色谱柱技术
色谱柱原理
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色谱柱原理是一种用于分离有机化合物的技术,在这种技术中,使用了一种叫做“色谱柱”的装置。
色谱柱是一种特殊的填充材料,它将有机化合物混合物形式的溶剂分离出来。
在色谱柱中,有机溶剂以液体或气体的形式进入,然后在色谱柱的另一端排出。
色谱柱的基本原理是,溶剂的分子彼此夹持,而不同的分子间有着不同的结合能力,这就决定了溶剂分子在色谱柱中以不同的速度移动。
当溶剂分子被色谱柱的填充材料吸引时,它们会减慢移动的速度,从而实现分离。
色谱柱是由一种叫做“色谱柱材料”的填充物和一个叫做“底管柱”的容器组成的。
色谱柱材料是由一种叫做“黏土”的粒子组成的,这种粒子具有吸引和分离有机分子的特性。
底管柱是一个用于容纳色谱柱材料的容器,它的顶部装有一个叫做“收集头”的装置,用于收集分离出来的有机分子。
色谱柱技术在化学分析、生物学分析、环境分析、生物技术等科学领域中有着广泛的应用。
它可以快速、有效地分离有机物质,以及它们的各种组分,从而为后续的化学反应提供良好的条件。
色谱柱的使用对于色谱分析、基因检测、生物分离及其他生物分析技术的研究和应用都有着重要的意义。
化学分析中的柱色谱法基础知识
![化学分析中的柱色谱法基础知识](https://img.taocdn.com/s3/m/b8f979bbcd22bcd126fff705cc17552707225e16.png)
化学分析中的柱色谱法基础知识柱色谱法是化学分析的基础技术之一,其广泛应用于分离、分析、净化、提纯等领域。
柱色谱法最早应用于有机化学中,主要用于分离各种有机物。
但随着仪器技术的不断升级,柱色谱法已经可以应用于各种领域,包括无机分析、生化分析、环境分析、食品分析等。
柱色谱法的基本原理柱色谱法主要利用物质分子在不同站点处所受的吸附作用差异,来完成分离、分析等任务。
通俗地说,柱色谱法就像是在不同人群中找到不同特征的一样,将不同的物质分开。
整个柱色谱法的过程主要包括三个步骤:样品进样、分离、检测。
其具体过程如下:1、样品进样:将待分离样品注入到柱子中,并通过色谱柱使样品分离。
2、分离:根据不同物质所受吸附作用的差异,在色谱柱中完成不同物质的分离。
3、检测:通过检测器,对分离出来的物质进行鉴定和定量。
柱色谱法的色谱柱柱色谱法的柱子是柱色谱法的核心部件,柱子的质量和种类对整个柱色谱法都至关重要。
目前常用的柱子有液相色谱柱(Liquid Chromatography Column)和气相色谱柱(Gas Chromatography Column)。
在柱子中,分离物质被分子筛分离,根据色谱柱的不同材料、填充物和分子筛分子的大小,可以分为多种柱子,如反相柱、离子柱、手性柱等等。
不同的柱子适用于不同的分离对象和条件,选用合适的柱子能够明显提高柱色谱法的分析效果。
柱色谱法的应用柱色谱法技术的应用领域十分广泛,可用于制药、食品、环境和生物等行业中的质量控制和检验检疫。
以下是柱色谱法的常见应用领域:1、制药工业中,利用反相柱对药物混合物进行消杂,提纯或分离开来。
2、食品工业中,用于检测食品中的添加剂、色素、香料等成分,以及检测食品中的农药残留。
3、环境监测领域,用于污染物检测和土壤分析等。
4、生物科学领域中,利用手性柱分离和分析手性化合物、蛋白质等。
总之,柱色谱法是化学分析领域中最为重要的技术之一,它能够通过选择合适的柱子,分离出不同的化合物和成分,进而实现分析和定量等任务。
凝胶色谱柱分离原理
![凝胶色谱柱分离原理](https://img.taocdn.com/s3/m/dd9a0705590216fc700abb68a98271fe910eaf0a.png)
凝胶色谱柱分离原理凝胶色谱柱是一种常用的分离技术,可以用于分离不同尺寸、形状、电荷和极性的分子。
本文将详细介绍凝胶色谱柱分离原理及其在分子分离中的应用。
一、分子尺寸分离凝胶色谱柱的分离原理之一是依据分子尺寸的不同进行分离。
这种分离方法基于分子尺寸大小差异,通过具有不同孔径的凝胶颗粒组成的色谱柱,不同大小的分子会以不同的速度通过色谱柱,从而实现分离。
凝胶颗粒具有均匀的孔径,小分子可以快速通过凝胶颗粒的孔隙,而大分子则会被延迟。
因此,不同大小的分子会在色谱柱中以不同的速度移动,最终实现分离。
这种分离方法特别适用于分离蛋白质、多肽和其他大分子化合物。
二、分子形状分离除了分子尺寸,凝胶色谱柱还可以根据分子形状的不同进行分离。
有些分子具有特定的形状,例如蛋白质的二级结构如α-螺旋和β-折叠。
这些不同的形状会导致分子在通过凝胶色谱柱时的速度不同,从而实现分离。
三、分子电荷分离另一种基于凝胶色谱柱的分离原理是分子电荷的不同。
具有不同电荷的分子在通过带电的凝胶颗粒时受到的排斥或吸引作用不同,从而导致它们以不同的速度通过色谱柱。
这种分离方法特别适用于分离具有不同电荷状态的同一种蛋白质。
四、分子极性分离凝胶色谱柱还可以根据分子极性的不同进行分离。
极性分子和非极性分子在通过凝胶颗粒时的行为有所不同。
极性分子更容易与带电的凝胶颗粒相互作用,因此移动速度较慢;而非极性分子则不受这种相互作用的影响,因此移动速度较快。
这种分离方法可以用于分离具有不同极性的化合物或化合物群。
五、温度影响分离温度也是影响凝胶色谱柱分离效果的一个重要因素。
随着温度的变化,凝胶颗粒的孔径和带电状态可能会发生变化,从而影响分子的移动速度。
因此,调整温度可以改变分离效果,使我们在不同条件下获得更好的分离效果。
结论:凝胶色谱柱是一种强大的分离工具,可以根据分子尺寸、形状、电荷和极性的差异进行分离。
通过理解这些原理并适当调整实验条件,我们可以利用凝胶色谱柱在生物制药、蛋白质组学、化学分析等领域中进行高效的分离和纯化工作。
