绿僵菌简介
绿僵菌
感染过程
绿僵菌侵染前后对比绿僵菌对寄主昆虫的感染与其它虫菌基本上相同。绿僵菌的分生孢子很容易附着于寄主 昆虫皮肤的节间处，当遇到适宜的温湿度，分生孢子即行萌发，产生芽管，并形成菌丝。菌丝可分泌能够溶解几 丁质的酶，溶解昆虫体壁。并借助菌对寄主侵入产生的压力，使菌丝侵入寄主的表皮，进而逐步向内侵染，侵入 昆虫的脂肪组织和肌肉。菌丝在昆虫体内繁殖，进而导致昆虫死亡。当寄主昆虫被绿僵菌初感时，在体壁可见到 黄褐色的斑点，由于受到绿僵菌毒素的作用，昆虫开始表现神经系统障碍的现象。幼虫取食停止，对刺激的反应 降低，最终死亡。死亡后的尸体僵化，虫体内的菌丝开始向体外伸延，虫尸很快被一层白色菌丝所包被，之后一、 二日，在菌丝上形成分生孢子梗和分生孢子，则变为绿色或暗绿色。
黄绿绿僵菌（ Metarhizium flavoviride）在察氏培养基上，菌落呈黄绿色，培养2周菌落直径达55mm。分 生孢子梗疏松轮状分枝，其上着生1-2个瓶梗，瓶梗杆状，顶部尖，大小为（7.2-12.5）μm×（1.8-3.0）μm。 分生孢子单胞，卵圆形，具不同的端部，大小为（7.2-9.3）μm×（3-4）μm，在瓶梗上形成向基性的链。
发现
最早发现绿僵菌的是梅契尼科夫，他在1879年观察到一批死亡的金龟子在昆虫死后两天，从它们身上生出菌 丝，尤其显著的是菌丝环绕着气门的周围。菌丝初为白色，随后变为绿色，最后呈暗绿色。
绿僵菌菌剂培养及田间生物防治研究
绿僵菌菌剂培养及田间生物防治研究杨文彬（山西省医药与生命科学研究院，山西太原 030006）摘 要：绿僵菌作为重要的生物农药制剂，研究及应用非常广泛。
本研究通过试验探索了固体培养绿僵菌L8500-2x菌株的最佳培养基配方及工艺条件，进行了田间试验示范推广，为有效利用绿僵菌进行田间合理的防治提供了科学参考。
关键词：绿僵菌；菌剂培养；生物防治中图分类号：S476.1 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20170533028绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是重要的昆虫病原真菌之一[1]，将其作为主要生物活性成分的制剂，具有不污染环境、无残留、易生产、致病力强、持效期长、应用效果好、对非靶标生物安全等优点，其寄主范围广，可在8目30科200余种农林害虫上寄生，其应用前景非常广阔[2,3]。
近年来，由于化学农药的大量使用，食品安全和健康问题、环境保护问题倍受重视，生物农药的研发及推广具有深刻意义[4]。
目前，绿僵菌生物农药的生产普遍采用液固双相发酵工艺，其固体载体多为大米和稻壳，国外绿僵菌生产的固体载体多为稻米[5]。
绿僵菌制剂的剂型主要有粉剂、可湿性粉剂等，其助剂的成分和配比是当前研究热点。
本研究为了大量生产绿僵菌菌剂用于田间农作物害虫的防治，先采用液体发酵培养绿僵菌L8500-2x菌剂，再采用固体发酵培养绿僵菌L8500-2x菌粉，进行田间试验示范推广，可为有效利用绿僵菌防治农作物病害提供参考，为适应绿色农业的发展要求，减少高毒、高残留化学农药的使用提供科学方法。
1试验材料与方法1.1 绿僵菌L8500-2x菌株固体发酵培养载体的筛选1.1.1试验材料绿僵菌培养载体：麦麸、硅藻土、磷酸钙、锯末、谷糠、玉米粉；试验害虫是菜青虫2代幼虫。
1.1.2试验方法[6]利用麦麸、硅藻土、磷酸钙、锯末、谷糠、玉米粉等廉价物质作为基质进行绿僵菌L8500菌剂的生产，观察不同供试载体对绿僵菌菌丝生长、产孢量和孢子萌发率的影响，经对比试验，确定固体培养绿僵菌L8500-2x 菌种的最佳培养基配方及工艺条件[7]。
绿僵菌是一种广泛使用的生物杀虫剂
6维度环境与健康网
绿僵菌:广泛使用的生物杀虫剂
编译：菁菁 6维度环境与健康网
