花叶金线莲离体保存技术研究
金线莲组织培养研究进展
安徽农业科学，J・Anhui AgWc.Scb2222,45(3)：15-07,25金线莲组织培养研究进展李荣峰，粟杨盛（百色学院农业与食品工程学院，广西百色333902）摘要是一种多年生用植物，野生,为1化发供1。
的人繁殖、段和外植、外植毒、培养基（基本、诱导、生根）选择等几方面进行了综/，同时分析了中存在1，并后1研究重点。
关键词；；研究进中图分类号S567.23文献标识码A文章编号2513-6610（2222）25-0213-25doi：10.3969/jTssu.S513-6610.S222.S5.S25开放科学（资源服务）标识码（OSID）:Research Pragress of Tissee Cultara in Anoectochilus roxburghiiLI Rong-feng, SU Yang-steng(Colleve oS Agriculture ant Foot Engineering,Baisc CoUeve, Baise,Guangxi533902)Abstract Aeectochilus roxburghii is a perennial herUacecus medicinal plan).The wili resources have been gradually depleted.Awibcial cu/W vation can provide suficien)mate d ais Us the intustWai development oS A.roxburghii.This papes reviewed the awibcial breeding oS A.rob-burghil i the selection oS the stem sepmenW ant Wp but explants of A.roxburghii,the disinUction oS expinW,ant the selection oS medium(bast io,intuction, rooting).The problems in the tissue culture of A.roxburghii were analyzed,ant the research focus of A.roxburghii was pointed out in the future.Key words Aeectochilus roxburghii；Tissue culture；Research progress金线莲（noectochilm roxburghii），别名金线兰、金丝草、金丝线、金耳环、乌人参、金线虎头蕉、金线入骨消、金线石松、金石蚕、、小叶金耳环、麻叶菜等，是兰科开唇兰属植物的多年生草本药用植物，因其叶脉呈金黄色。
金线莲调研报告
金线莲调研报告——,福建漳州、厦门一、金线莲组织培养 1、培养基制作配制培养基南靖本地大量培养及种植金线莲外，香蕉也是本地一个重要农业种植品种。
上山下乡路途中常常可见大片香蕉种植基地。
本地金线莲培养企业也在培养基配方中加入香蕉作为添加物，此外还有活性炭。
其他配方为企业机密，不对外透露。
分装加塞灭菌2、接种过程：母苗→取出→去除叶片、根部，留下茎→剪成茎段→置入新培养基→摆好茎段→加塞→移至培养室培养4个月→留作母苗↓↘烘干出售出瓶种植茎段长1cm-3cm,每一茎段留一个茎节每瓶培养基接种25左右个茎段3、培养培养条件：培养灯光：普通荧光灯，适宜光强为3000lux左右，但有厂家为控制电费成本低于该光强培养温度：空调控制为25℃左右开灯时间：一般为白天关灯，夜间开灯12h。
主要为夜间温度低，控制空调电费成本考虑。
培养时间：从接种之日培养至出瓶一般为4个月左右，期间不转接，直至金线莲出瓶。
培养目的：留作母苗：继续留在培养室，作为下一次接种的母苗。
烘烤干品：冲洗根部培养基后烘烤成干品后出售。
出瓶种植并洗瓶：出瓶冲洗培养基后进行种植。
清洗时应特别注意不要损伤根部，不可使用毛刷，用水漂洗。
4、残次品：残次品：接种剪下的叶片、根茎及炼苗失败的瓶苗洗净培养基后，厂家也将其烘烤成干品制成茶包低价出售。
有的干品在500元/斤左右。
5、典型案例：福建“嘉胜集团”系南靖县乃至福建省最大的金线莲组培集团，该公司有接种室12间，接种工作人员≥200人，金线莲组培苗月产量可达100万瓶。
二、金线莲大棚种植1、炼苗：瓶苗出培养室后一般炼苗15-30d，或者更久。
炼苗一般有专用炼苗大棚，瓶苗出培养室后运至炼苗大棚摆放即可，使瓶苗逐步适应外界的光、温、湿等。
2、出瓶：开盖后适当加水于瓶内，然后摇晃，用手指轻轻勾出苗后，洗净培养基。
3、种植：种植基质：进口泥炭土：珍珠岩=5:1。
加水量：种苗基质和水混合至手抓一把土挤压后约一滴水漏下，即含水量60%左右种植密度：每盆１４×１４＝２８８株种植盆钵：42cm*42cm，高的无孔盆钵种植方法：用镊子等工具将泥土挖开小洞，将金线莲根部轻轻埋好，一般不超过其底部第一个茎节处。
金线莲组培快繁技术研究进展
金线莲组培快繁技术研究进展摘要金线莲为兰科开唇兰属多年生草本植物，具有重要的药用价值。
该文对金线莲组培快繁的研究现状进行了综述，包括金线莲无菌培养的建立、增殖培养、生根培养及移栽驯化4个阶段，以期为今后组培方面的相关研究提供一定参考。
