幽门螺旋杆菌染色液(MGG法)使用说明

合集下载

幽门螺杆菌检测试剂盒(幽必现)说明书

幽门螺杆菌检测试剂盒（幽必现）说明书

【实验前准备】

1 各取去离子水15ml分别加入浸银液粉、显影液粉瓶中轻摇；

2 取去离子水130-150ml加入染色缸中；

3 将浸银液、显色液、染色缸至于60℃温箱助溶1小时；

4 染色前将浸银液加入染色缸中搅拌备用。

【染色方法】

1 切片脱蜡至水，去离子水涮洗；

2 将染色架放入染色缸中60℃30分钟；

3 取出染色架，去离子水涮洗3次；

4 将显影液倒入染色缸中，稍搅拌；

5 放入染色架显影10分钟；

6 温自来水洗；

7 95%乙醇，脱水透明封片。

【染色结果】

细菌黑色，背景组织黄色，细胞核棕黑色。

【原理】

为利用生物组织成分对银离子的还原性质不同，借助含银离子显影液中对苯二酚的还原显影辅助作用，使不同组织部位银粒子密度不同，从而显示从浅黄色到黑色不同的色彩，也显示出不同组织部位中幽门螺杆菌（Hp）的相同形态。

幽门螺杆菌鉴定操作步骤

幽门螺杆菌鉴定

生化鉴定：

(1) 尿素酶试验（自己配置）

用灭菌的接种环挑取适量菌落接种于尿素酶琼脂中，放入恒温培养箱中37℃培养约5min 后观察，幽门螺杆菌尿素酶阳性，可以分解周围试剂中的尿素，使培养基由酸性变成碱性，指示剂酚红由黄色变成红色。

(2) 氧化酶试验（公司购买试纸条）

用牙签刮取适量菌落轻轻涂抹于白色的氧化酶试纸条上，幽门螺杆菌阳性则在接触部位出现深蓝或黑色的反应。

(3) 触酶试验

在载玻片中央滴加1~2 滴3%H2O2溶液，用牙签挑取适量菌落，幽门螺杆菌阳性则立即可见连续气泡产生，反应剧烈形成持久的泡沫。

革兰染色镜检（革兰染液可购买）

(1) 涂片：滴加1 滴生理盐水于洁净的载玻片上，用接种环挑取固体培养上生长的可疑菌落少许，在生理盐水中均匀涂开。

(2) 固定：待水分完全挥干后，在酒精灯火焰处来回通过2~3 次固定标本。

(3) 初染：在玻片上滴加革兰染液1 至覆盖菌膜，染色1min，用自来水缓缓冲掉

染液直至颜色基本退去，沥去水分。结晶紫色染色：将玻片置于废液缸玻片搁架上，加适量（以盖满细菌涂面）的结晶紫染色液染色1分钟。

(4) 媒染：滴加革兰染液2 至覆盖菌膜，染色1min，用自来水缓缓冲掉染液直至

颜色基本退去，沥去水分。滴加卢哥氏碘液，媒染1min。

(5) 脱色：滴加革兰染液3，并轻轻晃动约30s，用自来水缓缓冲掉染液直至颜色

基本退去，沥去水分。连续滴加95%乙醇脱色20—25s至流出液无色，立即水洗。

(6) 复染：滴加革兰染液4，染色1min，用自来水缓缓冲掉染液直至颜色基本退去，用吸水纸吸掉水滴。滴加蕃红复染5min。

幽门螺杆菌检测试剂盒(脲酶法)

幽门螺杆菌检测试剂盒（脲酶法）

使用说明书

【产品名称】

商品称称：幽门螺杆菌检测试剂盒（脲酶法）

【包装规格】50人份/盒或100人份/盒

【预期用途】幽门螺杆菌检测试剂盒（脲酶法）是用于胃粘膜或牙垢中幽门螺杆菌的检测。幽门螺杆菌（Helicobacter Pylori Hp）是通过口腔进入消化道的常见病原菌之一，是导致慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。检测该菌对慢性胃炎，消化性溃疡的诊断，治疗及预防已成为临床需要。