绿僵菌 Metarhizium anisopliae 被绿僵菌杀死的幼虫 绿僵菌（Metarhizium anisopliae）是一种常见的土壤真菌，可使多种昆虫致病。
早在1879年，绿僵菌就被用于虫害生物控制。
现在，它已被商业化生产并在许多国家得到广泛应用。
研究认为，绿僵菌对哺乳动物无害，然而吸入这种真菌能引起过敏反应。
它对常见有益生物无害，包括：蚯蚓、瓢虫、草蛉、寄生蜂、蜜蜂幼虫及成虫。
对绿僵菌敏感的害虫包括：蚜虫、蓟马、叶蝉、粉虱、金龟子、象甲、螨、蠓、扁虱、蝗虫、白蚁、蟑螂、苍蝇和蚊子幼虫。
许多国家和专业人推荐用绿僵菌控制茄子梢螟（shoot borer）和豆荚螟（gram pod borer）。
根据上文可见，绿僵菌有可能用于多种作物的害虫控制。
参考文献：UNEP. Evalutaion of non-chemcial alternatives to endosulfan。
金龟子绿僵菌杀虫成效怎么样
农业害虫防治：农业害 虫是农业生产中的一大 难题，金龟子绿僵菌作 为一种生物防治手段， 对于减少化学农药的使 用、保护生态环境具有 积极意义。
国内外研究现状
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国内外研究进展：近年 来，国内外学者对金龟 子绿僵菌的研究不断深 入，对其致病性、杀虫 机制等方面进行了大量 研究。
研究空白：尽管金龟子 绿僵菌的研究取得了一 定进展，但在实际应用 中仍存在一些问题，如 杀虫成效不稳定、致病 力受环境影响等，需要 进一步研究。
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杀虫作用机制研究
对昆虫的感染过程
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接触感染
金龟子绿僵菌通过接触昆 虫体表或口器，进入昆虫 体内。
潜育期
金龟子绿僵菌进入昆虫体 内后，经过一段时间的潜 育期，开始大量繁殖并产 生毒素。
发病期
随着毒素的产生，昆虫出 现病症，表现为行动迟缓 、食欲不振等症状。
对昆虫的致病机制
抑制呼吸
金龟子绿僵菌产生的毒素 能够抑制昆虫的呼吸作用 ，导致昆虫窒息死亡。
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金龟子绿僵菌概述
定义与分类
定义
金龟子绿僵菌是一种半知菌亚门、链 孢霉目的真菌，具有杀虫活性。
分类
根据其分类地位，金龟子绿僵菌属于 昆虫寄生真菌，能够寄生于多种害虫 体内。
生物学特性
生长条件
金龟子绿僵菌在适宜的温度、湿 度和营养条件下生长繁殖，对环 境具有较强的适应性。
传播途径
金龟子绿僵菌主要通过分生孢子 传播，能够通过气流、昆虫等途 径扩散到其他地区。
金龟子绿僵菌杀虫成效怎么 样
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目录
• 引言 • 金龟子绿僵菌概述 • 杀虫作用机制研究 • 杀虫效果影响因素研究 • 实际应用与效果评估 • 结论与展望
“智慧”真菌杀虫剂——绿僵菌CQMa421
13F聚焦Focus“P 专业视角Perspective微生物杀虫剂的研发及田间防效 微生物杀虫剂的研发面临诸多问题：一是害虫种类多；二是抗药性上升，用量增大，产品市场寿命短；三是农药登记、生产、销售、使用等环节的监管越来越严格；四是防控理念变化要求我们不仅要保护寄生性、捕食性等天敌，还要不伤害其它益虫和非靶标生物。
综上可以看出，广谱、无抗性、安全、持续控害成为新杀虫剂的必备特点。
而“智慧”真菌杀虫剂——绿口/《农化市场十日讯》编辑部整理僵菌CQMa 421就具有杀害虫、护益虫、无抗性的特性。
通过筛选绿僵菌广谱菌株在稻田上进行试验发现，绿僵菌CQMa 421侵染水稻三种主要害虫，即稻纵卷叶螟、稻飞虱和二化螟，但不侵染稻田主要天敌。