Abstract The Anoectochilus roxburghii belongs to the genus Anoectochilus Bl.（Orchid），which is a perennial herb plant and plays an important role in medical use. This paper summarized the advances of Anoectochilus roxburghii tissue culture，including the establishment of aseptic system，multiplication culture，rooting culture，transplanting domestication. We hoped that the paper could provide a scientific basis for further study in tissue culture of Anoectochilus roxburghii.Key words Anoectochilus roxburghii；tissue culture；rapid propagation金线莲（Anoectochilus roxburghii）为兰科（Orchidaceae）开唇兰属（Anoectochilus Bl.）多年生草本植物，别名金蚕、金线兰、金线虎头蕉等，产于福建、浙江、江西、湖南、广东、海南、广西、四川、云南、西藏东南部[1-2]。
金线莲作为名贵珍稀的中药材，性平、味甘，有“药用植物之王”的盛誉，在民间素有“金草”、“神药”、“乌人参”等美称，常用于治疗小儿惊风高热、糖尿病、高血压、肝炎、肾炎等。
金线莲抗软腐病离体鉴定方法的研究
金线莲抗软腐病离体鉴定方法的研究作者：邵清松刘洪波郭杰许炎胡润淮李明焱来源：《中国中药杂志》2014年第01期[摘要] 以活体喷雾法作对照，研究不同离体接种方法、不同接种浓度以及不同叶龄对金线莲抗软腐病的影响。
结果表明离体叶碟滴接法接种后金线兰和台湾金线莲之间病情指数差异较大，能够比较明显区分其抗病性；当接种浓度为1.0×107 cfu·mL-1时，病情指数差异较明显，能够较好地区分抗、感病品种；在4个月叶龄接种时，金线兰和台湾金线莲间病情指数有一定的差异，能相对准确地反映品种间的抗性差异。
采用离体叶碟滴接法，对4个月叶龄的金线兰与台湾金线莲接种浓度为1.0×107 cfu·mL-1的细菌悬浮液，放入14 h光照、28 ℃培养箱中培养5 d后进行鉴定，其鉴定结果与活体喷雾法一致，可用于金线莲抗软腐病离体鉴定，为金线莲抗软腐病的新品种选育及种质创新提供依据。
[关键词] 金线兰；台湾金线莲；软腐病；离体鉴定[收稿日期] 2013-05-14[基金项目] 国家自然科学基金项目（81303167）；浙江省自然科学基金项目（LY13H280010）[通信作者] *胡润淮，Tel：（0571）63741273，E-mail： hurh57@[作者简介] 邵清松，博士，副教授，主要从事药用植物栽培与育种研究金线莲又名金线兰、金丝草，为兰科开唇兰属多年生名贵中药材，主产于福建、浙江、台湾、江西、贵州等地，具有清热凉血、除湿解毒等功效，用于治疗糖尿病、肾炎、急慢性肝炎等，在民间享有“药王”的美称[1-3]。
金线莲基原植物主要有2种：金线兰Anoectochilus roxburghii和台湾金线莲A. formosanus。
金线莲软腐病是金线莲主要病害之一，由软腐欧文氏菌黑茎病变种Eruinia carotovora var. atroseptica （Hellmers et Dowson） Dye引起，属于细菌性病害，主要通过昆虫、雨水、农具等造成伤口和植株叶片的水孔和气孔侵染。
金线莲林下仿野生栽培管理技术
金线莲林下仿野生栽培管理技术简介金线莲（Lonicera japonica）是一种常见的草本植物，也是一种重要的中草药材。
金线莲具有抗炎、清热、利尿等药用价值，被广泛用于中医药领域。
相比于野生金线莲，通过林下仿野生栽培可以提高产量和品质，并且减少对自然资源的依赖。
本文将介绍金线莲林下仿野生栽培的一些关键技术和管理方法。
地块选择与准备金线莲适生于温带气候，对土壤要求较为宽松肥沃、排水良好的砂质壤土或壤土为宜，pH值在6.5-7.5之间。
选择地块时应尽量选择没有使用化学农药和化肥的土地，以保证金线莲的质量和环境安全。
在地块准备阶段，首先需要清除杂草和其他植物，确保金线莲有充足的生长空间。
可以通过翻耕、除草、施有机肥等措施来改善土壤质量。
缩短种植周期金线莲的生长周期一般为2-3年，通过一些管理技术可以缩短种植周期，提高生产效益。
以下是一些缩短种植周期的方法：1.优质品种选择：选择生长速度较快的优质金线莲品种，可以缩短种植周期。
2.合理控制水分：金线莲对水分要求较高，但过度湿润会导致根部腐烂。
应根据天气情况调整浇水量，保持适当的水分。
3.合理施肥：通过科学合理的施肥方法，提供金线莲所需的养分，促进其生长发育，加快种植周期。
建议使用有机肥和自制的发酵液，避免过量施用化学肥料。
4.定期修剪：及时修剪金线莲的枝条和叶片，促进新的生长，有助于缩短种植周期。
病虫害防治金线莲易受一些病虫害的侵袭，为了保证金线莲的生长和品质，需要采取一些病虫害的防治措施：1.病虫害监测：定期巡查田地，观察金线莲的生长情况，发现病虫害问题及时处理。
2.生物防治：使用生物防治剂，如昆虫天敌、拮抗菌等，来控制病虫害的繁殖和传播。
3.增强植物抵抗力：通过合理的施肥和生长调节剂的使用，增强金线莲的抵抗力，减少病虫害发生的可能性。
4.病虫害防治剂使用：如果病虫害较为严重，可以根据实际情况使用农药进行防治。
但是要注意使用安全和环保的防治剂，并严格按照使用说明进行操作。
金线莲组培技术现状及发展趋势
金线莲组培技术现状及发展趋势金线莲是一种常见的观赏盆栽植物，其优美的花姿和深绿的叶片受到了许多人的喜爱。
随着人们对观赏植物需求的不断增加，金线莲的种植也呈现出了逐渐增长的趋势。
而随着现代生物技术的不断进步，金线莲的组培技术也得到了广泛的关注和研究。
本文将就金线莲组培技术的现状及发展趋势进行探讨。