【检测原理】幽门螺杆菌能分泌大量高活性的脲素酶，脲素酶分解基质中脲素，PH值升高，指示剂变色的原理，用来检测胃粘膜组织中或牙垢中的幽门螺杆菌。

【组成成份】

1、反应瓶：50个或100个

2、反应液：1瓶（氯化钠、吐温）

3、标本签：50根或100根

【储存条件及有效期】试剂盒宜阴凉干燥处保存，有效期12个月。

【标本要求】胃镜室用胃镜铗取小块胃粘膜组织或在未进食物之前和未刷牙之前采取绿豆大小量的牙垢，送检。

【检验方法】

1、取反应瓶，打开瓶盖，加入反应液3滴（150ul）振荡反应瓶3-5次，使干粉溶解。

2、用标本签，将新鲜活检胃粘膜组织或牙垢，置于反应瓶内。

3、室温5分钟后，观察结果。

【参考值】

该试剂盒为定性检测试剂盒，以反应瓶液体颜色由黄色转变为红色判断为阳性。用1%脲素酶系列稀释后，脲素酶最低含量为78mg/L时，反应液颜色刚好由黄色转变为红色，脲素酶含量越高，颜色变化越快且深。

【检验结果的解释】

阳性：反应瓶内液体或标本周围呈现浅红色至紫红色判断为阳性；

阴性：反应瓶内液体或标本周围无显色反应判断为阴性。

胃幽门螺杆菌快速检测试剂盒使用说明书

胃幽门螺杆菌快速检测试剂盒使用说明书【产品名称】胃幽门螺杆菌快速检测试剂盒

【包装规格】48 人份/盒,60 人份/盒。

【预期用途】适用于采用胃镜，取胃粘膜的新鲜活检组织，检测胃幽门螺杆菌的感染。【检验原理】胃幽门螺杆菌（Helicobacter pylori ，HP）是导致慢性胃炎和消化性溃疡的重要致病因素，检测该菌再施予针对治疗已成为临床需要。本试剂盒依据胃幽门螺杆菌分泌大量高活性尿素酶的特性，尿素酶分解尿素而产生氨，使pH值升高，致使指示剂变色，根据颜色变化即可快速判定检测结果，为HP所致疾病的正确诊断和有效治疗提供可靠的

4-30 12

1、做胃镜时，取病人病灶的胃粘膜，由于幽门螺杆菌寄居部位的差异，为提高检出率，建议对每个病人多部位胃粘膜取样。

2、由于尿素酶具有活性，胃镜活检粘膜取样后必须立即检测，陈旧或经处理的样本不能使用。

3、取样本时，尽可能避免酸碱类物质、重金属盐类的污染。【检验方法】使用前依当日需检测例数取去底物微孔药条，每孔加入反应液贰滴（100ul ），待药膜完全溶解后，用牙签或洁净镊子将新鲜活检胃粘膜置入药液内，在10℃～30℃条件下孵育5分钟后观察结果。

【参考范围】

采用目测法。衬白纸在自然光线下或40W日光灯下观察各孔内胃粘膜组织边缘药液颜色变化。

1、阴性：粘膜样品孔颜色无显色反应。

2、阳性：粘膜样品孔颜色呈红色～紫红色。【检验结果的解释】

1、环境和样本陈旧可造成酸碱性物质、重金属盐类污染，酸性物质可造成假阴性，重金属盐类使尿素酶失活可造成假阴性，碱性物质可造成假阳性。

幽门螺杆菌染色

【试剂配制】

Wathin-starrg染色液：

①0. 2%mol/L醋酸缓冲液（PH3.6）：

A液92.5ml （醋酸1.2ml，蒸馏水加至100ml）B液7.5ml （无水醋酸钠2.72g，加至蒸馏水100ml）

②1%硝酸银液：

硝酸银1g

0.2mol/L醋酸缓冲液（PH3.6）100ml

③2%硝酸银液：

硝酸银0.2g

0.2mol/L醋酸缓冲液（PH3.6）10ml

④5%明胶液：

明胶5g

0.2mol/L醋酸缓冲液100ml。

此液需要加温35～40℃，不断摇动使之溶解，冷却后

使用。

⑤3%对苯二酚液：

对苯二酚0.3g

0.2mol/L醋酸缓冲液10ml

⑥明胶对苯二酚液：

3%对苯二酚液2ml

5%明胶液30ml（明胶加热后加入对苯二酚液）

⑦显影液：

明胶对苯二酚液16ml

2%硝酸银液3ml

【染色方法】

（1）中性甲醛固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。

（2）0.2mol/L醋酸缓冲液洗2次。

（3）将切片置入1%硝酸银液内1小时左右（温箱56℃）。

（4）直接把切片取出，立即浸入显影液内2～3分钟。

（5）将切片浸入56℃蒸馏水中洗1～2分钟。

（6）蒸馏水洗1次。

（7）无水乙醇脱水，二甲苯透明和中性树胶封固。【结果】胃幽门弯曲菌呈棕黑色或黑色，背景呈淡黄色。

幽门螺旋杆菌金标法

一、幽门螺旋杆菌简介

幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori，HP）是一种革兰氏阴性菌，属于螺旋菌科。它存在于人类胃黏膜表面，并与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌等多种胃部疾病有着密切的关系。