目前研发出的产品类别包括可分散油悬浮剂和可湿性粉剂，可以应用于水稻、茶叶、蔬菜、烟草等作物上。
截至目前，农业农村部已登记的绿僵菌CQMa 421可分散油悬浮剂有1个，主要防治水稻稻纵卷叶螟、稻飞虱、二化螟、叶蝉；茶树茶小绿叶蝉；甘蓝黄条跳甲；烟“智慧”真菌杀虫剂——绿僵菌CQMa 421/生物源/14““草和桃树蚜虫等虫害。
其扩作登记包括豇豆上的甜菜夜蛾、苦瓜上的蚜虫、柑橘上的木虱、茄子上的蓟马等10余种害虫。
截至目前，农业农村部已登记的绿僵菌CQMa 421可湿性粉剂有1个，主要针对水稻稻纵卷叶螟、稻飞虱和二化螟。
综合2010-2015年，在全国8个省区进行应用“绿僵菌CQMa 421”油悬浮剂分别防控稻飞虱、稻纵卷叶螟和二化螟的田间试验和大面积应用示范，以及2018年在四川、山东进行的防治小麦蚜虫的田间试验，结果表明，与化学杀虫剂相比，“绿僵菌COMa 421”防治水稻害虫和小麦蚜虫死亡慢、死亡率低，但产量无显著差异。
绿僵菌CQMa 421应用的技术要点 1、保证药剂与害虫的接触，接触机会越多，虫害致死速度越快。
2、使用器械：可以选用常规喷雾器；静电喷雾器用于低容量喷雾、常量喷雾；超低容量喷雾器用于低容量喷雾、超低容量喷雾；无人机喷雾器用于低容量喷雾、超低容量喷雾。
科技写作作业
实验名称：绿僵菌抗药性菌株的驯化选育
摘要
绿僵菌（Metarhizium anisopliae）半知菌类、丛梗菌目、丛梗霉科、绿僵菌属，具有广谱性。
绿僵菌对寄主的入侵是寄主与病原菌之间的生理生化作用的综合结果，可通过体壁、气门、消化道等多种途径侵染宿主，其中体壁途径是主要方式。
本文研究嘧霉胺驯化诱导绿僵菌产生抗性菌株，研究绿僵菌对嘧霉胺的抗性风险。
绿僵菌在含嘧霉胺的培养基上经逐代驯化，获得了抗嘧霉胺的菌株R1、R2、R3、R4，经抗药性水平测定，R1、R2、R3、R4的抗性倍数分别为10ug/ml，100ug/ml，500ug/ml，1000ug/ml四株抗药性菌株均为对嘧霉胺的抗性菌株。
本文比较了抗药性菌株和敏感性菌株的生物学性状。
采用菌丝生长速率法测定了抗性菌株与敏感菌株的菌丝生长速率，结果表明经7d培养抗性菌株菌落直径在0.5-1.1cm之间，而敏感菌株为1.3cm，生长速率存在明显差异；在及抗性菌株与敏感菌株的产孢量大约都在3.6×107个/ml，说明室内诱导的高抗突变体不能正常生长，菌株对药剂的抗药性水平与菌株产孢能力没有相关性，而是由菌株本身决定的。
本试验初步研究了抗性菌株的遗传稳定性，抗性菌株的第零代到第六代的的结果表明绿僵菌的抗药性菌株与敏感菌株的不同转代的有差异性，从第零代第三代到第九代逐渐减小，第零代与第三代和第六代下降明显，第三代与第六代下降幅度很小，但始终保持着对嘧霉胺的高等抗性，表明抗性菌株具有良好的遗传稳定性。
关键词：绿僵菌；嘧霉胺；抗性菌株；生物学特性；遗传稳定性。
金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae) tetraspanin基因的克隆与序列分析
金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae) tetraspanin基因的克隆与序列分析贺闽1，夏玉先1*1重庆大学生物工程学院基因工程研究中心，重庆（400044）摘要：Tetraspanin蛋白是一类跨膜四次的膜蛋白，本文测序分析金龟子绿僵菌侵染蝗虫表皮阶段的cDNA文库，获得了金龟子绿僵菌的tetraspanin cDNA序列，以cDNA为探针从金龟子绿僵菌的DNA文库中克隆到了tetraspanin基因，并对tetraspanin蛋白进行了结构与进化分析, Soutern-blot分析表明tetraspanin基因在金龟子绿僵菌基因组中以单拷贝形式存在。