一、金线莲组培技术现状金线莲组培技术是通过离体培养技术，利用植物组织培养营养基、生长调节剂和植物激素等，将金线莲的组织或细胞培养在人工环境中，以实现植物的快速繁殖和改良。
目前，金线莲组培技术已经取得了一定的进展，并在实际生产中得到了广泛应用。
1. 基本原理金线莲组培技术主要包括组织培养、愈伤组织感应、再生、苗培养和生根等多个环节。
首先是从金线莲的茎、叶、花等部位组织中分离出愈伤组织，然后在含有适当培养基和植物激素的培养液中进行培养和再生。
接着将再生苗移植到含有适当生长调节剂和营养物质的培养基上，进行生根培养。
最终得到生长良好的金线莲植株。
2. 技术优势金线莲组培技术具有无污染、无季节限制、生长速度快、生长势强、遗传稳定性好等特点。
通过组培技术，可以实现对金线莲的快速繁殖和精细培育，缩短了繁殖周期，提高了繁殖效率，并且可以实现对金线莲相关性状的改良和遗传育种，为金线莲的生产和市场供应提供了重要的技术支持。
3. 技术应用金线莲组培技术目前已经取得了一定的成果，但与其他植物的组培技术相比，仍然存在一些问题和挑战。
未来，金线莲组培技术的发展趋势将主要包括以下几个方面：金线莲组培技术需要不断优化和改进，以提高培养效率和成活率。
目前，金线莲组培技术在愈伤组织的诱导、再生苗的生长和生根过程中存在一定的难题，需要找到更加有效的培养基配方和植物激素组合，以提高金线莲的再生率和成活率。
金线莲组培技术需要不断进行技术创新，以提高金线莲的育种效率和质量。
随着生物技术的不断发展，可以尝试利用基因工程技术进行金线莲的改良和育种，研究金线莲的主要功能基因，并进行基因功能验证，以实现对金线莲相关性状的精细调控和改良。
金线莲组织培养研究进展
金线莲组织培养研究进展金线莲是一种珍贵的中草药材，具有广泛的药用价值。
随着现代化科技的发展，利用组织培养技术对金线莲进行培育已成为金线莲的重要研究方向。
本文将从金线莲的生长特点、组织培养的优势和研究进展三个方面来论述金线莲组织培养研究的现状与发展趋势。
一、金线莲的生长特点金线莲为多年生草本植物，生长周期长，一般需要2-3年才能达到收获的标准。
其生长环境适应性强，可适应多种种植条件，但适宜生长的土壤条件较苛刻，须在肥沃、排水良好、酸碱度适宜的土壤中生长。
金线莲的中药材部位为根茎，对种植环境和气候等条件的要求非常高，因此，为了提高金线莲的水平和产量，必须采取采用现代化科学技术手段。
二、组织培养的优势组织培养是利用人工培养技术独立培育植物的一种方法，由于其操作容易、快速且产量高，因此在植物遗传育种、植物生物学、生物技术等领域得到广泛应用。
组织培养在金线莲的研究中也被广泛应用，并取得了一定的进展。
针对金线莲本身特点，组织培养有如下几个优势：1、嫁接育苗可提高品质采用组织培养技术进行嫁接育苗，不仅可以减缓恶劣环境的影响，还可以保持良好的生长和发育状况，从而提高金线莲的品质和产量。
2、无污染生物安全有保障组织培养是在无菌状态下进行的，不会有污染现象出现，而且可以精准控制植株的检疫检测，能够提高植株的生物安全水平，保障健康育种。
3、高产可控节省时间通过对培养条件、培养介质等方面的控制，金线莲的繁殖速度可以得到极大提高，同时也可以控制植物的生长，减少不必要的挑剔环节，提高工作效率和产量。
三、研究进展近年来，金线莲的组织培养研究取得了很大的进展，主要集中在以下几个方面：1、细胞培养小檗碱是金线莲的一种有价值的生物碱，具有重要的药用价值。
利用组织培养技术，可以提高金线莲药用生物发酵根的小檗碱含量，同时也有助于扩大生物碱提取的工业应用范围。
2、气体培养在金线莲的生产过程中，常常会遇到氧气不足、二氧化碳过多等环境问题。
七种观赏植物叶片离体分析和耐盐性研究
参考文献 ［１］ 翟凤林，曹鸣庆．植物的耐盐性及其改良［Ｍ］．北京：中国
农业出版社，１９８６，３３５－３３７． ［２］ 支欢欢，杨敏生，张华新等． ３ 种园林植物耐盐性对比
> 吊兰和绿萝 > 水竹草。
关键词：离体测定；膜透性；伤害率；耐盐性；观赏植物
中图分类号：Ｓ－３
文献标识码：Ｂ
土壤盐碱化是一个世界性的难题，全世界盐 渍土面积约 １０ 亿公顷；我国盐渍土面积约 ３４６０ 万公顷，天津地区拥有盐碱地总面积为 ４９．３ 万 平方米，占全市土地总面积的 ４２．３％。通过多年 的实践证明，种植耐盐碱作物既能改良土壤，又 能有一定的效益，是一种相对耗资少、见效快的 盐碱地农业发展方向［１］。大叶黄杨、紫叶小檗、吊 兰、绿萝、水竹草、二色补血草和紫花地丁这七种 观赏植物广泛在天津市应用，大叶黄杨、紫叶小 檗、二色补血草和紫花地丁被广泛的应用于重盐 碱地和轻盐碱地的改良［２］。
紫花地丁、二色补血草的叶片为试验材料，通过不同浓度的盐胁迫处理，离体测定了它们的细胞膜透
性和细胞膜伤害率。结果表明：随着盐浓度的增加，植物的叶片细胞膜透性和细胞伤害率逐渐增加，其
中大叶黄杨的细胞膜透性和细胞伤害率略高于紫叶小檗，紫花地丁的高于二色补血草，水竹草高于绿
萝和吊兰。研究显示，七种观赏植物的耐盐性依次为：二色补血草 > 紫叶小檗 > 大叶黄杨 > 紫花地丁
二色补血草，紫叶小檗的高于二色补血草；在盐 溶液浓度为 １％时，紫花地丁的细胞膜伤害率最 低，但在盐溶液浓度为 ２％、４％和 ６％时，紫花地 丁的细胞膜伤害率逐渐升高，最后成为 ４ 种植物 中最高的，说明盐溶液对紫花地丁的伤害最大。 对比 ４ 种植物的叶片细胞膜伤害率变化，大叶黄 杨从 ０ 增加到 ５３％，紫叶小檗从 ０ 增加到 ４９％， 二色补血草从 ０ 增加到 ４０％，紫花地丁从 ０ 增加 到 ５５％。因此，细胞膜伤害率顺序依次为：紫花地 丁 ＞ 大叶黄杨 ＞ 紫叶小檗 ＞ 二色补血草。 2.2 盐胁迫对吊兰、绿萝和水竹草细胞膜透性 和细胞伤害率的影响
金线莲组培技术实例分享【附配方】