高效液相色谱柱
![高效液相色谱柱](https://img.taocdn.com/s3/m/806a722c26d3240c844769eae009581b6bd9bd38.png)
高效液相色谱柱高效液相色谱柱是一种在分析化学领域中广泛使用的技术。
它的原理是通过溶液在色谱柱中的流动过程中,对溶质进行分离和纯化。
高效液相色谱柱的优点是分析速度快、分离效果好、操作简便等。
本文将介绍高效液相色谱柱的原理、种类、应用以及未来的发展趋势等内容。
高效液相色谱柱的原理主要包括固定相和移动相两个基本要素。
固定相负责分离溶质,常用的固定相有疏水相、离子相、亲合相等。
移动相则是将溶质带动在柱子中流动的溶剂,通常是有机溶剂和水的混合物。
这样,在溶液在色谱柱中流动过程中,不同溶质会在固定相的作用下发生分离,从而实现对混合物的分析和纯化。
高效液相色谱柱根据固定相的不同可以分为几种不同的类型。
例如,疏水相色谱柱广泛应用于有机物的分离和分析,它的固定相表面通常具有疏水性,可以对有机物进行选择性的吸附和分离。
离子相色谱柱则适用于进行离子化合物的分离和分析,例如酸和碱等。
亲合相色谱柱主要是基于生物大分子与其他化合物之间的生物亲和性进行分析。
高效液相色谱柱在实际应用中有着广泛的用途。
在生命科学研究领域,高效液相色谱柱可以用于对蛋白质、核酸等生物大分子的分离和纯化。
在药物分析领域,高效液相色谱柱经常被用于药物的纯化和质量控制。
在环境监测方面,高效液相色谱柱可以用于对环境污染物的检测和分析。
此外,高效液相色谱柱还被广泛应用于食品安全、农药残留检测、天然产物分析等领域。
随着科学技术的不断进步,高效液相色谱柱也在不断发展和完善。
目前,研究人员正在努力提高高效液相色谱柱的分离效率和分离速度,使其更加适用于复杂物质的分离和分析。
同时,也在研发新的固定相和移动相,以满足不同类型化合物的分析需求。
此外,一些新的检测技术和装置也被引入到高效液相色谱柱中,提高对溶质的灵敏度和准确性。
总之,高效液相色谱柱是一种重要的分析技术,具有广泛的应用前景和发展空间。
它在生命科学、药物分析、环境监测等领域都有着重要的作用。
随着科学技术的不断进步,相信高效液相色谱柱在未来会发展出更多的新技术和新应用,为我们的科研和生产提供更多的支持和帮助。
分子排阻色谱柱类型
![分子排阻色谱柱类型](https://img.taocdn.com/s3/m/ed779b6ecdbff121dd36a32d7375a417876fc14d.png)
分子排阻色谱柱类型
分子排阻色谱是一种常用的色谱技术,用于分离和分析生物大
分子,例如蛋白质、多肽和核酸。
在分子排阻色谱中,色谱柱的选
择至关重要,不同类型的色谱柱适用于不同的分子分离和分析需求。
1. 凝胶过滤色谱柱。
凝胶过滤色谱柱是一种常见的分子排阻色谱柱类型,通常用于
分离蛋白质和多肽。
这种色谱柱由多孔的凝胶材料构成,大分子可
以通过凝胶孔隙,而小分子则无法进入孔隙,因此实现了大分子和
小分子的分离。
凝胶过滤色谱柱适用于分子量在10 kDa以上的生物
大分子的分离。
2. 超高效液相色谱柱(UHPLC)。
UHPLC色谱柱是一种高效的分子排阻色谱柱类型,适用于分离
小分子有机化合物和生物大分子。
UHPLC色谱柱具有更小的颗粒大
小和更高的压力耐受能力,因此能够提供更高的分离效率和分辨率。
对于分析复杂样品和需要高灵敏度的分析,UHPLC色谱柱是一个理
想的选择。
3. 反相色谱柱。
虽然反相色谱主要用于亲脂性化合物的分离,但也可以用于一
些生物大分子的分离,例如脂质类分子和蛋白质。
反相色谱柱对于
一些疏水性的生物大分子具有一定的排阻效果,因此在特定情况下
也可以作为分子排阻色谱柱来使用。
总之,选择合适的分子排阻色谱柱类型对于分子的分离和分析
至关重要。
不同类型的色谱柱都有其特定的应用领域和优势,科学
家们需要根据具体分析需求来选择合适的色谱柱类型,以获得准确、可靠的分析结果。
innowax色谱柱工艺
![innowax色谱柱工艺](https://img.taocdn.com/s3/m/ef4fa04117fc700abb68a98271fe910ef12daee8.png)
innowax色谱柱工艺摘要本文档介绍了in no wa x色谱柱的工艺,包括其定义、特点、应用领域以及使用注意事项等内容。
通过对in no wa x色谱柱工艺的全面了解,读者可以更好地利用该技术进行实验和研究。
1.引言i n no wa x色谱柱是一种常用的分离技术,在许多领域都有广泛的应用。
本文将介绍该色谱柱的工艺,包括使用方法、优势以及注意事项。
2.定义i n no wa x色谱柱是一种针对挥发性有机物(VO Cs)的色谱柱,其固定相是聚醚硅烷。
它广泛用于食品、环境和化学分析等领域中对V OC s进行分离和鉴定的研究。
3.特点i n no wa x色谱柱具有以下特点:-高分离效能:i nn ow a x色谱柱能够有效分离并鉴定复杂的挥发性有机物混合物。
-良好的耐热性:该色谱柱能够耐受高温,适用于高温条件下的分析。
-广泛的应用领域:i n no wa x色谱柱适用于食品、环境、化学等多个领域的挥发性有机物分析。
-稳定性:该色谱柱具有较好的稳定性和重复性,可重复使用。
4.应用领域i n no wa x色谱柱广泛应用于以下领域:-食品分析:可以用于检测食品中的挥发性有机物,如香料、酒精等。
-环境分析:用于环境样品中有机物的分析,如空气中的挥发性有机物。
-化学研究:常用于有机物的分离、鉴定和定量分析。
5.使用注意事项在使用i nn ow ax色谱柱时,需要注意以下事项:-样品制备:应合理选择样品制备方法,避免样品中的杂质和不挥发物对分离的影响。
-柱温控制:根据样品的特点和需要,调整色谱柱的温度,以实现最佳的分离效果。