关键词：金龟子绿僵菌；tetraspanin；cDNA；DNA；进化分析。
中图分类号：1. 引言昆虫病原真菌是昆虫主要的自然致死因子，真菌生防剂具有触杀性、流行性、对环境安全和不易产生抗药性等特点，因此利用虫生真菌防治害虫越来越受到重视。
金龟子绿僵菌作为一种重要的昆虫病原真菌，国内外对其致病机理进行了大量研究，鉴定出了一些重要毒力基因，涉及真菌粘附并穿透宿主体壁、利用宿主营养、合成毒素以及逃避宿主免疫反应等[1,2,3,4,5,6]。
附着胞是虫生真菌入侵寄主过程中形成的重要侵染结构，能够分泌体壁降解酶和提供机械压力帮助侵染钉穿透昆虫体壁，附着胞的产生对于建立病原真菌与寄主关系是至关重要的。
因此，阐明附着胞形成分化的分子机制，能够为开发安全高效的真菌杀虫剂、挖掘昆虫病原真菌应用潜力提供科学依据。
Tetraspanin广泛表达于真核生物，是一类含204-344个氨基酸的细胞表面糖蛋白。
哺乳动物中已发现的tetraspanin家族蛋白有32个，果蝇中有37个，秀丽隐杆线虫中有20个，真菌中有4个。
在这众多的家族成员中，来自不同物种的tetraspanin很少存在同源性，但这些家族成员蛋白二级结构具有一定保守性，都由四个疏水跨膜区、胞外区的小环（EC1）和大环（EC2）,以及两个短的胞内末端组成[7]。
绿僵菌制剂的剂型及其应用效果
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（ 河北省 生物研 究所 ， 石家 庄 ０ ０ ５ ） ５ ０ １
摘要 ： 为提高 绿僵菌孢 子的贮藏 和环境稳 定性 ， 实验对绿 僵菌剂 型进行研 究 。确定 产品剂型配 方为５ ％孢 子 ０ 粉 ， １５ ２ ．％载 体 ， ％增 效剂 ， ．％紫外 吸收剂 ， ５ ２ １５ ２ ％的大豆 色拉油 ； 室内生物 测定 结果表 明 ， 制剂Ｘ ３ 东亚 ￣龄
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三、绿僵菌的生物学特性
绿僵菌的生活力
温度：15℃~35℃
生长温度
20℃~30℃
生长适温
25℃
最适生长，孢子形成
湿度：＜93%
98%~100%最适
温度与湿度对孢子的影响是相关的
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四、绿僵菌的应用现状
杀虫剂 生物发酵 对 1 6 a ， 1 7 a 一 环氧黄体酮进行 1 1 a
羟基化是利用微生物进行甾体药物合成的 一个重要反应， 得到的产物是生产醋酸 强的松、 强的松龙、 地塞米松等许多甾 体药物的重要中间体．
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黄绿绿僵菌（1，2，3，小，大） 白色绿僵菌
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一、绿僵菌属的系统分类
特征描述：菌丝分枝，有隔，无色光滑。 分生孢子梗从气生菌丝生出，直立、短小 或分化不明显;分生孢子直接生长在菌丝 上或由菌丝分化的分生孢子梗上，而不是 生长在分生孢子盘或分生孢子器内;分生 孢子梗和分生孢子都为无色，分生
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二、绿僵菌的分离与鉴定
一、绿僵菌属的门：真菌( E u m y c o t a )
亚门：子囊菌( As c o m y c o t i n a ) 纲：核菌( P y r e no m y c e t e s ) 目：球壳菌( S p h a e r i a l e s ) 科：麦角菌( C l a v i c i p i t a c e a e ) 属：绿僵菌(Metarhizium) 种：金龟子绿僵菌（1，2，小，大）