌营养不良等遗传病的诊断。
此外，PCR技术在肿瘤诊断和治疗中也扮演着重要的角色。
肿瘤是由DNA序列的突变引起的疾病，PCR技术可以通过扩增和检测肿瘤相关的DNA序列来进行早期检测、分型和预后判断。
例如，PCR技术可以用于检测肿瘤相关的突变基因，如BRAF、EGFR和KRAS基因的突变。
这些基因的突变状态可以用于肿瘤的分型和预后判断，并且可以指导个体化的治疗方案的选择。
此外，PCR技术还可以用于监测肿瘤治疗的疗效和预测复发风险。
除了上述应用，PCR技术还在个体化药物治疗、遗传标记物研究和体外受精技术中发挥着重要作用。
例如，PCR技术可以用于检测药物代谢相关的基因多态性，从而指导个体化药物治疗的选择和调整。
此外，PCR技术可以用于研究遗传标记物在疾病发展和治疗过程中的作用，有助于深入理解疾病的机制和发展新的治疗方法。
此外，PCR技术在体外受精技术中可以用于检测胚胎的遗传病风险，从而保障胚胎的质量和健康。
荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒检测中的应用
Ｐａ ｗ ａ ｄ ｎ Ｎ Ａ ， Ｌｏｍ ｂ ｄｉ Ａ ． Ｅｆｅ ｔ ｏ ｔ ｍ ｏｒ ｔ ｒ ｈａ ａｒ ｆ ｃ ｆ ｕ
ｎ ｃｏ ｉ ｆｃｏ ｎ ｇ ｏ ｎ ｕ ｃｉｎ ｉ ｅ ｒ ｓｓ ａ ｔ ｒ ｏ ｒ ｗｔ ｈ ａ ｄ ｆ ｎ ｔ ｎ ＦＲＴＬ５ ｏ
ｌｕ ，ｎ ｎ ｏ ｅｉ ｙｆｎ ｔ ｎ［ ］ Ｍｅａ ｙ ｄ ｉ ｓ ａｄ ｅｄ ｔｈｌ ｌｄｓｕ ｃｉ Ｊ ． ｔｂＳ ｎ ｒ ｔ ａ ｏ
Ｒｅａ ｓ ｒ ２ ０ １ １ ： ５ ６ ． ｌｔＤｉｏ ｄ， ０ ３， （ ） ５ — ７ Ｍ ｏ ａ Ｃ， ｖ ｒ ｏ Ｊ Ｆ． ｅ ｒ ｌ ｆｉ ｆａ ｒ Ｎａ ａ ｒ Ｔｈ ｏ ｅ ｏ ｎ ｌ ｍｍａ ｉ ｎ ａ ｔ ｓａ ｏ
ｐ ｔ ｈ ｇ ｎ ｃ ｆ ｃ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｅ ｏ ｍｅ ｔ ｏ ｅ ａ ｉ— ａ ｏ ｅ ｉ ａ ｔ ｒ ｉ ｅ ｄ ｖ ｌ ｐ ｎ ｆ ｒ ｎ ｌｄ ｓ
给予 治疗 ， 降低其疾 病 对患儿 的伤 害至关 重要 。 对 本
文采 用荧 光定 量聚合 酶链 式反应 （ Ｑ— Ｃ 法） 测 Ｆ ＰＲ 检 患 者 中， 体 对 Ｔ４反 应 低 下 ， 可 能 出 现 对 ＴＲ 垂 有 Ｈ 反应 低下 。而 重症 患者 Ｔ Ｈ 过低 主要 是 由于 ＴＲ Ｓ Ｈ 反应 低下 而深 度抑制 的作 用 。 ］ 从本组 的研 究显 示 ，
糖 尿病 患者 的 Ｔ Ｈ 浓 度随 Ｈｂ ｃ水平 的上升 而下 Ｓ Ａ１
ｅｓ ｎｄａ ｅ ｓＪ ． ｕｒＤａ ｐ ２ ０ ， （ ） ３ ９ ａｅ ｉ ｉｂｔ ［］ Ｃ ｒ ｉ Ｒｅ ，０ ５ ５ ６ ：９— ｅ ｂ
４０ １．
荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒检测中的应用
阳性率( % ) 76. 7 35. 9
V2 3. 109
P 值 0. 028
533 例样本中, HCM V-DNA 阳性 284 例, 总阳 性率为53. 3% 。227 例乳汁样本中, HCM V-DNA 阳 性174 例, 阳性率为76. 7% , 拷贝数的对数范围为2. 51～6. 63, 平均值为 4. 56。306 例患儿尿液样本中, HCMV -DNA 阳性 110 例, 阳性率为 35. 9% , 拷贝数 的对数范围为3. 12～7. 62。两组阳性率比较差异有 统计学意义( P< 0. 05) 。 2. 2 配对样本检验结果
·286·
检验医学
文章编号: 1671- 8631( 2012) 04- 0286- 03
P ro ceeding of Clinical M edicine, A pr. 2012, V ol 21 N o. 4
荧光定量 PCR 技术在人巨细胞病毒检测中的应用
祁Hale Waihona Puke 茹, 武坚锐( 山西省儿童医院, 山西 太原 030013)
1. 3 检测方法
验以阳性定量标准品做标准曲线, 同时设置阴性、空
1. 3. 1 标本处理
白对照。
乳汁样本: 充分混匀, 吸取 1. 0 mL 于无菌离心 1. 4 统计学方法
管, 12 000 r/ m in 离心 5 min, 弃上清; 装有沉淀的离 心管加入1 m L 无菌生理盐水洗涤1 次, 沉淀加入50
186 例配对样本中, 有 120 例结果一致, 一致率 为64. 5% 。母乳HCM V-DNA 阳性140 例中, 配对婴 儿尿 HCM V-DNA 阳性 88 例, 阳性率 62. 8% ; 母乳 HCMV -DNA 阴性 46 例中, 婴儿尿HCM V-DNA 阳 性共 14 例, 阳性率为 30. 4% , 两组比较差异有统计 学意义( P< 0. 01) 。 3 讨 论
荧光定量聚合酶链反应检测在婴儿人巨细胞病毒感染中的临床意义
Ｐ Ｃ Ｒ反 应 。
１ ． ５ 扩增 ：反应管置于 ＡＢ Ｉ － ７ ３ ０ ０全 自动分析仪内， ９ ３ ｑ Ｃ ２ ｍｉ ｎ
预变性 ， 然后 按 ９ ３℃ ４ ５ ｓ 、 ５ ５℃ ６ ０ Ｓ ， 先 ｌ Ｏ个 循 环 ， 最后按
因此 ， 对婴儿感染 的早期诊 断具有重要 意义。我们利用 荧光
定量聚合酶链反应 （ ｌ ｆ ｕ ｏ ｒ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｔ ｑ ｕ ａ ｎ ｔ ｉ ￣Ｐ Ｃ Ｒ， Ｆ Ｑ ． Ｐ Ｃ Ｒ） 方法检
血浆 Ｆ Ｉ Ｂ是急性相蛋 白，研究表 明 Ｆ ＩＢ是许多疾病进展 性 的危 险因子 ，手足 口病 Ｆ Ｉ Ｂ升高可 能是病毒直接作用于血
