芸香苷的提取精制水解和鉴定(共9张PPT)
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第1页，共9页。
• 实验器材：
• 试药：槐花米、0.4%硼砂水溶液、石灰乳、蒸馏水、
浓盐酸、2%硫酸、乙醇、1%氢氧化钠溶液、1%盐酸溶 液、10%α-萘酚溶液、浓硫酸、镁粉、1%醋酸镁甲醇
溶液、正丁醇、醋酸 • 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、
层析筒、试管
第2页，共9页。
实验内容与方法：
第6页，共9页。
• 2．呈色反应 • 取芸香苷和槲皮素约10mg，各用5ml乙醇溶解，制成样品溶
液，按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 • （1）Molish反应 取样品溶液1ml，加10%α-萘酚溶液1ml，振摇
后斜置试管，沿管壁滴加浓硫酸，静置，观察并记录液面交界处颜 色变化。
实验内容与方法：
1%氢氧化钠
溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶解成为黄色澄明溶液，然 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管
实验二 芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
（2）盐酸镁粉反应 芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管中，加入金属镁粉少许，浓盐酸2~3滴，观察并记录颜色变化。
后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄 （3）醋酸镁纸片反应 取两张滤纸条，分别滴两滴芸香苷、槲皮素的乙醇溶液，然后各加1%醋酸镁甲醇溶液两滴，于紫外灯下观察荧光变
取槐花米20g（ห้องสมุดไป่ตู้碎），置于1000ml圆底烧瓶中，加0.
渣同上重复一次。合并滤液用6N盐酸调 PH2~3，放置冰 实验注意事项
（2）盐酸镁粉反应 芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管中，加入金属镁粉少许，浓盐酸2~3滴，观察并记录颜色变化。
箱中析晶（一夜以上），待全部结晶析出，抽滤，得 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加2%H2SO4溶液80ml，加热回流30分钟至1小时，开始加热10分钟为澄清液，逐渐析出黄色小针
解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰 箱中冷冻一定时间后再观察）。 取芸香苷和槲皮素约10mg，各用5ml乙醇溶解，制成样品溶液，按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶 解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰 箱中冷冻一定时间后再观察）。 黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。 黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加2%H2SO4溶液80ml，加热回流30分钟至1小时，开始加热10分钟为澄清液，逐渐析出黄色小针 状结晶，即为槲皮素。
状结晶，即为槲皮素。 必要时可用稀乙醇重结晶。
粗芸香苷（滤饼用水洗3~4次），放置空气中自然干燥 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管 得粗品，称重、计算提取率。 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶
第3页，共9页。
实验内容与方法： • 二、芸香苷的精制 • 取2g加蒸馏水400ml，加热煮沸溶解，趁热抽
滤，滤液放置过夜，析晶，抽滤，得精制芸香 甙。烘干。
第4页，共9页。
实验内容与方法：
• 三、芸香苷的水解
• 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加2%H2SO4 溶液80ml，加热回流30分钟至1小时，开始加热10分
箱中冷冻一定时间后再观察）。
展开剂：正丁醇∶醋酸∶水（4∶1∶5）上层溶液
实验内容与方法：
仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管
展开剂：正丁醇∶醋酸∶水（4∶1∶5）上层溶液
实验内容与方法：
实验二 芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
并利用芸香苷对冷水和热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
实验二 芸香苷的提取、精制、水 解和鉴定
实验原理：
1.芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，在 碱水中成盐增大溶解能力，用碱水为溶剂煮 沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芸 香苷而析出。并利用芸香苷对冷水和热水的 溶解度相差悬殊的特性进行精制。
2.黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通 过薄层色谱法进行检识。
• 一、芸香苷的提取 酸化时PH不可过低，否则会使芸香苷形成样盐而降低产率。
取槐花米20g（研碎），置于1000ml圆底烧瓶中，加0. 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶
• 取槐花米20g（研碎），置于1000ml圆底烧瓶中，加 解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰 0.4%硼砂水溶液200ml，在搅拌下加石灰乳调PH8，加热 箱中冷冻一定时间后再观察）。 微沸30分钟，静置几分钟倾出上清液，用棉花过滤，药 黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。
化，记录现象。
明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或 （2）喷洒三氯化铝试剂后再观察斑点的变化
1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶
放置冰箱中冷冻一定时间后再观察）。 解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰
钟为澄清液，逐渐析出黄色小针状结晶，即为槲皮素。 放冷抽滤得结晶，滤液保留作为糖的检查，沉淀物用 蒸馏水洗至中性，抽干水份，晾干称重，得粗制槲皮 素。必要时可用稀乙醇重结晶。
第5页，共9页。
• 四、芸香苷的检识反应
• 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏
，振摇，观察试管有无变化，滴加 水2ml 酸化时PH不可过低，否则会使芸香苷形成样盐而降低产率。
• 实验器材：
• 试药：槐花米、0.4%硼砂水溶液、石灰乳、蒸馏水、
浓盐酸、2%硫酸、乙醇、1%氢氧化钠溶液、1%盐酸溶 液、10%α-萘酚溶液、浓硫酸、镁粉、1%醋酸镁甲醇
溶液、正丁醇、醋酸 • 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、
层析筒、试管
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实验内容与方法：
第6页，共9页。
• 2．呈色反应 • 取芸香苷和槲皮素约10mg，各用5ml乙醇溶解，制成样品溶
液，按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 • （1）Molish反应 取样品溶液1ml，加10%α-萘酚溶液1ml，振摇
后斜置试管，沿管壁滴加浓硫酸，静置，观察并记录液面交界处颜 色变化。
实验内容与方法：
1%氢氧化钠
溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶解成为黄色澄明溶液，然 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管
实验二 芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
（2）盐酸镁粉反应 芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管中，加入金属镁粉少许，浓盐酸2~3滴，观察并记录颜色变化。
后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄 （3）醋酸镁纸片反应 取两张滤纸条，分别滴两滴芸香苷、槲皮素的乙醇溶液，然后各加1%醋酸镁甲醇溶液两滴，于紫外灯下观察荧光变
取槐花米20g（ห้องสมุดไป่ตู้碎），置于1000ml圆底烧瓶中，加0.