导读：金线莲Anoectochilusroxburghii（wall.）lindl为兰科开唇兰属多年生草本，其种子自然萌发率和繁殖率低，利用组培技术快速繁殖种苗，对金线莲的开发利用和野生资源保护具有现实意义。
笔者特将对金线莲组织培养几种培养基筛选结果报道如下。
1 材料与方法1.1 材料取金线莲幼嫩茎段为外植体。
1.2 外植体灭菌取生长健壮且无病虫害的金线莲幼嫩茎段，去叶，放入低浓度的洗衣粉水中漂洗3-5分钟，然后用自来水冲洗干净，用75%酒精灭菌3-5秒，用0.1%的升汞灭菌15分钟，再用无菌水冲洗5-6次，将消毒好的材料切成有1-2节、带腋芽的茎段，接种在Ar + 6-BA 1.0mg/L +NAA0.5mg/L培养基上（Ar为MS改良培养基，大量元素减半，微量元素加倍），pH5.8，蔗糖2%、琼脂粉0.7%。
培养条件：温度（25±1）℃，光照时间8-10小时/天，光照强度1500-2000lx。
1.3 不同激素浓度继代增殖培养基筛选将分化出的丛生芽分割转接到继代增殖培养基上，培养基Ar + 6-BA 1-4mg/L + NAA0.1-0.8mg/L + IBA 0.2mg/L + KT 0.5mg/L，培养基附加糖3%、琼脂粉0.7%，pH5.8。
培养条件同上。
通过改变6-BA和NAA的浓度，共为7个处理（每个处理接种三瓶，每瓶5个接种块），经继代增殖培养，筛选培养基的最佳培养配方。
1.4 不同添加物壮苗培养基筛选将幼苗转接到壮苗培养基上，培养基Ar加入或不加入10%马铃薯、10%香蕉等添加物+糖3% + AC 0.2%；培养基均加入琼脂粉0.7%，pH5.8。
培养条件同上。
试验设培养基中添加10%马铃薯，添加10%香蕉，添加10%马铃薯+10%香蕉，不添加马铃薯和香蕉（对照）等4种处理，以筛选最佳添加物壮苗培养基配方。
1.5 不同激素浓度对生根的影响不定芽伸长至3-4厘米时，自基部切下，接种到生根培养基上，培养基为Ar + NAA 0.1-2.0mg/L + IBA 0.2-0.5mg/L + 糖3% + AC 0.2%，培养基均加入琼脂粉0.7%，pH5.8，共设8个处理，每处理接种5瓶，每瓶接种5株，培养条件同上，以筛选最佳的生根培养基。
金线莲组织培养研究进展
金线莲组织培养研究进展金线莲是一种常见的观赏植物，具有良好的观赏价值和药用价值。
然而，由于野生资源受到破坏和自然环境的变化，使得金线莲的生长和生产面临着很大的困难。
因此，金线莲组织培养技术的研究和应用具有重要的意义。
本文将介绍金线莲组织培养的基本概念、研究现状和前景。
一、金线莲组织培养的基本概念组织培养是指将植物体的一部分组织或细胞培养在适当的营养基上，利用其再生能力进行繁殖或栽培的一种方法。
金线莲组织培养包括愈伤组织培养、无菌苗培养和细胞培养等，其具体步骤主要包括杀菌、取材、培养、分化和移栽等。
1.愈伤组织培养愈伤组织培养是指将植物体的切片、叶片、幼芽等组织培养在含有激素和营养物质的基础培养基上，使其分化成生长旺盛、具有再生能力的愈伤组织。
近年来，许多研究表明，金线莲的愈伤组织培养是一种可行的方法，可以快速繁殖优质无病害的材料，并可以应用于种质资源保护和品种改良。
2.无菌苗培养无菌苗培养是将愈伤组织培养在含有生长素和细菌素的培养基上，使其分化出极少量的离体小苗。
无菌苗培养具有生产性强、生长快、抗病性好等优势，可以有效地促进金线莲的大规模繁殖和生产。
3.细胞培养近年来，随着生物技术的发展和应用广泛，金线莲组织培养技术逐渐引起了广泛的关注和应用。
组织培养不仅可以繁殖优质无病害的植物，还可以进行快速育种和优良品种的保护、推广和开发。
因此，金线莲组织培养技术在今后的应用和发展中，将具有重要的意义和前景。
综上所述，金线莲组织培养技术已经成为金线莲种质资源保护、新品种选育和生产开发的重要手段之一。
在今后的研究中，还需进一步明确金线莲组织培养的适宜条件以及快速育种和产业化的技术路线。
金线莲的离体快繁
Ｎ６＋６－ ＢＡ ０．５ｍｇ／Ｌ＋ＮＮＡ ０．１ｍｇ／ Ｌ ＋１０％马铃薯提取液 ＋０．０８％活性炭； 增 殖 培 养 基 ： Ｎ６＋６－ ＢＡ ０．１ｍｇ／Ｌ＋ＮＮＡ ０．２ｍｇ／ Ｌ ＋１０％马铃薯提取液 ＋０．０８％活性炭。上述培 养基均加 ０．７％琼脂和 ３％白糖， ｐＨ ５．５～６．０。培养温度 ２０～２５℃， 每天光照 １２ 小时， 光照度 ２ ０００～２ ５００Ｌｘ。
上的叶为鳞片状， 上部的为真叶。直立茎段、芽及根状 网。气候干燥时要常向叶面喷水， 每 ３～５ 天浇透水 １
茎 上 剪 下 的 顶 芽 ， 在 增 殖 培 养 基 上 培 养 ７ 天 ， 开 始 生 次， 使土壤保持湿润。如果用自来水浇灌金线莲， 最好
根长芽， 并逐渐长成直立的小苗； ７５～９０ 天后， 小苗又 先将自来水存放 ２～３ 天后再浇。在生长季节， 用 ０．３％
由于人们长期大量采挖和野生动物包括昆虫的 咬食， 加之近年来的山地开发、生态资源的破坏， 野生 金线莲数量大为减少， 致使药源紧缺， 国内外市场供 不应求。
金线莲的种子发育不全， 在自然条件下发芽率很 低， 传统的分根扦插繁殖时间长、繁殖系数低， 无法大 量 种 植 生 产 。而 利 用 植 物 组 织 培 养 繁 殖 可 大 大 提 高 繁 殖速度， 并有效地保护野生资源， 解决中药材来源匮 乏的问题， 满足人们用药的需要。
时芽 长成高 ２ｃｍ 左 右的小苗 ， 叶 色 为 它 本 有 的 紫 黑 炼苗移栽。移栽前， 将瓶苗移出培养室， 放在实验室中
色 ； ７５～９０ 天 时 小 苗 高 ７～８ｃｍ， 有 ３～４ 个 节 ， ２～３ 炼苗 ７～１０ 天， 然后打开封口膜， 小心取出苗， 洗掉根
条根。此时可转接并进入增殖培养阶段。
金线莲组培技术现状及发展趋势
金线莲组培技术现状及发展趋势金线莲是一种药用植物，具有重要的药用价值和经济价值。