-流速控制:应根据实验要求和样品的复杂程度选择适当的流速,以保证分离的准确性和稳定性。
-校正方法:使用标准品进行柱效校正,以确保结果的准确性和可靠性。
-安全使用:在操作过程中,要注意个人安全,严格遵守实验室操作规范。
结论本文对i nn ow ax色谱柱工艺进行了全面介绍,包括定义、特点、应用领域以及注意事项等内容。
色谱柱在中国药典二部的应用
![色谱柱在中国药典二部的应用](https://img.taocdn.com/s3/m/ade65c62a4e9856a561252d380eb6294dc88224f.png)
色谱柱在中国药典二部的应用
色谱柱在中国药典二部的应用非常广泛。
色谱柱是一种分离和分析技术,主要用于药品的质量控制和杂质检测。
在中国药典二部中,色谱柱的应用涵盖了多个章节,包括性状检查、鉴别、含量测定等。
1.性状检查:色谱柱可用于检查药品的物理性状,如粒度、颜色、气味等。
通过色谱柱分离样品,可以观察到不同成分的相对含量和分布,从而判断药品的质量和纯度。
2.鉴别:色谱柱可用于鉴别药品中的成分。
通过色谱柱分离样品,结合不同成分的保留时间、峰形等信息,可以判断药品中是否存在特定成分,从而实现鉴别目的。
3.含量测定:色谱柱可用于测定药品中特定成分的含量。
通过色谱柱分离样品,测量目标成分的峰面积或峰高,结合标准品对照,可以计算出药品中特定成分的含量。
4.有关物质检查:色谱柱可用于检查药品中存在的有关物质。
通过色谱柱分离样品,可以检测药品中可能存在的杂质、降解产物等,以确保药品的纯度和安全性。
5.残留溶剂检查:色谱柱可用于检查药品中残留的溶剂。
通过色谱柱分离样品,可以检测药品生产过程中使用的溶剂种类和含量,以评估药品的质量和安全性。
6.生物制品检测:色谱柱在生物制品的检测中也发挥着重要作
用。
例如,在疫苗检测中,色谱柱可用于分离和检测疫苗中的抗原蛋白、防腐剂等成分。
总之,色谱柱在中国药典二部的应用十分广泛,对药品的质量控制和安全性评估具有重要意义。
在实际应用中,根据不同药品的特性和需求,选择合适的色谱柱和检测方法,有助于确保药品的质量和疗效。
色谱柱实验报告
![色谱柱实验报告](https://img.taocdn.com/s3/m/c55a121c302b3169a45177232f60ddccda38e69e.png)
色谱柱实验报告
《色谱柱实验报告》
实验目的:通过色谱柱分离技术,分离和纯化混合物中的化合物。
实验原理:色谱柱是一种用于分离混合物中化合物的技术。
它利用化合物在固定相和流动相之间的不同亲和力来分离它们。
当混合物通过色谱柱时,化合物将以不同的速度移动,从而实现分离。
实验步骤:
1. 准备色谱柱和流动相。
2. 将混合物溶解在流动相中,并注入色谱柱。
3. 通过控制流动相的速度,使化合物逐个从色谱柱中分离出来。
4. 收集每个化合物的洗脱液,并进行进一步的分析和纯化。
实验结果:经过色谱柱分离,混合物中的化合物被成功分离出来,并且得到了纯化的化合物。
实验结论:色谱柱分离技术是一种有效的分离和纯化化合物的方法,可以广泛应用于化学、生物、药物等领域。
实验总结:通过本次实验,我们深入了解了色谱柱分离技术的原理和应用,为今后的科研工作积累了经验和知识。
通过本次实验报告,我们了解了色谱柱实验的基本原理、步骤、结果和结论,以及对实验的总结和展望。
希望本次实验报告能对读者有所帮助,也希望能够进一步探索色谱柱分离技术的更多应用领域。
色谱柱技术
![色谱柱技术](https://img.taocdn.com/s3/m/e790de6127d3240c8447efef.png)
一柱子上的分配系数之比,分配系数越大,表示该溶质在柱子上的保留越强。由于α = κ A ,
B
κ
′ ′ VRA = κΑ VS ; VRB = κΒ VS ,所以α =
κΑ V′ RA
κΒ V′ RB
=
.分离因子与柱子的其它参数无关,仅取决于溶质在
两相中的分配系数及温度。 4.死体积 V0 通常认为,在柱中不保留的组分或是杂质的峰,他所需的的流动相的体积即能代表死体积, 一般可用硝酸钠、硝普钠、硫代硫酸钠和硅胶来测定死体积。一根运行中的色谱柱内部体积 由流动相体积、固定相体积和载体体积三部分组成,即VC = Vm + Vs + Vsi 。结果显示,在色 谱柱中,流动相占柱内总体积约 68%,在流动相体积中,粒间隙体积约占 2/3,孔内体积约 占 1/3;在间隙中真正流动的流动相占总间隙体积的 2/3 左右。因此柱中的流动相仅有 50% 是流动的,而余下的,孔内及粒子间隙中接近粒子接触点的流动相是静止的。由此就可见, 色谱柱中的流动相处于很复杂的状态,柱子的死体积很难简单的统一的加以处理。 5.色谱峰的对称性 一般假设色谱峰服从高斯分布,都应呈现对称的峰形。但实际却经常出现拖尾峰或是“伸舌 头峰” ,不对称峰的出现,意味着溶质普带在柱床中移动速度的不均匀。假设谱带移动速度 为 Z,则Z = t = V = V
m
VLeabharlann 为溶质的分配系数。则有k =
V′
ΚVs Vm
,由于 Vr′=KVs,Vm(流动相的体积)=V0(死体积)-Ve
(柱外体积) ,则有k = V r ;实际测量中,保留因子 k 是指某一溶质峰值至死体积之间的距
0
离除以死点至原点的距离,其前提条件是柱外体积必须足够小。 3.分离因子α 分离因子α用来描述两种不同溶质在柱子中的分离过程,故分离因子被定义为两种溶质在同
色谱柱技术-第一章
![色谱柱技术-第一章](https://img.taocdn.com/s3/m/3c80d6e8b8f67c1cfad6b869.png)
第一章: 色谱柱理论概要色谱,是一种现代分离、分析方法,也是一种研究物理、化学过程的很好的工具。