参 考 文 献
【 １ 】 李维春 ， 王圣东 ． 心肌 肌钙蛋 白 Ｉ ， 高敏 ｃ ． 反应蛋 白检测在手 足 口病患Ｊ Ｌ ， Ｄ 肌损伤 的临床价值 ． 中国实用诊断学 ， ２ ０ ０ ９ ，
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１ ７ ８・
实用医技杂志 ２ ０ １ ４ 年２ 月第 ２ １ 卷第 ２ 期
Ｊ ｏ ｕ ｍ ａ ｌ ０ ｆ Ｐ ｒ ａ ｃ ｔ ｉ ｃ ａ １ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ａ １ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅ ｓ ， Ｆ ｅ ｂ ｒ ｕ ａ ｒ ｖ ２ ０ １ ４ ， Ｖ ０ １ ． ２ １ ， Ｎ ０ ． ２
床意义 的研究［ Ｊ 】 ． 中国优生与遗传杂志 ， ２ ０ ０ ７ ， １ ５ （ ２ ） ： １ ０ ５ ．
【 ３ ］ 方静霞 ． 超敏 Ｃ 一 反应 蛋 白和 心肌酶联合 检测对 手足 口病患儿
巨细胞病毒DNA检测在筛查巨细胞病毒感染中的应用
巨细胞病毒DNA检测在筛查巨细胞病毒感染中的应用作者：钟伟明何浩瑜黄家亮来源：《中国医学创新》2011年第15期作者单位：537100 广西贵港市妇幼保健院通讯作者：钟伟明【摘要】目的探讨荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）方法检测婴儿尿液人巨细胞病毒（CMV）DNA在儿科CMV感染诊断中的价值。
方法对565例临床疑诊CMV感染患儿分别应用荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）、酶联免疫法（ELISA）检测尿液CMV-DNA及血清CMV-IgM抗体。
结果 FQ-PCR检测尿CMV-DNA的阳性率为42.83%，ELISA检测婴儿血清CMV-IgM抗体阳性率为20.18%。
两种方法对CMV感染诊断符合率为76.46%，前者诊断阳性率显著高于后者（χ233.59，P【关键词】荧光定量聚合酶链反应；酶联免疫法；巨细胞病毒巨细胞病毒感染是由人巨细胞病毒（CMV）引起的病毒感染性疾病，可累及多脏器、多系统，临床症状多样且轻重不一。
婴儿感染可导致黄疸、肝脾肿大、皮肤出血点及淤斑等，重症病死率高，并可导致运动、听力、视力及智力等多种严重的后遗症［1，2］，因而受到儿科医生的极大关注。
由于CMV感染临床表现的非特异性，所以敏感和可依赖的实验诊断指标显得非常重要。
目前常用的实验室诊断方法有病毒分离、ELISA检测CMV特异性抗体、抗原血症pp65的检测及DNA的定量检测。
不同的方法各有优缺点。
本研究采用荧光定量PCR方法检测婴儿尿液CMV DNA，并与血清抗体检测进行比较，旨在探讨尿液CMV DNA定量检测的诊断意义。
1 资料与方法1.1 一般资料 2009年7月～2010年10月在本院儿科住院的临床疑似CMV感染［3］的患儿565例。
年龄14天～2岁。
1.2 标本收集采集所有被检验者静脉血2 ml，3000 r/min，离心5 min分离血清，置4 ℃冰箱保存，24 h内进行CMV-IgM检测。
同时，留取所有被检验者尿液5～10 ml，-20 ℃冰箱保存，24 h内进行CMV DNA检测。
肝移植后巨细胞病毒感染诊断
肝移植后巨细胞病毒感染诊断引言肝移植是治疗有严重肝功能衰竭或慢性肝病的患者的重要手段。
然而，移植后的患者容易受到各种感染的威胁，其中包括巨细胞病毒感染。
巨细胞病毒感染在肝移植患者中相对常见，但在早期诊断和治疗方面仍存在挑战。
本文将详细介绍肝移植后巨细胞病毒感染的诊断方法和临床意义。
背景知识巨细胞病毒（Cytomegalovirus，简称CMV）是一种DNA病毒，属于疱疹病毒科。
感染CMV的主要途径包括空气飞沫传播、血液和器官移植。
感染CMV后，大多数健康人会产生免疫应答并患上隐性感染，但在免疫抑制状态下的人群，特别是移植患者，CMV感染往往会引发严重的并发症。
肝移植后的巨细胞病毒感染是由供体或受体携带CMV病毒引起的。
该感染在肝移植患者中较为常见，大约有50%的患者在移植后3个月内会发生CMV感染。
CMV感染会增加移植后的并发症风险，并且对患者的预后有着重要影响。
临床表现肝移植后巨细胞病毒感染的临床表现各异。
一部分患者可能无任何症状，但仍可以通过实验室检查发现病毒感染。
另一部分患者可能出现类似感冒的症状，如发热、乏力、喉咙痛等。
少数患者会出现肝功能异常、呼吸道感染、胃肠道症状等症状。
对于移植后的患者来说，及早诊断和治疗CMV感染至关重要。
实验室检查肝移植后巨细胞病毒感染的诊断主要依靠实验室检查。
常用的检测方法包括血清学检测和分子生物学检测。
血清学检测血清学检测主要通过检测血清中的CMV病毒抗体来判断感染状况。
常用的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、中和试验、免疫荧光抗体法等。
这些方法可以检测到CMV抗体IgM和IgG，通过对照抗体滴度的变化可以判断感染的活跃程度和免疫抑制状态。
分子生物学检测分子生物学检测是诊断CMV感染的主要方法之一。
常用的方法包括聚合酶链反应（PCR），此技术可以直接检测病毒的DNA，具有高灵敏度和特异性，可以提供早期和定量的CMV感染信息。
此外，还有一些新型方法，如扩增酶链反应（LAMP）和转录酶介导扩增（TMA）等，也逐渐应用于临床。
聚合酶链反应在其他微生物检测中的应用
聚合酶链反应在其他微生物检测中的应用一、PCR检测人乳头瘤病毒人乳头瘤病毒的存在与多种皮肤黏膜的良、恶性增生，特别是宫颈癌的发生、发展密切相关，病毒的各型基因序列与其生物学行为存在高度相关性，不同基因型的HPV具有不同的致病危险性。