二、金标法原理

金标法是一种常用的HP检测方法，也被称为尿素酶快速测定法（urease rapid test）。其原理是基于HP细菌特有的尿素酶，该酶

可以将尿素分解为二氧化碳和氨。金标试剂中含有一种指示剂，当尿

素被分解后产生的氨使指示剂变色，从而可以判断样本中是否存在HP 细菌。

三、金标法操作步骤

1. 准备样本：取得患者的胃黏膜组织或呼出空气样本。

2. 打开试剂盒：将试剂盒从密封袋中取出，打开包装。

3. 取样：使用采样棒或吸管等工具取得样本。

4. 滴加样本：将采集的样本滴在试剂盒上。

5. 等待反应：等待约10分钟，观察试剂盒上的指示剂是否变色。

6. 判断结果：根据指示剂颜色变化判断样本中是否存在HP细菌。

四、金标法优缺点

1. 优点：

（1）操作简便，快速方便；

（2）对患者无创伤，不需要进行胃镜检查；

（3）准确率较高，可作为初步筛查方法。

2. 缺点：

（1）金标法只能检测到HP的存在与否，不能确定感染程度；（2）可能会出现假阴性或假阳性结果；

（3）金标试剂需要保存在低温下，否则易失效。

五、金标法应用范围

金标法适用于初步筛查HP感染患者，特别是对于不能进行胃镜检查的患者。同时，该方法也可以用于评估治疗效果和复发情况。

六、注意事项

1. 采样前应告知患者相关注意事项，并征得其同意。

2. 采集样本时要避免污染和误差。

幽门螺杆菌抗体检查标准操作规程

幽门螺杆菌抗体检测试剂盒(胶体金法)标准操作规程

1.产品名称:幽门螺杆菌抗体检测试剂盒(胶体金法)

2.包装规格:24人份/盒 48人份/盒

3.预期用途:用于检测试验血清中的幽门螺杆菌抗体(IgM/IgG)

4.检验原理:用幽门螺杆菌抗原固相硝酸纤维素膜，应用渗滤式间接法原理，检测血清中幽门螺杆菌抗体。

5.主要组成成份:

反应板 24份或48份

试剂Ⅰ 1瓶 0.02mol/L PH 7.4 PBS

试剂Ⅱ 1瓶胶体金标记物

6.储存条件及有效期:产品应储存在2℃～8℃条件中，不能冷冻；有效期24个月。

7.样本要求:

血清样品不能溶血，应为新鲜血清或2℃～8℃条件保存不超过一周。

高脂血症血清不能使用。

8.检验方法:

滴入二滴试剂Ⅰ于反应板中央孔中，待完全渗入；

滴入100μl血清于反应板孔中，待完全渗入；

滴加三滴试剂Ⅱ于反应板孔中，待完全渗入；

渗入三滴试剂Ⅰ于反应板孔中，待完全渗入。

9.结果解释:

阳性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端出现红色圆斑，为幽门螺杆菌抗体阳性；阴性：反应板孔中C端出现红色圆斑，T端不出现红色圆斑，为幽门螺杆菌抗体阴性。失效：反应板孔中C端不出现红色圆斑，或C端、T端均不出现红色圆斑，为试剂盒失效。

10.检验方法的局限性:

本试剂试验仅用于检测幽门螺杆菌抗体而非直接检测幽门螺杆菌，因而阳性结果并不能确诊是幽门螺杆菌感染。对患者状况的诊断应结合患者临床体征与症状和试验结果的综合分析。

抗体含量低的血清样品，不能被检测出来是可能的。部份幽门螺杆菌感染的患者，不产生抗体或产生少量的抗体。此时，可能显示阴性结果。

Giemsa染色法

MGG由May-Grunwald染料和Giemsa染料组成。前者化学名为曙红亚甲基蓝Ⅱ，对胞质着色较好；后者对胞核着色较好。因此MGG染色，可兼两者的优点，常用于细胞涂片染色。1．染液配制