任何两种不同的物质,只要它们存在有不同的物理、化学或生物学性质上的差异,而且还表现于在不同物相上分配系数的差异的话,它们便都可以在色谱过程中得到分离、分析或测定。
这里,所谓不同的物相可以包括气相、液相、固相和超临界相。
不同物相的配合,可以得到不同的色谱类型,如气相色谱系以气相为流动相,以固相或载有液相的固体为固定相进行物质的分离;液相色谱则是以液体为流动相,以广义的固相为固定相而进行分离的。
通常,均将固定相装填于柱子中,即以色谱柱的形式进行工作。
因此,色谱柱是进行色谱分离的主要场所。
人们常将其比喻为色谱仪的心脏,这是很恰当的。
发生在色谱柱中的分离过程,受热力学因素和动力学因素的控制。
为得到满意的分离,首先必须考虑固定相的性质及其与溶质相互作用的强弱,这主要体现在色谱柱填料的设计、合成及选择上。
为使分离的谱带展宽尽可能的小,就需要对柱子进行优化设计并将填料填充成性能优良的柱子。
同时由于流动相的种类与使用条件既可影响动力学因素,又影响热力学因素,故必须正确的选择并优化色谱条件。
在色谱柱确定后,主要是选择流动相、淋洗及各种参数。
上述这些问题,都涉及到色谱的基本理论。
色谱技术的理论基础可以大致归纳为色谱热力学和色谱动力学两大部分。
色谱热力学的问题,将在各具体色谱模式内加以探讨。
这里,拟主要讨论色谱动力学的几个问题。
在色谱理论发展的早期,主要是借用了化工原理上的塔板的概念,形成了平衡分配的塔板理论。
尔后,又针对塔板理论的不足,逐步建立并完善了速率理论。
目前,这两种理论模型仍然为广大色谱工作者所接受和使用,且它们具有某种互补性。
这里,拟省略去繁琐的数学推导,也尽量避免难于理解的概念,以比较易于理解的方式,将塔板和速度理论的主要内容及其在色谱柱的设计、选择与使用方面的一些基本问题,进行介绍和讨论。
[G1-G4]第一节色谱的塔板理论一、塔板理论要点(一) 色谱峰及色谱参数假设有两个溶质A和B,将它们注射进色谱柱后,便会在流动相的携带下通过色谱柱并获得分离。
UPLC色谱柱技术介绍
![UPLC色谱柱技术介绍](https://img.taocdn.com/s3/m/898ee46759fb770bf78a6529647d27284a733752.png)
UPLC色谱柱技术介绍UPLC(Ultra Performance Liquid Chromatography)是高效液相色谱技术的一种改进版本,它采用更小的颗粒尺寸和更高的流速,以提高分离效率和样品分析速度。
UPLC色谱柱是UPLC系统中的核心组成部分,起着关键的作用。
本文将介绍UPLC色谱柱的技术原理、分类,以及在各个领域的应用。
一、UPLC色谱柱的技术原理UPLC色谱柱的技术原理与传统的液相色谱柱类似,都是利用样品分子在固定相上的相互作用,使其在流动相中发生分离。
但是UPLC色谱柱使用更小的超高压液相色谱柱,颗粒尺寸通常在1.7-2.5微米之间,而传统的液相色谱柱颗粒尺寸通常在5-10微米之间。
此外,UPLC系统使用更高的流速,通常在0.2-1.0mL/min,而传统的液相色谱系统流速通常在1-2mL/min。
二、UPLC色谱柱的分类根据不同的色谱柱填充材料,UPLC色谱柱可分为以下几种类型。
1.反相色谱柱(RP)反相色谱柱使用疏水性纯化填料,如C18,C8或C4等,常用于生物、药物等复杂样品的分离。
其原理是通过样品分子与填料上的疏水性相互作用,实现分离。
2.正相色谱柱(NP)正相色谱柱使用亲水性纯化填料,如二氧化硅或硅胶等,常用于分析极性化合物,如氨基酸、酸碱中草药等。
3.离子交换色谱柱(IEC)离子交换色谱柱根据样品中的带电物质与填充材料的离子交换作用分离物质。
这种色谱柱常用于对有机酸、无机阳离子和阴离子的分析。
4.大孔色谱柱(SEC)大孔色谱柱用于分离较大的生物分子,如蛋白质、多肽等。
大孔色谱柱具有较大的孔径和相应的填充材料,以便样品分子可以在孔道中快速穿透。
三、UPLC色谱柱的应用1.制药领域在药物开发和质量控制中,UPLC色谱柱能够快速高效地分离和分析药物成分。
同时,UPLC系统还可与质谱联用,实现对复杂样品的同时定性和定量分析。
2.食品安全领域3.环境监测领域4.生物医学研究领域总结:。
色谱柱的性能 色谱柱技术指标
![色谱柱的性能 色谱柱技术指标](https://img.taocdn.com/s3/m/054a295ea55177232f60ddccda38376baf1fe0c9.png)
色谱柱的性能色谱柱技术指标色谱柱的性能与液相色谱柱的性能相关的因素很多,基质(matrix)或者说担体、载体的化学性质、键合相(固定液)的化学性质、填料形状大小粒度分布、碳量和键合度等等。
色谱柱填料可以由基质直接构成,如硅胶、氧化铝、高交联度的苯乙烯—二乙烯苯或者甲基丙烯酸酯等等;也可以在这些基质的基础上涂布或化学键合固定液来构成,如:较为经典的各种ODS柱、氨基柱、氰基柱等。
一、基质的特点:1、硅胶硅胶是陶瓷性质的无机物基质,刚性大,不易变形。
化学性质较稳定,但对于水溶液尤其碱性水溶液仍旧是不稳定的,即使表面经过良好的化学键合,覆盖了固定液,还是要注意水、碱性溶液、酸性溶液对硅胶的溶解作用,基质或者说是柱床(packed bed)溶解对色谱柱的影响是致命的。
以硅胶为基质的填料构成了目前绝大多数的色谱柱填料。
纯硅胶填料适合分别溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,硅胶也可以做凝胶色谱但柱效较低。
硅胶基质键合固定相的高压液相填料,有其他填料无法比拟的高分别效能。
2、二氧化铝二氧化铝和硅胶相像,但对水溶液、酸性碱性水溶液溶液更加不稳定。
所以,极少用作键合固定相的基质,也是适合分别溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,尤其是分别芳香族碳氢化合物。