为了满足人们对金线莲的需求，研究人员利用组织培养技术对其进行研究和发展，以达到高产高效的目标。
对于金线莲的组培技术，涉及到体细胞培养、愈伤组织培养、细胞悬浮培养等方面。
本文主要介绍了金线莲组培技术的现状以及其未来的发展趋势。
金线莲的组织培养主要是通过体外培养的方式来获得大量幼苗和苗木，其主要是利用组织培养的技术来进行。
目前，金线莲组织培养技术主要涉及以下方面：1.基础研究上的探索研究人员主要从金线莲的生长生态和细胞营养代谢等方面入手，对其组织培养方法进行了探索。
如利用解剖学分析分析金线莲营养器官的发育过程，鉴定金线莲的优质生长环境，建立金线莲的完整体系。
2.经济生产上的研发金线莲在经济方面具有很高的价值，特别是其药用价值被广泛认可。
因此，研究人员需要开发高效的培养技术，以满足工业生产的需要。
目前，金线莲的组织培养技术已经在工业生产上得到了应用，形成了一套完整的生产模式。
3.基于遗传转化的探索在金线莲的遗传转化方面，研究人员对其进行了基因改良和遗传转移，积极探索其适应性更强的新品种。
同时，对其细胞的分化和生长机制等方面进行了研究，以进一步提高其产量和经济效益。
未来，金线莲组培技术将会在以下方面得到发展：1.基于细胞工程技术的探索随着生物组织培养技术的快速发展，细胞工程技术的研究也越来越受到关注。
这种技术可以利用金线莲细胞的代谢能力来生产大量的药用物质。
因此，未来金线莲组培技术将会再次探索基于细胞工程技术的培养方法，进一步提高其经济效益。
2.差异化培养技术随着对金线莲组培技术的深入研究，研究人员已经发现不同培养条件会对其生长产生不同的影响。
因此，未来的金线莲组培技术将会更加强调差异化培养技术的应用，以更好地满足不同生产环境下的需求。
3.遗传改良和遗传转化技术的应用由于金线莲存在一定的遗传缺陷，因此未来的组培技术重点将在遗传改良和遗传转化技术上。
金线莲
1、金线莲（1）资源情况金线莲为兰科(Orchidaceae)开唇兰属(Anoectochilus)植物，药用全草，素有“药王”之称，是我国传统的珍贵药材。
开唇兰属植物在全世界约有40余种，分布于亚热带地区至大洋洲。
我国有20种，2个变种，主要分布于西南至东南沿海地区。
2005版中国药典尚未对金线莲进行收载。
在自然环境中，金线莲种子需要在内生真菌的作用下才能萌发，对生态环境的要求严格，自身繁殖系数低。
近年来用药需求量加大，加上台湾地区流行“金线莲热”，使得市场价格逐年递增。
自然环境的恶化和长期掠夺性采挖，野生金线莲资源已经濒临枯竭。
（2）民间用药金线莲性平味甘，具有清热凉血、祛风利湿的功效，主治咯血、支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎、小儿急惊风、毒蛇咬伤等，作为民间药用使用广泛。
（3）离体快繁技术研究情况我们现在已经利用离体快繁技术实现了金线莲的培养体系，并对培养苗进行了镇痛活性研究，药效学明显好于野生药材，该技术成熟可进行规模化生产。
①生产工艺如下：③有效成分含量比较金线莲试管苗中总黄酮含量18%，是野生药材的2.6倍。
2、天山雪莲（1）资源情况天山雪莲（Saussurea involucrate Kar. et Kir.）属被子植物门、双子叶植物纲、菊目、菊科、菜蓟族、凤毛菊属植物。
主要分布于我国新疆、青海、甘肃、云南和西藏等高寒地区，海拔2400～4100 m 雪线附近的岩石缝和悬崖峭壁之间，国外少有分布。
由于其特异的生长环境，野生天山雪莲生长缓慢，由种子萌发到开花结果需5～6年的时间，且种子的繁殖率很低，野生资源严重受限，再加上不法之徒的肆意盗采，使得野生天山雪莲濒临灭绝，已经被列为国家珍稀濒危二级重点保护植物。
（2）民间用药雪莲性温，味微苦，入肝、脾、肾三经，全草入药，有清热解毒、活血化淤、抗炎镇痛、祛风除湿、补肾壮阳、调经止血、收缩子宫等功能。
长期用于治疗风湿性关节炎，妇女小腹冷痛，麻疹不透，阳痿，高山不适应症等病症的治疗，民间应用广泛。
金线莲研究现状与保护措施
第1期（总第373期）2021年1月No.1 JAN文章编号：1673-887X(2021)01-0059-03金线莲研究现状与保护措施施满容（宁德职业技术学院，福建福安355000）摘要文章对金线莲的生物学特性、资源分布、药用研究、分子生物学、组织培养等方面进行综述，并就现有资源的保护和合理利用提出了建议和展望。
关键词金线莲；研究现状；保护利用中图分类号S567.23+9文献标志码A doi:10.3969/j.issn.1673-887X.2020.12.024 Research Status and Protection Measures of Anoectochilus Roxburghii Shi ManRongShi Manrong(Ningde Vocational College,Fu'an355000,Fujian,China)Abstract：In this paper,rare herbs Anoectochilus the biological characteristics,distribution of resources,medicinal research,molec‐ular biology,tissue culture and other aspects were reviewed and discussed the existing resources protection and rational utilization of suggestions and outlook.Key words：Anoectochilus,research status,protection and utilization金线莲为兰科开唇兰属多年生草本植物，有2种原植物,一种是金线兰又名花叶开唇兰，另一种是台湾银线兰又名台湾金线莲。