HPVDNA的检测和分型对了解相关病情、判断预后及指导治疗具有重要价值，特别是对女性生殖道肿瘤的癌情预报具有重要意义。
由于缺乏体外培养系统和可靠的血清反应物，所以HPV的检测几乎完全依赖于分子生物学检测方法。
（一）标本采集检查前告知患者1.月经正常妇女，在月经来潮后10～18天为最佳检查时间。
2.检查前48小时内不要作阴道冲洗，不要用避孕药膏等阴道内用药物。
3.检查前48小时最好不要行性生活。
4.检查前不进行醋酸或碘液涂抹。
（二）标本收集1.按医生指示，仰卧于检查床上。
2.由医生以窥阴器或阴道张开器暴露宫颈。
然后使用专用的HPV 采样刷置于宫颈口采集标本（最好在取样前先用棉签擦去宫颈分泌物）。
3.将专用宫颈刷置于宫颈口，轻轻搓动宫颈刷使其顺时针旋转5圈。
4.慢慢取出宫颈刷，将其放入标有患者编号的取样管中，取样管内已加有专用细胞保存液，折断其刷头入管中，拧紧瓶盖。
5.样本一经采集，则应尽可能快的送至检测实验室；如若不能马上送检样本，请于4℃保存，请在2个星期之内进行检测。
（三）HPVDNA检测1.人乳头瘤病毒（HPV）核酸扩增（PCR）荧光检测法同Tagman 原理。
2.人乳头瘤病毒（HPV）核酸扩增分型检测法采用“导流杂交”技术原理，将HPV探针固定于膜纤维中，使目标分子（单链DNA）主动导流穿过固定有探针的薄膜并与互补探针相结合，形成复合物而被固定下来。
未被结合固定的分子穿过薄膜后被除去。
因此，它加速了互补分子之间的相互作用，将杂交时间从几个小时降低至几分钟，比传统杂交法省时几百倍。
整个HPV基因分型实验主要由以下三个分实验组成：宫颈细胞总DNA的抽提，基因扩增（PCR），导流杂交。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析一、HCMV感染的临床表现HCMV感染可引起多种疾病，其临床表现也因感染对象的不同而有所差异。
在免疫功能正常的成年人中，HCMV感染多数为无症状性感染，或者出现轻微的上呼吸道症状，如咽痛、发热、乏力等。
而在免疫功能受损的个体中（如艾滋病毒感染者、器官移植受者、白血病患者等），HCMV感染往往表现为严重的疾病，如肺炎、肝炎、肾炎、视网膜炎等。
在早产儿、新生儿及婴幼儿中，HCMV感染可引起一系列疾病，如先天性脑损伤、听力损害、智力障碍等。
对于需要接受免疫抑制治疗的患者、器官移植受者以及新生儿等特殊人群，及时准确地检测HCMV感染显得尤为重要。
二、实时荧光定量PCR检测HCMV感染的临床意义1. 早期诊断和治疗指导实时荧光定量PCR技术具有灵敏度高、特异性强、快速准确的特点，可以在早期发现HCMV感染，帮助医生尽早进行诊断和治疗。
特别是对于接受器官移植、免疫抑制治疗的患者，因其免疫功能较低，一旦出现HCMV感染，往往病情进展较快。
实时荧光定量PCR技术可以在感染初期迅速发现病毒载量的增加，有助于医生及时调整治疗方案，提高治疗的效果。
2. 监测疗效和预后评估对于HCMV感染的患者，实时荧光定量PCR技术可以帮助监测治疗效果，及时评估感染的严重程度和预后情况。
通过定期检测病毒载量的变化，医生可以科学地调整治疗方案，判断治疗的效果和预后情况，有助于及时采取有效措施，提高患者的临床治疗效果。
3. 防控传播和预防感染及时准确地检测HCMV感染，有助于医院和社区进行传染病防控工作。
特别是在儿科医院和新生儿保健机构，实时荧光定量PCR技术可以帮助医生及时发现HCMV感染的患者，采取有效的隔离和预防措施，防止感染在人群中的传播。
尽管实时荧光定量PCR技术具有快速、准确、灵敏的特点，但其在检测HCMV感染时也存在一些局限性。
实时荧光定量PCR技术需要高度训练的技术人员进行操作，对实验室条件有一定的要求，可能会增加检测成本。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析【摘要】本文旨在探讨实时荧光定量PCR在检测人巨细胞病毒感染中的临床意义。
首先介绍PCR技术在临床诊断中的应用，然后解析实时荧光定量PCR的原理。
人巨细胞病毒感染的临床表现被详细描述，接着介绍实时荧光定量PCR检测该病毒感染的方法。
实验结果分析将进一步探讨该技术在病毒检测中的重要性。
结论部分将总结实时荧光定量PCR在人巨细胞病毒感染诊断中的临床意义，并展望未来的研究方向。
本研究旨在为临床医生提供更准确、快速的诊断手段，帮助早期干预和治疗人巨细胞病毒感染。
【关键词】实时荧光定量PCR、人巨细胞病毒、临床意义、PCR技术、临床诊断、原理、临床表现、方法、实验结果、结果分析、结论、未来研究方向、总结。
1. 引言1.1 背景介绍巨细胞病毒（CMV）是一种普遍存在于人类中的病毒，感染率随年龄增长逐渐增高。
在免疫功能正常的人群中，CMV感染通常无症状或仅产生轻微的症状，但在免疫功能受损的人群中，如HIV感染者、器官移植患者、白血病患者等，CMV感染可引起严重的并发症，甚至危及生命。
实时荧光定量PCR作为PCR技术的一种变种，通过在PCR反应过程中监测产生的DNA扩增产物的实时荧光信号来实现对目标DNA的定量检测，具有高度的灵敏度和特异性。
利用实时荧光定量PCR技术检测人巨细胞病毒感染具有重要的临床意义，可以根据检测结果及时进行诊断和治疗，降低感染带来的风险。
本研究旨在探讨实时荧光定量PCR技术在人CMV感染诊断中的应用，为临床提供更准确、快速的诊断手段。
1.2 研究目的我们的研究旨在验证实时荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒感染检测中的准确性和可靠性，并探讨其在临床诊断中的实际意义。
通过本研究，我们希望可以为提高人巨细胞病毒感染的早期检测率、准确性和治疗效果提供科学依据，为临床医生在诊疗工作中提供更好的支持和指导。