酸性易离解的化合物简单在二氧化铝上形成死吸附。
另外,氧化铝分别几何异构体本领优于硅胶。
3、聚合物填料聚合物基质受压会变形,压力限度低但pH使用范围宽。
苯乙烯—二乙烯苯基质疏水性强,使用任何流动相,在整个pH范围内稳定,可以用强酸、强碱来清洗色谱柱。
甲基丙烯酸酯基质比苯乙烯—二乙烯苯疏水性更强,但可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。
由于不耐压、有溶胀性,所以聚合物填料适合用于大分子像蛋白质或合成的高聚物,另外还可以制成分子排阻、离子交换柱。
近年进展快速的大孔树脂,实际上主体就是苯乙烯—二乙烯苯聚合物或仿佛的合成高聚物。
由于硅胶基质的确定地位,以下紧要以硅胶为例。
色谱柱分离技术的研究与应用
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色谱柱分离技术的研究与应用第一章:引言色谱柱分离技术是化学分析中最为常用的一种技术之一。
它可以将混合物中的各种化合物分离开来,然后进行检测和分析。
在医学、生命科学、食品检测等领域中,色谱柱分离技术已经得到了广泛的应用。
在本文中,我们将详细探讨色谱柱分离技术的研究与应用,以期对该技术的理解和运用有更深入的认识。
第二章:色谱柱分离技术的原理色谱柱分离技术源于分子分配平衡原理,即化合物在两相间不断分配,直至达到一个动态平衡状态。
核心原理是分离物的物理和化学性质存在差异,使得在色谱柱内的运动速度存在差异。
通过在色谱柱内静止相和动态相之间的相互作用,这些化合物得以分离。
在操作过程中,将待分离的样品通过液相或气相进入柱子,通过柱子内的各种物理、化学现象,不同分子的化合物不同的速率经过柱子,从而被分离出来。
而液相层析和气相色谱则是用于在分离中使用的两种技术。
在液相色谱中,液相作为移动相,将待分离物质混合进入柱子,样品与柱内的固相材料持续相互作用,确立效率分离过的化合物被从流动相中隔离出来。
而在气相色谱中,样品通过柱子时,是以气态形式运输。
与液相柱不同的是,气相柱中移动相都是气体,样品和气体一起通过固定的柱子,进而与固相作用,最后被分离。
这种技术是分离不易被液相色谱分离的挥发物质时的优选选择。
第三章:色谱柱分离技术的分类根据液相色谱和气相色谱的不同,色谱柱分离技术可以被分为以下两种:液相色谱柱:1、反相色谱柱(RPC):RPC柱是指其固相是一种亲水性材料,移动相为疏水性溶液,组成相反一般的流动相介质。
此时极性物质由于互相强占有水分子,因此流动相为水可以很好的将相异性化合物从区间进行分离。
2、正相色谱柱(NPC):NMC柱是指其固相是的一种疏水性材料,移动相为亲水性溶液,组成相反位于流动相介质。
此时极性物质由于互相强占有水分子,因此流动相为水可以很好的将相异性化合物从区间进行分离。
气相色谱柱:1、毛细管柱:毛细管柱是气相柱的一个常见类型,其型号和长度是顺应分析过程而定制。
hilic色谱柱原理及注意事项
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hilic色谱柱原理及注意事项
HILIC色谱柱(HydrophilicInteractionLiquidChromatography)是一种常用的色谱技术,主要用于分离极性化合物。
HILIC色谱柱与传统的反相色谱柱不同,适用于分离极性、水溶性和高极性化合物。
HILIC色谱柱原理是利用固定相与移动相之间的亲水性相互作用进行分离。
固定相通常采用含有亲水性官能团的硅胶或硅胶化学修饰产物。
移动相则是一种带有一定浓度的有机溶剂和水的缓冲液,pH
值通常在5-6之间。
在这种条件下,样品中的化合物会在柱上的亲水性固定相上发生相互作用,不同化合物之间的亲水性也会有所不同,从而实现分离。
在使用HILIC色谱柱时,需要注意以下几点:
1. 移动相组成的选择对色谱分离的影响较大,应根据不同的样品特性进行优化。
2. 柱温和流速也会影响色谱分离效果,应根据实际情况进行调整。
3. 样品的制备应尽量避免使用有机溶剂,以免影响色谱分离效率。
4. 柱的保养和储藏要注意,避免柱内干燥或受到污染。
HILIC色谱柱在分离极性化合物方面具有很好的应用前景,但在使用时需要注意以上几点,以获得更好的分离效果。
- 1 -。
色谱柱活化方法
![色谱柱活化方法](https://img.taocdn.com/s3/m/7af262acbdeb19e8b8f67c1cfad6195f312be81e.png)
色谱柱活化方法色谱柱活化是指在色谱柱上应用催化剂改变它的结构或特性,并使色谱柱的柱脱醇性和柱内的增效效率更高的技术。
这种活化技术已经得到了很多研究者的关注,并在分离分析中得到了广泛应用。
柱活化技术常采用液-液分散处理,通过柱面表面包合原理,将活性材料或催化剂装入柱内,从而改变并增强柱脱醇性。
柱活化的催化剂通常有金属和金属氧化物,如钴、铜、铁等,以及多元素杂原络合物,如氧化钛。
催化剂的选择和柱活化工艺对色谱柱改性和提高效率、提高分析效果有着重要作用。
在柱活化技术上,色谱柱活化主要有两类方法:一类是催化剂和调节剂共存在于柱内,称为“共存活化法”;另一类是催化剂和调节剂分别应用于色谱柱,称为“分离活化法”。
共存活化法是在柱表面使用催化剂或调节剂,使色谱柱表面的柱脱醇性增强,其催化剂可以是金属和金属氧化物,如钴、铜、铁等,也可以是多元素杂原络合物,如氧化钛。
根据柱表面结构和催化剂性质,可以调节催化剂对应分子的不同结合力和活性,从而改变柱脱醇性,使柱脱醇的能力和选择性改善,提高柱内的增效效率。
分离活化法是在色谱柱表面应用催化剂和调节剂,分别改变柱脱醇性和柱内的增效效率。
该法的催化剂有金属和金属氧化物,也有多元素杂原络合物,如氧化钛,等。