渣同上重复一次。合并滤液用6N盐酸调 PH2~3，放置冰 实验注意事项
（2）盐酸镁粉反应 芸香甙与槲皮素溶液分别置于试管中，加入金属镁粉少许，浓盐酸2~3滴，观察并记录颜色变化。
箱中析晶（一夜以上），待全部结晶析出，抽滤，得 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加2%H2SO4溶液80ml，加热回流30分钟至1小时，开始加热10分钟为澄清液，逐渐析出黄色小针
解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰 箱中冷冻一定时间后再观察）。 取芸香苷和槲皮素约10mg，各用5ml乙醇溶解，制成样品溶液，按下列方法进行试验，比较苷元和苷的反应情况。 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶 解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰 箱中冷冻一定时间后再观察）。 黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。 黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加2%H2SO4溶液80ml，加热回流30分钟至1小时，开始加热10分钟为澄清液，逐渐析出黄色小针 状结晶，即为槲皮素。
状结晶，即为槲皮素。 必要时可用稀乙醇重结晶。
粗芸香苷（滤饼用水洗3~4次），放置空气中自然干燥 仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管 得粗品，称重、计算提取率。 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶
第3页，共9页。
实验内容与方法： • 二、芸香苷的精制 • 取2g加蒸馏水400ml，加热煮沸溶解，趁热抽
滤，滤液放置过夜，析晶，抽滤，得精制芸香 甙。烘干。
第4页，共9页。
实验内容与方法：
• 三、芸香苷的水解
• 取精制芸香甙1g，置250ml圆底烧瓶中，加2%H2SO4 溶液80ml，加热回流30分钟至1小时，开始加热10分
箱中冷冻一定时间后再观察）。
展开剂：正丁醇∶醋酸∶水（4∶1∶5）上层溶液
实验内容与方法：
仪器：电炉、漏斗、紫外分析仪、锥形瓶、量筒、烧杯、层析筒、试管
展开剂：正丁醇∶醋酸∶水（4∶1∶5）上层溶液
实验内容与方法：
实验二 芸香苷的提取、精制、水解和鉴定
并利用芸香苷对冷水和热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制。
实验二 芸香苷的提取、精制、水 解和鉴定
实验原理：
1.芸香苷分子中具有酚羟基，显弱酸性，在 碱水中成盐增大溶解能力，用碱水为溶剂煮 沸提取，提取液加酸酸化后又成为游离的芸 香苷而析出。并利用芸香苷对冷水和热水的 溶解度相差悬殊的特性进行精制。
2.黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通 过薄层色谱法进行检识。
• 一、芸香苷的提取 酸化时PH不可过低，否则会使芸香苷形成样盐而降低产率。
取槐花米20g（研碎），置于1000ml圆底烧瓶中，加0. 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶
• 取槐花米20g（研碎），置于1000ml圆底烧瓶中，加 解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰 0.4%硼砂水溶液200ml，在搅拌下加石灰乳调PH8，加热 箱中冷冻一定时间后再观察）。 微沸30分钟，静置几分钟倾出上清液，用棉花过滤，药 黄酮苷可通过酸水解得到苷元和糖，并可通过薄层色谱法进行检识。
化，记录现象。
明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或 （2）喷洒三氯化铝试剂后再观察斑点的变化
1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏水2ml，振摇，观察试管有无变化，滴加1%氢氧化钠溶液数滴，振摇使芸香甙全部溶
放置冰箱中冷冻一定时间后再观察）。 解成为黄色澄明溶液，然后再滴加1%盐酸溶液数滴至成酸性反应，溶液则由澄明转为混浊状态（若当时不出现混浊时可放置片刻或放置冰
钟为澄清液，逐渐析出黄色小针状结晶，即为槲皮素。 放冷抽滤得结晶，滤液保留作为糖的检查，沉淀物用 蒸馏水洗至中性，抽干水份，晾干称重，得粗制槲皮 素。必要时可用稀乙醇重结晶。
第5页，共9页。
• 四、芸香苷的检识反应
• 1．成盐反应 取芸香甙10mg左右，置试管中加蒸馏
，振摇，观察试管有无变化，滴加 水2ml 酸化时PH不可过低，否则会使芸香苷形成样盐而降低产率。