我们也希望能够为今后相关疾病的研究提供启示，推动相关领域的发展与进步。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析1. 引言1.1 研究背景人巨细胞病毒是一种广泛存在于人类群体中的常见病毒，主要通过呼吸道、唾液等途径传播，在全球范围内都有较高的感染率。
人巨细胞病毒感染可以引起一系列不同严重程度的疾病，如呼吸道感染、消化系统感染、神经系统感染等，对特定人群，如免疫功能低下的患者、新生儿和儿童等，病情可能会更加严重甚至威胁生命。
传统的人巨细胞病毒感染检测方法包括细胞培养、免疫荧光等，然而这些方法存在着检测灵敏度低、耗时长、操作复杂等缺点。
迫切需要一种快速、准确且高灵敏度的检测方法来及时诊断人巨细胞病毒感染，以指导临床治疗和预防控制措施的制定。
1.2 研究目的本研究旨在通过实时荧光定量PCR技术对人巨细胞病毒感染进行准确、快速的检测和定量分析，深入探讨该技术在人巨细胞病毒感染诊断中的应用潜力以及临床意义。
具体目的包括：1. 探究实时荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒感染检测中的灵敏度和特异性，评估其在临床诊断中的准确性和可靠性。
2. 分析人巨细胞病毒感染的临床表现特点，探讨实时荧光定量PCR技术在早期诊断和治疗监测中的应用前景。
3. 探讨实时荧光定量PCR技术在人巨细胞病毒感染预防、控制和治疗中的临床意义，促进相关疾病的早期诊断和有效治疗。
通过对以上目的的研究，本研究旨在为人巨细胞病毒感染的临床诊断和治疗提供科学依据，并为相关疾病的防控工作提供技术支持和指导。
1.3 研究意义本研究的意义在于提高人巨细胞病毒感染的诊断准确性和效率，从而为临床治疗和预防提供更科学的依据。
目前，传统的检测方法存在着准确性低、耗时长、操作复杂等缺点，而实时荧光定量PCR技术具有高度灵敏性、特异性和快速性的优势，可以在短时间内准确检测出病毒感染情况，为疾病的早期筛查和诊断提供重要依据。
通过该技术的应用，可以对病情的发展和治疗效果进行动态监测，为临床医生调整治疗方案提供实时数据支持。
本研究的意义在于推动人巨细胞病毒感染的诊断技术的进步，为改善患者的治疗效果和生存质量做出贡献。
造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染的相关性研究
造血干细胞移植后人巨细胞病毒感染的相关性研究戴艳;方芳;冯钢;苏贵平;黄来全;蒋艺枝;黄东平【摘要】Objective:To investigate the incidence of cytomegalovirus ( CMV ) infection and ganciclovir ( GCV ) resistance after hematopoietic stem cell transplantation( HSCT) ,and the correlation between CMV infection and graft-versus-host disease ( GVHD) .Methods:Eighteen patients undergone HSCT in our hospital were included between March 2012 and April2014.Real-time fluorescent quantitative PCR(FQ-PCR) was performed to test the CMV in-fection in total patients,and patients with positive CMV-DNA were treated with GCV.Results:CMV infection occurred in 8 patients (44.4%),in whom 7 were umbilical cord blood transplantation(UCBT) from unrelated donors(87.5%,7/8).Seven in 8 with CMV infection were complicated with GVHD,in which 5 were infection of gradeⅢorover(71.4%,5 /7).GCV resistance after UCBT occurred in2.Conclusion:HCMV infection and GCV resistance ap-pear higher in patients after UCBT,and incidence of GVHD is associated with HCMV.%目的：探讨分析造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation ，HSCT）后人巨细胞病毒（HCMV）感染与更昔洛韦（ganciclovir，GCV）耐药的发生及与移植类型、移植物抗宿主病（GVHD）等的相关性。
不同方法检测造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的研究
临床研究论著不同方法检测造血干细胞移植受者巨细胞病毒感染的研究钱丽丽俞颖陈益明胡正军谈潘莉浙江中医药大学附属第一医院杭州310006摘要:[目的]探讨造血干细胞移植后检测巨细胞病毒(CM V)感染的有效方法。
[方法]分别应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法、荧光定量PCR(FQ PCR)、间接免疫荧光法(IFA)检测11名干细胞移植受者,96份标本的血清IgM抗体、血浆DNA负荷量和外周血白细胞PP65抗原。