此外,可以加入调节剂,如脂肪族酸、脂肪族醇、表面活性剂,以改变色谱柱表面的气相交换效果,改变吸附性能,提高柱脱醇性,改善柱内的增效效率。
柱活化技术的应用,能够有效提高色谱柱的选择性和效率,对于分析非油性物质具有很好的应用价值,如脂质、抗生素、类固醇、氨基酸等,都可以使用色谱柱活化技术进行有效分离。
柱活化是一种有效的提升柱效率与灵敏度的方法,可以使用它来提高分析效果,提高分析精度,而且在色谱分离分析中有着重要作用。
不仅技术成熟,而且受到科学家和工程师的广泛应用,但也需要在实际应用中不断完善和改进技术,才能更好地发挥活化技术的优势。
气相色谱柱新柱子活化
![气相色谱柱新柱子活化](https://img.taocdn.com/s3/m/d55800ebdc3383c4bb4cf7ec4afe04a1b071b0d1.png)
气相色谱柱新柱子活化气相色谱(GC)是一种常用的分离技术,广泛应用于化学、生物、环境等领域。
色谱柱作为GC系统中的核心部件,起到了关键的分离作用。
本文将介绍气相色谱柱的新型活化技术,以提高其分离效果和使用寿命。
一、气相色谱柱简介气相色谱柱是GC系统中起关键作用的部分,它是一个长而细的管子,内壁涂有固定相。
样品在进样口注入,通过气流的推动,在色谱柱内被分离。
不同的化合物根据其在固定相和移动相中的亲疏水性质而分离出来。
然而,随着使用时间的增加,色谱柱的活性会下降,分离效果也会变差。
二、气相色谱柱的问题1. 表面污染:由于环境中的杂质或样品残留物,色谱柱表面容易受到污染。
污染会降低固定相的活性,影响分离效果。
2. 堵塞:样品中的高沸点物质或杂质容易在色谱柱内积聚,导致柱子堵塞,分离效果下降。
3. 老化:长时间使用会导致色谱柱的老化,固定相的活性减弱,分离效果变差。
三、气相色谱柱新柱子活化技术为了解决上述问题,研究人员提出了气相色谱柱的新柱子活化技术,以延长柱子的使用寿命和提高分离效果。
以下是几种常见的活化技术:1. 清洗技术通过使用溶剂或气体清洗色谱柱,可以去除表面的污染物和积聚物。
常用的清洗溶剂包括甲醇、丙酮、醋酸乙酯等。
清洗后,再用气体(如空气、氮气)吹干柱子。
2. 热解技术热解是一种通过高温将固定相分解,去除附着在柱子表面的污染物和残留物的技术。
这种方法可以有效清除柱子表面积聚的杂质,提高柱子的分离效果。
3. 化学修复技术化学修复技术是指使用化学试剂对柱子进行修复。
常见的修复试剂包括酸、碱、氧化剂等。
修复试剂可以将在色谱柱表面堆积的污染物和附着物溶解或氧化掉,恢复固定相的活性。
4. 表面改性技术表面改性技术是一种在色谱柱固定相表面修饰一层具有特殊性质的薄膜的方法。
例如,可以在固定相表面修饰亲水性薄膜,以增加固定相与分离物之间的相互作用力,提高分离效果。
四、活化技术的优点和应用前景通过使用新柱子活化技术,可以提高气相色谱柱的分离效果和使用寿命。
手性色谱柱分离原理
![手性色谱柱分离原理](https://img.taocdn.com/s3/m/a61836fb27fff705cc1755270722192e45365835.png)
手性色谱柱分离原理
色谱柱是分离色层的重要工具,它是利用溶剂(溶剂系统)中吸附剂配合物在色谱柱内不同地带缓慢分散的物理现象,来实现色层分离的一种技术。
色谱柱分离原理可以分为两大类:站立性色谱柱分离原理和层析性色谱柱分离原理。
站立性色谱柱分离原理:站立性色谱柱分离原理主要是利用溶剂中吸附剂配合物的相对持久性以及溶剂系统的气体泵作用,在色谱柱内不同地带缓慢分散,使不同溶质或分子阵列而形成色层,从而实现色层分离的技术。
层析性色谱柱分离原理:在层析性色谱柱分离原理中,对色层分离是采用溶剂中特定层析剂并结合气体泵运行作用原理,使特定溶质或分子阵列分散在色谱柱中,不同溶质或分子阵列会沿着吸附剂配合物的不同地带形成多个色层,从而实现分离色层的目的。
色谱柱分离原理是实现色层分离的一种重要技术,目前主要分为站立性色谱柱分离原理和层析性色谱柱分离原理。
在色谱柱分离中,能够获得高精度的色层分离效果,大大减少分离操作的时间和金钱投入,而且色谱柱分离过程实现工艺简单、操作简便,非常有利于现场应用。
色谱柱制备纯化工艺
![色谱柱制备纯化工艺](https://img.taocdn.com/s3/m/1c4ca4a118e8b8f67c1cfad6195f312b3069eb45.png)
色谱柱制备纯化工艺
1. 选择合适的填料,色谱柱的填料通常是硅胶、聚合物或者其
他介孔材料。
选择合适的填料对于分离和纯化目标化合物非常重要,需要考虑填料的孔径大小、表面活性和化学稳定性等因素。
2. 色谱柱的装填,在制备色谱柱时,需要将填料均匀地装填到
柱内,以确保色谱分离的效果。
通常会使用适当的溶剂和压缩装填
的方法来实现均匀的填充。
3. 优化流动相条件,流动相的选择和优化对于色谱分离的效果
至关重要。
需要考虑流动相的极性、溶解度和流速等因素,以获得
最佳的分离效果。
4. 样品预处理,在进行色谱柱制备纯化工艺前,通常需要对样
品进行预处理,包括溶解、过滤和浓缩等步骤,以确保样品的纯度
和稳定性。
5. 分离条件的优化,在进行色谱柱制备纯化工艺时,需要对分
离条件进行优化,包括色谱柱的温度、压力和流速等参数的调节,
以获得最佳的分离效果。
总的来说,色谱柱制备纯化工艺涉及多个方面的操作和优化,需要综合考虑填料选择、装填技术、流动相条件、样品预处理和分离条件的优化等因素,以确保获得高纯度的目标化合物。
这些步骤的合理操作和优化将对实验结果产生重要影响。
色谱柱核壳技术
![色谱柱核壳技术](https://img.taocdn.com/s3/m/dab50c79590216fc700abb68a98271fe910eaf29.png)