I液的配制：迈格染料lg 甲醇100ml 在研钵内用少量纯甲醇将染料充分研磨成均匀一致的悬液，倒人烧瓶中，加入其余的甲醇后置入37℃温箱4-6小时，每隔半小时研磨半小时，然后放入深棕色瓶内，在室温下保存，2周后使用。临用前取上液40ml，加纯甲醇20ml混合用作工作液。Ⅱ液的配制：姬氏染粉0.6g 甘油50ml 甲醇100ml 将姬氏染粉溶于甘油内，在研钵内研磨3-4小时，使之磨匀，加入纯甲醇后搅拌均匀,放入深棕色瓶内，室温下保存，2周后即可使用。磷酸缓冲液配制：1％磷酸氢二钠20ml，l％磷酸二氢钠30ml，加蒸馏水至1000ml，调整pH 6.4-6.8(用蒸馏水代替缓冲液，效果亦佳)。

2．染色步骤

(1)自然干燥的细胞涂片(预先滴加甲醇固定更好)水平置于染色架上。(2)将I液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)滴盖涂片上，lO-30分钟。(3)倒弃涂片上的I液，自来水漂洗干净。(4)立即滴盖Ⅱ液(用缓冲液或蒸馏水5-10倍稀释)在涂片上染色10-30分钟。(5)倒弃涂片上的Ⅱ液，自来水漂洗干净。(6)趁湿加盖片或待干后镜检。

3．染色结果

MGG染色将细胞核染成紫红色，细胞质和核仁染成蓝紫色。

4．MGG染色特点

染色方法简单，且兼有瑞氏、姬氏两种染色的优点，并且涂片可保存十多年而不退色。MGG染色对胞质胞核染色效果均较好，结构清晰，所染细胞亦比HE染色的细胞大；同时对细菌、霉菌及胆固醇结晶的显示也很清楚。因此适用于淋巴造血系统的细胞标本、胸腹水、穿刺标本等。尤其对鉴别恶性淋巴瘤的类型，MGG染色更有帮助。

胃幽门螺旋杆菌感染检测的4种特殊染色方法比较

病，还有１过去曾多次食用芒果无反应而本次发病，这Ｏ例
些现象以接触性皮炎难以解释。是否与不同品种及不同成熟程度的芒果所含抗原成分及其含量、浓度差别有关？是否是受诱发处于致敏状态的致敏肥大细胞和致敏嗜碱粒细胞因个体在数月内不接触相同的变应原而使致敏状态逐渐消失？这些都尚待进一步的研究证实。
＜００，表１。．５）
１１对象：本研究对胃黏膜活检标本采用快速尿．素酶试验（ａｉｒａｅｅｔｒｐｄｕｅｓｓ，ＲＵＴ）和组织学检查ｔ（Ｓ银染法）联合检测ＨＰ，并作为诊断ＨＰ感染ｗ— 的金标准口，２项指标检测均阳性及均阴性的各４］０例胃黏膜活检标本人选本试验。
福建医药杂志２１０１年８月第３３卷第４期
ＦｊｎＭｅ，ｇｓ０１Ｖｏ．３Ｎｏ４ｕｉｄＪＡｕｕｔ２１，１３，．ａ
于立即型接触性皮肤反应，可表现为速发性皮肤发红及风团

幽门螺杆菌培养及鉴定标准操作规程

幽门螺杆菌培养及鉴定标准操作规程幽门螺杆菌培养及药敏

1. 形态与染色

革兰阴性，菌体细长，大小为(0.3-1)微米*(1.5-5)微米，弯曲成螺旋形，S 形，末端成弯曲状，胃黏膜病理切片标本可见螺旋形细菌。电子显微镜下，菌体的一端可伸出2,6条带鞘的鞭毛。

2.培养特性

微需氧，最适气体环境为5%~7%O2，5%~10%CO2，最适温度为36度~37度，25度和42度时均不生长。在加入5%~7%兔或羊血的牛心脑浸液布氏琼脂，哥伦比亚血琼脂，改良Skirrow平板或在Karmali弯曲菌血琼脂平板上分离的阳性率较高，但生长缓慢，应每2日观察一次。菌落细小，针尖状，半透明，不溶血。