[结果]ELISA、FQ PCR和IFA的阳性检出率分别为1563%、3438%、3646%。
ELI SA的阳性检出率明显低于FQ PCR和IFA法。
IF A与F Q PCR两种检测方法对CMV感染的测定结果具有良好的一致性(kappa值为0818)。
[结论]IF A和FQ P CR是检测造血干细胞移植受者CMV早期感染较为敏感的指标,具有良好的临床应用价值。
关键词:巨细胞病毒;荧光定量PCR;间接免疫荧光法;P P65抗原;造血干细胞移植中图分类号:R733文献标识码:A文章编号:10055509(2010)06085002Resear ch on Hematopoietic Stem Cell Tra nsplangtation Recipients with Cytom Egalovirus I nfection by Dif fer ent Methods Qian Lili, Yu Ying,Chen Yiming,et al F ir st H osp ital Af f iliated to Zhej iang Chinese Medica l Univer sity,H a ngz hou(310006)Abstr act:[Object ive]To find the mor e efficient method for cytom egalovirus infection in hematopoietic st em cell t ransplantation (H SCT)recipients.[Methods]The plasma CM V DNA loading,ser um level of ant i CMV IgM and the per ipheral blood leukocyte P P65antigen were determined in96clinical specimens fr om11H SCT recipient s by FQ P CR,IF A and ELISA respectively[Re sults]T he positive r ates of ELISA,FQ PCR and IF A wer e1563%,3438%and3646%r espectively IF A was concordant with F Q PCR in detecting cytom ega lovirus infect ion T he kappa was0818.[Conclusion]IFA and FQ PCR ar e t he sensit ive and relia ble methods in detection of early CMV infect ion,and can be widely used in clinic.Key w ords:cytom ega lovirus;fluorogenic quantitative PCR;IFA;PP65antigen;H SCT基金项目浙江省中医药管理局基金项目(N56)F j I f Z j T M B F(N56)巨细胞病毒(Cytom egalovirus,CMV)感染是造血干细胞移植(H SCT)后常见的并发症[1],活动性CMV感染在临床上不易与细菌和真菌感染相区别;且其引起的间质性肺炎是器官移植失败重要原因之一[2]。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析人巨细胞病毒（HCMV）是一种常见的人类病原体，属于疱疹病毒家族，广泛存在于人群中。
HCMV感染对于健康人群通常不会造成明显的症状，但对于免疫功能低下的个体，例如免疫抑制患者、新生儿、移植患者等，可能引起严重的并发症甚至危及生命。
及时、准确地检测HCMV感染对于预防和治疗相关疾病具有重要意义。
一、HCMV感染的临床意义HCMV感染在一般人群中多数情况下不会导致症状，但对于免疫功能低下的个体，HCMV 感染可能引起多种疾病，包括肺炎、胃肠炎、肝炎、视网膜炎等。
特别是在器官移植、造血干细胞移植等免疫抑制治疗的患者中，HCMV感染可能导致移植物排斥、器官损害等并发症，危及患者的生命。
妊娠期间的HCMV感染也可能导致胎儿的先天性感染、畸形等严重后果。
对于免疫功能低下的患者、妊娠期的女性以及新生儿，特别需要及时、准确地检测HCMV感染，以便采取有效的治疗和预防措施。
二、实时荧光定量PCR技术在HCMV感染检测中的应用实时荧光定量PCR技术是一种高度灵敏、特异的病原体检测技术，能够检测出样本中的病原体DNA的数量，并且具有快速、准确的特点。
在HCMV感染的检测中，实时荧光定量PCR技术能够检测出样本中的HCMV DNA数量，从而对HCMV感染进行定量分析，为临床医生提供重要的诊断和治疗依据。
在临床中，实时荧光定量PCR技术在HCMV感染的检测中发挥了重要作用。
实时荧光定量PCR技术可以对HCMV感染进行快速、准确地检测，为临床医生提供了及时的诊断依据。
实时荧光定量PCR技术能够对HCMV感染进行定量分析，为临床医生提供了病毒载量的重要信息，有利于疾病的严重程度评估和治疗方案制定。
实时荧光定量PCR技术的高度灵敏性和特异性能够有效地排除假阳性和假阴性结果，确保了检测结果的准确性，为患者的诊断和治疗提供了可靠的依据。
在移植医学领域，实时荧光定量PCR技术尤为重要。
干细胞移植效果评估指标与方法介绍
干细胞移植效果评估指标与方法介绍干细胞移植是一种新兴的治疗方法，被广泛应用于许多疾病的治疗。
为了评估干细胞移植的效果，科研人员开发了一系列指标和方法。
本文将介绍干细胞移植效果评估指标与方法，帮助读者更好地了解和应用于干细胞移植领域。