色谱柱核壳技术色谱柱核壳技术在分析化学领域中扮演着重要的角色。
本文将介绍色谱柱核壳技术的原理、应用以及其在色谱分析中的优势。
一、色谱柱核壳技术的原理色谱柱核壳技术是色谱柱中填充材料的一种创新进展。
传统的色谱柱填充材料主要是均质的微米级颗粒,而色谱柱核壳技术则是在这些颗粒表面包裹一层更薄的毫米级核壳结构。
核壳结构由具有良好分离性能的高效吸附剂(如硅胶)构成。
色谱柱核壳技术的原理在于核壳结构的优异性能。
核壳颗粒表面具有大量的吸附相,能够提供更高的表面积和更好的分离效果。
此外,核壳结构中心的空心空间可以增加样品分子与吸附相之间的接触时间,从而提高分离效率。
二、色谱柱核壳技术的应用色谱柱核壳技术在不同领域有着广泛的应用。
以下是几个重要的应用领域:1. 药物分析:色谱柱核壳技术可以用于药物的纯度分析、代谢产物的鉴定等。
由于其优异的分离效果,可以有效地提高药物的分析准确性和灵敏度。
2. 食品安全:色谱柱核壳技术可以用于食品中有害物质的检测,如农药残留、重金属等。
可以提供更好的分离效果,确保食品安全标准的合规性。
3. 环境监测:色谱柱核壳技术可以用于环境中有机污染物的检测和分析。
其高分离效率和较低的检出限可以更准确地监测环境污染水平。
4. 生物医学研究:色谱柱核壳技术可以用于蛋白质、肽段和核酸等生物大分子的分析与纯化。
其高效的分离性能有助于实现快速、高效的生物分析。
三、色谱柱核壳技术的优势相比传统的色谱柱填充材料,色谱柱核壳技术具有以下优势:1. 高效分离:核壳结构提供更大的表面积,增加样品与吸附相的接触时间,因此具有更高的分离效果。
2. 快速分析:由于核壳结构具有更好的分离性能,色谱柱核壳技术可以实现更快的分析速度,提高实验效率。
3. 提高灵敏度:核壳结构中心的空心空间可以增加样品分子与吸附相的接触面积,有助于提高灵敏度。
4. 扩展应用范围:色谱柱核壳技术适用于各种化学分析方法,包括气相色谱、液相色谱等。
综上所述,色谱柱核壳技术在分析化学领域中有着重要的地位和广泛的应用。
pfp色谱柱类似
![pfp色谱柱类似](https://img.taocdn.com/s3/m/4d96ca9351e2524de518964bcf84b9d528ea2c80.png)
PFP色谱柱及其类似技术深入解析在现代分析化学领域中,色谱技术一直扮演着至关重要的角色。
其中,PFP色谱柱作为一种特殊的色谱分离技术,因其独特的选择性和分离效能,受到了广泛关注。
本文将详细介绍PFP色谱柱的原理、特点、应用及其与类似技术的比较,旨在为读者提供全面、深入的了解。
一、PFP色谱柱的基本原理PFP色谱柱,即五氟苯基色谱柱,是一种基于五氟苯基官能团的固定相色谱柱。
其分离原理主要依赖于分析物与固定相之间的相互作用力,包括范德华力、氢键、偶极-偶极相互作用等。
这些相互作用力使得不同分析物在色谱柱上的保留时间不同,从而实现分离。
二、PFP色谱柱的特点1. 高选择性:由于五氟苯基官能团的特殊性质,PFP色谱柱对许多化合物具有高选择性,尤其适用于复杂样品中相似化合物的分离。
2. 高效能:PFP色谱柱具有较高的理论塔板数,能够提供较高的分离效能。
3. 广泛应用:PFP色谱柱适用于多种溶剂和分析条件,可广泛应用于环境、食品、医药等领域的化合物分析。
三、PFP色谱柱的应用1. 环境分析:PFP色谱柱可用于环境中有机污染物的分析,如多环芳烃、农药残留等。
2. 食品安全:在食品安全领域,PFP色谱柱可用于食品添加剂、食品中的有毒有害物质等的检测。
3. 医药研发:PFP色谱柱在医药研发中也有着广泛应用,可用于药物成分的分析、药物代谢产物的研究等。
四、PFP色谱柱与类似技术的比较1. 与硅胶色谱柱的比较:硅胶色谱柱是另一种常用的色谱分离技术。
与PFP色谱柱相比,硅胶色谱柱具有不同的选择性和分离机制。
硅胶色谱柱更适用于极性化合物的分离,而PFP色谱柱则更适用于非极性和弱极性化合物的分离。
2. 与聚合物色谱柱的比较:聚合物色谱柱具有较好的机械强度和化学稳定性。
然而,与PFP色谱柱相比,聚合物色谱柱的选择性较低,分离效能也相对较差。
五、结论与展望综上所述,PFP色谱柱作为一种高效的色谱分离技术,在环境分析、食品安全和医药研发等领域具有广泛的应用前景。
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流样动品相:阿:米6替5/林35 甲醇/20mM磷酸盐溶液pH7.0
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12
内容提要
Waters色谱柱发展历史及分类简介 超纯硅胶色谱柱平台简介
— HSS, SunFire, Symmetry
杂化颗粒色谱柱平台简介
— BEH, XBridge, XTerra
离子交换作用
O-Si
O-Si
O- (CH ) H+N OO-S- i 3 2
O-Si
O-Si
O-Si OO--Si
O-Si
当p带离H流负)﹥动电5时相性,为(硅大醇部基解
Base 对物严碱的重性保拖化留尾合及
两实验使用相同的传统C8硅胶柱
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8
如何解决碱性化合物和螯合物的峰形问题?
极性化合物色谱柱平台简介
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新!CSH技术介绍
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13
高纯硅胶柱可用于解决您 所有的应用难题吗?
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14
是否遇到这样的问题?