3. 感染与致病机理

幽门螺杆菌感染是慢性活动性胃炎、消化性溃疡、胃黏膜相关淋巴组织(MALT) 淋巴瘤和胃癌的主要致病因素。1994年世界卫生组织/国际癌症研究机构

(WHO/IARC) 将幽门螺杆菌定为?类致癌原。幽门螺杆菌进入胃后，借助菌体一侧的鞭毛提供动力穿过黏液层。研究表明，幽门螺杆菌在粘稠的环境下具有极强的运动能力，强动力性是幽门螺杆菌致病的重要因素。幽门螺杆菌到达上皮表面后，通过粘附素，牢牢地与上皮细胞连接在一起，避免随食物一起被胃排空。并分泌过氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶，以保护其不受中性粒细胞的杀伤作用。幽门螺杆菌

富含尿素酶，通过尿素酶水解尿素产生氨，在菌体周围形成“氨云”保护层，以抵抗胃酸的杀灭作用。

4. 生化反应

氧化酶试验阳性，不分解任何糖类，尿素试验强阳性，触酶试验阳性，H2S，马尿酸钠

和硝酸盐还原试验均阴性，25ºC和42ºC时均不生长，对奈啶酸耐药。

人幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)说明书定性

人幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)酶联免疫分析

试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

96T

使用目的：

本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)表达。实验原理

本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中人幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)表达。用纯化的抗原包被微孔板，制成固相抗原，可与样品中幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)相结合，经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的抗原结合，形成抗原-抗体-酶标抗原复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），与CUTOFF值相比较，从而判定标本中幽门螺旋杆菌IgM(HP IgM)的存在与否。

试剂盒组成

130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶

2酶标试剂6ml×1瓶8阳性对照0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9阴性对照0.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份

5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张

6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个

标本要求

1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融

2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

操作步骤

1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1

孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）

幽门螺旋杆菌检测方法和治疗

幽门螺旋杆菌（Helicobacter pylori）是一种常见的细菌，在人类

胃部定居并感染，被认为是引起许多胃疾病的主要原因之一，如慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌。因此，检测和治疗幽门螺旋杆菌感染至关重要。

1.尿素呼气试验（UBT）：这是一种常用的检测方法。它通过让患者

饮用含有尿素的溶液，并在呼气中检测碳14或碳13来评估是否存在幽门

螺旋杆菌感染。如果幽门螺旋杆菌存在，它会分解尿素并产生CO2，因此

可以检测到呼气中的标记物。

2.血清学检测：这是通过检测患者血液中的特定抗体来评估是否感染

幽门螺旋杆菌。这种方法虽然简单，但无法区分当前感染和已经治愈的旧

感染。

3.粪便检测：这种方法通过检测粪便中的幽门螺旋杆菌抗原来评估感

染情况。粪便样本可以在家中收集，然后送到实验室进行检测。这种方法

的优势在于非侵入性，不需要胃镜检查。

4.组织生物学检测：这种检测方法通常需要通过胃镜获取胃组织样本，并在实验室中进行细菌培养或组织学检测，以确定是否存在幽门螺旋杆菌

感染。虽然这种方法比较准确，但它是一种侵入性的检测方式，因此具有

一定的风险和不便。

一旦确诊了幽门螺旋杆菌感染，即可采取相应的治疗方法。目前，常

用的治疗方案通常包括抗生素和质子泵抑制剂（PPI）的联合使用，以消

灭幽门螺旋杆菌感染并减轻相关症状。

常见的抗生素用于治疗幽门螺旋杆菌感染的药物包括克拉霉素、阿莫

西林、甲硝唑和四环素等。质子泵抑制剂通常用于减少胃酸分泌，以提高

抗生素的疗效。治疗时间通常为7到14天不等，具体应根据医生的建议来确定。

百度文库-幽门螺杆菌染色液说明书

广州市外显子生物技术有限公司

幽门螺杆菌染色液

产品说明：

幽门螺杆菌为短杆菌，两端微弯的一种革兰氏阴性杆菌，主要生存于胃黏膜上皮和胃腺体黏液屏障之间，与慢性胃炎、消化性溃疡和胃肿瘤有密切关系。本染色液染色步骤简便，能清晰显示菌体，可大批浸染，为一种理想的HP染色液。

产品组成：

货号产品规格储存条件

S-1543 幽门螺杆菌染色液15ml RT -- 说明书1份

有效期：12 个月。原包装未开封染色液的使用期限为 12 个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后 6 个月内使