1.生存率指标干细胞移植后，了解干细胞的存活程度十分重要。
通过检测干细胞的存活率，可以评估移植的成活率和治疗效果。
常用的评估方法有：荧光显微镜观察、流式细胞术分析以及聚合酶链反应（PCR）。
这些方法可以定量地测量干细胞或其标记物的存活程度。
2.功能恢复指标干细胞移植的最终目的是恢复患者的功能。
因此，评估干细胞移植效果的一个重要指标是功能恢复。
对于不同的疾病和治疗对象，功能恢复的指标和方法也有所不同。
例如，在心脏病患者中，可以通过评估患者的心脏功能指标，如心功能分级、运动耐力和生活质量等来评估移植效果。
3.炎症指标炎症反应在干细胞移植过程中是常见的。
炎症反应的严重程度可能会影响干细胞的存活和功能。
因此，评估炎症指标可以为移植效果的评估提供重要依据。
常用的炎症指标包括白细胞计数、C-反应蛋白水平、细胞因子水平等。
这些指标的变化可以反映干细胞移植后的炎症反应和治疗效果。
4.免疫指标干细胞移植会引发免疫反应，包括细胞免疫和体液免疫。
评估干细胞移植效果的一个重要指标是免疫指标。
常用的免疫指标包括淋巴细胞亚群的比例和功能、免疫球蛋白水平等。
这些指标可以反映干细胞移植后免疫系统的状态和功能恢复程度。
5.影像学指标影像学技术已成为评估干细胞移植效果的重要手段。
通过影像学技术，可以观察和分析移植部位的变化。
常用的影像学评估方法包括X线、CT、MRI等。
这些技术可以提供有关移植部位的结构和功能改变的定量和定性信息。
6.临床症状指标临床症状是评估干细胞移植效果的重要指标之一。
通过评估患者的临床症状，可以了解干细胞移植对患者的影响和治疗效果。
常用的临床症状指标包括疼痛程度、生活质量评分、生活活动能力等。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析引言人巨细胞病毒（HCMV）是一种广泛存在于人类群体中的病毒，几乎所有的成年人都曾经感染过HCMV。
尽管大多数感染者没有症状，但在免疫功能受损的患者中，HCMV感染会引起严重的并发症，包括肺炎、脑炎、视网膜炎等。
对于免疫功能受损的患者来说，及时准确地检测HCMV感染非常重要。
实时荧光定量PCR技术已经成为检测HCMV感染的主要方法之一，本文将对其临床意义进行分析。
一、实时荧光定量PCR技术实时荧光定量PCR技术是一种高灵敏度和高特异性的核酸检测方法，通过扩增目标DNA序列并实时监测PCR反应过程中的荧光信号来进行定量分析。
相比传统的PCR方法，实时荧光定量PCR技术具有检测快速、准确性高、可靠性强等优点，已经在临床诊断中得到广泛应用。
二、实时荧光定量PCR检测HCMV感染的临床意义1. 提高早期诊断率HCMV感染在免疫功能受损的患者中容易引起严重的并发症，因此早期诊断对于及时采取治疗措施非常重要。
实时荧光定量PCR技术具有高灵敏度和特异性，可以检测到病毒感染的早期病毒载量，有助于提高早期诊断率，为及时治疗提供重要的依据。
2. 监测治疗效果对于HCMV感染的治疗过程中，实时荧光定量PCR技术可以实时监测病毒载量的变化，评估治疗效果。
通过定期检测HCMV病毒载量的变化，可以及时调整治疗方案，提高治疗效果，减少治疗过程中的并发症和副作用。
3. 提高预后评估的准确性HCMV感染在免疫功能受损的患者中往往会导致严重的并发症，严重影响患者的预后。
实时荧光定量PCR技术可以对HCMV病毒载量进行定量分析，为预后评估提供更为准确的依据。
通过监测病毒载量的变化，可以及时发现预后不良的患者，采取更加积极有效的治疗措施。
4. 指导预防措施的实施对于接受器官移植、造血干细胞移植等免疫抑制治疗的患者，预防HCMV感染尤为重要。
实时荧光定量PCR技术可以对HCMV感染进行早期监测，及时发现感染者，以指导预防措施的实施。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的 临床意义分析
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染的临床意义分析实时荧光定量PCR（real-time PCR）是一种用于检测病毒感染的高灵敏度、高特异性的技术。
人巨细胞病毒（HCMV）是一种常见的病毒，感染者多数无症状，但对于免疫功能低下的患者，特别是器官移植患者和艾滋病患者，HCMV感染可能导致严重的并发症。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染具有重要的临床意义。
实时荧光定量PCR可以及时准确地检测人巨细胞病毒感染。
实时PCR技术具有高度敏感性和特异性，能够快速准确地检测HCMV的DNA，对于早期发现感染和进行干预治疗具有重要意义。
通过实时PCR检测，可以及早发现感染，及时采取有效措施，避免病毒的进一步扩散和感染的恶化。
实时荧光定量PCR可以指导临床治疗。
对于患者感染了HCMV的情况，实时PCR检测可以帮助医生及时调整治疗方案。
在器官移植术后感染HCMV的患者，通过实时PCR检测可以监测病毒载量的变化，指导抗病毒药物的使用和剂量的调整，从而提高治疗的效果，降低药物的副作用。
实时荧光定量PCR可以评估预后和预测疗效。
HCMV感染往往与预后密切相关，感染程度越重，预后越差。
通过实时PCR检测可以定量监测病毒的载量，评估感染的程度，为临床预后评估提供依据。
在治疗过程中，实时PCR检测还可以监测病毒载量的变化，评估治疗的效果，及时发现治疗失败或复发，指导调整治疗方案。
实时荧光定量PCR可以帮助研究HCMV感染的流行病学和病毒学特征。
通过大规模实时PCR检测，可以了解HCMV感染的流行病学特征，如感染的年龄分布、季节分布、地域分布等，有助于制定相关的预防和控制策略。
实时PCR检测还可以对HCMV的病毒学特征进行深入研究，如病毒基因型、毒株变异等，为病毒特异性治疗的研究提供基础数据。