分磷离酸三钠环缓类冲抗液忧(pH郁7剂, 时50色°谱C)峰为形流随动时相间的变化
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新!CSH技术介绍
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2
Waters 现代色谱柱一览
超纯硅胶色谱柱
ACQUITY UPLC HSS C18/C18 SB HPLC HSS SunFire™ Symmetry® SymmetryShield
测试化合物:
1. Uracil
对羟基苯甲酸丁酯 2. Propranolol
3. Butylparaben(
)
2 35
1 46 7
邻苯二甲酸二丙酯 4. Naphthalene
5. Dipropylthalate(
)Hale Waihona Puke 6. Acenaphthene
色流谱动柱相 7.
Amitriptyline
2
: 4.6 x 100 mm, 3.5 µm
1
AU 0.00
第5天 4
2
3
1.00
2.00
3.00
4.00 M5i.n0u0tes 6.00
7.00
8.00
9.00 10.00
-
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15
硅胶基体颗粒
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Silica pH 2 - 8 Polymer pH 2 -14
1
: 65/35 (v/v) MeOH/ 20 mM K3PO4, pH 7.0
3 4
5
柱温: 23.4 ºC
柱流速: 1 mL/min
6
25 13
4
XBridge™ C8
7 XBridge™ Phenyl
XBridge™ Shield RP18 76
2 1
3
5
4
XBridge™ C18
6
7
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22
Shield RP18/RP8的可能作用机理
水 “屏蔽”层
H3C H
N +
CH3
了硅“水带羟层负基”屏电蔽的
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改善了反相硅胶表面与水的浸润性-100%水相流动相兼容 降低了碱性化合物的保留 降低了拖尾现象
23
XBridgeTM 固定相系列:分离选择性各不相同 (流动相pH为7下的测试结果)
(Hybrid Particle Technology, HPT)
— 新美颗,粒明的显传改质善特了性柱可效与和最对新碱一性代化的合超物纯的硅色胶谱柱峰媲形
— 大大强化了色谱柱在高pH流动相中的寿命
— 提HI供LI六C种,固A定m相id(eC)1,8可, 覆C8盖, 绝RP大1多8数, 苯的基应,用领域
82
pH
81
pH
12
3
内容提要
Waters色谱柱发展历史及分类简介 超纯硅胶色谱柱平台
— HSS, SunFire, Symmetry
杂化颗粒色谱柱平台
— BEH, XBridge, XTerra
极性化合物色谱柱平台
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新!CSH技术介绍
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反复摸索、优化流动相组成以达到可接受的色 谱峰形(例如使用竞争性碱TEA或离子对色谱)
年代策略 — 1970-1980 — 方法开发过程复杂、漫长
从改善反相填料着手降低硅醇基活性
— 自1994至今 — 无需花费大量时间去优化峰形
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9
超纯硅胶填料(B型填料)合成过程(1994)
离子交换 能保留任何离子型化合物
缺点
洗洗脱脱-不需可要用高于浓M度S盐分缓析冲液或采用pH进行梯度 对于不可离子化的极性化合物无效
低金属杂质
Hinokitiol
O Si
O M n+ O Si O
高金属杂质含量
2
4
6
8 Minutes
0
流动相:20 mM Phosphate Buffer pH 3.6 含( 0.05% EDTA): Acetonitrile (50:50)
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对超Sy碱纯m性硅m药胶e物基tr阿体yâ米C替18林柱峰:形良好
*
碱传性统药硅物胶阿基米体替C1林8峰柱形:严重拖尾
*
10
20
30
40 分钟
传碱统性型化合C1物8峰硅形胶的柱影上响金属杂质对
6
硅胶颗粒的表面处理
1) C18-bonding 2) TMS-endcap
硅并羟不基是发所生有反的应
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7
碱性分析物在硅胶柱上的拖尾机理
4
传统硅胶填料(A型填料)的生产过程
Na2SiO3 (矿物) + 2H+
Si(OH)4 (原硅酸)+ 2Na+
硅胶颗粒 (含金属杂质!)
C18/C8 键合 + 封尾
C18/C8 反相填料
(最终仍带金属杂质!)
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5
传统硅胶柱的弊端
传统硅胶柱的生产原料为矿物硅酸盐(如泡花碱),具有以下弊端:
Waters 现代色谱柱技术
Waters Chemistry Operation
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1
内容提要
Waters色谱柱分类简介 超纯硅胶色谱柱平台
— HSS, SunFire, Symmetry
杂化颗粒色谱柱平台
— BEH, XBridge, XTerra
极性化合物色谱柱平台
0
5
10
15
20
25
Minutes
Alden, Iraneta
24
高XpBHr寿id命g更e长™十稳倍以定上性! 数据
第二代杂化颗粒
第一代杂化颗粒
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内容提要
Waters色谱柱发展历史及分类简介 超纯硅胶色谱柱平台简介
— HSS, SunFire, Symmetry
0.10
AU -0.005 0.26
1
Peak Number UPS Tailing Factor
4
1. Doxepin
1.2
2. Nortriptyline 1.1
3. Amitriptyline 1.1
第1天
4. Trimipramine 1.0
2
3
1.00 2.00 3.00 4.00 5.00 6.00 7.00 8.00 9.00 10.00 Minutes
与键合相的疏水性作用
当时性流,(未硅动解醇相离基p)H趋﹤于3中
O-Si O-Si OH O-Si
O-Si OH
O-Si OH O-Si O-Si O-Si
OH O-Si O-Si
Base
双21))重与与保残键留余合机硅相理醇的:基的间疏的水离性子作交用换; 作用
H+N(CH3)2
O-Si
O-Si O-
杂化颗粒色谱柱平台简介
— BEH, XBridge, XTerra
极性化合物色谱柱平台简介
— 反相保留机理举例 — HILIC保留机理举例
新!CSH技术介绍
©2011 Waters Corporation
Alden, Iraneta
25
26
反相色谱技术保留极性化合物: 对所有色谱柱生产商的挑战!
非极性固定相
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8
去替甲林基阿米
4 5 6 7 8 9 10 11 12 pH
在高pH下硅胶颗粒溶解
0
1
2
3
Minutes
Nortriptyline
Amitriptyline
pH 10
0
1
2
3
Minutes
17
第二代杂化颗粒柱技术(2004): Ethylene Bridged Hybrid (BEH) Particles