用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。实验步骤：

1.切片厚4-5微米，脱蜡至水。

2.幽门螺杆菌染色液染色1-2分钟。

3.水洗。

4.风干后，树胶封片，镜检。

结果判定：幽门螺杆菌蓝色，红细胞绿色，背景蓝色。

幽门螺杆菌说明书A3版

【参考文献】 1.Unidentified curved bacilli on gastric epitheliums in active chronic gastritis. Lancent 1:1273(1983) 2.Morris,A,J., et al. Long term follow-up of voluntary ingestion of Helicobacter pylori. Ann.Intern.Med.114:662(1991). 3.Marshall BJ and Warren JR. Unidentified curved bacilli in the stomach of patents with gastritis and peptic ulceration. Lancet 1:1311 (1984). 4.Dooley CP, et al.Prevalence of Helicobacter pylori infection and histologic gastritis in asymptomaticpersons .NEngl.J.Med.321:1652(1 989). 5.Buck GE,et al. Relation of Campylobacter pyloridis to gastritis and peptic ulcer. J Infect. Dis. 6.Blaster MJ, Helicobacter pylori and the pathogenesis of gastroduodenal inflammation. J Infect. Dis. 161:626 (1900). 7.Graham DY. Campylobacter pylori and pept iculcerdiseseGastroenterol.96(Suppl.2):615(198 9). 8.Blaser MJ, Pathogenesis of Helicobacter pylori-induced gastroduodenal disease. In new antibacterial strategies, Neu,HC(ed).London : Churchill Livingston, pp 143-153. (1990) 9.Siurala M, et al. Chronic gastritis: Dynamic and clinical aspects. ScanJ. Gastroenterol. Suppl.109:69(1985).

人幽门螺旋杆菌IgM(Hp-IgM)说明书定量

10ng/L
2 号标准品
150µl 的 3 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
5ng/L
1 号标准品
150µl 的 2 号标准品加入 150µl 标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样 50µl，待测样品孔中先加样品稀释液 40µl，
10 说明书
1份
5 显色剂 A 液
6ml×1 瓶
11 封板膜
2张
6 显色剂 B 液
6ml×1/瓶
12 密封袋
1个
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
2．不能检测含 NaN3 的样品，因 NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
然后再加待测样品 10µl（样品最终稀释度为 5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置 37℃温育 30 分钟。 4. 配液：将 30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水 30 倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置 30 秒后弃去，如此重复 5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂 50µl，空白孔除外。 7. 温育：操作同 3。 8. 洗涤：操作同 5。 9. 显色：每孔先加入显色剂 A50µl，再加入显色剂 B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 10 分钟. 10. 终止：每孔加终止液 50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后 15 分钟以内进行。操作程序总结：

幽门螺旋杆菌染色液(MGG法)使用说明书

货号:G1930

有效期：24个月有效。

产品组成：

名称2×100ml Storage

试剂(A)A1:May-Grunwald Stain50ml RT避光A2:MG磷酸盐缓冲液50ml RT

取A1、A2等量混合，即为May-Grunwald工作液，不宜预先配制。

试剂(B)B1:Giemsa Stain50ml RT避光B2:Giemsa磷酸盐缓冲液50ml RT

取A1、A2等量混合，即为Giemsa工作液，不宜预先配制。

产品说明：

胃幽门螺杆菌(Helicobacter Pyloric，HP)又称胃幽门弯曲菌(Campylobacter Pyloric)。现已证实这种细菌与慢性胃炎和消化性溃疡有密切关系。胃幽门螺杆菌一般呈弧形、S形或海鸥状，有时可见3～4个弯曲呈螺旋状，常呈鱼群状分布。该菌多见于胃黏膜表面上皮与黏膜层之间，并贴近表面上皮细胞，部分进入上皮细胞胞质内，胃小凹和黏膜浅层腺腔内亦有此菌。幽门螺旋杆菌染色主要有亚甲蓝法、硝酸银法、迈格林华-姬姆萨法(May-Grunwald-Giemsa，MGG法)、碱性品红法等。硝酸银法对比清楚，染片可以长期保存，但操作较为麻烦、耗时。其他方法较为简便，但染片容易褪色。May-Grunwald-Giemsa染色液主要由迈格林华染液和姬姆萨染液组成，染色后胃幽门螺旋杆菌呈蓝色，胶原纤维呈红色，红细胞呈绿色，胃黏膜上皮呈淡蓝色，细胞核呈深蓝色。HP多位于胃黏膜上皮表面的黏液中，特别在胃小凹中数量较多。

自备材料：