民间多用于治疗糖尿病、高血脂、乙型肝炎等疾病，有“药王”“金草”之称[1-2]。
金线莲有效成分分析及生理活性研究
金线莲有效成分分析及生理活性研究金线莲含有生物碱、氨基酸、糖类、皂昔、街体、挥发油等成，具有保肝、抗HBV、降压、强心、降血糖、镇痛、抗炎等药理活性。
研究表明，金线莲的氨基酸组成成分、含量及抗衰老活性的微量元素的含量均高于国产和野生西洋参。
柯伙钊等利用色谱联用技术（GC-MS）对台湾组培金线莲中挥发油的化学成分进行测定，其中乙醚萃取的挥发油中分离出42种成分，鉴定出39种组分，占挥发油总量的98.479%，主要成分为烷烃类化合物；正己烷萃取的挥发油中分离出24种成分，鉴定出23种组分，占挥发油总量的99.147%，主要成分为:2-甲氧基-3-烯丙基苯酚、亚油酸、棕桐酸和亚麻酸甲醋等。
胡国海等利用干法灰化处理样品，用火焰原子吸收光谱连续测定人工种植金线莲中Zn、Mn、Cu、Fe、Ni、Co、Cr、Cd、Pb 9种微量元素的含量并将其与野生金线莲比较，野生的与人工种植的比较，Fe,Mn,Zn,Co,Cu元素均比人工种植的高；而Cr元素含量人工种植的比野生的高，有害元素在人工种植和野生中的含量都很低或未检出。
近年来，对金线莲内生真菌化学成分及生理活性研究已成为热点。
谭小明等以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和白色念珠菌为实验菌株，用琼脂块法和纸片扩散法对分离的真菌进行了抑菌实验，从广西野生金线莲植物中共分离到23株内生真菌，其中有6株真菌对至少1种实验菌株有抗菌活性，占总分离菌株的26.0%，表明广西野生金线莲内生真菌中存在着丰富的抗菌天然活性物质，这可为寻找新型抗菌物质提供资源。
目前我国对金线莲的研究主要集中在资源普查、生物学形态特征考察、栽培等方面，对金线莲的化学成分及药效活性作用机制的深度研究并不多。
采用现代生物技术通过组织培养加速开发金线莲，以缓解民间珍惜药用植物资源的日趋枯竭，但为更好的体现金线莲的药用价值，还要重视对金线莲药效活性机制的研究，这对发掘民间传统中草药具有深远的意义。
金线莲组织培养研究进展
１ ． ３ ． ２ 种子萌发 金线莲种子在 自然条件下萌发率极低 ，而在培 养基 中进行无菌萌发效果很好。使用的基本培养基 般 为 ＭＳ ［ ］ 或 １ ／ ２ ＭＳ … ８ 。
一
金线莲外植体消毒采用常规方法即可 【 ｌ Ｏ 一 １ １ ］ 。果 实 由于 有一 层 厚 实 的果 皮 包 裹 着 ，可 适 当提 高消 毒
名贵中草药 ，享有 “ 药王”等美誉 。金线莲种子在 自然条件下萌发率极低 ，加上长期采挖 ，野生种质 资源稀缺 ，已濒临灭绝 。利用组织培养这一生物技
增加数量 ，又产生不定根。而有 的步骤顺序可以前 后交换 ，如原球茎可发育成完整小苗后进行继代培 养 ；也可先进行 继代培养 ，形成大量类原球茎后 ，
摘要 ：从外植体选择、 消毒方法、 愈伤组织诱导与种子萌发、 不定芽、 芽与原球茎诱导、 继代与增殖培养、 壮苗生根、炼苗移栽、组培苗与野生苗 比较、多倍体诱导、人工种子等方面对金线莲组织培养 的研究进展进 行梳理 ，以期对金线莲组织培养研究提供参考。
关键词 ：金线莲 ；组织培养；离体快繁；研 究进展 ；综述 中图分 类 号 ：Ｑ ９ ４ ３ ． １ 文献标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：１ ６ ７ ４ — ９ ２ ０ ０（ ２ ０ １ ３） ０ ６ — ０ ０ １ １ — ０ ４
剂 浓度 、增 加 消毒 时 间 。
１ ． ３ 愈伤 组 织诱 导与 种子 萌发
１ ． ４ 不 定 芽、 芽与原球 茎诱 导
１ ． ４ ． １ 不 定芽诱 导 不 定 芽 是 从 愈 伤 组 织 上 产 生 的 ，其 产 生 位 置 不 可 确 定 。 在 诱 导 不 定 芽 时 ，起 主要 作 用 的 是 细
再 将类 原球 茎 培育成 完 整小 苗 。 １ ． ３ ． １ 愈 伤组 织诱 导 植 物生长调节剂被广泛应用 于植物组织培养 ，
金线莲组培技术现状及发展趋势
金线莲组培技术现状及发展趋势金线莲是一种重要的中药材，具有清热解毒、利尿消肿、活血化瘀等药用价值，被广泛用于中医药领域。
随着人们对中药材需求的不断增加，金线莲的种植和生产也呈现出了迅速增长的趋势。
由于野生金线莲资源的不断减少和环境污染等原因，引起了金线莲的种植难题。
为了解决这一问题，金线莲组培技术应运而生。
本文将探讨金线莲组培技术的现状及发展趋势。
一、金线莲组培技术现状1. 金线莲组培技术概述金线莲组培技术是指通过离体培养的方法，利用金线莲的组织或细胞进行培养繁殖。
该技术主要包括组织培养、细胞培养、植株再生等步骤。
通过对金线莲的细胞和组织进行合理的营养、激素等因子的调控，使其在无土或特定培养基上生长繁殖，最终实现金线莲的大规模培育和繁殖。
金线莲组培技术的应用，不仅可以解决野生资源匮乏的问题，还可以提高金线莲的生产效率和药用价值。
2. 金线莲组培技术研究进展目前，金线莲组培技术的研究已取得了一定的进展。
研究人员通过不断改进培养条件和培养方法，提高了金线莲组培技术的成功率和繁殖效率。
还利用生物技术手段，对金线莲进行了基因转化和育种，使金线莲的抗病虫能力和药用成分得到了提高。
这些研究成果为金线莲的大规模生产和利用奠定了技术基础。
二、金线莲组培技术发展趋势1. 培养基优化金线莲组培技术的发展趋势之一是培养基的优化。
培养基是金线莲组培技术的基础，对金线莲的生长和发育起着至关重要的作用。
研究人员需要通过对培养基成分和配比进行优化，提高其对金线莲生长的适应性和营养需求，从而提高金线莲的生长速度和繁殖效率。
2. 抗逆性提高随着环境污染和气候变化的加剧，金线莲的种植面临着日益严峻的挑战。