实时荧光定量PCR检测人巨细胞病毒感染具有重要的临床意义。
通过该技术的应用，可以及时准确地检测HCMV感染，指导临床治疗，评估预后和预测疗效，以及开展相关的流行病学和病毒学研究。
定量PCR监测骨髓移植患者人巨细胞病毒感染
定量PCR监测骨髓移植患者人巨细胞病毒感染李敏;赵维莅;季育华;彭亦冰;支立民;潘宁【期刊名称】《上海交通大学学报（医学版）》【年(卷),期】2002(022)002【摘要】目的用定量PCR方法监测骨髓移植患者中人巨细胞病毒(human cytomegalovirus, HCMV)活动性感染. 方法用双标记探针水解的荧光定量PCR方法,检测4例骨髓移植患者移植前、后随访的血标本140份(其中血浆与外周血多形核细胞各50%)中HCMV DNA拷贝数,并作动态分析.血浆标本中HCMV DVA的检出与HCMV IgG和IgM作平行比较. 结果 4例患者除病例4外,均在术后30～50d间HCMV DNA拷贝数增加,同一时间外周血多形核细胞中HCMV DNA的拷贝数高于血浆.当给予适量更昔洛韦,则能抑制其继续升高.4例患者血清中HCMV IgM始终呈阴性,IgG始终呈阳性. 结论荧光定量PCR方法是用以监测骨髓移植患者中HCMV活动情况、指导临床适时用药的一种快速有效的方法.【总页数】3页(P143-145)【作者】李敏;赵维莅;季育华;彭亦冰;支立民;潘宁【作者单位】上海第二医科大学瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院血液科,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院检验科,上海,200025;上海第二医科大学瑞金医院检验科,上海,200025【正文语种】中文【中图分类】R373.9【相关文献】1.荧光定量PCR反应监测发热患者甲型H1N1流感病毒感染 [J], 金欣;黄媛;陈建魁;于农;田曙光;曾利军;左向华;王淼;宋世平;尹秀云2.实时荧光定量PCR方法监测造血干细胞移植患者人巨细胞病毒感染的临床意义[J], 肖小红;陈伟3.荧光实时定量逆转录PCR监测急性早幼粒细胞白血病患者的分子学反应 [J], 姚利;陈子兴;岑建农;邱桥成;何军;鲍晓晶;袁晓妮4.实时定量PCR监测急性早幼粒细胞白血病患者PML/RARα融合基因的临床意义[J], 丁士华;秦慧;翟志敏;吴凡;熊述道5.高敏与普通荧光定量PCR技术在慢乙肝患者抗病毒疗效监测中的对比研究 [J], 卢建华;杨莉;赵召霞;李芊璘;李敏然;刘玉珍;戴二黑;陈秀丽因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
cmvdna参考范围
cmvdna参考范围摘要：1.概述CMV DNA参考范围的重要性2.CMV DNA参考范围的临床应用3.影响CMV DNA参考范围的因素4.正常范围与异常范围的判断和处理5.总结与展望正文：CMV DNA参考范围是临床诊断和治疗CMV感染的重要依据。
CMV （Cytomegalovirus，巨细胞病毒）是一种常见的病毒，广泛存在于人群中，多数人感染后无症状，但在某些特殊情况下，如免疫功能低下、新生儿、器官移植等患者中，可能导致严重的疾病。
因此，准确检测CMV DNA水平，掌握合适的参考范围，对临床诊疗具有重要意义。
一、CMV DNA参考范围的临床应用1.诊断CMV感染：通过实时荧光定量PCR等方法检测CMV DNA水平，有助于早期发现CMV感染，为临床治疗提供依据。
2.评估病情严重程度：CMV DNA水平与病情严重程度呈正相关，高水平的CMV DNA意味着病情较重，需密切监测和积极治疗。
3.监测治疗效果：抗CMV治疗过程中，定期检测CMV DNA水平，以评估治疗效果，调整治疗方案。
4.预测并发症：CMV DNA水平升高，提示可能出现并发症，如肺炎、脑炎等，需加强警惕。
二、影响CMV DNA参考范围的因素1.年龄：年龄对CMV DNA参考范围有影响，新生儿和老年人感染CMV 后，CMV DNA水平较高。
2.免疫状态：免疫功能正常者，CMV DNA水平较低；免疫功能低下者，CMV DNA水平较高。
3.感染部位：不同部位的感染，如呼吸道、肠道、泌尿生殖道等，CMV DNA水平存在差异。
4.合并其他病毒感染：合并其他病毒感染，如HSV、EBV等，CMV DNA 水平可能升高。
三、正常范围与异常范围的判断和处理1.正常范围：不同实验室和文献对CMV DNA正常范围的界定不完全一致，通常认为<1000copies/ml为正常范围。
2.异常范围：CMV DNA水平≥1000copies/ml，提示感染活跃，需进一步评估病情和治疗。
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造血干细胞移植中人巨细胞病毒检测：荧光定量聚合酶链反应的早期诊断价值
刘川1，邹叶青1，石庆芝2
南昌大学第二附属医院，1分子医学实验室，2血液科，江西省南昌市330006
Human cytomegalovirus detection in hematopoietic stem cell transplantation: value of fluorescence quantitative PCR in the early diagnosis
Liu Chuan1, Zou Ye-qing1, Shi Qing-zhi2
1 Laboratory of Molecular Medicine,
2 Department of Hematology, the Second Affiliated Hospital of Nanchang University, Nanchang 330006, Jiangxi Province, China