金线莲组培技术发展的另一个趋势是提高金线莲的抗逆性。
通过针对金线莲的逆境胁迫（如盐碱、干旱、病虫害等）进行研究，筛选出具有较强抗逆性的金线莲种质资源，并利用组培技术进行繁育，从而培育出适应不同环境条件下生长的金线莲新品种。
3. 生物技术手段应用随着生物技术的不断发展，金线莲组培技术还将积极应用生物技术手段。
金线莲养殖的注意事项
使用精致美观的陶瓷盆可以增加观赏性，但需要 注意盆底部的通气性。
泥盆
使用泥盆需要注意其透气性，防止根系窒息。
基质选择与配比
腐叶土
使用疏松而不太粘的腐叶土，加入适量珍珠 岩以增强透气性。
蛭石
蛭石是一种轻质、吸水性强的材料，常用于 金线莲的扦插繁殖。
椰糠
椰糠具有良好的保水性和透气性，但需要注 意其盐分含量。
春季气温逐渐升高，空气湿度大，且金线莲处于旺盛生长期，此时分株有利于 植株恢复和生长。
秋季分株
秋季气温适宜，空气湿度较低，金线莲进入半休眠状态，此时分株有利于避免 夏季高温对植株的影响。
分株方法与注意事项
分株方法
选择生长健壮、无病虫害的植株进行分株，将母株从盆中取出，用水冲洗干净， 剪除老根、枯叶和病叶，然后按照每盆3-5株的密度重新上盆栽种。
凉血润燥
金线莲具有凉血润燥的功效，可用于治疗肺热咳 嗽、肺结核等疾病，对改善便秘、肠道疾病也有 一定的帮助。
护肝利胆
金线莲具有护肝利胆的功效，可用于治疗肝炎、 胆囊炎等疾病，对改善胆结石、胆囊息肉等疾病 也有一定的作用。
金线莲的美容价值
改善肤质
01
金线莲具有改善肤质的作用，可以促进皮肤新陈代谢，消除色
VS
虫害防治
金线莲也容易受到各种害虫的侵害，如蚜 虫、红蜘蛛、螟虫等。为避免虫害的发生 和传播，应定期检查植株生长情况，及时 发现并采取有效的防治措施。例如，可以 使用杀虫剂进行喷洒防治，以消灭害虫； 同时，也可以通过增加通风和降低湿度等 措施来减少虫害的发生概率。
04
繁殖与分株
分株时间选择
春季分株
降低湿度
在潮湿的环境中，可以通 过通风、除湿等方式降低 湿度，以避免金线莲发生 霉变。
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花叶金线莲离体保存技术研究作者：陈艺荃樊荣辉叶秀仙来源：《福建农业科技》2019年第06期摘要：采用缓慢生长保存法对花叶金线莲进行离体保存试验。
结果表明：在培养温度（24±3）℃，光照强度前3个月1500～2000 lx、3个月后500～1000 lx，光照时间10 h·d-1的培养条件下，花叶金线莲单芽在改良MS+蔗糖20 g·L-1+甘露醇20 g·L-1培养基中保存12个月，存活率达85.0%，保存后能恢复正常生长;缓慢生长保存法可为金线莲种质保存提供新的方法与思路。
关键词：花叶金线莲;缓慢生长;离体保存DOI： 10.13651/ki.fjnykj.2019.06.006Abstract： The method of slow growth conservation was used to conduct the experiment of in vitro conservation of mosaic anoectochilus formosanus. The results showed that： In the culture conditions of the temperature being 24±3℃， the illumination intensity being 1500-2000 lx for the first 3 months and 500-1000 lx after 3 months， and the illumination time being 10 h·d-1， the survival rate of the single bud of mosaic anoectochilus formosanus reached 85.0% after 12 months conservation in the modified MS+sucrose 20 g·L-1+ mannitol 20 g·L-1 medium. And it could restore normal growth after the conservation， which provided a new method and idea for the germplasm conservation of anoectochilus formosanus.Key words： Mosaic anoectochilus formosanus;Slow growth;In vitro conservation金線莲Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl.为兰科开唇兰属多年生草本植物，是我国传统名贵药材，也是十分珍贵的室内小型观叶植物[1-4]。
花叶金线莲系金线莲突变自育新品种，因其叶色墨绿色与金黄色相嵌，形成鲜明的色彩对比，色泽亮丽，极具观赏价值，其既可作为药用兼观赏的新品种开发，又可作为试管花卉的工艺品开发应用。
作为一种新型草本兰科植物，同其他兰花资源一样，主要是采用田间种植保存和组织培养保存，但金线莲种植保存过程中易受气候条件限制，尤其高温高湿环境条件下，茎腐病等病害为害严重，使活体保存工作难于开展，而组织培养保存需对种质材料进行频繁继代，工作量大、成本高，且可能会发生变异等问题。
因此，研究探索一套符合金线莲特点的种质资源保存方法十分必要。
缓慢生长离体保存是近年来新发展且较为有效的种质保存方法，是以组织培养技术为基础，通过改变培养条件，如在培养基中加入化学物质或采用一些物理方法，限制或延缓培养物的生长，使组织或细胞生长降至最小限度，但不死亡或者少量死亡，从而达到延长继代培养的保存方法。
其最大优点是可以使保存材料维持不断生长。
影响缓慢生长离体保存效果的因素很多，但主要因素是培养基组分和培养条件。
通过在保存培养基中添加不同浓度蔗糖、甘露醇、脱落酸、多效唑等对种质离体保存影响的研究，近年来，本课题组在文心兰、蝴蝶兰等兰科植物离体种质保存中有较多的实践[5-7]。
目前未见花叶金线莲种质资源离体保存技术的相关报道。
本研究利用课题组已建立的花叶金线莲的离体培养再生体系[8]，研究了改良MS基本培养基中添加不同浓度蔗糖及甘露醇对花叶金线莲单芽离体保存的影响，以期为金线莲种质资源保存提供理论和技术参考。
1材料与方法1.1试验材料以花叶金线莲Anoectochilus roxburghii（wall.）lindl.‘Huaye’单芽为离体保存试验材料。
试验在福建省特色花卉工程技术研究中心花卉组培实验室进行。
1.2离体保存方法陈艺荃等：花叶金线莲离体保存技术研究2019年第6期2019年第6期陈艺荃等：花叶金线莲离体保存技术研究在改良MS基本培养基中添加不同浓度（10、20、30、40、50、60、70 g·L-1）蔗糖，以及添加不同浓度（10、20、30、50 g·L-1）甘露醇。
其中改良MS基本培养基组分详见表1，甘露醇处理中均附加蔗糖20 g·L-1。
以上每个处理接种5瓶，每瓶接种4株单芽，瓶口用保鲜膜封口。
每2个月调查1次存活率（存活率为存活株数与接种株数的比值×100%），不更换培养基连续保存12个月。
每个月观察其生长情况和存活率。
以上试剂均为国药集团化学试剂有限公司生产的分析纯试剂。
1.3保存材料的恢复生长试管苗保存12个月，与60 d继代1次正常培养的对照试管苗各自转接到恢复生长培养基（表2）中进行恢复培养。
培养温度为（24±3）℃，光强为1500～2000 lx，光照时间为10 h·d-1。
2结果与分析2.1蔗糖对花叶金线莲单芽保存的影响将花叶金线莲单芽接种在添加不同浓度蔗糖的改良MS培养基上保存，保存结果见表3。
表3结果表明，随着保存时间的延长，花叶金线莲单芽存活率随蔗糖浓度的增加而降低;培养基中添加低浓度蔗糖20 g·L-1，在缓慢生长保存12个月后仍保持较高的存活率，达80.0%。
说明降低培养基中的蔗糖浓度具有减缓生长，延长保存时间的作用，而高浓度蔗糖可能增加了培养基的渗透压，使植株吸收水分和养分严重受阻，导致生长不良死亡。
2.2甘露醇对花叶金线莲单芽保存的影响将花叶金线莲单芽接种在添加不同浓度甘露醇的改良MS附加蔗糖20 g·L-1培养基上保存，保存结果见表4。
表4结果表明，在添加不同浓度甘露醇的培养基上，随着保存时间的延长，添加一定浓度的甘露醇对花叶金线莲单芽保存有利，能有效提高其存活率。
筛选出适宜花叶金线莲保存的甘露醇浓度为20 g·L-1，保存12个月存活率达85.0%。
综上，适宜花叶金线莲单芽保存的培养基为改良MS+蔗糖20 g·L-1+甘露醇20 g·L-1。
2.3保存材料的恢复生长经保存的材料，切去根系，将茎段转接到花叶金线莲专用恢复生长培养基中继续培养，生长情况与正常继代苗无明显差异，保存苗均能生根成完整植株。
可见，在普通组织培养条件下，保存花叶金线莲试管苗，材料受损伤程度较小，不需长时间恢复。
3结论与讨论缓慢生长离体保存最大优点是使保存材料维持不断生长。
影响其保存效果的因素很多，但主要是培养基组分和培养条件。
蔗糖具有双重作用，不仅为试管苗的生长发育提供主要碳源，而且作为一种高渗化合物，起到调节培养基渗透势的作用。
本试验结果表明，在培养基中添加20 g·L-1蔗糖对花叶金线莲单芽保存效果最好，能够有效延长继代间隔时间，保存12个月的存活率达80.0%。
在离体种质保存中，培养基中加入一定浓度的甘露醇可减缓植株生长，延长保存时间。
甘露醇作用机理是降低了细胞膨压，提高了培养基的渗透势负值，造成水分逆境，使水分和养分吸收受阻，减少营养消耗;同时细胞壁酶活性受到抑制，减弱新陈代谢活动，延缓细胞生长。
本试验结果表明，在培养基中添加甘露醇20 g·L-1，对花叶金线莲单芽保存效果最好，能够有效延长继代间隔时间，保存12个月的存活率达85.0%，且恢复生长与正常继代苗表现无明显差异。
花葉金线莲通过限制生长法保存，保存12个月期间不需要转接继代，与常规的组织培养保存（2个月继代1次）相比，不仅延长了保存材料的继代间隔期，避免频繁继代，节约培养成本，而且材料一直处于生长状态，可以保持种质优良特性，随时用于扩繁。
参考文献：[1]罗晓青，吴明开，查兰松.珍稀药用植物金线莲研究现状与发展趋势[J].贵州农业科学，2011，39（3）：71-74.[2]赵云青，黄颖桢，陈菁瑛，等.金线莲白绢病病原菌分离及分子鉴定[J].福建农业学报，2013，28（4）：357-360.[3]施满容，龚林光，陆志平，等.闽东野生金线莲有效成分含量的比较[J].福建农业学报，2016，31（9）：950-956.[4]魏翠华，谢宇，秦建彬，等.不同肥料处理对金线莲产量和品质的影响[J].福建农业学报，2015，30（8）：793-796.[5]叶秀仙，黄敏玲，吴建设，等.甘露醇和生长抑制剂对文心兰离体保存的影响[J].福建农业学报，2011，26（1）：140-145.[6]叶秀仙，黄敏玲，钟淮钦，等.文心兰离体再生体系建立及试管苗种质保存研究[C]//中国观赏园艺研究进展.北京：中国林业出版社，2009，93-197.[7]叶秀仙，黄敏玲，樊荣辉，等. 蝴蝶兰离体保存及其遗传稳定性研究[J].福建农业学报，2014，29（10）：976-981.[8]叶秀仙，陈艺荃，钟淮钦，等.花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术研究[J].福建农业学报，2018，33（3）：258-262.（责任编辑：柯文辉）。