摘要
背景：动态监测造血干细胞移植受者血浆人巨细胞病毒载量，快速筛选出早期活动性人巨细胞病毒感染者，进而指导临床用药，提高造血干细胞移植的成活率。
目的：探讨荧光定量聚合酶链反应对造血干细胞移植患者人巨细胞病毒活动性感染的早期诊断价值。
方法：收集41例造血干细胞移植患者共656份血标本，应用实时荧光定量PCR方法动态监测血浆人巨细胞病毒DNA载量，并与60例健康体检者血浆人巨细胞病毒DNA载量对比分析。
结果与结论：656份血标本中96份阳性，病毒载量介于5.0×102-1.0×107 IU/mL之间。
治疗有效者人巨细胞病毒DNA迅速转阴，治疗耐药者持续阳性，12例连续阳性者2例死于巨细胞病毒活动性感染。
实时荧光定量PCR方法检测人巨细胞病毒DNA适用于造血干细胞移植后巨细胞病毒活动性感染的早期诊断。
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
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关键词：干细胞；移植；造血干细胞移植；人巨细胞病毒；实时荧光定量PCR；Abstract：
BACKGROUND: To improve the survival rate of transplanted hematopoietic stem cells, dynamic monitoring of plasma content of human cytomegalovirus (HCMV) and rapid screening of early active HCMV infection in hematopoietic stem cell tranplantation recipients, thus to guide the clinical medication, is preferred. OBJECTIVE: To evaluate the usefulness of fluorescence quantitative PCR assay for early detection of HCMV activation after hematopoietic stem cell transplantation. METHODS: Real-time fluorescence quantitative PCR assay was applied for HCMV monitoring in 656 blood samples from 41 hematopoietic stem cell tranplantation
recipients and 60 control blood samples.
RESULTS AND CONCLUSION: In 656 blood samples, 96 samples were positive, and the HCMV DNA copies ranged from 5.0×102 to 1.0×107 IU/mL. Timely initiation of therapy resulted in the rapid clearance of DNA-viraemia but it recurrenced in short time by drug-resistent. Two cases from 12 postive recipients died from HCMV infection. The quantitative detection of HCMV DNA by real-time PCR is a rapid method for monitoring HCMV infection and the early diagnosis in patients after hematopoietic stem cell transplantation.
中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞；骨髓干细胞；造血干细胞；脂肪干细胞；肿瘤干细胞；胚胎干细胞；脐带脐血干细胞；干细胞诱导；干细胞分化；组织工程
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Key words：hematopoietic stem cell transplantation; cytomegalovirus; cytomegalovirus infections; polymerase chain reaction;
中图分类号:R394.2
通讯作者:刘川，硕士，副主任技师，南昌大学第二附属医院分子医学实验室，江西省南昌市330006
作者简介: 刘川，男，1979年生，江西省丰城市人，汉族，2005年江西医学院毕业，硕士，副主任技师，主要从事分子生物学方面的研究。
引用本文:
刘川,邹叶青,石庆芝. 造血干细胞移植中人巨细胞病毒检测：荧光定量聚合酶链反应的早期诊断价值[J]. 中国组织工程研究, 2014, 18(28): 4563-4567.
Liu Chuan,Zou Ye-qing,Shi Qing-zhi. Human cytomegalovirus detection in hematopoietic stem cell transplantation: value of fluorescence quantitative PCR in the early diagnosis[J]. Chinese Journal of Tissue Engineering Research, 2014, 18(28): 4563-4567.。